Lipids exert key biologically relevant activities in cells and tissues, being partof cell

signaling pathways in both health and disease. It is required a betterunderstanding of

the biological mechanisms underlying the role that enzymatic- and nonenzymatic-
derived lipids have in pathophysiological processesas well their association to drug
development. The lack of lipid involvementtreatments for inflammatory diseases and
the need of early diagnosis footprints highlight the relevance of a comprehensive
understanding of the biological mechanisms of lipids’ underlying changes that occur.
Lipids are beingdetermined as novel biomarkers that would lead to novel treatment
strategies,earlier diagnosis, and improve patients’ lives. A small, lipid-derived
bloodbased biomarker could act as a screening tool to identify at-risk individuals.In
this way, lipidomic analysis has been focused on small-to-medium lipidmolecules as
final products of normal and pathological processes. Coupledwith the fact that blood is
relatively easily accessible, plasma metabolites arean ideal source of noninvasive
biomarkers of disease. Modifications exertedto bioactive lipids may affect membrane
composition, structure, and function,while changes in their biosynthesis or metabolism
may have a significant rolein the onset and development of disease.The aim of this
book is to analyze the role of bioactive lipids from physicochemistry to therapeutics.
We present a comprehensive discussion of thechemical structure of different bioactive
lipids and their role in inflammatoryprocesses as well as in cardiovascular and
neurodegenerative diseases. Weexpect that the current text will serve for students and
senior researchers ofeither basic or clinical science to improve knowledge on how
studying lipidmetabolism may aid in understanding underlying key mechanisms of
healthand disease.

This chapter includes an overview of the structure of cell membranes and a review
of the permeability of membranes to biologically relevant oxygen and nitrogen
reactive species, namely oxygen, singlet oxygen, superoxide, hydrogen peroxide,
hydroxyl radical, nitric oxide, nitrogen dioxide, peroxynitrite and also hydrogen
sulfide. Physical interactions of these species with cellular membranes are discussed
extensively, but also their relevance to chemical reactions such as lipid peroxidation.
Most of these species are involved in different cellular redox processes ranging from
physiological pathways to damaging reactions against biomolecules. Cell membranes
separate and compartmentalize different processes, inside or outside cells, and in
different organelles within cells. The permeability of these membranes to reactive
species varies according to the physicochemical properties of each molecule. Some of
them, such as nitric oxide and oxygen, are small and hydrophobic and can traverse
cellular membranes virtually unhindered. Nitrogen dioxide and hydrogen sulfide find a
slightly higher barrier to permeation, but still their diffusion is largely unimpeded by
cellular membranes. In contrast, the permeability of cellular membranes to the more
polar hydrogen peroxide, is up to five orders of magnitude lower, allowing the
formation of concentration gradients, directionality and effective
compartmentalization of its actions which can be further regulated by specific
aquaporins that facilitate its diffusion through membranes. The compartmentalizing
effect on anionic species such as superoxide and peroxynitrite is even more
accentuated because of the large energetic barrier that the hydrophobic interior of
membranes presents to ions that may be overcome M. N. Möller (*) · A. Denicola
Laboratorio de Fisicoquímica Biológica, Instituto de Química Biológica, Facultad de
Ciencias, Universidad de la República, Montevideo, Uruguay Center for Free Radical
and Biomedical Research, Universidad de la República, Montevideo, Uruguay e-mail:
mmoller@fcien.edu.uy E. Cuevasanta · L. Thomson Laboratorio de Enzimología,
Instituto de Química Biológica, Facultad de Ciencias, Universidad de la República,
Montevideo, Uruguay Center for Free Radical and Biomedical Research, Universidad
de la República, Montevideo, Uruguay F. Orrico · A. C. Lopez Laboratorio de
Fisicoquímica Biológica, Instituto de Química Biológica, Facultad de Ciencias,
Universidad de la República, Montevideo, Uruguay Laboratorio de Enzimología,
Instituto de Química Biológica, Facultad de Ciencias, Universidad de la República,
Montevideo, Uruguay Center for Free Radical and Biomedical Research, Universidad
de la República, Montevideo, Uruguay 1 4 by protonation or the use of anion
channels. The large difference in cell membrane permeability for different reactive
species indicates that compartmentalization is possible for some but not all of them.

Lipids containing unsaturated doubles bonds are oxidized by enzymatic and non-
enzymatic mechanisms yielding hydroperoxides and hydroxides as primary products.
This process has been implicated in physiological and pathological mechanisms. Thus,
precise characterization and quantification of lipid oxidation products in biological
samples can provide important mechanistic insights. In this context, the use of liquid
chromatography coupled to tandem mass spectrometry (LCMS/MS) to characterize
the primary products of polyunsaturated fatty acids, like hydroxides and
hydroperoxides, is a sensitive, specific and versatile tool. Here we will focus on the
characterization and specific analysis of hydroxy and hydroperoxy regioisomers of
linoleic acid, arachidonic acid, eicosapentaenoic acid and docosahexaenoic acid by
LC-MS/ MS.

