PRACTICA 5

HEMOSTASIA

OBJETIVO PRINCIPAL
• Realizar e interpretar las pruebas de tiempo de sangrado, tiempo de coagulación,
tiempo de protrombina, tiempo de tromboplastina e INR.

MARCO TEÓRICO
El proceso de la hemostasia evita o detiene el flujo de sangre tras la lesión de un vaso
sanguíneo. La hemorragia se produce cuando la integridad vascular se pierde y se
interrumpe a causa de tres tipos de fenómenos hemostáticos:
• Reacción vascular o vasoespasmo.
• Tapón plaquetario o respuesta plaquetaria.
• Cascada de la coagulación con formación de una red o coágulo de fibrina.

Finalmente se origina el sellado del vaso sanguíneo y la prevención de la pérdida posterior

de sangre.

La cascada de la coagulación consta de tres etapas:

• Fase tromboplástica, que tarda 3 a 10 minutos en producirse;
• Vía común, de 12 a 15 segundos.
• Conversión del fibrinógeno en fibrina, sólo de 1 a 2 segundos.

Por lo tanto, para una hemostasia normal se requieren:

• Respuesta vascular adecuada.
• Plaquetas normales cualitativa y cuantitativamente.
• Factores de la cascada de la coagulación.

El tiempo total para que estos fenómenos se produzcan es de 3 a 10 minutos, ya que no

ocurren en secuencia, sino de manera simultánea.
EXPERIMENTOS
MATERIALES
a. Lancetas por mesa.
b. Frasco con torundas de algodón.
c. Frasco con alcohol.
d. Unidades de papel filtro.
e. Jeringas hipodérmica de 10 ml.
f. Gradillas para tubos de ensayo.
g. Guantes quirúrgicos.
h. Incubadora.
i. Cronómetro por mesa.
j. Solución de Cloruro de calcio.
k. Tubos vacutainer.

PROCEDIMIENTO
TIEMPO DE SANGRÍA (Método Duke)
1. Limpiar el lóbulo de la oreja.
2. Realizar una punción de 3 mm de profundidad con una lanceta en la zona desinfectada
inmediatamente iniciar con la toma del tiempo con el cronómetro.
3. Con el papel filtro secar la sangre cada 30 segundos, sin tocar la herida (Realizar
pequeños toques).
4. Al momento que cese el sangrado detener el cronómetro y anotar el tiempo transcurrido.
Los valores normales para esta técnica son entre 1 - 3 minutos.

TIEMPO DE COAGULACIÓN (Método Lee y White)

1. Obtener 5 ml de sangre venosa.
2. En cuanto se inicia la salida de la sangre iniciar toma de tiempo con el cronómetro.
3. Coloque 1 ml de sangre respectivamente en cada tubo vacutainer tapa roja (sin
anticoagulante), tapa celeste (citrato de sodio) y tapa morada (EDTA).
4. Coloque los tubos de ensayo en la incubadora a baño maría de 37º.
5. Cada 30 segundos observe hasta que vea el cambio de estado físico de líquido a sólido
(no se mueve al inclinar el tubo de ensayo) y anote el tiempo transcurrido en que se
produzco totalmente el cambio (voltee totalmente el tubo).
6. Compare las muestras y registre el tiempo.
Los valores normales para esta técnica son entre 3 - 10 minutos.
 TIEMPO DE PROTROMBINA
1. Obtenga 4 ml de sangre venosa.
2. Inmediatamente colóquelo en un tubo vacutainer tapa celeste (citrato de sodio).
3. Centrifugue la muestra por 5 minutos a 2500 Hz.
4. Al terminar la muestra debe tener dos fases, utilice la pipeta y retire 1 ml de plasma,
deposítelo en un tubo de ensayo y llévelo a la incubadora con baño maría a 37ºC por 3
minutos.
5. Coloque en la incubadora un tubo de ensayo con 1 ml de una solución de cloruro de
calcio (0,025M) (PREPARACIÓN: 45 mg en 16 ml de agua destilada) por tres minutos.
6. Mezcle ambos tubos y prenda el cronómetro.
7. Observe la muestra cada 30 segundos hasta que aparezca una película de fibrina,
7. Registre el tiempo.
8. Note que en este caso no se trata de esperar la formación de un coágulo completo, sino
el momento en que empieza a formarse.
Los valores normales son de 12 - 15 segundos.

