‫‪Machine Translated by Google‬‬

‫ﯿﺪ‬
‫ﯿﻨ‬‫ﺒ‬
‫ﺑ‬‫ﯾﻪ در‪https://www.researchgate.net/publication/255757304 :‬‬
‫ﯾﻦ ﻧﺸﺮ‬
‫ﺑﺮا ی ا‬‫ﯾ ﺴﻨﺪه را‬
‫ﯾﻪ ﻫﺎ ی ﻧﻮ‬
‫ﺑﺤ ﺚ ﻫﺎ‪ ،‬آﻣﺎر و ﻧﻤﺎ‬

‫ﯿﻦ‬
‫ﺘﺎﻣ‬
‫ﺘﻔﺎده درﺳﺎﺧ ﺖ آﻣﻔ‬
‫ﺘﺪاول ﻣﻮرد اﺳ‬
‫ﯿ ﺶ ﻣﺎده ﻣ‬
‫ﭘ‬‫ﯾﮏ‬
‫ﺘﻮن ‪-‬‬
‫ﯿﻞ ﮐ‬
‫ﺘ‬‫ﯾﻞ ﻣ‬
‫ﺑﻨﺰ‬‫ﯿﻦ‬
‫ﯿ‬‫ﺗﻌ‬

‫ﺒﺮ ‪DOI: 10.1039/C2AY25772F‬‬

‫ﺘ‬‫ﯿﻠﯽ ·اﮐ‬
‫ﻣﻘﺎﻟﻪ در رو ش ﻫﺎ یﺗﺤﻠ‬
‫‪2012‬‬

‫ﺘﻨﺎد‬
‫اﺳ‬ ‫ﻣﯽ ﺧﻮاﻧﺪ‬

‫‪11‬‬ ‫‪13768‬‬

‫ﯾ ﺴﻨﺪه از ﺟﻤﻠﻪ‪:‬‬
‫‪9‬ﻧﻮ‬

‫ﺘﻔﺎﻧﻮ د ی ﺟﻮواﻧﯽ‬
‫اﺳ‬ ‫ﯾﺎﻟﻪ‬
‫ﯿﻮ وار‬
‫ﺘﻮﻧ‬
‫آﻧ‬

‫ﯿﺎ‬
‫ﺘﺎﻟ‬
‫ﯾ‬‫ﯿﻘﺎ ت ا‬
‫ﺷﻮرا ی ﻣﻠﯽﺗﺤﻘ‬ ‫ﯿﺎ‬
‫ﺘﺎﻟ‬
‫ﯾ‬‫ﯿﻘﺎ ت ا‬
‫ﺷﻮرا ی ﻣﻠﯽﺗﺤﻘ‬

‫ﺘﺸﺎرا ت ‪121‬ﻧﻘﻞ ﻗﻮل‬

‫‪15‬اﻧ‬ ‫ﺘﺸﺎرا ت ‪1,490‬ﻧﻘﻞ ﻗﻮل‬
‫‪98‬اﻧ‬

‫ﯿﺪ‬
‫ﯿﻨ‬‫ﺒ‬
‫ﺑ‬‫ﯾﻪ را‬
‫ﻧﻤﺎ‬ ‫ﯿﺪ‬
‫ﯿﻨ‬‫ﺒ‬
‫ﺑ‬‫ﯾﻪ را‬
‫ﻧﻤﺎ‬

‫ﺒﻂ ﮐﺎر ﻣﯽ ﮐﻨﻨﺪ‪:‬‬

‫ﺗ‬‫ﭘﺮوژه ﻫﺎ ی ﻣﺮ‬‫ﯾﻦ‬
‫ﺑﺮ رو ی ا‬‫ﯿﺰ‬
‫ﯾﻪ ﻧ‬
‫ﯾﻦ ﻧﺸﺮ‬
‫ﯾ ﺴﻨﺪﮔﺎن ا‬
‫ﺑﺮﺧﯽ از ﻧﻮ‬

‫ﭘﺮوژه‬‫ﺒ ﺖ ﻣﺸﺎ ﻫﺪه‬

‫ﺜ‬‫ﺘﺮ ی ﻫﺎ ی ﮔﺮم ﻣ‬
‫ﺑﺎﮐ‬‫ﺗﺎﻣﺎ ت )‪(SBP‬در‬
‫ﺗﺼﺎل ﮔﻠﻮ‬
‫ﯿﻦ ا‬
‫ﺗﺌ‬‫ﭘﺮو‬

‫ﭘﺮوژه‬‫‪MARIABOX‬ﻣﺸﺎ ﻫﺪه‬
‫‪Machine Translated by Google‬‬

‫ﺑﺎرﮔﺬار ی ﺷﺪه اﺳ ﺖ در ‪29‬آﮔﻮﺳ ﺖ ‪2017.‬‬‫ﯿﻮواﻧﯽ‬

‫ﺘﻔﺎﻧﻮ د ی ﺟ‬
‫ﯾﻦ ﺻﻔﺤﻪﺗﻮﺳﻂ اﺳ‬
‫ﯾﺮ ا‬
‫ﺘﻮا ی ز‬
‫ﺗﻤﺎم ﻣﺤ‬

‫ﯾﻞ داﻧﻠﻮد ﺷﺪه را ﮐﺮده اﺳ ﺖ‪.‬‬

‫ﺒﻮد ﻓﺎ‬
‫ﺑﻬ‬‫ﺑﺮ درﺧﻮاﺳ ﺖ‬
‫ﮐﺎر‬
‫‪Machine Translated by Google‬‬

‫ﯿﻠﯽ‬
‫ﺗﺤﻠ‬

‫ﯿﻦ‬
‫ﺘﺎﻣ‬
‫ﺘﻔﺎده درﺳﺎﺧ ﺖ آﻣﻔ‬
‫ﺘﺪاول ﻣﻮرد اﺳ‬
‫ﯿ ﺶ ﻣﺎده ﻣ‬
‫ﭘ‬‫ﯾﮏ‬
‫ﺘﻮن ‪-‬‬
‫ﯿﻞ ﮐ‬
‫ﺘ‬‫ﯾﻞ ﻣ‬
‫ﺑﻨﺰ‬‫ﯿﻦ‬
‫ﯿ‬‫ﺗﻌ‬
Machine Translated by Google

‫ﻣﻮاد و رو ش ﻫﺎ‬
www.rsc.org/methods 3499–3898 ‫ ﺻﻔﺤﺎ ت‬2012 | ‫ﺒﺮ‬
‫ﻧﻮاﻣ‬11 | ‫ﺷﻤﺎره‬4 | ‫ﺟﻠﺪ‬
Machine Translated by Google
‫‪Machine Translated by Google‬‬

‫ﯿﻠﯽ‬
‫ﺗﺤﻠ‬ ‫ﯾﺎ‪>C‬‬
‫ﭘﻮ‬‫ﯿﻮﻧﺪ ﻫﺎ ی ﻣﻘﺎﻟﻪ‬
‫ﭘ‬

‫ﻣﻮاد و رو ش ﻫﺎ‬
‫ﯿﺪ‪ :‬ﻣﻘﻌﺪ‪ .‬رو ش ﻫﺎ‪2012، 4، 3558 ،‬‬
‫ﯾﻦ را ذﮐﺮ ﮐﻨ‬
‫ا‬

‫‪www.rsc.org/methods‬‬ ‫ﮐﺎﻏﺬ‬

‫ﯿﻦ‬
‫ﺘﺎﻣ‬
‫ﺘﻔﺎده درﺳﺎﺧ ﺖ آﻣﻔ‬
‫ﺘﺪاول ﻣﻮرد اﺳ‬
‫ﯿ ﺶ ﻣﺎده ﻣ‬
‫ﭘ‬‫ﯾﮏ‬
‫ﺘﻮن ‪-‬‬
‫ﯿﻞ ﮐ‬
‫ﺘ‬‫ﯾﻞ ﻣ‬
‫ﺑﻨﺰ‬‫ﯿﻦ‬
‫ﯿ‬‫ﺗﻌ‬

‫ﺑﻪ‬‫ﯿﺎﻧﻮ‪،‬‬
‫ﺘ‬‫ﯾﺎ اﺳ‬
‫ﺑﻪ ﻣﺎر‬‫ﯿﺮو‪،‬‬
‫ﭘﻪ روﺟ‬
‫ﺑﻪ ﺟﻮز‬‫ﯾﻨﭽﻨﺰو ﻣﺎﻧﻮﺋﻞ ﻣﺎرزوﻟﻮ‪،‬‬
‫ﺑﻪ و‬
‫ﯾﺎﻟﻪ‪† ،‬‬
‫ﯿﻮ وار‬
‫ﺘﻮﻧ‬
‫ﺑﻪ آﻧ‬
‫ﺘﻔﺎﻧﻮ د ی ﺟﻮواﻧﯽ‪† ،‬‬
‫اﺳ‬
‫ﯾﺎ*آ‬
‫ﺗﻮ داور‬
‫ﺑﺎ‬
‫ﯿﻮرﻟﻮ ب وﺳﺎ‬
‫ﯾﺎ ﻓ‬
‫ﯿﺮﻧﻮ‪ ،‬آﻧﺎ ﻣﺎر‬
‫ﭘ‬‫ﯿﺠﯽ‬
‫ﺑﯽ ﻟﻮﺋ‬‫ﺗﻮﺳﮑﯽ‪،‬‬
‫ﺒﺮ‬‫آﻟ‬

‫ﯾﺮ ش در ‪21‬آﮔﻮﺳ ﺖ ‪2012 DOI: 10.1039/c2ay25772f‬‬

‫ﭘﺬ‬‫ﯿﻪ ‪2012،‬‬
‫ﯾﺎﻓ ﺖ در ‪18‬ژوﺋ‬
‫در‬

‫ﺑﻪ آ ب و‬‫ﯿﻪ‬
‫ﺒ‬‫ﺑﯽ رﻧﮓﯾﺎ ﮐﻤﯽ زرد اﺳ ﺖ‪ .‬ﭼﮕﺎﻟﯽ ﺷ‬‫ﯾﻊ‬
‫ﺘﻪ ﻣﯽ ﺷﻮد‪،‬ﯾﮏ ﻣﺎ‬
‫ﺘﻮن )‪(BMK‬ﺷﻨﺎﺧ‬
‫ﯿﻞ ﮐ‬
‫ﺘ‬‫ﯾﻞ ﻣ‬
‫ﺑﻨﺰ‬‫ﺑﻪ ﻋﻨﻮان‬‫ﯿﻦ‬
‫ﭘﺎﻧﻮن ‪ (P-2-P)،‬ﻫﻤﭽﻨ‬
‫ﭘﺮو‬
‫ﯿﻞ‪-2-‬‬
‫‪1-‬ﻓﻨ‬
‫ﺑﺎﺷﺪ‪ ،‬اﻏﻠ ﺐ ‪BMK‬‬‫ﺘﻪ‬
‫ﯾﻦ وﺟﻮد داﺷ‬
‫ﯿﻞ ﻫﮕﺰدر‬
‫ﭘ‬‫ﭘﺮو‬‫ﯾﯽ‬
‫ﯿﺪ دارو ی دارو‬
‫ﺘﻔﺎده ﻫﺎ ی ﻣﺸﺮوع ﮐﻤﯽ از ‪BMK‬ﻣﺎﻧﻨﺪﺗﻮﻟ‬
‫ﺘﯽ اﮔﺮ اﺳ‬
‫ﯾﺮ دارد‪ .‬ﺣ‬
‫ﭙﺬ‬‫ﯾﺤﻪ ا ی دﻟ‬
‫ﯿﻦ را‬
‫ﻫﻤﭽﻨ‬
‫ﺗﻮﮔﺮاﻓﯽ ﮔﺎز ی‪،‬‬
‫ﯿﮏ ﻣﺎﻧﻨﺪ ﮐﺮوﻣﺎ‬
‫ﺑﺎ رو ش ﻫﺎ ی ﮐﻼﺳ‬
‫ﺘﻔﺎده ﻣﯽ ﺷﻮد‪ .‬در واﻗﻊ‪BMK ،‬‬
‫ﯿﻦ اﺳ‬
‫ﺘﺎﻣ‬
‫ﯿﺮﻗﺎﻧﻮﻧﯽ آﻣﻔ‬
‫ﺑﺮا یﺳﺎﺧ ﺖ ﻏ‬‫ﯿﺮﻗﺎﻧﻮﻧﯽ‬
‫ﯿﺐ ﻏ‬
‫ﺑﻪ ﻋﻨﻮانﯾﮏﺗﺮﮐ‬
‫ﯾﺠﺎد‬
‫ﺑﻪ ا‬‫ﯿﺎز ﻓﻮر ی‬
‫ﯾﻬﯽ اﺳ ﺖ ﮐﻪ ﻧ‬
‫ﺑﺪ‬‫ﯾﺪه دارد‪.‬‬
‫ﺗﻮر ﻫﺎ ی آﻣﻮز ش د‬
‫ﭘﺮا‬
‫ﺑﻪ ﺣﻀﻮر ا‬‫ﯿﺎز‬
‫ﺑﻮده و ﻧ‬‫ﺑﺮ‬‫ﯾﻨﻪ‪ ،‬زﻣﺎن‬
‫ﭘﺮ ﻫﺰ‬‫ﯾﻦ رو ش ﻫﺎ‬
‫ﯾﯽ ﻣﯽ ﺷﻮد‪ .‬ا‬
‫ﯾﺎ ‪HPLC‬ﺷﻨﺎﺳﺎ‬
‫‪NMR‬‬
‫ﯾﯽ‬
‫ﯿﺎ‬‫ﯿﻤ‬
‫ﺘﺰ ﺷﺪه ﺷ‬
‫ﺘﻖ ‪BMK‬ﺳﻨ‬
‫ﯾﻦ ﮐﺎر‪،‬ﯾﮏ ﻣﺸ‬
‫ﯿﻢ‪ .‬در ا‬
‫ﯿﺺ د ﻫ‬
‫ﺛﺎر ‪BMK‬راﺗﺸﺨ‬
‫ﺑﻪ ﻣﺎ اﻣﮑﺎن ﻣﯽ د ﻫﺪ وﺟﻮد آ‬‫ﯾﺪ وﺟﻮد دارد ﮐﻪ‬
‫ﯾﻊ ﺟﺪ‬
‫ﯾﮏ رو ش آﺳﺎن وﺳﺮ‬
‫ﺑﺮ‬‫ﺘﻨﯽ‬
‫ﺒ‬‫ﺘﯽ ﻣ‬
‫ﯾﺴ‬‫ﺘﻔﺎده ﺷﺪ‪.‬ﯾﮏﺳﻨﺠ ﺶ ز‬
‫ﯿﻪ ﻣﻮﻟﮑﻮل ﻫﺎ ی ‪BMK‬اﺳ‬
‫ﺑﺎد ی ﻋﻠ‬‫ﺘﯽ‬
‫ﯿﺪ آﻧ‬
‫ﺑﺮا یﺗﻮﻟ‬‫ﯾﮏ‬
‫ﯾﻤﻮﻧﻮﻟﻮژ‬
‫ﺑﻪﯾﮏ ﺣﺎﻣﻞ ا‬‫ﺑﻪ ﺻﻮر ت ﮐﻮواﻻﻧ ﺴﯽ‬‫ﯾﺪ‬
‫ﺟﺪ‬
‫ﺑﺎ‬‫ﺒﯽ را‬
‫ﯿﻠﯽ ﺟﺎﻟ‬
‫ﯾﻦﺳﻨﺠ ﺶ ﻋﻤﻠﮑﺮد ﻫﺎ یﺗﺤﻠ‬
‫ﯾﺠﺎد ﺷﺪ‪ .‬ا‬
‫ﺘﻖ ‪BMK‬ا‬
‫ﯿﺪ ﺷﺪه و ﻣﺸ‬
‫ﺗﻮﻟ‬
‫ﺑﺎد ی ﻫﺎ ی ﺿﺪ ‪BMK‬‬‫ﺘﯽ‬
‫ﺘﻔﺎده از آﻧ‬
‫ﺑﺎ اﺳ‬‫ﯿﻮن ﻓﻠﻮرﺳﺎﻧ ﺲ‬
‫ﯾﺰاﺳ‬
‫ﭘﻼر‬
‫ﺒﺎ ً ﺧﻄﯽﺗﺎ ‪600‬ﻧﺎﻧﻮﻣ‬
‫ﺘﺮ ﻧﺸﺎن ﻣﯽد ﻫﺪ‪.‬‬ ‫ﯾ‬‫ﭘﺎﺳﺦﺗﻘﺮ‬‫ﺘﺮ و‬
‫ﺘﺮ از ‪100‬ﻧﺎﻧﻮﻣ‬
‫ﯿﺺ ﮐﻤ‬
‫ﯾ ﺖﺗﺸﺨ‬
‫ﻣﺤﺪود‬

‫ﯾﺪه‬
‫ﯿﺮ آﻣﻮز ش د‬
‫ﭘﺮﺳﻨﻞ ﻏ‬‫ﯿﻢ اﻧﺠﺎم ﺷﻮد و ﻣﯽﺗﻮاﻧﺪﺗﻮﺳﻂ‬
‫ﺑﻞﺗﻨﻈ‬
‫ﺑﻞ ﺣﻤﻞ ﻗﺎ‬
‫ﯿﻖ ﻗﺎ‬
‫ﺑﺰار دﻗ‬
‫ﺘﻔﺎده از ا‬
‫ﺑﺎ اﺳ‬‫ﯿﺸﻨﻬﺎد ی ﻣﯽﺗﻮاﻧﺪ‬
‫ﭘ‬‫ﺟﺎﻟ ﺐﺗﻮﺟﻪ اﺳ ﺖ‪،‬ﺳﻨﺠ ﺶ‬
‫ﺘﻔﺎده ﺷﻮد‪.‬‬
‫ﯾﻊ ﻧﻘﻄﻪ ا ی اﺳ‬
‫ﺑﺮرﺳﯽ ﻫﺎ یﺳﺮ‬‫ﺑﺮا ی‬‫ﺑﺎزرﺳﯽﺳﻔﺎرﺷﯽﯾﺎ‬‫ﭘ ﺴ ﺖ ﻫﺎ ی‬‫در ﻣﺮز ﻫﺎ و‬

‫| ‪3558‬ﻣﻘﻌﺪ ی رو ش ﻫﺎ‪2012، 4، 3558-3564 ،‬‬ ‫ﯾﻦ ﻣﺠﻠﻪ ‪ª The Royal Society of Chemistry 2012‬اﺳ ﺖ‬
‫ا‬
‫‪Machine Translated by Google‬‬

‫ﻣﻌﺮﻓﯽ‬ ‫ﯿ ﺶﺳﺎز‬
‫ﭘ‬‫ﯾﻦ‪BMKiseda ،‬‬
‫ﺑﺮ ا‬‫ﭘﺎک ﮐﻨﻨﺪه ﻫﺎ ی ﻟﮑﻪﯾﺎﻓ ﺖ ﻣﯽ ﺷﻮد‪ .‬ﻋﻼوه‬‫ﭘﺎک ﮐﻨﻨﺪه ﻫﺎ و‬‫ﯿﻦ در‬
‫‪ BMK‬ﻫﻤﭽﻨ‬
‫ﺑﻪ ‪100‬درﺻﺪ‬‫ﯾﮏ‬
‫ﯿﻦ زده ﻣﯽ ﺷﻮد ﮐﻪ ﻧﺰد‬
‫ﯿﻦ اﺳ ﺖ‪.‬ﺗﺨﻤ‬
‫ﺘﺎﻣ‬
‫ﯿﻦ و ﻣ ﺖ آﻣﻔ‬
‫ﺘﺎﻣ‬
‫ﯿﺮﻗﺎﻧﻮﻧﯽ آﻣﻔ‬
‫ﯿﺪ ﻏ‬
‫ﺑﺮا یﺗﻮﻟ‬
‫ﺑﺎزار‬‫ﺑﺮا ی‬‫ﯿﻦ‬
‫ﺘﺎﻣ‬
‫ﺘﻨﺪ ﮐﻪ آﻣﻔ‬
‫ﯾﯽ ﻫ ﺴ‬
‫ﯾﻦ ﮐﺸﻮر ﻫﺎ‬
‫ﺗﺮ‬‫ﯾﮏ و ﻫﻠﻨﺪ ﻋﻤﺪه‬
‫ﺑﻠﮋ‬‫ﺘﺎن‪،‬‬
‫ﯾﯽ‪ ،‬ﻟﻬ ﺴ‬
‫ﭘﺎ‬
‫ﯿﺎن ﮐﺸﻮر ﻫﺎ ی ارو‬
‫در ﻣ‬
‫ﺘﻪ ﻣﯽ ﺷﻮد‪.‬‬
‫ﯿﺮﻗﺎﻧﻮﻧﯽ ‪BMK‬ﺳﺎﺧ‬
‫ﺑﻊ ﻏ‬
‫ﯿﻦ از ﻣﻨﺎ‬
‫ﺘﺎﻣ‬ ‫ﺒﺎ ً ‪10‬درﺻﺪ ﻣ‬
‫ﺘﺎﻣﻔ‬ ‫ﯾ‬‫ﯿﻦ وﺗﻘﺮ‬
‫ﺘﺎﻣ‬
‫آﻣﻔ‬
‫ﯾﺸﮕﺎه ﻣﺨﻔﯽ‬
‫ﯾﻦ آزﻣﺎ‬
‫ﯿﺪ ﻣﯽﺷﻮد‪ .‬ﭼﻨﺪ‬
‫ﯿﺮﻗﺎﻧﻮﻧﯽ در آﻧﻬﺎﺗﻮﻟ‬
‫ﻏ‬

