Генотерапія - сукупність генноінженерних (біотехнологічних) та

медичних методів, спрямованих на внесення змін до генетичного апарату

соматичних клітин людини з метою лікування захворювань. Це нова і
бурхливо розвиваюча область, орієнтована на виправлення дефектів,
викликаних мутаціями (змінами) у структурі ДНК, поразкою ДНК людини
вірусами чи надання клітинам нових функцій.

Розвиток концепції генотерапії

Концепція генотерапії, мабуть, з'явилася відразу після відкриття явища
трансформації у бактерій та вивчення механізмів трансформації клітин
тварин пухлиноутворюючими вірусами. Такі віруси можуть здійснювати
стабільне впровадження генетичного матеріалу в геном клітини господаря,
тому було запропоновано використовувати їх як вектори для доставки
бажаної генетичної інформації в генома клітин. Передбачалося, що такі
вектори можуть у разі потреби виправляти дефекти геному.

Реальністю генна корекція соматичних клітин стала після 1980-х років, коли
були розроблені методи отримання ізольованих генів, створені еукаріотичні
вектори, що експресують, стали звичайними переноси генів у мишей та інших
тварин.

Історично генна терапія націлювалася на лікування спадкових генетичних

захворювань, проте поле її застосування принаймні теоретично
розширилося. В даний час генну терапію розглядають як потенційно
універсальний підхід до лікування широкого спектру захворювань,
починаючи від спадкових, генетичних та закінчуючи інфекційними.

Hemgenix – це генна терапія, покликана виправити мутацію в

ДНК пацієнта, що спричиняє кровотечі. На відміну від більшості
препаратів, які полегшують симптоми, цей діє на саму причину проблеми
– «зламаний» ген.
Історія генної терапії
1970-і і раніше
У 1972 році Фрідман і Роблін опублікували статтю в Журналі Science під
заголовком «Генна терапія для генетичних хвороб людини?» Роджерс (1970)
запропонував замінювати дефектну ДНК у тих, хто страждав від генетичних
дефектів.

1980-ті
У 1984 була розроблена система ретровірусного вектора, здатна ефективно
вставляти сторонні гени в хромосоми ссавців.

1990
Перше дозволене в історії США клінічне дослідження генної терапії було
проведено 14 вересня 1990 року в Національному інституті здоров'я під
керівництвом Вільяма Андерсона. У взятій у пацієнта крові дефектний ген був
замінений на функціональний випадок. Це призвело до часткового
відновлення імунної системи Ашанті. Вона тимчасово стимулювала
виробництво ферменту, що бракує, але не породжувало нові клітини з
функціональним геном. Ашанті продовжувала отримувати ін'єкції
скоригованих T-клітин кожні два місяці і мала можливість вести нормальне
життя.
1993-2002
1993 рік. Генна терапія пацієнта, який страждає на SCID команді Френча
Андерсона з Каліфорнійського Університету. Після проведення терапії білі
кров'яні клітини продовжували виконувати свої функції протягом 4 років.
Потім потрібно повторне лікування.

«Батько генної терапії» Френч Андерсон вилікував двох дівчаток, 4 та 8 років.

Дівчатка були на межі смерті, але завдяки йому живі та здорові досі.

1999 рік. Джессі Гелсінджер помер під час клінічного випробування генної
терапії. Випадок з Гелсінджером мав сильний гальмуючий ефект для всіх
учених у цій галузі.

1999 рік. Кожна четверта дитина, яка страждає на SCID, лікується за

допомогою генної терапії.

“SCID” Тяжкий комбінований імунодефіцит, (англ. SCID, також алімфоцитоз,

синдром Глянцмана-Рінікера, синдром важкого комбінованого
імунодефіциту, і тимічна алімфоплазія) - це генетичне захворювання, при
якому в результаті дефекту одного з генів порушується робота компонентів
адаптивної лімфоцитів. Тяжкий комбінований імунодефіцит - це важка форма
спадкового імунодефіциту, який також відомий як синдром хлопчика в
міхурі, так як хворі вкрай вразливі перед інфекційними хворобами і змушені
перебувати в стерильному середовищі. Одним із таких хворих був Девід
Веттер. Тяжкий комбінований імунодефіцит є результатом настільки
сильного пошкодження імунної системи, що остання вважається практично
відсутньою.
2003 рік
У 2003 команді Каліфорнійського Університету вдалося перенести гени в
нейрони головного мозку, використовуючи ліпосоми, вкриті полімером
поліетиленгліколь (англ. PEG). До цього перенесення генів у нейрони
головного мозку було неможливе через те, що вірусні вектори не могли
подолати гематоенцефалічний бар'єр через свої великі розміри. На основі
нової технології розробляються методи генної терапії хвороби Паркінсона.

