X (A H W) Y (E-H) X (L-B) Y (L-B) X (E-H) Y (A H W)

[s] mM Vo mmol/min 1/[s] 1/Vo Vo/[s] [s]/Vo Modelo Michaelis Menten

3 18.8 0.3333 0.0532 6.2667 0.1596 70
11 23.6 0.0909 0.0424 2.1455 0.4661 60
18 29.8 0.0556 0.0336 1.6556 0.6040

Vo (mmoles/min)
50
19 30.5 0.0526 0.0328 1.6053 0.6230 40
21 35.5 0.0476 0.0282 1.6905 0.5915 30
35 40.5 0.0286 0.0247 1.1571 0.8642 20
41 45.5 0.0244 0.0220 1.1098 0.9011 10
45 50.5 0.0222 0.0198 1.1222 0.8911 0
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90
68 55.5 0.0147 0.0180 0.8162 1.2252
[s] (mM)
78 60.5 0.0128 0.0165 0.7756 1.2893

Modelo Eadie Hofstie

L-B: b=1/Vmax Vmax=1/b=1/0.0269=45. 66 mmol/min
70
M=km/Vmax Km=m^2 Vmax=(0. 1058)(45.66)=4.830mM
60
E-H b=Vmax=50. 29 mol/min 50
M=-Km Km=m=-(-6. 1162) =6.1162
40

Vo
A-H-W: m=1/Vmax Vmax=1/m=1/0.0137=72. 992 mmol/min 30
b=km/Vmax Km=b*Vmax=(0. 2987) (72.992)=21.802mM 20

10
Param. / cinética L-B E-H A-H-W
Km (mM): . 4.83 6.1162 21,802 0
0 1 2 3 4 5 6 7
Vmax (mmol/min) 45.66 50.29 72,992
Vo/[s]
 Modelo Lineweaver Burk
0.06
0.05 R² = 0.757588302762523
0.04
0.03
1/Vo

0.02
0.01
0
70 80 90 0 0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3 0.35
1/[s]

1.4

1.2

0.8
[s]/Vo

0.6

0.4

0.2

0
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90
5 6 7
[s]
 sin inhibidor [fenil piruvato] (inhibidor) Cinetica de Lineweaver Burk
[s] Vo Vo 0.77 Vo 1.54 Vo 3.1 Vo 6.2 1/[s] 1/Vo 1/Vo 0.77 1/Vo 1.54 1/Vo 3.1
6.2 247.04 210 181.03 142.37 101.2 0.16129 0.00405 0.00476 0.00552 0.00702
9.3 276.3 250 233.33 200 157.3 0.10753 0.00362 0.00400 0.00429 0.00500
12.4 300 289.66 280 270.97 247.06 0.08065 0.00333 0.00345 0.00357 0.00369

Inhibicion del fenilpiruvato Inhibidor / parametro Km Kap

Sin inhibidor 3.34615385
0.012
Inhibidor 0.77 3.34615385 7.22727273
0.01
Sin inhibidor Inhibidor 1.54 3.34615385 14.1176471
0.008 Linear (Sin inhibidor )
con inhibidor 0.77
Inhibidor 3.1 3.34615385 81.6
0.006
Linear (con inhibidor 0.77) Inhibidor 6.2 3.34615385 44.625
0.004
con inhibidor 1.54
1/Vo

0.002
Linear (con inhibidor 1.54)
0 con inhibidor 3.1
45 43 26 Linear (con inhibidor 3.1) tipo de inhibición es: no competitiva
806 720 032
25 81 29 con inhibidor 6.2
032 268 161 Linear (con inhibidor 6.2)
9 5 45
12 07 06
. 16 0.1
08
0 0.
1/[s]
1/Vo 6.2
0.00988
0.00636
0.00405

