ASTAXANTHIN ORAL MEMPERTAHANKAN JUMLAH SEL

SPERMATOGENIK MENCIT YANG MENGALAMI

AKTIVITAS FISIK MAKSIMAL

Ni Ketut Somoyani1

Abstract. Fertility is one of important thing in determining a person’s survival.

Fertility can be impaired when in the body presence quite a lot of free radicals.
Astaxanthin is able to break the chain of free radical reactive oxygen in cell membrane
to prevent lipid peroxidation. This study was aimed at determining the effect of
astaxanthin in the number of spermatogenic cells of mice (Mus musculus) induced
by physical overtraining. This was a true experimental study with pre-test and post-
test control group design. The samples of this study were strain Balb-C adult male
mice. Randomly, 32 mice were divided into two groups, 16 mice were used for control
group ( P0=the group was given physical overtraining and glyserin), and 16 mice
were used for treatment group (P1=the group was given physical overtraining and
astaxanthin 0,01 mg which was dissolved in glyserin). The rests of the mice were
used for post-test examination after 35 days treatment. On the 36th day, all the rest
mice were necropsied for microscopic testicle preparation. Data were analyzed by
independent sample t-test. The result showed that there was a significant difference
in the number of spermatogenic cells (p<0,05) after astaxanthin treatment. It can
be concluded that astaxanthin increase the number of spermatogenic cells of mice
induced by physical overtraining. The result of this study is expected to be used as a
baseline of further study to test influence of astaxanthin on the function of the
other reproduction organ like the function of tubulus seminiferus, Leydig cells, and
level of testosterone hormon.
Keywords : Astaxanthin, pyisical overtraining, spermatogenic cels.

Setiap pasangan (laki-laki dan perempuan) beberapa faktor yang dikelompokkan

mengharapkan dapat hidup secara normal dan
memiliki keturunan untuk kelangsungan
hidupnya. Kesuburan atau fertilitas
merupakan hal yang penting dalam
menentukan kelangsungan hidup manusia.
Kesuburan atau fertilitas pasangan dapat
dinilai dari jumlah dan kualitas spermatozoa
pada pria dan sel telur (ovum) pada wanita.
Pada pria, proses spermatogenesis dimulai
pada usia pubertas yang kemudian mengalami
penurunan seiring bertambahnya usia. Proses
terbentuknya sel spermatogenik melalui tiga
fase yaitu spermatositogenesis, miosis, dan
spermiosis. Semua proses tersebut
berlangsung pada epitel tubulus seminiferus1.
Spermatogenesis dapat dipengaruhi oleh
menjadi dua yaitu faktor internal dan
eksternal. Salah satu faktor tersebut adalh
terbentuknya radikal bebas di dalam tubuh2.
Olah raga dengan intensitas tinggi dan durasi
lama terbukti dapat menimbulkan kerusakan
sel. Aktivitas fisik maksimal juga dapat
menyebabkan terjadinya penurunan jumlah
dan motilitas spermatozoa3.
Penelitian tentang pelatihan fisik berlebih (stres
fisik) yang disertai dengan penurunan kualitas
spermatozoa menunjukkan bahwa terjadi
peningkatan Reactive Oxygen Species
(ROS) dalam seminal plasma dan penurunan
perlindungan oleh antioksidan. Sitoplasma sel
spermatogenik mengandung sejumlah kecil
scavenging enzyme, namun enzim antiok-

