In the first step, sample, sample treatment solution, expiration date as indicated on the label when should read
should read the related system operation manual
HIV
Antigen and Antibodies to
Human Immunodeficiency
Virus（CLIA）
Order Information
Catalog No. Package Size
HIV111 2×50 tests
HIV112 2×100 tests
Intended Use
The CL-series HIV assay is a Chemiluminescent
Immunoassay for the simultaneous qualitative
determination of HIV p24 antigen, and antibodies to
HIV-1 and/or HIV-2 in human serum or plasma.
Summary
Human Immunodeficiency Virus (HIV ） is the
etiologic agent causing acquired immunodeficiency
syndrome (AIDS), which belongs to retrovirus ，
classified in the category of Lentivirus, primate
immunodeficiency subgenus. HIV is transmitted by
sexual contact, exposure to blood or blood products,
or prenatal infection of a fetus or a newborn1.
There are two types of human immunodeficiency
viruses, HIV-1 and HIV-2, both composed of
multiple genetic subtypes2, 3. The prevalent
subtypes in different areas could vary. HIV-1 is
classified into three main groups: Group M (major),
Group O (outlier), and Group N (Non-M and Non-O)
4-6
. Among HIV-1 Group M there are nine subtypes
(A, B, C, D, F, G, H, J & K) and circulating
recombinant forms (CRFs). HIV-1 is the most widely
transmitted HIV virus4. HIV-1 Group O and Group N
were discovered in Cameron, which are rare and
only endemic to West Central Africa. However,
Group O infections have been identified in other
areas too5, 6. HIV-2 is classified into genetic
subtypes A-H, among which A and B are the most
endemic subtypes7.
When HIV infects human being, the immune system
of human body will respond by generating a variety
of antibodies to HIV virus proteins. The antibodies
against trans-membrane protein (TMP) of the virus
are among the first to appear at seroconversion of
HIV infected individuals. In addition, the anti-TMP
response remains relatively strong throughout the
course of the disease. Therefore, anti-TMP
antibodies are good targets for HIV assay8-13. In
addition to antibody, the 4th generation HIV assay
also target HIV p24 antigen in serum or plasma for
identification of the recently infected individuals14,
15
. the right）:
Mindray HIV assay belongs to the 4th generation HIV
assay which detects both HIV-1 (including Group M
& O) and HIV-2 antibodies, as well as HIV p24
antigen prior to seroconversion, thereby shortening
the detection window and improving detection
sensitivity of early HIV infection.
Assay Principles
The CL-series HIV assay is a two-site sandwich
assay to determine the level of HIV p24 antigen and
the antibodies to HIV-1 and/or HIV-2.
P/N: 046-003271-00 (8.0) English-1
paramagnetic microparticles coated with mouse
anti-HIV p24 mAb, and microparticles coated with
specific HIV-1 and HIV-2 antigens are added into a
reaction vessel. After incubation, HIV p24 antigen in
the sample will bind specifically to the monoclonal
antibody coated on microparticles, while HIV-1 and
HIV-2 antibodies in the sample will bind to HIV-1 or
HIV-2 antigen coated microparticles. Afterwards,
microparticles are magnetically captured while
other unbound substances are removed by washing.
In the third step, diluent solution, ALP labeled
anti-HIV p24 monoclonal antibody, and ALP labeled
HIV-1 and HIV-2 antigens are added to the reaction
vessel. After incubation, ALP labeled anti-HIV p24
monoclonal antibody, ALP labeled HIV-1 and HIV-2
antigen will form sandwich with microparticle
captured HIV p24 antigen, HIV-1 or HIV-2 antibody
respectively. Afterwards, microparticles are
magnetically captured while other unbound
substances are removed by washing.
In the third step, the substrate solution is added to
the reaction vessel. The substrate is catalyzed by
ALP in the immune complex captured on the
microparticles, The resulting chemiluminescent
reaction is measured as relative light units (RLUs)
by a photomultiplier built into the system. A direct
relationship exists between the amount of p24
antigen, and antibody to HIV-1 or HIV-2 or both in
the sample and the RLUs generated during the
reaction. The presence or absence of HIV p24
antigen, HIV-1 or HIV-2 antibodies in the sample is
determined by comparing the chemiluminescent
signal in the reaction to the cutoff signal determined
from calibration. A cutoff index (COI) is calculated
by Sample RLU/Cutoff RLU.
Reagent Components
The reagent kit is composed of four components: Ra,
Rb, Rc, and Rd. The component cannot be
exchanged, and the detailed information of each
component is listed below：
Paramagnetic microparticles coated with
HIV-1/2 specific antigens and HIV p24
Ra
monoclonal antibody (mouse IgG) in
HEPES buffer with preservative.
ALP labeled HIV-1/2 specific antigens
and HIV p24 monoclonal antibody
Rb
(mouse IgG) in TRIS buffer with
preservative.
Sample diluents in TRIS buffer with
Rc
preservative.
Blockers in TRIS buffer with
Rd
preservative.
The position of each component is shown in the
figure below（front view on the left and top view on
Storage and Stability
The unopened HIV reagent kit is stable up to the
HIV Page 1 of 2
stored at 2~8 0C. The actual expiration date is
stated on the label.
The HIV reagent kit can be stored onboard at 2~8 0C
and used for a maximum of 28 days after opening
for use.
Reagent Preparation
Ra: Ready to use
Rb: Ready to use
Rc: Ready to use
Rd: Ready to use
Materials Required but not Provided
Mindray CL-series Chemiluminescence
Immunoassay Analyzer
Cat. No. HIV211: HIV Calibrators, 1×2.0mL for each
level of calibrator C0 and C1
Cat. No. HIVN311: HIV Negative Control 3×2.0mL
Cat. No. HIVN312: HIV Negative Control, 6×2.0mL
Cat. No. HIVP311: HIV Ag/Ab Positive Control,
12×2.0mL
(HIV Ag Positive Control:6×2.0mL, HIV Ab Positive
Control:6×2.0mL)
Cat. No. HIVP312: HIV Ag/Ab Positive Control,
6×2.0mL
(HIV Ag Positive Control:3×2.0mL, HIV Ab Positive
Control:3×2.0mL)
Cat. No. CS511: Substrate Solution, 4×115mL
Cat. No. WB411: Wash Buffer
Reaction Vessel
Instrument System
Mindray CL-series Chemiluminescence
Immunoassay Analyzer
Specimen Collection and Preparation
Human serum, heparin plasma or citrate plasma is
suitable for the test. Human serum is
recommended.
Specimens must be separated from clots or red
blood cells using centrifugation as recommended by
the tube manufacturer after clot formation is
complete. Specimens should be tested as soon as
possible after sample collection and pre-analytical
treatment. Test the specimens within two hours
after centrifugation. If testing is not completed
within 12 hours, transfer the supernatant into tubes
for storage. Specimens should be tightly capped and
refrigerated at 2~8°C. If testing will be delayed for
more than 7 days, specimens should be frozen at
-20°C or below.
Avoid repeated freeze and thaw cycles, which may
cause sample deterioration. Specimen can be used
after a maximum of five cycles of freeze and thaw.