‫ﯿﺪ‬
‫ﯿﺮ ی ازﺗﻮﻟ‬
‫ﺑﻪ ﻣﻨﻈﻮر ﺟﻠﻮﮔ‬‫ﯿﻞ ﻣﯽ ﺷﻮد‪.‬‬
‫ﺘﺰ ‪ Leuckart1‬ﻫﺮﺳﺎلﺗﻌﻄ‬
‫ﺘﻔﺎده ازﺳﻨ‬
‫ﺑﺎ اﺳ‬‫ﯿﻦ‬
‫ﺘﺎﻣ‬
‫ﯿﺪ آﻣﻔ‬
‫ﺗﻮﻟ‬
‫ﯾﯽ ﮐﻪ‬
‫ﯾﻖ ﮐﺸﻮر ﻫﺎ‬
‫ﯿﺮﻗﺎﻧﻮﻧﯽ را از ﻃﺮ‬
‫ﯾﻞ ﻏ‬
‫ﺑﻪ ﻣﻨﻈﻮر ﮔﻤﺮاه ﮐﺮدن ﻣﻘﺎﻣﺎ ت ﻣﺠﺮ ی ﻗﺎﻧﻮن‪ ،‬ﻣﺠﺮﻣﺎن اﻏﻠ ﺐﺗﺤﻮ‬
‫ﯿﺮﻗﺎﻧﻮﻧﯽ و »ﺧﺮدهﻓﺮوﺷﺎن«‬
‫ﯿﺪﮐﻨﻨﺪﮔﺎن ﻏ‬
‫ﺑﻪﺗﻮﻟ‬‫ﯿﺮﻗﺎﻧﻮﻧﯽ ﻣﻮاد ﻣﺨﺪر‪ ،‬ﻣﻘﺎﻣﺎ ت ﻣﺠﺮ ی ﻗﺎﻧﻮنﺗﻼ ش ﻣﯽﮐﻨﻨﺪﺗﺎ‬
‫ﻏ‬
‫ﯾﺮ ‪BMK‬ﻗﺎﭼﺎق درﯾﮏ‬
‫ﺘﻨﺪ‪،‬ﺳﺎزﻣﺎﻧﺪ ﻫﯽ ﻣﯽ ﮐﻨﻨﺪ‪ .‬ﻣﻘﺎد‬
‫ﯿﺴ‬‫ﺒﻂ ﻧ‬
‫ﺗ‬‫ﯿﺮﻗﺎﻧﻮﻧﯽ ﻣﺮ‬
‫ﯿﺪ ﻣﻮاد ﻣﺨﺪر ﻏ‬ ‫ﻣﻌﻤﻮﻻ ً‬
‫ﺑﻪﺗﻮﻟ‬
‫ﺘﻪ‬
‫ﯿﺰ ﺷﻨﺎﺧ‬
‫ﺘﻮن )‪(BMK‬ﻧ‬
‫ﯿﻞ ﮐ‬
‫ﺘ‬‫ﯾﻞ ﻣ‬
‫ﺑﻨﺰ‬‫ﺑﻪ ﻧﺎم‬‫ﭘﺎﻧﻮن ‪(P-2-P)،‬ﮐﻪ‬
‫ﭘﺮو‬
‫ﯿﻞ‪-2-‬‬
‫ﯿ ﺶﺳﺎز اﺻﻠﯽ ﻣﻮاد ﻣﺨﺪر‪1 ،‬ﻓﻨ‬
‫ﭘ‬
‫ﺘﻪ اﺳ ﺖ ﮐﻪ در آن‬
‫ﯿﺮ اﺳ ﺖ‪ .‬در ﻣﻮرد ﻧﺤﻮه ﻋﻤﻠﮑﺮد‪ ،‬ﻣﻮارد ی وﺟﻮد داﺷ‬
‫ﺘﻐ‬‫ﯿﻠﻮﮔﺮمﺗﺎ ﭼﻨﺪﺗﻦ ﻣ‬
‫ﻣﺤﻤﻮﻟﻪ از ﭼﻨﺪ ﮐ‬
‫ﯿﺪا ﮐﻨﻨﺪ‪.1 .‬‬
‫ﭘ‬‫ﺘﺮﺳﯽ‬
‫ﻣﯽﺷﻮد‪ ،‬دﺳ‬
‫ﺑﻮدهاﻧﺪ ﮐﻪ در اﺳﻨﺎد ﮔﻤﺮﮐﯽﯾﺎ‬ ‫ﺘﻔﺎده ﻣﯽﮐﻨﻨﺪ ﮐﻪ ﮐﺎﻣ ﻼ ً‬
‫ﺑﯽاﻃﻼع‬ ‫ﯾﯽ از ﻧﺎم ﺷﺮﮐ ﺖ ﻫﺎ ی ﻣﻮﺟﻮد اﺳ‬
‫ﺳﺎزﻣﺎن ﻫﺎ ی ﺟﻨﺎ‬
‫ﯾﯽ‬
‫ﺜﺮ ﻣﻮارد‪ ،‬ﻣﺠﺮﻣﺎن از ﻧﺎم ﺷﺮﮐ ﺖ ﻫﺎ‬
‫ﺑﺮده ﺷﺪهاﻧﺪ‪ .‬اﻣﺎ در اﮐ‬‫ﯿﺮﻧﺪه اﺻﻠﯽ ﻧﺎم‬
‫ﺑﻪﻋﻨﻮان ﮔ‬‫ﻧﺎﻣﻪ ﻫﺎ ی ﺣﻤﻞ و ﻧﻘﻞ‬
‫ﯿﺪ ﺷﺪه ﻣﻤﮑﻦ اﺳ ﺖ از‬
‫ﯿﺮﻗﺎﻧﻮﻧﯽﺗﻮﻟ‬
‫ﺘﯽ اﮔﺮ رﻧﮓ ‪BMK‬ﻏ‬
‫ﺑﻪ زرد اﺳ ﺖ‪ ،‬ﺣ‬‫ﯾﻞ‬
‫ﺑﯽ رﻧﮓﯾﺎ ﮐﻤﯽ ﻣﺎ‬‫ﯾﻌﯽ‬
‫‪BMK‬ﻣﺎ‬
‫ﯿﺪﮐﻨﻨﺪه ‪BMK‬وارد ﻣﯽﮐﺮدﻧﺪ و ﮐﺎﻻ ﻫﺎ ی اﻇﻬﺎر ﺷﺪه در‬
‫ﺑﻪ ﻃﻮر ﻣﻨﻈﻢ ﮐﺎﻻ از ﮐﺸﻮر ﻫﺎ یﺗﻮﻟ‬‫ﺘﻔﺎده ﻣﯽﮐﺮدﻧﺪ ﮐﻪ‬
‫اﺳ‬
‫ﯿﻦ‬
‫ﺘﺎﻣ‬
‫ﺑﻪﺳﺎﺧ ﺖ آﻣﻔ‬‫ﯾﯽ‬
‫ﯾﯽ و دارو‬
‫ﯿﺎ‬‫ﯿﻤ‬
‫ﯾﻊ ﺷ‬
‫ﺘﻔﺎده ﻣﺸﺮوع از ‪BMK‬در ﺻﻨﺎ‬
‫ﺑﺎﺷﺪ‪ .‬اﺳ‬‫ﺘﻔﺎو ت‬
‫ﯿﺮه ﻣ‬
‫زردﺗﺎ ﻗﻬﻮها یﺗ‬
‫ﺑﺎ‬‫ﺑﻖ‬
‫اﺳﻨﺎد ﮔﻤﺮﮐﯽ ﻣﻄﺎ‬
‫ﯾﮑﺎل ﻫﺎ ی‬
‫ﯿﺪ راد‬
‫ﺗﻮﻟ‬
‫ﺘﻔﺎده ﻗﺎﻧﻮﻧﯽ اﺿﺎﻓﯽ از ‪BMK‬‬
‫ﺘﻘﺎ ت آﻧﻬﺎ ﻣﺤﺪود ﻣﯽ ﺷﻮد‪.‬ﯾﮏ اﺳ‬
‫ﯿﻦ و ﻣﺸ‬
‫ﺘﺎﻣ‬ ‫ﯾﺤﻪ‬
‫ﺖ آﻣﻔ‬ ‫وراﻣ‬
‫ﯾﺎﻻ ت‬
‫ﯿﻪ و ا‬
‫ﺘﻔﺎده ﻣﯽ ﺷﻮد‪ .‬درﺗﺮﮐ‬
‫ﯾﻦ اﺳ‬
‫ﯿﻞ ﻫﮕﺰدر‬
‫ﭘ‬‫ﭘﺮو‬‫ﯿﺪ‬
‫ﺑﺮا یﺗﻮﻟ‬‫ﺑﻪ ﺧﻮد‬
‫ﺑﻪ ﻧﻮ‬‫ﯿﺰ اﺳ ﺖ ﮐﻪ‬
‫ﺘﻮﻟ‬
‫ﯾﻖ ﻓ‬
‫ﯾﻞ از ﻃﺮ‬
‫ﺑﻨﺰ‬
‫ﺘﺤﺪه‪،‬‬
‫ﻣ‬

‫ﺗﻮﮔﺮاﻓﯽ ﮔﺎز ی‪NMR ،‬‬

‫ﺑﺮ رو ش ﻫﺎ ی ﮐﺮوﻣﺎ‬‫ﺘﻨﯽ‬
‫ﺒ‬‫ﺗﺎ ً ﻣ‬
‫ﯿﺺ ‪BMK‬ﻋﻤﺪ‬
‫ﺑﺮا یﺗﺸﺨ‬‫ﺘﻔﺎده‬
‫در واﻗﻊ‪ ،‬رو ش ﻫﺎ ی ﻣﻮرد اﺳ‬
‫ﺗﻮﺳﻌﻪ‬
‫ﯿﻞ ﮐﺮدن ﻧﺎﺧﺎﻟﺼﯽ ﻫﺎ ی ‪BMK‬‬
‫ﭘﺮوﻓ‬‫ﺑﺮ‬‫ﺘﻨﯽ‬
‫ﺒ‬ ‫ﯿﺮا ً رو ش ﺟﺪ‬
‫ﯾﺪ ی ﻣ‬ ‫ﺘﻨﺪ ‪ .‬اﺧ‬
‫ﯿﺮ اﺿﺎﻓﯽ ﻫ ﺴ‬
‫ﯿﺰ ﻫﺎ ی وﻗ ﺖﮔ‬
‫و آﻧﺎﻟ‬
‫ﺘﺰ ﺷﺪه اﺳ ﺖ‬
‫ﯾﻦ رو ش اﺟﺎزه ﻣﯽ د ﻫﺪﺗﺎ ﻣﺸﺨﺺ ﺷﻮد ‪BMK‬از ﮐﺪام ﮐﺸﻮرﺳﻨ‬
‫ﺘﻪ اﺳ ﺖ‪ .‬ا‬
‫ﯾﺎﻓ‬

‫ﺑﺮا یﺗﻮﺳﻌﻪ وﺟﻮد دارد‬‫ﯾﻬﯽ اﺳ ﺖ ﮐﻪﯾﮏ ﺿﺮور ت ﻓﻮر ی‬

‫ﺑﺪ‬‫ﺑﻪ ﻧﻈﺮ ﻣﯽ رﺳﺪ‬
‫ﯿﻨﻮ ‪111، 80131‬‬
‫ﺘﻠ‬‫ﺘﺮو ﮐﺎﺳ‬
‫ﯿ‬‫ﭘ‬‫ﯾﻖ‬
‫ﯿﻦ‪CNR، ،‬از ﻃﺮ‬
‫ﺗﺌ‬‫ﭘﺮو‬‫ﯿﻤﯽ‬
‫ﯿﻮﺷ‬
‫ﺑ‬‫ﯾﺸﮕﺎهﺳﻨﺠ ﺶ ﻣﻮﻟﮑﻮﻟﯽ‪ ،‬ﻣﻮﺳ ﺴﻪ‬
‫آزﻣﺎ‬
‫ﯾﻊ ‪BMK.‬‬
‫ﯿﺺﺳﺮ‬
‫ﺑﺮا یﺗﺸﺨ‬‫ﯾﺪ آﺳﺎن‬
‫رو ش ﺟﺪ‬
‫ﺗﻠﻔﻦ‪Tiburtina، :‬‬
‫ﯿﮑﯽ‪s.dauria@ ibp.cnr.it; :‬ﻓﮑ ﺲ‪+39-0816132277; :‬‬
‫ﺘﺮوﻧ‬
‫ﭘ ﺴ ﺖ اﻟﮑ‬‫ﯿﺎ‪.‬‬
‫ﺘﺎﻟ‬
‫ﯾ‬‫ﭘﻞ‪ ،‬ا‬
‫ﻧﺎ‬
‫ﺘﻨﺪ‪.‬‬
‫ﺑﻪ ﻫﻤﺎن اﻧﺪازه در ﮐﺎر ﻣﺸﺎرﮐ ﺖ داﺷ‬‫ﯾ ﺴﻨﺪﮔﺎن‬
‫ﯾﻦ ﻧﻮ‬
‫ﯿﺎ †ا‬
‫ﺘﺎﻟ‬
‫ﯾ‬‫‪+39-0816132250 bSelex-SI، Via‬رم‪ ،‬ا‬ ‫ﺑﺮا ی‬‫ﯾﺪ را‬
‫ﯿﻮن ﺟﺪ‬
‫ﯾﺰاﺳ‬
‫ﭘﻼر‬‫ﯾﻦ ﮐﺎر ﻣﺎﯾﮏﺳﻨﺠ ﺶ ﻓﻠﻮرﺳﺎﻧ ﺲ‬
‫در ا‬
‫ﺘﻔﺎده ازﯾﮏ ﻣﻮرد ﺧﺎص اﺳ ﺖ‬
‫ﺑﺮ اﺳﺎس اﺳ‬‫ﯾﻦﺳﻨﺠ ﺶ‬
‫ﯿﺺ ‪BMK‬ا‬
‫ﺗﺸﺨ‬

‫ﯿﺺ‬
‫ﯿ ﺖ‪ .‬ﺣﺪﺗﺸﺨ‬
‫ﯿﻪ آﻧﺎﻟ‬
‫ﯿﺪ ﺷﺪه ﻋﻠ‬
‫ﺘﺼﺎﺻﯽﺗﻮﻟ‬
‫ﺑﺎد ی ﻫﺎ ی اﺧ‬‫ﺘﯽ‬
‫ﺘﺰ ﺷﺪه و آﻧ‬
‫ﺘﻖ ‪BMK‬ﻓﻠﻮرﺳﺎﻧ ﺲﺳﻨ‬
‫ﻣﺸ‬ ‫ﺘﺎ ت‬
‫ﯿﻞ اﺳ‬
‫ﺗ‬‫ﯾﻪ ﻧﺎزک ‪ (N-‬ﻫﮕﺰان‪-‬ا‬
‫ﺗﻮﮔﺮاﻓﯽ ﻻ‬
‫ﺑﺎ ﮐﺮوﻣﺎ‬‫ﺑﻪ ﻣﺪ ت ‪2‬ﺳﺎﻋ ﺖ‪ .‬واﮐﻨ ﺶ‬
‫ﺘﺎﻧﻮل )‪(1: 1: 4‬‬
‫ﯾﻦ‪H2O- -‬ﻣ‬
‫ﯾﺪ‬‫ﯿﺮ‬
‫ﭘ‬

‫ﯾ ﺶ ﻫﺎ ی ﻣﺎ‬
‫ﺑﺮا ی آزﻣﺎ‬‫ﺘﻔﺎده‬
‫ﺘﮕﺎه ﻣﻮرد اﺳ‬
‫ﯾﻦ اﺳ ﺖ ﮐﻪ ﮐﻞ دﺳ‬
‫ﺘﻪ ﻣﻬﻢ ا‬
‫ﺘﺮ اﺳ ﺖ‪ .‬ﻧﮑ‬
‫)‪(LOD‬ﺳﻨﺠ ﺶ ‪50‬ﻧﺎﻧﻮﻣ‬ ‫ﭘﻮر ﺣﺬف ﺷﺪﻧﺪ‪.‬‬
‫ﺗﺎ‬
‫ﯿﺮﺗﻮﻟﻮﺋﻦﺗﻮﺳﻂﯾﮏ رو‬
‫ﺑﺎﺗﻘﻄ‬‫ﯾﺮ ﺣﻼل ﻫﺎ‬
‫ﯾﻦ وﺳﺎ‬
‫ﯾﺪ‬‫ﯿﺮ‬
‫ﭘ‬‫ﺒﺎل ﺷﺪ‪.‬‬
‫‪8: 2 +‬ﻗﻄﺮه )‪HCOH‬دﻧ‬

‫ﯿﻮن را در‬
‫ﯾﺰاﺳ‬
‫ﭘﻼر‬‫ﯿﺮا ت ﻓﻠﻮرﺳﺎﻧ ﺲ‬
‫ﯿ‬‫ﺗﻮاﻧﺪﺗﻐ‬
‫ﯾﻦ ﺷﻮد‪ ،‬ﮐﻪ ﻣﯽ‬
‫ﯾﮕﺰ‬
‫ﺘﮕﺎه ﻧﻮر ی ﮐﻮﭼﮏ و ارزان ﺟﺎ‬
‫ﺑﺎﯾﮏ دﺳ‬‫ﺗﻮاﻧﺪ‬
‫ﻣﯽ‬ ‫ﺘﺮ د ی‬
‫ﯿ‬‫ﯿﻠﯽﻟ‬
‫ﺑﺎ ‪10‬ﻣ‬‫ﯾﺎﻓ ﺖ ﺷﺪ و‬
‫ﺑﺎز‬
‫ﺑﺎ ‪NaOH‬‬
‫ﺘﺮ ‪H2O‬در ‪pH 9.00‬‬
‫ﯿ‬ ‫ﻣﺤﺼﻮل واﮐﻨ ﺶ ﻣﺠﺪدا ً در ‪5‬ﻣ‬
‫ﯿﻠﯽﻟ‬

‫ﺑﺎد ی ﻫﺎ ی ﺿﺪ ‪BMK‬آﺷﮑﺎر ﮐﻨﺪ‪.‬‬

‫ﺘﯽ‬‫ﺘﻘﺎ ت ‪BMK‬و آﻧ‬
‫ﯿﻦ ﻣﺸ‬
‫ﺑ‬‫ﺑﻞ‬
‫ﺘﻘﺎ‬
‫ﺛﺮ ﻣ‬
‫ا‬ ‫ﺘﺮ د ی‬
‫ﯿ‬‫ﯿﻠﯽ ﻟ‬
‫ﯿﺪ ی ﺷﺪ و ﻣﺤﺼﻮل در ‪3 15‬ﻣ‬
‫ﺑﻪ ‪pH 3.0‬اﺳ‬
‫ﺑﺎ ‪HCl‬‬‫ﺑﯽ‬
‫ﭙ ﺲ ﻓﺎز آ‬
‫ﺘﻪ ﺷﺪ‪.‬ﺳ‬
‫ﺘﺎن ﺷ ﺴ‬
‫ﮐﻠﺮوﻣ‬