1 Dosen Jurusan Kebidanan Poltekkes Denpasar

16
 Somoyani (Astaxanthin oral mempertahankan...)
sidan intrasel ini tidak mampu melindungi
membran plasma yang melingkupi akrosom
dan ekor spermatozoa dari serangan radikal
bebas. Pada aktivitas maksimal jumlah
antioksidan tidak mampu menetralisir radikal
bebas, akibatnya muncul stres oksidatif. Stres
oksidatif dapat menyebabkan kerusakan
jaringan testis terutama tubulus seminiferus(4)
Antioksidan diyakini dapat melindungi
biomolekul terhadap stres oksidatif.
Astaxanthin merupakan salah satu pigmen
karotenoid (seperti beta karoten), yang
diekstraksi dari strain mikroalga tropis yang
disebut Haematococcus pluvialis. Penelitian
yang dilakukan oleh Wood dan Yamasitha
(2009), menyimpulkan bahwa Astaxanthin
adalah antioksidan kuat, bersifat alami dan
memiliki elektron untuk menetralkan radikal
bebas5. Penelitian terhadap 30 pria infertil
yang terpapar radikal bebas dan diberikan 16
mg Astaxanthin setiap hari selama 3 bulan
menunjukkan terjadi peningkatan angka
kehamilan sebesar 54,5%, dan pada
kelompok yang diberikan plasebo sebesar
10,5%6. Tujuan penelitian ini adalah untuk
mengetahui pengaruh pemberian Astaxanthin
oral dalam mempertahankan jumlah sel
spermatogenik mencit yang mengalami
aktivitas fisik maksimal.
Metode
Penelitian ini merupakan penelitian
eksperimental dengan menggunakan pretest-
postest control group design (7), dimana
pengelompokan subyek dilakukan secara
acak sederhana. Subyek dibagi atas dua
kelompok, yaitu; kelompok I (Kontrol)
diinduksi aktivitas fisik maksimal setelah itu
diberikan plasebo(gliserin 0,5 ml). Kelompok
II diinduksi aktivitas fisik maksimal lalu
diberikan staxanthin oral 0,01 mg dalam
larutan gliserin 0,5 ml. Perlakuan dilakukan
selama 35 hari. Sebelum perlakuan dilakukan
pemeriksaan sel spermatogenik (pre-test),
dan sesudah perlakuan (hari ke-36) dilakukan
pemeriksaan sel spermatogenik (post-test).
Kemudian dihitung rerata sel spermatogenik
pre-test dan post-test pada masing-masing
kelompok kemudian diuji secara statistik.
Penelitian ini dilakukan di Laboratory
Animal Unit Bagian Farmakologi Fakultas
Kedokteran, Universitas Udayana, dan
pemeriksaan histopatologi dikerjakan di
Laboratorium Patologi Anatomi Fakultas
Kedokteran Hewan, Universitas Udayana.
Penelitian dilaksanakan pada bulan April - Juni
2011. Sampel dalam penelitian ini adalah
mencit jantan dewasa yang memenuhi kriteria
inklusi;berat badan 20-22 gram,umur 2 – 3
bulan, sehat, satu hibrid, Galur Balb-C. Besar
sampel sebanyak 16 ekor mencit pada
masing-masing kelompok, sehingga secara
keseluruhan berjumlah 32 ekor.
Data yang dikumpulkan meliputi; sel
spermatogonium A, spermatosit pakhiten,
spermatid 7, dan spermatid 16. Data pre-test
dan post-test yang telah diperoleh kemudian
dianalisis dengan program SPSS. Analisis
data dimulai dari analisis deskriptif, uji
normalitas data dengan Shapiro-Wilk ,
didapatkan data berdistribusi normal dengan
nilai p>0,05. Sedangkan uji homogenenitas
dengan Levene’s test dan data homogen
dengan nilai p>0,05. Untuk mengetahui
perbedaan rerata jumlah sel spermatogenik
antar kelompok digunakan uji t-independent.
Sedangkan analisis perbandingan pre-test
kelompok kontrol dengan post-test kelompok
kontrol, dan pre-test kelompok perlakuan
dengan post-test kelompok perlakuan
digunakan uji Paired T-test. Analisis data
menggunakan tingkat kepercayaan 95% atau
dinyatakan berbeda bila p< 0,05.
Hasil Penelitian
Data jumlah rerata sel spermatogenik dari
kelompok kontrol dan kelompok perlakuan
terlihat pada tabel 1.
17
Jurnal Skala Husada Volume 9 Nomor 1 April 2012 : 16 - 21