Do not use specimen with the following conditions:
 heat inactivated
 grossly hemolyzed
 obvious microbial contamination
 visible fibrin or other debris
Assay Procedure
For optimal performance of this assay, operators
carefully to get sufficient information such as
operation instructions, sample preservation and
management, safety precautions, and maintenance.
Prepare all required materials for the assay as well.
Before loading the HIV reagent kit on the
instrument for the first time, invert unopened
reagent bottle gently for at least 30 times to
resuspend the microparticles, which have settled
during shipment or storage. Visually inspect the
bottle to ensure the microparticles have been well
mixed. If the microparticles remain adhered to the
bottle, continue inverting until the microparticles
have been completely mixed. If the microparticles
cannot be homogenized, it is recommended not to
use this bottle of reagent. Contact Mindray
Customer Service for help. Do not invert opened
reagent bottle.
This assay requires 100 μL of sample volume for a
single test. This volume does not include the dead
volume of the sample container. Additional volume
is required when performing additional tests from
the same sample. Operators should refer to the
system operation manual and specific requirement
of the assay to determine the minimum sample
volume.
Calibration
The calibration information is stored in the barcode
attached in the reagent and calibrator pack. When
performing the calibration, scan the information
from the barcodes into the system first, and then
test the calibrators at two levels. Calibration is
required before any HIV test. Recalibration is
recommended every 4 weeks, or when a new
reagent lot is used, or when the quality controls are
out of specified ranges. For detailed instruction of
calibration, refer to the system operation manual.
Control
It is recommended that quality controls should be
run once every 24 hours if the tests are in use, or
after every calibration. The quality control
frequency should be adapted to each laboratory’s
individual requirements. Two controls for this assay
are Mindray HIV Negative Control and HIV Positive
Control.
Quality control results should be within the
acceptable ranges. If a control is out of its specified
range, the associated test results are invalid and the
samples must be retested. Recalibration may be
required. Refer to the system operation manual to
check up the system. If the quality control results
are still out of the specified ranges, please contact
Mindray Customer Service for help.
Calculation
The CL-series analyzer calculates the mean RLU
signals of both calibrator C1 and C0.
The CL-series analyzer calculates HIV result based
on the ratio of the sample RLU to the cutoff RLU
(Cutoff Index, COI) for each specimen and control.
Cutoff RLU = [(Mean RLU of C1 – Mean RLU of
C0) x Calibration Coefficient] + Mean RLU of C0
Calibration Coefficient is specific for each
reagent and calibrator lot.
COI = Sample RLU/Cutoff RLU
Specimen Dilution
2020-04
Specimens cannot be diluted for Mindray HIV assay. Precision 8.
The CL-series HIV assay is designed to have a
Interpretation of Results precision of ≤10% (within-device CV). Precision
Samples with a COI<1.00 are Non-reactive in the was determined by following National Committee 9.
Mindray HIV assay. These samples are considered for Clinical Laboratory Standards (NCCLS) Protocol
as negative for HIV, and do not need further testing. EP5-A216. Three levels of quality controls were
tested in duplicate in two separate runs per day, for
Samples with a COI I≥1.00 are considered Initially
a total of 20 days, using a single lot of reagents and
Reactive.
a single calibration curve. The precision data are 10.
All Initially Reactive specimens must be transferred summarized in the table below.
to a centrifuge tube and centrifuged at≥10,000 RCF Within-
Average Within- Between-
(Relative Centrifugal Force) for 10 minutes, and Sample Device
then retested in duplicate. (COI) Run CV Run CV Graphical Symbols
CV
If COI is <1.00 in both retests, this sample is Negative
0.14 2.42% 3.44% 6.46%
considered as negative for HIV p24 antigen and Control
HIV-1/2 antibodies. Positive
If COI is ≥ 1.00 in any of the retests, the sample is Control 6.95 1.15% 2.98% 3.40%
1 14.
considered as Repeatedly Reactive, and is positive
for either HIV p24 antigen, or HIV-1/2 antibodies, or Positive
positive for both antigen and antibodies. Control 5.95 1.18% 3.02% 3.66%
2 haemophiliacs.
Repeatedly Reactive samples must be confirmed
according to the recommended confirmatory
Specificity
procedure by regulatory authority, such as Western
Blot and HIV RNA tests. Specimen spiked with hemoglobin up to 500 mg/dL,
bilirubin up to 20 mg/dL, triglycerides up to 3000
Limitation of Measurement mg/dL, total protein up to 10 g/dL, rheumatoid Bibliography
factor(RF) up to 1500 IU/mL, anti-DNA antibody
The HIV result of a given specimen can vary, 1.
(ANA) up to 400 U/L, or human anti-mouse
depending on the assays from different
antibody（HAMA）shows unaffected results(criterion:
manufacturers, which have differences in assay
recovery within ± 10% of initial value).
methods, calibration, and reagent specificity.
Mindray HIV kit was evaluated for potential
The CL-series HIV assay may not detect all infected
cross-reactive substances from individuals with 2.
individuals. A negative test result does not exclude
medical conditions unrelated to HIV infection. At
the possibility of exposure to or infection with HIV.
least 5 samples containing each of the potentially
HIV antibodies and/or p24 antigen may be
interfering substance of the following (HAV,
undetectable in some stages of the infection and in
Anti-HBs, HCV, HEV, HGV, Anti-HTLV-Ⅰ/Ⅱ, HBsAg,
some clinical conditions. A negative test result does
TP, EBV, RV, CMV, HSV-1, Toxo, Rubella, E.coli, Yeast,
not completely rule out the possibility of an infection 3.
and Lentivirus）are tested by Mindray HIV and a
with HIV. Specimens from the very early
reference reagent kit. All results are consistent
(pre-seroconversion) phase or the late phase of HIV
between Mindray assay and the reference assay.
infection can occasionally yield negative findings.
Yet unknown HIV variants can also lead to a 1021 specimens have been claimed negative by
negative result. reference methods. HIV assay on Mindray CL-2000i 4.
system detected 1019 samples as negative, while 2
As with all tests containing monoclonal mouse
samples are tested positive, with a diagnostic
antibodies, anomalous results maybe obtained from
specificity of 99.8%.
specimens taken from patients who have received
monoclonal mouse antibodies for diagnosis or
therapy in rare cases. Warnings and Precautions
1. For in vitro diagnostic use only. 5.
The assay results should be used in conjunction with
other data, such as symptoms, results of other tests, 2. Follow all the rules in handling laboratory
and clinical history, etc. to make clinical decisions. reagents and take necessary safety
The presence of HIV antigen or antibodies to HIV is precautions.
not a diagnosis of AIDS. 6.
3. Due to the differences in methodology and
antibody specificity, test results of the same
Performance Characteristics sample may be different when using reagent
kits from different manufacturers on Mindray 7.
Sensitivity system, or using Mindray reagent kits on
other systems.
The sensitivity for HIV p24 at the cutoff is <2 IU/mL.
The measurement accuracy is traceable to WHO 4. Do not use reagent kits beyond the expiration 8.
International Standard HIV p24 Antigen (NIBSC date.
code: 90/636).
5. Do not use reagents mixed from different
505 specimens have been clinically diagnosed with reagent lots.
HIV infection and classified as disease status.