RESULTADOS

TIEMPO FÉNOMENO HEMOSTÁTICO

PRUEBA NOMBRE RESULTADO
NORMAL EVALUADO

Tiempo de sangrado Abraham 2 minutos 1 - 3 minutos Coagulación sanguínea

Tiempo de sangrado Alexandra 1.30 minutos 1 - 3 minutos Coagulación sanguínea
Tiempo de sangrado Emerson 1 minutos 1 - 3 minutos Coagulación sanguínea
Tiempo de coagulación Leonardo 12 minutos 3 - 10 minutos Recuento plaquetario
Tiempo de coagulación Santiago 11 minutos 3 - 10 minutos Recuento plaquetario
Tiempo de coagulación Aron 9 minutos 3 - 10 minutos Recuento plaquetario
Tiempo de coagulación Rebeca 7.30 minutos 3 - 10 minutos Recuento plaquetario
Tiempo de protrombina Alexia 10 segundos 12 - 15 segundos Formación de coágulo

CONCLUSIONES

• El tiempo de tromboplastina parcial activado evalúa la vía intrínseca de la coagulación y la

vía común; esta última, junto con el tiempo de protrombina.
• La sangre fuera del cuerpo con anticoagulante se conoce como sangre total. La sangre total
aún se puede separar en líquido y células. Este líquido se llama plasma. Es la porción líquida
de la sangre cuando el tubo contiene anticoagulante. El uso de un anticoagulante conserva
los fibrinógenos en el plasma, por lo que puede usarse en una prueba de coagulación.
• La coagulación es el resultado de una interacción coordinada de las proteínas sanguíneas,
las células circulantes, células de la vasculatura y las proteínas de la matriz extracelular en la
pared de los vasos. Este complejo mecanismo hace difícil su evaluación en el laboratorio,
que sólo se limita a medir las proteínas de la coagulación circulantes y células circulantes,
mientras que los elementos vasculares no son medibles.
PREGUNTAS

1. ¿Cuál es la finalidad de utilizar citrato de sodio y cloruro de calcio en la

prueba dedeterminación del tiempo de protrombina?
El citrato de sodio se usa también como un anticoagulante en los tubos usados para tomar
sangre en ciertos exámenes de laboratorio que miden el tiempo de coagulación sanguínea,
entre ellas el tiempo de tromboplastina parcial activado y el tiempo de protrombina. La
concentración de citrato de sodio utilizada como anticoagulante es una variable
preanalítica importante porque puede variar el tiempo de coagulación del plasma
sanguíneo ya que la cantidad de citrato presente afecta la concentración de calcio utilizada
en estas pruebas.
Cloruro de calcio para reintroducir los iones calcio necesarios para la coagulación que
fueron acomplejados por el citrato de sodio utilizado como anticoagulante durante la
recolección de la muestra.

2. ¿Cuál es la finalidad de utilizar EDTA en la prueba de determinación del

tiempo decoagulación?

El tubo EDTA es el tubo estándar utilizado en hematología clínica, pruebas cruzadas,

grupos sanguíneos y diversos instrumentos de análisis de células sanguíneas.
El aditivo EDTA actúa como un potente anticoagulante al unirse al calcio en la sangre. El
tubo ofrece una protección integral para las células sanguíneas.