Tabel 1 40,75 dengan SB±1,67. Rerata Spermatid 7

Jumlah rerata spermatogenik kelompok perlakuan
kelompok kontrol adalah 26,88 dengan SB
dan kontrol sebelum dan sesudah perlakuan ±2,64, rerata kelompok Astaxanthin adalah
27,88±1,64. Rerata Spermatid 16 kelompok
kontrol adalah 31,75 dengan SB ±3,69,
Kelompok
Sel Spermatogenik Kontrol Perlakuan
rerata kelompok Astaxanthin adalah 30,88
Pre- Post- Pre- Post- dengan SB ±2,95. Analisis kemaknaan
Spermatogonium A 38,13 27,18 38,25 39,40 dengan uji t-independent menunjukkan
Spermatosit Pakhiten 41,00 29,73 40,75 41,03 bahwa sebelum diberikan perlakuan tidak
Spermatid 7 26,88 18,93 27,88 26,45 terdapat perbedaan pada kedua kelompok
Spermatid 16 31,75 26,53 30.88 31,38
(p > 0,05).
Tabel 1 menunjukkan bahwa kelompok Analisis Efek Perlakuan
kontrol mengalami penurunan jumlah sel-sel
Analisis efek perlakuan diuji berdasarkan
spermatogenik, sedangkan pada kelompok
rerata Sel Spermatogenik antar kelompok
perlakuan terjadi peningkatan jumlah sel-sel
sesudah diberikan perlakuan. Hasil analisis
spermatogenik. Hasil uji Shapiro-Wilk
kemaknaan dengan uji t-independent
terhadap data jumlah sel Spermatogonium A,
disajikan pada Tabel 3.
Spermatosit Pakhiten, Spermatid 7, dan
Spermatid 16 baik sebelum dan sesudah Tabel 3
Rerata spermatogenik antar kelompok sesudah perlakuan
perlakuan pada masing-masing kelompok
menunjukkan data berdistribusi normal Sel Spermatogenik Kelompok N Rerata SB t P
Spermatogonium A Kontrol 8 27,18 2,11
(p>0,05). 9,98 0,00
Astaxanthin 8 39,40 2,75
Spermatosit Pakhiten Kontrol 8 29,73 1,56
14,26 0,00
Uji Beda Rerata Sel Spermatogenik Astaxanthin 8 41,03 1,61
Sebelum Perlakuan Spermatid 7 Kontrol 8 18,93 1,92
8,70 0,00
Astaxanthin 8 26,45 1,52
Untuk membandingkan rerata Sel Spermatid 16 Kontrol 8 26,53 1,59
4,58 0,00
Astaxanthin 8 31,38 2,54
spermatogenik antar kelompok sebelum
diberikan perlakuan digunakan uji t- Tabel 3 menunjukkan bahwa rerata Sel
independent. Hasil selengkapnya seperti spermatogenik setelah diberikan perlakuan
pada tabel 2. berupa Astaxanthin, didapatkan rerata
Spermatogonium A kelompok kontrol adalah
Tabel 2
Rerata spermatogenik antar kelompok sebelum perlakuan 27,18 dengan SB ±2,11, rerata kelompok
Sel Spermatogenik Kelompok N Rerata SB t P
Astaxanthin adalah 39,40 dengan SB ±2,75.
Spermatogonium A Kontrol 8 38,13 1,96
0,151 0,882
Rerata Spermatosit Pakhiten kelompok
Astaxanthin
Spermatosit Pakhiten Kontrol
8
8
38,25
41,00
1,28
2,00
kontrol adalah 29,73 dengan SB ±1,56,
0,271 0,79
Astaxanthin 8 40,75 1,67 rerata kelompok Astaxanthin adalah 41,03
Spermatid 7 Kontrol 8 26,88 2,64
Astaxanthin 8 27,88 1,64
0,909 0,379 dengan SB ±1,61. Rerata Spermatid 7
Spermatid 16 Kontrol 8 31,75 3,69 kelompok kontrol adalah 18,93 dengan SB
0,524 0,609
Astaxanthin 8 30,88 2,95
±1,92, rerata kelompok Astaxanthin adalah
Tabel 2, menunjukkan bahwa rerata 26,45 dengan SB ±1,52. Rerata Spermatid
Spermatogonium A sebelum perlakuan pada 16 kelompok kontrol adalah 26,53 dengan
kelompok kontrol adalah 38,13 dengan SB ±1,59, rerata kelompok Astaxanthin
Simpangan Baku(SB)± 1,96, rerata adalah 31,38±2,54. Analisis kemaknaan
kelompok Astaxanthin adalah 38,25 dengan dengan uji t-independent didapatkan bahwa
SB±1,28. Rerata Spermatosit Pakhiten kedua kelompok berbeda secara bermakna
kelompok kontrol adalah 41,00 dengan SB (p < 0,05).
±2,00, rerata kelompok Astaxanthin adalah