6. Always keep the reagent pack in the upright 9.
Among them, five specimens are HIV-O antibody
position to ensure no microparticle has been
positive, 30 are HIV-2 antibody positive, and 23 are
lost prior to use.
HIV p24 antigen positive. HIV assay on Mindray
CL-2000i system detected 505 specimens as 7. Reagent pack opened for more than 28 days is
positive, with the positive coincidence rate at not recommended for use.
100%.. 10.
P/N: 046-003271-00 (8.0) English-1 HIV Page 2 of 2
Reliability of assay results cannot be in AIDS patients are encoded by HTLV-III.
guaranteed if the instructions in this package Science 1985; 228:1091-4.
insert are not followed. 11. Barin F, McLane MF, Allan JS, et al. Virus
All the specimen and reaction wastes should envelope protein of HTLV-III represents major
be considered potentially biohazard. target antigen for antibodies in AIDS patients.
Specimens and reaction wastes should be Science 1985; 228:1094-6.
handled in accordance with the local 12. Hunt JC, Johnson-Paepke J, Boardway K, et al.
regulations and guidelines. Discrimination between HIV-1 and HIV-2
The Material Safety Data Sheet (MSDS) is seropositive individuals using mouse
available upon request. monoclonal antibodies directed to HIV
transmembrane proteins. AIDS Res Hum
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Address: Mindray building, Keji 12th Road South,
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glycoprotein antigens that induce antibodies
2020-04
 определения уровня антигена р24 и антител к ВИЧ-1 Хранение и стабильность образцы после оттаивания следует осторожно и

Тест на ВИЧ и (или) ВИЧ-2.

На первом этапе в реакционную емкость вводится
проба, раствор для обработки пробы,
Невскрытый набор реактивов для анализа на ВИЧ
остается стабильным до одного полного года при
тщательно перемешать и центрифугировать при
10000 g в течение 10 минут.
Не используйте образец, если он:
Антиген и антитела к парамагнитные микрочастицы, покрытые температуре хранения 2~8 °C. Дата окончания  термически инактивирован;
мышиными моноклональными антителами к срока годности указана на этикетке.  сильно гемолизирован;
вирусу иммунодефицита антигену p24 ВИЧ и микрочастицы, покрытые Набор реактивов для анализа на ВИЧ может  имеет признаки загрязнения
специфическими антигенами ВИЧ-1 и ВИЧ-2. После
человека (ХЛИА) инкубации антиген р24 в пробе специфически
храниться в аппарате при температуре 2~8 °C и
использоваться в течение не более 28 суток после
микроорганизмами;
связывается с покрывающим микрочастицы  содержит фибрин или другой мусор.
вскрытия.
моноклональным антителом, а антитела к ВИЧ-1 и
Информация для заказа ВИЧ-2 в пробе — с микрочастицами, покрытыми Методика выполнения анализа
Подготовка реактивов
№ по каталогу Размер упаковки антигеном ВИЧ-1 или ВИЧ-2. После этого Для качественного выполнения анализа
микрочастицы захватываются магнитом, в то время Ra: Готовый к использованию
пользователь должен внимательно ознакомиться
HIV111 2×50 тестов как другие несвязанные вещества удаляются Rb (отрицательный контроль разбавителя): с руководством пользователя системы, а также с
HIV112 2×100 тестов промыванием. Готовый к использованию инструкциями пользователя, инструкциями по
На втором этапе в реакционную емкость вводится Rc: Готовый к использованию подготовке и хранению проб, инструкциями по
разбавитель, меченное щелочной фосфатазой Rd: Готовый к использованию технике безопасности и обслуживанию
Предусмотренное использование устройства. Также необходимо приготовить все
моноклональное антитело к антигену р24 и
Тест на ВИЧ серии CL представляет собой меченные щелочной фосфатазой антигены ВИЧ-1 Необходимые материалы, не входящие в материалы для проведения анализа.
хемилюминесцентный иммунологический тест и ВИЧ-2. После инкубации меченное щелочной Перед первой загрузкой набора реактивов для
для одновременного количественного комплект поставки
фосфатазой моноклональное антитело к анализа на ВИЧ в аппарат закрытый флакон с
определения антигена ВИЧ p24 и антител к ВИЧ-1 антигену р24 и меченные щелочной фосфатазой Анализатор Mindray серии CL для реактивом следует осторожно перевернуть не
и (или) ВИЧ-2 в сыворотке или плазме крови антигены ВИЧ-1 и ВИЧ-2 образуют хемилюминесцентного иммуноанализа менее 30 раз для ресуспендирования
человека. сэндвич-комплекс с микрочастицами с антигеном № по каталогу HIV211: калибраторы для теста на микрочастиц, которые осели при
р24 и антителом к ВИЧ-1 или ВИЧ-2 ВИЧ, по 2,0 мл на каждый уровень концентрации транспортировке или хранении. Визуально
Сводка соответственно. После этого микрочастицы калибратора (с нулевой концентрацией и проверьте нижнюю часть флакона, чтобы
Вирус иммунодефицита человека (ВИЧ) является захватываются магнитом, в то время как другие концентрацией C1) убедиться, что микрочастицы хорошо
этиологическим агентом, вызывающим синдром несвязанные вещества удаляются промыванием. № по каталогу HIVN311: отрицательный перемешались. Если микрочастицы остаются на
приобретенного иммунодефицита (СПИД), контроль для теста на ВИЧ (антиген/антитела), стенках флакона, следует продолжить
который принадлежит к ретровирусам категории На втором этапе в реакционную емкость
добавляется субстрат. Субстрат катализируется 3 × 2,0 мл переворачивать флакон до полного
лентивирусов, подрода иммунодефицита перемешивания микрочастиц. Не рекомендуется
приматов. ВИЧ передается при половом контакте, щелочной фосфатазой в иммунном комплексе, № по каталогу HIVN312: отрицательный
находящемся на микрочастицах. Полученная контроль для теста на ВИЧ (антиген/антитела), использовать пробирки с реактивом, в котором
через кровь или продукты крови, посредством микрочастицы не гомогенизированы. Для
пренатальной инфекции плода или хемилюминесцентная реакция измеряется в 6 × 2,0 мл
относительных световых единицах (ОСЕ) с помощи свяжитесь с отделом обслуживания
новорожденного1. № по каталогу HIVP311: положительный клиентов Mindray. Не переворачивайте открытые
Существует два типа вируса иммунодефицита помощью встроенного в систему фотоумножителя. контроль для теста на ВИЧ (антиген/антитела),
Существует прямая связь между уровнем флаконы с реактивами.