‫ﺑﻤﺎﻧﺪ‪.‬‬‫ﺑﺎﻗﯽ‬‫ﯿﺮ ﺷﺪﺗﺎﯾﮏ ﻣﺤﺼﻮل روﻏﻨﯽ‬

‫ﺘﺨﺮاج ﺷﺪ‪ .‬ﺣﻼل رو ی ‪NaSO4‬ﺧﺸﮏ ﺷﺪ و در ﺧﻼءﺗﻘﻄ‬
‫ﺘﺎن اﺳ‬
‫ﮐﻠﺮوﻣ‬

‫ﺑﺮ رو ی‬‫ﺗﻮﮔﺮاﻓﯽ ﻓﻠ ﺶ‬
‫ﯿﻦ‪ ،‬ﮐﺮوﻣﺎ‬
‫ﯿﻞ آﻣ‬
‫ﺘﻮﮐ ﺴ‬
‫ﺑﻮﮐ ﺴﯽ ﻣ‬
‫ﺒﯽ واﮐﻨ ﺶ و اﺿﺎﻓﯽ ﮐﺮ‬
‫ﺑﻪ ﻣﻨﻈﻮر ﺣﺬف ﻣﺤﺼﻮﻻ ت ﺟﺎﻧ‬

‫ﺑﺎ ﻗﻄﺮه ‪CH2Cl2-CH3OH 9 : 1 + HCOOH‬‬‫ﺘﺮ(‬

‫ﯿﻠﯽ ﻣ‬
‫ﯿﮑﺎژل ‪60 M 0.04-0.0063‬ﻣ‬
‫ﯿﻠ‬‫ﯿﮑﺎ )ﺳ‬
‫ﯿﻠ‬‫ﺘﻮنﺳ‬
‫ﯾﮏﺳ‬
‫ﺗﺰ‪ppm (s، 2H)، d 7.40- 7.70 ppm (m، 5H). ،‬‬
‫ﺑﺎزده ﺟﺪا ﺷﺪه )‪45٪‬اﻧﺠﺎم ﺷﺪ‪1H NMR (400 .‬ﻣﮕﺎ ﻫﺮ‬
‫)‬

‫‪CDCl3): d 1.82 ppm (s، 3H)، d 3.48 ppm (s، 1H)، d 3.76-3.78 ppm (m، 1H)، d 4.67‬‬
‫ﻣﻮاد و رو ش ﻫﺎ‬

‫ﯾﻞ‬
‫ﺑﻨﺰ‬‫ﯿﻦ‪،‬‬
‫ﯿﻞ آﻣ‬
‫ﺘﻮﮐ ﺴ‬
‫ﺑﻮﮐ ﺴﯽ ﻣ‬
‫ﯾﺪ ﮐﺮ‬
‫ﯿﺪروﮐﻠﺮا‬
‫ﯿﻦﺳﺮم ﮔﺎو ی ؛‪(BSA‬ﮐ ﺴﺮ ی ‪ V)،‬ﻫﻤﯽ ﻫ‬
‫ﺒﻮﻣ‬
‫ﺑﻮدﻧﺪ و از ‪1-[3-(Dimethylamino)-propyl]-3- ethylcarbodiimide (EDC)،‬آﻟ‬‫ﺑﺮﺧﻮردار‬‫ﯿ ﺖﺗﺠﺎر ی ﻣﻮﺟﻮد‬
‫ﯿﻔ‬‫ﯾﻦ ﮐ‬
‫ﺗﺮ‬‫ﺑﺎﻻ‬‫ﻫﻤﻪ ﻣﻌﺮف ﻫﺎ از‬
‫ﻣﺎﻧﻨﺪ‬ ‫ﯾﺪار ی ﺷﺪ‪.‬‬
‫ﺧﺮ‬
‫ﺷﺪه‪.‬‬
‫‪Biotium‬‬
‫ﺘﺮوﺳﻠﻮﻟﺰ ‪Protran‬ﺷﺮﮐ ﺖ اﺧﺬ‬
‫ﯿ‬‫ﺘﻘﺎل ﻧ‬
‫ﭘﺮو ب ﻓﻠﻮرﺳﻨ ﺖ ‪CF488A‬از ﻏﺸﺎ ی اﻧ‬‫ﯾﺪار ی ﺷﺪ‪.‬‬
‫ﯾﭻ ﺧﺮ‬
‫ﯿﮕﻤﺎ آﻟﺪر‬
‫ﺑﺎﻓﺮ ﻫﺎ ی ‪EAH Sepharose 4B‬ازﺳ‬‫ﯾﻦ و‬
‫ﺘﻔﺎده ﮐﺮدﻧﺪ‪ .‬رز‬
‫ﺘﻮن )‪(BMK‬اﺳ‬
‫ﯿﻞ ﮐ‬
‫ﺘ‬‫ﻣ‬

‫ﯿﻒ ‪NMR‬‬
‫ﺑﻮد‪ .‬ﻃ‬
‫ﯾﻪ( از ‪Abcam‬‬
‫ﺛﺎﻧﻮ‬‫ﺑﺎد ی‬‫ﺘﯽ‬
‫ﺑﻪ ﺧﺮﮔﻮ ش ﻣﺰدوج ‪)IgG-HRP‬آﻧ‬‫ﺑﺰ‬‫ﭘﻠﯽ ﮐﻠﻮﻧﺎل‬‫ﺘﻔﺎده ﺷﺪﻧﺪ‪.‬‬
‫ﺑﻼ ت اﺳ‬‫ﺘﺮن‬
‫ﯾ ﺶ ﻫﺎ ی وﺳ‬
‫‪Amersham‬در آزﻣﺎ‬ ‫‪Biosciences‬‬
‫‪BSA‬‬ ‫ﮐﻨﮋوﮔﻪاز)‪(BMK-BSA‬‬
‫‪Schleicher‬و ‪ECL‬‬
‫ﺘﺰ‬
‫ﺳﻨ‬ ‫ﯿﺺ ‪& Schuell‬‬
‫ﻣﻌﺮف ﻫﺎ یﺗﺸﺨ‬

‫ﺒ ﺖ ﺷﺪ‪.‬‬‫ﺛ‬ ‫ﺗﺰ(‬
‫ﺘﻖ ‪BMK‬رو ی ‪Varian Gemini 200 (200‬ﻣﮕﺎ ﻫﺮ‬ ‫ﻣﺸ‬
‫ﯿﻦ‬
‫ﺒﻮﻣ‬
‫ﺑﻪ آﻟ‬
‫ﭘﻠﯽ ﮐﻠﻮﻧﺎل‪BMK-oxime ،‬‬‫ﺑﺎد ی‬‫ﺘﯽ‬‫ﯿﺺ آﻧ‬ ‫ﯾﻨﺪﺗﺸﺨ‬ ‫ﯿﻦ ﺣﺎﻣﻞ در ﻓﺮآ‬
‫ﺗﺌ‬‫ﭘﺮو‬‫ﯿﺮ ی ازﺗﺪاﺧﻞ‬
‫ﺑﺮا ی ﺟﻠﻮﮔ‬

‫ﺑﺎﯾﮏ‬‫ﺗﺎﻧﻮل ﺣﻞ ﺷﺪ و‬
‫ﯿﻠﯽ ﻣﻮل ‪BMK-oxime‬در ا‬
‫ﺘﻔﺎده ﺷﺪ‪0.484 :‬ﻣ‬
‫ﯾﺮ اﺳ‬
‫ﺳﺮم )‪(BSA‬ﮐﻮﻧﮋوﮔﻪ ﺷﺪ‪ .‬رو ش ز‬

‫ﯿﻖ‬
‫ﯿﻠﯽ ﻣﻮﻻر در ‪pH 6‬رﻗ‬
‫ﺑﺎﻓﺮ ﻓ ﺴﻔﺎ ت ‪10‬ﻣ‬‫ﺑﺎ‬‫ﺘﺮ‬
‫ﯿ‬‫ﯿﻠﯽ ﻟ‬
‫ﯿﻠﯽ ﻣﻮل ‪EDC.‬ﻣﺤﻠﻮلﺗﺎ ‪840‬ﻣ‬
‫ﺑﯽ ‪4.84‬ﻣ‬
‫ﻣﺤﻠﻮل آ‬
‫ﯿﻨﻮﮐ ﺴﯽ(‪.‬‬
‫ﯾﻦ آﻣ‬
‫ﯿﺪ‬‫ﯿﻠ‬
‫ﺗ‬‫ﯿﻞ‪-‬ا‬
‫ﯿﻞ‪-2-‬ﻓﻨ‬
‫ﺘ‬‫ﯿﮏ ‪(1-‬ﻣ‬
‫ﺘ‬‫ﯿﺪ اﺳ‬
‫ﺘﺰ اﺳ‬
‫ﺳﻨ‬
‫ﺑﺎ ‪4.84‬ﻧﺎﻧﻮﻣﻮﻻر ‪BSA‬ﻣﺤﻠﻮل در ‪160‬‬‫ﯾ ﺖ ﻣﺤﻠﻮل‬
‫ﺑﻪ ﺷﺪ‪ .‬در ﻧﻬﺎ‬
‫ﺗﺎق اﻧﮑﻮ‬
‫ﯿﻘﻪ در دﻣﺎ ی ا‬
‫ﺑﻪ ﻣﺪ ت ‪20‬دﻗ‬‫ﺷﺪ و‬
‫ﺑﻮﮐ ﺴﯽ‬
‫ﺑﺎ ده ﻣﻌﺎدل از ‪O-‬ﮐﺮ‬‫ﯿﻠﯽ ﻣﻮل(‬
‫ﺘﺮ‪4.56 ،‬ﻣ‬
‫ﯿ‬‫ﯿﻠﯽ ﻟ‬
‫ﯾﭻ‪612 ،‬ﻣ‬
‫ﯿﮕﻤﺎ آﻟﺪر‬
‫ﺘﻮن ‪(99٪‬ﺳ‬
‫ﯿﻞ ﮐ‬
‫ﺘ‬‫ﯾﻞ ﻣ‬
‫ﺑﻨﺰ‬
‫ﺑﻪ ﺷﺪ‪.‬‬
‫ﺗﺎقﺗﺤ ﺖ اﻧﮑﻮ‬
‫ﺑﻪ ﺷﺪ‪ .‬ﻣﺨﻠﻮط واﮐﻨ ﺶ در دﻣﺎ ی ا‬
‫ﯿﻠﯽﻣﻮﻻر در ‪pH 6‬اﻧﮑﻮ‬
‫ﺑﺎﻓﺮ ﻓ ﺴﻔﺎ ت ‪10‬ﻣ‬‫ﺘﺮ‬
‫ﯿ‬‫ﯿﻠﯽﻟ‬
‫ﻣ‬
‫ﯿﻠﯽ ﻣﻮل رﻓﻠﮑ ﺲ‬
‫ﯿﻠﯽ ﻣﻮل( در ‪6‬ﻣ‬
‫ﯾﭻ‪5.00 ،‬ﮔﺮم‪45.7 ،‬ﻣ‬
‫ﯿﮕﻤﺎ آﻟﺪر‬
‫ﯾﺪ ‪(99٪‬ﺳ‬
‫ﯿﺪروﮐﻠﺮا‬
‫ﯿﻦ ﻫﻤﯽ ﻫ‬
‫ﯿﻞ آﻣ‬
‫ﺘﻮﮐ ﺴ‬
‫ﻣ‬

‫ﺷﺪ‪.‬‬

‫ﯾﻦ ﻣﺠﻠﻪ ‪ª The Royal Society of Chemistry 2012‬اﺳ ﺖ‬

‫ا‬ ‫ﻣﻘﻌﺪ ی رو ش ﻫﺎ‪2012، 4، 3558-3564 | 3559 ،‬‬
‫‪Machine Translated by Google‬‬

‫ﺑﻪ ﻣﺪ ت ‪4‬روز‬
‫ﯿﻠﯽ ﻣﻮﻻر در ‪pH 7.4‬‬
‫ﺑﺎﻓﺮ ﻓ ﺴﻔﺎ ت ‪10‬ﻣ‬‫ﺘﺮ‬
‫ﯿ‬‫ﺑﺮ ‪0.5‬ﻟ‬
‫ﺑﺮا‬‫ﭙ ﺲ در‬
‫ﻫﻢ زدن ﻣﺪاوم وﺳ‬ ‫ﯿﻦ ﺷﺪ‪.‬‬
‫ﯿ‬‫ﺗﻌ‬
‫ﺘﻔﺎده از ‪31% ¼ 14‬‬
‫ﺑﺎ اﺳ‬‫ﺘﺮ‪،‬‬
‫ﯿﺮ ی ﺟﺬ ب در ‪l ¼ 278‬ﻧﺎﻧﻮﻣ‬
‫ﺑﺎ اﻧﺪازه ﮔ‬‫ﺘﺮ ی‬
‫ﺘﻮﻣ‬
‫ﺘﺮوﻓ‬
‫ﭙﮑ‬‫اﺳ‬
‫ﯿﺰ ﺷﺪ‪.‬‬
‫ﯾﺎﻟ‬
‫ﺑﺎﻓﺮ د‬‫ﯿﺮا ت روزاﻧﻪ‬
‫ﯿ‬‫ﺑﺎﺗﻐ‬
‫ﺑﺎد ی و ﺧﺎﻟﺺﺳﺎز ی ‪IgG‬‬‫ﺘﯽ‬
‫ﯿﺪ آﻧ‬
‫ﺗﻮﻟ‬ ‫ﺑﻼ ت‬‫ﺘﺮن‬
‫ﯾﺸﺎ ت وﺳ‬
‫آزﻣﺎ‬

‫ﯾﻤﻦ‬
‫ﭘ ﺲ از دوره ا‬‫ﯾﻤﻦﺳﺎز ی ﺷﺪ‪.‬‬
‫ﯾﻖ داﺧﻞ ﺟﻠﺪ ی ا‬
‫ﺑﺎﺗﺰر‬‫ﺘﺎﻧﺪارد‬
‫ﺗﮑﻞ اﺳ‬
‫ﭘﺮو‬‫ﺒﻖ‬
‫ﯾﮏ ﺧﺮﮔﻮ ش ﻃ‬ ‫ﯿﻞ‬
‫ﯾﻢ دودﺳ‬
‫ﺘﺮوﻓﻮرز ژلﺳﺪ‬
‫ﺑﺎ اﻟﮑ‬‫ﯿﺮ ی ﺷﺪﻧﺪ‪،‬‬
‫ﺑﺎرﮔ‬‫ﯿﻦ(‬
‫ﺗﺌ‬‫ﭘﺮو‬‫ﯿﻠﯽ ﮔﺮم از ﻫﺮ‬
‫ﯿﻦ ﻫﺎ ‪(4.0‬ﻣ‬
‫ﺗﺌ‬‫ﭘﺮو‬
‫ﯿﻮژ ﺷﺪﺗﺎﺳﻠﻮل ﻫﺎ ی ﺧﻮﻧﯽ ازﺳﺮم‬
‫ﯾﻔ‬‫ﺘﺮ‬
‫ﺑﺎﻧﯽ ﺷﺪ و ﺧﻮن آن ﺟﻤﻊ آور ی وﺳﺎﻧ‬
‫ﺳﺎز ی‪ ،‬ﺧﺮﮔﻮ ش ﻗﺮ‬ ‫ﺒﻪ در دﻣﺎ ی ‪4‬درﺟﻪ‬
‫ﭙ ﺲﯾﮏ ﺷ‬
‫ﯿﺪ )‪(12% SDS-PAGE‬ﺟﺪا ﺷﺪﻧﺪ وﺳ‬
‫ﯾﻞ آﻣ‬
‫ﭘﻠﯽ آﮐﺮ‬
‫ﺳﻮﻟﻔﺎ ت‪-‬‬
‫ﯿﻠﯽ ﻣﻮﻻر ‪Tris-HCl‬در ‪pH 7.0‬‬
‫ﺘﺮ ی ازﺳﺮم ﺧﺮﮔﻮ ش ‪1: 1‬در ‪50‬ﻣ‬
‫ﯿ‬‫ﯿﻠﯽ ﻟ‬
‫ﺟﺪا ﺷﻮﻧﺪ‪ .‬ﻧﻤﻮﻧﻪ ‪2.0‬ﻣ‬ ‫ﺑﺎﻓﺮ ﻣ ﺴﺪود ﮐﻨﻨﺪه‬‫ﺘﺮ از‬
‫ﯿ‬‫ﯿﻠﯽ ﻟ‬
‫ﺘﻘﻞ ﺷﺪﻧﺪ‪ .‬ﻏﺸﺎءﺗﻮﺳﻂ ‪50‬ﻣ‬
‫ﯿﮕﺮاد رو ی ﻏﺸﺎ ی ‪PVDF‬ﻣﻨ‬
‫ﺘ‬‫ﺳﺎﻧ‬
‫ﯾﻦ )‪4 Fast Flow (GE Healthcare‬‬
‫ﯿﻦ رز‬
‫ﺗﺌ‬‫ﭘﺮو‬‫ﺘﺮ‬
‫ﯿ‬‫ﯿﻠﯽ ﻟ‬
‫ﯿﻖ ﺷﺪ و رو ی ‪0.5‬ﻣ‬
‫ﺗﺼﺎل( رﻗ‬
‫ﺑﺎﻓﺮ ا‬
‫)‬ ‫ﭘ ﺲ ازﺳﻪ‬‫ﺗﺎق ﻣ ﺴﺪود ﺷﺪ‪.‬‬
‫ﺑﻪ ﻣﺪ ت ‪1‬ﺳﺎﻋ ﺖ در دﻣﺎ ی ا‬‫ﺑﯽ(‬
‫ﺑﺪون ﭼﺮ‬‫ﯿﺮ‬
‫‪(TBS‬ﺣﺎو ی ‪5٪‬ﺷ‬
‫ﺑﺎ‬
‫ﺑﺨ ﺶ ‪IgG‬‬‫ﺘﻮراﻟﻌﻤﻞﺳﺎزﻧﺪه ﺧﺎﻟﺺ ﺷﺪ‪.‬‬
‫ﺒﻖ دﺳ‬
‫‪A SepharoseTM‬اﻋﻤﺎل ﺷﺪ‪ .‬ﮐ ﺴﺮ ‪IgG‬ﻃ‬ ‫ﺘﯽ‬
‫ﺑﺎﯾﮏ آﻧ‬‫ﺘﺮ‬
‫ﯿﻠ‬‫ﺘﺸﻮ(‪ ،‬ﻓ‬
‫ﯿﻘﻪ در ﻫﺮ ﺷ ﺴ‬
‫ﺑﺎ ‪TBS-Tween (TBSTween 0.05٪، 10‬دﻗ‬‫ﺘﺸﻮ‬
‫ﺷﺴ‬
‫ﺑﺎﻓﺮ ﺷﺪ‪.‬‬
‫ﺑﺎ ‪1.0 M Tris-HCl‬در ‪pH 8.8‬‬‫ﺑﻼﻓﺎﺻﻠﻪ‬‫ﺘﻪ ﺷﺪ و‬
‫ﯿﻦ )‪(0.1 M‬در ‪pH 2.8‬ﺷ ﺴ‬
‫ﯿﺴ‬‫ﮔﻠ‬ ‫ﺘﻮن ‪(1: 500‬‬
‫ﺒﯽ رو یﺳ‬
‫ﯿ‬‫ﯿﻞﺗﺮﮐ‬
‫ﺗﻮﮔﺮاﻓﯽ ﻣ‬
‫ﺑﺎ ﮐﺮوﻣﺎ‬‫ﯿﻪ ‪BMK،‬ﮐﻪ‬
‫ﺘﺼﺎﺻﯽ ﺧﺎﻟﺺ ﺷﺪه ﻋﻠ‬
‫ﺑﺎد ی اﺧ‬
‫ﺑﯽ‬
‫ﯾﺎ‬
‫ﺑﺮا ی ارز‬
‫ﺑﺮرﺳﯽ ﺷﺪ و ‪SDS PAGE‬‬‫ﺘﺮ‬
‫ﺑﺎ ﺟﺬ ب در ‪l¼ 278‬ﻧﺎﻧﻮﻣ‬
‫ﯿﻦ ﻫﺎ ی ‪IgG‬‬
‫ﺗﺌ‬‫ﭘﺮو‬‫ﺘﺸﻮ ی‬
‫ﺷﺴ‬ ‫ﺑﻪ ﻣﺪ ت‬‫ﺑﯽ(‬
‫ﺑﺪون ﭼﺮ‬‫ﯿﺮ‬
‫ﺑﻪ ﺷﺪ‪1% .‬ﺷ‬
‫ﺑﻪ دﺳ ﺖ آﻣﺪ‪ ،‬اﻧﮑﻮ‬
‫‪EAH-BMK‬در )‪TBS-Tween 0.05٪‬‬
‫ﺑﻪ دﺳ ﺖ آﻣﺪه ﺟﻤﻊ‬‫ﺧﻠﻮص ﻧﻤﻮﻧﻪ ﻫﺎ اﻧﺠﺎم ﺷﺪ )داده ﻫﺎ ﻧﺸﺎن داده ﻧﺸﺪه اﺳ ﺖ(‪ .‬ﻧﻤﻮﻧﻪ ﻫﺎ ی‬ ‫ﯿﻘﻪ در‬
‫ﺑﺎ ‪TBS-T (TBS-Tween 0.05٪، 10‬دﻗ‬‫ﺘﺸﻮ‬
‫ﺑﺎر ﺷ ﺴ‬‫ﭘ ﺲ ازﺳﻪ‬‫ﺗﺎق‪.‬‬
‫‪1‬ﺳﺎﻋ ﺖ در دﻣﺎ ی ا‬
‫ﯿﺰ ﺷﺪﻧﺪ‪.‬‬
‫ﯾﺎﻟ‬
‫ﯿﻠﯽ ﻣﻮﻻر ‪PBS‬در ‪pH 7.4‬د‬
‫ﺑﺮ ‪10‬ﻣ‬
‫ﺑﺮا‬‫آور ی و در‬ ‫ﯿﺪاز‪3000 ،‬‬
‫ﭘﺮاﮐ ﺴ‬‫ﺑﺰ ﺿﺪ ﺧﺮﮔﻮ شﺗﺮ ب ﮐﻮ ﻫﯽ‬‫ﯾﻪ )ﮐﺎﻧﮋوﮔﻪ‬
‫ﺛﺎﻧﻮ‬‫ﺑﺎد ی‬‫ﺘﯽ‬
‫ﺑﺎﯾﮏ آﻧ‬‫ﺘﺮ‬
‫ﯿﻠ‬‫ﺘﺸﻮ(‪ ،‬ﻓ‬
‫ﻫﺮ ﺷ ﺴ‬
‫ﺗﺎق‪.‬‬
‫ﺑﻪ ﻣﺪ ت ‪1‬ﺳﺎﻋ ﺖ در دﻣﺎ ی ا‬‫ﺑﯽ(‬
‫ﺑﺪون ﭼﺮ‬‫ﯿﺮ‬
‫ﺑﻪ ﺷﺪ‪ .‬ﺷ‬
‫‪1:‬در )‪TBS-Tween 0.05٪، 1٪‬اﻧﮑﻮ‬
‫ﺑﺎ ﻣﻌﺮف‬‫ﭙ ﺲ‬
‫ﺘﻪ ﺷﺪ وﺳ‬
‫ﯿﺢ داده ﺷﺪ ﺷ ﺴ‬
‫ﺑﺎﻻﺗﻮﺿ‬‫ﺑﺎر ﻫﻤﺎﻧﻄﻮر ﮐﻪ در‬‫ﺘﺮﺳﻪ‬
‫ﯿﻠ‬‫ﯾﺖ ﻓ‬
‫در ﻧﻬﺎ‬
‫ﺗﻮﺳﻌﻪﯾﺎﻓ ﺖ‪.‬‬
‫ﯿﺺ ‪ECL‬‬
‫ﺗﺸﺨ‬

