‫د‪.‬نغم قـ‪ .‬كـ‪.

‬‬ ‫الكيمياء احلياتية‪ /‬الفصل الرابع‪ -‬االنزميات‬

‫‪1‬‬

‫الفصل الرابع‬

‫االنزميات ‪Enzymes‬‬

‫اإلنزيم هي كلمة التينية تعني (في الخميرة ‪ ،)in yeast‬إذ إن عملية التحفيز الحيوي‪ ،‬اكتشفت أوال في عملية تخمر‬
‫الكلوكوز إلى كحول بواسطة الخميرة‪ .‬اإلنزيم عبارة عن بروتين أو معقد بروتيني معدني يعمل ضمن الجسم الحي في نطاق‬
‫درجة حرارة الجسم الفسيويولوجية كوسيط يعمل على تسريع التفاعالت الكيميائية الحيوية ‪ .‬االنزيمات هي محفزات كيميائية‬
‫حيوية( عوامل مساعدة) ذات تركيب بروتيني عالي الوزن الجزيئي ‪ ,‬وكغيره من البروتينات يتألف األنزيم من عدد كبير من‬
‫األحماض األمينية يوجد فيما بينها روابط بيبتيدية و تكون هذه األحماض األمينية سلسلة أو أكثر من سالسل عديدة البيبتيد‬
‫‪.‬واالنزيمات هي الصنف االكبر واالكثر تخصصا من البروتينات ‪ ،‬وهي بروتينات كروية تذوب في الماء ‪.‬‬

‫اغلب األنزيمات تتألف من سالسل بروتينية ومكونات أخرى يحتاجها األنزيم لفعاليته وتسمى العوامل المرافقة ‪ ،‬وتكون‬
‫العوامل المرافقة على شكل فلزات ‪ Cofactor‬مثل المغنيسيوم ‪ Mg‬والحديد ‪ Fe‬وغيرها ‪ ،‬أو قد تكون بشكل معقدات عضوية‬
‫تسمى مرافقات األنزيم ‪ ، Coenzyme‬وتحتاج بعض األنزيمات أحياناً لكال النوعين ‪ .‬األيونات الفلزية والمعقدات‬
‫عضويةـ وعند ارتباط العوامل المرافقة بقوة مع األنزيم فانه يطلق عليها اسم المجموعة المترابطة ‪ . prosthetic group‬ان‬
‫االنزيم المرتبط بالعامل المرافق يسمى الهولو انزيم ‪ ، holoenzyme‬حيث ان الجزء البروتيني ( االنزيم وحده بدون مرافق) في‬
‫هذا الهولو انزيم يسمى االبو انزيم ‪ apoenzyme‬او ابوبروتين ‪. apoprotein‬‬

‫تتشابه اإلنزيمات في فعلها مع العوامل المساعدة الكيميائية األخرى‪ .‬إذ أنها تشارك في التفاعل دون أن تغير من نتيجته‬
‫او طبيعة الناتج‪ ،‬كما أنها تعود في نهاية التفاعل إلى وضعها األصلي الذي كانت عليه قبل بدء التفاعل مما يمكنها من المشاركة‬
‫بتفاعل جديد وهذا ما يسمح لكميات قليلة من األنزيم بالمشاركة لفترة زمنية طويلة في التفاعل‪ ،‬لكنها تمتاز عن العوامل‬
‫المساعدة األخرى بكفاءتها العالية‪.‬‬

‫الزاميوجني ‪( proenzyme‬طليعة االنزيم او اإلنزيم الغري نشط ‪) Proenzyme‬‬

‫من اإلنزيمات ما يصنع أوال في شكل غير نشط يسمى الزايموجين ( طليعة اإلنزيم ‪ ) Proenzyme‬فإذا دعت الحاجة‬
‫إلى تنشيط هذا اإلنزيم فسوف يتم ذلك بتغير بسيط في تركيبه‪ ،‬كأن يزال جزء من سلسلة متعدد الببتيد المكونة له‪ ،‬فيتحول بذلك‬
‫إلى إنزيم نشط ‪ . Active Enzyme‬ومن األمثلة على اإلنزيمات التي تتكون في صورة غير نشطة إنزيما الهضم الببسين‬
‫والتربسين فهما يتكونان أوال على صورة ببسينوجين و تربسينوجين على التوالي ‪.‬‬
 ‫د‪.‬نغم قـ‪ .‬كـ‪.‬‬ ‫الكيمياء احلياتية‪ /‬الفصل الرابع‪ -‬االنزميات‬
‫‪2‬‬

‫آلية العمل‬

‫آلية عمله عن طريق خفض طاقة التنشيط مما يسمح بإنجاز تفاعالت تجري عادة ضمن درجات حرارة مرتفعة جدا‪ ،‬وفق‬
‫الشروط الحيوية بدرجة حرارة ال تتعدى درجة حرارة الجسم الحي‪ ،‬ليعود بعد انجاز التفاعل إلى وضعه األصلي مما يمكنه من‬
‫المشاركة بتفاعل جديد وهذا ما يسمح لكميات قليلة من األنزيم بالمشاركة لفترة زمنية طويلة في التفاعل‪ .‬يقلل األنزيم طاقة‬
‫تنشيط التفاعل بواسطة ارتباطه (ارتباط مؤقت) بالمواد المتفاعلة عند الموقع النشط لإلنزيم وهذا االرتباط يقرب بين المواد‬
‫المتفاعلة ‪ ،‬وتحدث التفاعالت بينها‪ .‬أي أن اإلنزيم يقلل طاقة التنشيط للتفاعل فيسمح ألكبر عدد من الجزيئات بالتحلل إلي‬
‫نواتج بواسطة جزئ إنزيم واحد ‪.‬‬

