วิชาพันธุศาสตร์และวิวัฒนาการ : แบบฝึกหัดเรื่อง DNA technology

ชื่อ_________________________________________________
wawwos riw เลขที่ ____________
5 ห้อง _____________
↑&

ตอนที่ 1 DNA Cloning: นักวิจัยต้องการเพิ่มปริมาณยีนทีส

่ ร้างฮอร์โมนอินซูลินเพื่อฉีดให้คนไข้ที่เป็น
โรคเบาหวานชนิดที่ 2 ด้วยเทคนิค DNA Cloning ให้นักเรียนพิจารณาภาพการตัดต่อยีน และเติมขั้นตอนในภาพ
ให้สมบูรณ์

A. เลี้ยงแบคทีเรียที่มียีนอินซูลิน
และผลิตอินซูลน
ิ

B.ถ่ายดีเอ็นเอลูกผสม
(Recombinant DNA) เข้าสูเ่ ซลล์
D
แบคทีเรีย
C

C. เชือ
่ ม DNA จากสองแหล่งเข้า
B
ด้วยกัน โดยใช้ DNA ligase

E. ฮอร์โมนอินซูลินพร้อมฉีดให้
A
คนไข้

D. ตัด Plasmid DNA ด้วย

restriction enzyme
F

F. แยกอินซูลน
ิ ให้มีความบริสุทธิ์
E
พร้อมใช้งาน
ตอนที่ 2 Polymerase chain reaction: PCR story board
ให้นักเรียนวาดภาพปฏิกิริยาในแต่ละขั้นของกระบวนการ Polymerase chain reaction

ขั้น____________________________________
Denaturing
อุณหภูม_ิ ______________________________
90 95
- 15 sec.

เหตุการณ์ที่เกิดขึ้น
Double stand DNA

# -
Double stand DNA single stand DNA

Poncertousc H-bond

single stand DNA

ขั้น____________________________________
Annealing
อุณหภูม_ิ ______________________________
&5 800c
-
Sec.
15

เหตุการณ์ที่เกิดขึ้น

primer in DNA fusions under

ขั้น____________________________________
Extension

อุณหภูม_ิ ______________________________
72% 15-30 sec.

เหตุการณ์ที่เกิดขึ้น

<
vewwwinown infuriavion nucleotide on steal
&

for
Tag polymerase Ezy.
องค์ประกอบของกระบวนการ Polymerase chain reaction (PCR) คือ

องค์ประกอบ หน้าที่

DNA template iSw DNA m

dNTP ↳Es Par

DNA

Taq DNA polymerase insugius

Primer paifavosmijzeus

หากเปรียบเทียบกระบวนการ PCR กับ DNA replication

DNA replication PCR

ขั้น________________________________
fork formation ขั้น Denature
·
Helicase nav H-bond
ใช้การเพิ่มอุณหภูมิให้สูง (95C) เพื่อทําลายพันธะ H-
bond ระหว่างสาย DNA
sudsDNA ssDNA

ขั้น________________________________
Primer binding ขั้น Annealing
เอนไซม์ Primase สร้างโมเลกุล RNA สายสั้น ๆ (RNA
primer) เพือ
่ เข้าเกาะกับสาย DNA ต้นแบบ primer nine:No Nallro
DNA

audinivasa

ขั้น Elongation ขั้น________________________________

Extension

เอนไซม์ DNA polymerase เข้าเกาะกับ RNA primer

rufu
DNA fumriaa nucleotide
เพือ
่ ต่อความยาว DNA จากทิศทาง 5’ -> 3’ varouanovos

5'es'
win fawene.
Tag polymerase
 ในปฏิกิริยา Polymerase chain reaction แต่ละรอบเป็นการเพิ่มปริมาณ DNA เท่าตัว หากเริ่มต้นที่ 1 โมเลกุล ให้
นักเรียนเติมจํานวนของโมเลกุล DNA ที่ได้แต่ละรอบลงในตารางให้ถูกต้อง

PCR cycle 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15

Copies of DNA 2 - 8 16 32 6012825651270282088909681921638032768

PCR cycle 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30

Copies of DNA 26 27 218 29 220 24 722,33,20275226 227 228 2

29
230

30
ดังนั้นเมื่อทําปฏิกิริยา Polymerase chain reaction จํานวน 30 รอบ จะได้ DNA เป็น ________________________
2

โมเลกุล และให้นักเรียน plot กราฟ ระหว่างปริมาณ DNA และจํานวนรอบของปฏิกิริยา PCR