RAPORT

CHROMATOGRAFIA CIENKOWARSTWOWA LIPIDÓW

Metodą chromatografii cienkowarstwowej rozdzielamy związki
drobnocząsteczkowe, takie jak aminokwasy, lipidy, cukry,
nukleotydy.
Celem ćwiczenia jest chromatograficzny rozdział ekstraktu
lipidowego i identyfikacja lipidów, na podstawie reakcji
barwnych.
Próby:
 Lecytyna
 Cholesterol
 Olej jadalny
 Ekstrakt lipidowy z mózgu wieprzowego
1- Płytka w parach jodu:
Zasada metody: Fluorowce, w tym przypadku jony jodu,
podlegają reakcji addycji elektrofilowej do występujących w
nienasyconych kwasach tłuszczowych wiązań podwójnych
między atomami węgla.
Reakcja zaszła we wszystkich badanych substancjach. Oznacza
to, że we wszystkich próbach wykryto obecność wiązań
podwójnych.
2- Płytka w roztworze H2SO4:
Zasada metody: Pod wpływem stężonego H2SO4 dochodzi do odłączenia dwóch cząsteczek wody z
dwóch cząsteczek cholesterolu. W wyniku kondensacji powstaje jedna cząsteczka biocholesterolu,
która wybawrwaia się na czerwono.
Wynik dodatni próby dał ekstrakt lipidowy z mózgu wieprzowego, co świadczy o obecności w nim
cholesterolu.
3- Płytka w odczynniku do wykrywania fosfolipidów:
Zasada metody: Jony fosforanowe łączą się z molibdenianem amonowym w obecności H2SO4 i
wody, czego wynikiem są niebieskie plamki na płytce.
Próba z niebieską plamą wskazują na obecność reszt fosforanowych w badanej próbie. Lecytyna
jest fosfolipidem, stąd niebieskie plamki. Olej jadalny również wybarwił się na niebiesko; znajduje
się w nim znacząca ilość fosfolipidów. W ekstrakcie z mózgu wieprzowego również znajdują się
fosfolipidy. Cholesterol nie jest fosfolipidem, jest to fałszywy dodatni wynik próby.