‫المرحلة االنتقالية بدون االنزيم‬

‫طاقة التنشيط بدون االنزيم‬

‫المرحلة االنتقالية بوجود االنزيم‬ ‫طاقة التنشيط‬

‫بوجود االنزيم‬

‫‪ -‬ال تؤثر األنزيمات على ثابت االتزان في التفاعل الذي تحفزه ولكنها تسرع التفاعل للوصول إلى حالة اإلتزان ‪.‬‬
‫‪ -‬ال تؤثر على تغيرات الطاقة الحرة للتفاعل‪.‬‬
‫‪ -‬ال تغير االختالف في مستوى الطاقة بين المواد المتفاعلة و المواد الناتجة‪.‬‬
‫‪ -‬تعمل على تخفيض طاقة التنشيط المطلوبة لبدء التفاعل المحفز باألنزيم و الوصول به إلى “ مرحلة اإلنتقال ”‪.‬‬
‫‪ -‬طاقة التنشيط ‪ :‬هي الطاقة الالزمة لبدء التفاعل و نقل المواد المتفاعلة إلى مستوى طاقة يكفي لتحويل المواد المتفاعلة إلى‬
‫نواتج هذا المستوى يعرف “بالحالة االنتقالية المؤقتة” ‪ .‬كلما قلت طاقة التنشيط كلما زادت سرعة التفاعل‪.‬‬
 ‫د‪.‬نغم قـ‪ .‬كـ‪.‬‬ ‫الكيمياء احلياتية‪ /‬الفصل الرابع‪ -‬االنزميات‬
‫‪3‬‬

‫املوقع الفعال ‪Active site‬‬

‫في أي تفاعل أنزيمي يرتبط األنزيم ‪ ( E ) enzyme‬مع المادة الهدف ‪ (S) substrate‬ليكونا معا معقد األنزيم و‬
‫المادة الهدف ) ‪ ( ES Complex‬و يتم هذا اإلرتباط في موقع معين في تركيب اإلنزيم يسمى الموقع الفعال‪-:‬‬

‫الموقع الفعال هو وحدات من االحماض االمينية في االنزيم ‪ ،‬تشترك في عملية التحفيز ‪ ،‬ويكون على شكل حفرة او التفاف‬
‫لسلسلة متعدد الببتيد ‪ .‬توجد المواقع الفعالة ‪ Active sites‬على سطح األنزيم وفي منطقة ذات شكل هندسي محدد وثابت‪.‬‬

‫‪ -‬ال يشغل سوى حيز بسيط من سطح اإلنزيم‪.‬‬

‫‪ -‬يتألف من عدد محدود من األحماض األمينية المشكلة لجزيء اإلنزيم ‪ ،‬و ليس من الضروري أن تكون األحماض األمينية‬
‫المشكلة للموقع النشط متتابعة أو متقاربة في سلسلة متعدد الببتيد ‪ ،‬بل هي غالبا تتكون من انثناءات السلسلة المتعددة‬
‫الببتيد أو انحنائاتها ‪ ،‬فتتقارب لتعطي بناءا محدودا يناسب على نحو ما بناء المادة الهدف‪.‬‬

‫وهناك نظريتان تتضمنان اتحاد المادة االساس بالموقع الفعال وتكوين معقد االنزيم –المادة االساس (‪)ES complex‬‬
‫حيث ان المواصفات النوعية لبنية المراكز الفعالة في االنزيمات هي التي تحدد ظاهرة التخصص في فعاليتها التنشيطية ‪ ،‬لقد‬
‫اقترح العالم فيشر ‪ Emil Fischer‬مصطلح القفل والمفتاح ‪ Lock & Key‬والمقابل لمصطلح التوافق المستحث ‪Induced‬‬
‫‪ fit‬الذي يطرحة العالم دانيال ‪. Daniel Koshland‬‬

‫‪ -1‬نظرية القفل والمفتاح‬

‫في هذه النظرية تكون المادة االساس ذات شكل مالئم تماما للموقع الفعال اشبه بدخول المفتاح داخل القفل ‪ .‬ومن عيوب هذه‬
‫النظرية هي صالبة او عدم مرونة الموقع الفعال بالنسبة للمادة االساس ‪.‬‬
 ‫د‪.‬نغم قـ‪ .‬كـ‪.‬‬ ‫الكيمياء احلياتية‪ /‬الفصل الرابع‪ -‬االنزميات‬
‫‪4‬‬

‫انزيم‬ ‫مادة اساس‬ ‫معقد انزيم‪-‬مادة اساس‬ ‫معقد انزيم‪-‬ناتج‬ ‫االنزيم‬

‫النواتج‬

‫‪ -2‬نموذج التوافق المستحث‬

‫هنا يكون الموقع الفعال غير مطابق للمادة االساس ‪ ،‬ولكنه مرن يتغير ويصبح مطابق لها ‪ .‬حيث إن الموقع النشط لألنزيم‬
‫سوف يغير شكله بصورة مستمرة إلى الشكل الذي يناسب شكل المادة األساس لترتبط به عن طريق تفاعالت أو روابط ضعيفة‬
‫بين األنزيم و المادة األساس‪ .‬هذه النظرية تقول بأن المادة األساس ال ترتبط بسهولة مع الموقع النشط الثابت الشكل‪،‬‬
‫فالسالسل الجانبية لألحماض األمينية المكونة للموقع النشط لألنزيم سوف تشكل نفسها لتعطي الموقع الصحيح دقيق الشكل‬
‫الذي يساعد األنزيم ليؤدي وظيفته المحفزة و يرتبط بالمادة األساس ‪.‬ان اهم مالمح هذة النظرية هو مرونة الموقع الفعال ‪.‬‬

