Professional Documents
Culture Documents
Coffee
Coffee
This study was conducted to determine the effect of roasting conditions on chemical
constituents of Vietnam robusta coffee. The contents of acrylamide, chlorogenic acid and tannins
were higher in green coffee than in roasted coffee and decreased as roasting condition increased,
which ranged from 6.53 to 91.36 μg/100g, 1.54 to 55.51 mg/g and 3.14 to 651.59 mg/10g,
respectively. In addition, the content of trigonelline ranged from 1.43 to 64.24 mg/10g, which gave
the highest value in green coffee, then decreased rapidly, while in the Italian roast it was not present
at all. Caffeine content ranged from 15.30 to 35.91 mg/g and presented the lowest value in the case
of green coffee, then increased reaching the highest value at 240 oC, after that decreasing gradually
and slowly
Nghiên cứu này được thực hiện nhằm xác định ảnh hưởng của điều kiện rang đến thành phần
hóa học của cà phê vối Việt Nam. Hàm lượng acrylamide, axit chlorogen và tanin trong cà phê nhân
cao hơn trong cà phê rang và giảm khi điều kiện rang tăng lên, dao động lần lượt từ 6,53 đến 91,36
μg/100g, 1,54 đến 55,51 mg/g và 3,14 đến 651,59 mg/10g. Ngoài ra, hàm lượng trigonelline dao
động trong khoảng 1,43 – 64,24 mg/10g, cho giá trị cao nhất ở cà phê nhân, sau đó giảm nhanh, còn
ở cà phê rang kiểu Ý thì hàm lượng này hoàn toàn không có. Hàm lượng caffein dao động từ 15,30
– 35,91 mg/g và có giá trị thấp nhất ở cà phê nhân, sau đó tăng dần đạt giá trị cao nhất ở 240 oC, sau
đó giảm dần và chậm dần.
Introduction
Coffee is one of the most popular and consumed beverages around the world (Mussatto et al.,
2012). The composition of green coffee beans depends on several factors such as variety, origin,
field conditions, climate and soil (Van Dam and Feskensm, 20112; Riksen et al., 2009).
Nevertheless, the chemical composition of roasted coffee beans seem to play a major role in
defining the quality of this beverage. During the roasting process, the beans suffer physical changes
and go through several chemical reactions which change, generate and degrade several substances
responsible for the flavor and aroma of coffee (Wei et al., 2011).
Aroma formation is a very complex process, including Maillard and Strecker’s reactions and
thermal degradation during roasting (De Maria et al., 1994). Some aroma precursors, such as
sucrose and trigonelline, give rise to appreciated flavour products (De Maria et al., 1996). Roasting
is a complex process from a chemical point of view, since hundreds of chemical reactions take place
simultaneously, such as Maillard and Strecker reactions, degradation of proteins, polysaccharides,
trigonelline and chlorogenic acids (De Maria et al., 1996). Sugars and trigonelline will act as aroma
precursors, originating several substances which will affect both the flavor and aroma of the
beverage. The thermal degradation of chlorogenic acids will result in phenolic substances that
contribute to bitterness.
Major chemical alterations have been quantitatively described for chlorogenic acid (Trugo
and Macrae, 1984), sucrose, trigonelline (Casal et al., 2000) and amino acids, trigonelline,
chlorogenic acids and caffeine, in both green and roasted coffee. Those modifications are supposed
to be related to coffee quality. Furthermore, a few studies have proposed the use of these substances
for the determination of the degree of roast (Stennert and Maier, 1996), as genotype selection
criteria (Guerrero and Sua´rez, 2001), and for species differentiation (Martın et al., 1998, Ky et al.,
2001). The antioxidant capacity of coffee has been attributed to its content of polyphenols and
melanoidins (Anese and Nicol, 2003). Acrylamide and melanoidins are both Maillard reaction
products (MRPs) formed during coffee roasting, which is typically conducted at temperatures
between 210 and 250 oC. Theoretically, any attempt to inhibit the Maillard reaction as a possible
measure to minimize the formation of acrylamide would lead to a reduction of the antioxidant
capacity of coffee, as it has been already observed in cookies (Summa et al., 2006).
