HbA1c

Generic Name :Hemoglobin A1c Kit (Enzymatic Assay Method) 1. For in vitro diagnostic use only.
2. Take the necessary precautions for the use of laboratory reagents.
Abbreviated name: HbA1c
3. Preservative contained. Do not swallow. Avoid contact with skin and
Order Information mucous membranes.
4. Disposal of all waste material should be in accordance with local
Cat.No. Package size
guidelines.
HBA0202 R1 2×30 mL+R2 1×12 mL Pretreatment Solution 1×150 mL
5. Material safety data sheet is available for professional user on request.
HBA0203 R1 2×40 mL+R2 1×15 mL Pretreatment Solution 1×200 mL
6. For diagnostic purposes, %HbA1c values should be used in conjunction
HBA0204 R1 4×40 mL+R2 2×15 mL Pretreatment Solution 2×150 mL with information from other diagnostic procedures and clinical valuations.
R1 2×30mL+R2 1×12mL+Calibrator 2×1 mL 7. The test is designed only for accurate and precise measurement
HBA0302
Pretreatment Solution 1×150 mL of %HbA1c. The individual results for total Hb and HbA1c concentration
R1 2×40mL+R2 1×15mL+Calibrator 2×1 mL should not be reported.
HBA0303
Pretreatment Solution 1×200 mL 8. The test is not intended for the diagnosis of diabetes mellitus or for
R1 4×40 mL+R2 2×15 mL+Calibrator 2×1 mL judging day-to-day glucose control and should not be used to replace
HBA0304
Pretreatment Solution 2×150 mL daily home testing of urine or blood glucose.
R1 2×30 mL+R2 1×12 mL+Calibrator 2×1 mL + Quality control 9. All human material should be considered potentially infectious.
HBA0102
2×1 mL Pretreatment Solution 1×150 mL
10. The reagent must be used together with the calibrator bearing the same
R1 2×40 mL+R2 1×15 mL+Calibrator 2×1 mL + Quality control
HBA0103 lot number.
2×1 mL Pretreatment Solution 1×200 mL
R1 4×40mL+R2 2×15 mL+Calibrator 2×1 mL + Quality control Reagent Preparation
HBA0104
2×1 mL Pretreatment Solution 2×150 mL
R1 and R2 are ready to use.
Intended use
Calibrator Preparation
In vitro test for the quantitative determination of HbA1c concentration in human
Carefully open the bottle, avoiding the loss of lyophilizate, and pipette in exactly
whole blood on photometric systems.
1.0 mL of distilled/deionized water. Carefully close the bottle and dissolve the
Summary 1-3
contents completely by occasional gentle swirling within 30 minutes. Avoid the

Hemoglobin (Hb) consists of four protein chains with four heme portions, and is formation of foam. The dissolved calibrator can be used without any other
the red-pigmented protein located in the erythrocytes. Its main function is the Pretreatment.
transport of oxygen and carbon dioxide in blood. Each Hb molecule is able to
Quality control Preparation
bind four oxygen molecules. Hb consists of a variety of subfractions and
derivatives. Among this heterogeneous group of hemoglobins HbA1c is one of Carefully open the bottle, avoiding the loss of lyophilizate, and pipette in exactly
the glycated hemoglobins, a subfraction formed by the attachment of various 1.0 mL of distilled/deionized water. Carefully close the bottle and dissolve the
sugars to the Hb molecule. HbA1c is formed in two steps by the non-enzymatic contents completely by occasional gentle swirling within 30 minutes. Avoid the
reaction of glucose with the N-terminal amino group of the β-chain of normal formation of foam. The dissolved control can be used without any other
adult Hb (HbA). The first step is reversible and yields labile HbA1c. This slowly Pretreatment.
rearranges in the second reaction step to yield stable HbA1c. In the erythrocytes,
Storage and stability
the relative amount of HbA converted to stable HbA1c increases with the
average concentration of glucose in the blood. The conversion to stable HbA1c is Up to expiration date indicated on the label, when stored unopened at 2-8℃ and
limited by the erythrocyte’s life span of approximately 100 to 120 days. As a protected from light.
result, HbA1c reflects the average blood glucose level during the preceding 2 to Once opened, the reagents are stable for 28 days when refrigerated on the
3 months. HbA1c is thus suitable to monitor long-term blood glucose control in analyzer or refrigerator.
individuals with diabetes mellitus. More recent glucose levels have a greater
Contamination of the reagents must be avoided.
influence on the HbA1c level. The approximate relationship between HbA1c and
Do not freeze the reagents.
mean blood glucose value during the preceding 2 to 3 months has been analyzed
Once dissolved, the calibrator and control are stable for 15 days at 2–8℃,do not
by several studies.
freeze.
Method
Reagent blank absorbency
Enzymatic Assay Method
The absorbance of Hb reagent blank at 500 nm should be <0.8 A;
Reaction Principle
The absorbance of HbA1c reagent blank at 660 nm should be <0.5 A.
In the first reaction, the concentration of hemoglobin is measured at absorbance
Materials required but not provided
of fixed wavelength, and simultaneously the fructosyl dipeptides are generated
1. NaCl solution 9 g/L.
from the N-terminus amino groups of the beta-chain of HbA1c by the reaction of
protease. In the second reaction, the reaction of Fructosyl peptide oxidase(FPOX) 2. General laboratory equipments.

with fructosyl dipeptides, generated hydroperoxide allows Specimen collection and preparation
10-(carboxymethylaminocarbonyl)-3,7-bis(dimethylamino) phenothiazine
1. Only the specimens listed below were tested and found acceptable.
sodium salt to develop a color in the presence of peroxidase. The change in
2. EDTA-、NaF-EDTA or heparinized blood are suitable for samples.
absorbance is measured for HbA1c determination. The combined assay results
3. Use the suitable tubes or collection containers and follow the instruction of
for hemoglobin and HbA1c are used by the system to calculate and express
the manufacturer; avoid effect of the materials of the tubes or other
HbA1c(%).
collection containers.
Reagents
Pretreatment Procedure of Whole Blood
Components and concentration 1. Prior to testing, whole blood samples should be centrifuged at 2000 rpm
R1： Tris buffer 2.7 mmol/L for 5 min.
Peroxidase 1500 U/L 2. Get 25 uL blood corpuscle from the blood corpuscle deposition into a
R2：
Fructosyl peptide oxidase 1500 U/L sample cup or an Eppen-dorf microfuge tube.

Pretreatment Solution Hemolysin 5 g/L 3. Add 500 μL of Pretreatment Solution into sample cup or an Eppen-dorf
microfuge tube.
Calibrator Indicated on the Value sheet
4. Close the test tube and lysis the blood by shaking vigorously. Then mix the
Quality control Indicated on the Value sheet
solution by either swirling gently or by using a vibration mixer.
Warnings and precautions 5. The hemolysate can be used as working samples after 5 minute.

2013-07 V7.0 English HbA1c Page 1 of 2 P/N：046-001259-00（7.0）

HbA1c
6. Whole blood Stability: 3 day at 15-25℃ 7 days at 2–8℃ Lipemia 2000 mg/dL NSI
Hemolysate Stability :8 hours at 15-25℃ 24 hours at 2–8℃ Glucose 1000 mg/dL NSI
Assay procedure * NSI: No Significant Interference (within ±10%)

1. Hb Linearity Range
Blank Sample The Mindray System provides the following analytical ranges:
Reagent 1 180 μL 180 μL
Sample Type S.I. Units
Dist. water 12 μL －
Whole blood 3-16%
Sample － 12 μL If the value of sample exceeds 16%, the sample should be diluted with
Mix, incubate for 5 min. at 37 ℃, and read the blank absorbance A Pretreatment Solution (e.g. 1+ 1) and rerun.
ΔA = [ΔA sample]- [ΔA blank]
Analytic Sensitivity/Limit of Detection
2. HbA1c
The lowest measurable Hb concentration that can be distinguished from zero is
Blank Sample 15 μ mol/L with 99.7% confidence.
Reagent 1 180 μL 180 μL The lowest measurable HbA1c concentration that can be distinguished from zero
Dist. water 12 μL － is 3 μ mol/L with 99.7% confidence.
Sample － 12 μL Precision
Mix, incubate for 5 min. at 37 ℃, and read the blank absorbance, then add:
Precision performance using the CLSI Approved Guideline EP5-A2 to assay
Reagent 2 60 μL 60 μL serum control appears in the table below5. U：%
Mix thoroughly at 37 ℃, and read the absorbance again 5 min later.
Type of Level 1 Level 2
ΔA = [ΔA sample]- [ΔA blank] Imprecision Mean SD CV (%) Mean SD CV (%)
Within-run 0.141 3.194 0.133 1.434
Calibration
Between-run 0.085 1.923 0.092 0.982
1. It is recommended to use the calibrator in kits for tow-point calibration 4.43 9.32
Between-day 0.031 0.705 0.023 0.245
2. Traceability of the calibrator:This method has been standardized against
Diabetes Control and Complications Tria （ DCCT ） Reference method Within-device 0.168 3.794 0.164 1.755

（JCCRM411-2、JCCRM 423-7、JCCRM 622-1）. Method Comparison

3. Calibration frequency:
A comparison between Mindray System (Mindray BS series analyzers /Mindray
After reagent lot changed.
HbA1c Reagent) (y) and Hitachi/SEKISUI System (Hitachi / SEKISUI HbA1c) (x)
As required following quality control procedures.
using 40 samples gave following correlation (%): y = 0.9975x - 0.0455,
Quality control r=0.9962
At least two levels of control material should be analyzed with each batch of Details of the comparison experiments are available on request.
samples. In addition, these controls should be run with each new calibration, References
with each new reagent cartridge, and after specific maintenance or
1. Junge W, Wilke B, Halabi A et al. Determination of reference intervals in
troubleshooting procedures as detailed in the appropriate system manual. adults for hemoglobin A1c (HbA1c). Poster presentation 18th International
We recommend using the Control in kits to verify the performance of the Diabetes Federation Congress, Paris, 2003.
measurement procedure; other suitable control material can be used in addition. 2. CLSI. Evaluation of Precision Performance of Quantitative Measurement
Each laboratory should establish its own internal quality control scheme and
Methods; Approved Guideline-Second Edition. CLSI document EP5-A2
procedures for corrective action if controls do not recover within the acceptable
[ISBN 1-56238-542-9. CLSI, 940 West Valley Road, Suite 1400, Wayne,
tolerances.
PA 19087 USA, 2008.
Calculation
Graphical symbols
The analyzer calculates the HbA1c concentration of each sample automatically
after calibration.
Propotcol 1 according to IFCC: HbA1c(%)= HbA1c(μ mol/L) / Hb(μ mol/L)×100
Propotcol 2 according to NGSP/DCCT: HbA1c(%)= 91.5×HbA1c(μ mol/L) / Hb(μ
mol/L)+ 2.15
Propotcol 3 according to JCCLS: HbA1c(%)= 96.3×HbA1c(μ mol/L) / Hb(μ
mol/L)+ 1.62