Vmax sin Vmax con b m

384.615385 0.0026 0.0087
384.615385 454.545455 0.0022 0.0159
384.615385 588.235294 0.0017 0.024
384.615385 2000 0.0005 0.0408
384.615385 625 0.0016 0.0714
[s] Vo EM Vo EP 1/S 1/Vo EM 1/Vo EP
0.00005 2.86 43 20000 0.34965035 0.02325581 Diagnostico del paciente
0.00007 3.78 57 14285.7143 0.26455026 0.01754386 0.4
0.0001 5 75 10000 0.2 0.01333333 0.35
0.3
0.00015 6.67 100 6666.66667 0.14992504 0.01
0.25
0.0002 8 120 5000 0.125 0.00833333 0.2 Enzima miocardio
0.0003 10 150 3333.33333 0.1 0.00666667 0.15 Linear (Enzima mioca

1/Vo
0.1 Enzima del paciente
0.05 Linear (Enzima del
b=1/Vmax, Vmax=1/b
0 paciente )
m=Km/Vmax, Km=m*Vmax 0 43 00 67 00 33
00 71 00 66 50 33
EM: b=0.0501 ----> Vmax=1/0.0501=19.96 mmol/mg*min 20 85 1 6 3
42 66 33
m=0.00001 ---> Km=(0.00001)(19.96)=1.996x10-4mol/L 71 6 66 333
5. .6 .3
28 66 33
EP: b=0.0034 ----> Vmax=1/0.0034=294.11 mmol/mL*min 14 66 33
m=0.000001--> Km=(0.000001)(294.11)=0.00029411 mol/L 1/[s]

Km paciente= 0.0002941 DIFERENTE 0.00002 Km Músculo esquelético

0.0002941 SIMILAR 0.0001996 Km Miocardio

El paciente sufrió un infarto al miocardio

paciente

Enzima miocardio
Linear (Enzima miocardio)
Enzima del paciente
Linear (Enzima del
paciente )
[S] Vo EA Vo EE 1/[s] 1/VoEA 1/VoEE
0.0000168 1.05 5 59523.8095 0.95238095 0.2 Enzimas eritrocitarias
0.000025 1.54 6.66 40000 0.64935065 0.15015015
1
0.0000333 1.98 8 30030.03 0.50505051 0.125 0.9
0.8
0.00005 2.86 10 20000 0.34965035 0.1 0.7
0.00007 3.78 11.67 14285.7143 0.26455026 0.0856898 0.6
0.5 Eritrocito adulto
0.0001 5 13.33 10000 0.2 0.07501875 0.4
0.3 Linear (Eritrocito adulto)
0.00015 6.67 15 6666.66667 0.14992504 0.06666667

1/Vo
0.2 Eritrocito embrionario
0.000167 7.15 15.4 5988.02395 0.13986014 0.06493506 0.1 Linear (Eritrocito em-
0.0002 8 16 5000 0.125 0.0625 0 brionario)
95 00 03 00 43 00 67 81 00
3 80 400 030 200 571 100 666 095 50
2 0 8 66 52
Eritrocito adulto Eritrocito embrionario 95 03 42 66 239
.80 30. .71 6
3 0 5 . 6 .0
b= 0.0483 0.0497 .=b 52 30 28 66 88
59 14 66 59
VmaxEA= 20.70393 .= 20.12072 .=VmaxEE
1/[s]
m= 0.00005 0.000003 .=m
kmEA= 0.001035 > 6.04E-05 .=KmEE