Caffeine is found in varying quantities in the seeds, leaves, and fruit of some plants. It is
most commonly consumed by humans in infusions extracted from the seed of the coffee plant and
the leaves of the tea bush (Peters, 1967). Also caffeine is found in various kinds of foods and drinks
that we consume in daily life (Singh and Sahu, 2006). In humans, caffeine acts as a central nervous
system stimulant, temporarily warding off drowsiness and restoring alertness (Lovett, 2008). Also it
causes various physiological effects such as the relaxation of the bronchial muscle, the stimulation
of the central nervous system, gastric acid secretion and dieresis. Caffeine has a number of effects
on sleep, but does not affect all people in the same way. It improves performance during sleep
deprivation but may lead to subsequent insomnia (Snel and Lorist, 2011). In shift workers it leads to
fewer mistakes caused by tiredness. In athletics, moderate doses of caffeine can improve sprint,
endurance and team sports performance, but the improvements are usually not very large (Conger et
al., 2011). On the other hand, the chemical analysis of caffeine in coffee beans is also used as an
additional tool for evaluating coffee quality (Franca et al., 2005). This study evaluated the product
quality coffee after roasting. Tannins are water-soluble polyphenolic compounds, recalcitrant to
biodegradation and with wide prevalence in plants. Hydrolysable and condensed tannins are the two
major classes of tannins. These compounds play important roles as resistant agents to microbial
decomposition, mainly due to the ability of these molecules to inhibit microbial growth by binding
strongly to proteins and polysaccharides like cellulose and pectin (Lewis and Starkey, 1969; Bhat et
al., 1998). They may activate paltelets, and they are involved in the epithelial injury of bronchi by
cotton dust that may play an important role in the woodworkers’ nasal sinus cancer. Condensed
tannins are more resistant to microbial decomposition, while hydrolysable tannins are more easily
degraded by some microorganisms (Lewis and Starkey, 1968; Lekha and Lonsane, 1997; Aguilar
and Gutie'rrez-Sa'nchez, 2001). Tannins occur universally in higher plants and are present in
significant quantities in many food crops. Tannin precipitates with heavy metals and alkaloids so it
is commonly used to treat gastrointestinal toxicity.
Trigonelline is an alkaloid and a zwitterion formed by the methylation of the nitrogen atom
of niacin. It is a product of niacin metabolism that is excreted in urine. Since nicotinic acid is
produced during coffee processing, it is highly available in the beverage, unlike in natural sources
where it is present in bound form. Besides, trigonelline appears to have anti-invasive activity against
cancer cells (Hirakawa et al., 2005) and may regenerates dendrites and axons, in addition to memory
improvement in animal models (Tohda et al., 2005). Acrylamide (2- propenamide) is a known
neurotoxin and carcinogen (Prasad and Muralidhara, 2012), present in heated foods and cigarette
smoke. Acrylamide is particularly formed in heated plant foods >120°C, peaking at 150°C (Gökmen
et al. 2006), treated between 160-180°C, or at 210°C (Elmore et al., 2005). Chlorogenic acid is a
natural chemical compound which is the ester of caffeic acid and quinic acid and it is an important
biosynthetic intermediate in lignin biosynthesis (Boerjan et al., 2003). This compound, known as an
antioxidant, may also slow the release of glucose into the bloodstream after a meal (Johnston et al.,
2003). Chlorogenic acid was found in green and roasted coffee bean extract (Onakpoya et al., 2010).
This study determined the influence of roasting time and temperature on the weight loss of
coffee beans and measured the amount of caffeine, tannins, trigonelline, chlorogenic acid and
acrylamide in green and roasted Vietnam robusta coffee.
Giới thiệu
Cà phê là một trong những loại đồ uống phổ biến và được tiêu thụ nhiều nhất trên thế giới
(Mussatto et al., 2012). Thành phần của hạt cà phê xanh phụ thuộc vào một số yếu tố như giống,
nguồn gốc, điều kiện đồng ruộng, khí hậu và thổ nhưỡng (Van Dam và Feskensm, 20112; Riksen và
cộng sự, 2009). Tuy nhiên, thành phần hóa học của hạt cà phê rang dường như đóng một vai trò
quan trọng trong việc xác định chất lượng của loại đồ uống này. Trong quá trình rang, hạt cà phê
chịu những thay đổi vật lý và trải qua một số phản ứng hóa học làm thay đổi, tạo ra và phân hủy một
số chất chịu trách nhiệm tạo nên hương vị và mùi thơm của cà phê (Wei et al., 2011).
Sự hình thành mùi thơm là một quá trình rất phức tạp, bao gồm các phản ứng của Maillard và
Strecker và sự phân hủy nhiệt trong quá trình rang (De Maria và cộng sự, 1994). Một số tiền chất
tạo hương thơm, chẳng hạn như sucrose và trigonelline, tạo ra các sản phẩm có hương vị được đánh
giá cao (De Maria và cộng sự, 1996). Rang là một quá trình phức tạp từ quan điểm hóa học, vì hàng
trăm phản ứng hóa học diễn ra đồng thời, chẳng hạn như phản ứng Maillard và Strecker, sự phân
hủy protein, polysacarit, trigonelline và axit chlorogenic (De Maria và cộng sự, 1996). Đường và
trigonelline sẽ đóng vai trò là tiền chất tạo hương thơm, tạo ra một số chất sẽ ảnh hưởng đến cả
hương vị và mùi thơm của đồ uống. Sự phân hủy nhiệt của axit chlorogenic sẽ tạo ra các chất
phenolic góp phần tạo nên vị đắng.