Reference Intervals 4
Each laboratory should establish its own reference intervals based upon its
patient population. The reference intervals measured at 37℃ listed below were
taken from literature: © 2013 Shenzhen Mindray Bio-Medical Electronics Co., Ltd. All rights Reserved
Sample Type S.I. Units Manufacturer: Shenzhen Mindray Bio-Medical Electronics Co., Ltd.
According to IFCC 2.9-4.2% Address:Mindray building, Keji 12th Road South, Hi-tech Industrial
Park,Nanshan, Shenzhen, 518057 P.R.China
Whole blood According to NGSP/DCCT 4.8-5.9%
E-mail Address: service@mindray.com
According to JCCLS 4.3-5.8%
Website: www.mindray.com
Performance Characteristics
Tel:+86-755-81888998
Representative performance data obtained from Mindray system (Mindray BS
series analyzers / Mindray HbA1c Reagent) is given below. Results may vary if a Fax:+86-755-26582680
different instrument, an individual laboratory or a manual procedure is used. EC-Representative: Shanghai International Holding Corp. GmbH(Europe)
Address: Eiffestraβe 80, Hamburg 20537, Germany
Limitations-interference
Tel: 0049-40-2513175 Fax:0049-40-255726
The following substances were tested for interference with this methodology.
Criterion: Recovery within ±10 % of initial value.
Substance Level Tested Observed Effect
Ascorbic acid 30 mg/dL NSI*
Bilirubin 50 mg/dL NSI

2013-07 V7.0 English HbA1c Page 2 of 2 P/N：046-001259-00（7.0）

HbA1c
непатентованное наименование: Набор для определения Калибратор Указано в таблице результатов
гемоглобина А1с(HbA1c), ферментативный метод Контроль качества Указано в таблице результатов
сокращенное наименование : HbA1c
Предупреждения и меры предосторожности
Информация для оформления заказа
1. Только для диагностики in vitro.
№ по кат. Размер упаковки 2. При работе с лабораторными реагентами соблюдайте необходимые
R1 2×30 мл+R2 1×12 мл Раствор для предварительной меры предосторожности.
HBA0202
обработки 1×150 мл 3. Содержит консервант. Запрещается проглатывать. Избегайте
R1 2×40 мл + R2 1×15 мл контакта с кожей и слизистой оболочкой.
HBA0203
Раствор для предварительной обработки 1×200 мл 4. От всех отходов избавляйтесь в соответствии с местными
R1 4×40 мл + R2 2×15 мл нормативами.
HBA0204
Раствор для предварительной обработки 2×150 мл 5. Паспорт безопасности материала предоставляется пользователям по
R1 2×30 мл+R2 1×12 мл+калибратор 2×1 мл запросу.
HBA0302
Раствор для предварительной обработки 1×150 mL 6. В диагностических целях значения %HbA1c следует использовать
R1 2×40 мл+R2 1×15 мл +калибратор 2×1 мл вместе с данными других диагностических процедур и клиническими
HBA0303
Раствор для предварительной обработки 1×200 мл оценками.
R1 4×40 мл+R2 2×15 мл + калибратор 2×1 мл 7. Данный тест предназначен только для достоверного и точного
HBA0304
Раствор для предварительной обработки 2×150 мл измерения %HbA1c. Отдельные результаты по концентрации общего
R1 2×30 мл+R2 1×12 мл+калибратор 2×1 мл+контроль Hb и HbA1c не следует включать в отчет.
HBA0102 качества 2×1 мл 8. Тест не предназначен для диагностики сахарного диабета или оценки
Раствор для предварительной обработки 1×150 мл повседневного контроля глюкозы, и не может заменить ежедневного
R1 2×40 мл+R2 1×15 мл + калибратор 2×1 мл + контроль тестирования глюкозы в моче или крови в домашних условиях.
HBA0103 качества 2×1 мл 9. Весь человеческий материал следует считать потенциально
Раствор для предварительной обработки 1×200 мл инфекционным.
R1 4×40 мл+R2 2×15 мл + калибратор 2×1 мл + контроль 10. Реагент необходимо использовать вместе с калибратором с тем же
HBA0104 качества 2×1 мл номером партии.
Раствор для предварительной обработки 2×150 мл Приготовление реагента
Назначение Реагенты R1 и R2 готовы к использованию.
Тест для количественного определения in vitro концентрации HbA1c в Приготовление калибратора
человеческой цельной крови методом фотометрии . Осторожно откройте флакон, чтобы не потерять лиофилизат, и пипеткой
Краткая справка 1-3 введите точно 1,0 мл дистиллированной или деионизированной воды.
Аккуратно закройте флакон и полностью растворите содержимое, в течение
Гемоглобин (Hb) состоит из четырех белковых цепей и четырех гемов и
30 минут время от времени взбалтывая кругообразными движениями. Не
является окрашивающим в красный цвет белком, входящим в состав
допускайте образования пены. Растворенный калибратор можно
эритроцитов. Его основная функция — транспортировка кислорода и использовать без всякого дальнейшего приготовления.
двуокиси углерода в крови. Каждая молекула Hb способна связать четыре
Приготовление контроля качества
молекулы кислорода. Hb состоит из разнообразных субфракций и дериватов.
Осторожно откройте флакон, чтобы не потерять лиофилизат, и пипеткой
В эту гетерогенную группу гемоглобинов входят гемоглобины HbA1c, введите точно 1,0 мл дистиллированной или деионизированной воды.
представляющие гликозилированные гемоглобины — субфракцию, Аккуратно закройте флакон и полностью растворите содержимое, в течение
сформированную путем прикрепления различных сахаров в молекуле Hb. 30 минут время от времени взбалтывая кругообразными движениями. Не
HbA1c образуется в два этапа в результате неферментативной реакции допускайте образования пены. Растворенный контроль можно использовать
глюкозы с N-концевой аминогруппой β-цепи нормального зрелого Hb (HbA). без всякого дальнейшего приготовления.
Этот первый этап обратимый и дает неустойчивый HbA1c. Он медленно Хранение и устойчивость
трансформируется во второй этап, в результате которого получается В случае хранения в защищенном от света месте при температуре 2-8℃ в
устойчивый HbA1c. В эритроцитах относительное количество HbA, нераспечатанных флаконах сохраняют устойчивое состояние до истечения
преобразуемого в устойчивый HbA1c, возрастает с увеличением средней срока годности, указанного на этикетке.
концентрации глюкозы в крови. Преобразование в устойчивый HbA1c Открытый реагент остаѐтся стабильным в течение 28 дней, если хранится в
ограничивается сроком жизни эритроцитов — приблизительно 100—120 анализаторе или в холодильнике.
суток. В результате HbA1c отражает средний уровень глюкозы в крови за Необходимо защищать реагенты от загрязнения.
предшествующие 2—3 месяца. Следовательно, HbA1c подходит для Запрещается замораживать реагенты.
мониторинга долгосрочного контроля глюкозы в крови людей, страдающих Растворенные калибратор и контроль остаются устойчивым в течение 15
сахарным диабетом. Чем свежее уровни глюкозы, тем больше их влияние на суток при температуре 2—8 °С. Не замораживать.
уровень HbA1c. Приблизительная взаимосвязь между HbA1c средним Поглощающая способность холостого реагента
значением глюкозы в крови за предшествующие 2—3 месяца была Поглощающая способность холостого реагента Hb при 500 нм должна быть
проанализирована в ряде исследований. <0,8 A.
Метод Поглощающая способность холостого реагента HbA1c при 660 нм должна
Метод ферментативного химического анализа быть <0,5 A.
Принцип реакции Необходимые материалы, не входящие в комплект поставки
В первой реакции измеряется концентрация гемоглобина на основе 1. Раствор 9 г/л NaCl.
поглощающей способности света фиксированной длины волны, и, 2. Обычное лабораторное оборудование.
одновременно, формируются дипептиды фруктозила в результате реакции Взятие и приготовление пробы
протеазы из N-концевых аминогрупп бета-цепи HbA1c. Во второй реакции — 1. Испытаны и признаны пригодными только следующие образцы.
фруктозил-пептид-оксидазы (FPOX) с дипептидами фруктозила — 2. В качестве проб пригодна ЭДТА-、NaF-ЭДТА или гепаринизированная
образуется натриевая соль фенотиазина кровь.
10-(карбоксиметиламинокарбонил)-3,7-бис(диметиламино), дающая 3. Используйте подходящие пробирки или контейнеры для сбора проб и
цветовую реакцию при наличии пероксидазы. Для определения HbA1c соблюдайте инструкции изготовителя, чтобы исключить влияние
измеряется изменение поглощающей способности. Совокупные результаты материалов пробирок или контейнеров для сбора проб.
химического анализа гемоглобина и HbA1c используются системой для Процедура приготовления цельной крови
расчета и выражения HbA1c(%). 1. Перед тестированием цельную кровь следует в течение 5 минут
Реагенты обработать в центрифуге со скоростью вращения 2000 об/мин.
Компоненты и концентрация 2. Отберите 25 мкл форменных элементов крови из осадка форменных
R1： Трис-буфер 2,7 ммоль/л элементов крови в чашку для пробы или микроцентрифужную
Пероксидаза 1500 Ед/л пробирку Эппендорфа.
R2： 3. Добавьте 500 мкл приготовленного раствора в чашку для пробы или
Фруктозил-пептид-оксидаза 1500 Ед/л
микроцентрифужную пробирку Эппендорфа.
Раствор для
4. Закройте тестовую пробирку и, энергично встряхивая ее, лизируйте
предварительной Гемолизин 5 г/л
кровь. Затем перемешайте раствор, либо легкими кругообразными
обработки
движениями, либо с помощью вибрационного смесителя.

2013-07 V7.0 Русский HbA1c Стр. 1 из 2 Кат.№：046-001259-00（7.0）

HbA1c
5. Спустя 5 минут, гемолизат можно использовать в качестве рабочих Аскорбиновая кислота 30 мг/дл NSI*
проб. Билирубин 50 мг/дл NSI
6. Устойчивость цельной крови:3 суток при 15-25 °C,7 суток при 2-8 °C Липемия 2000 мг/дл NSI
Устойчивость гемолизата:8 часов при 15-25 °C,24 часа при 2–8 °C Глюкоза 1000 мг/дл NSI
Порядок выполнения химического анализа *NSI: без существенного влияния (в пределах ±10 %)
1. Hb Диапазон линейности
Холостая проба Проба Система Mindray обеспечивает следующие пределы анализа:
Реагент 1 180 мкл 180 мкл Тип пробы Единицы СИ
Дист. вода 12 мкл － Цельная кровь 3—16 %
Проба － 12 мкл Если этот показатель пробы превышает 16 %, ее следует разбавить
Смешайте, инкубируйте в течение 5 мин. при 37 °С и снимите показания приготовленным раствором (например, 1+ 1) и обработать заново.
поглощающей способности холостой пробы A
Аналитическая чувствительность/предел обнаружения
ΔA = [ΔA пробы]- [ΔA холостой пробы] Минимальная измеряемая концентрация Hb, которую можно отличить от
2. HbA1c нулевой, составляет 15 мкмоль/л с достоверностью 99,7 %.
Холостая проба Проба Минимальная измеряемая концентрация HbA1c, которую можно отличить от
Реагент 1 180 мкл 180 мкл нулевой, составляет 3 мкмоль/л с достоверностью 99,7 %.
Дист. вода 12 мкл － Точность
Проба － 12 мкл Точность измерения в соответствии с рекомендациями руководства CLSI
Смешайте, инкубируйте в течение 5 мин. при 37 °С, снимите показания Approved Guideline EP5-A2 при химическом анализе контрольной сыворотки
поглощающей способности холостой пробы и затем добавьте: приведена в таблице ниже5. Ед.：%
Реагент 2 60 мкл 60 мкл Уровень 1 Уровень 2
Тип
Тщательно перемешайте при 37 °C, и, спустя 5 минут, еще раз снимите погрешности Среднее КВ Среднее КВ
СО СО
показания поглощающей способности. значение (%) значение (%)