‫تصنيف االنزميات ‪Enzyme classification‬‬

‫قد تعين وضع نظام تسمية دولي نتيجة لتزايد عدد اإلنزيمات المكتشفة كل عام‪ ،‬فشكلت لجنة انبثقت عن مؤتمر الكيمياء‬
‫الحيوية الدولي الذي انعقد في موسكو عام ‪ .1961‬فقررت اشتقاق معظم أسماء اإلنزيمات من أسماء المواد االساس‬

‫‪ substrates‬التي تؤثر اإلنزيمات فيها ملحقة بالالحقة (آز) ‪ ، ase‬وهكذا دعي اإلنزيم الذي يحلل النشاء تحليالً مائياً‬
‫باألميليز ‪ ،amylase‬واإلنزيم الذي يحلل المواد الدهنية تحليالً مائياً الليبيز ‪ lipase‬واإلنزيم الذي يحلل البروتينات تحليالً مائياً‬
‫البروتييز ‪ . protease‬وبعدها وحسب توصيات االتحاد العالمي للكيمياويين الحياتيين عام ‪ 1972‬قسمت األنزيمات إلى ستة‬
‫أصناف استنادا إًلى نوع التفاعل الذي تحفزه ‪ ،‬كذلك وضعوا لكل أنزيم عدد تصنيفي مميز خاص بهذا األنزيم فقط‪ .‬وهذه االصناف‬
‫هي كاالتي‪:‬‬
 ‫د‪.‬نغم قـ‪ .‬كـ‪.‬‬ ‫الكيمياء احلياتية‪ /‬الفصل الرابع‪ -‬االنزميات‬
‫‪5‬‬

‫‪ .1‬أنزيمات األكسدة و اإلختزال ‪ -: Oxidoreductases‬وهي االنزيمات المنشطة للتفاعالت التي تترافق مع اكسدة واختزال‬
‫المركبات المتفاعلة‪ .‬ومن امثلتها االوكسيديز والبيروكسيديز‬

‫‪ -: Transferase‬وهي االنزيمات التي تقوم بنقل بعض الذرات او المجموعات الذرية ضمن او بين‬ ‫‪ .2‬انزيمات النقل‬
‫الجزيئات المختلفة ‪ .‬و من أمثلتها الهكسوكاينيز وهو اإلنزيم الذي ينقل مجموعة الفوسفات من مركب أدينوسين ثالثي‬
‫الفوسفات )‪ (ATP‬إلى الكلوكوز‪.‬‬

‫‪ .3‬أنزيمات التحلل المائي ( مميئة) ‪ -: Hydrolases‬وهي االنزيمات التي تنشط تفكك الروابط بين الجزيئات المختلفة‬
‫بواسطة جزيئات الماء ومن امثلتها االنزيمات التي تعمل على تحلل االواصر الكاليكوسيدية مثا انزيم االميليز‪.‬‬

‫‪ .4‬إنزيمات الفصل ‪ -: Lyases‬وهي االنزيمات التي تعمل على نزع مجموعة كيميائية دون اضافة الماء ‪ ،‬ويترافق هذا التفكيك‬
‫عادة اما بتكوين رابطة مزدوجة او االضافة الى رابطة مزدوجة‪ ،‬مثل فصل مجموعة امين ‪ NH2‬في صورة أمونيا ‪.NH3‬‬

‫‪ .5‬أنزيمات التشكل او التناظر ‪ -: Isomerase‬وهي االنزيمات التي تنشط التحوالت البنوية الوظيفية والفراغية ضمن الجزيئة‬
‫‪ ،‬ومنها انزيمات السس والترانس ‪ Cis-Transisomerases‬وال ‪ D‬و ‪. L‬‬

‫‪ .6‬أنزيمات اإلرتباط ‪ -: Ligases‬وهي االنزيمات التي تعمل على إنشاء رابطة جديدة بين مركبين مختلفين او اكثر باستخدام‬
‫طاقة التحلل للـ ‪ ATP‬او غيرها من المركبات عالية الطاقة ‪ .‬مثل ‪RNA Ligase‬‬

‫مثال ‪ -:‬العدد التصنيفي المميز ألنزيم معين هو‪ ( E.C. 1.2.1.7. :‬البادئة ‪ E.C.‬قبل الرقم تدل على االسم النظامي‬
‫‪ ) Enzyme Nomenclature‬يدل الرقم األول على النوع الرئيسي للتفاعل ‪ ،‬بينما يدل الرقم الثاني على النوع‬ ‫لالنزيم‬
‫الفرعي ‪ ،‬و يدل الرقم الثالث على النوع الفرعي ‪ -‬الفرعي ‪ ،‬و يدل الرقم الرابع على اإلنزيم نفسه‪.‬‬

‫فمثال إنزيم الاليبيز رقمه ( ‪: ) 3.1.1.3‬‬

‫‪ ‬يدل الرقم االول (‪ )3‬على الصنف الذي ينتمي له هذا األنزيم وهو أنزيمات التحلل المائي‪.‬‬

‫‪ ‬والرقم الثاني (‪ )1‬يدل على تحت الصنف (صنف فرعي ‪ ، )subclass‬حيث يعمل هذا األنزيم على تحليل روابط اإلستر ‪.‬‬

‫‪ ‬والرقم الثالث (‪ )1‬يدل على تحت تحت الصنف (صنف فرعي‪-‬فرعي‪ ) sub-subclasses‬اي ان الروابط االستر التي‬
‫يحللها ( روابط أستر كاربوكسيليه ) ‪.‬‬

‫‪ ‬والرقم األخير (‪ )3‬يدل على الرقم التسلسل الخاص بانزيم تراي اسيل كليسرول اليبيز ‪ triacylglycerol lipase‬من ضمن‬
‫األنزيمات التي تحلل روابط االستر الكاربوكسيلي‪.‬‬
 ‫د‪.‬نغم قـ‪ .‬كـ‪.‬‬ ‫الكيمياء احلياتية‪ /‬الفصل الرابع‪ -‬االنزميات‬
‫‪6‬‬