Những thay đổi hóa học chính đã được mô tả định lượng đối với axit chlorogenic (Trugo và
Macrae, 1984), sucrose, trigonelline (Casal et al., 2000) và axit amin, trigonelline, axit chlorogenic
và caffein, trong cả cà phê xanh và cà phê rang. Những thay đổi này được cho là có liên quan đến
chất lượng cà phê. Hơn nữa, một số nghiên cứu đã đề xuất việc sử dụng các chất này để xác định
mức độ rang (Stennert và Maier, 1996), làm tiêu chí lựa chọn kiểu gen (Guerrero và Sua´rez, 2001)
và để phân biệt loài (Martın và cộng sự, 1998, Kỳ và cộng sự, 2001). Khả năng chống oxy hóa của
cà phê được cho là nhờ hàm lượng polyphenol và melanoidin (Anese và Nicol, 2003). Acrylamide
và melanoidin đều là sản phẩm của phản ứng Maillard (MRP) được hình thành trong quá trình rang
cà phê, thường được tiến hành ở nhiệt độ từ 210 đến 250 oC. Về mặt lý thuyết, bất kỳ nỗ lực nào
nhằm ức chế phản ứng Maillard như một biện pháp khả thi để giảm thiểu sự hình thành acrylamide
sẽ dẫn đến giảm khả năng chống oxy hóa của cà phê, như đã được quan sát thấy trong bánh quy
(Summa et al., 2006).
Caffeine được tìm thấy với số lượng khác nhau trong hạt, lá và quả của một số loại thực vật.
Nó được con người tiêu thụ phổ biến nhất trong dịch truyền được chiết xuất từ hạt của cây cà phê và
lá của bụi cây trà (Peters, 1967). Ngoài ra caffeine còn được tìm thấy trong nhiều loại thực phẩm và
đồ uống mà chúng ta tiêu thụ trong cuộc sống hàng ngày (Singh và Sahu, 2006). Ở người, caffein
hoạt động như một chất kích thích hệ thần kinh trung ương, tạm thời ngăn chặn cơn buồn ngủ và
khôi phục sự tỉnh táo (Lovett, 2008). Ngoài ra, nó còn gây ra các tác dụng sinh lý khác nhau như thư
giãn cơ phế quản, kích thích hệ thần kinh trung ương, tiết axit dạ dày và tiêu chảy. Caffeine có một
số tác dụng đối với giấc ngủ, nhưng không ảnh hưởng đến tất cả mọi người theo cùng một cách. Nó
cải thiện hiệu suất trong thời gian thiếu ngủ nhưng có thể dẫn đến chứng mất ngủ tiếp theo (Snel và
Lorist, 2011). Ở những người làm việc theo ca, điều đó dẫn đến ít sai sót hơn do mệt mỏi. Trong
điền kinh, liều lượng caffein vừa phải có thể cải thiện khả năng chạy nước rút, sức bền và thành tích
thể thao đồng đội, nhưng những cải thiện này thường không lớn lắm (Conger và cộng sự, 2011).
Mặt khác, phân tích hóa học của caffein trong hạt cà phê cũng được sử dụng như một công cụ bổ
sung để đánh giá chất lượng cà phê (Franca et al., 2005). Nghiên cứu này nhằm đánh giá chất lượng
sản phẩm cà phê sau khi rang. Tannin là các hợp chất polyphenolic tan trong nước, khó phân hủy
sinh học và phổ biến rộng rãi trong thực vật. Tanin thủy phân và tanin ngưng tụ là hai loại tanin
chính. Các hợp chất này đóng vai trò quan trọng như là tác nhân chống lại sự phân hủy của vi sinh
vật, chủ yếu là do khả năng ức chế sự phát triển của vi sinh vật bằng cách liên kết mạnh mẽ với
protein và polysacarit như cellulose và pectin (Lewis và Starkey, 1969; Bhat et al., 1998). Chúng có
thể kích hoạt pallet và chúng có liên quan đến tổn thương biểu mô của phế quản do bụi bông có thể
đóng một vai trò quan trọng trong bệnh ung thư xoang mũi của thợ mộc. Tannin ngưng tụ có khả
năng chống lại sự phân hủy của vi sinh vật tốt hơn, trong khi tanin thủy phân dễ bị một số vi sinh
vật phân hủy hơn (Lewis và Starkey, 1968; Lekha và Lonsane, 1997; Aguilar và Gutie'rrez-
Sa'nchez, 2001). Tannin phổ biến trong thực vật bậc cao và hiện diện với số lượng đáng kể trong
nhiều loại cây lương thực. Tanin kết tủa với kim loại nặng và ancaloit nên thường được dùng để
chữa nhiễm độc đường tiêu hóa.
Trigonelline là một alkaloid và một zwitterion được hình thành bởi quá trình methyl hóa
nguyên tử nitơ của niacin. Nó là sản phẩm của quá trình trao đổi chất niacin được bài tiết qua nước
tiểu. Vì axit nicotinic được tạo ra trong quá trình chế biến cà phê, nên nó rất sẵn có trong đồ uống,
không giống như trong các nguồn tự nhiên, nơi nó hiện diện ở dạng liên kết. Bên cạnh đó,
trigonelline dường như có hoạt tính chống xâm lấn tế bào ung thư (Hirakawa và cộng sự, 2005) và
có thể tái tạo các sợi nhánh và sợi trục, bên cạnh việc cải thiện trí nhớ ở mô hình động vật (Tohda
và cộng sự, 2005). Acrylamide (2-propenamide) là một chất độc thần kinh và chất gây ung thư đã
được biết đến (Prasad và Muralidhara, 2012), có trong thực phẩm đun nóng và khói thuốc lá.