ΔA = [ΔA пробы]- [ΔA холостой пробы] В одном

анализе 0,141 3,194 0,133 1,434
Калибровка
Между
1. Для двухточечной калибровки рекомендуется использовать
анализами 4,43 0,085 1,923 9,32 0,092 0,982
калибратор, входящий в наборы
Между
2. Отслеживаемость калибратора: данный метод стандартизован
днями 0,031 0,705 0,023 0,245
согласно стандартуDCCTметод （ JCCRM411-2 、 JCCRM 423-7 、 JCCRM
В устройстве 0,168 3,794 0,164 1,755
622-1）
3. Частота калибровки: Сравнение методов
После замены партии реагентов. В результате сравнения системы Mindray (анализаторы Mindray серии
По мере надобности соблюдайте процедуры контроля качества. BS/реагент HbA1c Mindray) (y) и системы Hitachi/SEKISUI (Hitachi/SEKISUI
Контроль качества HbA1c) (x) на 40 пробах получена следующая корреляция (%): y = 0,9975x
Для каждой партии проб следует проанализировать не менее двух уровней - 0,0455, r=0,9962
контрольного материала. Кроме того, эти контроли следует обрабатывать Подробные данные сравнительных экспериментов предоставляются по
для каждой новой калибровки, каждого нового картриджа с реагентами и требованию.
после определенного технического обслуживания или устранения Литература
неполадок, о чем подробно написано в руководствах соответствующих 1. Junge W, Wilke B, Halabi A et al. Determination of reference intervals in
систем. adults for hemoglobin A1c (HbA1c) (Определение референтных
Для оценки эффективности процедуры измерения рекомендуется интервалов для гемоглобина A1c (HbA1c) у взрослых). Poster
использовать контроль из наборов. Кроме того, можно использовать другие presentation 18th International Diabetes Federation Congress, Paris, 2003.
подходящие контрольные материалы. 2. CLSI. Evaluation of Precision Performance of Quantitative Measurement
В каждой лаборатории следует принять собственную схему контроля Methods (Оценка характеристик точности методов количественного
качества и процедуры внесения поправок на то случай, если контроли не измерения); Approved Guideline-Second Edition. CLSI document EP5-A2
восстанавливаются в допустимых пределах. [ISBN 1-56238-542-9. CLSI, 940 West Valley Road, Suite 1400, Wayne, PA
Вычисления 19087 USA, 2008.
Анализатор автоматический рассчитывает концентрацию HbA1c каждой Графические обозначения
пробы после выполнения калибровки.
Протокол 1 согласно IFCC: HbA1c(%)= HbA1c(мкмоль/л)/Hb(мкмоль/л)×100
Протокол 2 согласно NGSP/DCCT:
HbA1c(%)= 91,5×HbA1c(мкмоль/л)/Hb(мкмоль/л)+ 2,15
Протокол 3 согласно JCCLS:
HbA1c(%)= 96,3×HbA1c(мкмоль/л)/Hb(мкмоль)+ 1,62
Референтные интервалы 4
В каждой лаборатории следует принять собственные референтные
интервалы с учетом группы больных. Приведенные ниже референтные
интервалы, измеренные при 37 °C, взяты из литературы:
Тип пробы Единицы СИ © 2013 Shenzhen Mindray Bio-Medical Electronics Co., Ltd. Все права
Согласно IFCC 2,9—4,2 % защищены
Цельная кровь Согласно NGSP/DCCT 4,8—5,9 % Изготовитель: Shenzhen Mindray Bio-Medical Electronics Co., Ltd.

4,3—5,8 % Адрес:Mindray building, Keji 12th Road South, Hi-tech Industrial

Согласно JCCLS
Park,Nanshan, Shenzhen, 518057 P.R.China
Эксплуатационные характеристики
Адрес эл. почты: service@mindray.com
Ниже представлены репрезентативные рабочие характеристики,
Веб-сайт: www.mindray.com
полученные с помощью системы Mindray (анализаторы Mindray серии
BS/реагент HbA1c Mindray). Результаты могут меняться, если используются Тел.:+86-755-81888998 Факс:+86-755-26582680
другие приборы, отдельная лаборатория или ручной анализ. Представитель в ЕС: Shanghai International Holding Corp. GmbH(Europe)
Адрес: Eiffestraβe 80, Hamburg 20537, Germany
Ограничения - мешающие вещества
Тел.: 0049-40-2513175 Факс:0049-40-255726
Проверено мешающее воздействие следующих веществ при использовании
данной методологии. Критерий: восстановление в пределах ±10 % от
начального значения.
Тестируемый Наблюдаемый
Вещество
уровень эффект

2013-07 V7.0 Русский HbA1c Стр. 2 из 2 Кат.№：046-001259-00（7.0）

HbA1c
Nome genérico : Kit de Hemoglobina A1c (Método de Doseamento Controle de qualidade Indicado na planilha de valores
Enzimático)
Avisos e precauções
Nome abreviado : HbA1c
1. Apenas para diagnóstico in vitro.
Informações da ordem 2. Adote as precauções necessárias para o uso de reagentes de laboratório.
NºCat. Tamanho da embalagem 3. Contém conservantes. Não deve ser ingerido. Evite contato com a pele e
R1 2×30 mL+R2 1×12 mL membranas mucosas.
HBA0202 4. O descarte dos resí
duos deve ser feito de acordo com as diretrizes locais.
Solução de Pré-tratamento 1×150 mL
5. A folha de segurança de material está disponí
vel para profissionais da
R1 2 × 40 mL + R2 1 × 15 mL
HBA0203 área mediante solicitação.
Solução de Pré-tratamento 1 × 200 mL
6. Com o propósito de diagnóstico, os valores de %HbA1c devem ser usados
R1 4 × 40 mL + R2 2 × 15 mL em conjunto com as informações de outros procedimentos de diagnóstico
HBA0204
Solução de Pré-tratamento 2 × 150 mL e outras avaliações clí
nicas.
R1 2×30 mL+R2 1×12 mL+ Calibrador 2×1 mL 7. O teste foi desenvolvido somente para a medição precisa da %HbA1c. Os
HBA0302
Solução de Pré-tratamento 1×150 mL resultados individuais para Hb total e a concentração de HbA1c não
R1 2 × 40 mL + R2 1 × 15 mL + Calibrador 2 × 1 mL devem ser relatados.
HBA0303 8. O teste não tem a intenção de diagnosticar diabetes mellitus ou julgar o
Solução de Pré-tratamento 1 × 200 mL
controle diário de glicose e não deve ser usado para substituir os testes
R1 4 × 40 mL + R2 2 × 15 mL + Calibrador 2 × 1 mL
HBA0304 caseiros diários de urina ou glicose sanguí
nea.
Solução de Pré-tratamento 2 × 150 mL
9. Todo o material humano deve ser considerado como potencialmente
R1 2×30 mL+R2 1×12 mL+ Calibrador 2×1 mL + Controle de infeccioso.
HBA0102
qualidade 2×1 mL Solução de Pré-tratamento 1×150 mL 10. O reagente deve ser usado com o calibrador que possui o mesmo número
R1 2 × 40 mL + R2 1 × 15 mL + Calibrador 2 × 1 mL + Controle de de lote.
HBA0103
qualidade 2 × 1 mL Solução de Pré-tratamento 1 × 200 mL Preparação do reagente
R1 4 × 40 mL + R2 2 × 15 mL + Calibrador 2 × 1 mL + Controle de O R1 e o R2 vêm prontos para uso.
HBA0104
qualidade 2 × 1 mL Solução de Pré-tratamento 2 × 150 mL Preparação do calibrador
Uso pretendido Abra cuidadosamente o frasco, evitando a perda de material liofilizado, e
Teste in vitro para a determinação quantitativa da concentração de HbA1c no coloque na pipeta exatamente 1,0 mL de água destilada/deionizada. Feche
sangue total humano em sistemas fotométricos. cuidadosamente o frasco e dissolva completamente o conteúdo com agitação
Resumo 1-3
suave ocasional dentro de 30 minutos. Evite a formação de espuma. O calibrador
A hemoglobina (Hb) consiste em quatro cadeias de proteí
na com quatro partes dissolvido pode ser usado sem qualquer outro pré-tratamento.
de hemo e éa proteí
na pigmentada na cor vermelha, localizada nos eritrócitos. Preparação do controle de qualidade
Sua função principal éo transporte de oxigênio e dióxido de carbono no sangue.
Abra cuidadosamente o frasco, evitando a perda de material liofilizado, e
Cada molécula da Hb écapaz de ligar-se a quatro moléculas de oxigênio. A Hb
coloque na pipeta exatamente 1,0 mL de água destilada/deionizada. Feche
consiste em uma variedade de subfrações e derivados. Entre esse grupo
cuidadosamente o frasco e dissolva completamente o conteúdo com agitação
heterogêneo de hemoglobinas HbA1c estáuma das hemoglobinas glicadas, uma
suave ocasional dentro de 30 minutos. Evite a formação de espuma. O controle
subfração formada pela conexão de vários açúcares àmolécula da Hb. A HbA1c
éformada em duas etapas pela reação não enzimática da glicose com o grupo de dissolvido pode ser usado sem qualquer outro pré-tratamento.
amino N-terminal da cadeia β da Hb de um adulto normal (HbA). A primeira Armazenamento e estabilidade
etapa é reversí
vel e produz a HbA1c instável. Isso reorganiza lentamente a Atéa data de vencimento indicada no rótulo se armazenado ainda lacrado em
segunda etapa de reação para produzir a HbA1c estável. Nos eritrócitos, a temperaturas entre 2℃－e 8℃ e protegido da luz .
quantidade relativa de HbA, convertida em HbA1c estável, aumenta a Uma vez aberto, o reagente mantém a estabilidade por 28 dias se refrigerado no
concentração média de glicose no sangue. A conversão em HbA1c estável é
analisador ou em refrigerador.
limitada pela vida útil do eritrócito de aproximadamente 100 a 120 dias. Como
Evite a contaminação dos reagentes.
resultado, a HbA1c reflete o ní
vel médio de glicose no sangue durante os 2 a 3
Não congele os reagentes.
meses precedentes. Portanto, a HbA1c éadequada para monitorar o controle de
glicose no sangue a longo prazo em indiví
duos com diabetes mellitus. Ní
veis de Depois de dissolvidos, o calibrador e o controle ficam estáveis por 15 dias entre

