Analytical 

Chemistry
2023 Spring Semester

3. Complexometric
Titration

Jungki Ryu
School of Energy & Chemical Engineering
Ulsan National Institute of Science & Technology (UNIST)
Email: jryu@unist.ac.kr
Homepage: https://www.bioinspired‐materials.com/

Midterm Exam – Offline Open Book Test
• Midterm Schedule
‐ When: 7 to 10 pm on Thursday, April 20
‐ Where: B/D 104, Room E101

• Scope of the Midterm
: (1) Chemical Equilibrium, (2) Acid/base Titrations, and (3) 
Complexometric Titrations

• How?
‐ Only a calculator and your hand‐written notebook will be 
allowed for the midterm exam.
‐ Please let me know by email if you have another exam at the 
same time,   then you can take an exam in my office from 1‐4 pm 
on the same day in advance

2
 Metal Ions in Life and Chemical Sciences
• Metalloproteins
‐ Oxygen‐transport
: hemoglobin, myoglobin

‐ Redox catalysis
Enzyme Redox reaction Reduction  Remarks
potential
Hydrogenase ‐ 0.42 V
Oxygen evolving complex ‐ 0.82 V
CO dehydrogenase ‐ 0.52 V
Methane Monooxygenase ‐ 0.583 V
  
Nitrogenase N 2  8H  6e 2NH 4 ‐ 0.280 V

Nitrogenase Oxygen evolving complex (OEC)
[Mn4CaO4] 3
[Fe7MoS9C]

Alginate Gels

4
 Metal Ions in Environmental Sciences
• Water hardness
‐ hard water: water with high mineral contents ↔ soft water

• Toxic heavy metals
Acute exposure Chronic exposure

Air
Cd Pneumonitis 간질 Lung cancer 폐암
pollution
Mercury (lung inflammation) Osteomalcia 골연화증
Asbestos
(Hg) Proteinuria 단백뇨
Hg Diarrhea 설사 Stomatitis 구내염
Fever 열 Nausea 메스꺼움
Lead (Pb) Benzene
Chemicals Vomiting 구토 Nephrotic syndrome 신증후군
of Public Neurasthenia 신경쇠약증
Health Dioxin & Pb Encephalopathy 뇌병증 Anemia 빈혈증
dioxin-
Cadmium Concern like
Encephalopathy 뇌병증
(Cd) Nephropathy (kidney disorder)
substanc
es Cr Hemolysis 용혈 Pulmonary fibrosis 폐섬유증
Arsenic Excess Acute renal failure 신장이상 Lung cancer 폐암
Highly
(As) fluoride
Hazardou As Nausea 메스꺼움 Diabetes 당뇨병
s Vomiting 구토 Hypopigmentation 색소침작저하증
Pesticides Diarrhea 설사 Hyperkeratosis 각막비후증
Encephalopathy 뇌병증 Cancer
10 Chemicals of Major Public Concern Arrhythmia 부정맥
by World Health Organization (WHO) 2015 Neuropathy 신경통 5

Metal Ions & Neurodegenerative Disease?

6
 Formation of Complex
• Coordination complex (or metal complex): compounds composed of 
a metal atom and one or more ligands (atoms, ions, or molecules) that 
donate electrons to the metal.
‐ Coordination number: total number of neighbors of a central atom 
in a molecule or ion 

Cobaloxime Chlorophyl a, b

H2‐evolving catalyst in plants
Heme b N719 dye for DSSC

• Complexation (chelation)
‐ Formation or presence of two or more separate coordinate (dative covalent) bonds
between a polydentate (multiple bonded) ligand and a single central atoms.
‐ Ligand: an ion, molecule, or functional group that finds to a central metal atom to form 
a coordination complex; act as electron donors
‐ Denticity: the number of donor groups in a single ligand that bind to a central atom in a 
coordination complex.