человека — ВИЧ-1 и ВИЧ-2. Оба состоят из 12 × 2,0 мл
нескольких генетических подтипов2, 3
. содержания антигена р24 и антител к ВИЧ-1 На один тест требуется 100 мкл образца. Данный
и (или) ВИЧ-2 в пробе и количеством (положительный контроль для теста на антиген
Преобладающие подтипы могут варьироваться в ВИЧ, 6 × 2,0 мл; положительный контроль на объем не включает мертвое пространство
различных областях. ВИЧ-1 делятся на три относительных световых единиц (ОСЕ), контейнера с образцом. Дополнительный объем
вырабатываемых в ходе реакции. Наличие или антитела к ВИЧ, 6 × 2,0 мл)
основные группы: Группа M («major»— требуется для проведения дополнительных
отсутствие антигена р24, антител к ВИЧ-1 или № по каталогу HIVP312: положительный тестов с образцом. Оператору рекомендуется
основная), группа O («outlier» — аномальная) и контроль для теста на ВИЧ (антиген/антитела),
группа N («Non-M» и «Non-O»— не М и не О) 4-6. ВИЧ-2 в пробе определяется путем сравнения ознакомиться с руководством пользователя
хемилюминесцентного сигнала реакции с 6 × 2,0 мл системы и особыми требованиями к анализу для
В группе М ВИЧ-1 имеется девять подтипов (A, B,
C, D, F, G, H J и K) и циркулирующие сигналом отсечки, определяемым при (положительный контроль для теста на антиген определения минимального объема образца.
рекомбинантные формы. ВИЧ-1 является калибровке. Индекс отсечки (COI) ВИЧ, 3 × 2,0 мл; положительный контроль на
наиболее широко распространенным вирусом рассчитывается как ОСЕ пробы/ОСЕ отсечки. антитела к ВИЧ, 3 × 2,0 мл) Калибровка
иммунодефицита человека4.ВИЧ-1 группы О и № по каталогу CS511: субстратный раствор, Сведения о калибровке содержатся в штрихкоде
группы N были обнаружены в Камеруне, они Компоненты реактива 4 × 115 мл на упаковке с реактивом и калибратором. При
являются редкими и характерными только для Набор реактивов состоит из четырех № по каталогу WB411: промывочный буфер выполнении калибровки сначала считайте
Западной и Центральной Африки. Тем не менее, компонентов: Ra, Rb, Rc и Rd. Компоненты не реакционная емкость информацию со штрихкодов, а затем
заражение вирусами группы O было выявлено и могут быть заменены; подробная информация о протестируйте калибраторы на двух уровнях.
в других странах5, 6. ВИЧ-2 делятся на каждом компоненте приведена ниже: Калибровка требуется перед проведением
генетические подтипы от A до H, при этом вирусы Используемое оборудование
Парамагнитные микрочастицы, покрытые каждого исследования на ВИЧ. Повторную
подтипов А и В являются наиболее Анализатор Mindray серии CL для калибровку рекомендуется проводить каждые 4
распространенными7. специальными рекомбинантными хемилюминесцентного иммуноанализа недели, или при использовании новой партии
При попадании ВИЧ-инфекции в организм антигенами ВИЧ-1/2 (кишечная палочка) и реактивов, или в случае, если контроль качества
Ra
человека его иммунная система реагирует на моноклональным антителом к антигену ВИЧ Забор и подготовка образцов находится вне указанного диапазона. Детальный
инфекцию посредством создания различных р24 (мышиному IgG) в ГЭПЭС-буфере с порядок калибровки изложен в руководстве
антител к вирусным белкам ВИЧ. У Для анализа пригодна сыворотка,
консервантом. пользователя.
ВИЧ-инфицированных пациентов при выработке гепаринизированная плазма или цитратная
антител одними из первых появляются антитела Меченные ALP рекомбинантные антигены плазма крови человека. Рекомендуется Контроль
к трансмембранному белку вируса. Кроме того, ВИЧ-1/2 (E. Coli.) и моноклональное использовать сыворотку крови человека.
уровень антител к трансмембранному белку Rb Для проверки надежности системы анализа
антитело (мышиное IgG) к антигену ВИЧ После завершения формирования сгустка контроль качества должен проводиться не реже
остается относительно высоким на протяжении р24 в ТРИС-буфере с консервантом. образцы необходимо отделить от сгустков или
всей болезни. Таким образом, антитела к одного раза в сутки, после загрузки нового
эритроцитов посредством центрифугирования в комплекта реактивов или после каждой
трансмембранному белку являются хорошими Разбавители пробы в ТРИС-буфере соответствии с рекомендациями производителя
индикаторами при анализе на ВИЧ8-13. Помимо Rc калибровки. Для данного теста имеется два
с консервантом. пробирки.Анализ должен быть проведен как
антител, для выявления заболевания на ранней контроля: отрицательный и положительный
Rd Блокатор в ТРИС-буфере с консервантом. можно скорее после забора образцов и контроли для теста на ВИЧ компании Mindray.
стадии тест на ВИЧ четвертого поколения предварительной обработки. Выполните анализ
использует в качестве индикатора антиген p24 в Расположение каждого компонента реактива образцов в течение двух часов после Показатели контроля качества должны
сыворотке или плазме крови14, 15. показано на рисунке ниже (вид спереди слева и центрифугирования. Если анализ не выполнен в находиться в допустимых пределах. Если
Тест на ВИЧ компании Mindray относится к тестам вид сверху справа): течение 12 часов, перелейте надосадочную показатели контроля качества выходят за рамки
на ВИЧ четвертого поколения, предназначенных жидкость в пробирки для хранения. Образцы нормальных значений, результаты тестов
для обнаружения антител к ВИЧ-1 (в том числе должны быть плотно закупорены с последующим являются недостоверными и должно быть
группы М и O) и ВИЧ-2 и антигена р24 до хранением в холодильнике при температуре проведено повторное тестирование. Также
сероконверсии, что позволяет как можно быстрее 2~8 °C. Если анализ не проведен в течение 7 должна быть проведена рекалибровка. Для
и с большей вероятностью обнаружить дней и более, образцы должны быть заморожены проверки системы см. руководство по
ВИЧ-инфекцию на ранних стадиях. при температуре -20 °C или ниже. эксплуатации системы. Если показатели
Избегайте повторного замораживания и оттаивания, контроля качества повторно выходят за границы
Принципы анализа это может привести к порче образца. Образец может нормы, свяжитесь с Отделом обслуживания
Тест на ВИЧ серии CL предназначен для проведения быть использован после не более пяти циклов клиентов компании Mindray.
двухэтапного сэндвич-анализа с целью замораживания и оттаивания. Ранее замороженные

№ по каталогу:046-003271-00(8.0)Русский-2 Тест на ВИЧ Стр. 1 из 2 2020-04

Вычисление результатов для диагностики или лечения, в редких случаях анти-HBs, вирус гепатита C, вирус гепатита Е, HGV, patient at risk for acquired immune deficiency
Анализатор серии CL вычисляет средний уровень могут быть получены аномальные результаты. анти-HTLV-I/II, HBsAg, БТ, вирус Эпштейна-Барр, syndrome (AIDS). Science 1983; 220:868-71.
сигналов ОСЕ от калибраторов C1 и C0. RV, цитомегаловирус, вирус простого герпеса 3. Clavel F, Guetard D, Brun-Vezinet F et al.
При принятии клинических решений результаты 1 типа, токсо, краснуха, кишечная палочка,
Анализатор серии CL рассчитывает результаты измерений должны сопоставляться с другими Isolation of a new human retrovirus from West
молочница и лентивирус — проверено с помощью African patients with AIDS. Science 1986;
по антителам к вирусу ВИЧ на основе отношения данными, такими как симптомы, результаты набора реактивов Mindray для анализа на ВИЧ и
количества ОСЕ для пробы к количеству ОСЕ, других исследований, анамнез и др. 233:343-6.
