Professional Documents
Culture Documents
Bakteriyofaj Teknik Eğitimi
Bakteriyofaj Teknik Eğitimi
6 NİSAN 2023
Sorularınızı sunum anında yazılı veya Sunum daha sonra e-posta ile
sonunda mikrofonlarınızı açarak sözlü iletilecektir.
olarak sorabilirsiniz.
6 NİSAN 2023 Fermente Süt Ürünleri /Bakteriyofaj Teknik Eğitimi ve Duyusal Analiz
Teknikleri
Davut Kara
Kıdemli Teknik Satış
Müdürü
Chr. Hansen Türkiye
6 ©2019
© 2021Chr.Chr. Hansen.
Hansen All rights
A/S. All rights reserved.
reserved.
Bir bakteriyofaj neye benzer?
24 to 200nm
1) The head_baş
2) The collar_boyun
3) The tail_kuyruk
ÖZELLİKLERİ
Image: https://en.wikipedia.org/wiki/Bacteriophage
7 © 2019 Chr. Hansen A/S. All rights reserved.
Bir fajın yaşam döngüsü, faja dayanıklı kültürlerin ve rotasyonların
neden bu kadar önemli olduğunu göstermektedir
1 2 3 4 5
Faj konak hücreye Faj konak hücreye Faj DNA'sı konak Viral bileşenler Konak hücre parçalanır
bağlanır. nüfuz eder ve hücrede viral vironlara monte edilir ve yeni vironlar serbest
› Hücre duvarında DNA'sını enjekte eder bileşenlerin sentezini kalır.
fajların genetik yönlendirir
materyallerini
tutmalarına ve FA J L A R Ç O K H I Z L I Ç O Ğ A L I R ! 3 0 D A K I K A I Ç I N D E . . .
enjekte
etmelerine izin 1 fajdan 100 faj 1 bakteriden 2 bakteri
veren spesifik
reseptörler
mevcuttur
8 ©2019
© 2021Chr.Chr. Hansen.
Hansen All rights
A/S. All rights reserved.
reserved.
Bir çok faktör laktik asit bakterilerinin (LAB)gelişimini engellerken bakteriofajların en sık rastlanan
sebep olduğuna inanılır.
• Antibiyotikler
• Bakteriofajların lizisi
Tekne 1 – Kültür ortama hakim olur Tekne 2 – Faj ortama hakim olur
Log (Bac,
phage)/mL pH pH
10
10 Kültür
1 bill./ml 9
Kültür 9
8
8
7 pH
1 mill./ml 7 pH
6
6
5
5 Faj
4 1% PAS transferi
Faj 4
1000/ml 3
3
100/ml 2
2
10/ml 1 1
1/ml 0 0
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
PH ÜZERİNDEKİ ETKİLER
FERMENTASYON SIRASINDA FAJIN PH
• Proses içi fermentasyon süresinde uzama
ÜZERİNDE ETKİSİ
• Üretim sonrası fermentasyon süresinde uzama
(‘fermentasyon sonu’) 7
• Fermentasyonun durması
pH
6
1 2 3
Bizim kültür tavsiyelerimiz genellikle sanitasyon seviyesi ve son uygulamaya dayanır. Fakat yine de süt sanayinde
kültür kullanımı için iyi uygulama tavsiyeleri vardır.
VS.
Aynı gruptaki kültürlerin mümkün olduğunca benzer etkiler göstermesi beklense de suşlar genetik olarak
farklıdırlar ve az da olsa farklı etki göstereceklerdir. Dolayısıyla kültür çeşidinde fazlalık , daha fazla çeşitlilik
demektir. Bu etki aynı faj grubunda bulunmazlarsa daha da önemli hale gelecektir.
Sütün kendisinden sonra fermente süt ürünlerindeki en önemli girdi kültürdür ve kilit önem taşır.
Kullanım dozunun azaltılması sonucunda tabloda yer alan değerlerin biri veya birkaçı olumsuz etkilenecektir.