‫ﺒﯽ ‪BMK-EAH Sepharose 4B‬‬

‫ﯿ‬‫ﯿﻞﺗﺮﮐ‬
‫ﺘﻮن ﻣ‬
‫آﻣﺎدهﺳﺎز یﺳ‬

‫ﯾﺮ‬
‫ﺑﻪ ﺷﺮح ز‬
‫ﺑﻪ ‪EAH Sepharose 4B‬‬
‫ﺘﻖ ‪BMK-oxime‬‬
‫ﺑﺎ ﮐﻮﻧﮋوﮔﻪ ﮐﺮدن ﻣﺸ‬‫ﺒﯽ‬
‫ﯿ‬‫ﯿﻞﺗﺮﮐ‬
‫ﺘﻮن ﻣ‬
‫ﺳ‬
‫ﺑﺎ ‪0.5‬‬‫ﺘﺮ(‪،‬‬
‫ﯿ‬‫ﯿﻠﯽ ﻟ‬
‫ﺑﺎ ‪H2O‬در ‪pH 4.5 (160‬ﻣ‬‫ﯾﻦ‬
‫ﺘﺮ ی از رز‬
‫ﯿ‬‫ﯿﻠﯽ ﻟ‬
‫ﺑﺪﺳ ﺖ آﻣﺪ‪.‬ﯾﮏ ﻧﻤﻮﻧﻪ ‪1.2‬ﻣ‬
‫ﺑﺎد ی‬‫ﺘﯽ‬
‫ﯿﻮن آﻧ‬
‫ﺘﺮاﺳ‬
‫ﯿ‬‫ﺗ‬
‫ﯾﻦ‬
‫ﺘﻪ ﺷﺪ ‪ .‬رز‬
‫ﺘﺮ( ﺷ ﺴ‬
‫ﯿ‬‫ﯿﻠﯽ ﻟ‬
‫ﺑﺎ ‪H2O‬در ‪pH 4.5 (100‬ﻣ‬‫ﺑﺎره‬
‫ﺘﺮ(‪ ،‬و دو‬
‫ﯿ‬‫ﯿﻠﯽ ﻟ‬
‫ﻣﻮﻻر ‪NaCl (100‬ﻣ‬
‫ﯿﻠﯽ‬
‫ﺘﺮ‪BIORAD) ،‬ﮐﻪ در ‪2.0‬ﻣ‬
‫ﯿ‬‫ﯿﻠﯽ ﻟ‬
‫ﯾﺮن ‪(10‬ﻣ‬
‫ﺘﺎ‬‫ﭘﻠﯽ اﺳ‬‫ﺘﻮن‬
‫ﯾ ﺖ درﯾﮏﺳ‬
‫‪Sepharose‬در ﻧﻬﺎ‬ ‫ﺘﯽ ژن ﻫﺎ‬
‫ﯿﻦ ﺷﺪ‪ .‬آﻧ‬
‫ﯿ‬‫ﯾﺮﺗﻌ‬
‫ﺑﺎ رو ش ﮐﻠﯽ ز‬‫ﯿﻢ‬
‫ﺘﻘ‬‫ﯿﺮﻣ ﺴ‬
‫ﺘﻔﺎده از رو ش ‪ELISA‬ﻏ‬
‫ﺑﺎ اﺳ‬‫ﺑﺎد ی‬‫ﺘﯽ‬
‫ﺘﺮ آﻧ‬
‫ﯿ‬‫ﺗ‬
‫ﺑﻪ آراﻣﯽﺗﮑﺎن داده‬‫ﯿﻮن ﻫﺎ ی ﺣﺎﺻﻞ‬
‫ﭙﺎﻧ ﺴ‬
‫ﺑﻨﺪ ی ﺷﺪ وﺳﻮﺳ‬‫ﺘﻪ‬
‫ﺑﺴ‬‫ﺑﻮد‬‫ﺘﺮ ‪H2O‬در ‪pH 4.5‬ﻣﻌﻠﻖ‬
‫ﯿ‬‫ﻟ‬ ‫ﺑﺎﻓﺮ‬‫ﺘﺮ درﯾﮏ‬
‫ﯿ‬‫ﯿﻠﯽ ﻟ‬
‫ﯿﻠﯽ ﮔﺮم در ﻣ‬
‫ﺘﺮ در ﻫﺮ ﭼﺎ ﻫﮏ( ‪1‬ﻣ‬
‫ﯿ‬‫ﯿﻠﯽ ﻟ‬
‫‪(BSA-BMK، GlnBP‬و ‪BSA، 100‬ﻣ‬
‫ﯿﻠﯽ ﻣﻮل )‪(H2O pH 4.5‬‬
‫ﺗﺎﻧﻮل و ‪400‬ﻣ‬
‫ﺘﺮ ا‬
‫ﯿ‬‫ﯿﻠﯽ ﻟ‬
‫ﯿﻠﯽ ﻣﻮل ‪BMKoxime‬در ‪2‬ﻣ‬
‫ﺷﺪﻧﺪ‪15.3 .‬ﻣ‬ ‫ﯿﻠﯽ ﮔﺮم‬
‫ﯾﯽ ‪0.1‬ﻣ‬
‫ﯿﻖ ﺷﺪﻧﺪ و ﻣﻘﺪار ﻧﻬﺎ‬
‫ﺑﻨﺎ ت‪pH ¼ 9.5) ،‬رﻗ‬
‫ﺑﯽ ﮐﺮ‬‫ﺑﺎﻓﺮ‬‫ﯿﻠﯽ ﻣﻮﻻر‬
‫ﭘﻮﺷﺸﯽ ‪(50‬ﻣ‬
‫ﯿﻖ ﺷﺪ‪ .‬ﻣﺤﻠﻮل واﮐﻨ ﺶ ﻣﺨﻠﻮط ﺷﺪ و‬
‫ﯾﯽ ‪0.1‬ﻣﻮﻻر رﻗ‬
‫ﺗﺎ ﻏﻠﻈ ﺖ ﻧﻬﺎ‬
‫‪EDC‬‬ ‫ﺑﻪ ﺷﺪ و ﻣﮑﺎﻧﻬﺎ ی‬
‫ﯿﮕﺮاد اﻧﮑﻮ‬
‫ﺘ‬‫ﺑﻪ ﻣﺪ ت ‪1‬ﺳﺎﻋ ﺖ در دﻣﺎ ی ‪37‬درﺟﻪﺳﺎﻧ‬‫ﯿﺖ‬
‫ﭘﻠ‬‫ﺑﻮد‪.‬‬‫در ﭼﺎ ﻫﮏ‬
‫ﺑﺎ ‪BSA‬‬‫ﯿﮕﺮاد‬
‫ﺘ‬‫ﯿﻘﻪ در دﻣﺎ ی ‪37‬درﺟﻪﺳﺎﻧ‬
‫ﺑﻪ ﻣﺪ ت ‪30‬دﻗ‬‫ﯿﻮن‬
‫ﺑﺎﺳ‬
‫ﺑﺎ اﻧﮑﻮ‬‫واﮐﻨ ﺶ ﻧﺪاده رو ی ﺻﻔﺤﻪ‬
‫ﯿﻠﯽ‬
‫ﺑﺎ ‪TBS (30‬ﻣ‬‫ﺑﺎر‬‫ﺘﺮ در ﻫﺮ ﭼﺎه( ﻣ ﺴﺪود ﺷﺪﻧﺪ‪ .‬ﭼﺎ ﻫﮏ ﻫﺎﺳﻪ‬
‫ﯿ‬‫ﯿﻠﯽ ﻟ‬
‫‪0.5٪‬در ‪PBS 1 (150‬ﻣ‬
‫ﺑﻮد‬
‫ﺑﻪ ﺷﺪ‪ .‬ﻣﺤﻠﻮل ‪BMK oxime-EDC‬‬
‫ﯿﻘﻪ در ‪RT‬اﻧﮑﻮ‬
‫ﺑﻪ ﻣﺪ ت ‪10‬دﻗ‬ ‫ﯿﻠﯽ ﻣﻮﻻر ‪NaCl‬در )‪pH 7.4‬ﺣﺎو ی ‪0.05٪ Tween (TBS-T)، pH 7.4‬‬
‫ﻣﻮﻻر ‪Tris-HCl، 130‬ﻣ‬
‫ﺑﻪ ﺷﺪ‪.‬‬
‫ﺗﺎق اﻧﮑﻮ‬
‫ﺑﻪ ﻣﺪ ت ‪2‬ﺳﺎﻋ ﺖ در دﻣﺎ ی ا‬‫ﯾﻢ‬
‫ﺑﺎﺗﮑﺎن دادن ﻣﻼ‬‫ﯾﻦ دوﻏﺎ ب اﺿﺎﻓﻪ ﺷﺪ و‬
‫ﺑﻪ رز‬ ‫ﺑﻪ ﭼﺎ ﻫﮏ‬
‫ﯾﺎل ‪BMK‬‬
‫ﯿﻖ ﺷﺪهﺳﺮ‬
‫ﺑﺎد ی رﻗ‬‫ﺘﯽ‬
‫ﺑﺎ ‪PBS-T،‬آﻧ‬‫ﺘﺸﻮ‬
‫ﺑﺎر ﺷ ﺴ‬‫ﭘ ﺲ ازﺳﻪ‬‫ﺘﺸﻮ ﺷﺪﻧﺪ‪.‬‬
‫ﺷﺴ‬
‫ﺗﺎﻧﻮل‬
‫ﯾﻦ دوﻏﺎ ب )ا‬
‫ﺑﻪ ﻣﺤﻠﻮل اﺿﺎﻓﻪ ﺷﺪ و ﻣﺤﻠﻮل رز‬
‫ﯿﻠﯽ ﻣﻮل ‪EDC‬‬
‫ﺘﺮل ﺷﺪ و ‪40‬ﻣ‬
‫‪pH‬ﻣﺤﻠﻮل ﮐﻨ‬ ‫ﺑﺎر‬‫ﭙ ﺲﺳﻪ‬
‫ﺑﻪ ﺷﺪ وﺳ‬
‫ﯿﮕﺮاد اﻧﮑﻮ‬
‫ﺘ‬‫ﯿﻘﻪ در دﻣﺎ ی ‪37‬درﺟﻪﺳﺎﻧ‬
‫ﺑﻪ ﻣﺪ ت ‪30‬دﻗ‬‫ﻫﺎ اﺿﺎﻓﻪ ﺷﺪ‪،‬‬
‫ﺑﻪ ﺷﺪ‪.‬‬
‫ﯿﮕﺮاد اﻧﮑﻮ‬
‫ﺘ‬‫ﯾﻢﯾﮏ ﺷ ﺐ در دﻣﺎ ی ‪4‬درﺟﻪﺳﺎﻧ‬
‫ﺑﺎﺗﮑﺎن دادن ﻣﻼ‬‫‪50‬درﺻﺪ(‬ ‫ﺘﺸﻮ داده ﺷﺪ‪.‬‬
‫ﺷﺴ‬

‫ﺗﺎﻧﻮل ‪50٪ (15‬‬

‫ﺑﺎ ‪H2O‬در ‪pH 4.5، 0.5‬ﻣﻮﻻر ‪NaCl‬در ا‬‫ﺘﺮده‬
‫ﺑﻪ ﻃﻮر ﮔ ﺴ‬‫ﯾﻦ دوﻏﺎ ب‬
‫ﻣﺤﻠﻮل رز‬ ‫ﺑﺎﻓﺮ ﻓ ﺴﻔﺎ ت ﺣﺎو ی )‪Tween 20 (PBS 1X/Tween20‬‬‫ﯿﻦ‬
‫ﺘﯽﺳﺮم ﺿﺪ ‪BMK‬درﺳﺎﻟ‬
‫‪PBS-T.‬آﻧ‬
‫ﺘﺮ ‪AcOH 0.1‬ﻣﻮﻻر‬
‫ﯿ‬‫ﯿﻠﯽﻟ‬ ‫ﺒﻼً‬
‫ﺑﺎ ‪15‬ﻣ‬ ‫ﺗﺎﻧﻮل ‪50‬درﺻﺪ ﻗ‬
‫ﯾﻦ دوﻏﺎ ب در ا‬
‫ﺘﻪ ﺷﺪ‪ .‬رز‬
‫ﺘﺮ( ﺷ ﺴ‬
‫ﯿ‬‫ﯿﻠﯽ ﻟ‬
‫ﻣ‬ ‫ﺑﺎد ی‪:‬‬‫ﺘﯽ‬
‫ﺘﺮ آﻧ‬
‫ﯿ‬‫ﯿﻠﯽ ﻟ‬
‫ﯿﻖ ﺷﺪه در ﻫﺮ ﭼﺎ ﻫﮏ ‪(1: 500، 1‬ﻣ‬
‫ﺑﺎد ی رﻗ‬‫ﺘﯽ‬
‫ﺘﺮ آﻧ‬
‫ﯿ‬‫ﯿﻠﯽ ﻟ‬
‫ﯿﻖ ﺷﺪ و ‪100‬ﻣ‬
‫رﻗ‬
‫ﺑﺎ ‪0.1‬ﻣﻮﻻر‬‫ﭙ ﺲ‬
‫ﺑﺎﻓﺮ ﻣ ﺴﺪودﮐﻨﻨﺪه( وﺳ‬
‫ﺗﺎﻧﻮل ‪50‬درﺻﺪ )‬
‫در ‪pH 4.0، 0.5‬ﻣﻮﻻر ﻧﻤﮏ ﻃﻌﺎم در ا‬ ‫ﺑﺎد ی ﻫﺎ ی ﺿﺪ ‪IgG‬‬‫ﺘﯽ‬
‫ﺑﻪ ﺷﺪ‪37 C. .‬آﻧ‬
‫ﯿﻘﻪ اﻧﮑﻮ‬
‫ﺑﻪ ﻣﺪ ت ‪30‬دﻗ‬‫ﺑﺎﻓﺮ( اﺿﺎﻓﻪ ﺷﺪ و‬‫ﺘﺮ‬
‫ﯿ‬‫ﯿﻠﯽ ﻟ‬
‫‪500‬ﻣ‬
‫ﺘﺸﻮ(‪.‬‬
‫ﺑﺎﻓﺮ ﺷ ﺴ‬
‫ﺗﺎﻧﻮل )‬
‫ﯿﻤﺎر ﺷﺪ‪ .‬ا‬
‫ﺗ‬‫‪Tris-HCl‬در ‪pH 7.0، 0.5 M% NaC‬‬ ‫ﺑﻪ ﭼﺎ ﻫﮏ‬
‫ﯿﻖ ﺷﺪه ‪1:2000‬در ‪PBS-T‬ﺣﺎو ی ‪BSA (1%)،‬‬
‫ﯿﺪازﺗﺮ ب‪ ،‬رﻗ‬
‫ﭘﺮاﮐ ﺴ‬‫ﺑﺎ‬‫ﺧﺮﮔﻮ ش ﮐﻮﻧﮋوﮔﻪ‬