референсного набора реактивов. Все результаты
соответствующему порогу отсечки (индекс Наличие антигена ВИЧ или антител к ВИЧ не теста Mindray согласуются с результатами 4. Peeters, M. Recombinant HIV sequences: their
отсечки, ИО), для каждого образца и контроля. является диагнозом СПИД. контрольного теста. role in the global epidemic. In: Kuiken C, Foley
Порог отсечки в ОСЕ = [(C1 сред. в ОСЕ – C0 сред. B, Hahn B, et al, editors. HIV Sequence
1021 образцов признанно отрицательными на Compendium 2000. Los Alamos, NM: Los
в ОСЕ) x коэффициент калибровки] + C0 сред. в Эксплуатационные характеристики основании данных, полученных референсными
ОСЕ. Alamos National Laboratory, 2000:54-73.
методами. При проведении анализа на ВИЧ в (Available online at http://hiv-web.lanl.gov)
Коэффициент калибровки специфичен для Чувствительность системе Mindray CL-2000i для 1019 образцов был
каждого сочетания партии набора реактивов и Чувствительность к антигену ВИЧ p24 для получен отрицательный результат, в то время 5. Khouri ME, et al. Hepatitis B: Epidemiological,
партии калибраторов. отсечки составляет <2 МЕ/мл. Точность как 2 образца были ВИЧ-положительными, что immunological, and serological considerations
COI = количество ОСЕ для образца/порог отсечки в измерения имеет прослеживаемую связь с указывает на то, что диагностическая emphasizing mutation. Rev. Hosp. Clin. Fac.
ОСЕ международным стандартом WHO анализа на специфичность составляет 99,8 %. Med. S. Paulo 2004; 59(4):216-224.
антиген ВИЧ p24 (код NIBSC: 90/636). 6. Ayouba A, Souquieres S, Njinku B, et al. HIV-1
Разведение образцов У 505 образцов была клинически диагностирована Предостережения и меры group N among HIV-1-seropositive individuals
ВИЧ-инфекция, и классифицирован статус предосторожности in Cameroon. AIDS 2000; 14:2623-5.
Для анализа на ВИЧ компании Mindray
заболевания. Из них пять образцов положительны 1. Используется только для диагностики in 7. Peeters M, Gueye A, Mboup S, et al.
запрещается разведение образцов. к антителу к ВИЧ-O, 30 положительны к антителу к vitro. Geographical distribution of HIV-1 group O
ВИЧ-2, и 23 положительны к антигену ВИЧ p24. 2. Соблюдайте правила обращения viruses in Africa. AIDS 1997; 11:493-8.
Интерпретация результатов При проведении анализа на ВИЧ в системе Mindray
В случае теста на ВИЧ компании Mindray образцы с лабораторными реактивами и правила 8. Gao F, Yue L, Robertson DL, et al. Genetic
CL-2000i для 505 образцов был получен техники безопасности. diversity of human immunodeficiency virus
с COI <1,00 не дают реакцию. Эти пробы положительный результат, при этом процент
считаются отрицательными на ВИЧ и не 3. Результаты тестов могут различаться type 2: evidence for distinct sequence
совпадений по положительным результатам subtypes with differences in virus biology.
нуждаются в дополнительной проверке. составил 100 %. в соответствии с разностью применяемых
методик и специфичностью антител, также J Virology 1994; 68:7433-47.
Пробы с COI≥1,00 считаются первоначально
Точность результаты тестов могут различаться при 9. Sarngadharan MG, Popovic M, Bruch L, et al.
реактивными. использовании диагностических реактивов Antibodies reactive with human T-lymphotropic
Все первоначально реактивные образцы Прецизионность результатов теста на ВИЧ других производителей при использовании retroviruses (HTLV-III) in the serum of patients
необходимо переносить в пробирку для серии CL составляет ≤10 % (коэффициент диагностических устройств Mindray, или with AIDS. Science 1984; 224:506-8.
центрифугирования и центрифугировать при вариации для одного устройства). использовании диагностических наборов
относительной центробежной силе (RCF) ≥10 000 Прецизионность определялась в соответствии с Mindray в других диагностических 10. Allan JS, Coligan JE, Barin F, et al. Major
в течение 10 минут, после чего исследоваться Протоколом Национального комитета по устройствах. glycoprotein antigens that induce antibodies in
повторно в двух параллельных анализах. клиническим и лабораторным стандартам (NCCLS) AIDS patients are encoded by HTLV-III.
4. Не используйте набор реактивов по Science 1985; 228:1091-4.
Если по результатам обоих повторных исследований EP5-A216. Трехэтапный контроль качества истечении срока годности.
значения ИО окажутся <1,00, проба считается тестировался в двух независимых испытаниях в 11. Barin F, McLane MF, Allan JS, et al. Virus
течение 20 дней с использованием одной партии 5. Не смешивайте реактивы из разных партий envelope protein of HTLV-III represents major
отрицательной к антигену ВИЧ p24 и антителам реактивов.
ВИЧ-1/2. реактивов и единой калибровочной кривой. target antigen for antibodies in AIDS patients.
Значения погрешности приведены в таблице 6. Всегда держите упаковку с реактивами в Science 1985; 228:1094-6.
Если по результатам обоих повторных
исследований значения ИО окажутся ≥1,00, ниже. вертикальном положении, чтобы
предотвратить утечку микрочастиц до 12. Hunt JC, Johnson-Paepke J, Boardway K, et al.
проба считается повторно реактивной и В Discrimination between HIV-1 and HIV-2
положительной к антигену ВИЧ p24 или Межсе- В пределах использования.
пределах seropositive individuals using mouse
антителам ВИЧ-1/2, или положительной и к рийный коэффи- 7. Не рекомендуется использовать упаковку monoclonal antibodies directed to HIV
антигену, и к антителам. Средний серии, реактивов, вскрытую более 28 суток назад.
Проба коэффи- циента transmembrane proteins. AIDS Res Hum
Повторно реактивные пробы должны быть (COI) коэффи- 8. Не гарантируется точность результатов при Retroviruses 1990;6: 883-98.
циент вариации
подтверждены в соответствии с рекомендуемой циент несоблюдении инструкции по 13. Clavel F, Guyader M, Gutard D, et al. Molecular
вариации устройства использованию.
процедурой подтверждения, установленной вариации cloning and polymorphism of the human
регулирующими органами, например, 9. Все образцы и отходы лабораторной immune deficiency virus type 2. Nature 1986;
вестерн-блоттингом и анализом РНК на ВИЧ. Отрица- диагностики являются потенциально 324:691-5.
тельный 0,14 2,42% 3,44% 6,46% биологически опасными веществами.
Хранение образцов и отходов лабораторной 14. Allain J-P, Laurian Y, Paul DA, et al. Serological
Ограничение измерений контроль
диагностики должно осуществляться в markers in early stages of human
Результаты анализа конкретного образца на ВИЧ, Положи- immunodeficiency virus infection in
полученные с использованием тестов разных соответствии с локальными
тельный законодательными актами и инструкциями. haemophiliacs. Lancet 1986; 2(8518):1233-6.