‫خصوصية األنزيم ‪Specificity of enzyme‬‬

‫تتصف المركبات االنزيمية بخصوصيتها العالية سواء كان ذلك في التفاعل الذي تحفزه او في اختيارها للمواد المتفاعلة‬
‫والتي تسمى بالمواد األساس ‪ ، Substrates‬وهذا أيضا يميزها عن العوامل المساعدة الغير عضوية‪ .‬تتفاوت درجة تخصصية‬
‫األنزيمات كما يأتي ‪-:‬‬

‫‪ -1‬انزيمات ذات التخصص المطلق (تخصص عالي) ‪-: Absolute Specificity‬وهي أن يعمل اإلنزيم على مادة تفاعل‬
‫واحدة فقط مثل إنزيم اليوريز الذي يعمل على تميؤ مادة اليوريا وانزيم الكلوكوكاينيز الذي يعمل على اضافة مجموعة‬
‫الفوسفات الى الكلوكوز فقط ‪.‬‬
‫‪ -2‬انزيمات ذات تخصص المجموعة (تخصص منخفض) ‪ -: Group specificity‬وهي انزيمات تعمل على مجموعة كاملة‬
‫من المواد االساس مثل الهكسوكاينيز الذي يعمل على اضافة مجموعة الفوسفات الى اغلب السكريات السداسية ‪.‬‬
‫‪ -3‬انزيمات ذات تخصص االصرة ‪ -: Linkage specificity‬وتتخصص هذه اإلنزيمات طبقاً لنوع االصرة التي تربط المادة‬
‫المتفاعلة مثل إنزيمات الليبيز ‪ Lipase‬الخاصة بالدهون كما في انزيم الاليبيز ‪ Lipase‬البنكرياسي يحلل مائيا ارتباط‬
‫االستر بين الكليسرول ‪ Glycerol‬والحوامض الدهنية في الليبيدات ‪ ،‬ولكن ال يكون له اي تاثير على التحلل المائي‬
‫للبروتينات او السكريات ‪ ،‬مثال اخر انزيمات االستريز تكون خاصة باالسترات فقط‪.‬‬
‫‪ -4‬إنزيمات ذات تخصص التشابه الفراغي ‪ -: Stereo specificity‬وهي انزيمات تتخصص في التأثير على المواد ذات‬
‫التشابه الفراغي مثل باسم مثل السس والترانس ‪ ،‬او ايزومرات ‪ D‬و ‪ ، L‬حيث تستطيع هذه االنزيمات التمييز بين شكل واحد‬
‫فقط أي ان تعمل مثال على مركبات السس وال تعمل على الترانس مثل حامض الماليك ‪ Maleic acid‬الذي هو النظير ‪Cis‬‬
‫لحامض الفيوميريك ويوضح الشكل التالي تركيب حامض الماليك‪.‬‬

‫العوامل املؤثرة يف سرعة التفاعل االنزميي‬

‫‪ .1‬درجة الحرارة‪ :‬اإلنزيمات حساسة لدرجة الحرارة فعند درجة الصفر يقف عمل اإلنزيم تماما ويمكن أن يستعيد نشاطه مرة‬
‫أخرى تدريجيا برفع درجة الحرارة ‪ ،‬حيث ان ارتفاع درجة الحرارة يزيد من حركة الجزيئات وبالتالي احتمال تصادف او تصادم‬
‫االنزيم مع الماده االساس‪ .‬ويصل نشاط اإلنزيم إلى ذروته عند درجة الحرارة تتراوح بين ‪( 40-37‬درجة حرارة الجسم)‬
‫وينخفض نشاط برفع درجة الحرارة‪ .‬كما ينخفض نشاط اإلنزيم بالتسخين حيث يفقد فاعليته تماما عند درجة الغليان وذلك‬
‫لتغير طبيعة اإلنزيم‪.‬‬
 ‫د‪.‬نغم قـ‪ .‬كـ‪.‬‬ ‫الكيمياء احلياتية‪ /‬الفصل الرابع‪ -‬االنزميات‬
‫‪7‬‬

‫كلما ترتفع درجة الحرارة ‪ 10‬درجات تزداد السرعة التفاعل ‪3-2‬‬ ‫‪-‬‬
‫الحرارة المثلى‬
‫ضعف الى ان تصل الى درجة الحرارة المثلى وهذا ما يسمــــــــــى‬
‫بمعامل الحرارة (‪The temperature coefficient )Q10‬‬
‫وعندما تتجاوز درجة الحرارة الدرجة المثلى فانه ستبدأ حالـــــــــة‬
‫مسخ االنزيم (البروتين) ‪. Denaturation‬‬

‫ال تفقد االنزيمات طبيعتها عند درجات الحرارة الواطئة ‪ ،‬وتستعيد فعاليتها مرة ثانية اذا ارتفعت درجة الحرارة ‪ ،‬وان هذه‬
‫الحقيقية تسمح للباحثين بحفظ زراعات الخلية وانسجة الجسم ‪ ،‬لغرض الزرع وكائنات مثل البكتريا لدراسات اكثر‪ ،‬كذلك من‬
‫الممكن حفظ الغذاء في ثالجة الن التفاعالت االنزيمية التي تسبب التلف تتباطأ كثي ار او تقف عند درجات الحرارة الواطئة‬
‫جدا‪.‬‬