Acrylamide đặc biệt được hình thành trong thực phẩm thực vật được đun nóng >120°C, đạt cực đại
ở 150°C (Gökmen et al. 2006), được xử lý trong khoảng 160-180°C hoặc ở 210°C (Elmore et al.,
2005). Axit chlorogen là một hợp chất hóa học tự nhiên là este của axit caffeic và axit quinic và nó
là một chất trung gian sinh tổng hợp quan trọng trong quá trình sinh tổng hợp lignin (Boerjan et al.,
2003). Hợp chất này, được biết đến như một chất chống oxy hóa, cũng có thể làm chậm quá trình
giải phóng glucose vào máu sau bữa ăn (Johnston và cộng sự, 2003). Axit chlorogenic được tìm
thấy trong chiết xuất hạt cà phê xanh và rang (Onakpoya et al., 2010).
Nghiên cứu này xác định ảnh hưởng của thời gian và nhiệt độ rang đến tỷ lệ hao hụt khối
lượng của hạt cà phê và đo hàm lượng caffein, tanin, trigonelline, chlorogenic acid và acrylamide
trong cà phê vối rang và cà phê nhân Việt Nam.
Materials and Methods
Preparation of coffee beans
Coffee beans were purchased from the robusta coffee commercial market in Ban Me Thuat
city, the Dak Lak province of Vietnam. The relative humidity was around 12%. Good quality coffee
beans were handpicked.
Nguyên liệu và phương pháp
Chuẩn bị hạt cà phê
Hạt cà phê được mua từ chợ thương mại cà phê Robusta ở thành phố Ban Mê Thuật, tỉnh
Đắk Lắk của Việt Nam. Độ ẩm tương đối là khoảng 12%. Những hạt cà phê chất lượng tốt được lựa
chọn cẩn thận.
Chemicals and Reagents
Caffeine and acrylamide standards were obtained from Sigma Chemical Co. (St. Louis, MO,
EUA). Tannin and chlorogenic acids standards were purchased from Aladdin Chemistry Co., Ltd.
(Shanghai, China). Trigonelline standard was purchased from Lvyuan biochemical Co., Ltd.
(Shanghai, China). All reagents were analytical grade, while HPLC reagents were LC grade.
Ultrapure water was obtained from a Milli-Q System (Millipore Corp., Milford, MA, USA). The
mobile phases were filtered in HAWP and HVWP membranes, respectively, for aqueous and
organic solvents (47 mm diameter and 0.45-mm pore size, Millipore Corp., Milford, MA, USA).
Hóa chất và thuốc thử
Các tiêu chuẩn caffein và acrylamide được lấy từ Công ty Hóa chất Sigma (St. Louis, MO,
EUA). Tannin và axit chlorogenic tiêu chuẩn được mua từ Aladdin Chemistry Co., Ltd. (Thượng
Hải, Trung Quốc). Tiêu chuẩn Trigonelline được mua từ Công ty TNHH sinh hóa Lvyuan (Thượng
Hải, Trung Quốc). Tất cả các thuốc thử đều là loại phân tích, trong khi thuốc thử HPLC là loại LC.
Nước siêu tinh khiết được lấy từ Hệ thống Milli-Q (Millipore Corp, Milford, MA, USA). Các pha
động được lọc lần lượt trong màng HAWP và HVWP đối với dung môi nước và dung môi hữu cơ
(đường kính 47 mm và kích thước lỗ 0,45 mm, Millipore Corp, Milford, MA, USA).
Roasting of coffee beans
Randomly selected coffee bean samples were placed into a pan and then roasted using a
muffle roaster. Each time the pan was positioned in the same place of the muffle roaster in an effort
to ensure uniform roasting conditions. After roasting, the beans were cooled immediately using an
electric fan. Five different roasting degrees (coffee roasting at 250 oC for different roasting times - 8,
12, 14, 18 and 20 min - called American roast, Vienna roast, French roast, Italian roast and Spanish
roast, respectively) and five different roasting temperatures (210, 220, 230, 240 and 250 oC) were
adopted. Weight loss was determined based on the difference percentage in sample weight before
and after roasting, and the effect of temperature on weight loss during roasting coffee beans was
evaluated. Ultimately, the roasting degrees were established based on weight loss measurements and
visual inspection of the external color of beans, which is the most widely used in the coffee roasting
industry.
Rang cà phê hạt
Các mẫu hạt cà phê được chọn ngẫu nhiên được đặt vào chảo và sau đó được rang bằng máy
rang muffle. Mỗi lần chảo được đặt ở cùng một vị trí của máy rang muffle nhằm đảm bảo các điều
kiện rang đồng đều. Sau khi rang, hạt cà phê được làm nguội ngay bằng quạt điện. Năm mức độ
rang khác nhau (rang cà phê ở 250oC cho các thời gian rang khác nhau - 8, 12, 14, 18 và 20 phút -
lần lượt được gọi là rang kiểu Mỹ, rang kiểu Vienna, rang kiểu Pháp, rang kiểu Ý và rang kiểu Tây
Ban Nha) và năm nhiệt độ rang khác nhau (210 , 220, 230, 240 và 250oC) đã được thông qua. Giảm
trọng lượng được xác định dựa trên tỷ lệ phần trăm chênh lệch về trọng lượng mẫu trước và sau khi
rang, đồng thời đánh giá ảnh hưởng của nhiệt độ đến giảm trọng lượng trong quá trình rang hạt cà
phê. Cuối cùng, độ rang được thiết lập dựa trên các phép đo giảm trọng lượng và kiểm tra trực quan
màu sắc bên ngoài của hạt, được sử dụng rộng rãi nhất trong ngành công nghiệp rang cà phê.