производителей, могут отличаться ввиду 6,95 1,15% 2,98% 3,40%
различий методов анализа, калибраторов и контроль 10. Паспорт безопасной эксплуатации 15. Goudsmit J, De Wolf F, Paul DA, et al.
специфичности реактивов. 1 материалов (MSDS) предоставляются по Expression of human immunodeficiency virus
запросу. antigen (HIV-Ag) in serum and cerebrospinal
естовый набор для анализа на ВИЧ серии CL не Положи- fluid during acute and chronic infection. Lancet
всегда позволяет определить наличие тельный 1986; 2(8500):177-80.
5,95 1,18% 3,02% 3,66% Графические символы
инфицирования. Отрицательный результат контроль 16. CLSI. EP5-A2: Vol. 24, No. 25, Evaluation of
анализа не исключает вероятности контакта с 2 Precision Performance of Quantitative
вирусом или ВИЧ-инфицирования. Антитела к Measurement Method; Approved Guideline –
ВИЧ и (или) антиген p24 могут не Специфичность Second Edition.
обнаруживаться на некоторых стадиях инфекции Присутствие в образцах гемоглобина до
и при некоторых клинических состояниях. 500 мг/дл, билирубина до 20 мг/дл, © 2017 Shenzhen Mindray Bio-Medical Electronics
Отрицательный результат анализа не исключает триглицеридов до 3000 мг/дл, общего белка до Co., Ltd.
вероятность инфицирования ВИЧ. Образцы, 10 г/дл, ревматоидного фактора (РФ) до Все права защищены
взятые на самой ранней стадии (до 1500 МЕ/мл, антител к ДНК (ANA) до 400 Е/л или
сероконверсии) или на поздней стадии Производитель: Shenzhen Mindray Bio-Medical
человеческих антимышиных антител （HAMA） не
ВИЧ-инфекции, иногда могут демонстрировать Electronics Co., Ltd.
влияет на результаты анализа (критерий:
отрицательные результаты. Неизвестные степень извлечения в пределах ±10 % от Адрес: Mindray Building, Keji 12th Road South,
Библиография
варианты ВИЧ также могут демонстрировать первоначального значения). Hi-tech Industrial Park, Nanshan, Shenzhen,
отрицательные результаты. 1. Schochetman G, George JR, editors. AIDS 518057 P.R.China
Набор для анализа на ВИЧ Mindray был оценен на Testing: A Comprehensive Guide to Technical,
Как и в случае всех тестов, содержащих наличие потенциальных перекрестно-реактивных Medical, Social, Legal, and Management Issues. Адрес электронной почты:
моноклональные мышиные антитела, при веществ у людей с заболеваниями, не связанными 2nd ed. New York: NY Springer-Verlag; 1994. service@mindray.com.cn
анализе образцов, взятых у пациентов, с ВИЧ-инфекцией. Не менее 5 проб, содержащих 2. Barre-Sinoussi F, Chermann JC, Rey F, et al.
каждое из потенциально интерферирующих Тел.: +86-755-81888998
получавших моноклональные мышиные антитела Isolation of a T-lymphotropicretrovirus from a
веществ из числа следующих: вирус гепатита А, Факс: +86-755-26582680

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HIV
Antí
geno e anticorpos contra o
ví
rus da imunodeficiência
humana (CLIA)
Informações do pedido
Número de Tamanho de
catálogo embalagem
HIV111 2 ×50 testes
HIV112 2 ×100 testes
Uso pretendido
O ensaio de HIV série CL é um imunoensaio
quimioluminescente de determinação quantitativa
simultânea do antígeno p24 do HIV, e anticorpos
para HIV-1 e/ou HIV-2 no soro ou plasma humano.
Resumo
Vírus da imunodeficiência humana (HIV) éo agente
etiológico que causa a síndrome da
imunodeficiência adquirida (AIDS), que pertence ao
retrovírus, classificado na categoria de Lentiví
rus,
subgênero de imunodeficiência primata. O HIV é
transmitido por contato sexual, exposição ao
sangue ou hemoderivados, ou infecção pré-natal do
feto ou recém-nascido.1
Hádois tipos de ví rus de imunodeficiência humana,
HIV-1 e HIV-2, ambos compostos de vários subtipos
genéticos2, 3. Os subtipos prevalentes em áreas
diferentes podem variar. O HIV-1 éclassificado em
três grupos principais: Grupo M (principal), Grupo O
(secundário) e Grupo N (não M e não O). 4-6 Entre o
Grupo M do HIV-1 hánove subtipos (A, B, C, D, F, G,
H, J e K) e formas recombinantes circulantes (CRFs).
O HIV-1 é o ví rus do HIV mais amplamente
transmitido.4 O Grupo O e o Grupo N do HIV-1 foram
descobertos em Camarões, que são raros e
endêmicos somente no centro-oeste africano. No
entanto, as infecções do Grupo O foram
identificadas em outras áreas também. 5, 6 O HIV-2
éclassificado nos subtipos genéticos A-H, entre os
quais A e B são os subtipos mais endêmicos.7
Quando o HIV infecta seres humano, o sistema
imunológico do corpo humano responde gerando
uma variedade de anticorpos para as proteí nas do
vírus do HIV. Os anticorpos contra a proteí na de
membrana trans (TMP) do ví rus são os primeiros a
aparecer na soroconversão de pacientes infectados
por HIV. Além disso, a resposta anti-TMP continua
relativamente alta em todo o curso da doença.
Portanto, os anticorpos anti-TMP são bons alvos
para o ensaio de HIV.8-13 Além do anticorpo, a 4a
geração do ensaio de HIV também destina-se ao
antígeno p24 do HIV no soro ou plasma para a
duos recém-infectados.14, 15
identificação dos indiví
O ensaio de HIV da Mindray pertence à4 a geração
do ensaio de HIV que detecta anticorpos HIV-1
(inclusive o Grupo M e O) e HIV-2, bem como o
antígeno p24 do HIV antes da soroconversão,
diminuindo a janela de detecção e melhorando a
sensibilidade da detecção da infecção precoce
por HIV.
Princí
pios do ensaio
O ensaio de HIV série CL éum ensaio sanduí
che de
N/P: 046-003271-00 (8.0) Português-3
dois sites para determinar o ní
vel de antí
geno p24
do HIV e os anticorpos para HIV-1 e/ou HIV-2.
Na primeira etapa, a amostra, a solução de
tratamento de amostra, micropartí
culas
paramagnéticas revestidas com p24 mAb anti-HIV e
micropartículas revestidas com antí genos HIV-1 e
HIV-2 especí ficos são adicionados em um frasco de
reação. Após a incubação, o antí geno p24 do HIV na
amostra se liga especificamente ao anticorpo
monoclonal revestido com micropartí culas, enquanto
os anticorpos HIV-1 e HIV-2 na amostra se ligam às
micropartículas revestidas com antí geno HIV-1 ou
HIV-2. Depois, as micropartí culas são capturadas
magneticamente, enquanto outras substâncias não
vinculadas são removidas por lavagem.
Na segunda etapa, solução de diluente, anticorpo
monoclonal p24 com identificação ALP anti-HIV e
antígenos HIV-1 e HIV-2 com identificação ALP são
adicionados ao frasco de reação. Após a incubação,
o anticorpo monoclonal p24 com identificação ALP
anti-HIV e os antí genos HIV-1 e HIV-2 com
identificação ALP formarão um sanduí che com o
antígeno p24 do HIV ou o anticorpo HIV-1 ou HIV-2
capturado pela micropartí cula, respectivamente.