Faj yönünden düşük dozajın anlamı, son pH ve hücre konsantrasyonu öncesi kültürün çoğalamaması demektir.
Kültür sayısının istenilen seviyeye ulaşamaması fajların çoğalarak kritik bir seviyeye ulaşması riskini arttırır
(bakterilerin iki katına çıkarken fajların 100 katına ulaştığını hatırlayın)
0,01% inoculation
Presence of phages
Reference
0,02% inoculation
3 4 5 6 7 8
pH 4.65 e ulaşma süresi (sa)
Yukarıdaki örnekte faj atağının etkisi, tavsiye edilen dozda(0.02%) limitlenmiş iken ekstra iki
saat geçmesine rağmen yarı dozajda(0.01%) son pH ya ulaşılamamıştır. Dolayısıyla dozaj, faj
atağı sonrası üretilen ürünün fire yapılıp yapılmayacağının kararında etkili olacaktır.
İyi uygulama
Kültürlü Süt
Yoğurt Probiyotikler Taze Peynir &
Krema
PROAKTIF VEYA REAKTIF FAJ KİŞİYE ÖZEL ÖNERİLER SİSTEMATİK FAJ İZLEME
DENETİMLERİ VE EĞİTİMLERİ
Faj durumunuzu değerlendirerek, Üzerinde anlaşmaya varılmış bir numune
Potansiyel iyileştirme alanlarını rotasyon programları hakkında alma planını takiben numunelerini bize
belirlemek ve faj yönetiminde tavsiyelerde bulunuyoruz ve yıllık faj gönderdikten sonra çıkan sonuçları analiz
uygulamalı eğitim sağlamak için denetiminde kararlaştırılan edip sizinle paylaşarak tesisinizdeki faj
üretim tesisinizi denetliyoruz uygulamaları takip ediyoruz. yükünü anlamanıza ve izlemenize
yardımcı oluyoruz.
PhageWatch™, faj
denetim önerilerini,
faj izleme sonuçlarını
bulabileceğiniz ve
analiz için
numunelerinizi
kaydedebileceğiniz
kullanımı kolay dijital
bir arayüzdür.
2 Fransa
6
3 3 Almanya
2
1
4 Arjantin
8 5 Brezilya
6 Rusya
7 Avustralya
5
8 Meksika
7
4
9 Hindistan
ROTASYON KÜLTÜRÜ
• Benzer performanslara sahip ancak farklı
faj gruplarına ait kültürler
• Rotasyonda mümkün olduğunca az
kullanın
• Düzenli faj izleme sonuçlarını ve bir risk
değerlendirme aracını kullanarak en iyi
rotasyon planını tanımlayın
BACKUP KÜLTÜRÜ
• Rotasyon kültürlerine benzer performans,
ancak farklı bir faj grubuna ait
• Faj atak durumunda bir rotasyon kültürü
yerine, 2 ila 3 hafta boyunca kullanın
Faj oluşumu
Sanitasyon
Sanitasyon Sanitasyon
SanitasyonSanitasyon Sanitasyon Sanitasyon
Asitlendirme için eşik Sanitasyon Sanitasyon
Süreklilik
Sanitasyon
Sanitasyon
Sanitasyon
Faj oluşumu Sanitasyon
Sanitasyon
Sanitasyon
Sanitasyon Asitlendirme Problemleri
Sanitasyon
Sanitasyon Sanitasyon
Asitlendirme için eşik Sanitasyon Sanitasyon
Yanlış rotasyon kültürü seçimi
Süreklilik
2
6 Doğru rotasyon kültürü 1. Rotasyon kültürüne dönüş
M
a
y
Zaman
ı
s
2
0
1 40 © 2021 Chr. Hansen. All rights reserved.
5
Hangi düzeltici önlemler faj seviyesini azaltabilir?