‫‪ .2‬األس الهيدروجيني ( تركيز أيونات الهيدروجين ) ‪ -: PH‬لكل إنزيم درجة حموضة ‪ PH‬مناسبة يكون نشاطه عندها أكبر‬
‫ما يمكن ويقل نشاطه إذا تغير درجة ‪ PH‬ارتفاعا أو انخفاضا وذلك ملا يطرأ على اإلنزيم من تغير وذلك لتغيير شحنة‬
‫األحماض االمينية املكونة لسلسلة البروتين والتي تشارك في ربط املواد املتفاعلة بمركز نشاط اإلنزيم الذي يسبب‬
‫ايضا تغير شكل املوقع الفعال‪ .‬فمثال انزيم الببسين يعمل في درجة ‪ PH‬منخفضه اي حامضي جدا بينما انزيم التربسين‬
‫يعمل في درجة ‪ PH‬عاليه اي قاعديه ‪ ،‬ومعظم االنزيمات تعمل في درجة ‪ PH‬متعادله ‪.‬‬

‫‪ .3‬تركيز مادة التفاعل على سرعة التفاعل‪ :‬تزيد سرعة التفاعل طرديا بزيادة تركيز المواد المتفاعلة حتى تصل إلى سرعة معينة‬
‫ال تزيد بعدها سرعة التفاعل مهما زاد تركيز المواد المتفاعلة وتبقى سرعة التفاعل ثابته وهذا بسبب كون تركيز االنزيم‬
‫محدود وان اضافة مادة اساس اكثر لن تجد انزيمات تتبط بها ‪ ،‬وتسمى هذه السرعة بالسرعة القصوى‪.‬‬
 ‫د‪.‬نغم قـ‪ .‬كـ‪.‬‬ ‫الكيمياء احلياتية‪ /‬الفصل الرابع‪ -‬االنزميات‬
‫‪8‬‬

‫لقد قام العالمان ميكايليز ومنتن بتفسير العالقة بين سرعة التفاعل االنزيمي وتركيز المادة االساس ‪Michaelis and‬‬
‫‪ Menten‬افترض هذان العالمان بأن األنزيم ‪ E‬يتحد أوال بصورة عكسية مع المادة األساس ‪ S‬ليكون مركب معقد من األنزيم‬
‫والمادة األساس ‪ ES‬في تفاعل سريع ثم يتفكك المركب المعقد ‪ ES‬بعد ذلك بتفاعل عكسي ثان والذي يكون أبطأ من األول ليولد‬
‫مرة أخرى األنزيم الطليق وناتج التفاعل ‪.P‬‬

‫عندما يكون تراكيز المواد االساس قليلة ويكون االنزيم غير مشبع فان سرعة التفاعل تكون معتمدة على تركيز المادة‬
‫االساس ويعبر عنها بحركية احادية الرتبة وعند زيادة التركيز الى درجة كبيرة وتصبح المواقع الفعالة لألنزيم كلها مشبعة بصورة‬
‫دائمة ( حيث تقترن بصورة مستمرة جزيئات المادة االساس الموجودة بوفرة بالمواقع الفعالة لجزيئات االنزيم حيث حالما تتحرر‬
‫جزيئات الناتج من االنزيم وهكذا يكون االنزيم بحالة تشبع دائما ) وتكون في هذه الحالة سرعة التفاعل غير معتمدة على تركيز‬
‫المادة االساس ويعبر عنها بحركية صفر الرتبة ‪ .‬وان العالقة يتم التعبير عنها بالرسم البياني بين تركيز المادة االساس وسرعة‬
‫التفاعل يكون بشكل منحني ذي قطع مخروطي ( هايبربوليك ‪-: ) hyperbolic‬‬

‫وان المعادلة الرياضية التي تعبر عن هذه العالقة يطلق عليها معادلة ثابت ميكايليز ومينتن ‪-:‬‬

‫حيث ان‬

‫‪ = Vo‬سرعة التفاعل االبتدائية‬

‫‪ = Vmax‬السرعة القصوى‬
‫]‪ = [s‬تركيز المادة األساس‬
‫‪ = Km‬ثابت ميكايليز وهو عبارة عن تركيز المادة األساس الذي يكون عنده سرعة التفاعل تساوي نصف السرعة القصوى‬
‫‪Vmax‬‬
 ‫د‪.‬نغم قـ‪ .‬كـ‪.‬‬ ‫الكيمياء احلياتية‪ /‬الفصل الرابع‪ -‬االنزميات‬
‫‪9‬‬

‫‪ -‬ثابت ميكايلز ال يتغير بتغير تركيز األنزيم ‪ ،‬وتكون لكل أنزيم ومادة أساس خاصة به ‪ ،‬قيمة لثابت ميكيلز معينة ‪ ،‬هذا الثابت‬
‫يعكس سهولة أو صعوبة ارتباط األنزيم بالمادة األساس ‪ ،‬أي ميل األنزيم لالرتباط بالمادة األساس‪ .‬اذا كانت ‪ Km‬عالية‬
‫لألنزيم فانها تعكس ميل األنزيم الضعيف للمادة األساس ‪ .‬اذا كانت ‪ Km‬صغيرة تعكس ميل األنزيم القوي للمادة األساس‪.‬‬
‫تعتبر هذه المعادلة أساسية و صحيحة لكافة اختالفات فعالية األنزيم في تحفيز التفاعالت واذا كان كل من ‪ Km‬و‪Vmax‬‬
‫معلومة والتي يمكن استنتاجها بسهولة من تجارب بسيطة نستطيع احتساب سرعة التفاعل ألي تركيز معين للمادة األساس‪.‬‬

‫رسم لينويفر‪-‬بيرك البياني ‪Line-Weaver Burk Plot‬‬

‫عند اخذ القيمة العكسية لطرفي معادلة ميكايليز –مينتن اعاله واعادة ترتيبها نحصل على عالقة خطية تعرف بمعادلة‬
‫لينويفر‪-‬بيرك ويمكن بواسطتها الحصول على قيم ‪ Km‬و‪ Vmax‬بدقة من هذا الرسم دون الحاجة إليجادها بالطرق المختبرية‪.‬‬