In this chapter, an overview of LC-MS analysis for fatty acid hydroperoxides and
hydroxides was presented. Recent advances in MS technologies and improvements in
chromatography have greatly enhanced the identification of different fatty acid
oxidation products. The utmost important advantage for LC-MS technique is that it
allows analysis without prior derivatization. The most used ionization mode for fatty
acid hydroperoxide is ESI. The main ions yielded by ESI are [M-H]− corresponding to
the carboxylate anion of hydroperoxide and [M-H-H2O]−, a fragment ion formed by
the loss of water. None of these ions yields structural information on the
hydro(pero)xide position. Therefore, characteristic fragments are obtained by CID,
which mainly induces the cleavage of carbons vicinal to the hydroxyl/hydroperoxyl
group and the cleavage of the double bond allylic to the hydroperoxide. Specific
analysis of isobaric hydroperoxide and hydroxide fatty acids can be accomplished by
monitoring characteristic fragmentations of the original compound by doing the LC-
MS/MS analysis in the MRM mode. This technique increases both specificity and
sensitivity of the analysis. Nonetheless, it is noteworthy to mention that accurate
quantification requires the use of appropriate internal standards for each class of
products. More recently, the use of highresolution mass analyzers (HR-MS: q-TOF or
q-Orbitrap) is expanding the field of oxidized lipid analysis (oxylipidomics). HR-MS
confers some advantages including higher specificity and more detailed structural
characterization due to higher mass accuracy. Using this type of instrument, oxidized
lipids can be monitored by high resolution MRM or parallel reaction monitoring
(PRM). In conclusion, the use of LC-MS based techniques for hydro(pero)xy-fatty
acid analysis offers the possibility to expand our understanding on lipid metabolism,
especially the role of oxidized lipids to physiological and pathological conditions.

Lipid hoạt tính sinh học có khả năng mang lại một số lợi ích cho sức khỏe. Chúng đã
được phát hiện là có đặc tính chống viêm, có thể giúp giảm viêm trong cơ thể và ngăn
ngừa hoặc kiểm soát các bệnh mãn tính như viêm khớp, bệnh tim và tiểu đường. Lipid
hoạt tính sinh học cũng có thể có đặc tính chống ung thư và có thể giúp giảm nguy cơ
mắc một số loại ung thư.
Hơn nữa, những lipid này rất quan trọng trong việc điều chỉnh quá trình trao đổi chất
và có thể giúp cải thiện quá trình chuyển hóa lipid và glucose, giúp kiểm soát tốt hơn
các tình trạng như béo phì và hội chứng chuyển hóa. Chúng cũng có thể góp phần vào
sức khỏe của da, giúp duy trì độ ẩm và độ đàn hồi.
Nhìn chung, những lợi ích tiềm năng của lipid hoạt tính sinh học là đầy hứa hẹn và
nghiên cứu đang được tiến hành đang khám phá những ứng dụng tiềm năng của chúng
trong các lĩnh vực sức khỏe và thể chất khác nhau.

Lipid hoạt tính sinh học có thể có tác động tiêu cực đến sức khỏe nếu chúng có quá
nhiều hoặc không được cân bằng hợp lý với các chất dinh dưỡng khác. Một số tác
động tiêu cực của lipid hoạt tính sinh học bao gồm:
1. Viêm nhiễm: Dư thừa lipid có hoạt tính sinh học có thể dẫn đến tình trạng viêm
nhiễm mãn tính, làm tổn thương các mô và cơ quan, làm tăng nguy cơ mắc các bệnh
mãn tính như tim mạch, tiểu đường, ung thư.
2. Đông máu: Một số chất béo có hoạt tính sinh học như thromboxanes và
prostaglandin có thể khiến máu đông lại, làm tăng nguy cơ đau tim và đột quỵ.
3. Kháng insulin: Hàm lượng lipid hoạt tính sinh học cao có thể cản trở tín hiệu
insulin, dẫn đến kháng insulin và tăng nguy cơ mắc bệnh tiểu đường loại 2.
4. Béo phì: Một số lipid hoạt tính sinh học có thể thúc đẩy quá trình tích tụ chất béo
trong cơ thể, dẫn đến béo phì và các vấn đề sức khỏe liên quan.
5. Rối loạn chức năng miễn dịch: Mức độ lipid hoạt tính sinh học không cân bằng có
thể làm rối loạn chức năng miễn dịch, dẫn đến tăng nguy cơ nhiễm trùng và các bệnh
tự miễn dịch.
Do đó, điều quan trọng là duy trì sự cân bằng lành mạnh của lipid hoạt tính sinh học
thông qua chế độ ăn uống cân bằng và hoạt động thể chất.