18
 Somoyani (Astaxanthin oral mempertahankan...)

Uji Paired T-Test Kelompok Penelitian (2004) yang menyatakan bahwa olah raga
dengan intensitas tinggi dan durasi lama
Kelompok kontrol terbukti dapat menimbulkan kerusakan sel.
Analisis Paired T-test dilakukan untuk Di samping itu, penelitian yang dilakukan pada
mengetahui perbedaan rata-rata antara tikus yang diberikan beban kerja aktivitas fisik
kelompok pre-test dengan post-test. Hasil (swimming stress) dengan beban ekor 2%
analisis kemaknaan dengan Paired T-test dari dari berat badan tikus menunjukkan adanya
data sel-sel spermatogenik sebelum dan peningkatan kadar Malondialdehide (MDA)
sesudah perlakuan pada kelompok kontrol yang bermakna dibandingkan dengan
berbeda bermakna (p< 0,05), seperti pada kelompok yang tidak diberikan beban kerja
Tabel 4. aktivitas fisik8. Senyawa MDA menyebabkan
Tabel 4
kerusakan membran spermatozoa dan
Uji Paired t-test kelompok kontrol sebelum dan sesudah penurunan integritas membran spermatozoa
perlakuan sehingga akan terjadi penurunan kualitas
Pair Pre-Post-Test Perbedaan spermatozoa9
T Df P
Kontrol Mean SD Radikal bebas menyebabkan kerusakan sel-
Spermatogonium A 1,09 2,22 13,959 7 0
Spermatosit Pakhiten 1,13 1,78 17,893 7 0
sel spermatogenik melalui mekanisme
Spermatid 7 7,95 2,41 9,316 7 0 peroksidasi komponen lipid dari membran sel.
Spermatid 16 5,23 4,32 3,419 7 0,011 Kerentanan spermatozoa dari proses lipid
peroksidasi karena struktur dari membran sel
Kelompok Perlakuan spermatozoa sangat tinggi kandungan asam
Analisis Paired T-test dilakukan untuk lemak tak jenuh khususnya Docosa-
mengetahui rata-rata antara kelompok pre- hexaenoic yang penting dalam mengatur
test dan post-test. Hasil analisis kemaknaan proses spermatogenesis dan fluiditas
dengan Paired T-test dari data sel-sel membran. Peroksidasi dari asam lemak tak
spermatogenik sebelum dan sesudah jenuh yang terjadi pada membran sel
perlakuan pada kelompok perlakuan tidak spermatozoa adalah reaksi self-propagation,
berbeda bermakna (p> 0,05). yang dapat meningkatkan disfungsi sel akibat
hilangnya fungsi dan integritas membran(10) .
Tabel 5
Uji Paired t-test kelompok perlakuan sebelum dan Penurunan sel-sel spermatogenik ini
sesudah perlakuan disebabkan oleh degenerasi maupun
kerusakan sel-sel spermatogenik yang
Pair Pre-Post-Test Perbedaan
T Df P disebabkan oleh adanya radikal bebas yang
Kontrol Mean SD
Spermatogonium A -1,15 3,38 -0,962 7 0,368 terbentuk dari aktivitas fisik maksimal yang
Spermatosit Pakhiten -0,28 0,67 -1,166 7 0,282
dialami oleh hewan coba11. Stres oksidatif
Spermatid 7 1,43 1,47 2,725 7 0,055
Spermatid 16 -0,50 1,42 0,997 7 0,352 akibat aktivitas fisik maksimal pada
spermatozoa akan menyebabkan gangguan
Pembahasan pada proses oksidasi fosforilasi sehingga
Terjadinya penurunan Spermatogonium A, terjadi peningkatan produksi ROS