glicose mais recentes possuem maior influência no ní

vel da HbA1c. A relação 2 e 8℃; não congele.
aproximada entre a HbA1c e o valor médio de glicose no sangue durante os 2 a Absorção do nulo do reagente
3 meses precedentes foi analisada por vários estudos. A absorbância do nulo do reagente de Hb a 500 nm deve ser < 0,8 A.
Método A absorbância do nulo do reagente de HbA1C a 660 nm deve ser < 0,5 A.
Método de ensaio enzimático Materiais necessários, mas não fornecidos:
Princí
pio de reação 1. Solução de 9 g/L de NaCl.
Na primeira reação, a concentração de hemoglobina émedida na absorbância do 2. Equipamento comum de laboratório.
comprimento de onda fixo e, simultaneamente, dipeptí
deos da Coleta e preparação da amostra
frutosiltransferase são gerados dos grupos de aminos N-terminais da cadeia 1. Somente as amostras relacionadas abaixo foram testadas e consideradas
beta da HbA1c pela reação da protease. Na segunda reação, a reação da oxidase aceitáveis.
dos peptí
deos da frutosiltransferase (FPOX) com os dipeptí
deos da 2. Sangue com EDTA- 、 NaF-EDTA ou heparinizado é adequado como
frutosiltransferase gerou o hidroperóxido que permite que o sal de sódio de amostra.
fenotiazina 10-(carboximetilaminocarbonil)-3,7-bis(dimetilamino) desenvolva 3. Use tubos ou recipientes de coleta adequados e siga as instruções do
cor na presença da peroxidase. A alteração na absorbância é medida para a fabricante; evite o impacto causado pelos materiais dos tubos ou
determinação da HbA1c. Os resultados combinados do ensaio para a recipientes de coleta.
hemoglobina e a HbA1c são usados pelo sistema para calcular e expressar a Procedimento de pré-tratamento de sangue total
HbA1c(%). 1. Antes do teste, as amostras de sangue total devem ser centrifugadas a
Reagentes 2.000 rpm por 5 minutos.
Componentes e concentrações 2. Obtenha 25 uL de corpúsculo sanguí
neo de uma deposição de corpúsculos
R1： Solução tampão TRIS 2,7 mmol/L sanguí
neos em um copo de amostra ou um tubo de microcentrí
fuga
Peroxidase 1500 U/L Eppen-dorf.
R2： Oxidase dos peptí
deos da 1500 U/L 3. Adicione 500 μL da Solução de Pré-tratamento no copo de amostra ou no
frutosiltransferase tubo de microcentrí
fuga Eppen-dorf.
Solução de Pré-tratamento Hemolisina 5 g/L 4. Feche o tubo de teste e execute a lise do sangue, agitando vigorosamente.
Calibrador Indicado na planilha de valores Em seguida, misture a solução agitando suavemente ou usando um mixer

2013-07 V7.0 Portuguese HbA1c Página 1 de 2 P/N：046-001259-00（7.0）

HbA1c
com vibração. Limitações-interferência
5. O hemolisado pode ser usado como amostra de trabalho depois de 5 As substâncias a seguir foram testadas para avaliar sua interferência nessa
minutos. metodologia. Critérios: recuperação em ± 10% do valor inicial.
6. Estabilidade de sangue total: 3 dias a 15 a 25℃ 7 dias a 2 a 8℃ Substância Ní
vel testado Efeito observado
Estabilidade do hemolisado: 8 horas a 15 a 25℃ 24 horas a 2 a 8℃ Ácido ascórbico 30 mg/dL NIS*
Procedimento do ensaio Bilirrubina 50 mg/dL NIS
1. Hb Lipemia 2000 mg/dL NIS
Nulo Amostra Glicose 1000 mg/dL NIS
Reagente 1 180 μL 180 μL * NSI: Sem interferência significativa (dentro de ±10%)
Água dest. 12 μL － Intervalo de linearidade
Amostra － 12 μL O Sistema da Mindray fornece os seguintes intervalos analí
ticos:
Misture, incube por 5 minutos a 37℃ e leia a absorbância do nulo A Tipo de amostra Unidades do S.I.

ΔA = [ΔA amostra]- [ΔA nulo] Sangue total 3 - 16%

2. HbA1c Se o valor da amostra exceder 16%, a amostra deveráser diluí

da com a Solução
Nulo Amostra de Pré-tratamento (por exemplo, 1 + 1) e analisada novamente.
Reagente 1 180 μL 180 μL Sensibilidade analí
tica/Limite de detecção
Água dest. 12 μL － A menor concentração de Hb que pode ser distinguida de zero é 15 μ mol/L com
Amostra － 12 μL 99,7% de segurança.

Misture, incube por 5 minutos a 37℃, leia a absorbância do nulo e, em seguida, A menor concentração de HbA1c que pode ser distinguida de zero é 3 μ mol/L
adicione: com 99,7% de segurança.
Reagente 2 60 μL 60 μL Precisão
Misture bem a 37℃ e faça novamente a leitura da absorbância após 5 minutos O desempenho da precisão usando a Diretriz EP5-A2 aprovada pelo CLSI em
de espera. relação ao controle do soro do ensaio émostrado na tabela a seguir5. U：%
ΔA = [ΔA amostra]- [ΔA nulo] Tipo de Ní
vel 1 Ní
vel 2
imprecisão Média DP CV (%) Média DP CV (%)
Calibração
Na execução 0,141 3,194 0,133 1,434
1. Érecomendável usar o calibrador dos kits para a calibração de dois pontos
Entre execução 0,085 1,923 0,092 0,982
2. Rastreabilidade do calibrador: este método foi padronizado de acordo com 4,43 9,32
o padrão DCCT método（JCCRM411-2、JCCRM 423-7、JCCRM 622-1）. Entre dias 0,031 0,705 0,023 0,245

3. Frequência de calibração: No dispositivo 0,168 3,794 0,164 1,755

Após a mudança do lote do reagente. Comparação de métodos

Conforme exigido de acordo com os procedimentos de controle de Uma comparação entre o Sistema da Mindray (Analisadores Mindray série
qualidade. BS/Reagente HbA1c da Mindray) (y) e o sistema Hitachi/SEKISUI (HbA1c da
Controle de qualidade Hitachi/SEKISUI) (x) usando 40 amostras forneceu a seguinte correlação (%): y
Pelo menos dois ní
veis de material de controle devem ser analisados com cada = 0,9975x - 0,0455, r = 0,9962.
lote de amostras. Além disso, esse controle deve ser realizado a cada nova Detalhes sobre os experimentos comparativos podem ser disponibilizados
calibração, a cada novo cartucho de reagente e após determinados mediante solicitação.
procedimentos de manutenção ou solução de problemas, conforme indicado no Referências
manual especí
fico do sistema. 1. Junge W, Wilke B, Halabi A et al. Determination of reference intervals in
Recomenda-se utilizar o controle dos kits para verificar o desempenho do adults for hemoglobin A1c (HbA1c). Poster presentation 18th International
procedimento de medição; outros materiais adequados de controle também Diabetes Federation Congress, Paris, 2003.
podem ser empregados. 2. CLSI. Evaluation of Precision Performance of Quantitative Measurement
Cada laboratório deveráestabelecer seus próprios esquemas e procedimentos Methods; Approved Guideline-Second Edition. CLSI document EP5-A2
de controle de qualidade para ações corretivas caso os controles não sejam [ISBN 1-56238-542-9. CLSI, 940 West Valley Road, Suite 1400, Wayne, PA
recuperados dentro das tolerâncias aceitáveis. 19087 EUA, 2008.
Cálculo Sí
mbolos gráficos
O analisador calcula automaticamente a concentração de HbA1c de cada
amostra após a calibração .
Protocolo 1 de acordo com IFCC: HbA1c(%)= HbA1c(μ mol/L) / Hb(μ
mol/L)×100
Protocolo 2 de acordo com NGSP/DCCT: HbA1c(%)= 91,5×HbA1c(μ mol/L) /
Hb(μ mol/L)+ 2,15
Protocolo 3 de acordo com JCCLS: HbA1c(%)= 96,3×HbA1c(μ mol/L) / Hb(μ
mol/L)+ 1,62
Intervalos de referência 4
Cada laboratório deve determinar seus próprios intervalos de referência com
base na população de pacientes. Os intervalos de referência a seguir, medidos a © 2013 Shenzhen Mindray Bio-Medical Electronics Co., Ltd. Todos os direitos
reservados.
37℃, foram retirados da literatura:
Fabricante: Shenzhen Mindray Bio-Medical Electronics Co., Ltd.
Tipo de amostra Unidades do S.I.
Endereço: Mindray Building, Keji 12th Road South, Hi-tech Industrial Park,
De acordo com IFCC 2,9 - 4,2%
Nanshan, Shenzhen, 518057 P.R.China
Sangue total De acordo com NGSP/DCCT 4,8 - 5,9% Endereço de e-mail: service@mindray.com
De acordo com JCCLS 4,3 - 5,8% Site: www.mindray.com
Caracterí
sticas de desempenho Tel:+86-755-81888998 Fax:+86-755-26582680
Representante da CE: Shanghai International Holding Corp. GmbH
Dados de desempenho representativos obtidos no sistema da Mindray
(Europa)
(Analisadores Mindray série BS/Reagente HbA1c da Mindray) são fornecidos a
Endereço: Eiffestraβe 80, Hamburg 20537, Alemanha
seguir. Os resultados podem variar de acordo com o instrumento, o laboratório ou
Tel: 0049-40-2513175 Fax: 0049-40-255726
o procedimento manual empregado.

2013-07 V7.0 Portuguese HbA1c Página 2 de 2 P/N：046-001259-00（7.0）

HbA1c
Nombre genérico :Kit de hemoglobina A1c (Método de ensayo Control de calidad Indicado en la hoja de valores
enzimático)
Advertencias y precauciones
Nombre abreviado : HbA1c
1. Exclusivo para uso diagnóstico in vitro.
Información para pedidos 2. Tome las precauciones necesarias para la utilización de reactivos de
N.ºcat. Tamaño de envase laboratorio.
HBA0202 R1 2×30 ml + R2 1×12 ml Solución de pretratamiento 1×150 ml 3. Contiene conservantes. No ingerir. Evite el contacto con la piel y las
membranas mucosas.
HBA0203 R1 2×40 ml + R2 1×15 ml Solución de pretratamiento 1 × 200 ml
4. El desecho de todos los materiales se debe realizar conforme a las
HBA0204 R1 4×40 ml + R2 2×15 ml Solución de pretratamiento 2×150 ml
directrices locales.
R1 2×30ml+R2 1×12ml+ Calibrador 2×1 ml
HBA0302 5. Los usuarios profesionales que lo soliciten disponen de hojas de datos de
Solución de pretratamiento 1×150 ml seguridad de los materiales.
R1 2×40 ml + R2 1×15 ml + Calibrador 2×1 ml 6. A efectos diagnósticos, los valores de HbA1c se deben usar junto con la
HBA0303
Solución de pretratamiento 1 × 200 ml información de otros procedimientos diagnósticos y evaluaciones clí
nicas.
R1 4× 40ml + R2 2×15 ml + Calibrador 2×1 ml 7. Esta prueba estádiseñada únicamente para la medición precisa y exacta
HBA0304 de %HbA1c. No se debe informar de los resultados individuales de la
Solución de pretratamiento 2 × 150 ml
concentración de HbA1c y Hb total.
R1 2×30 ml+R2 1×12 ml+ Calibrador 2×1 ml + Control de calidad
HBA0102 8. La prueba no está diseñada para diagnosticar diabetes mellitus ni para
2×1 ml Solución de pretratamiento 1×150 ml
evaluar el control diario de glucosa. No se debe usar para sustituir los
R1 2 × 40 ml + R2 1 × 15 ml + Calibrador 2 × 1 ml + Control de
HBA0103 análisis domésticos de glucosuria o glucemia.
calidad 2 × 1 ml Solución de pretratamiento 1 × 200 ml 9. Todo material humano debe ser considerado como potencialmente
R1 4 × 40 ml + R2 2 × 15 ml + Calibrador 2 × 1 ml + Control de infeccioso.
HBA0104
calidad 2 × 1 ml Solución de pretratamiento 2 × 150 ml 10. El reactivo se debe usar junto con el calibrador con el mismo número de
lote.
Finalidad de uso
Pruebas in vitro para la determinación cuantitativa de la concentración de HbA1c Preparación del reactivo
en sangre humana completa en sistemas fotométricos . R1 y R2 están listos para su utilización.