Grinding and storage
Roasted coffee samples were stored in sealed containers at ambient temperature for a
maximum period of 24 h. Just before each analysis, roasted coffee beans were finely ground with an
electric coffee grinder (Multi-purpose disintegrator MJ-04) at 3.5 screen size (0.30 mm) and keep
refrigerated in sealed plastic bag prior to analysis.
Mài và bảo quản
Các mẫu cà phê rang được bảo quản trong hộp kín ở nhiệt độ môi trường trong thời gian tối
đa là 24 giờ. Ngay trước mỗi lần phân tích, hạt cà phê rang được nghiền mịn bằng máy xay cà phê
điện (Máy đánh tơi đa năng MJ-04) với kích thước sàng 3,5 (0,30 mm) và bảo quản lạnh trong túi
nhựa kín trước khi phân tích.
UV-Vis spectrophotometer analysis
Analysis of tannins with UV-Vis spectrophotometer: Tannin was measured with a ultraviolet
visible spectrophotometer at 276 nm. Samples were dissolved in high pure water, and then filtered
through 0.45 mm membranes. The solution was determined by the spectrophotometer before and
after adding enough chromed hide powder (to absorb the tannin) in Quartz color dish, as recently
reported (Clifford et al., 1991; Zhang and Ou, 2005; Jiang et al., 2012).
Phân tích bằng máy quang phổ UV-Vis
Phân tích tanin bằng máy đo quang phổ UV-Vis: Tannin được đo bằng máy quang phổ tử
ngoại khả kiến ở bước sóng 276 nm. Các mẫu được hòa tan trong nước có độ tinh khiết cao, sau đó
được lọc qua màng 0,45 mm. Dung dịch được xác định bằng máy đo quang phổ trước và sau khi
thêm đủ bột da mạ crôm (để hấp thụ tanin) vào đĩa màu Thạch anh, như đã báo cáo gần đây
(Clifford và cộng sự, 1991; Zhang và Ou, 2005; Jiang và cộng sự, 2012) .
Trigonelline analysis
Trigonelline was extracted from samples (2.0 g) with 10.0 ml methyl alcohol. After
extraction for 40 min in an ultra-wave, the solution was filtered through 0.45 mm membranes. The
trigonelline was separated by ion-pair reverse phase HPLC. Liquid chromatograph consisted of a
Jasco integrated system (Japan) equipped with two model PU-980 pumps, a AS-950 automated
injector, a MD-910 multiwave length diode-array detector (DAD), and a FP-920 fluorometric
detector (excitation 252 nm, emission 500 nm). A reversed-phase Tracer-Excel 120 ODS-A (250 ×
4.6 mm) column (Teknokroma, Spain), operating at 30 °C, with a mobile phase of gradient of
acetonitrile/ water = 80/ 20 and a flow rate of 0.8 mL·min-1, as reported by Hornero-Mendez and
Garrido-Fernandes, was used. Quantification was carried out using calibration curves obtained with
standard solutions of trigonelline at 265 nm, as recently reported (Trugo and Macrae, 1984; Casal et
al., 2000; Ky et al., 2001).
Phân tích Trigonelline
Trigonelline được chiết xuất từ các mẫu (2,0 g) với 10,0 ml rượu metylic. Sau khi chiết xuất
trong 40 phút trong sóng siêu âm, dung dịch được lọc qua màng 0,45 mm. Trigonelline được phân
tách bằng HPLC pha đảo ngược cặp ion. Máy sắc ký lỏng bao gồm một hệ thống tích hợp Jasco
(Nhật Bản) được trang bị hai máy bơm kiểu PU-980, một bộ tiêm tự động AS-950, một máy dò
mảng đi-ốt (DAD) đa bước sóng MD-910 và một máy dò huỳnh quang FP-920 (kích hoạt 252nm,
bức xạ 500nm). Cột Tracer-Excel 120 ODS-A (250 × 4,6 mm) pha đảo ngược (Teknokroma, Tây
Ban Nha), hoạt động ở 30°C, với pha động có gradien acetonitril/nước = 80/20 và tốc độ dòng chảy
là 0,8 mL·min-1, theo báo cáo của Hornero-Mendez và Garrido-Fernandes, đã được sử dụng. Định
lượng được thực hiện bằng cách sử dụng các đường cong hiệu chuẩn thu được với các dung dịch
chuẩn của trigonelline ở 265 nm, như báo cáo gần đây (Trugo và Macrae, 1984; Casal et al., 2000;
Ky et al., 2001).