Types of Ligands

Type Name Structure

H2O, NH3
Monodentate Netural monodentate ligands
RNH2 (aliphatic amines)
F‐, Cl‐, Br‐, I‐, SCN‐, CN‐
Anionic monodentate ligands
OH‐, RCOO‐, S2‐

Bidentate Ethylenediamine(en)

Tetradentate Triethylenetetraamine (Trien)

Nitrilotriacetic acid (NTA)

Hexadentate Ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA)

Cyclohexanediaminetetraacetic acid (CDTA)

Octadentate Diethylenetriaminepentaacetic acid (DTPA)

8
 Metal‐Chelate Complexes
• Chelate effect: chelating ligands (e.g., multidentate ligand) forms stronger complexes 
than a similar monodentate ligand

Chemical Equilibrium in Metal‐Chelate Complexes
• Complexometric titration: a titration based on complex formation
‐ Analyte: a metal ion
‐ Titrant: a regent forming a water‐soluble complex with the analyte; normally chelating 
agent. 
ex) ligands other than NTA forms strong 1:1 complexes with most metals regardless of 
the charge on the metal ion

10
 Metal‐Chelate Complexes
• EDTA (ethylenediaminetetraacetic acid) 
‐ EDTA forms strong 1:1 complexes with most metal atoms
‐ Applications: detergents, cleaning agents, food additives (prevention of food 
oxidation)
‐ EDTA complexes metals (Fe, Pb, Cu, Zn, etc.) so that they pass safely through 
waterwaste treatment plants (negative effect)

N N

11

EDTA
• Ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA)
‐ One of the most useful chelating agents used for titration.
‐ Virtually every element of the periodic table can be analyzed with EDTA by direct 
titration or through an indirect sequence of reactions 

• EDTA is a hexaprotic system, designated H6Y2+. 
‐ Acidic hydrogen atoms are the ones that are lost upon metal‐complex formation.
‐ The first four pK values apply to carboxyl protons, and the last two are for the 
ammonium protons.
‐ The neutral acid is tetraprotic (H4Y)
10.37

6.13

2.69
2.0
H4Y 1.5

0.0
12
 EDTA Complexes
• Formation constant (Kf): the equilibrium constant for the reaction of a metal with a 
ligand/chelate (=stability constant)
𝑀𝑌
𝑀 𝑌 ⇌ 𝑀𝑌 𝐾
𝑀 𝑌
• Kf is defined for the reaction of Y4‐ with Mn+. But Y4‐ is only one of the seven forms of 
EDTA.
• Whenever Mn+ reacts with any forms of EDTA, the product is always MYn‐4!!
• Na2H2Y•2H2O (the sodium salt): a commonly used reagent

13

Conditional Formation Constant
𝑌
𝛼 ⟹ 𝑌 𝛼 𝐸𝐷𝑇𝐴
𝐸𝐷𝑇𝐴
𝑀𝑌 𝑀𝑌
𝐾
𝑀 𝑌 𝑀 𝛼 𝐸𝐷𝑇𝐴

• Conditional formation constant 
(=effective formation constant)
𝑀𝑌 𝑀 𝐸𝐷𝑇𝐴 ⇌ 𝑀𝑌
𝐾 𝛼 𝐾
𝑀 𝐸𝐷𝑇𝐴

* Kf ’ is useful because it allows us to 
look at EDTA complex formation 
as if the uncomplexed EDTA were 
in all in one form

* Kf ’ is pH dependent
𝑌
𝛼
𝐻 𝑌 𝐻 𝑌 𝐻 𝑌 𝐻 𝑌 𝐻 𝑌 𝐻𝑌 𝑌

14
 Fractional Composition for EDTA

𝐾𝐾𝐾𝐾𝐾𝐾
𝛼
𝐻 𝐻 𝐾 𝐻 𝐾𝐾 𝐻 𝐾𝐾𝐾 𝐻 𝐾𝐾𝐾𝐾 𝐻 𝐾𝐾𝐾𝐾𝐾 𝐾𝐾𝐾𝐾𝐾𝐾
𝑌
𝛼
𝐸𝐷𝑇𝐴

• αY4‐ is dependent on
concentration of each 
EDTA species, which is
dependent on [H+]
which in turn is dependent 
on ionic strength

15

Revisit Fractional Composition Equations
• Monoprotic Systems
𝐻 𝐴
𝐻𝐴 ⇌ 𝐻 𝐴 𝐾
𝐻𝐴
𝑀𝑎𝑠𝑠 𝑏𝑎𝑙𝑎𝑛𝑐𝑒: 𝐹 𝐻𝐴 𝐴
𝐻 𝐹 𝐻𝐴
𝐾
𝐻𝐴
𝐾 𝐻𝐴 𝐻 𝐹 𝐻 𝐻𝐴
𝐾 𝐻 𝐻𝐴 𝐻 𝐹
𝐻 𝐹
𝐻𝐴
𝐾 𝐻