Resumen 1-3 Preparación del calibrador

La hemoglobina (Hb) estácompuesta por cuatro cadenas proteicas con cuatro Abra el frasco con cuidado, evitando perder liofilizado y pipetee exactamente 1,0
grupos hemo. Es la proteí
na con pigmento de color rojo ubicada en los eritrocitos. ml de agua destilada/desionizada. Con cuidado, cierre el frasco y disuelva el
Su función principal es transportar oxí
geno y dióxido de carbono en la sangre. contenido completamente agitando suavemente de vez en cuando durante 30
Cada molécula de Hb se puede unir con cuatro moléculas de oxí
geno. La Hb está minutos. Evite que se forme espuma. Se puede usar el calibrador disuelto sin
compuesta por una variedad de subfracciones y derivados. Entre este grupo otro pretratamiento.
heterogéneo de homoglobinas, la HbA1C es una de las glucohemogoblinas, una Preparación del control de calidad
subfracción formada por la fijación de distintos glúcidos a la molécula de Hb. La Abra el frasco con cuidado, evitando perder liofilizado y pipetee exactamente 1,0
HbA1c se forma en dos pasos por la reacción no enzimática de la glucosa con el ml de agua destilada/desionizada. Con cuidado, cierre el frasco y disuelva el
grupo amino terminal del extremo N de la cadena beta de la Hb de una persona contenido completamente agitando suavemente de vez en cuando durante 30
adulta normal (HbA). El primer paso es reversible y produce la hemoglobina minutos. Evite que se forme espuma. Se puede usar el control disuelto sin otro
HbA1c lábil. Ésta se reorganiza lentamente en el segundo paso de la reacción pretratamiento.
para producir HbA1c estable. En los eritrocitos, la cantidad relativa de HbA
Almacenamiento y estabilidad
convertida a HbA1c estable aumenta con la concentración media de glucosa en
Hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta, si se almacena sin abrir
sangre. La conversión a HbA1c estable queda limitada por la vida media del
entre 2 y 8 ℃, protegido de la luz.
eritrocito de aproximadamente 100 a 120 dí
as. Como resultado, la HbA1c refleja
Una vez abiertos, los reactivos se mantienen estables durante 28 dí
as si
el nivel medio de glucosa en sangre durante los 2 a 3 meses anteriores. Por tanto,
permanecen refrigerados en el analizador o un frigorí
fico.
la medición de la HbA1c es adecuada para controlar la glucemia a largo plazo en
Evite la contaminación de los reactivos.
personas con diabetes mellitus. Los niveles más recientes de glucosa tienen un
No congele los reactivos.
impacto mayor en el nivel de HbA1c. Varios estudios han analizado la relación
Una vez disueltos, el calibrador y el control se mantendrán estables durante 15
aproximada entre la HbA1c y el valor de glucemia medio durante los 2 a 3 meses
dí
as a 2-8 ℃. No los congele.
previos.
Absorbancia del blanco de reactivo
Método
La absorbancia del blanco de reactivo de Hb a 500 nm debe ser < 0,8 A.
Método de ensayo enzimático
La absorbancia del blanco de reactivo de HbA1c a 660 nm debe ser < 0,5 A.
Principio de la reacción
Materiales necesarios pero no incluidos
En la primera reacción, la concentración de hemoglobina se mide según la
1. Solución de 9 g/l de NaCl.
absorbancia a una longitud de onda fija, de forma simultánea, los dipéptidos
2. Equipos de laboratorio general.
fructosil se generan a partir de los grupos amino terminales del extremo N de la
Recogida y preparación de muestras
cadena beta de la HbA1c mediante la reacción de proteinasa. En la segunda
1. Únicamente se probaron las muestras enumeradas a continuación, y el
reacción, se produce la reacción de fructosil-péptido-oxidasa (FPOX) con los
resultado fue aceptable.
dipéptidos fructosil. Se genera hidroperóxido que permite a la sal de sodio
2. Para las muestras se puede usar EDTA-、NaF-EDTA o sangre heparinizada.
10-(carboximetil-aminocarbonilo)-3,7-bis(dimetilamino) fenotiazina desarrollar
3. Utilice los tubos o contenedores de recogida apropiados y siga las
un color en presencia de peroxidasa. Para determinar la HbA1c se mide el
instrucciones del fabricante, evite el efecto de los materiales de los tubos
cambio en la absorbancia. El sistema usa los resultados de ensayos combinados
u otros contenedores de recogida.
para la hemoglobina y la HbA1c con el fin de calcular y expresar la HbA1c(%).
Procedimiento de pretratamiento de sangre completa
Reactivos
1. Antes del análisis, las muestras de sangre completa se deben centrifugar
Componentes y concentraciones
a 2000 rpm durante 5 min.
R1： Tampón TRIS 2,7 mmol/l
2. Extraiga 25 μl de glóbulos sanguíneos a partir de la sedimentación en un
Peroxidasa 1500 U/l vaso de muestras o en un tubo para microcentrí
fuga Eppendorf.
R2：
Fructosil-péptido-oxidasa 1500 U/l 3. Añada 500 μl de solución de pretratamiento en un vaso de muestras o en
Solución de un tubo para microcentrí
fuga Eppendorf.
Hemolisina 5 g/l
pretratamiento 4. Cierre el tubo de ensayo y efectúe la lisis agitando con fuerza. A
continuación, mezcle la solución agitando suavemente o con un
Calibrador Indicado en la hoja de valores
mezclador por vibración.

2013-07 V7.0 Español HbA1c Página 1 de 2 N/P：046-001259-00（7.0）

HbA1c
5. El hemolizado se puede usar como muestra de trabajo transcurridos 5 Sustancia Nivel de prueba Efecto observado
minutos. Ácido ascórbico 30 mg/dl NSI*
6. Estabilidad de la sangre completa: 3 dí
as a 15-25 ℃ 7 dí
as a 2–8℃
Bilirrubina 50 mg/dl NSI
Estabilidad del hemolizado: 8 horas a 15-25 ℃ 24 horas a 2–8℃
Lipemia 2000 mg/dl NSI
Procedimiento del ensayo
Glucosa 1000 mg/dl NSI
1. Hb
* NSI: Sin interferencia significativa (dentro de ± 10%)
Blanco Muestra
Linearity Range (Intervalo de linealidad)
Reactivo 1 180 μl 180 μl
El sistema de Mindray proporciona los siguientes intervalos analí
ticos:
Agua destilada 12 μl －
Tipo de muestra Unidades SI
Muestra － 12 μl
Sangre completa 3-16%
Mezclar, incubar durante 5 min. a 37 ℃, y leer la absorbancia de blanco A
Si el valor de la muestra supera el 16%, la muestra se debe diluir con una
ΔA = [muestra ΔA]- [blanco ΔA] solución de pretratamiento (p. ej., 1 + 1) y repetir el ensayo.
2. HbA1c
Sensibilidad analí
tica y lí
mite de detección
Blanco Muestra
La concentración de Hb más baja que se puede medir, distinta de cero, es 15 μ
Reactivo 1 180 μl 180 μl
Agua destilada 12 μl － mmol/l con una fiabilidad del 99,7%.

Muestra － 12 μl La concentración de HbA1c más baja que se puede medir, distinta de cero, es 3
μ mmol/l con una fiabilidad del 99,7%.
Mezclar, incubar durante 5 min. a 37 ℃, y leer la absorbancia de blanco, a
continuación, añadir: Precisión
Reactivo 2 60 μl 60 μl El rendimiento de la precisión obtenido mediante la recomendación EP5-A2
Mezclar en profundidad a 37 ℃ y leer la absorbancia de nuevo después de 5
aprobada por el CLSI para el control del suero en ensayos se muestra en la
minutos.
siguiente tabla 5. U：%
ΔA = [muestra ΔA]- [blanco ΔA]
Tipo de Nivel 1 Nivel 2
Calibración
imprecisión Media DE CV (%) Media DE CV (%)
1. Se recomienda utilizar el calibrador de los kits para realizar la calibración
En secuencia 0,141 3,194 0,133 1,434
de dos puntos.
2. Trazabilidad del calibrador: este método es un estándar conforme a DCCT Entre
secuencias 4,43 0,085 1,923 9,32 0,092 0,982
método（JCCRM411-2、JCCRM 423-7、JCCRM 622-1）.
3. Frecuencia de calibración: Entre dí
as 0,031 0,705 0,023 0,245

Después de un cambio de lote de reactivos. En dispositivo 0,168 3,794 0,164 1,755

Conforme a los procedimientos de control de calidad. Comparación de métodos

Control de calidad
Se deben analizar al menos dos niveles de material de control con cada lote de
muestras. Además, estos controles se deben realizar con cada nueva calibración,
cada nuevo cartucho de reactivo y después de los procedimientos de
mantenimiento o solución de problemas especí
ficos, como se detalla en el
manual del sistema correspondiente.
Se recomienda utilizar el Control de los kits para comprobar el rendimiento del
procedimiento de medición; también se pueden utilizar otros materiales de
En una comparación entre el sistema de Mindray (analizadores de la serie BS de
Mindray y reactivo HbA1c de Mindray) (y) y el sistema Hitachi/SEKISUI (HbA1c
de Hitachi / SEKISUI) (x) con 40 muestras se obtuvo la siguiente correlación (%):
y = 0,9975x - 0,0455, r = 0,9962
Los detalles de los experimentos de comparación se encuentran a disposición de
quien asílo solicite.
Referencias

control apropiados. 1. Junge W, Wilke B, Halabi A et al. Determination of reference intervals in

Cada laboratorio debe establecer su propio esquema de control de calidad adults for hemoglobin A1c (HbA1c). Cartel de presentación del 18°
interno, asícomo los procedimientos de acciones correctivas, si los controles no Congreso Mundial de la Federación Internacional de Diabetes, Parí
s, 2003.
se mantienen dentro de las tolerancias aceptables. 2. CLSI. Evaluation of Precision Performance of Quantitative Measurement
Cálculo Methods; Approved Guideline-Second Edition. Documento del CLSI EP5-A2
El analizador calcula automáticamente la concentración de HbA1c de cada [ISBN 1-56238-542-9. CLSI, 940 West Valley Road, Suite 1400, Wayne, PA
muestra después de la calibración. 19087 EE. UU., 2008.
Protocolo 1 según IFCC: HbA1c(%) = HbA1c(μ mol/l) / Hb(μ mol/l) × 100 Sí
mbolos gráficos
Protocolo 2 según NGSP/DCCT: HbA1c(%) = 91,5 × HbA1c(μ mol/l) / Hb(μ mol/l)
+ 2,15
Protocolo 3 según JCCLS: HbA1c(%) = 96,3 × HbA1c(μ mol/l) / Hb(μ mol/l) +
1,62

Intervalos de referencia 4
Cada laboratorio debe establecer sus propios intervalos de referencia en función
de la población de pacientes. Los intervalos de referencia medidos a 37 ℃ que se
enumeran a continuación están tomados de material de referencia:
Tipo de muestra Unidades SI
Según IFCC 2,9-4,2% © 2013 Shenzhen Mindray Bio-Medical Electronics Co., Ltd. Reservados todos
Sangre completa Según NGSP/DCCT 4,8-5,9% los derechos.
Fabricante: Shenzhen Mindray Bio-Medical Electronics Co., Ltd.
Según JCCLS 4,3-5,8%
Dirección: Mindray building, Keji 12th Road South, Hi-tech Industrial
Caracterí
sticas de rendimiento Park,Nanshan, Shenzhen, 518057 P.R.China
A continuación, se ofrecen datos de rendimiento representativos obtenidos del Dirección de correo electrónico: service@mindray.com
sistema de Mindray (analizadores de la serie BS y reactivo HbA1c de Mindray). Sitio web: www.mindray.com
Los resultados pueden variar si se utiliza un instrumento diferente, otro Tel.: +86-755-81888998 Fax: +86-755-26582680
laboratorio o procedimiento manual. Representante de la CE: Shanghai International Holding Corp. GmbH
(Europa)
Limitaciones e interferencia
Dirección: Eiffestraβe 80, Hamburg 20537, Alemania
Se ha comprobado la interferencia de las siguientes sustancias mediante esta Tel: 0049-40-2513175 Fax: 0049-40-255726
metodologí
a. Criterio: recuperación dentro del ± 10% del valor inicial.