AKSİYON PLANI
FAJ TEŞHİSİ (DENETİM) - AMAÇLAR
• Faj backup kültürünü 2 - 3 hafta boyunca kullan
• Üretim sürecindeki olası değişiklikleri keşfedin
• Sanitasyonu arttır
• Yeni hammadde tedarikçisi
• Sıklığı artırın
• İşlem parametresi değişiklikleri
• Klor veya PAA konsantrasyonunu 400 ppm yapın(VS 150/200 ppm)
Yeni temizlik maddesi / proses / frekans, vb.
• Çevresel dezenfeksiyonu arttır:
• Ekipman / tesis onarım çalışması
Drenajın klorlama frekansı
• Mikrobiyolojik uyarı
Hava dezenfeksiyonu
• Kontaminasyonun kökenini ve fajın nerede büyüdüğünü bulun
• Proses Kontrolünü iyileştirin ve hasarlı ekipmanı onarın / değiştirin
(süt işletmesi bakım planını güncelleyin)
• Korozyon DÜZELTİCİ EYLEMLERİ TANIMLAMA
• Temizlenecek tüm alanların erişilebilirliği (yüksek miktarda atıktan • Yan ürün geri dönüşümünü ortadan kaldırın /
kaçının) azaltın (peynir altı suyu vb.)
• Hammaddeler arasındaki boru hattı bağlantılarından kaynaklanan • Yerleşik GMP'leri takip edin
olası çapraz kontaminasyonun kontrolü • Temizlik ve dezenfeksiyon sıklığını artırın
• Faj Teşhisi • Hammadde tedarikçi kalitesini inceleyin
• Hammaddeden nihai ürüne kadar proses boyunca numuneler alınır
AKSİYONLAR
• Müşteri eğitimi
• Müşteri desteği: izleme ve sorun giderme
• Faj karakterizasyonu:
- CH faj bankasının yönetimi: > 700'den fazla
saflaştırılmış faj
- Faj tipleme (faj ilişkisi)
- Isı direnci
İNHİBİSYON TESTİ
Kontrol: Zaman içinde asitleşme Numune: Zaman içinde Numune: Mevcut fajı ısı ile yok
profilini takip edin asitleşme profilini takip edin edin, zaman içinde asitleşme
profilini takip edin
A: kontrol - referans pH profili B: test - Δ pH'a karşı kontrol C: kimyasal inhibisyon - Δ pH'a
karşı kontrol
45
İnhibisyon testi: pH multiscan metodu
SONUÇLARIN YORUMLANMASI
CH İÇ METODU
Yüksek ∆ pH
İnhibisyon testinin minyatürleştirilmesi inhibisyon
• Renk göstergesi: Bromokresol yeşil + mor
• Aynı inkübasyon koşulları 0.60
• Elektronik tarayıcı ile her bir kuyunun
renginin okunması Orta inhibisyon
• Veri çevirisi: pH değerlerine kolorimetrik
veriler 0.30
AVANTAJLARI
• Çok sayıda test çalıştırılabilir Düşük
inhibisyon
• Zaman tasarrufu 0.10
• Veri işleme basitleştirildi İnhibisyon yok
46
İnhibisyon testi: pH multiscan yöntemi = pH rengi
47
Plak testi kullanılarak fajlar nasıl tespit edilebilir?