Fraction of molecules in the form of HA or A‐ is
𝐻𝐴 𝐻𝐴 𝐻
𝛼
𝐻𝐴 𝐴 𝐹 𝐻 𝐾
𝐴 𝐾
𝛼 1 𝛼
𝐹 𝐻 𝐾

16
 Revisit Fractional Composition Equations
• Diprotic Systems

𝐻 𝐴 𝐻
𝛼
𝐹 𝐻 𝐻 𝐾 𝐾𝐾

𝐻𝐴 𝐻 𝐾
𝛼
𝐹 𝐻 𝐻 𝐾 𝐾𝐾

𝐴 𝐾𝐾
𝛼
𝐹 𝐻 𝐻 𝐾 𝐾𝐾

17

Fractional Composition for EDTA
• αY4‐: fraction of EDTA in the from Y4‐
𝑌
𝛼
𝐻 𝑌 𝐻 𝑌 𝐻 𝑌 𝐻 𝑌 𝐻 𝑌 𝐻𝑌 𝑌
𝑌
𝛼
𝐸𝐷𝑇𝐴

[EDTA]: total concentration of all free EDTA, not complexed to metal ions.
𝐾𝐾𝐾𝐾𝐾𝐾
𝛼
𝐻 𝐻 𝐾 𝐻 𝐾𝐾 𝐻 𝐾𝐾𝐾 𝐻 𝐾𝐾𝐾𝐾 𝐻 𝐾𝐾𝐾𝐾𝐾 𝐾𝐾𝐾𝐾𝐾𝐾

18
 EDTA Titration Curves
• The concentration of free Mn+ decreases as the titration 
proceeds

𝑀 𝐸𝐷𝑇𝐴 ⇌ 𝑀𝑌

• Region 1: Before the equivalence point
‐ There is excess Mn+ left solution after 
the EDTA has been consumed
‐ The concentration of free metal ion 
is equal to the concentration of 
excess untreated Mn+.
‐ The dissociation of MYn‐4 is negligible.

𝑉 𝑉 𝑉
𝐶𝑎 𝐶
𝑉 𝑉 𝑉

Dilution factor Initial  Fraction of 

conc. remaining analyte
19

EDTA Titration Curves
• Region 2: At the equivalence point
‐ There is exactly as much EDTA as 
metal in the solution
‐ We can treat the solution as if it had
made by dissolving pure MYn‐4
‐ Some free Mn+ is generated by the
slight dissociation of MYn‐4

𝑀𝑌 ⇌𝑀 𝐸𝐷𝑇𝐴

‐ EDTA refers to the total concentration
of free EDTA in all of its forms
‐ At the equivalence point, [Mn+]=[EDTA]

20
 EDTA Titration Curves
• Region 3: After the equivalence point
‐ There is excess EDTA, and virtually 
all the metal ion is in the form MYn‐4
‐ The concentration of free EDTA can be
equated to the concentration of excess 
EDTA added after the equivalence point
‐ Free metal concentration is calculated 
from the known free EDTA and MYn‐4

Volume of
excess EDTA
𝑉 𝑉
𝐸𝐷𝑇𝐴 𝐶
𝑉 𝑉
original
Dilution factor conc.

𝑉
𝐶𝑎𝑌 𝐶
𝑉 𝑉 𝐶𝑎 𝐸𝐷𝑇𝐴 ⇌ 𝐶𝑎𝑌
Dilution factor Initial  𝐶𝑎𝑌
conc. 𝐾 𝛼 𝐾
𝐶𝑎 𝐸𝐷𝑇𝐴
21

Revisit Titration of Strong Base with Strong Acid
1) Before the equivalence point, the pH is determined
by excess OH‐ in the solution.

2) At the equivalence point, H+ is just sufficient to 
react with all OH‐ to make H2O. The pH is  Excess OH- Excess H+
determined by dissociation of water.