2013-07 V7.0 Español HbA1c Página 2 de 2 N/P：046-001259-00（7.0）

HbA1c
Nome generico :Kit per Emoglobina A1c (metodo di dosaggio Fruttosil peptide ossidasi 1500 U/L
enzimatico)
Soluzione di pretrattamento Emolisina 5 g/L
Abbreviazione : HbA1c
Calibratore Indicato sulla scheda dei valori
Informazioni per gli ordini
N. cat. Confezione Controllo qualità Indicato sulla scheda dei valori
2 flaconi di R1 da 30 mL + 1 flacone di R2 da 12 mL, 1 flacone di
HBA0202 Precauzioni e avvertenze
soluzione di pretrattamento da 150 mL
1. Solo per uso diagnostico in vitro.
2 flaconi di R1 da 40 mL + 1 flacone di R2 da 15 mL, 1 flacone di
HBA0203 2. Adottare le precauzioni necessarie per l'uso di reagenti di laboratorio.
soluzione di pretrattamento da 200 mL
4 flaconi di R1 da 40 mL + 2 flaconi di R2 da 15 mL, 2 flaconi di 3. Contiene conservanti. Non ingerire. Evitare il contatto con pelle e mucose.
HBA0204 4. Per lo smaltimento dei materiali di scarto è necessario attenersi alle
soluzione di pretrattamento da 150 mL
2 flaconi di R1 da 30 mL + 1 flacone di R2 da 12 mL + 2 flaconi normative locali.
HBA0302 di calibratore da 1 mL 5. La scheda sulla sicurezza dei materiali è disponibile su richiesta per gli
Soluzione di pretrattamento: 1×150 mL utenti professionisti.
2 flaconi di R1 da 40 mL + 1 flacone di R2 da 15 mL + 2 flaconi 6. A scopo diagnostico le percentuali di HbA1c devono essere utilizzate
HBA0303 di calibratore da 1 mL insieme a informazioni ottenute tramite altre procedure diagnostiche e
Soluzione di pretrattamento: 1 flacone da 200 mL
valutazioni cliniche.
4 flaconi di R1 da 40 mL + 2 flaconi di R2 da 15 mL + 2 flaconi
7. Il test ha unicamente lo scopo di misurare in modo accurato e preciso le
HBA0304 di calibratore da 1 mL
percentuali di HbA1c. I singoli risultati per le concentrazioni totali di
Soluzione di pretrattamento: 2 flaconi da 150 mL
emoglobina e HbA1c non devono essere riportati.
2 flaconi di R1 da 30 mL + 1 flacone di R2 da 12 mL + 2 flaconi
HBA0102 di calibratore da 1 mL + 2 flaconi di controllo qualitàda 1 mL, 1 8. Il test non deve essere utilizzato per la diagnosi del diabete mellito o per
flacone di soluzione di pretrattamento da 150 mL la valutazione quotidiana dei livelli di glucosio, néin sostituzione dei test
2 flaconi di R1 da 40 mL + 1 flacone di R2 da 15 mL + 2 flaconi domestici quotidiani delle urine o del glucosio ematico.
HBA0103 di calibratore da 1 mL + 2 flaconi di controllo qualitàda 1 mL, 1 9. Tutti i materiali umani devono essere considerati potenzialmente infettivi.
flacone di soluzione di pretrattamento da 200 mL 10. Il reagente deve essere utilizzato insieme al calibratore con lo stesso
4 flaconi di R1 da 40 mL + 2 flaconi di R2 da 15 mL + 2 flaconi numero di lotto.
HBA0104 di calibratore da 1 mL + 2 flaconi di controllo qualitàda 1 mL, 2
flaconi di soluzione di pretrattamento da 150 mL Preparazione del reagente
I reagenti R1 e R2 sono pronti all'uso.
Uso previsto
Test in vitro per la determinazione quantitativa della concentrazione di HbA1c nel Preparazione del calibratore
Aprire il flacone con cautela, per evitare fuoriuscite di liofilizzato, e introdurre
sangue umano intero tramite sistemi fotometrici.
esattamente 1,0 mL di acqua distillata/deionizzata. Chiudere attentamente il
1-3
Riepilogo flacone e sciogliere completamente il contenuto, agitandolo ripetutamente in
L'emoglobina (Hb) ècostituita da quattro catene proteiche con quattro porzioni senso circolare per 30 minuti. Evitare la formazione di schiuma. Il calibratore
eme ed èla proteina con pigmentazione rossa presente negli eritrociti. La sua sciolto non richiede altre operazioni di pretrattamento.
funzione principale ètrasportare ossigeno e anidride carbonica nel sangue. Ogni
Preparazione del controllo qualità
molecola di emoglobina puòlegarsi a quattro molecole di ossigeno. L'emoglobina
Aprire il flacone con cautela, per evitare fuoriuscite di liofilizzato, e introdurre
è costituita da una vasta gamma di sottofrazioni e derivati che includono
esattamente 1,0 mL di acqua distillata/deionizzata. Chiudere attentamente il
l'emoglobina glicata HbA1c, una sottofrazione che si forma in seguito al contatto
flacone e sciogliere completamente il contenuto, agitandolo ripetutamente in
delle molecole di emoglobina con vari tipi di zuccheri. L'HbA1c si forma in due
senso circolare per 30 minuti. Evitare la formazione di schiuma. La soluzione di
passaggi durante la reazione non enzimatica del glucosio con il gruppo amminico
controllo non richiede altre operazioni di pretrattamento.
N-terminale della catena β dell'emoglobina adulta normale (HbA). Il primo
passaggio è reversibile e genera HbA1c instabile, che si assesta durante la Conservazione e stabilità
seconda fase della reazione per produrre HbA1c stabile. Negli eritrociti, la Fino alla data di scadenza indicata sull'etichetta, con flacone sigillato conservato
quantità relativa di HbA convertita in HbA1c stabile aumenta con la a una temperatura di 2-8 ℃ al riparo dalla luce.
concentrazione media del glucosio nel sangue. La conversione in HbA1c stabile è Dopo l'apertura i reagenti rimangono stabili per 28 giorni, se conservati al fresco
limitata dalla vita media degli eritrociti, pari a circa 100-120 giorni. Di nell'analizzatore o in frigorifero.
conseguenza, il livello di HbA1c rispecchia il livello medio di glucosio nel sangue Evitare la contaminazione dei reagenti.
durante i 2-3 mesi precedenti. È pertanto possibile utilizzare l'HbA1c per il Non congelare i reagenti.
monitoraggio a lungo termine del glucosio ematico nelle persone affette da Una volta sciolti, il calibratore e il composto di controllo rimangono stabili per 15
diabete mellito. I livelli di glucosio più recenti influiscono maggiormente sul giorni a 2–8 ℃. Non congelare.
livello di HbA1c. La relazione approssimata tra HbA1c e valore medio recente di
Assorbanza del bianco reagente
glucosio ematico durante i 2-3 mesi precedenti èstata analizzata nel corso di
L'assorbanza del bianco reagente per l'emoglobina a 500 nm deve essere < 0,8
vari studi.
A.
Metodo L'assorbanza del bianco reagente per l'HbA1c a 660 nm deve essere < 0,5 A.
Metodo di dosaggio enzimatico
Materiale necessario ma non fornito
Principio di reazione 1. Soluzione di NaCl da 9 g/L.
Durante la prima reazione la concentrazione di emoglobina viene determinata 2. Apparecchiature generali di laboratorio.
tramite la lettura dell'assorbanza di una lunghezza d'onda fissa.
Prelievo e preparazione dei campioni
Contemporaneamente una reazione tra i gruppi amminici N-terminali della
1. Sono stati testati e ritenuti accettabili solo i campioni elencati di seguito.
catena β dell'HbA1c e la proteasi determina la generazione di fruttosil-dipeptidi.
2. Per i campioni è possibile utilizzare sangue con EDTA, sangue con
Durante la seconda fase la reazione tra fruttosil peptide ossidasi (FPOX) e
NaF-EDTA o sangue eparinato.
fruttosil-dipeptidi genera perossido di idrogeno, consentendo al
3. Utilizzare provette appropriate o contenitori per la raccolta dei campioni e
10-(carbossimetil-amminocarbonil carbossimetil
seguire le istruzioni del produttore. Evitare gli effetti dei materiali delle
aminocarbonil)-3,7-bis(dimetilammino) sale sodico di fenotiazina di generare un
provette o dei contenitori di raccolta.
prodotto colorato in presenza di periossidasi. Il livello di HbA1c viene
determinato misurando l'assorbanza. Il sistema usa i risultati combinati del Procedura di pretrattamento del sangue intero
dosaggio per emoglobina e HbA1c per calcolare e restituire la percentuale di 1. Prima del test è necessario centrifugare i campioni di sangue intero a
HbA1c. 2000 rpm per 5 minuti.
2. Prelevare 25 uL di globuli sanguigni depositati nella coppetta o da una
Reagenti
provetta Eppendorf della microcentrifuga.
Componenti e concentrazione 3. Aggiungere 500 μL di soluzione di pretrattamento nella coppetta o in una
R1： Tampone tris 2,7 mmol/L provetta Eppendorf della microcentrifuga.
R2： Perossidasi 1500 U/L 4. Chiudere la provetta e sciogliere il sangue agitando vigorosamente.