Розробляються методи лікування синдрому Хантінгтона із застосуванням

процесу РНК-інтерференції.

РНК-інтерференція, РНКі — система контролю активності генів еукаріотичних

клітин, що здійснюється за допомогою коротких (20-25 нуклеотидів)
молекул рибонуклеїнової кислотима контролю активності генів
еукаріотичних клітин, що здійснюється за допомогою коротких (20-
25 нуклеотидів) молекул рибонуклеїнової кис

2006 рік
Перша демонстрація ефективної боротьби з раком із застосуванням генної
терапії. Вчені з National Institutes of Health (Меріленд) успішно борються з
метастазуючою меланомою у двох пацієнтів, використовуючи генетично
змінені Т-кілери.

Травня 2006 року. Колектив вчених на чолі з Luigi Naldini та Brian Brown з
Міланського San Raffaele Telethon Institute for Gene Therapy (HSR-TIGET)
повідомив про прорив у генотерапії: розроблено спосіб «обману» імунної
системи, що викликає відторгнення генно-модифікованих клітин. Для цього
специфічним чином використовується мікроРНК. Відкриття може відігравати
ключову роль у розробці методів генної терапії гемофілії.

У березні 2006 р. міжнародна група вчених оголосила про успішне

використання генотерапії для лікування двох дорослих пацієнтів від
захворювання, пов'язаного з мієлоїдними клітинами.

2007 рік
У травні 2007 року Moorfields Eye Hospital та University College London's
Institute of Ophthalmology оголосили про перше випробування генотерапії на
лікування вродженого амаврозу Лебера[10]. Першу операцію було виконано
на 23-річному британці Роберті Джонсоні на початку 2007 року. Для цього
використовувався рекомбінантний аденоасоційований вірус, що несе ген
RPE65. Лікування спричинило позитивні результати, при цьому не було
виявлено жодних побічних ефектів.

2008 рік
У грудні 2008 року успішно завершилися випробування на мишах терапії
серповидно-клітинної анемії.

2009 рік
Генотерапія успішно застосована для покращення стану хворих на ВІЛ та ТКІД
(важкий комбінований імунодефіцит). На гризунах показано ефективність
генотерапії в терапії хронічного болю та деяких видів глухоти та сліпоти. В
даний час розробляється генотерапія для рідкісного та тяжкого захворювання
- фібродисплазії. Відбувається це в Університеті штату Пенсільванія за участю
генетиків усього світу.

2010 рік
Стаття Комаромі, опублікована у квітні 2010 року, описала технологію генної
терапії для лікування форм ахроматопсії у собак. Ахроматопсія або повна
сліпота кольору використовується у вигляді ідеальної моделі для розробки
методів генної терапії, спрямованих на конусні фоторецептори. Функція
конусів та денний зір були відновлені принаймні протягом 33 місяців у двох
молодих собак з ахроматопсією. Тим не менш, терапія була менш
ефективною для старих собак.

2011 рік
Пацієнт, який проходив лікування в 2007 і 2008 роках у Геро Хюттера, був
вилікований від ВІЛ методом повторної трансплантації гематопоетичних
стовбурових клітин (див. також алогенна трансплантація стовбурових клітин,
алогенна трансплантація кісткового мозку, . Методи цього лікування, які
вимагали повного видалення існуючого кісткового мозку пацієнта, що було
дуже виснажливою процедурою, не було прийнято медичною спільнотою аж
до 2011 року.

Групі генетиків вдалося вилікувати лабораторних мишей від гемофілії за

допомогою аденоасоційованих вірусів. Протягом 8 місяців не виявлено
жодних побічних ефектів.