Agar
Bacterial
cells
48
Chr. Hansen faj riskinizi yönetmenizde size destek olabilir
Fajların nerede olduğunu ve nelerin saldırıya neden olabileceğini biliyoruz ve üretim ihtiyaçlarınıza uyacak
şekilde uyarlanmaya hazır bir çözüm paketi oluşturduk
49
Faj Audit /Faj Denetimi
Numune
Fabrika organizasyonu toplanması
Fabrika ziyaret
• boyut, fabrika planı (ileri yürüyüş)
• imalat ürünleri & Her zaman
hammaddeden nihai
• kullanılmış kültürler (yedek veya rotasyon ürüne
kültürü
52
Raw materials (Answer all questions)
WPC or other by-products from Cheese Industry
Recycled pasteurised milk, without sterilisation (min 110°C/30s)
Recycled inoculated milk, without sterilisation (min 110°C/30s)
Ingredient water from non chlorinated water source (excepted RO or sterilized water)
Section Score
Production Environment (Answer all questions)
Correct heat treatment for milk pasteurisation (min 92°C/6min)
Process milk room is physically isolated, with minimal traffic into the room from other parts of the plants (milk preparation)
Disinfection of the culture pouch before opening
Empty cultures box / pouch are properly "destroyed" or kept in closed/secured trash
Process milk tanks are under positive pressure
Treated air-filtered air generates continuous positive air pressure in the process milk area (inoculation area)
Running time of the filling machines is less than 12 hours (between 2 CIP)
Does filling machines are protected by a laminar flow in the dosing area?
Does filling machine hopper is protected by a air-filtration system?
Treated air-filtered air generates continuous positive air pressure in the filling room
Regular monitoring of the air filtration systems
Section Score
CIP System (Answer all questions)
Separate CIP systems for the line before and after pasteurization
Is last rinsing water after CIP used for first rinsing after production?
Monitoring (automatic or daily manual checking) of CIP process? (concentration of chemicals, flow rate and CIP return temperature)
Regular monitoring of CIP tanks? (pressure, spray balls integrity, level of CIP solutions into the tank)
Regular replacement of CIP cleaning solutions? (avoid organic material in cleaning solutions)
Section Score
53
Cleaning (Answer all questions)
At least cleaning (soda) for the line before pasteurization, after each filling/batch 0
At least weekly full cleaning (soda + acid) for the line before pasteurization 0
At least full cleaning of pasteurizer after each run (minimum 1/day) 0
At least full cleaning after each process tank usage (inoculation tanks) 0
At least daily shut down the production and apply a full cleaning of the filling machines 0
At least weekly full cleaning of drain collectors in the filling machine area 0
Section Score 19
Disinfection
Is correct disinfection applied every day on the pasteurizer with hot water (min 95°C / 15 minutes) 0
Is correct disinfection applied every week for recipe tanks (with chlorine or peracetic acid) 0
Is correct disinfection applied after each use for process tanks (with chlorine or peracetic acid) 0
Is correct disinfection applied after each full cleaning on the filling machines (with chlorine or peracetic acid) 0
At least weekly drain disinfection after cleaning in the filling machine area? 0
At least monthly ambiance disinfection in process milk and filling machine areas 0
Section Score 14
Total process
Cumulative Process Score 91
Culture dosage and usage (Answer all questions)
At least 80% of the full recommended culture dosage is used 0
Avoid rotation with other culture suppliers (to keep culture rotations under control) 0
Time limit is defined to use the same culture according to the phage pressure 0
Total Culture Score 9
54
Set ve Stirred Yoğurtta Yapı/Tekstür
ölçümü
55
Yoğurtta yapı/tekstür ölçüm cihazı
56
Reometre
Reometreler, akışkanların reolojik özelliklerini ölçmek için en yaygın kullanılan cihazlardır. Bu ekipman, en yaygın olanları kılcal
sistemler ve rotasyonel sistemler olmak üzere farklı konfigürasyonlar sunabilir (Barnes vd., 1989; Dogan ve Kokini, 2011; Hackley ve
Ferraris, 2001; Ross-Murphy, 1994).
Kılcal sistemlerde akışkan, yerçekimi veya diğer mekanik yollarla oluşturulabilen giriş ve çıkış basınçları arasındaki fark nedeniyle
dairesel kesitli bir tüpün içinde akar (Boeker vd., 2013).
Dönel sistemler ise, sisteme bir dönme hızı uygulandığında viskoz bir direnç kuvvetine maruz kalan bir sıvıya daldırılmış silindirik, konik
veya dairesel bir gövdenin dönmesine dayanmaktadır (Gupta, 2014).