2013-07 V7.0 Italiano HbA1c Pagina 1 di 2 P/N：046-001259-00（7.0）

HbA1c
Miscelare quindi la soluzione ruotandola delicatamente o utilizzando un Sostanza Livello testato Effetto osservato
miscelatore a vibrazione. Acido ascorbico 30 mg/dL NIS*
5. L'emolizzato puòessere utilizzato come campione di lavoro dopo 5 minuti. Bilirubina 50 mg/dL NIS
6. Stabilitàdel sangue intero: 3 giorni a 15-25 ℃ 7 giorni a 2–8 ℃ Lipemia 2000 mg/dL NIS
Stabilitàdell'emolizzato: 8 ore a 15-25 ℃ 24 ore a 2–8 ℃ Glucosio 1000 mg/dL NIS
Procedura di dosaggio * NIS: nessuna interferenza significativa (entro ±10%)

1. Emoglobina Intervallo di linearità

Bianco Campione Il sistema Mindray presenta i seguenti intervalli analitici:
Reagente 1 180 μL 180 μL Tipo di campione UnitàS.I.
Acqua distillata 12 μL － Sangue intero 3-16%
Campione － 12 μL Se il valore del campione supera il 16%, il campione deve essere diluito con la
Miscelare e lasciare in incubazione per 5 minuti a 37 ℃, quindi leggere il valore soluzione di pretrattamento (ad esempio, 1+1) e sottoposto nuovamente al test.
dell'assorbanza del bianco A
Sensibilitàanalitica e limite di rilevamento
ΔA = [ΔA campione]- [ΔA bianco]
La minima concentrazione di emoglobina misurabile che puòessere distinta dallo
2. HbA1c zero è15 μmol/L, con una confidenza del 99,7%.
Bianco Campione La minima concentrazione di HbA1c misurabile che puòessere distinta dallo zero
Reagente 1 180 μL 180 μL è 3 μmol/L, con una confidenza del 99,7%.
Acqua distillata 12 μL － Precisione
Campione － 12 μL Nella tabella seguente sono riportati i valori di precisione ottenuti effettuando il
Miscelare e lasciare in incubazione per 5 minuti a 37 ℃, leggere il valore dosaggio del siero di controllo in base alle linee guida approvate della CLSI,
dell'assorbanza del bianco, quindi aggiungere: documento EP5-A25. U：%
Reagente 2 60 μL 60 μL Livello 1 Livello 2
Tipo di
Miscelare accuratamente a 37 ℃, quindi leggere di nuovo il valore CV CV
imprecisione Media SD Media SD
dell'assorbanza dopo 5 minuti. (%) (%)
ΔA = [ΔA campione]- [ΔA bianco] Durante il ciclo 0,141 3,194 0,133 1,434
Calibrazione Tra cicli diversi 0,085 1,923 0,092 0,982
1. Èconsigliabile utilizzare il calibratore nei kit di calibrazione a due punti. Tra giorni diversi 4,43 0,031 0,705 9,32 0,023 0,245
2. Tracciabilitàdel calibratore: questo metodo èstato standardizzato in base Nello stesso
0,168 3,794 0,164 1,755
allo standard DCCT metodo（JCCRM411-2、JCCRM 423-7、JCCRM 622-1） dispositivo
3. Frequenza di calibrazione:
Confronto tra metodi diversi
Dopo il cambio di lotto del reagente.
Eseguendo un confronto tra il sistema Mindray (analizzatori Mindray serie BS con
Come richiesto dalle procedure di controllo qualità.
reagente Mindray HbA1c) (y) e il sistema Hitachi/SEKISUI (Hitachi con reagente
Controllo qualità SEKISUI HbA1c) (x) utilizzando 40 campioni è stata ottenuta la seguente
Per ogni lotto di campioni ènecessario analizzare almeno due livelli di materiale correlazione (%): y = 0,9975x - 0,0455, r = 0,9962
di controllo. Tali controlli devono essere inoltre eseguiti dopo ogni nuova I dettagli degli esperimenti di confronto sono disponibili su richiesta.
calibrazione, con ogni nuova cartuccia di reagente e dopo specifiche procedure di
Riferimenti
manutenzione o risoluzione dei problemi illustrate nel manuale del sistema
1. Junge W, Wilke B, Halabi A et al. Determination of reference intervals in
appropriato.
adults for hemoglobin A1c (HbA1c). Poster presentation 18th International
Èconsigliabile utilizzare il materiale di controllo disponibile nei kit per verificare
Diabetes Federation Congress, Paris, 2003.
le prestazioni della procedura di misurazione. È possibile utilizzare anche altro
2. CLSI. Evaluation of Precision Performance of Quantitative Measurement
materiale di controllo appropriato aggiuntivo.
Methods; Approved Guideline-Second Edition. CLSI document EP5-A2
Ogni laboratorio dovrebbe stabilire schemi e procedure interne di controllo
[ISBN 1-56238-542-9. CLSI, 940 West Valley Road, Suite 1400, Wayne, PA
qualità, in modo da adottare misure correttive se i risultati non rientrano nelle
19087 USA, 2008.
tolleranze accettabili.
Simboli grafici
Calcolo
L'analizzatore calcola la concentrazione di HbA1c di ogni campione
automaticamente dopo la calibrazione.
Protocollo 1 secondo IFCC: HbA1c(%) = HbA1c(μ mol/L) / Hb(μ mol/L) × 100
Protocollo 2 secondo NGSP/DCCT: HbA1c(%) = 91,5 × HbA1c(μ mol/L) / Hb(μ
mol/L) + 2,15
Protocollo 3 secondo JCCLS: HbA1c(%) = 96,3 × HbA1c(μ mol/L) / Hb(μ mol/L)
+ 1,62

Intervalli di riferimento4
Ogni laboratorio deve stabilire i propri intervalli di riferimento in base alla
popolazione di pazienti. Gli intervalli di riferimento misurati a 37 ℃ elencati di
© 2013 Shenzhen Mindray Bio-Medical Electronics Co., Ltd. Tutti i diritti
seguito sono tratti dalla documentazione disponibile:
riservati.
Tipo di campione UnitàS.I.
Produttore: Shenzhen Mindray Bio-Medical Electronics Co., Ltd.
Secondo IFCC 2,9-4,2%
Indirizzo: Mindray building, Keji 12th Road South, Hi-tech Industrial
Sangue intero Secondo NGSP/DCCT 4,8-5,9%
Park,Nanshan, Shenzhen, 518057 P.R.China
Secondo JCCLS 4,3-5,8%
Indirizzo e-mail: service@mindray.com
Caratteristiche di rendimento Sito Web: www.mindray.com
Di seguito sono riportate informazioni di rendimento rappresentative ottenute dal
Tel.:+86-755-81888998
sistema Mindray (analizzatori Mindray serie BS con reagente Mindray HbA1c). I
Fax: +86-755-26582680
risultati possono variare in caso di utilizzo di uno strumento diverso, di un
laboratorio specifico o di una procedura manuale. Rappresentante CE: Shanghai International Holding Corp. GmbH (Europe)
Indirizzo: Eiffestraβe 80, Hamburg 20537, Germany
Limitazioni e interferenze
Èstata verificata l'interferenza delle seguenti sostanze con questa metodologia. Tel.: 0049-40-2513175 Fax: 0049-40-255726

Criterio: recupero entro ±10% del valore iniziale.

2013-07 V7.0 Italiano HbA1c Pagina 2 di 2 P/N：046-001259-00（7.0）

HbA1c
Genel Ad :Hemoglobin A1c Kiti (Enzimatik Tayin Yöntemi) 1. Sadece in vitro diyagnostik kullanım içindir.
kısaltılmış ad : HbA1c 2. Laboratuvar reaktiflerinin kullanımı için gerekli önlemleri alın.

Sipariş Bilgileri 3. Koruyucu içerir. Yutmayın. Ciltle ve mükoz membranlarla teması önleyin.
4. Atık malzemeler yerel düzenlemelere göre bertaraf edilmelidir.
Kat.No. Ambalaj boyutu
5. Madde güvenliği veri sayfası istek üzerine profesyonel kullanıcılara temin
HBA0202 R1 2×30 mL+R2 1×12 mL Ön İşlem Çözeltisi 1×150 mL
edilir.
HBA0203 R1 2×40 mL+R2 1×15 mL Ön İşlem Çözeltisi 1×200 mL
6. Tanılama sırasında %HbA1c değerleri, diğer diyagnostik prosedürlerden
HBA0204 R1 4×40 mL+R2 2×15 mL Ön İşlem Çözeltisi 2×150 mL
ve klinik değerlendirmelerde elde edilen bilgilerle birlikte kullanılmalıdır.
R1 2×30mL+R2 1×12mL+Kalibratör 2×1 mL
HBA0302 7. Test sadece %HbA1c'nin doğru ve tekrarlanabilir ölçümü içindir. Total Hb
Ön İşlem Çözeltisi 1×150 mL
ve HbA1c konsantrasyonları ayrı ayrı rapor edilmemelidir.
R1 2×40mL+R2 1×15mL+Kalibratör 2×1 mL
HBA0303 8. Test diabetes mellitus tanısı veya günlük glukoz kontrolünü
Ön İşlem Çözeltisi 1×200 mL
değerlendirmek için değildir ve evde yapılan günlük idrar veya kan
R1 4×40 mL+R2 2×15 mL+Kalibratör 2×1 mL
HBA0304 glukozu testlerinin yerine kullanılmamalıdır.
Ön İşlem Çözeltisi 2×150 mL
9. İnsanlardan elde edilen tüm materyal potansiyel olarak enfeksiyöz kabul
R1 2×30 mL+R2 1×12 mL+Kalibratör 2×1 mL + Kalite kontrolü
HBA0102 edilmelidir.
2×1 mL Ön İşlem Çözeltisi 1×150 mL
10. Reaktif, aynı lot numarasını taşıyan kalibratörle kullanılmalıdır.
R1 2×40 mL+R2 1×15 mL+Kalibratör 2×1 mL + Kalite kontrolü
HBA0103 Reaktiflerin Hazırlanması
2×1 mL Ön İşlem Çözeltisi 1×200 mL
R1 ve R2 kullanıma hazırdır.
R1 4×40mL+R2 2×15 mL+Kalibratör 2×1 mL + Kalite kontrolü
HBA0104 Kalibratörün Hazırlanması
2×1 mL Ön İşlem Çözeltisi 2×150 mL
Şişeyi liyofilizat kaybını önleyecek şekilde dikkatle açıp pipetle tam 1,0 mL of
Kullanım amacı
distile/deiyonize su ekleyin. Şişeyi dikkatle kapatın; şişeyi 30 dakika süresince
İnsan kanındaki HbA1c konsantrasyonunun fotometrik sistemlerde kantitatif
çevirme hareketiyle arada sırada nazikçe sallayarak tüm içeriğin çözünmesini
tayini için in vitro test.
sağlayın. Köpük oluşmasını önleyin. Çözünen kalibratör başka bir ön işlemden
Özet1-3 geçmeden kullanılabilir.
Hemoglobin (Hb), dört hem grubu bulunan dört protein zincirinden oluşur ve
Kalite Kontrolü için Hazırlık
eritrositlerde bulunan kırmızı pigmentli proteindir. Hemoglobinin ana işlevi
Şişeyi liyofilizat kaybını önleyecek şekilde dikkatle açıp pipetle tam 1,0 mL of
kanda oksijen ve karbondioksit taşımaktır. Her Hb molekülü dört oksijen
distile/deiyonize su ekleyin. Şişeyi dikkatle kapatın; şişeyi 30 dakika süresince
molekülüne bağlanabilir. Hb bir dizi subfraksiyon ve türevlerden oluşur. Bu
çevirme hareketiyle arada sırada nazikçe sallayarak tüm içeriğin çözünmesini
heterojen hemoglobin grubunda HbA1c, çeşitli şekerlerin Hb molekülüne
sağlayın. Köpük oluşmasını önleyin. Çözünen kontrol başka bir ön işlemden
bağlanmasıyla oluşan glike hemoglobinler subfraksiyonuna dahildir. HbA1c,
geçmeden kullanılabilir.
glukozun normal yetişkin Hb (HbA) β zincirindeki N terminal amino grubuyla
nonenzimatik reaksiyonu sonucu iki adımda oluşturulur. İlk adım geri Saklama ve stabilite
dönüştürülebilirdir ve kararsız HbA1c oluşturur. Kararsız oluşum reaksiyonun 2-8℃ derecede açılmamış halde ve ışık almayan bir alanda saklandığı takdirde
ikinci adımında yavaşça yeniden düzenlenerek kararlı HbA1c'yi oluşturur. etikette belirtilen son kullanma tarihine kadar stabildir.
Eritrositlerde kararlı HbA1c'ye dönüştürülen HbA'nın miktarı kandaki ortalama Reaktifler açıldıktan sonra soğutucuda veya analizörde soğutulmak kaydıyla 28
glukoz konsantrasyonuna bağlı olarak artar. Kararlı HbA1c'ye dönüşüm, gün stabildir.
eritrositin yaklaşık 100 ila 120 günlük yaşam süresiyle kısıtlıdır. Bunun Reaktiflerin kontamine olması önlenmelidir.
sonucunda HbA1c son 2 ila 3 aydaki ortalama kan glukoz düzeyini yansıtır. Bu Reaktifleri dondurmayın.
nedenle HbA1c, diabetes mellitus görülen bireylerde uzun süreli kan glukozu Çözünen kalibratör ve kontrol 2–8℃'de 15 gün stabildir. Dondurmayın.
kontrolünü izlemek için uygundur. Daha yakın zaman içindeki glukoz
Reaktif körü absorbansı
düzeylerinin HbA1c düzeyi üzerindeki etkisi daha fazladır. Son 2-3 ay içindeki
500 nm'de Hb reaktif körü absorbansı <0,8 A olmalıdır;
HbA1c ve ortalama kan glukozu değeri arasındaki ilişki pek çok çalışmada analiz
660 nm'de HbA1c reaktif körü absorbansı <0,5 A olmalıdır;
edilmiştir.
Gereken fakat temin edilmeyen malzemeler
Yöntem
Enzimatik Tayin Yöntemi 1. 9 g/L NaCl çözeltisi.
2. Genel laboratuvar ekipmanı.
Reaksiyon Prensibi
Numune alma ve hazırlama
İlk reaksiyonda, hemoglobin konsantrasyonu sabit dalga boyundaki absorbansla
ölçülür ve aynı zamanda HbA1c'nin beta zincirindeki N-terminus amino 1. Sadece aşağıda belirtilen numuneler test edilmiş ve kabul edilebilir
gruplarından proteaz reaksiyonuyla fruktozil dipeptitler üretilir. İkinci bulunmuştur.
reaksiyonda (Fruktozil peptid oksidazın (FPOX) fruktoz dipeptitleriye 2. EDTA-、NaF-EDTA veya heparinize kan numune olmaya uygundur.
reaksiyonu), üretilen hidroperoksit sayesinde 3. Uygun tüp veya toplama kaplarını kullanın ve üreticinin talimatlarına uyun;
10-(karboksimetilaminokarbonil)-3,7-bis(dimetilamino) fenotiazin sodyum tuzu, tüp veya toplama kabı materyallerinin etkisini önleyin.
peroksidaz varlığında bir renk oluşturur. HbA1c tayini için absorbanstaki Tam Kanın Ön İşlemden Geçirilme Prosedürü
değişiklik ölçülür. Hemoglobin ve HbA1c'nin birleştirilmiş tayin sonuçları sistem
1. Testten önce tam kan numuneleri 2000 rpm hıza 5 dakika santrifüje tabi
tarafından HbA1c(%) hesaplaması ve ifadesi için kullanılır.
tutulmalıdır.
Reaktifler 2. Ayrılan kan korpüsküllerinden 25 uL'yi bir numune kabına veya
Bileşenler ve konsantrasyon Eppen-dorf mikrofüj tüpüne alın.
3. Numune kabına veya Eppen-dorf mikrofüj tüpüne 500 μL Ön İşlem
R1： Tris tamponu 2,7 mmol/L
Çözeltisi ekleyin.
Peroksidaz 1500 U/L
R2： 4. Test tüpünü kapatın, tüpü iyice çalkalayarak kanın lizise uğramasını
Fruktozil peptit oksidaz 1500 U/L
sağlayın. Ardından çözeltiyi nazikçe çevirerek veya titreşimli karıştırıcı
Ön İşlem Çözeltisi Hemolizin 5 g/L
kullanarak karıştırın.
Kalibratör Değer sayfasında belirtilmiştir 5. Hemolizat 5 dakikanın ardından çalışma numunesi olarak kullanılabilir.
Kalite kontrolü Değer sayfasında belirtilmiştir 6. Tam Kan Stabilitesi: 15-25℃'de 3 gün 2–8℃'de 7 gün