У 2011 році в Росії був зареєстрований «Неоваскулген» - перший у класі

препарат генотерапії для лікування периферійної артеріальної хвороби,
включаючи критичну ішемію кінцівки. Склад препарату -
дезоксирибонуклеїнова плазмідна кислота надскручена pCMV-VEGF165.
2012 рік
Вчені з іспанського Національного онкологічного наукового центру (ісп.
Centro Nacional de Investigaciones Oncologicas) під керівництвом його
директора Марії Бласко (ісп. María Blasco) довели, що тривалість життя
мишей можна збільшити одноразовим введенням препарату, який
безпосередньо впливає на гени тварини у дорослому стані. Вони зробили це
за допомогою генної терапії - стратегії, яка ще жодного разу не
використовувалася для боротьби зі старінням. Застосування цього методу на
мишах визнано безпечним та ефективним. Миші, які отримували терапію у
віці одного року, жили довше в середньому на 24%, а у віці двох років – на
13%. Крім того, лікування призвело до значного поліпшення стану здоров'я
тварин, затримавши розвиток вікових захворювань – таких як остеопороз та
резистентність до інсуліну – та покращивши такі показники старіння, як
нервово-м'язова координація. Це дослідження «показує, що можна
розробити антивікову генну терапію на основі теломерази без збільшення
захворюваності на рак», стверджують його автори. Таким чином, генна
терапія стає одним із перспективних напрямків, які народжуються в даний
час терапевтичної сфери радикального продовження життя та зупинки
старіння. 2 листопада Єврокомісія вперше дозволила випуск та продаж у ЄС
ліків нідерландської компанії uniQure на основі генотерапії для лікування
важкого генетичного захворювання – ліпопротеїноліпазної недостатності.
Вартість ліків складе 1,6 млн. доларів США, що є рекордом за всю історію
медицини.
З 2012 року продається на території Росії препарат, який лікує атеросклероз
судин за допомогою місцевої генотерапії.

2013 рік
На 2013 рік у світі дозволено до клінічного застосування всього п'ять генних
препаратів: три для лікування злоякісних новоутворень, четвертий – глибера,
для лікування рідкісного спадкового захворювання – дефіциту
ліпопротеїнліпази та неоваскулген.

2017 рік
У листопаді 2017 року в Каліфорнії відбулася перша у світі процедура з
«редагування» геному дорослої людини прямо всередині його тіла.
Пацієнтом став чоловік із мукополісахаридозом II типу (синдромом Хантера).

2019 рік
На основі аденоасоційованого вектора AAV9 було створено препарат
Zolgensma для лікування спинальної м'язової атрофії. Цей препарат
вважається найдорожчими ліками з вартістю курсу (1 укол) понад $2 млн.
Дозволено у низці країн з 2019 року. За деякими оцінками, можливо близько
тисячі застосувань препарату
Методи генотерапії
Нові підходи до генної терапії соматичних клітин можна розділити на великі
категорії: генна терапія ex vivo і in vivo. Розробляються специфічні лікарські
препарати на основі нуклеїнових кислот: РНК-ферменти, модифіковані
методами генної інженерії олігонуклеотиди, що коригують генні мутації in
vivo і т.д.

Використання при імплантації ген-активованих матеріалів, модифікованих

геннотерапевтичними препаратами, дозволяє забезпечити відкладене та
тривале вивільнення препарату in situ.

Розробка таких потужних інструментів для генної модифікації, як

CRISPR/Cas9, надали людству можливість у найближчому майбутньому за
допомогою генної модифікації успішно усувати причини спадкових
захворювань та підвищити стійкість організму до старечих захворювань.
Існує кілька способів введення нової генетичної інформації в клітини ссавців.
Це дозволяє розробляти прямі методи лікування спадкових хвороб – методи
генотерапії.

Використовують два основних підходи, що відрізняються природою клітин-

мішеней:

фетальна генотерапія, при якій чужорідну ДНК вводять у зиготу або ембріон
на ранній стадії розвитку; при цьому очікується, що введений матеріал
потрапить у всі клітини реципієнта (і навіть у статеві клітини, забезпечивши
цим передачу наступному поколінню)

соматична генотерапія, при якій генетичний матеріал вводять тільки в

соматичні клітини, і він не передається статевим клітинам.