‫ﺑﻪ ﺷﺪ‪.‬‬
‫ﺘﯽ ﮔﺮاد اﻧﮑﻮ‬
‫ﯿﻘﻪ در دﻣﺎ ی ‪37‬درﺟﻪﺳﺎﻧ‬
‫ﺑﻪ ﻣﺪ ت ‪30‬دﻗ‬‫ﺘﺮ( اﺿﺎﻓﻪ ﺷﺪ و‬
‫ﯿ‬‫ﯿﻠﯽ ﻟ‬
‫ﻫﺎ ‪(100‬ﻣ‬
‫ﺗﺎق‬
‫ﯿﻘﻪ در دﻣﺎ ی ا‬
‫ﺑﻪ ﻣﺪ ت ‪30‬دﻗ‬‫ﺘﻪ ﺷﺪ و‬
‫ﺑﺎﻓﺮ ﻣ ﺴﺪود ﮐﻨﻨﺪه ﺷ ﺴ‬‫ﺑﺎ‬‫ﯾﻦ‬
‫ﯾﻦ ﻣﺮﺣﻠﻪ رز‬
‫ﭘ ﺲ از ا‬ ‫ﺘﺮ در ﻫﺮ ﭼﺎه(‪،‬‬
‫ﯿ‬‫ﯿﻠﯽ ﻟ‬
‫ﯾﻤﯽ ‪TMB‬اﺿﺎﻓﻪ ﺷﺪ ‪(100‬ﻣ‬
‫ﺘﺮا ی آﻧﺰ‬
‫ﺑﺴ‬‫ﺑﺎ ‪PBS-T،‬ﺳﻮ‬‫ﺘﺸﻮ‬
‫ﭘ ﺲ ازﺳﻪ ﺷ ﺴ‬
‫ﺑﺎﻓﺮ‬‫ﺘﺮ از‬
‫ﯿ‬‫ﯿﻠﯽﻟ‬
‫ﺘﺸﻮ‪15 ،‬ﻣ‬
‫ﺑﺎﻓﺮ ﺷ ﺴ‬‫ﺘﺮ از‬
‫ﯿ‬‫ﯿﻠﯽﻟ‬
‫ﺑﺎ ‪15‬ﻣ‬‫ﯾﻦ دوﻏﺎ ب‬
‫ﭙ ﺲ ﻣﺤﻠﻮل رز‬
‫ﺑﻪ ﺷﺪ‪.‬ﺳ‬
‫اﻧﮑﻮ‬ ‫ﺑﻪ‬‫ﺘﺮ ﻣﺤﻠﻮلﺗﻮﻗﻒ‬
‫ﯿ‬‫ﯿﻠﯽ ﻟ‬
‫ﭘ ﺲ از اﻓﺰودن ‪100‬ﻣ‬‫ﺑﻪ ﺷﺪ‪.‬‬
‫ﺗﺎق اﻧﮑﻮ‬
‫ﯿﻘﻪ در دﻣﺎ ی ا‬
‫ﺑﻪ ﻣﺪ ت ‪5‬دﻗ‬‫و‬
‫ﯿﻠﯽﻣﻮﻻر‬
‫ﺘﺮ از ‪50‬ﻣ‬
‫ﯿ‬‫ﯿﻠﯽﻟ‬
‫ﺑﺎ ‪10‬ﻣ‬‫ﯾﺖ‬
‫ﯿﻤﺎر ﺷﺪ و در ﻧﻬﺎ‬
‫ﺘﺸﻮﺗ‬
‫ﺑﺎﻓﺮ ﺷ ﺴ‬‫ﺑﺎ‬‫ﺑﺎره‬
‫ﻣ ﺴﺪودﮐﻨﻨﺪه و دو‬
‫ﺑﺎ رﺳﻢ‬‫ﯿﮑﯽ‬
‫ﺑﻪ ﺻﻮر ت ﮔﺮاﻓ‬‫ﺑﺎد ی‬‫ﺘﯽ‬
‫ﺘﺮ آﻧ‬
‫ﯿ‬‫ﯿﺮ ی ﺷﺪ‪.‬ﺗ‬
‫ﺘﺮ اﻧﺪازه ﮔ‬
‫ﭼﺎ ﻫﮏ ﻫﺎ‪ ،‬ﺟﺬ ب در ‪l¼ 450‬ﻧﺎﻧﻮﻣ‬
‫ﺘﻪ ﺷﺪ‪.‬‬
‫‪Tris-HCl‬در ‪pH 7.0‬ﺷ ﺴ‬
‫ﺜﺮ‬
‫ﺑﻪ ﻋﻨﻮان ﺣﺪاﮐ‬‫ﺘﺮ‬
‫ﯿ‬‫ﯿﻦ ﺷﺪ‪.‬ﺗ‬
‫ﯿ‬‫ﺑﺎد یﺗﻌ‬‫ﺘﯽ‬
‫ﺑﺮا ی ﻫﺮ رﻗ ﺖ آﻧ‬‫ﺑﺮ ﺟﺬ ب‬
‫ﺑﺮا‬‫ﺑﺎد ی در‬‫ﺘﯽ‬
‫ﺑﻞ رﻗ ﺖ آﻧ‬
‫ﺘﻘﺎ‬
‫ﻣ‬
‫ﺘﻪ ﺷﺪ ﮐﻪ در آن ﻣﻘﺪار ‪0.6‬واﺣﺪ ﺟﺬ ب ﻣﺸﺎ ﻫﺪه ﺷﺪ‪.‬‬
‫ﺑﺎد ی در ﻧﻈﺮ ﮔﺮﻓ‬‫ﺘﯽ‬
‫رﻗ ﺖ آﻧ‬

‫ﺒﯽ‬
‫ﯿ‬‫ﯿﻞﺗﺮﮐ‬
‫ﺗﻮﮔﺮاﻓﯽ ﻣ‬
‫ﺑﺎ ﮐﺮوﻣﺎ‬‫ﺑﺎد ی‬‫ﺘﯽ‬
‫ﺧﺎﻟﺺﺳﺎز ی آﻧ‬

‫ﯿﻠﯽ‬
‫ﯿﻠﯽ ﮔﺮم ‪IgG (2.0‬ﻣ‬
‫ﯾﻦ ‪EAH-BMK، 8.0‬ﻣ‬
‫ﺒﯽ رو ی رز‬
‫ﯿ‬‫ﯿﻞﺗﺮﮐ‬
‫ﺗﻮﮔﺮاﻓﯽ ﻣ‬
‫در ﺧﺎﻟﺺﺳﺎز ی ﮐﺮوﻣﺎ‬
‫ﺑﺎ‬‫ﯿﻖ ﺷﺪ و‬
‫ﺗﺼﺎل( رﻗ‬
‫ﺑﺎﻓﺮ ا‬
‫ﯿﻠﯽ ﻣﻮﻻر ‪Tris-HCl‬در ‪)pH 7.0‬‬
‫ﺘﺮ ( ‪1: 1‬در ‪50‬ﻣ‬
‫ﯿ‬‫ﯿﻠﯽ ﻟ‬
‫ﮔﺮم در ﻣ‬
‫ﯿﻠﯽ ﻣﻮﻻر ‪HCl‬‬
‫ﺘﻮن ‪50‬ﻣ‬
‫ﺑﺎ ‪20‬ﺣﺠﻢﺳ‬‫ﺘﺸﻮ‪،‬‬
‫ﺒﻞ از ﺷ ﺴ‬
‫ﺘﻮن‪ ،‬ﻗ‬
‫ﺑﻪ ﺷﺪ‪.‬ﺳ‬
‫ﺒﯽ اﻧﮑﻮ‬
‫ﯿ‬‫ﯿﻞﺗﺮﮐ‬
‫ﺘﻮن ﻣ‬
‫ﺳ‬ ‫ﯾﺮﯾﺎﻓ ﺖ ﺷﺪ‪1/64 000. :‬‬
‫ﯾﺮ ز‬
‫ﻣﻘﺎد‬

‫ﺘﺸﻮ‬
‫ﺑﺮا ی ﻣﺮﺣﻠﻪ ﺷ ﺴ‬‫ﺑﺮوﻧﺪ‪.‬‬‫ﯿﻦ‬
‫ﺑ‬‫ﺘﺼﺎﺻﯽ از‬
‫ﯿﺮ اﺧ‬
‫ﺑﺎد ی ﻫﺎ ی ﻏ‬‫ﺘﯽ‬
‫ﺘﻪ ﺷﺪﺗﺎ آﻧ‬
‫‪Tris-‬در ‪pH 7.0‬ﺷ ﺴ‬
‫ﺘﺮ ی‬
‫ﯿ‬‫ﯿﻠﯽﻟ‬
‫ﺑﺨ ﺶ ﻫﺎ ی ﻧﻤﻮﻧﻪ ‪1‬ﻣ‬‫ﺘﻔﺎده ﺷﺪ و‬
‫ﺘﺮ( اﺳ‬
‫ﯿ‬‫ﯿﻠﯽﻟ‬
‫ﯿﻦ‪HCl -‬در ‪pH 3.0 (5‬ﻣ‬
‫ﯿﺴ‬‫از ‪0.1‬ﻣﻮﻻر ﮔﻠ‬ ‫ﺘﺰ ‪BMK-BSA-488‬‬
‫ﺳﻨ‬

‫ﺘﯽ‬
‫ﯿﻮن ﻫﺎ ی ﺣﺎو ی آﻧ‬
‫ﺑﺮرﺳﯽ ﺷﺪ‪ .‬ﻓﺮاﮐ ﺴ‬‫ﺘﺮ‬
‫ﯿﺮ ی ﺟﺬ ب در ‪l 278‬ﻧﺎﻧﻮﻣ‬
‫ﺑﺎ اﻧﺪازهﮔ‬‫ﺟﻤﻊآور ی ﺷﺪ و‬ ‫‪1‬‬
‫ﺑﯽ‬‫ﺑﺎﻓﺮ‬‫ﺘﺮ در‬
‫ﯿ‬‫ﯿﻠﯽ ﻟ‬
‫ﺘﺮ در ‪150‬ﻣ‬
‫ﯿ‬‫ﯿﻠﯽ ﻟ‬
‫ﯿﻠﯽ ﮔﺮم در ﻣ‬
‫ﺑﺎ ﻏﻠﻈ ﺖ ‪0.5‬ﻣ‬
‫ﻣﺤﻠﻮﻟﯽ از ﻣﺰدوج ‪BSA-BMK‬‬
‫ﺘﯽ‬
‫ﯿﺰ ﺷﺪﻧﺪ‪ .‬ﻏﻠﻈ ﺖ آﻧ‬
‫ﯾﺎﻟ‬
‫ﺑﺎﻓﺮ ﻓ ﺴﻔﺎ ت در ‪pH 7.4‬د‬‫ﯿﻠﯽ ﻣﻮﻻر‬
‫ﺑﺮ ‪10‬ﻣ‬
‫ﺑﺮا‬‫ﺑﺎد ی ﻫﺎ ﺟﻤﻊ آور ی و در‬
‫ﺒﺖ‬
‫ﺑﺎ ‪CF488A‬از ‪Biotium‬ﻣﺨﻠﻮط ﺷﺪ‪ .‬ﻧ ﺴ‬‫ﯾﻢ ‪0.1‬ﻣﻮﻻر در ‪pH 8.3‬ﺣﻞ ﺷﺪ و‬
‫ﺑﻨﺎ تﺳﺪ‬
‫ﮐﺮ‬
‫ﺑﻮد‬‫ﺑﺎد ی ﻫﺎ‬
‫ﺑﻪ ﻣﺪ ت ‪1‬ﺳﺎﻋ ﺖ در دﻣﺎ ی ‪37‬‬‫ﺘﻪ ﺷﺪ‪ .‬ﻣﺨﻠﻮط واﮐﻨ ﺶ‬
‫ﯿﻦ در ‪500 : 1‬ﻧﮕﻪ داﺷ‬
‫ﺗﺌ‬‫ﭘﺮو‬‫ﻣﻮﻟﯽ رﻧﮓ و‬

‫ﺑﻪ ﺷﺪ و ﻣﻮﻟﮑﻮﻟﻬﺎ ی ﻧﺸﺎﻧﺪار ﺟﺪا ﺷﺪﻧﺪ‪.‬‬

‫ﯿﮕﺮاد اﻧﮑﻮ‬
‫ﺘ‬‫درﺟﻪﺳﺎﻧ‬

‫| ‪3560‬ﻣﻘﻌﺪ ی رو ش ﻫﺎ‪2012، 4، 3558-3564 ،‬‬ ‫ﯾﻦ ﻣﺠﻠﻪ ‪ª The Royal Society of Chemistry 2012‬اﺳ ﺖ‬
‫ا‬
‫‪Machine Translated by Google‬‬

‫ﯿﻠﯽ ﻣﻮﻻر در‬

‫ﺑﺎﻓﺮ ﻓ ﺴﻔﺎ ت ‪10‬ﻣ‬‫ﺑﺮ‬
‫ﺑﺮا‬‫ﯿﺰ در‬
‫ﯾﺎﻟ‬
‫ﯿﻮن ژل و د‬
‫ﺘﺮاﺳ‬
‫ﯿﻠ‬‫ﺑﺎ ﻓ‬‫ﭘﺮو ب ﻫﺎ ی واﮐﻨ ﺶ ﻧﺪاده‬‫از‬ ‫ﯾﻖ‬
‫ﯿﻪ ‪ BMK‬ﻫﻨﮕﺎمﺗﺰر‬
‫ﺑﺎد ی ﻋﻠ‬‫ﺘﯽ‬
‫ﯿﺪ آﻧ‬
‫ﺑﺮا یﺗﻮﻟ‬‫ﯿﻦ‪،‬‬
‫ﺗﺌ‬‫ﭘﺮو‬‫ﺑﻪ‬‫ﯿﻦ‬
‫ﯾﮏ‪ ،‬و ﻫﻤﭽﻨ‬
‫ﯾﻤﻮﻧﻮﻟﻮژ‬
‫ﺑﻪﯾﮏ ﺣﺎﻣﻞ ا‬
‫ﯿﻒ( در ﻃﻮل ﺷ ﺐ در‬
‫ﯾﺸﮕﺎه ﻫﺎ ی ﻃ‬
‫ﺑﺎ ﻗﻄﻊ ‪3500‬دا )آزﻣﺎ‬‫ﯿﺰ‬
‫ﯾﺎﻟ‬
‫ﺘﻔﺎده از ﻟﻮﻟﻪ ﻫﺎ ی د‬
‫ﺑﺎ اﺳ‬
‫‪pH 7.4‬‬ ‫ﺘﺼﻞ اﺳ ﺖ‪.‬‬
‫ﺑﻪ ﺧﺮﮔﻮ ش ﻣ‬
‫ﺘﯽ ﮔﺮاد‪.‬‬
‫دﻣﺎ ی ‪4‬درﺟﻪﺳﺎﻧ‬
‫ﯿﻨﻮﮐ ﺴﯽ(‪.‬‬
‫ﯾﻦ آﻣ‬
‫ﯿﺪ‬‫ﯿﻠ‬
‫ﺗ‬‫ﯿﻞ‪-‬ا‬
‫ﯿﻞ‪-2-‬ﻓﻨ‬
‫ﺘ‬‫ﯿﮏ ‪(1-‬ﻣ‬
‫ﺘ‬‫ﯿﺪ اﺳ‬
‫ﺘﺰ اﺳ‬
‫ﺳﻨ‬
‫ﯾﺪار‬
‫ﭘﺎ‬‫ﯿﺮ ی ﻓﻠﻮرﺳﺎﻧ ﺲ ﺣﺎﻟ ﺖ‬
‫اﻧﺪازه ﮔ‬
‫ﺘﯽ اﺳ ﺖ‪،‬‬
‫ﯾﺴ‬‫ﺑﺎ ﻣﻮﻟﮑﻮل ﻫﺎ ی ز‬‫ﯿﻮﻧﺪ‬
‫ﭘ‬‫ﺑﺮا ی‬‫ﭘﺎﻧﻮن )‪(BMK‬ﻓﺎﻗﺪ ﻣﮑﺎن ﻫﺎ ی ﻟﻨﮕﺮ‬
‫ﭘﺮو‬
‫ﯿﻞ‪-2-‬‬
‫‪1-‬ﻓﻨ‬

‫ﯿﻒﺳﻨﺞ ﻓﻠﻮرﺳﺎﻧ ﺲ ‪)FP8600‬ﺟﺎﺳﮑﻮ(‬

‫ﺑﺮ رو یﯾﮏ ﻃ‬‫ﯾﺪار‬
‫ﭘﺎ‬‫ﯾ ﺶ ﻫﺎ ی ﻓﻠﻮرﺳﺎﻧ ﺲ ﺣﺎﻟ ﺖ‬
‫آزﻣﺎ‬ ‫ﯿﻢ‬
‫ﯿﻢ ﻣﻌﺮﻓﯽ ﺷﺪ‪ .‬اﮐ ﺴ‬
‫ﯿﻞ اﮐ ﺴ‬
‫ﺑﺮا یﺗﺸﮑ‬‫ﯿﻞ‬
‫ﺑﻮﻧ‬
‫ﺑﺎﺗﺮاﮐﻢ رو ی ﮐﺮ‬‫ﺗﺎه‬
‫ﯿﻮﻧﺪ ی ﮐﻮ‬
‫ﭘ‬‫ﺑﺎزو ی‬‫ﯾﻦﯾﮏ‬
‫ﺑﺮا‬
‫ﺑﻨﺎ‬

‫ﺑﺮا ی ‪BSA-488 (Abs488 0.018 OD)،‬‬‫ﺑﺎ دﻣﺎ یﯾﮏﺳﻠﻮﻟﯽ اﻧﺠﺎم ﺷﺪ‪.‬‬‫ﺑﻪ ﻧﮕﻬﺪارﻧﺪه ﻧﻤﻮﻧﻪ‬‫ﻣﺠﻬﺰ‬ ‫ﺘﺮده‬
‫ﺑﻪ ﻃﻮر ﮔ ﺴ‬‫ﺘﻨﺪ ﮐﻪ‬
‫ﯿﻞ ﻫ ﺴ‬
‫ﺑﻮﻧ‬
‫ﯿ ﺐ ﮐﺮ‬
‫ﯿﮏﯾﮏﺗﺮﮐ‬
‫ﺘﻘﺎ ت ﮐﻼﺳ‬
‫ﯿﺰ ﻣﺸ‬
‫ﯿﻦ ﻧ‬
‫ﯿﺪروﮐ ﺴﯽ آﻣ‬
‫ﻫﺎ ی ﻫ‬

‫ﺘﺮ و ‪600‬‬
‫ﯿﻦ ‪500‬ﻧﺎﻧﻮﻣ‬
‫ﺑ‬‫ﯿﻠﯽ‬
‫ﯿﻒ ﻫﺎ ی ﮔ ﺴ‬
‫ﺑ ﺖ ﺷﺪ و ﻃ‬
‫ﺛﺎ‬‫ﺘﺮ‬
‫ﯾﮏ در ‪488‬ﻧﺎﻧﻮﻣ‬
‫‪BMK-‬ﻃﻮل ﻣﻮجﺗﺤﺮ‬ ‫ﺘﻔﺎده ﻣﯽ ﺷﻮد ‪.‬‬
‫ﺑﺎﻻ در واﮐﻨ ﺶ اﺳ‬‫ﺑﺎزده ﺟﻔ ﺖ ﺷﺪن‬‫ﺑﺮا ی‬
‫ﯿﻞ ‪GC‬‬
‫ﯾﻪ وﺗﺤﻠ‬
‫ﺑﺮا یﺗﺠﺰ‬