Spermatosit Pakhiten, Spermatid 7, dan spermatozoa. Peningkatan ROS ini dapat juga
Spermatid 16 setelah mencit mengalami disebabkan karena antioksidan yang tersedia
aktivitas fisik maksimal disebabkan karena dalam sperma tidak mampu lagi mengubah
aktivitas dengan intensitas tinggi dan durasi oksigen reaktif menjadi senyawa yang netral9.
lama dapat mengakibatkan terjadinya Rerata jumlah sel spermatogenik sesudah
kerusakan sel. Hal ini didukung oleh penelitian perlakuan dengan pemberian Astaxanthin oral
yang dilakukan oleh Sutarina dan Edward 0,01 mg setiap hari pada mencit yang
mengalami aktivitas fisik maksimal,
19
Jurnal Skala Husada Volume 9 Nomor 1 April 2012 : 16 - 21
menunjukkan tidak ada perbedaan secara
bermakna dengan nilai p>0,05. Hasil ini
menunjukkan bahwa, pemberian Astaxanthin
oral dapat mempertahankan jumlah sel
spermatogenik mencit yang mengalami
aktivitas fisik maksimal. Hal tersebut
disebabkan karena Astaxhantin merupakan
salah satu pigmen karotenoid (seperti beta
karotin) yang memiliki gugus radikal yang
mampu melindungi tubuh terhadap proses
peroksidasi lipid dan kerusakan sel yang
diakibatkan oleh proses-proses oksidasi pada
membran sel dalam jaringan tubuh (12) .
Astaxanthin menunjukkan aktivitas kuat dalam
mencerna radikal bebas dan memberikan
perlindungan melawan peroksidasi lemak dan
mencegah kerusakan membran sel dan
jaringan (13,14). Astaxanthin menetralkan singlet
oksigen melalui mekanisme fisik, dimana
energi yang berlebihan dari singlet oksigen
tersebut ditransfer ke struktur karotenoid
yang kaya akan elektron dan mengubah
energinya menjadi panas, sehingga tidak
terbentuk singlet oksigen lagi serta bereaksi
dengan radikal lain untuk mencegah dan
menghentikan reaksi rantai. Astaxanthin
memiliki potensi menghambat terjadinya
singlet oksigen yang merupakan radikal
bebas, lebih besar dibandingkan karotenoid
lain dan vitamin E. Astaxanthin seperti vitamin
E merupakan antioksidan yang larut dalam
lemak, sehingga memungkinkan melewati
membran sel yang kaya lemak (12).
Kesimpulan dan saran
Pemberian Astaxanthin oral 0,01 mg setiap
hari selama 35 hari dapat mempertahankan
jumlah sel spermatogonium A, spermatosit
pakhiten, spermatid 7 dan spermatid 16
mencit yang mengalami aktivitas fisik
maksimal. Hal yang dapat disarankan dari hasil
penelitian ini adalah; perlu dilakukan penelitian
lebih lanjut untuk mengetahui pengaruh
Astaxanthin terhadap proses spermatogenesis
mencit yang terpapar oleh radikal bebas lain
dan terhadap kadar hormon LH, dan
testosteron.
20
Meskipun pada penelitian ini menunjukkan
bahwa pemberian Astaxanthin oral dapat
mempertahankan sel spermatogenik mencit,
namun perlu mempertimbangkan
penggunaanya pada manusia.
Daftar Pustaka
1. Sadller, T.W. Embriologi Kedokteran
Langman. Edisi 10. Alih Bahasa: Brahm