3. Describa las diferencias que existen entre el tiempo de sangrado y el

tiempo de coagulación.
Tiempo de sangrado, de acuerdo con la técnica de Duke, consiste en la medición de la
duración de la hemorragia producida por la punción hecha en el lóbulo de la oreja con una
lanceta; normalmente dura de tres a siete minutos. En una forma muy general permite
evaluar la retracción del capilar, la cantidad y calidad de las plaquetas; con cifras menores
de plaquetas el tiempo de sangrado se prolonga, pero su mayor utilidad es para evaluar la
función de las plaquetas cuando la cifra es normal como sucede en trombastenia de
Glanzman, enfermedad de von Willebrand, uremia, uso de aspirina.
Tiempo de coagulación de Lee-White, que puede realizarse al pie de la cama del
paciente, y que rápidamente permite conocer el funcionamiento de los factores de la
coagulación que normalmente ocurre entre 5 y 10 minutos. Las plaquetas también se
pueden activar desencadenando la cascada de la coagulación.
4. Describa la cascada de la coagulación.
Activación de los factores de coagulación que ocurren in vitro cuando se realizan pruebas
de coagulación en el laboratorio. Se analiza agregando a la muestra de sangre sustancias
que inician el proceso de coagulación y se mide el tiempo que tarda la muestra en
comenzar a coagularse. El tiempo de protrombina (tp) y el tiempo de tromboplastina parcial
(ttp) evalúan factores de la coagulación que forman parte de las distintas vías de la cascada
de la coagulación. Estas vías reciben el nombre de vía intrínseca, extrínseca y común.

• El TTP se utiliza para evaluar los factores de coagulación XII, XI, IX, VIII, X, V, II
(protrombina) e I (fibrinógeno), así como precalicreína (PK) y cininógeno de alto peso
molecular (HK).
• Una prueba de TP evalúa los factores de coagulación VII, X, V, II e I (fibrinógeno).
5. Describa la tercera etapa de la coagulación.
La fibrinólisis es la tercera etapa de la hemostasia y consiste en el proceso de destrucción
del tapón plaquetario de forma gradual, para así restaurar el flujo sanguíneo normal. Este
proceso es mediado por la plasmina, la cual es una proteína proveniente del
plasminógeno, que tiene como función degradar la fibrina.
6. ¿Qué deficiencias de factor existe en las hemofilias?

La sangre contiene muchas proteínas, llamadas factores de la coagulación, que ayudan a

detener la hemorragia. Las personas con hemofilia tienen bajos niveles del factor de la
coagulación VIII (8) o del factor de la coagulación IX (9). La gravedad de la hemofilia que
tiene una persona está determinada por la cantidad del factor en la sangre. Cuanto más
baja sea la cantidad del factor, mayor será la probabilidad de que ocurra hemorragia, lo
cual puede llevar a serios problemas de salud.
CALIFICACIÓN
Durante la práctica el docente evalúa a cada estudiante de acuerdo con su trabajo individual
y grupal según:
Competencias
Pensamiento critico
Manejo de información
Aprendizaje autorregulado y
continuo
Comunicación efectiva
Ninguna competencia
Una competencia
Dos o más competencias
BIBLIOGRAFÍA
Habilidades
Análisis e identificación de la
información relevante.
Formulación de problemas e
hipótesis.
Uso de textos científicos y
fuentes de información
especializada.
Generar hábito de estudio.
Sintetizar información
proveniente de diversas fuentes.
Intercambio de información.
Escuchar con atención a
compañeros y profesor.
Expresión verbal y escrita clara. Discusión de resultados.
Argumentar puntos de vista.
Evaluación
Identificar la información
correcta y completa.
Resolución de los problemas y
la hipótesis.
Manejo de información
actualizada.
Formulación de preguntas.
Trabaja en equipo.
Fundamentar las conclusiones.
0 puntos
1 punto
2 puntos
Garza N(Ed.),(1999).Manual de laboratorio de fisiología, 2e. McGraw Hill.
Garza N(Ed.),(2015).Manual de laboratorio de fisiología, 6e. McGraw Hill.
Clinical and Laboratory Standars Institute (CLSI) – H3-A6-Procedures for the Collection of
diagnosis Blodd Specimens by Venipuncture; Approved Standard-Sixth Edition. (Publication
Date:10/31/2007