Depois, as micropartículas são capturadas
magneticamente, enquanto outras substâncias não
vinculadas são removidas por lavagem.
Na terceira etapa, a solução do substrato é
adicionada ao veí culo de reação. O substrato é
catalisado pelo ALP no complexo imunológico
capturado nas micropartículas. A reação
quimioluminescente resultante é medida como
unidades de luz relativa (RLUs) por um
fotomultiplicador embutido no sistema. Há uma
relação direta entre a quantidade de antígeno p24,
o anticorpo HIV-1 ou HIV-2 ou ambos na amostra e
as RLUs geradas durante a reação. A presença ou a
ausência de antígeno p24 do HIV e anticorpos HIV-1
ou HIV-2 na amostra é determinada pela
comparação do sinal de quimiluminescência da
reação ao sinal de corte determinado na calibração.
Um í ndice de corte (COI) é calculado por RLU da
amostra/RLU de ponto de corte.
Componentes reagentes
O kit de reagentes é composto por quatro
componentes: Ra, Rb, Rc e Rd. O componente não
pode ser trocado, e as informações detalhadas de
cada componente são listadas abaixo:
Micropartículas paramagnéticas
revestidas com antí genos especí
ficos
HIV-1/2 recombinantes (E. Coli.) e
Ra
anticorpo monoclonal p24 do HIV (IgG do
camundongo) no tampão HEPES com
conservante.
Antígenos especí ficos HIV-1/2
recombinantes com identificação ALP
Rb (E. Coli.) e anticorpo monoclonal p24 do
HIV (IgG do camundongo) no tampão
TRIS com conservante.
Diluentes de amostra no tampão TRIS
Rc
com conservante.
Bloqueadores no tampão TRIS com
Rd
conservante.
A posição de cada componente émostrada na figura
abaixo (vista frontal à esquerda e vista superior à
direita):
HIV Página 1 de 2
Armazenamento e estabilidade
O kit de reagentes de HIV não aberto permanece
estável por atéum ano inteiro quando armazenado
em temperaturas entre 2 °C e 8 °C. A data de
validade real estápresente no rótulo.
O kit de reagentes de HIV pode ser armazenado
onboard e usado por no máximo 28 dias após a
abertura em 2~8 °C.
Preparação do reagente
Ra: Pronto para usar
Rb: Pronto para usar
Rc: Pronto para usar
Rd: Pronto para usar
Materiais necessários, mas não
fornecidos
Analisador de Imunoensaio Quimioluminescente da
série CL da Mindray
Cat. N°HIV211: Calibradores de HIV, 1 × 2,0 mL
para cada ní vel de calibrador C0 e C1
Cat. N°HIVN311: Controle negativo de HIV Ag/Ab
3 × 2,0 mL
Cat. N°HIVN312: Controle negativo de HIV Ag/Ab
6 × 2,0 mL
Cat. N° HIVP311: Controle positivo de HIV Ag/Ab
12 × 2,0 mL
(Controle positivo de HIV Ag: 6 × 2,0 mL, controle
positivo de HIV Ab: 6 × 2,0 mL)
Cat. N° HIVP312: Controle positivo de HIV Ag/Ab
6 × 2,0 mL
(Controle positivo de HIV Ag: 3 × 2,0 mL, controle
positivo de HIV Ab: 3 × 2,0 mL)
Cat. N°CS511: Solução de substrato, 4 × 115 mL
Cat. N°WB411: Tampão de lavagem
Frasco de reação
Sistema do equipamento
Analisador de Imunoensaio Quimioluminescente da
série CL da Mindray
Coleta e preparação do espécime
Soro humano, plasma de heparina ou plasma de
citrato é adequado para o teste. O soro humano é
recomendado.
Os espécimes devem ser separados de coágulos ou
glóbulos vermelhos usando a centrifugação,
conforme recomendado pelo fabricante do tubo
após a conclusão da formação de coágulo. As
amostras devem ser testadas assim que possí vel,
após a coleta da amostra e o tratamento
pré-analí tico. Teste as amostras dentro de duas
horas após a centrifugação. Caso o teste não seja
concluí do em 12 horas, transfira o sobrenadante
para tubos para armazenamento. As amostras
deverão ser fechados e refrigerados a 2~8°C. Se os
testes forem ser atrasados por mais de 7 dias, as
amostras deverão ser congeladas a -20°C ou
abaixo.
Evite ciclos repetidos de congelação e
descongelação, o que pode causar deterioração da
amostra. A amostra pode ser usada depois de, no
máximo, cinco ciclos de congelamento e
descongelamento. As amostras anteriormente
congeladas devem ser misturadas bem e
cuidadosamente depois de descongeladas e
centrifugadas a 10000g por 10 minutos.
Não use a amostra com as seguintes condições:
 inativada por calor
 maciçamente hemolisada
 contaminação microbiana evidente
 fibrina ou outros resí
duos visí
veis
Procedimento do ensaio
Para obter o procedimento de ensaio ideal, os
operadores devem ler o manual de operação do
sistema relacionado com atenção, para obter
informações suficientes, como instruções de
operação, preservação e administração da amostra,
precauções de segurança e manutenção. Prepare
todos os materiais necessários para o ensaio
também.
Antes de carregar o kit de reagentes de HIV no
instrumento pela primeira vez, inverta o frasco
fechado do reagente suavemente por pelo menos
30 vezes para ressuspensão das micropartí culas,
que se acomodaram durante a remessa ou
armazenamento. Inspecione visualmente o frasco
para assegurar que as micropartí culas tenham sido
bem misturadas. Se as micropartículas
permanecerem coladas no frasco, continue
invertendo até que elas sejam totalmente
misturadas. Se não for possí vel homogeneizar as
micropartículas de novo, érecomendável não usar
esse frasco de reagente. Entre em contato com o
Serviço de Atendimento da Mindray para obter
ajuda. Não inverta o frasco do reagente aberto.
Este ensaio requer 100 μL de volume de amostra
para um único teste. Esse volume não inclui o
volume morto do contêiner da amostra. Um volume
adicional é necessário ao realizar mais testes da
mesma amostra. Os operadores devem consultar o
manual de operação do sistema e o requisito
específico do ensaio para determinar o volume
mínimo da amostra.
Calibração
As informações de calibração são armazenadas no
código de barras anexado no pacote de reagente e
calibrador. Ao realizar a calibração, verifique as
informações dos códigos de barras no sistema
primeiro, e depois teste os calibradores em dois
níveis. Énecessário calibrar antes de qualquer teste
de HIV. A recalibração é recomendável a cada 4
semanas ou quando um novo lote de reagente é
usado, ou os controles de qualidade estão fora do
intervalo especificado. Para obter instruções
detalhadas de calibração, consulte o manual de
operação do sistema.
Controle
Para verificar a confiabilidade do sistema do ensaio,
os controles de qualidade devem ser executados
pelo menos uma vez a cada 24 horas, após o
carregamento de um novo pacote de reagente ou
depois de cada calibração. Dois controles para este
ensaio são o Controle negativo de HIV e o Controle
positivo de HIV da Mindray.