57
Brookfield Viskozimetresi
Brookfield viskozimetresi, ölçülecek sıvı
ile temas halinde olan bir dönen şaft
içeren dinamik bir viskozite testidir.
Analog tipte , viskozite değeri cihazın
üzerindeki dönen kadrandan
okunur. Dijital türde bu değer
dokunmatik ekran vasıtasıyla okunur.
Buna ek olarak, dijital viskozimetreler
donanımda sahip olduğu 0-10mV gibi
çıkışlarla uzaktan görüntüleme,
kontrolörler ve kaydedici gibi cihazlara
bağlanabilir.
Ayran viskozite ölçüm
Slide
59
Set ve Stirred Yoğurtta Duyusal Analiz
Teknikleri
60
Tadım testlerinde etkili faktörler
• Ortamda herhangi bir bulaşık maddenin varlığı: Herhangi bir tat diğer bir
tadın varlığında artabilir veya yok olabilir. Örneğin tatlı yedikten sonra şekerli
çay tatsız algılanır.
61
Tadım testlerinde yapılan hatalar
62
Örneklerin sunuluş düzeni ile oluşan
hatalar
63
Halo etkisi
Ürünün birden fazla özelliğinin değerlendirildiği
durumlarda, derecelendirmelerin birbirlerini etkileme
eğilimidir.
Örneğin, yoğurt ile ilgili bir tüketici testinde,
tüketicilerden genel beğenilerinin yanı sıra yoğurda ait
farklı özellikleri de tercihlerine göre sıralamaları
istendiğinde, ürün genel olarak beğenildi ise, tatlılık,
asitlik, yağlılık, ağız dolgunluğu hissi gibi özelliklerinde
beğenildiği belirlenmiştir.
Ancak ürün genel olarak beğenilmedi ise, diğer
özelliklerinde beğenilmediği saptanmıştır.
64
Bu prosedür, Chr. Hansen'in standart protokolünden
türetilen yoğurt tadımı için talimatlar sağlar.
Bu, bir yoğurt numunesini değerlendirme adımları
boyunca bir kılavuzdur ve doku profili hakkında
bütünsel bir anlayış elde etmenize yardımcı olur.
Bu protokolde belirtilen özellikler tipik olarak Chr.
Hansen'de hem dahili eğitimli panelimiz hem de
müşteri tadımları için yoğurdun duyusal
değerlendirmesinde kullanılır.
65
Dikkate Alınması Gerekenler
66
TADIM PROTOKOLÜ PARAMETRELERİ
67
TADIM PROTOKOLÜ PARAMETRELERİ
68
ÖRNEK TADIM ŞABLONU
0 1 2 3 4 5
(Hiç yok) (Çok
fazla)
Serum ayrılması
Yoğurdun yüzeyinde ne kadar sıvı var?
Jel sertliği
Yüzeye konan bir kaşık yoğurt
şeklini ne kadar korur?
Sünme
Kaşığı birkaç kez hızlıca yüzeye
daldırarak takip edilen yoğurt dizisi ne
kadardır?
Tatlılık
Yoğurt ne kadar tatlı?
Ekşilik
Yoğurt ne kadar ekşi?
Ağız dolgunluğu
Yoğurdu yutarken ne kadar
Direnç var?
Ağız kaplaması
Yuttuktan sonra ağzınız yoğurt tarafından
ne kadar kaplanıyor?
Diğerleri:
Lütfen örnekler için uygun
Bulduğunuz diğer özelliklerden
Bahsedin
69
Set Yoğurt Duyusal Analiz Teknikleri
70
Soru ve Cevap
TRFIR@CHR-HANSEN.COM TRDKA@CHR-HANSEN.COM
Funda Yücel Davut Kara,
Kalite Uygulama Müdürü Kıdemli Teknik Satış Müdürü
T E Ş E K K Ü RL E R