‫ﯿﺮ ی ﻫﺎ در ‪10‬اﻧﺠﺎم ﺷﺪ‬

‫ﺒ ﺖ ﺷﺪ‪ .‬اﻧﺪازه ﮔ‬
‫ﺛ‬‫ﺘﺮ‬
‫ﺘﺸﺎر ‪2.5‬ﻧﺎﻧﻮﻣ‬
‫ﺑﺎ ﻋﺮض ﺷﮑﺎف اﻧ‬‫ﺘﺮ‬
‫ﻧﺎﻧﻮﻣ‬

‫ﺑﺎﻓﺮ ﻓ ﺴﻔﺎ ت در ‪pH 7.4،‬در‬‫ﯿﻠﯽ ﻣﻮﻻر‬

‫ﯿﻢ ‪1‬ﻣ‬
‫‪(B).‬‬ ‫ﺷﮑﻞ‬
‫ﺑﻪ اﮐ ﺴ‬
‫ﭘﺎﻧﻮن )‪(A‬‬
‫ﭘﺮو‬
‫ﯿﻞ‪-2-‬‬
‫ﺘﻖﺳﺎز ی ‪1-‬ﻓﻨ‬
‫ﯿﮏ ﻣﺸ‬
‫ﺗ‬‫واﮐﻨ ﺶ ﺷﻤﺎ‬
‫ﺗﺎ ‪600‬‬
‫ﯿﻪ ‪BMK‬از ‪0.0‬‬
‫ﺑﺎد ی ﻫﺎ ﻋﻠ‬
‫ﺘﯽ‬‫ﯿﻌﯽ از ﻏﻠﻈ ﺖ آﻧ‬
‫ﯿﻒ وﺳ‬
‫ﺑﺎ ﻃ‬
‫ﺗﺎق‪BMK-BSA 488 .‬‬
‫دﻣﺎ ی ا‬ ‫ﺘﻔﺎده از رو ش‬
‫ﺑﺎ اﺳ‬‫ﺒﯽ‬
‫ﯿ‬‫ﯿﻞﺗﺮﮐ‬
‫ﯾﻦ ﻫﺎ ی ﻣ‬
‫ﯿﻦ ﻫﺎﯾﺎ رز‬
‫ﺗﺌ‬‫ﭘﺮو‬‫ﺑﺎ‬‫ﺘﻮن‬
‫ﺑﺮا ی ﺟﻔ ﺖ ﮐﺮدن ﻣﻮﻟﮑﻮل ﮐ‬
‫ﯿﺮ ی ﻫﺎ ی‬
‫ﯿﻒ ﻫﺎ ی ﻓﻠﻮرﺳﺎﻧ ﺲ اﻧﺠﺎم ﺷﺪ‪ .‬اﻧﺪازهﮔ‬
‫ﺑﻪ ﺷﺪ و ﻃ‬
‫ﯿﻘﻪ اﻧﮑﻮ‬
‫ﺑﻪ ﻣﺪ ت ‪10‬دﻗ‬‫ﺘﺮ‬
‫ﻧﺎﻧﻮﻣ‬ ‫ﺘﺮون‬
‫ﺑﺮ ﺷﮑﻞ و ﭼﮕﺎﻟﯽ اﻟﮑ‬‫ﯿﺮ را‬
‫ﺛ‬‫ﯾﻦﺗﺄ‬
‫ﺘﺮ‬‫ﺘﻖﺳﺎز ی ﮐﻤ‬
‫ﯾﻦ ﻣﺸ‬
‫ﯿﻮن‪ .‬ا‬
‫ﯾ ﺴ ﺖ ﮐﻮﻧﮋوﮔﺎﺳ‬
‫ﯾﺞ ز‬
‫ﻫﺎ ی را‬
‫ﺑﺎﯾﮏ‬‫ﯾﮏ و ﻧﻤﻮﻧﻪ‪،‬‬
‫ﺒﻊﺗﺤﺮ‬
‫ﯿﻦ ﻣﻨ‬
‫ﺑ‬‫ﯾﺰهﮐﻨﻨﺪه ‪Glan‬‬
‫ﭘﻼر‬‫ﺑﺎ ﻗﺮار دادنﯾﮏ‬‫ﯿﻮن‪،‬‬
‫ﯾﺰاﺳ‬
‫ﭘﻼر‬‫ﻓﻠﻮرﺳﺎﻧ ﺲ‬ ‫ﯿﻮﻧﺪ ﻣﻮﺟﻮد در ﻣﻮﻟﮑﻮل ﺷﺮوع اﺳ ﺖ‪.‬‬
‫ﭘ‬‫ﯿﻪ‬
‫ﺒ‬‫ﯿﻞﺷﺪه ﮐﺎﻣ ﻼ ً ﺷ‬
‫ﯾﺪﺗﺸﮑ‬
‫ﯿﻮﻧﺪ ﺟﺪ‬
‫ﭘ‬‫ﯾﺮا‬
‫ﺘﺎر دارد‪ ،‬ز‬
‫ﺳﺎﺧ‬
‫ﺘﺸﺎر اﻓﻘﯽ )‪(90‬اﻧﺠﺎم ﺷﺪ‪.‬‬
‫ﯾﺰه اﻧ‬
‫ﭘﻼر‬‫ﺘﺮ‬
‫ﯿﻠ‬‫ﺑﺎﯾﮏ ﻓ‬‫ﯾﮏ ﻋﻤﻮد ی )‪(0‬و‬
‫ﺑﺎﺗﺤﺮ‬‫ﺒﯽﺷﺪه‬
‫ﺘﺮ ﻗﻄ‬
‫ﯿﻠ‬‫ﻓ‬ ‫ﯿﻞ‪-2-‬‬
‫ﺘﻮن )‪(A‬ﺷﺮوع ﻣﯽ ﺷﻮد ‪(1-‬ﻓﻨ‬
‫ﯿﺪ )‪(B‬از ﮐ‬
‫ﺘﻘﺎ ت اﺳ‬
‫ﺘﺰ آﺳﺎن‪ ،‬در ﻋﻤﻠﮑﺮد ﺧﻮ ب‪ ،‬ﻣﺸ‬
‫ﺳﻨ‬
‫ﯿﮕﻤﺎ‬
‫ﯾﺪ‪98٪ ،‬ﺳ‬
‫ﯿﺪروﮐﻠﺮا‬
‫ﯿﻦ ﻫﻤﯽ ﻫ‬
‫ﯿﺪروﮐ ﺴﯽ آﻣ‬
‫ﯿﻞ( ﻫ‬
‫ﺘ‬‫ﺑﻮﮐ ﺴﯽ ﻣ‬
‫ﯿﮕﻤﺎ ‪)(O-‬ﮐﺮ‬
‫ﭘﺎﻧﻮن‪99٪ ،‬ﺳ‬
‫ﭘﺮو‬
‫ﯾﺎﻓ ﺖ ﺷﺪ‪،‬ﯾﮏ ﻣﺨﻠﻮطﺳﻪ‬
‫ﺘﺮ در‬
‫ﯿﺸ‬‫ﺑ‬‫ﺑﺪون ﺧﺎﻟﺺﺳﺎز ی‬‫ﺘﻔﺎده ﺷﺪ‪ .‬ﻫﻤﺎﻧﻄﻮر ﮐﻪ‬
‫ﯾﭻ( اﺳ‬
‫آﻟﺪر‬
‫ﯿﻦﻫﺪه‬
‫ﻣﺸﺎ‬
‫‪TLC‬آﻣ‬
‫ﯿﺪروﮐ ﺴﯽ‬
‫ﺗﻮﺳﻂ‬
‫ﯿﻞ ﻫ‬
‫ﺘ ﮐﻪ‬
‫ﻫﻤﺎﻧﻄﻮر‬
‫ﺑﻮﮐ ﺴﯽ ﻣ‬
‫ﺷﻮد‪،‬‬
‫ﮐﺮ‬ ‫ﮐﻤﯽ‬
‫ﯾﭻ(‬ ‫ﯿﻞ‬
‫آﻟﺪر‬ ‫ﻣﻘﺪار‬
‫ﺖﺗﺸﮑ‬ ‫ﺑﺎ‬
‫ﺳﺎﻋ‬‫ﯾﺪ و‬
‫ﯾﻦ(‬ ‫ﯿﺮدو‬‫ﺘﺎﻧﻮل‪،‬راآ ب‪،‬‬
‫ﻋﺮض‬
‫ﭘ‬ ‫ﻣﺤﺼﻮل در‬
‫ﮐﻨﻨﺪه )ﻣ‬‫ﻫﺪﺗﺎ‬ ‫ﺲ‬
‫ﯿﻮﻧﺪ د ﻫﻨﺪه‬
‫ﭘ‬
‫رﻓﻼﮐد‬
‫اﺟﺎزه ﻣﯽ‬
‫ﯾﯽ‬‫ﺗﺎ‬
‫ﯿﺶ‬
‫ﺑ‬‫ﯿﻮﻧﺪ د ﻫﻨﺪه ﻫﺎ ی‬
‫ﭘ‬‫ﯿﺎر ی از‬
‫ﺑﺴ‬‫ﺑﺎ ﺧﻼص ﺷﺪن از ﺷﺮ‬‫ﺑﻮدﺗﺎ‬‫ﯿﻪ آﺳﺎن ﮐﺎﻓﯽ‬
‫ﺷﺪ‪.‬ﯾﮏ ﮐﺎرﺗﺼﻔ‬
‫ﯾﻦ‬
‫ﺑﺎ ا‬‫ﺑﺮا ی ا ﻫﺪاف ﻣﺎ ﻓﺮا ﻫﻢ ﻣﯽ ﺷﻮد‪.‬‬‫ﺘﻔﺎده ﻓﻮر ی از ﻣﺤﺼﻮل‬
‫ﺘﻔﺎده ﺷﺪه‪ ،‬اﻣﮑﺎن اﺳ‬
‫از ﺣﺪ اﺳ‬

‫ﺑﻘﻪ ‪BMK‬‬
‫ﺳﻨﺠ ﺶ ﻣ ﺴﺎ‬ ‫ﺑﺎﯾﮏ‬‫ﯿﮑﺎ‬
‫ﯿﻠ‬‫ﺗﻮﮔﺮاﻓﯽ ﻓﻠ ﺶ رو ی ژلﺳ‬
‫ﺘﺮﺗﻮﺳﻂ ‪NMR،‬ﮐﺮوﻣﺎ‬
‫ﺑﻬ‬‫ﺘﺎر‬
‫ﯿﻒﺳﺎﺧ‬
‫ﺑﺮا یﺗﻮﺻ‬‫ﺣﺎل‪،‬‬
‫ﺑﻮد ﮐﻪ ﻫﻨﻮز وﺟﻮد دارد‪.‬‬‫ﯿﺎز‬
‫ﯿﻦ ﻣﻮرد ﻧ‬
‫ﯿﺪروﮐ ﺴﯽ آﻣ‬
‫ﺑﻮﮐ ﺴﯽ ﻫ‬
‫ﺑﺮا ی ﺣﺬف ﮐﺎﻣﻞ ﮐﺮ‬‫ﺒﯽ‬
‫ﯾﻨﺪه ﻗﻄ‬
‫ﺷﻮ‬
‫ﯾﺶ‬
‫ﯿﻪ ‪BMK (460‬ﻧﺎﻧﻮﻣﻮﻻر( در ﺣﻀﻮر اﻓﺰا‬
‫ﺑﺎد ی ﻋﻠ‬‫ﺘﯽ‬
‫ﺑ ﺖ آﻧ‬
‫ﺛﺎ‬‫ﺑ ﺖ در ﻏﻠﻈ ﺖ‬
‫ﺒ ﺶ رﻗﺎ‬
‫ﺳﻨﺠ ﺶ ﻗﻄ‬
‫ﯿﺪ ﺷﺪ )در ﺷﮑﻞ ‪2‬ﻧﺸﺎن داده‬
‫ﯾ‬‫ﺗﺎ‬
‫ﺑﺎ ‪1H NMR‬‬‫ﺘﺎر‬
‫ﯿﻦ ﮐﺎر‪،‬ﺳﺎﺧ‬
‫ﭘ ﺲ از اوﻟ‬‫در ﻣﺤﺼﻮل روﻏﻨﯽ‬
‫ﺗﺎﻧﻮل اﻧﺠﺎم ﺷﺪ‪.‬‬
‫ﯿﻖﺷﺪه در ا‬
‫ﯿﻠﯽﻣﻮﻻر( رﻗ‬
‫ﯿﻠﯽﻣﻮﻻرﺗﺎ ‪1‬ﻣ‬
‫ﺑﺮﭼ ﺴ ﺐ )از ‪0.2‬ﻣ‬‫ﺑﺪون‬
‫ﻏﻠﻈ ﺖ ‪BMK‬‬
‫ﺑﺮ‬‫ﯿﻮﻧﺪ ی وارد ﺷﺪه‬
‫ﭘ‬‫ﺑﺎزو ی‬‫ﯿﻠﻦ رو ی‬
‫ﺘ‬‫ﺗﻮن ﻫﺎ ی ﻣ‬
‫ﭘﺮو‬‫ﯿﻞ‬
‫ﺑﻪ دﻟ‬
‫ﺷﺪه اﺳ ﺖ(‪ .‬ﻣﻨﻔﺮد در ‪ppm 4.7‬‬
‫ﯿﻮن در ﺣﻀﻮر‬
‫ﺑﺎﺳ‬
‫ﯿ ﺶ اﻧﮑﻮ‬
‫ﭘ‬‫ﯾﻦ‬
‫ﭘ ﺲ از ا‬‫ﯿﻘﻪ اﻧﺠﺎم ﺷﺪ‪.‬‬
‫ﺑﻪ ﻣﺪ ت ‪30‬دﻗ‬‫ﺗﺎق‬
‫ﯿﻮن در دﻣﺎ ی ا‬
‫ﺑﺎﺳ‬
‫اﻧﮑﻮ‬
‫ﺑ ﺴ ﺖ اﺻﻠﯽ‪.‬‬
‫رو ی دار‬
‫ﯿﺮ ی ﻫﺎ ی‬
‫ﺑﻪ ﺷﺪﻧﺪ و اﻧﺪازهﮔ‬
‫ﺘﺮ( اﻧﮑﻮ‬
‫ﺑﺎ ‪BMK-BSA-488 (70‬ﻧﺎﻧﻮﻣ‬‫ﺑﺮﭼ ﺴ ﺐ‪ ،‬ﻫﻤﻪ ﻧﻤﻮﻧﻪ ﻫﺎ‬‫ﺑﺪون‬
‫‪BMK‬‬
‫ﺑﺎ ﮔﻠﻦ( اﻧﺠﺎم‬
‫ﺑﺎ )‪)ISS K2 (ISS inc. UrbanaChampaign IL USA‬‬‫ﯿﻮن‬
‫ﯾﺰاﺳ‬
‫ﭘﻼر‬‫ﻓﻠﻮرﺳﺎﻧ ﺲ‬
‫ﯿﻢ ﺷﺪه و‬
‫ﺗﻨﻈ‬
‫ﯾﮑﯽ ﮐﻪ رو ی ‪90‬‬
‫ﯾﺰهﺗﺤﺮ‬
‫ﭘﻼر‬‫ﺘﺮ‬
‫ﯿﻠ‬‫ﺑﺎ ﻓ‬‫ﯾﮏ و ﻧﻤﻮﻧﻪ(‬
‫ﺒﻊﺗﺤﺮ‬
‫ﯿﻦ ﻣﻨ‬
‫ﺑ‬‫ﯾﺰه ﮐﻨﻨﺪه‬
‫ﭘﻼر‬‫ﺷﺪ‪.‬‬
‫ﯿﻢ ﺷﺪه اﺳ ﺖ‪.‬‬
‫ﺗﻨﻈ‬
‫ﺘﺸﺎر رو ی ‪0‬‬
‫ﯾﺰه اﻧ‬
‫ﭘﻼر‬‫ﺘﺮ‬
‫ﯿﻠ‬‫ﻓ‬

‫ﺑﻪ ‪GlnBP‬و ‪BSA‬‬

‫ﺘﻖ ‪BMK‬‬
‫ﯿ ﺐ ﻣﺸ‬
‫ﺗﺮﮐ‬

‫ﺑﺤ ﺚ‬‫ﯾﺞ و‬
‫ﺘﺎ‬‫ﻧ‬
‫ﯿﻨﻮﮐ ﺴﯽ‬
‫ﯾﻦ آﻣ‬
‫ﯿﺪ‬‫ﯿﻠ‬
‫ﺗ‬‫ﯿﻞ ا‬
‫ﯿﻞ‪ 2-‬ﻓﻨ‬
‫ﺘ‬‫ﺘﻦ ‪1-‬ﻣ‬
‫ﭘ‬‫ﺘﺨﺎ ب ﺷﺪ و ﻫﺎ‬
‫ﯿﻦ ﺣﺎﻣﻞ اﻧ‬
‫ﺗﺌ‬‫ﭘﺮو‬‫ﺑﻪ ﻋﻨﻮانﯾﮏ‬
‫‪GlnBP9‬‬

‫ﭘﺎﺳﺦ‬‫ﺘﻦ ﻫﺮ ﮔﻮﻧﻪ‬
‫ﯿﺨ‬‫ﺑﺮاﻧﮕ‬‫ﺑﺮا ی‬
‫ﺑﺎ وزن ﻣﻮﻟﮑﻮﻟﯽ ﮐﻢ اﺳ ﺖ )ﺷﮑﻞ ‪1)،‬‬‫ﯿﺐ‬
‫ﯾﮏﺗﺮﮐ‬
‫ﯿﻢ‪BMK .‬‬
‫ﯿﻒ ﻣﯽ ﮐﻨ‬
‫ﺗﻮﺻ‬‫ﺑﻪ‬‫ﭘﺎﻧﻮندر آ ب‬
‫)‪(BMK‬‬ ‫ﻣﺤﻠﻮل‬
‫ﭘﺮو‬ ‫ﯿﺪ‬‫ﯾﻤ‬
‫ﻓﻨ ا‬
‫ﯿﻞ‪-2-‬‬ ‫‪ 1-‬ی‬
‫ﺑﻮد‬
‫ﺗﺸﺨش ﮐﺮ‬
‫ﯿﺺ‬ ‫ﺑﺎ رو‬
‫ﯿﻞ ی‬‫ﺴ‬
‫ﺑﺮا‬‫ﺑﻮﮐ را‬
‫ﻫﻨﺪه ﮐﺮ‬
‫ﺴﺎس‬ ‫ﺶﺣ‬ ‫ﺒد‬
‫ﺶ‬
‫واﮐﻨﻗﻄ‬
‫ﺑﺮ‬ ‫ﮔﺮوه‬
‫ﺘﻨﯽ‬ ‫ﯾﻖﻣ‬
‫ﺒ‬ ‫ﻃﺮش‬
‫ﯾﮏاز رو‬
‫)‪BMK‬‬
‫ﺘﻖﮐﺎر ﻣﺎ‬‫)ﻣﺸ‬
‫ﯾﻦ‬
‫در ا‬
‫ﯾﻢ‪.‬‬
‫ﯾﯽ اﺻﻼح ﮐﺮد‬
‫ﯿﺎ‬‫ﯿﻤ‬
‫ﺑﺎﺷﺪ‪ ،‬از ﻧﻈﺮ ﺷ‬ ‫‪BSA-‬‬
‫‪)BMK‬ﺷﮑﻞ )‪1‬ﮐﻪ ﻣﯽﺗﻮاﻧﺪ ﮐﻮواﻻﻧ ﺴﯽ‬ ‫ﺘﻖ‬ ‫‪BMK‬‬ ‫ﻣﺰدوج‬
‫ﯾﮏ ﻣﺸ‬ ‫‪GlnBP‬وآوردن‬ ‫ﻣﺰدوج‬
‫ﺑﻪ دﺳ ﺖ‬‫ﺑﺮا ی‬‫آن یرا‬
‫ﺑﺮا‬ ‫ﺳﺎﺧﮐﻪ‬
‫ﺘﺎر‬ ‫روﺷﯽ‬
‫ﻫﻤﺎن ﻣﺎ‬
‫ﯾﻦ‪،‬‬ ‫ﺑﺎ‬
‫ﺑﺮا‬ ‫‪BSA‬‬
‫ﺑﻨﺎ‬ ‫ﻣﺰدوج‬
‫ﺳ ﺖ‪.‬‬ ‫‪8-11‬‬
‫ﮐﻮﭼﮏ ا‬ ‫ﯿﺎر‬‫ﺷﺪ‪.‬ﺴ‬
‫ﺑ‬ ‫ﮐﻮﻧﮋوﮔﻪ‬
‫ﯾﮑﯽ‬ ‫اآن‬
‫ﯾﻤﻮﻧﻮﻟﻮژ‬
‫ﯾ ﺶ ﺷﺪﻧﺪ‪.‬‬
‫ﯿﻪ ‪BMK‬اﻧﺠﺎم ﺷﺪ‪ ،‬آزﻣﺎ‬
‫ﺑﺎد ی ﻫﺎ ی ﺧﺎص ﻋﻠ‬
‫ﺘﯽ‬‫ﺑﺎ آﻧ‬‫ﺑﻼ ت ﮐﻪ‬‫ﺘﺮن‬
‫ﯾ ﺶ ﻫﺎ ی وﺳ‬
‫ﺗﻮﺳﻂ آزﻣﺎ‬

‫ﯾﻦ ﻣﺠﻠﻪ ‪ª The Royal Society of Chemistry 2012‬اﺳ ﺖ‬

‫ا‬ ‫ﻣﻘﻌﺪ ی رو ش ﻫﺎ‪2012، 4، 3558-3564 | 3561 ،‬‬
‫‪Machine Translated by Google‬‬

‫ﺘﻘﺎ ت ‪BMK‬و ‪ELISA‬‬

‫ﯿﻪ ﻣﺸ‬
‫ﺑﺎد ی ﻋﻠ‬‫ﺘﯽ‬
‫ﯿﺪ آﻧ‬
‫ﺗﻮﻟ‬ ‫ﯿﻮن‬
‫ﯾﻤﻦﺳﺎز ی‪ ،‬ﻓﺮاﮐ ﺴ‬
‫ﯾﺎن دوره ا‬
‫ﭘﺎ‬‫ﺘﺎﻧﺪارد‪10 .‬در‬
‫ﺗﮑﻞ اﺳ‬
‫ﭘﺮو‬‫ﺒﺎلﯾﮏ‬
‫ﺑﻪ دﻧ‬
‫ﺑﻞ ‪BMK،‬‬
‫در ﻣﻘﺎ‬
‫ﺗﺴ ﺖ‬ ‫ﺘﺎﻧﺪارد ﺟﺪا ﺷﺪ‪.‬‬
‫ﺗﻮﺳﻂ اﺳ‬
‫ﯿﻦ ‪A‬‬
‫ﺗﺌ‬‫ﭘﺮو‬‫ﺘﻮن‬
‫ﯿ ﺖﺳ‬
‫ﻫﺎ ی ‪IgG‬ﺳﺮم ﺧﺮﮔﻮ شﺗﻮﺳﻂ ﮐ‬