Chlorogenic acids analysis
Chlorogenic acid was extracted from samples (1.0g) with 10.0 ml 70% methyl alcohol
solution. After extraction for 30 min in an ultra-wave, the solution then was filtered through 0.45
mm membranes. Chlorogenic acid was separated by ion-pair reverse phase HPLC. The liquid
chromatograph consisted of a Jasco integrated system (Japan) equipped with two model PU-980
pumps, a AS-950 automated injector, a MD-910 multiwavelength diode-array detector (DAD), and
a FP-920 fluorometric detector (excitation 252 nm, emission 500 nm). A reversed-phase Tracer-
Excel 120 ODS-A (250 × 4.6 mm) column (Teknokroma, Spain), operating at 30°C, with a mobile
phase of gradient of acetonitrile/0.5% acetic acid solution = 1/9 and a flow rate of 1.0mL.min-1.
Quantification was carried out using calibration curves obtained with standard solutions of
chlorogenic acid at 327 nm (Trugo and Macrae, 1984; Casal et al., 2000; Ky et al., 2001).
Phân tích axit chlorogen
Axit chlorogenic được chiết xuất từ các mẫu (1,0 g) bằng 10,0 ml dung dịch cồn metylic
70%. Sau khi chiết trong 30 phút trong sóng siêu âm, dung dịch sau đó được lọc qua màng 0,45
mm. Axit chlorogenic được tách bằng HPLC pha đảo ngược cặp ion. Máy sắc ký lỏng bao gồm một
hệ thống tích hợp Jasco (Nhật Bản) được trang bị hai máy bơm kiểu PU-980, một bộ tiêm tự động
AS-950, một máy dò mảng đi-ốt đa bước sóng MD-910 (DAD) và một máy dò huỳnh quang FP-920
(kích thích 252nm, bức xạ 500nm). Cột Tracer-Excel 120 ODS-A (250 × 4,6 mm) pha đảo ngược
(Teknokroma, Tây Ban Nha), hoạt động ở 30°C, với gradient pha động của acetonitril/dung dịch
axit axetic 0,5% = 1/9 và a tốc độ dòng chảy 1.0mL.min-1. Việc định lượng được thực hiện bằng
cách sử dụng các đường cong hiệu chuẩn thu được với các dung dịch axit chlorogen tiêu chuẩn ở
bước sóng 327 nm (Trugo và Macrae, 1984; Casal và cộng sự, 2000; Ky và cộng sự, 2001).
Caffeine analysis
Caffeine was extracted from samples (1.0 g) with 10.0 ml trichloromethan. After extraction
for 30 min in an ultra-wave, certain amounts of anhydrous sodium sulphate and saturated sodium
chloride were added to the solution, shaken and after that the solution was filtered through 0.45 mm
membranes. Caffeine was separated by ion-pair reverse phase HPLC. The liquid chromatograph
consisted of a Jasco integrated system (Japan) equipped with two model PU-980 pumps, a AS-950
automated injector, a MD-910 multiwavelength diode-array detector (DAD), and a FP-920
fluorometric detector (excitation 252 nm, emission 500 nm). A reversed- phase Tracer-Excel 120
ODS-A (250 × 4.6 mm) column (Teknokroma, Spain), operating at 30°C, with a mobile phase of
methanol/ acetonitrile/water = 57/29/14 (50 mL 0.8 mol/L acetic acid solution was added to per
1000mL mobile phase). Quantification was carried out using calibration curves obtained with
standard solutions of caffeine at 286nm according to Trugo and Macrae, 1984; Casal et al., 2000;
Ky et al., 2001; Horzic et al., 2009.
Phân tích caffein
Caffeine được chiết xuất từ các mẫu (1,0 g) với 10,0 ml trichloromethane. Sau khi chiết trong
30 phút trong sóng siêu âm, một lượng nhất định natri sunfat khan và natri clorua bão hòa được
thêm vào dung dịch, lắc và sau đó dung dịch được lọc qua màng 0,45 mm. Caffeine được tách bằng
HPLC pha đảo ngược cặp ion. Máy sắc ký lỏng bao gồm một hệ thống tích hợp Jasco (Nhật Bản)
được trang bị hai bơm kiểu PU-980, một bộ tiêm tự động AS-950, một máy dò mảng đi-ốt đa bước
sóng MD-910 (DAD) và một máy dò huỳnh quang FP-920 (kích thích 252 nm, phát xạ 500 nm).
Cột Tracer-Excel 120 ODS-A (250 × 4,6 mm) pha đảo ngược (Teknokroma, Tây Ban Nha), hoạt
động ở 30°C, với pha động là metanol/axetonitril/nước = 57/29/14 (50 mL 0,8 mol/L dung dịch axit
axetic được thêm vào mỗi 1000mL pha động). Định lượng được thực hiện bằng cách sử dụng các
đường chuẩn thu được với các dung dịch chuẩn của caffeine ở bước sóng 286nm theo Trugo và
Macrae, 1984; Casal và cộng sự, 2000; Kỳ và cộng sự, 2001; Horzic và cộng sự, 2009.
Acrylamide analysis
Acrylamide was extracted from samples (2.0g) with 10.0 ml high pure water. After extraction
for 40 min with oscillation, the solution was centrifuged then filtered through 0.45 mm membranes.