‫‪ .4‬تركيز األنزيم ‪ -:‬تتناسب سرعة التفاعل طرديا مع زيادة تركيز االنزيم وتستقر سرعة التفاعل على حد معين رغم اضافة‬
‫االنزيم تبقى السرعة ثابته وهذا يعود للمادة االساس ألنها اصبحت مرتبطة كليا فإضافة انزيم اكثر لن يجد ماده اساس‬
‫ليعمل عليها‪.‬‬

‫الفحص الكمي لفعالية االنزيم ‪Enzyme assay‬‬

‫يمكن قياس فعالية االنزيم بواسطة الفحص الكمي للتاثير المحفز الذي ينتجه ذلك االنزيم ‪ ،‬ويتم فحص االنزيم عند الدرجة الحرارة‬
‫المثلى ودرجة الرقم الهيدروجيني المثلى والتشبع بالمادة االساس‪.‬‬

‫تعرف وحدة قياس االنزيم الدولية (‪ International unit of enzyme activity )I.U‬بانها كمية االنزيم التي يمكنها‬
‫تحويل ‪ 1‬مايكرومول من المادة االساس الى ناتج خالل دقيقة واحدة في ظروف قياسية‪.‬‬

‫‪I.U= µmol/min‬‬
 ‫د‪.‬نغم قـ‪ .‬كـ‪.‬‬ ‫الكيمياء احلياتية‪ /‬الفصل الرابع‪ -‬االنزميات‬
‫‪10‬‬

‫الفعالية النوعية لألنزيم ‪ = specific activity‬عدد وحدات االنزيم لكل ملغم من البروتين الكلي‬

‫‪specific activity =I.U /mg of protein = µmol/min of protein‬‬

‫ان الفعالية النوعية هي مقياس لنقاوة االنزيم وتزداد من خالل تنقية االنزيم وتصبح اقصى ما يمكن عندما يكون االنزيم نقي‪.‬‬

‫عدد التحول هو عدد الجزيئات المتحررة من التفاعل لكل وحدة زمن بواسطة جزيئة واحدة من االنزيم عندما يكون االنزيم هو‬
‫المحدد لسرعة التفاعل مثال عدد التحول النزيم كاربونيك انهايدريز هو ‪ 136000000‬جزيئة ‪ /‬دقيقة وهو اعلى عدد تحول‬
‫‪T.N=I.U/mol.of enzyme =µg/min/mol.of enzyme‬‬ ‫معروف ‪.‬‬

‫الد َولِ ِّي ِل َلو ْحدات( = كيمية االنزيم التي تحول ‪ 1‬مول من المادة االساس لكل‬ ‫الن ِ‬
‫ظام ُ‬ ‫اإل نزيمات في ِّ‬ ‫ِ‬
‫قياس ِ‬ ‫(و ْح َدةُ‬
‫‪ 1‬كاتال ‪َ katal‬‬
‫دقيقة واحدة ‪ ،‬لذلك فان ‪-:‬‬

‫‪1 U = 1/60 micro katal = 16.67 nano katal‬‬ ‫‪1katal=6x107 U‬‬

‫االنزميات املتماثلة ‪Isoenzymes‬‬

‫هي اإلنزيمات التي تحفز نفس التفاعل الكيميائي لكنها تختلف بترتيب وتسلسل االحماض االمينية المكونة لها ‪ ،‬وتختلف‬
‫فيما بينها في خصائصها الكيميائية والفيزيائية وايضا بقيمة ال ‪ Vmax‬و‪ KM‬والفعالية التحفيزية ونقطة التعادل الكهربائي‬
‫ومكان تواجدها ‪ ،‬يتم فصلها تحت تأثير التيار الكهربائي في المحلول ‪ . electrophoresis‬اإلنزيمات المتماثلة ضرورية‬
‫لتنظيم العمليات الحيوية وكذلك في تكون األنسجة‪ ،‬ولها دور كبير في المجال الطبي للكشف عن األمراض‪ .‬ومن األمثلة على‬
‫ذلك إنزيم الكتيت ديهيدروجينيز (‪ lactate dehydrogenase )LDH‬الذي وجد منه خمسة أشكال في مصل دم اإلنسان‬
‫حيث يتوزع بأنسجة مختلفة‪ .‬كل انواع ال ‪ LDH‬تتكون من اربع سالسل ببتيدية ( الوزن الجزيئي لكل منها = ‪) 33,500‬‬
‫وكل نوع منها يحتوي نسبة مختلفة من نوعين من السالسل الببتيدية ‪ .‬سلسلة تدعى ‪ ( M‬للعضلة ‪ ) Muscle‬وسلسلة تدعى‬
‫‪ ( H‬للقلب ‪ . ) Heart‬ففي العضلة الهيكلية انزيم ‪ LDH‬يتكون من اربع سالسل ‪ ، M‬والقلب يحتوي على انزيم ‪ LDH‬يتكون‬
‫من اربع سالسل ‪ ، H‬وبقية االنسجة تتكون من كال النوعين ‪ ،،،‬واالشكال الخمسة لهذا االنزيم هي ‪-.‬‬

‫في القلب وكريات الدم الحمراء‬ ‫‪HHHH‬‬ ‫‪LDH1‬‬

‫في القلب وكريات الدم الحمراء‬ ‫‪HHHM‬‬ ‫‪LDH2‬‬
‫في الدماغ والكلية‬ ‫‪HHMM‬‬ ‫‪LDH3‬‬
‫في العضالت الهيكلية والكبد‬ ‫‪HMMM‬‬ ‫‪LDH4‬‬
‫في العضالت الهيكلية والكبد‬ ‫‪MMMM‬‬ ‫‪LDH5‬‬
 ‫د‪.‬نغم قـ‪ .‬كـ‪.‬‬ ‫الكيمياء احلياتية‪ /‬الفصل الرابع‪ -‬االنزميات‬
‫‪11‬‬