‫ﯾﻤﻦﺳﺎز ی ﺧﺮﮔﻮ ش‬
‫ﺑﺮا ی ا‬
‫ﮐﻨﮋوﮔﻪ ‪GlnBP-1-methyl-2-phenyl-ethylideneaminooxy‬‬
‫ﺘﻔﺎده ﺷﺪ‪.‬‬
‫ﭘﻠﯽ ﮐﻠﻮﻧﺎل اﺳ‬‫ﺑﺎد ی ﻫﺎ ی‬‫ﺘﯽ‬
‫ﯿﺪ آﻧ‬
‫ﺑﺮا یﺗﻮﻟ‬‫ﻫﺎ‬

‫ﺗﺰ‪.‬‬
‫ﯿﻒ ‪1H-NMR BMK-oxime‬در ‪CDCl3، 400‬ﻣﮕﺎ ﻫﺮ‬
‫ﺷﮑﻞ ‪2‬ﻃ‬
‫ﯿﮕﺮاد‬
‫ﺘ‬‫ﺷﮑﻞ ‪3‬رو ی ‪25‬درﺟﻪﺳﺎﻧ‬ ‫ﯿﺮ اﻧﺠﺎم ﺷﺪ‪ .‬درﺟﻪ ﺣﺮار ت‬
‫ﺑﺎﻓﺮ ‪Tris-borate‬در ﺣﻀﻮر ‪0.005% Tween‬و ‪1%‬ﺷ‬‫ﯾﺰا ﺿﺪ ‪BMK IgG.‬ﺳﻨﺠ ﺶ در‬
‫ﺳﻨﺠ ﺶ اﻻ‬
‫ﯿﻢ ﺷﺪ‪.‬‬
‫ﺗﻨﻈ‬

‫ﯿﺪ ﺷﺪه در ﺧﺮﮔﻮ ش‪ .‬ﺧﻂ ‪1: 10‬‬

‫ﺘﻖﺗﻮﻟ‬
‫ﺑﺎد ی ﺧﺎص ﺿﺪ ﻣﺸ‬‫ﺘﯽ‬
‫ﺑﻼ ت از آﻧ‬‫ﺘﺮن‬
‫ﯿﻞ وﺳ‬
‫ﯾﻪ وﺗﺤﻠ‬
‫ﺗﺠﺰ‬
‫ﺷﮑﻞ ‪4‬‬
‫ﯿﻠﯽ ﮔﺮم ‪BSA.‬‬
‫ﯿﻠﯽ ﮔﺮم ‪BSA-BMK‬و ﺧﻂ ‪2: 10‬ﻣ‬
‫ﻣ‬
‫ﯿﻢ ﺷﺪ‪.‬‬
‫ﯿﮕﺮادﺗﻨﻈ‬
‫ﺘ‬‫دﻣﺎ رو ی ‪25‬درﺟﻪﺳﺎﻧ‬

‫| ‪3562‬ﻣﻘﻌﺪ ی رو ش ﻫﺎ‪2012، 4، 3558-3564 ،‬‬ ‫ﯾﻦ ﻣﺠﻠﻪ ‪ª The Royal Society of Chemistry 2012‬اﺳ ﺖ‬
‫ا‬
‫‪Machine Translated by Google‬‬

‫ﯿﻢ ﺷﺪ‪.‬‬
‫ﯿﮕﺮادﺗﻨﻈ‬
‫ﺘ‬‫ﺒ ﺶ ‪BMK-BSA-488.‬دﻣﺎ رو ی ‪25‬درﺟﻪﺳﺎﻧ‬
‫ﺘﺸﺎر ﻗﻄ‬
‫ﯿﻒ اﻧ‬
‫ﺷﮑﻞ ‪5‬ﻃ‬

‫ﯿﻠﯽﻣﻮﻻر ‪PBS‬در ‪7.4‬‬

‫ﺑﺮ ‪10‬ﻣ‬
‫ﺑﺮا‬‫ﯿﻆ و در‬
‫ﯿﻊ‪،‬ﺗﻐﻠ‬
‫ﯿﻮن ﻫﺎ ی ‪IgG‬ﺟﻤﻊآور یﺷﺪه‪،‬ﺗﺠﻤ‬
‫ﯾﻪ ﻫﺎ ﻓﺮاﮐ ﺴ‬
‫رو‬
‫ﺘﻨﺪ‪.‬‬
‫ﯾ ﺶ ﻗﺮار ﮔﺮﻓ‬
‫ﺑﺎ رو ش ‪ELISA‬ﻣﻮرد آزﻣﺎ‬‫ﯿﺰ ﺷﺪﻧﺪ و‬
‫ﯾﺎﻟ‬
‫‪pH‬د‬
‫ﺳﻨﺠ ﺶ‬
‫ﺑﺎد ی ﻫﺎ ی ﺿﺪ ‪GlnBP‬ﻣﻮﺟﻮد درﺳﺮم‬‫ﺘﯽ‬
‫ﺑﺮا ی ﺣﺬف واﮐﻨ ﺶ ﻫﺎ ی ﻧﺎدرﺳ ﺖ ﻧﺎﺷﯽ از آﻧ‬
‫ﯾﻦ ﻣﻨﻈﻮر ‪BSA‬‬
‫ﺑﺮا ی ا‬‫ﺘﻖ ‪BMK‬ﮐﻮﻧﮋوﮔﻪ ﺷﺪ‪.‬‬
‫ﺑﻪ ﻣﺸ‬
‫ﺘﻔﺎو ت از ‪GlnBP‬‬
‫ﯿﻨﯽ ﻣ‬
‫ﺗﺌ‬‫ﭘﺮو‬‫ﺧﺮﮔﻮ ش‪،‬‬
‫ﺑﺎد ی ﻫﺎ ی ﺿﺪ ‪BMK‬‬‫ﺘﯽ‬
‫ﺘﺮ آﻧ‬
‫ﯿ‬‫ﯾﺰا را ﻧﺸﺎن ﻣﯽ د ﻫﺪ‪.‬ﺗ‬
‫ﯾﺸﺎ ت اﻻ‬
‫ﯾﺞ آزﻣﺎ‬
‫ﺘﺎ‬‫ﺘﺨﺎ ب ﺷﺪ‪ .‬ﺷﮑﻞ ‪3‬ﻧ‬
‫اﻧ‬
‫ﺗﺎ ‪64000‬وﺟﻮد‬
‫ﺑﺎ رﻗ ﺖ ﻫﺎ ی ‪IgG‬‬
‫ﯾ ﺶ ‪ELISA‬‬
‫ﺑﻪ ﻧﻈﺮ ﻣﯽ رﺳﺪ‪ ،‬ﻫﻨﻮز ﻫﻢ اﻣﮑﺎن اﻧﺠﺎم آزﻣﺎ‬‫ﻋﺎﻟﯽ‬
‫داﺷ ﺖ‪.‬‬

‫ﺘﺼﺎﺻﯽ‬
‫ﺑﺎد ی ﻫﺎ ی اﺧ‬‫ﺘﯽ‬
‫ﺒﯽ و ﺧﺎﻟﺺﺳﺎز ی آﻧ‬
‫ﯿ‬‫ﯿﻞﺗﺮﮐ‬
‫ﺘﻮن ﻫﺎ ی ﻣ‬
‫ﯿﻪﺳ‬
‫ﺗﻬ‬

‫ﺑﺎ‬
‫ﯿﻦ )‪A‬‬
‫ﺗﺌ‬‫ﭘﺮو‬‫ﭘ ﺲ از ﺧﺎﻟﺺﺳﺎز ی‬
‫ﺑﺨ ﺶ ‪)IgG‬‬‫ﺘﻖ ‪BMK‬از‬
‫ﺑﺮا ی ﻣﺸ‬‫ﺘﺼﺎﺻﯽ‬
‫ﺑﺎد ی ﻫﺎ ی اﺧ‬‫ﺘﯽ‬
‫آﻧ‬
‫ﺑﺎرﮔﺬار ی‪،‬‬‫ﭘ ﺲ از‬‫ﺘﻖ ‪BMK‬ﺧﺎﻟﺺ ﺷﺪﻧﺪ‪.‬‬
‫ﺑﺎ ﻣﺸ‬‫ﯾﻦ ﮐﻮﻧﮋوﮔﻪ‬
‫ﺒﯽ رو ی رز‬
‫ﯿ‬‫ﯿﻞﺗﺮﮐ‬
‫ﺗﻮﮔﺮاﻓﯽ ﻣ‬
‫ﮐﺮوﻣﺎ‬
‫ﺘﻔﺎده‬
‫ﺑﺎ اﺳ‬‫ﺘﻪ ﺷﺪ و‬
‫ﺘﺼﺎﺻﯽ ﺷ ﺴ‬
‫ﯿﺮ اﺧ‬
‫ﺑﺎد ی ﻫﺎ ی ﻏ‬‫ﺘﯽ‬
‫ﺑﺮدن آﻧ‬‫ﯿﻦ‬
‫ﺑ‬‫ﺑﺮا ی از‬‫ﺗﺼﺎل‬
‫ﺑﺎﻓﺮ ﻫﺎ ی ا‬‫ﺑﺎ‬‫ﺘﻮن‬
‫ﺳ‬
‫ﺑﺮ ﺟﺬ ب در ‪l¼ 278‬‬‫ﺑﺎ ﻧﻈﺎر ت‬‫ﺑﺎد ی ﻫﺎ‬‫ﺘﯽ‬
‫ﯿﻮن ﻫﺎ ی ﺣﺎو ی آﻧ‬
‫ﺘﻪ ﺷﺪ‪ .‬ﻓﺮاﮐ ﺴ‬
‫ﺑﺎﻓﺮ در ‪pH 2.8‬ﺷ ﺴ‬‫از‬
‫ﯾ ﺶ ﺷﺪﻧﺪ‪.‬‬
‫ﺘﻖ ‪BMK‬آزﻣﺎ‬
‫ﺑﺮ ﻣﺸ‬
‫ﺑﺮا‬‫ﺑﻼ ت در‬‫ﺘﺮن‬
‫ﺑﺎ وﺳ‬‫ﺘﺨﺎ ب ﺷﺪﻧﺪ و‬
‫ﺘﺮ اﻧ‬
‫ﻧﺎﻧﻮﻣ‬

‫ﺑﺎد ی ﻫﺎ ی ﺧﺎص‬‫ﺘﯽ‬
‫ﺑﺎ آﻧ‬‫ﺑﻼ ت‬‫ﺘﺮن‬
‫وﺳ‬

‫ﺑﺎ‬‫ﺑﻪ ﮐﺮدن ﻧﻤﻮﻧﻪ ﻫﺎ‬

‫ﺑﺎ اﻧﮑﻮ‬‫ﺑﻮد(‬‫ﺘﺮل ﻣﻨﻔﯽ‬
‫ﺑﻼ ت ﮐﻨﮋوﮔﻪ ‪BMK (BSA‬ﮐﻨ‬‫ﺘﺮن‬
‫ﯾ ﺶ ﻫﺎ ی وﺳ‬
‫آزﻣﺎ‬
‫ﺒﯽ ‪EAH–BMK‬‬
‫ﯿ‬‫ﯿﻞﺗﺮﮐ‬
‫ﺘﻮن ﻣ‬
‫ﺘﺼﺎﺻﯽ ﺧﺎﻟﺺﺷﺪه ﺿﺪ ‪BMK‬ﮐﻪ رو یﺳ‬
‫ﺑﺎد ی ﻫﺎ ی اﺧ‬
‫ﺘﯽ‬‫آﻧ‬
‫ﯾﻪ ﻣﺰدوج ‪HRP‬‬
‫ﺛﺎﻧﻮ‬‫ﺑﺎد ی‬‫ﺘﯽ‬
‫ﯿﻮن آﻧ‬
‫ﺑﺎﺳ‬
‫ﭘ ﺲ از اﻧﮑﻮ‬‫ﺧﺎﻟﺺﺳﺎز ی ﺷﺪهاﻧﺪ )رﻗ ﺖ )‪1:500‬اﻧﺠﺎم ﺷﺪ‪.‬‬
‫ﯿﭻ‬
‫ﺑﺮا ی ‪BSA-BMK‬ﻣﺸﺎ ﻫﺪه ﺷﺪ و ﻫ‬‫ﭘﺎﺳﺦ واﺿﺢ‬‫ﯾﮏ‬
‫ﺘﺼﺎﺻﯽ ‪ECL،‬‬
‫ﺑﺎ ﻣﻌﺮف اﺧ‬‫وﺗﻮﺳﻌﻪ‬
‫ﺑﺮا ی ‪BSA‬ﻣﺸﺎ ﻫﺪه ﻧﺸﺪ )ﺷﮑﻞ ‪4).‬‬‫ﭘﺎﺳﺨﯽ‬

‫ﯾﺪار ﻓﻠﻮرﺳﺎﻧ ﺲ ﻣﺰدوج ‪BMK-BSA-CF488‬‬

‫ﭘﺎ‬‫ﯿﺮ ی ﻫﺎ ی ﺣﺎﻟ ﺖ‬
‫اﻧﺪازهﮔ‬

‫ﺑﺎ‬‫ﺑﺮا ی ‪BMK،‬ﻣﺎﯾﮏ ‪BMK-BSA‬ﻧﺸﺎﻧﺪار ﺷﺪه‬‫ﯿﻮن‬

‫ﯾﺰاﺳ‬
‫ﭘﻼر‬‫ﯾﻤﻮﻧﻮاﺳﯽ‬
‫ﺑﻪ ﻣﻨﻈﻮر اﻧﺠﺎم ا‬
‫ﯿﻢ‪.‬‬
‫ﯿﺪ ﻣﯽ ﮐﻨ‬
‫ﺗﻮﻟ‬
‫)‪CF488 (BMK-BSA-488‬‬

‫ﯾﻦ ﻣﺠﻠﻪ ‪ª The Royal Society of Chemistry 2012‬اﺳ ﺖ‬

‫ا‬ ‫ﻣﻘﻌﺪ ی رو ش ﻫﺎ‪2012، 4، 3558-3564 | 3563 ،‬‬
‫‪Machine Translated by Google‬‬

‫ﺑﻌﯽ از ﻏﻠﻈ ﺖ‬
‫ﺑﻪ ﻋﻨﻮانﺗﺎ‬‫ﺘﺮ‬
‫ﺒﯽ ﺷﺪه را در ‪512‬ﻧﺎﻧﻮﻣ‬
‫ﺘﺸﺎر ﻗﻄ‬
‫ﯿﺮا ت اﻧ‬
‫ﯿ‬‫ﺘﺼﺎﺻﯽ ‪BMK.‬ورود یﺗﻐ‬
‫ﺑﺎد ی ﻫﺎ ی اﺧ‬‫ﺘﯽ‬
‫ﯾ ﺶ ﻏﻠﻈ ﺖ آﻧ‬
‫ﺒ ﺶ ‪BMK-BSA-488‬در ﺣﻀﻮر اﻓﺰا‬
‫ﻫﺪ‪.‬‬
‫ﺘﺸﺎردﻗﻄ‬
‫اﻧ ﻣﯽ‬
‫ﻧﺸﺎن‬
‫ﯿﻒ‬‫ﻃ‬
‫ﺑﺎد‪ 6‬ی‬
‫ﺷﮑﻞ‬
‫ﺘﯽ‬
‫آﻧ‬

‫ﺒﻞ از اﻧﺠﺎم اﻧﺪازه‬

‫ﭘﺮو ب واﮐﻨ ﺶ ﻧﺪاده ﻗ‬‫ﺑﺮا ی ﺣﺬف‬‫ﯿﺰ‬
‫ﯾﺎﻟ‬
‫ﯿﻮن ژل و د‬
‫ﺘﺮاﺳ‬
‫ﯿﻠ‬‫ﺑﺎﺷﺪ‪ ،‬ﻓ‬‫ﺘﻪ‬
‫ﯿﺮ ی ﻫﺎﺗﺪاﺧﻞ داﺷ‬
‫ﺚاﻧﺪازه ﮔ‬
‫ﺑﺎﻋدر‬
‫ﺗﻮاﻧﺪ‬
‫ﻧﺎﻧﻮﻣﻮﻻر‬
‫‪200‬ﮐﻪ ﻣﯽ‬
‫ﻧﺪارد‪،‬‬
‫ﺑﺎد ی‬
‫ﻣﺤﻠﻮل‬
‫ﺘﯽ‬‫در آﻧ‬
‫ﯾﮕﺎﻧﯽﺖ‬
‫ﺶ ﻏﻠﻈ‬
‫رﻧﮓ را‬
‫ﯾ‬‫ﯿﭻاﻓﺰا‬
‫اﻓﺰودن‬
‫ﻧﻤﻮﻧﻪ ﻫ‬
‫ﺗﻨﻬﺎ‬
‫ﯾﻨﮑﻪ‬
‫ﻫﺪا ﮐﻪ‬
‫ﯿﻨﺎند از‬
‫اﻃﻤﻣﯽ‬
‫ﻧﺸﺎن‬
‫ﺑﺮا ی‬
‫ﯾﺞ‬‫ﺘﺎ‬
‫ﯾﻦ ﻧ‬
‫ا‬
‫ﯿﻒ ﻫﺎ از ‪500‬‬
‫ﺑ ﺖ ﺷﺪ و ﻃ‬
‫ﺛﺎ‬‫ﺘﺮ‬
‫ﯾﮏ در ‪488‬ﻧﺎﻧﻮﻣ‬
‫ﯿﮕﺮاد ﻧﺸﺎن ﻣﯽ د ﻫﺪ‪.‬ﺗﺤﺮ‬
‫ﺘ‬‫اﻓﺰودندر دﻣﺎ ی ‪25‬درﺟﻪﺳﺎﻧ‬
‫‪BSA-488‬ﮐﻪ‪BMK-‬را‬
‫ﻧﺸﺎن ﻣﯽ د ﻫﺪ‬ ‫ﻗﻄ ﻫﺎ‬
‫ﺒﯽ ﺷﺪه‬ ‫ﯿﻒ‬ ‫ﺷﻮد‪ .‬ﻃ‬
‫ﺘﺸﺎر‬ ‫‪BMK-‬ﻃﻣﯽ‬
‫ﯿﻒ اﻧ‬ ‫ﺷﮑﻞ ‪5‬‬‫‪BSA488‬‬ ‫ﯾﺰه‬
‫اﻧﺠﺎم ﺷﺪ‪.‬‬ ‫ﭘﻼر‬
‫ﯿﻮن‬
‫ﺳ‬‫ﯾﺰاﺲ‬
‫ﺳﺎﻧ‬‫ﻓﻠﻮر‬
‫ﭘﻼر‬‫ﺷﺪ ی تﻫﺎ ی‬‫ﯾ ﺶﮔ‬
‫ﯿﺮ‬ ‫اﻓﺰا‬

‫ﺘﻤﺮﮐﺰ ﺷﺪ‪.‬‬
‫ﺘﺮ ﻣ‬
‫ﻧﺎﻧﻮﻣ‬
‫ﺷﺪ‪.‬‬ ‫‪512‬‬ ‫‪BSA-488‬در‬
‫‪BMK-‬‬ ‫‪BMK-BSA-488‬‬ ‫ﺘﺸﺎر‬
‫در ﺷﺪ ت‬ ‫ﺜﺮ اﻧ‪36٪‬‬‫ﺣﺪاﮐ‬
‫ﺒﯽ‬‫ﯾ‬‫ﺗﻘﺮ‬‫آﻣﺪﻧﺪ‪.‬‬
‫ﯾﺶ‬ ‫ﺑﻪﺖاﻓﺰا‬
‫ﺳ‬‫ﺑﻪ د‬
‫ﻣﻨﺠﺮ‬‫ﺘﺮ‬ ‫‪600(600‬ﻧﺎﻧﻮﻣ‬
‫ﻧﺎﻧﻮﻣﻮﻻر(‬ ‫ﺘﺮﺗﺎ‬
‫ﻧﺎﻧﻮﻣ‬
‫ﻫﺎ‬ ‫ﺑﺎد ی‬‫ﺘﯽ‬
‫آﻧ‬