The acrylamide was separated by ion-pair reverse phase HPLC. The liquid chromatograph consisted
of a Jasco integrated system (Japan) equipped with two model PU-980 pumps, a AS-950 automated
injector, a MD-910 multiwavelength diode-array detector (DAD), and a FP-920 fluorometric
detector (excitation 252 nm, emission 500 nm). A reversed-phase Tracer-Excel 120 ODS-A (250 ×
4.6 mm) column (Teknokroma, Spain), was operated at 28°C, with a mobile phase of acetonitrile/
water = 4/96 and a flow rate of 1.0 mL min-1. Quantification was carried out using calibration
curves obtained with standard solutions of Acrylamide at 200nm, as recently reported (Kit and Fagt,
2004; Kristina et al., 2008).
Phân tích acrylamit
Acrylamide được chiết xuất từ các mẫu (2,0 g) với 10,0 ml nước tinh khiết cao. Sau khi chiết
trong 40 phút với dao động, dung dịch được ly tâm rồi lọc qua màng 0,45 mm. Acrylamide được
phân tách bằng HPLC pha đảo ngược cặp ion. Máy sắc ký lỏng bao gồm một hệ thống tích hợp
Jasco (Nhật Bản) được trang bị hai máy bơm kiểu PU-980, một bộ tiêm tự động AS-950, một máy
dò mảng đi-ốt đa bước sóng MD-910 (DAD) và một máy dò huỳnh quang FP-920 (kích thích
252nm, bức xạ 500nm). Cột Tracer-Excel 120 ODS-A (250 × 4,6 mm) pha đảo ngược
(Teknokroma, Tây Ban Nha), được vận hành ở 28°C, với pha động là axetonitril/nước = 4/96 và tốc
độ dòng chảy là 1,0 mL phút-1. Định lượng được thực hiện bằng cách sử dụng các đường cong hiệu
chuẩn thu được với các dung dịch chuẩn của Acrylamide ở bước sóng 200nm, như đã báo cáo gần
đây (Kit và Fagt, 2004; Kristina và cộng sự, 2008).
Statistical analysis
All results were analysed using the statistical software SPSS 17.0. The average value and the
standard deviation of five replications for each roasting condition were calculated.
Phân tích thống kê
Tất cả các kết quả được phân tích bằng phần mềm thống kê SPSS 17.0. Giá trị trung bình và
độ lệch chuẩn của năm lần lặp lại cho mỗi điều kiện rang đã được tính toán.
Results and discussion
Effect of decreasing temperature on weight loss during roasting
The results for weight loss during roasting at 250oC are shown in Figure 1. The external color
of the beans changed according to roasting time (8 min, 12 min, 14 min, 18 min and 20 min) from
green to beige, brown, dark brown, dark and very dark, respectively. The mass loss values were
7.05, 12.34, 15.7, 21.8 and 24.27 %, for American roast, Vienna roast, French roast, Italian roast
and Spanish roast, respectively. The weight loss rate was increased with increasing roasting time
and is probably attributed not only to water removal but also to volatilization of volatiles in crude
coffee during the roasting stage. As the roasting time increased, the roasting process turned from the
drying stage into the roasting stage, so the weight loss rate occurred faster during the last 10min.
Figure 4. Content of caffeine, trigonelline, acrylamide, tannins and chlorogenic acids in green and
different roasting temperatures of coffee. Values followed by the same letter for a specific roasting
temperature do not differ significantly by the Duncan test at a 5% probability
Hecimovic et al. (2011) reported on the rise of caffeine from green, light, medium to dark
roasted coffee, reaching the highest value of 10.70 mg/g in the case of light roasted coffee Minas,
and of 22.40 mg/g in light roasted coffee. Furthermore, coffee Cioccolatato records 24.70 mg/g in
the medium roasted coffee for Vienna roast and 25.20 mg/g in the medium roasted Cherry coffee.
On the contrary, there are some reports that show that caffeine content reduced during the roasting
process, which was contrary to the present results. Franca et al. (2005) showed that there was a
decrease in caffeine levels from 10.70 to 17.30 mg/g in green coffee and from 5.10 to 6.70 mg/g in
roasted coffee.
In this study, Vietnam robusta coffee was roasted with different degrees of roasting, starting
from American roast to Spanish roast, and with different roasting temperature, from 210 to 250 oC.
The content of the five different types of coffee was measured, and each experiment was repeated 5
times to get accurate results.