Al ser Vmax en ambas enzimas igual, tienen una relación de isoenzimas

La enzima embrionaria tiene una mayor afinidad por el [S] ya que su Km es menor que la Km EA.
Eritrocito adulto
Linear (Eritrocito adulto)
Eritrocito embrionario
Linear (Eritrocito em-
brionario)
[Sustrato] A B C D
(mM) Control (5 µm) (20 µm) (2 mM) (0.1 mM) 1/[S] 1/Vocntrl
0.2 16.67 6.25 5.56 10 8.89 5.00000 0.05999
0.25 20 7.69 6.67 11.11 10.81 4.00000 0.05000
0.33 24.98 10 8.33 12.5 13.78 3.03030 0.04003
0.5 33.33 14.29 11.11 14.29 19.05 2.00000 0.03000
1 50 25 16.67 16.67 30.77 1.00000 0.02000
2 66.67 40 22.22 18.18 44.44 0.50000 0.01500
2.5 71.4 45.45 23.81 18.52 48.78 0.40000 0.01401
3.33 76.92 52.63 25.64 18.87 54 0.30030 0.01300
4 80 57.14 26.67 19 57.14 0.25000 0.01250
5 83.33 62.5 27.77 19.23 60.6 0.20000 0.01200

Tipo de inhibicion
0.2
0.18
0.16
0.14 Sin inhibidor
0.12 Linear (Sin inhibidor)
Con inhibidor A
0.1
Linear (Con inhibidor A)
0.08
Con inhibidor B
1/Vo

0.06
Linear (Con inhibidor B)
0.04
Con inhibidor C
0.02
Linear (Con inhibidor C)
0
5 4 2 1 Con inhibidor D
03 0.
5 4 3
0. 00 0.2
5
0.
2
303 03 Linear (Con inhibidor D)
30 30
030 300
03 30
0
03 0.
3.
1/S
1/Vo A 1/Vo B 1/Vo C 1/Vo D
0.16000 0.17986 0.10000 0.11249
0.13004 0.14993 0.09001 0.09251
0.10000 0.12005 0.08000 0.07257
0.06998 0.09001 0.06998 0.05249
0.04000 0.05999 0.05999 0.03250
0.02500 0.04500 0.05501 0.02250
0.02200 0.04200 0.05400 0.02050
0.01900 0.03900 0.05299 0.01852
0.01750 0.03750 0.05263 0.01750
0.01600 0.03601 0.05200 0.01650

Inhibidor km kap vmax sin vmax con Tipo Inhibicion

control 1 100
Inhibidor A 1 3 100 100 competitiva
Inhibidor B 1 1 100 33.33 no competitiva
Inhibidor C 1 0.2 100 20 acompetitiva
Inhibidor D 1 1.6 100 80 no competitiva mixta

Control b=0,01, Vmax=1/0,01=100

m=0,01, Km=(100)(0,01)=1
Inhibidor A b=0,01, Vmax=1/0,01=100
m=0,03 Km=(0,03)(100)=3
Inhibidor B b=0,03, Vmax=1/0,03=33,33
m=0,0299, Km=(0,0299)(33,33)=1,0
Inhibidor C b=0,05, Vmax=1/0,05=20
m=0,01, Km=(0,01)(20)=0,2
Inhibidor D b=0,0125, Vmax=1/0,0125=80
m=0,02, Km=(0,02)(80)=1,6
[Benzilamin Vo NH3 Vo NH3 Vo NH3 150 Vo NH3 1/Vo sin 1/Vo NH3 1/Vo NH3 1/Vo NH3
a] (mM) Vo sin NH3 50mM 100mM mM 200mM 1/ Benzilamina NH3 50mM 100mM 150mM
0.2 0.813 0.627 0.531 0.444 0.387 5.0000 1.2300 1.5949 1.8832 2.2523
0.3 0.957 0.743 0.637 0.528 0.462 3.3333 1.0449 1.3459 1.5699 1.8939
0.5 1.093 0.858 0.741 0.627 0.543 2.0000 0.9149 1.1655 1.3495 1.5949
1 1.22 0.966 0.844 0.725 0.627 1.0000 0.8197 1.0352 1.1848 1.3793
2 1.342 1.081 0.926 0.787 0.687 0.5000 0.7452 0.9251 1.0799 1.2706

Efecto del NH3 en monoaminoxidasa Inh NH3(mM)

0
3
50
2.5 Sin NH3 100
Linear (Sin NH3)
150
2 Con 50 mM NH3
Linear (Con 50 mM NH3) 200
1.5 Con 100 mM NH3
1/Vo