Uyarı ve önlemler Hemolizat Stabilitesi: 15-25℃'de 8 saat 2-8 ℃'de 24 saat

2013-07 V7.0 Türkçe HbA1c Sayfa 1 / 2 P/N：046-001259-00（7.0）

HbA1c
Tayin prosedürü Glukoz 1000 mg/dL NSI

1. Hb * NSI: Anlamlı enterferans yok (±%10 dahilinde)

Kör Numune Doğrusallık Aralığı

Reaktif 1 180 μL 180 μL Mindray Sisteminin sağladığı analitik aralıklar:
Dist. su 12 μL － Numune Tipi S.I. Birimleri

Numune － 12 μL Tam kan %3-16

Karıştırıp 37 ℃'de 5 dakika enkübe edin ve kör absorbansı A'yı okuyun Numunenin değeri %16'yı aşarsa numune Ön İşlem Çözeltisi ile seyreltilip (örn. 1

ΔA = [ΔA numune]- [ΔA kör] + 1) yeniden çalıştırılmalıdır.

2. HbA1c Analitik Duyarlılık/Saptama Limiti

Kör Numune Sıfırdan ayırt edilebilen ölçülebilir en düşük Hb konsantrasyonu 15 μmol/L'dir

(%99,7 güven).
Reaktif 1 180 μL 180 μL
Sıfırdan ayırt edilebilen ölçülebilir en düşük HbA1c konsantrasyonu 3 μmol/L'dir
Dist. su 12 μL －
(%99,7 güven).
Numune － 12 μL
Tekrarlanabilirlik
Karıştırıp 37 ℃'de 5 dakika enkübe edin ve kör absorbansını okuyun, ardından
CLSI Onaylı Kılavuzu EP5-A2 kullanılarak yapılan serum kontrolü miktar
şunu ekleyin:
tayininde elde edilen tekrarlanabilirlik performansı aşağıdadır5. U：%
Reaktif 2 60 μL 60 μL
Tutarsızlık Seviye 1 Seviye 2
37 ℃'de iyice karıştırıp 5 dakika sonra absorbansı tekrar okuyun.
tipi Ortalama SS CV (%) Ortalama SS CV (%)
ΔA = [ΔA numune]- [ΔA kör]
Çalışma içi 0,141 3,194 0,133 1,434
Kalibrasyon
Çalışmalar
1. İki noktalı kalibrasyonda kitlerle verilen kalibratörün kullanılması önerilir arası 0,085 1,923 0,092 0,982
4,43 9,32
2. Kalibratörün izlenebilirliği:Bu yöntem （DCCT）method （JCCRM411-2、
Gün içi 0,031 0,705 0,023 0,245
JCCRM 423-7、JCCRM 622-1）. standardına göre standardize edilmiştir.
Cihaz içi 0,168 3,794 0,164 1,755
3. Kalibrasyon sıklığı:
Reaktif lotu değiştirildikten sonra. Yöntem Karşılaştırma
Kalite kontrolü prosedürlerini takiben gereken sıklıkta.
40 numune kullanılarak yapılan Mindray Sistemi (Mindray BS serisi analizörler
Kalite kontrolü /Mindray HbA1c Reaktifi) (y) - Hitachi/SEKISUI Sistemi (Hitachi / SEKISUI HbA1c)
Her numune serisinde en az iki seviye kontrol maddesi analiz edilmelidir. Buna ek (x) karşılaştırmasında şu korelasyon elde edilmiştir (%): y = 0,9975x - 0,0455,
olarak bu kontroller her yeni kalibrasyonda ve reaktif kartuşunda ve uygun r=0,9962 Karşılaştırma deneylerinin ayrıntıları istek üzerine temin edilir.
sistem kılavuzunda açıklanan şekilde belirli bakım veya onarım prosedürlerinden Referanslar
sonra çalıştırılmalıdır.
1. Junge W, Wilke B, Halabi A et al. Determination of reference intervals in
Ölçüm prosedürünün performansını doğrulamak için kitlerle birlikte verilen
adults for hemoglobin A1c (HbA1c). Poster presentation 18th International
Kontrolün kullanılmasını öneririz; ek olarak uygun diğer kontrol maddeleri de
Diabetes Federation Congress, Paris, 2003.
kullanılabilir.
2. CLSI. Evaluation of Precision Performance of Quantitative Measurement
Her laboratuvar kendi dahili kalite kontrol programını ve kontrollerin kabul
Methods; Approved Guideline-Second Edition. CLSI document EP5-A2
edilebilir tolerans dahilinde olmaması durumunda uygulanacak düzeltici önlem
[ISBN 1-56238-542-9. CLSI, 940 West Valley Road, Suite 1400, Wayne, PA
prosedürlerini belirlemelidir.
19087 USA, 2008.
Hesaplama
Grafik semboller
Analizör kalibrasyondan sonra her numunenin HbA1c konsantrasyonunu
otomatik olarak hesaplar.
IFCC'ye göre protokol 1: HbA1c(%)= HbA1c(μ mol/L) / Hb(μ mol/L)×100
NGSP/DCCT'ye göre protokol 2: HbA1c(%)= 91,5×HbA1c(μ mol/L) / Hb(μ
mol/L)+ 2,15
JCCLS'y göre protokol 3: HbA1c(%)= 96,3×HbA1c(μ mol/L) / Hb(μ mol/L)+
1,62

Referans Aralıklar 4

Her laboratuvar hasta popülasyonuna bağlı olarak kendi referans aralıklarını

belirlemelidir. Aşağıdaki listede yer alan 37℃'de ölçülen referans aralıklar
literatürden alınmıştır: © 2013 Shenzhen Mindray Bio-Medical Electronics Co., Ltd. Tüm hakları saklıdır

Numune Tipi S.I. Birimleri Üretici: Shenzhen Mindray Bio-Medical Electronics Co., Ltd.

IFCC'ye göre %2,9-4,2 Adres:Mindray building, Keji 12th Road South, Hi-tech Industrial

Tam kan NGSP/DCCT'ye göre %4,8-5,9 Park,Nanshan, Shenzhen, 518057 Çin

JCCLS'ye göre %4,3-5,8 E-posta Adresi: service@mindray.com

Web sitesi: www.mindray.com
Performans Özellikleri
Tel:+86-755-81888998
Mindray sisteminden (Mindray BS serisi analizörler / Mindray HbA1c Reaktifi) elde
Faks:+86-755-26582680
edilen temsili performans verileri aşağıda verilmiştir. Farklı bir cihaz, laboratuvara
AT Temsilcisi: Shanghai International Holding Corp. GmbH (Avrupa)
özgüveya manuel bir prosedür kullanıldığında sonuçlar değişkenlik gösterebilir.
Adres: Eiffestraβe 80, Hamburg 20537, Almanya
Kısıtlamalar-enterferans
Tel: 0049-40-2513175 Faks:0049-40-255726
Aşağıdaki maddeler bu metodolojide enterferansa karşı test edilmiştir. Kriter: İlk
değerin ±%10'u dahilinde geri kazanım.
Madde Test Edilen Seviye Gözlenen Etki
Askorbik asit 30 mg/dL NSI*
Bilirubin 50 mg/dL NSI
Lipemi 2000 mg/dL NSI

2013-07 V7.0 Türkçe HbA1c Sayfa 2 / 2 P/N：046-001259-00（7.0）