Eric Tsifrikas MP06 09/11/22

Nom i cognoms CURS GRUP

Departament de Química
Escola Municipal de Treball
GRANOLLERS Eric Tsifrikas 1er A6

Cicle Formatiu de Grau Superior

DATA DE LLIURAMENT 9/11/22 Laboratori d’Anàlisi i Control de Qualitat
NOTA

DATA D’INICI 9/10/22

MP06 Assajos microbiològics
DATA DE FINALITZACIÓ 9/11/22

N.
Títol pràctica
pràctica

Preparació, sembra, ressembra i recompte de medis de cultiu 01

Eric Tsifrikas MP06 09/11/22

Pràctica 01:
Preparació, sembra, ressembra i recompte de medis de cultiu

1. Objectiu

L’objectiu principal d’aquesta pràctica es l'elaboració i preparació d’un agar, la

sembra de microorganismes en les plaques obtingudes, la ressembra en altres
medis de cultiu i finalment el recompte de microorganismes. Cal recalcar al inici
d’aquest informe que jo vaig estar absent en una de les classes i que careix-ho
del procediment de sembra en agar prèviament elaborat. Tot i així s’explicaran
els detalls necessaris per entendre satisfactòriament l’informe.

2. Procediment
Banc de dilucions i sembra

El mètode que s'utilitza sera l’aïllament per dilució on es preparen 4 plaques

d’agar nutritiu, seguit per 4 tubs amb 9 mL de Ringer

Es prepara un banc de dilucions decimals amb la mostra ( - 1, -2, -3, -4 ) i

sembra 0’1 mL a les plaques de cada una de les dissolucions amb l'ús de la
nansa de Digralsky.

1 mL -1 1 mL -2 1 mL -3 1 mL -4
Mostra mare ----------> --------> -------> ------->

↓ ↓ ↓ ↓
0’1 mL 0’1 mL 0’1 mL 0’1 mL

10-1 10-2 10-3 10-4

La sembra requeria de l’us de micropipetes ( 1mL ) per tal d’introduir el volum

inoculat a la placa de petri. La sembra s’ha realitzat amb l'ús de la nansa de
digralsky de manera similar a aquesta, assegurant-se de que el volum
s'expandeix per tots els costats de la placa.

Aquestes plaques van ser retolades i doncs dipositades en la estufa de cultiu a

37 ºC durant 48h.
Eric Tsifrikas MP06 09/11/22

Recompte i ressembra

Per les 4 dilucions es realitza el recompte de microorganismes que es puguin

observar a les plaques. Després del recompte es realitzar la sembra escocesa i
ressembra en diferents agars i amb diferents microorganismes.

Agars:

Columbia McConkey Levine Sab-Caf

Microorganismes: Amarillo, Blanco, Saccharomyces cerevisiae , S. Aureus

3. Resultats
Plaques AN
Rang: >30 i <300

10-1 10-2 10-3 10-4

Incontable Incontable 267 ufc 45 ufc

1 1
𝑢𝑓𝑐/𝑚𝑙 0'1
× −4 × 45 𝑢𝑓𝑐 = 4500000 ufc / mL
10

Observaciones
Creixement bacterià excessiu, amb forma circular i vores senceres. Colònies
blanc perla.

Plaques de ressembra
Eric Tsifrikas MP06 09/11/22

1.Colònies roses i circulars B

2. Colònies oscures i circulars E

3.Ausencia de microorganismes C

4.Creixement de microorganismes C
Eric Tsifrikas MP06 09/11/22

5.Creixement de microorganisme D
amb viratge a groc (acidificació)

6. Creixement de colònies grogues

A i colònies blanques B

7.Colònies roses B

4. Conclusions

El creixement de microorganismes ha estat excessiu en l’agar nutritiu, la raó

més probable recau en les dilucions i en un més que probable error alhora de
posar el volum de la dilució a la placa.

Referent a les resembres, son majoritàriament satisfactòries tot i que la sembra

per el microorganisme C no era necesaria la ressembra en Levine.
Eric Tsifrikas MP06 09/11/22

5. Observacions

- En el procés de de repartir el medi en les plaques de Petri, s’ha fet servir

el mètode de mitja lluna per omplir totes les plaques amb el mateix
nivell d’agar ja que; si en fiquem poc, es probable que els
microorganismes acabin ràpidament amb els nutrients, i si és massa,
s’estan perdent mL de medi que poden utilitzar-se en altres plaques.
- Les micropipetes que es van utilitzar durant la sembra van estar
dipositades en un recipient amb una dilució de lleixiu per tal d’evitar
contaminació
- En el procés de sembra i resembra, s’ha fet ús de l'encenedor d’alcohol
per tal de crear un ambient estèril a la zona de treball. Sempre s’ha
treballat a prop de la flama i s’ha d'esterilitzar la nansa de digralsky
després de la sembra.
- La sembra escocesa o per esgotament s’ha realitzat seguint el patró
següent:

6. Annexes