‫االنزميات االلوستريية ‪Allosteric Enzymes‬‬

‫تحتوي معظم اإلنزيمات على موقع نشط واحد في كل جزيء‪ ،‬إال أن هناك مجموعة من اإلنزيمات تحتوي على أكثر من‬
‫موقع نشط و تسمى هذه اإلنزيمات باإلنزيمات ذات الموقع اآلخر أو اإلنزيمات األلوستيرية ‪.Allosteric Enzymes‬‬

‫و يرتبط على أحد المواقع النشطة جزيء من المادة الهدف بينما يرتبط على الموقع اآلخر مركب كيميائي معين برابطة ضعيفة‬
‫غير تساهمية ‪ ،‬و يؤدي ارتباط تلك المركبات الكيميائية إلى تغير في نشاط اإلنزيم زيادة أو نقصانا‪ ،‬حيث تؤدي الى تغييرات‬
‫تركيبية في البناء الهيكلي لبقية الوحدات في الجزيئة األنزيمية )‪ (Conformational Changes‬فتتغير بذلك قدرة األنزيم‬
‫على االرتباط مع المادة األساس ‪ ،‬وهي لذلك تسمى معدالت ‪ .Modifiers‬فتسمى المعدالت التي تزيد من نشاط االنزيم‬
‫بالمنشطات)‪ ، (Activators‬وتلك التي تؤدي الى اضعاف نشاط االنزيم بالمثبطات)‪. (Inhibitors‬‬

‫معـــدل ذو تأثيـــــر سلبـــــي علــــــــى االنزيــــــم‬ ‫معــــــدل ذو تأثيــــر ايجابـي علــــــــى االنزيــم‬
‫(تغير الموقع الفعال نتيجة ارتباط المـــــــــادة‬ ‫(تغيــــر الموقـع الفعـال نتيجة ارتباط المادة‬
‫المعدلة ليصبح غير مناسب للمادة االساس)‬ ‫المعــــدلة ليصبـح مناســـب للمادة االساس)‬

‫التثبيط بالتغذية املرتدة ‪Feedback inhibition‬‬

‫وهي الظاهرة التي تحدث بواسطة كون الناتج النهائي يثبط االنزيم االول في السلسلة االنزيمية او المسار األنزيمي ‪ ،‬ويعرف‬
‫االنزيم الذي يتأثر بالناتج النهائي باألنزيم المنظم والذي قد يحتوي باإلضافة الى الموقع الفعال على موقع ارتباط ثاني كما في‬
‫االنزيمات االلوستيرية‬
 ‫د‪.‬نغم قـ‪ .‬كـ‪.‬‬ ‫الكيمياء احلياتية‪ /‬الفصل الرابع‪ -‬االنزميات‬
‫‪12‬‬

‫االنزميات وتشخيص االمراض ‪Enzyme and the diagnosis of disease‬‬

‫توجد في بالزما الدم مجموعة من األنزيمات المتعددة و التي لها أهمية كبيرة في تشخيص بعض األمراض و متابعة تطور‬
‫بعضها‪ .‬كما تساهم بشكل كبير في تقدير العالج الناجع و مدى فعاليته‪ .‬يعد الكبد المصنع الرئيسي لألنزيمات في الجسم حيث‬
‫ينتج معظمها و يتم تقسيم األنزيمات إلى مجموعتين‪:‬‬

‫‪ .1‬األنزيمات الخاصة بالبالزما ‪ :‬هي انزيمات وظيفية أي انها التي تقوم بوظائف معينة في الدم حص ارً مثل عوامل التخثر‬
‫المنتجة في الكبد و عوامل المتممة المسؤولة عن تعزيز الجانب المناعي تجاه المستضدات و منظومة الرينين المفرزة من الكلية‪.‬‬

‫‪.2‬األنزيمات الغير خاصة بالبالزما‪ :‬هي انزيمات ال وظيفية التي تنتقل الى الدم من أنسجة محددة ‪ ،‬أي انها توجد بتراكيز قليلة‬
‫جدا في الدم وتزداد هذه االنزيمات في حال اصابة العضو بمرض او جرح و منها مثال ناقالت األمين (‪ )ALT,AST,GGT‬التي‬
‫تزداد في حالة اصابة الكبد ‪.‬‬

‫املثبطات ‪Inhibitors‬‬

‫يقصد بالمثبطات بانها تلك المركبات التي يترتب على وجودها انخفاض نشاط االنزيم (فعاليته) ‪ ،‬وفي بعض االحيان‬
‫يتوقف نشاط االنزيم كليا‪ ،‬وتأثير المثبطات يعود الى ارتباطها مع بعض االنزيمات بصورة تمنع او تعيق هذه االنزيمات عن القيام‬
‫بوظيفتها ‪.‬‬
 ‫د‪.‬نغم قـ‪ .‬كـ‪.‬‬ ‫الكيمياء احلياتية‪ /‬الفصل الرابع‪ -‬االنزميات‬
‫‪13‬‬