U Pendit; Editor: Andita Novariani.
Jakarta: Penerbit Buku Kedokteran EGC.
p: 30-34. 2010.
2. Huhtaniemi, I.T.Endocrine Regulation Of
Male Reproduction. University of Turku.
Finland. 2009
3. Sutarina, N., Edward, T. Pemberian
Suplemen pada Olahraga. 2004.Majalah
GizMindo. Vol.3 No.9 September 2004.
4. Safarinejad, M.R., Amza, K., Kolahi, AA.
The Effect of Intensive Long-Term
Treadmill Running on Reproductive
Hormones, Hypothalamus-Pituitary-Testis
Axis, and Semen Quality: A Randomized
Controlled Study. 2009. Available at: http:/
/www.endocrinology.journals.org.
Accessed : Januari 2011.
5. Wood, V., Yamashita, E. Antioxidant
Symposium 2009: An Update on Clinical
Research. Jakarta. 2009. Available at:
http://blog.perriconemd.com/astaxanthin-
side-effects. Accessed Januari 2011
6. Comhaire, F.H., Garem, YR., Mahmoud.,
Eertmans., Schoonjans. Combined
Conventional/antiokxidant”Astaxanthin”
Treatment fopr Male Infertility: a double
blind, Randomized Trial. Asian Journal
Andrology(2005) 7, 257-262;doi:10.1111
/j.1745-7262.2005.00047.x. 2004.
Available at: http://www.nature.com/aja/
journal/v7/n3/abs/aja200549a.html.
accessed: Januari 2010.
7. Pocock, S.J. The Size of A Clinical Trial,
Clinical Trials, A Practical Approach, p
123-127. 2008.
 Somoyani (Astaxanthin oral mempertahankan...)
8. Maslachah. Pengaruh Antioksidan
Probucal Terhadap kadar Malondi
aldehide (MDA) dalam Darah dan Jumlah
Circulating Endotel pada Tikus Putih Yang
menerima Stressor. 2008. Available from:
h t t p : / / a d l n . l i b . u n a i r. a c . i d /
go.php?id=jiptunar-gld-res-2001-
maslachah2c-435-probucal. Accessed:
Desember 2010.
9. Hayati, A., Mangkoewidjojo,S., Hinting,
A., and Moeljopawiro,S. Hubungan
Kadar MDA Sperma dengan Integritas
Membran Spermatozoa Tiklus Setelah
Pemaparan 2-Methoxyethanol. 2006.
Available from: http://www/
berk.penel.hayati/11. Accessed: April
2011.
10.Saleh, A. Oxidative Stress and Male
Infertility : From Research Bench to Clinical
Practice. 2002. Available at: http://www/
andrologyjournal. org/ci/content/full/23/6/
737. Accessed: April 2011.
11.Maneesh, M and Jayaleshmi, H. Role of
Reactive Oxygen Species and Antioxidant
on Pathophisiology of Male Reproduction.
2006. Indian Journal of Clinical
Biochemistry, 21 (2) 80-8
12.Winarsi, H.. Antioksidan Alami dan
Radikal Bebas. Potensi dan Aplikasinya
dalam Kesehatan. Penerbit Kanisius.
Jakarta. 2007.
13.Goto, S., Kogure,K., Abe,K.,
Kitahama,K., Yamasitha, E., Terada,H..
Efficient Radical Trapping at Surface and
Inside The Phospholipid Membrane is
Responsible for Highly Potent
Antiperoxidative Activity of The
Carotenoid Astaxanthin. 2001.
Biochemica et Biophysica Acta. Vol
1512:251-258.
14.Suseela, M.R.., Toppo, K. Haemoto
coccus pluvialis-a Green Algae, Richest
Natural Source of Astaxanthin. Current
Science. 2006. Vol 90 (12): 1602-1603.
21