3) After the equivalent point, pH is determined
by excess H+ in the solution

22
 EDTA Titration Curves
• Theoretical titration curves for the reaction of 50.0 mL of 0.0400 M metal ion with 
0.0800 M EDTA at pH 10.00
𝑀𝑌
𝐾 𝛼 𝐾
𝑀 𝐸𝐷𝑇𝐴

• The higher the conditional formation constant of a metal‐ligand complex,
the more distinct the end point.

EDTA Titration as a Function of pH
• As the pH is lowered, the end point becomes less distinct.
𝑀𝑌
𝐾 𝛼 𝐾
𝑀 𝐸𝐷𝑇𝐴
𝐾𝐾𝐾𝐾𝐾𝐾
𝛼
𝐻 𝐻 𝐾 𝐻 𝐾𝐾 𝐻 𝐾𝐾𝐾 𝐻 𝐾𝐾𝐾𝐾 𝐻 𝐾𝐾𝐾𝐾𝐾 𝐾𝐾𝐾𝐾𝐾𝐾
𝑌
𝛼
𝐸𝐷𝑇𝐴

24
 EDTA Titration as a Function of pH
• As the pH increases, the equilibrium shifts to the right. 

Titration curves for 100 mL 0.1 M Ca2+ vs 0.1 M Na2EDTA at pH 7 and 10. 

25

Revisit Acid‐Base Titration Curve
• As HA becomes a weaker acid, or the concentrations of analyte and titrant decrease, 
the inflection near the equivalence point decreases, until the equivalence point 
becomes too shallow to detect.
• It is not practical to titrate an acid or a base when its strength is too weak 
or its concentration is too dilute.

26
 EDTA Titration as a Function of pH
• The points represent the pH at which the conditional formation constant, Kf‘ for each 
metal ion ~ 106 which is the minimum value needed for a sharp end point. 

Minimum pH for effective titrations of  
various metal ions with EDTA.  27

Auxiliary Complexing Agents
• Auxiliary complexing agents may be added
i) to prevent M(OH)2 precipitation at high pH
𝑁𝐻 𝐻 ⇌ 𝑁𝐻
ii) to fix pH (                                   ; buffer)
iii) to complex metal ion and keep it in solution until EDTA is introduced
𝑀𝐿 [M]: free metal concentration
𝑀 𝐿 ⇌ 𝑀𝐿 𝛽
𝑀 𝐿
𝑀𝐿 [MLn]: metal‐liquid complex concentration
𝑀 2𝐿 ⇌ 𝑀𝐿 𝛽
𝑀 𝐿 βn: overall or cumulative formation constants
𝑀𝐿 [L]: concentration of free ligand
𝑀 𝑛𝐿 ⇌ 𝑀𝐿 𝛽
𝑀 𝐿

𝑀 𝑀
𝛼 CM: total concentration of all forms of 
𝐶 𝑀 𝑀𝐿 𝑀𝐿 ⋯ 𝑀𝐿
𝑀 M (M, ML, ……, MLn) 
𝑀 𝛽 𝑀 𝐿 𝛽 𝑀 𝐿 ⋯ 𝛽 𝑀 𝐿 αM: fraction of free metal ion
1
1 𝛽 𝐿 𝛽 𝐿 ⋯ 𝛽 𝐿
𝑀𝑌
𝐾 ⋅𝛼 ⋅𝛼
Kf ”: the effective formation constant  𝐶 ⋅ 𝐸𝐷𝑇𝐴
at a given fixed pH (αY4‐) and given 𝑀𝑌
𝐾 ⋅𝛼
fixed concentration of auxiliary 𝐶 ⋅ 𝐸𝐷𝑇𝐴
complexing agent (αM) 𝑀𝑌
𝐾" 𝐶 𝐸𝐷𝑇𝐴 ⇌ 𝑀𝑌
𝐶 ⋅ 𝐸𝐷𝑇𝐴 28
 Auxiliary Complexing Agents
• Remark

‐ EDTA is much stronger complexing agent than NH3, 
and all of EDTA added is bound to Mn+

‐ The greater the concentration of NH3, the smaller 
the change of pMn+ near the equivalence point.

‐ When an auxiliary ligand is used, its amount 
must be kept below the level that would obliterate 
the end point of the titration

‐ Kf ”: The effective formation constant at a given 
fixed pH (αY4‐) and given fixed concentration of 
auxiliary complexing agent (αM)

29

Metal Ion Indicators
• Metal ion indicator: compounds whose color changes when they bind to a metal ion; 
the most common technique
e.g.) MgIn +    EDTA     MgEDTA +    In
(red)          (colorless)     (colorless)      (blue)

* Useful indicators must bind metal less 
strongly than EDTA does
* Because the color of free indicator is 
pH dependent, most indicators can be 
used only in certain pH ranges in which 
color changes can be seen cleary.