Ảnh hưởng của điều kiện rang đến hàm lượng caffein trong cà phê
Việc xác định định lượng hàm lượng caffein được thực hiện bằng đường chuẩn chuẩn (R 2 =
0,9825). Hàm lượng cafein trong cà phê nhân và cà phê vối Việt Nam với các mức độ và nhiệt độ
rang khác nhau dao động trong khoảng 15,30 – 35,91 mg/g. Hàm lượng caffein được phát hiện
trong cà phê xanh là 15,30 mg/g, và đã được nghiên cứu trước đây bởi Hecimovic et al (2011),
người đã báo cáo rằng mức độ caffein trong cà phê xanh dao động từ 6,60 đến 20,70 mg/g, trong khi
các báo cáo khác cho thấy rằng nó thấp hơn so với quan sát trong các kết quả hiện tại, dao động từ
10,10 đến 11,90 mg/g (Belay và cộng sự, 2008), từ 9,60 đến 12,60 mg/g (Farah và cộng sự, 2006),
từ 7,30 đến 10,70 mg/g (Franca và cộng sự, 2005) và từ 7,53 đến 10,54 mg/g (Belay và cộng sự,
2008). Hàm lượng cafein tăng theo mức độ rang (từ rang Mỹ đến rang Tây Ban Nha), đạt giá trị cao
nhất là 35,91 mg/g ở rang kiểu Pháp, sau đó giảm dần xuống 29,24 mg/g ở rang Tây Ban Nha, như
trong Hình 3. Hàm lượng cafein cũng có xu hướng tương tự như nhiệt độ rang càng cao thì hàm
lượng cafein càng cao. Nó đạt giá trị cao nhất là 29,89 mg/g ở 240 oC và giảm xuống 29,24 mg/g ở
250oC, như trong Hình 4. Ngoài ra, nhiều nghiên cứu khác đã báo cáo rằng hàm lượng caffeine tăng
lên trong quá trình rang, dao động từ 10,10 đến 11,90 mg /g (Belay và cộng sự, 2008), từ 9,60 đến
12,60 mg/g (Farah và cộng sự, 2006), và từ 20,44 đến 25,15 mg/g, và tỷ lệ này cao hơn ở kiểu Pháp
rang (Joon và cộng sự, 2009).
Hình 4. Hàm lượng caffeine, trigonelline, acrylamide, tannin và axit chlorogenic trong cà phê nhân
xanh và các nhiệt độ rang khác nhau. Các giá trị được theo sau bởi cùng một chữ cái đối với một
cách rang cụ thể
Hecimovic và cộng sự. (2011) đã báo cáo về sự gia tăng của caffeine từ cà phê rang xanh,
nhạt, trung bình đến đậm, đạt giá trị cao nhất là 10,70 mg/g trong trường hợp cà phê rang nhẹ Minas
và 22,40 mg/g trong cà phê rang nhạt. Hơn nữa, cà phê Cioccolatato ghi nhận 24,70 mg/g trong cà
phê rang vừa đối với cà phê rang kiểu Viên và 25,20 mg/g đối với cà phê Cherry rang vừa. Ngược
lại, có một số báo cáo cho thấy hàm lượng caffein giảm trong quá trình rang, điều này trái ngược
với kết quả hiện tại. Franca và cộng sự. (2005) cho thấy có sự giảm hàm lượng caffein từ 10,70
xuống 17,30 mg/g trong cà phê nhân và từ 5,10 xuống 6,70 mg/g trong cà phê rang.
Trong nghiên cứu này, cà phê vối của Việt Nam được rang với các mức độ rang khác nhau,
bắt đầu từ rang kiểu Mỹ đến rang kiểu Tây Ban Nha và với nhiệt độ rang khác nhau, từ 210 đến
250oC. Hàm lượng của năm loại cà phê khác nhau đã được đo và mỗi thí nghiệm được lặp lại 5 lần
để có kết quả chính xác.
Conclusion
The results of this study showed that the contents of all measured compounds in green coffee
were higher than roasted coffee, with the exception of caffeine. Gradual weight reduction was
observed during the first 10-12 min due to the slow release of water and volatile components. After
that interval, the weight loss rate increased, which can be attributed to an intensive release of
organic compounds and CO2 due to pyrolysis. For the five types of compounds analyzed in this
experiment, the contents of trigonelline, acrylamide, tannins and chlorogenic acids in green coffee
were highest. As the roasting degree and temperature increased, the content of these compounds
decreased. In addition, trigonelline was absent when the roasting degrees were Italian and Spanish,
as well as when the roasting temperature was 250 oC. During the roasting process, the content of
caffeine increased gradually until reaching the highest value in the French roast and then decreased
gradually.
Phần kết luận
Kết quả của nghiên cứu này cho thấy hàm lượng của tất cả các hợp chất đo được trong cà phê
nhân đều cao hơn cà phê rang, ngoại trừ caffein. Trọng lượng giảm dần được quan sát thấy trong
10-12 phút đầu tiên do nước và các thành phần dễ bay hơi giải phóng chậm. Sau khoảng thời gian
đó, tốc độ giảm cân tăng lên, điều này có thể là do sự giải phóng mạnh các hợp chất hữu cơ và CO 2
do quá trình nhiệt phân. Đối với năm loại hợp chất được phân tích trong thí nghiệm này, hàm lượng
trigonelline, acrylamide, tannin và axit chlorogenic trong cà phê nhân là cao nhất. Khi mức độ rang
và nhiệt độ tăng lên, hàm lượng của các hợp chất này giảm xuống. Ngoài ra, trigonelline không có
khi độ rang là Ý và Tây Ban Nha, cũng như khi nhiệt độ rang là 250 oC. Trong quá trình rang hàm
lượng caffein tăng dần cho đến khi đạt giá trị cao nhất trong kiểu rang kiểu Pháp rồi giảm dần.