Anastasiia Ilvytska, 313823

RAPORT
METABOLIZM WĘGLOWODANÓW ZAPASOWYCH
Degradacja skrobi przez α-amylazę trzustki
α-Amylaza to enzym, który rozszczepia łańcuchy skrobi na mniejsze fragmenty tzw. dekstryny
graniczne. Podczas hydrolizy tego polisacharydu następuje skracanie łańcucha skrobi do dekstryn o
coraz mniejszej masie. Wraz z degradacją skrobi następuje zanikanie reakcji z I2 w KI (zanikanie
barwy ciemnoniebieskiej), jednocześnie wzrasta ilość cukrów redukujących, które wykazują
dodatnią reakcję z odczynnikiem Fehlinga (redukcja jonów Cu2+ do Cu+).
Odczynniki:
- 2% roztwór skrobi (świeżo przygotowany)
- 0,05% roztwór I2 w KI
- odczynnik Fehlinga (roztwory Fehlinga I i II zmieszać w stosunku 1:1)
- 0,1 M NaOH
Uzyskaliśmy wyniki podczas reakcji z jodem oraz odczynnikiem Fhelinga w doświadczeniu, w
reakcji skrobi z jodem powinno dośło do zaniku grantowego zabarwienia w miarę upływu czasu.
Zaś w reakcji skrobi z próbą Fhelinga wraz z upływem czasu pojawiają się cukry redukujące, w
wyniku procesu hydrolizy, wynikiem tego jest zmiana zabarwienia z niebieskiego na brunatno-
czerwony.

Oznaczanie kwasu mlekowego w soku z kiszonych ogórków

Dehydrogenaza mleczanowa katalizuje reakcję
redukcji pirogronianu do kwasu mlekowego, w
której kosubstratem jest NADH+H+ oraz
utleniania kwasu mlekowego do pirogronianiu,
gdzie NAD+ ulega redukcji do NADH+H+.
Dysponując preparatem oczyszczonej
dehydrogenazy mleczanowej (LDH) możemy
oznaczać ilościowo pirogronian lub mleczan,
korzystając z różnic we właściwościach
spektralnych NAD+ /NADH+H+.
Odczynniki:
- 100 mM bufor glicyna-NaOH, pH 9,7
- dehydrogenaza mleczanowa (1U/100μl) w 100
mM buforze glicyna-NaOH, pH 9,7
- 2 mM NAD+ w wodzie destylowane
Wyniki:
Numer próby Absorbancja [340nm]
1. (próba “zerowa”) 0
2. 0,11
3. 0,094

Aśr= (0,11+0,094)/2 = 0,102

1M roztwór NADH+H+ wykazuje przy 340 nm absorbancję 6220, więc:
1 mol/1000 ml - 6220
1 mmmol/1ml - 6220
1 μmol/1ml - 6,220
1 nmol/1ml - 0,00622
Xnmoli – 0,102
X= (1 nmol * 0,102) / 0,00622= 16,3987 nmoli/ml
16,3987 nmoli/ml * 10 * 10*100= 163987 nmoli/100ml
Masa molowa kwasu mlekowego= 90,08 g/mol
1 mol – 90,08 g
0,000163987 mola – y g
Y= 0,014771949 g/100ml
Cp= 0,014771949 %
Produkcja alkoholu etylowego ze skrobi zawartej w ziarnach ryżu
Skrobia jest źródłem glukozy, którą komórki drożdży w warunkach beztlenowych metabolizują
glikolitycznie do pirogronianu, z którego następnie odszczepiają CO2. Powstający aldehyd octowy
jest dalej redukowany z udziałem NADH+H+ do alkoholu etylowego.
Odczynniki:
- 200g surowego ryżu
- 400g sacharozy
- 10g drożdży piekarniczych
Wykonanie:
Rozpuścamy 400 g sacharozy w 1 litrze przegotowanej i ostudzonej wody. 200 g surowego ryżu
dokładnie przepłukamy pod wodą. Ryż wsypamy do butli i zalewamy przygotowanym roztworem
sacharozy. Drożdże rozpuścamy w 20 ml wody i przenosimy do butli z ryżem i sacharozą. Butlę
zamykamy z rurką fermentacyjną napełnioną wodą. Fermentację prochodzi przez około 7 tygodni.