‫ﺑﻌﯽ از‬
‫ﺑﻪ ﻋﻨﻮانﺗﺎ‬‫ﺘﺮ‬
‫ﯾﺰه را در ‪512‬ﻧﺎﻧﻮﻣ‬
‫ﭘﻼر‬‫ﺘﺸﺎر ﻓﻠﻮرﺳﺎﻧ ﺲ‬
‫ﺜﺮ اﻧ‬
‫ﯿﺮ ﺣﺪاﮐ‬
‫ﯿ‬‫ﺷﮑﻞ ‪6‬ورود ی‪،‬ﺗﻐ‬
‫ﺘﯽ‬
‫ﺑﺎ اﻓﺰودن آﻧ‬‫ﯾ ﺶ ﺷﺪ ت‬
‫ﯾﺞ ﻧﺸﺎن ﻣﯽ د ﻫﺪ ﮐﻪ اﻓﺰا‬
‫ﺘﺎ‬‫ﯾﻦ ﻧ‬
‫ﺑﺎد ی ﻧﺸﺎن ﻣﯽ د ﻫﺪ‪ .‬ا‬‫ﺘﯽ‬
‫ﻏﻠﻈ ﺖ آﻧ‬
‫ﺑﻮد‪.‬‬‫ﺑﺎد ی ﻫﺎ در ﻣﺤﺪوده ﻏﻠﻈ ﺖ از ‪0.0‬ﻧﺎﻧﻮﻣﻮﻻرﺗﺎ ‪600‬ﻧﺎﻧﻮﻣﻮﻻر ﺧﻄﯽ‬
‫ﺘﯽ ﮔﺮاد و ﻣﺤﻠﻮل‬
‫ﯿﺮ ی ﻫﺎ در دﻣﺎ ی ‪25‬درﺟﻪﺳﺎﻧ‬
‫ﺘﺼﺎﺻﯽ ‪BMK‬ﻧﺸﺎن ﻣﯽ د ﻫﺪ‪ .‬اﻧﺪازه ﮔ‬
‫ﺑﺎد ی ﻫﺎ ی اﺧ‬‫ﺘﯽ‬
‫ﯾ ﺶ ﻏﻠﻈ ﺖ آﻧ‬
‫ﺒﯽ ﺷﺪه ‪BMK-BSA-488‬را در ﺣﻀﻮر اﻓﺰا‬
‫ﺘﺸﺎر ﻗﻄ‬
‫ﯿﻒ اﻧ‬
‫ﺷﮑﻞ ‪6‬ﻃ‬
‫اﻧﺠﺎم ﺷﺪ‬

‫ﺑﺎد ی در ﻣﺤﺪوده ﻏﻠﻈ ﺖ ‪30‬ﻧﺎﻧﻮﻣﻮﻻرﺗﺎ ‪600‬ﻧﺎﻧﻮﻣﻮﻻر اﺿﺎﻓﻪ ﺷﺪ‪.‬‬‫ﺘﯽ‬

‫آﻧ‬ ‫ﯿﻮن‬
‫ﯾﺰاﺳ‬
‫ﭘﻼر‬‫ﺘﯽ‬
‫ﺑ‬‫ﯾﻤﻮﻧﻮاﺳﯽ رﻗﺎ‬
‫ا‬

‫ﺑﺮﭼ ﺴ ﺐ در ﻣﺤﻠﻮل و‬‫ﺑﺪون‬

‫ﯾﺎ ب ‪BMK‬‬
‫ﯿﻦ رد‬
‫ﺑ‬‫ﺑﺖ‬
‫ﯿﺮ ی رﻗﺎ‬
‫ﺑﺮا ی اﻧﺪازه ﮔ‬
‫ﯾﻤﻮﻧﻮاﺳﯽ ‪FP‬‬
‫از رو ش ا‬
‫ﺘﻔﺎده ﺷﺪ‪.‬‬
‫ﯿﺮ ی اﺳ‬
‫ﺑﺮا ی اﻧﺪازه ﮔ‬
‫‪BMK-BSA-488‬‬

‫ﺑﺎد ی ﻫﺎ ی ﺧﺎص ﺿﺪ ‪BMK.‬‬‫ﺘﯽ‬

‫ﺑﺎ آﻧ‬‫ﺗﺼﺎل‬
‫ا‬
‫ﯾ ﺶ ﻏﻠﻈ ﺖ ‪BMK‬در‬
‫ﺑﺎ اﻓﺰا‬‫ﺑﺎد ی ‪(460‬ﻧﺎﻧﻮﻣﻮﻻر(‬‫ﺘﯽ‬
‫ﺑ ﺖ آﻧ‬
‫ﺛﺎ‬‫ﺑﺎ ﻏﻠﻈ ﺖ‬‫ﺘﻠﻒ‬
‫ﻧﻤﻮﻧﻪ ﻫﺎ ی ﻣﺨ‬
‫ﺑﻪ ﺷﺪﻧﺪ‪ .‬ﻫﺮ ﻧﻤﻮﻧﻪ ﺧﺎرج از ﺧﻂ ﻣﺨﻠﻮط ﺷﺪ و اﺟﺎزه داده ﺷﺪﺗﺎ‬
‫ﯿﻠﯽ ﻣﻮﻻر اﻧﮑﻮ‬
‫ﻣﺤﺪوده ‪0.2-1.0‬ﻣ‬
‫ﺑﻪ ﺷﻮد‪.‬‬
‫ﯿﻮن ﻓﻠﻮرﺳﺎﻧ ﺲ اﻧﮑﻮ‬
‫ﯾﺰاﺳ‬
‫ﭘﻼر‬‫ﯿﺮ ی‬
‫ﺒﻞ از اﻧﺪازه ﮔ‬
‫ﯿﻘﻪ ﻗ‬
‫ﺑﻪ ﻣﺪ ت ‪30‬دﻗ‬

‫ﺑﺮﭼ ﺴ ﺐ در ﻣﺤﻠﻮل‬‫ﺑﺪون‬
‫ﯾ ﺶ ‪BMK‬‬
‫ﯿﺠﻪ اﻓﺰا‬
‫ﺘ‬‫ﯾﺰه را در ﻧ‬
‫ﭘﻼر‬‫ﺘﺸﺎر ﻓﻠﻮرﺳﺎﻧ ﺲ‬
‫ﺷﮑﻞ ‪7‬ﮐﺎ ﻫ ﺶ اﻧ‬
‫ﯾﻦ‬
‫ﺑﺎ ا‬‫ﺑﻪ ﻧﻈﺮ ﻣﯽ رﺳﺪ ﮐﻪ‬‫ﯿﻞ داده ﻫﺎ ی ﻧﺸﺎن داده ﺷﺪه در ﺷﮑﻞ‪،‬‬
‫ﯾﻪ وﺗﺤﻠ‬
‫ﺑﺎﺗﺠﺰ‬‫ﻧﺸﺎن ﻣﯽ د ﻫﺪ‪.‬‬
‫ﯿﺺ داد‪.‬‬
‫ﺘﺮ راﺗﺸﺨ‬
‫ﺘﺮ از ‪50‬ﻧﺎﻧﻮﻣ‬
‫ﯾﺮ ‪BMK‬ﮐﻤ‬
‫رو ش ﻣﯽﺗﻮان ﻣﻘﺎد‬

‫ﯿﺮ ی‬
‫ﯿﺠﻪ ﮔ‬
‫ﺘ‬‫ﻧ‬

‫ﺘﻪ‬
‫ﺗﻮﺳﻌﻪﯾﺎﻓ‬
‫ﯿﺺ ‪BMK‬‬
‫ﺑﺮا یﺗﺸﺨ‬‫ﯾﺪ‬
‫ﯿﻮن ﺟﺪ‬
‫ﯾﺰاﺳ‬
‫ﭘﻼر‬‫ﺑﺮ ﻓﻠﻮرﺳﺎﻧ ﺲ‬‫ﺘﻨﯽ‬
‫ﺒ‬‫ﯿﺠﻪ‪،‬ﯾﮏ رو ش ﻣ‬
‫ﺘ‬‫در ﻧ‬
‫ﺘﺎر ﻣﻮﻟﮑﻮﻟﯽ‬
‫ﺘﺰ ﺷﺪه اﻧﺪ‪.‬ﺳﺎﺧ‬
‫ﺑﻊﺗﺠﺎر یﺳﻨ‬
‫ﺑﺎ ﺷﺮوع از ﻣﻨﺎ‬‫ﺑﺮا یﺳﻨﺠ ﺶ‬‫ﺘﻔﺎده‬
‫اﺳ ﺖ‪ .‬ﻣﻮاد ﻣﻮرد اﺳ‬
‫ﯿﺮ ﮐﺮده اﺳ ﺖ‬
‫ﯿ‬‫ﺑﻪ آنﺗﻐ‬‫ﺗﺼﺎل آﺳﺎن‬
‫ﺑﺮا ی ا‬
‫‪BMK‬‬
‫ﺑﺮﭼ ﺴ ﺐ‪.‬‬‫ﺑﺪون‬
‫ﯾ ﺶ ﻏﻠﻈ ﺖ ‪BMK‬‬
‫ﺑﺎ اﻓﺰا‬
‫ﯾﻤﻨﯽ ‪FP‬‬
‫ﯿﻮنﺳﻨﺠ ﺶ ا‬
‫ﺘﺮاﺳ‬
‫ﯿ‬‫ﺗ‬‫ﺷﮑﻞ ‪7‬‬

‫| ‪3564‬ﻣﻘﻌﺪ ی رو ش ﻫﺎ‪2012، 4، 3558-3564 ،‬‬ ‫ﯾﻦ ﻣﺠﻠﻪ ‪ª The Royal Society of Chemistry 2012‬اﺳ ﺖ‬
‫ا‬
‫‪Machine Translated by Google‬‬

‫ﺑﺎد ی ﻫﺎ ی ﺧﺎص‬
‫ﺘﯽ‬ ‫ﺒﺎ ًﺗﻮﻟ‬
‫ﯿﺪ آﻧ‬ ‫ﺘﻌﺎﻗ‬
‫ﯾﻤﻨﯽ و ﻣ‬
‫ﯿﺪﯾﮏ ﻣﺰدوج واﮐﻨ ﺶد ﻫﻨﺪه ا‬
‫ﺑﺮا یﺗﻮﻟ‬
‫ﯿﻦ ‪GlnBP‬‬
‫ﺗﺌ‬‫ﭘﺮو‬

‫ﯾﻦ ﻣﺠﻠﻪ ‪ª The Royal Society of Chemistry 2012‬اﺳ ﺖ‬

‫ا‬ ‫ﻣﻘﻌﺪ ی رو ش ﻫﺎ‪2012، 4، 3558-3564 | 3565 ،‬‬
‫‪Machine Translated by Google‬‬

‫ﯾﯽ را در ﮐﻞ ﻣﺤﺪوده‬
‫ﺑﺎﻻ‬‫ﯾﺮ ی‬
‫ﭘﺬ‬‫ﯾﻦ رو شﺗﮑﺮار‬
‫ﺑﻌﻼوه‪ ،‬ا‬ ‫ﺒﺎ ً ﺧﻄﯽﺗﺎ ‪۶۰۰‬ﻧﺎﻧﻮﻣ‬
‫ﺘﺮ ﻧﺸﺎن ﻣﯽد ﻫﺪ‪.‬‬ ‫ﯾ‬‫ﭘﺎﺳﺦﺗﻘﺮ‬‫ﺘﺮ و‬
‫ﺖ‬
‫ﻧﺎﻧﻮﻣ‬
‫‪ ۱۰۰‬ﺴ‬
‫ﭘ‬‫ﻫﺎ و‬
‫ﻣﺮز از‬
‫ﺘﺮ‬‫درﮐﻤ‬
‫‪LOD‬‬
‫ﯾﺪه‬
‫ﺑﺎ د‬
‫آﻣﻮزراش‬
‫ﺒﯽ‬‫ﺟﺎﻟ‬
‫ﯿﺮ‬‫ﯿﻠﯽﻏ‬
‫ﺳﻨﻞ‬
‫ﺗﺤﻠ‬
‫ﭘﺮ‬
‫ﺳﻂ ی‬
‫ﻋﻤﻠﮑﺮد ﻫﺎ‬
‫ﺗﻮاﻧﺪﺗﻮ‬
‫ﺘﻪ‬
‫ﻣﯽ‬
‫ﯾﺎﻓ‬
‫ﺳﻌﻪ‬
‫‪5،6‬ﮐﻪ‬
‫ﺶﺗﻮ‬‫ﯿﻮن‬
‫ﺳﻨﺠ‬
‫ﯾﺰاﺳ‬
‫ش‪.‬‬
‫ﭘﻼر‬
‫ﺧﺮﮔﻮ‬
‫ﺳﺎﻧ ﺲ‬
‫ﻓﻠﻮردر‬
‫ﺿﺪ ت‪BMK‬‬
‫ﺷﺪ‬
‫ﻧﺸﺎن داده ﺷﺪه اﺳ ﺖ‪.‬‬ ‫ﺘﻔﺎده ‪7‬‬
‫ﺷﻮد‪.‬‬ ‫ﺳﺷﮑﻞ‬ ‫ﻫﻤﺎﻧﻄﻮر اﮐﻪی ادر‬
‫ﯾﻊ ﻧﻘﻄﻪ‬ ‫ﺳﯽﻫﺪ‪،‬‬
‫ﺳﺮ‬ ‫ﻣﯽ د‬
‫ﺑﺮر‬‫ﻧﺸﺎن‬
‫ﺑﺮا ی‬‫‪BMK‬و‬ ‫ﻏﻠﻈیﺖ‬
‫ﺑﺎزرﺳﯽ‬ ‫ﻫﺎ‬

‫ﯾﻬﺎ‬
‫ﭙﺎﺳﮕﺰار‬
‫ﺳ‬

‫ﯾﻨﻪ‪242387. :‬‬
‫ﭘﺮوژه "‪"CUSTOM‬ﻣﻮاﻓﻘ ﺖ ﻧﺎﻣﻪ ﮐﻤﮏ ﻫﺰ‬‫ﭘﺎ‬
‫ﯾﻪ ارو‬
‫ﺗﺤﺎد‬
‫ﭘﺮوژه در ﭼﺎرﭼﻮ ب ‪FP7‬ا‬‫ﯾﻦ‬
‫ا‬
‫ﯿﺺ‬
‫ﺑﻪﺗﺸﺨ‬‫ﺘﮕﺎه ﻧﻮر یﺳﺎده اﺳ ﺖ ﮐﻪ ﻗﺎدر‬
‫ﯾﻦﺳﻨﺠ ﺶ اﻣﮑﺎنﺳﺎﺧ ﺖﯾﮏ دﺳ‬
‫ﯾ ﺖ اﺻﻠﯽ ا‬
‫ﻣﺰ‬
‫ﯿﻢ‪.‬‬
‫ﭘﺮوﻓ ﺴﻮرﺗﺸﮑﺮ ﮐﻨ‬‫ﯿﻢ از‬
‫ﯾﻠ‬‫ﻣﺎ‬
‫ﯿﺮا ت در‬
‫ﯿ‬‫ﺗﻐ‬
‫ﯾ ﺶ ﻫﺎ ی ‪NMR.‬‬
‫ﺑﺮا ی آزﻣﺎ‬‫ﯾﮑﻮ دوم"‬
‫ﭘﻞ "ﻓﺪر‬
‫ﯿ ﺴﯽ‪ ،‬داﻧﺸﮕﺎه ﻧﺎ‬
‫ﯾﺎدوﻧ‬
‫آﻟﻔﻮﻧ ﺴﻮ ا‬

‫ﺑﻊ‬
‫ﻣﻨﺎ‬

‫‪1 R. Leuckart, On a new way of forming tribenzylamine, Ber.‬‬

‫آﻟﻤﺎﻧﯽ ‪Chem. Ges., 1885, 18, 2341.‬‬

‫| ‪3564‬‬

‫ﺘﺸﺎر‬
‫ﻣﺸﺎ ﻫﺪه آﻣﺎر اﻧ‬

‫ﺘﺤﺪ‪،‬ﺳﺮ ی ﻣﻌﺎ ﻫﺪه‪ ،‬ﺟﻠﺪ‪1582، .‬ﺷﻤﺎره ‪27627.‬‬

‫‪2‬ﺳﺎزﻣﺎن ﻣﻠﻞ ﻣ‬
‫ﯿﻮن‬
‫ﺘﺮل ﻣﻮاد ﻣﺨﺪر درﺳﺎل ‪2002‬در ﻣﻮرد اﺟﺮا ی ﻣﺎده ‪12‬ﮐﻨﻮاﻧ ﺴ‬
‫ﯿﻦ اﻟﻤﻠﻠﯽ ﮐﻨ‬
‫ﺑ‬‫ﯿﺌ ﺖ‬
‫‪3‬ﮔﺰار ش ﻫ‬
‫ﺘﺸﺎرا ت‬
‫ﯿﺮﻗﺎﻧﻮﻧﯽ ﻣﻮاد ﻣﺨﺪر و ﻣﻮاد رواﻧﮕﺮدان درﺳﺎل ‪1988‬اﻧ‬
‫ﯿﻪ ﻗﺎﭼﺎق ﻏ‬‫ﺘﺤﺪ ﻋﻠ‬
‫ﺳﺎزﻣﺎن ﻣﻠﻞ ﻣ‬
‫ﺘﺤﺪ‪ ،‬ﺷﻤﺎره ﻓﺮو ش ‪E.03.XI.4.‬‬
‫ﺳﺎزﻣﺎن ﻣﻠﻞ ﻣ‬

‫‪4 T. Krawczyk، I. Kunda، D. Perkowska‬و ‪D. Dudek، Bull. Narc.، 2005، LVII (1‬و‬
‫‪2)، 33-65.‬‬
‫ﯿﻤﯽ‪1999، 71، 1241-1251. ،‬‬
‫‪5 I. Gryczynski، Z. Gryczynski‬و ‪JR Lakowicz، Anal.‬ﺷ‬

‫‪6 JR Lakowicz، I. Gryczynski، Z. Gryczynski‬و ‪JD Dattelbaum،‬‬

‫ﯿﻤﯽ‪1999، 267، 397-405. ،‬‬‫ﯿﻮﺷ‬‫ﺑ‬‫ﻣﻘﻌﺪ ی‬
‫‪7 IM Kuznetsova، OV Stepanenko، KK Turoverov، M. Staiano، V.‬‬
‫‪Scognamiglio, M. Rossi and S. D'Auria, J. Proteome Res., 2005, 2, 417-423.‬‬

‫ﯿﻠﯽ‪Wiley Inter-Science، ،‬‬

‫ﺘﻖﺳﺎز یﺗﺤﻠ‬
‫ﺑﭽﻪ را ﻫﻨﻤﺎ ی واﮐﻨ ﺶ ﻫﺎ ی ﻣﺸ‬
‫ﺘﺎ‬
‫‪8 DR Knapp،‬ﮐ‬
‫ﯾﻮرک‪1979. ،‬‬
‫ﯿﻮ‬‫ﻧ‬
‫ﯿ ﺖ‪2008. ،‬‬
‫ﯿﻮﮐﻮﻧﮋوﮔ‬
‫ﺑ‬‫ﯿﮏ ﻫﺎ ی‬
‫ﺗﮑﻨ‬
‫‪9 GT Hermanson،‬‬
‫‪10 M. de Champdore، P. Bazzicalupo، L. De Napoli، D. Montesarchio، G.‬‬
‫ﯿﻮ‪L. Cocozza، A. Parracino، M. Rossi ،‬و ‪S. D'Auria، Anal.‬‬
‫ﺑ‬‫د ی ﻓﺎ‬
‫ﯿﻤﯽ‪2007، 79، 751-757. ،‬‬
‫ﺷ‬
‫‪M. Strianese، S. Di Giovanni، G. Ruggiero، A. Secchi، M. Dispenza، AM Fiorello‬‬
‫‪11 A. Varriale، M. Staiano، VM Marzullo،‬و ‪S. D'Auria،‬آﻧﺎل‪2012، 4، 1940-1944. .‬‬
‫‪Methods،‬‬

‫ﻣﻘﻌﺪ ی رو ش ﻫﺎ‪2012، 4، 3558-3564 ،‬‬ ‫ﯾﻦ ﻣﺠﻠﻪ ‪ª The Royal Society of Chemistry 2012‬اﺳ ﺖ‬
‫ا‬