• Mercury electrode

• Ion selective electrode

30
Metal Ion Indicators

31

Metal Ion Indicator

32
• Guide to EDTA titrations 
of common metals

• Light color: pH region in which 
reaction with EDTA is quantitative. 
(Below the PH ranges indicated Kf’ is 
not large enough)

• Dark color: pH region in which 
auxiliary complexing agent is 
necessary to prevent hydroxide 
precipitation

• Underline with the indicator name: 
suitable pH range for each indicator

33

EDTA Titration Techniques
• Direct titration: when analyte is titrated with EDTA.
‐ Analyte is buffered to a pH at which the conditional formation constant for the metal‐
EDTA complex is large and the color of the free indicator is distinctly different from that 
of the metal‐indicator complex.
• Back titration: when a known excess of EDTA is added to the analyte.
‐ Excess EDTA is then titrated with a standard solution of a second metal ion.
‐ The metal ions for the back titration must not displace analyte form
‐ Useful when (i) analyte precipitates in the absence of EDTA, (ii) analyte reacts too 
slowly with EDTA, and (iii) analyte blocks the indicator.
• Displacement titration: When analyte does not have a satisfactory indicator.
e.g., Hg2+ is treated with excess Mg(EDTA)2‐ to displace Mg2+, which is titrated with 
standard EDTA
• Indirect titration: Anions that precipitate with certain metal ions can be analyzed with 
EDTA by indirect titration.
• Masking: preventing one species from interfering in the analysis of another.
‐ Masking agent: a regent that protects some components of the analyte from reaction 
with EDTA.
e.g., Cyanide masks: Cd2+, Zn2+, Hg2+, Co2+, Cu+, Ag+, Ni2+, Pd2+, Pt2+, Fe2+, and Fe3+
‐ Demasking agent: a regent that releases metal ion from a masking agent.
e.g., Formaldehyde (H2CO) can damask cyanide complexes.
34
 EDTA Titration Techniques
• Direct titration: when analyte is titrated with EDTA.
‐ Analyte is buffered to a pH at which the conditional formation constant for the metal‐
EDTA complex is large and the color of the free indicator is distinctly different from that 
of the metal‐indicator complex.

+EDTA

Cu2+ CuY2‐
Cu2+ CuY2‐
Cu2+ CuY2‐

35

EDTA Titration Techniques
• Back titration: when a known excess of EDTA is added to the analyte.
‐ Excess EDTA is then titrated with a standard solution of a second metal ion.
‐ The metal ions for the back titration must not displace analyte form
‐ Useful when (i) analyte precipitates in the absence of EDTA, (ii) analyte reacts too 
slowly with EDTA, and (iii) analyte blocks the indicator

+ excess  titration 
EDTA with Mg2+

Co2+ CoY2‐ MgY2‐ CoY2‐

Y2‐
Co2+ CoY2‐ CoY2‐
Co2+ CoY2‐ CoY2‐
36
 EDTA Titration Techniques
• Displacement (or substitution) titration: 
‐ When analyte does not have a satisfactory indicator.
e.g., Hg2+ is treated with excess Mg(EDTA)2‐ to displace Mg2+, which is titrated with 
standard EDTA

titration of 
+ excess  displacem free Mg2+
MgY2‐ ent with EDTA

+1EDTA

Hg2+ HgY2‐ HgY2‐

Hg2+ Mg2+ Mg2+
MgY2‐ MgY2‐ Mg2+ MgY2‐
Hg2+ Hg2+ MgY2‐ HgY2‐ MgY2‐ HgY2‐ MgY2‐

3MgY2‐ 2MgY2‐+Mg2+
37

EDTA Titration Techniques
• Indirect titration: Anions that precipitate with certain metal ions can be analyzed with 
EDTA by indirect titration.

+ excess Fe3+ titration 
with EDTA

FeY‐
PO42‐ Fe3+ FeY‐
Fe3+
PO42‐
FePO4 FePO4

38