‫انواع التثبيط‬

‫‪Reversible Inhibition‬‬ ‫‪ -1‬التثبيط العكـــــسي‬

‫‪Competitive inhibitors‬‬ ‫التثبيط التنافســي‬ ‫أ‪-‬‬

‫في هذا النوع العكسي من التثبيط يتنافس المثبط ‪ Inhibitor‬والمادة االساس ‪ Substrate‬لالرتباط مع الموقع النشط‬
‫لألنزيم‪ ،‬وبذلك تقل فعالية االنزيم بسبب قلة نسبة جزيئات االنزيم التي تتحد والمادة االساس‪ .‬فمثال قد تكون مادة السلفانيالميد‬
‫‪ Sulfanilamide‬مثبط تنافسي الذي يشبه في تركيبه حامض با ار امينوبنزويك )‪ p-aminobenzoic (PABA‬الذي يدخل‬
‫في بعض التفاعالت االنزيمية االساسية للبكتريا ‪ ،‬لذلك فان وجود هذا الدواء في الوسط الذي تعيش فيه البكتريا يسبب ايقاف‬
‫عمل انزيم معين مادته االساس حامض ‪ p-aminobenzoic‬وذلك لتشابه تركيب المثبط لتركيب الركيزة كما مبين في الشكل‬
‫ادناه‪:‬‬

‫ولذلك فان دواء السلفانيالميد يقضي على البكتريا المسببة للمرض بإعاقة عمل االنزيم الذي يستخدم ‪p-aminobenzoic‬‬
‫الضروري لتخليق حامض الفوليك ‪. Folic acid‬‬

‫في التثبيط التنافسي ‪ Km‬تزداد ولكن ‪ Vmax‬ال تتغير‬

 ‫د‪.‬نغم قـ‪ .‬كـ‪.‬‬ ‫الكيمياء احلياتية‪ /‬الفصل الرابع‪ -‬االنزميات‬
‫‪14‬‬

‫ب‪ -‬التثبيط غير التنافسي ‪Uncompetitive Inhibition‬‬

‫في هذا النوع من التثبيط ال يتحد المثبط مع االنزيم الحر ولكن يتحد اتحادا عكسيا مع معقد االنزيم – المادة االساس‬
‫]‪ ، [ES‬وينتج عن ذلك معقد غير فعال ويتميز هذا النوع من التثبيط بانه نادر في االنظمة احادية المواد المتفاعلة ‪.‬‬

‫في التثبيط غير التنافسي ‪ Km‬تقل و ‪ Vmax‬تقل ايضا‬

‫ت‪ -‬التثبيط الالتنافسي ‪Noncompetitive Inhibition‬‬

‫في هذا النوع من التثبيط يتحد المثبط مع االنزيم في موقع يختلف عن الموقع الذي تتحد به المادة االساس ]‪ [S‬مع‬
‫االنزيم‪ .‬وكما موضح في الشكل التالي‪.‬‬

‫في التثبيط الالتنافسي ‪ Km‬ال تتغير و ‪ Vmax‬تقل‬

 ‫د‪.‬نغم قـ‪ .‬كـ‪.‬‬ ‫الكيمياء احلياتية‪ /‬الفصل الرابع‪ -‬االنزميات‬
‫‪15‬‬

‫التثبيط غير العكسي ‪Irreversible Inhibition‬‬ ‫‪-2‬‬

‫يحدث هذا المنع غير العكسي عندما تتحطم او تتحور المجموعة الوظيفية او العامل المساعد لفعالية االنزيم‪ .‬مثال انزيم‬
‫استيل كولين استريز ‪ Acetylcholinesterase‬هو االنزيم الذي يساعد التفاعل الذي يحدث بين نقاط اتصال الخاليا العصبية‬
‫‪ ،‬هذا االنزيم ضروري لألرسال االشارات العصبية‪ ،‬فعند التعرض لغاز االعصاب الذي يحتوي على ثنائي ايزوبروبل‬
‫فوسفوفلوريدات )‪ Diisopropylphosphofluoridate (DIPF‬فأن هذا المركب سوف يتحد مع مجموعة الـ ‪ OH‬على‬
‫جزيئة الحامض االميني السيرين ‪ Serine‬التي هي مهمة للموقع الفعال لالنزيم ‪ ،‬ومن ثم يفقد االنزيم قابليته على مساعدة‬
‫التفاعل وبذلك تشل الحركة الحيوانات‪.‬‬

‫يوجد االستيل كولين ‪ Acetylcholine‬في نهاية الياف الخاليا العصبية ‪ ،‬ثم ينتقل الى بروتين مستقبل في خلية مجاورة ‪ ،‬مما‬
‫يؤدي الى ارسال االشارة ثم بعدها يتحلل ‪ Acetylcholine‬مائيا بانزيم ‪ Cholinesterase‬تاركا الخلية مستعدة الستقبال‬
‫االشارة الالحقة‪ .‬وان تسمم العصب يربك هذه العمليات بالطرق التالية‪.‬‬

‫‪ .1‬يوقف فعالية ‪ Acetylcholine‬وعليه ال ترسل االشارات العصبية ويحدث الموت بسبب فشل في التنفس‪.‬‬

‫والكودائين ‪ codeine‬والكوكائين ‪cocaine‬‬ ‫‪ .2‬النيكوتين ‪ Nicotine‬واالتروبين ‪ atropine‬والمورفين ‪morphine‬‬

‫والمخدرات الموضعية مثل البروكائين ‪ procaine‬يتحد مع البروتين المستقبل مانعا تفاعله مع ‪ Acetylcholine‬وعليه‬
‫فان الخلية الثانية ال تستلم الضربات وال ترسل االشارات العصبية‪.‬‬

‫‪ .3‬مضادات انزيم الــ ‪ Cholinesterase‬هي سموم مثل غازات االعصاب ‪ ،‬ومضادات الحشرات الفوسفاتية العضوية ‪،‬‬
‫وبعص توكسينات الفطر التي تمنع انزيم الــ ‪ Cholinesterase‬مسببه ما فوق التحفير للخاليا العصبية باستيل كولين‬
‫‪ Acetylcholine‬وهذا يؤدي الى عدم انتظام ضربات القلب والتشنج والموت‪.‬‬