Linear (Con 100 mM NH3)

1 Con 150mM NH3
Linear (Con 150mM NH3)
0.5 Con 200 mM NH3
Linear (Con 200 mM NH3)
0
0 1 2 3 4 5 6
1/[s]

Oxigeno Vo NH3 Vo NH3 Vo NH3 100 Vo NH3 1/Vo sin 1/Vo NH3 1/Vo NH3 1/Vo NH3
(mM) Vo sin NH3 50mM 75mM mM 150mM 1/ Oxigeno NH3 50mM 75mM 100mM
0.1 1.124 0.962 0.858 0.794 0.676 10.0000 0.8897 1.0395 1.1655 1.2594
0.136 1.342 1.13 1 0.909 0.778 7.3529 0.7452 0.8850 1.0000 1.1001
0.175 1.538 1.274 1.149 1.026 0.866 5.7143 0.6502 0.7849 0.8703 0.9747
0.25 1.754 1.48 1.282 1.149 0.952 4.0000 0.5701 0.6757 0.7800 0.8703
0.3 1.876 1.587 1.351 1.212 1.015 3.3333 0.5330 0.6301 0.7402 0.8251

Efecto del NH3 en monoaminoxidasa Inh NH3(mM)

0
1.6
1.4
50
1.2 Sin NH3
1 Linear (Sin NH3)
Con 50mM NH3
0.8
Linear (Con 50mM NH3)
0.6 Con 75 mM NH3
o
 Efecto del NH3 en monoaminoxidasa
1.6
1.4
1.2 75
Sin NH3
1 Linear (Sin NH3) 100
0.8
Con 50mM NH3 150
Linear (Con 50mM NH3)
0.6 Con 75 mM NH3
1/Vo

0.4 Linear (Con 75 mM NH3)

0.2 Con 100 mM NH3
Linear (Con 100 mM NH3)
0
Con 150 mM NH3
10 59 71 4 33
470 285 333 Linear (Con 150 mM NH3)
76 14 33
411 857 333
29 42 33
35 71 33
7. 5. 3.
1/S
1/Vo NH3
200mM [NH3] mM Km Kap Vmax sin Vmax con b m
2.5840 0 0.14948747 1.423690205 0.7024 0.105
2.1645 50 0.14948747 0.20600797 1.423690205 1.14810563 0.871 0.1447
1.8416 100 0.14948747 0.25014237 1.423690205 1.00240577 0.9976 0.1757
1.5949 150 0.14948747 0.31121868 1.423690205 0.86147484 1.1608 0.2186
1.4556 200 0.14948747 0.35435649 1.423690205 0.74682599 1.339 0.2489

km kap Vmax sin Vmax con Tipo de inhibicion

0.149 1.424
0.149 0.206 1.424 1.148 No competitiva mixta
0.149 0.25 1.424 1.002 No competitiva mixta
0.149 0.311 1.424 0.861 No competitiva mixta
0.149 0.354 1.424 0.747 No competitiva mixta
< >

1/Vo NH3
150mM [NH3] mM Km Kap Vmax sin Vmax con b m
1.4793 0 0.15127479 2.83286119 0.353 0.0534
1.2853 50 0.15127479 0.17365439 2.83286119 2.32450023 0.4302 0.0613
1.1547 75 0.15127479 0.18243626 2.83286119 1.92455735 0.5196 0.0644
1.0504 100 0.15127479 0.18611898 2.83286119 1.64853281 0.6066 0.0657
0.9852 150 0.15127479 0.20736544 2.83286119 1.34012329 0.7462 0.0732

km kap Vmax sin Vmax con Tipo de inhibicion

0.151 2.832
0.151 0.174 2.832 2.325 No competitiva mixta
0.151 0.182 2.832 1.925 No competitiva mixta
0.151 0.186 2.832 1.649 No competitiva mixta
0.151 0.207 2.832 1.340 No competitiva mixta

< >