2020-04
Os resultados do controle de qualidade devem estar Assim como em todos os testes contendo anticorpos
dentro dos intervalos aceitáveis. Se um controle monoclonais de camundongos, resultados
estiver fora do intervalo especificado, os resultados anômalos podem ser obtidos de espécimes obtidos
do teste associado serão inválidos e as amostras de pacientes que receberam anticorpos
precisarão ser retestadas. Talvez seja necessário monoclonais de camundongos para diagnóstico ou
recalibrar. Consulte o manual de operaç ão do sistema terapia em casos raros.
para verificar o sistema. Se os resultados do controle Os resultados do ensaio devem ser usados em
de qualidade ainda estiverem fora do intervalo conjunto com outros dados, como sintomas,
especificado, entre em contato com o Serviço de resultados de outros testes, histórico clí
nico etc.
Atendimento da Mindray para obter ajuda. para tomar decisões clí nicas. A presença de
antígeno de HIV ou anticorpos de HIV não é um
Cálculo diagnóstico para AIDS.
O analisador série CL calcula a média dos sinais de
RLU de ambos os calibradores C1 e C0. Caracterí
sticas de desempenho
O analisador série CL calcula o resultado de HIV com
base na proporção de RLU de amostra para RLU de Sensibilid.
corte (índice de corte, COI) de cada espécime e A sensibilidade para p24 de HIV no ponto de corte é
controle.
<2 IU/mL. A precisão da medição érastreável para
RLU de corte = [(RLU média de C1 - RLU média de o padrão internacional de antígeno p24 de HIV da
C0) x Coeficiente de calibração] + RLU média de C0 OMS (código NIBSC: 90/636).
O coeficiente de calibração é especí fico para cada 505 amostras foram clinicamente diagnosticadas
lote de reagente e calibrador. com infecção por HIV e classificadas como status da
COI = RLU de amostra/RLU de corte doença. Dentre elas, cinco amostras são positivas
para o anticorpo HIV-O, 30 são positivas para o
Diluição do espécime anticorpo HIV-2 e 23 são positivas para o antígeno
Os espécimes não podem ser diluí
dos para o ensaio p24 de HIV. O ensaio de HIV no sistema Mindray
de HIV da Mindray. CL-2000i detectou 505 amostras como positivas,
com a taxa de coincidência positiva em 100%.
Interpretação dos resultados
As amostras com COI<1,00 são não reativas no Precisão
ensaio de HIV da Mindray. Essas amostras são O ensaio de HIV série CL foi projetado para ter uma
considerados negativas para HIV, e não precisam de precisão de ≤10% (dentro do CV do dispositivo). A
mais testes. precisão foi determinada de acordo com o Comitê
Amostras com um COI I≥1,00 são consideradas Nacional para Normas de Laboratórios Clí nicos
inicialmente reativas. (NCCLS), Protocolo EP5-A214. Três ní veis de
controles de qualidade foram testados em duplicata
Todas as amostras inicialmente reativas devem ser
em duas execuções separadas por dia, em um total
transferidas para um tubo de centrí fuga e
de 20 dias, usando um único lote de reagentes e
centrifugadas a ≥10.000 RCF (força centrífuga relativa)
uma única curva de calibração. Os dados de
por 10 minutos e, em seguida, testadas em duplicata.
precisão estão resumidos na tabela abaixo.
Se COI for <1,00 em ambos os retestes, essa
amostra seráconsiderada negativa para o antí geno Entre o
Média CV na CV no
p24 de HIV e os anticorpos HIV-1/2. Amostra CV da
(COI) série dispositivo
execução
Se COI for ≥ 1,00 em um dos retestes, a amostra será
considerada como várias vezes reativa, e será Controle
positiva para o antígeno p24 de HIV ou anticorpos 0,14 2,42% 3,44% 6,46%
negativo
HIV-1/2, ou positiva para o antí
geno e os anticorpos.
Controle
As amostras várias vezes reativas devem ser 6,95 1,15% 2,98% 3,40%
positivo 1
confirmadas de acordo com o procedimento
recomendado pela entidade reguladora, como Controle
5,95 1,18% 3,02% 3,66%
testes de Western Blot e RNA de HIV. positivo 2
Limitação de medida Especificidade Specificity
O resultado de HIV em uma determinada amostra Espécime marcada com hemoglobina até
pode variar, dependendo dos ensaios de fabricantes 500 mg/dL, bilirrubina até 20 mg/dL, triglicerí deos
diferentes, devido às diferenças nos métodos do até 3.000 mg/dL, proteí na total até 10 g/dL, fator
ensaio, calibração e especificidade do reagente. reumatoide (RF) até 1.500 IU/mL, anticorpo
O ensaio de HIV série CL pode não detectar todos os anti-DNA (ANA) até 400 U/L e anticorpo humano
indivíduos infectados. Um resultado de teste não anticamundongo (HAMA) não mostra resultados
reagente não exclui a possibilidade de exposição ou alterados (critério: recuperação dentro de ± 10% do valor
infecção com HIV. Anticorpos de HIV e/ou antí geno inicial).
p24 podem não ser detectáveis em alguns estágios O Kit de HIV da Mindray foi avaliado quanto a
da infecção e em algumas condições clí nicas. Um possí veis substâncias com reação cruzada em
resultado de teste não reagente não elimina
indivíduos com condições médicas não relacionadas
completamente a possibilidade de uma infecção
àinfecção por HIV. Pelo menos 5 amostras contendo
com HIV. Os espécimes da fase muito precoce
cada uma das substâncias possivelmente
(pré-soroconversão) ou da fase tardia da infecção interferentes das seguintes (HAV, Anti-HBs, HCV,
por HIV podem ocasionalmente gerar resultados HEV, HGV, Anti-HTLV-I/II, HBsAg, TP, EBV, RV, CMV,
não reagentes. Variantes desconhecidas do HIV HSV-1, Toxo, rodela, E.coli, Yeast e Lentiví
rus) são
também podem levar a um resultado não reagente.
testadas pelo kit de HIV da Mindray e um kit de
N/P: 046-003271-00 (8.0) Português-3 HIV Página 2 de 2
reagentes de referência. Todos os resultados são
consistentes entre o ensaio da Mindray e o ensaio de
referência.
1021 amostras foram consideradas negativas por
métodos de referência. O ensaio de HIV no sistema
Mindray CL-2000i detectou 1019 amostras como
negativas, enquanto 2 amostras foram
consideradas positivas, com uma especificidade
diagnóstica de 99,8%.
Avisos e precauções
1. Apenas para diagnóstico in vitro.
2. Siga todas as regras ao manusear reagentes de
laboratório e adote as precauções de
segurança necessárias.
3. Devido às diferenças na metodologia e
especificidade do anticorpo, os resultados de
teste da mesma amostra podem ser diferentes
durante o uso de kits de reagentes de
fabricantes diferentes no sistema da Mindray
ou com o uso de kits de reagentes da Mindray
em outros sistemas.
4. Não use kits de reagentes com a data de
expiração vencida.
5. Não use reagentes misturados de lotes
diferentes.
6. Sempre mantenha o pacote de reagente na
posição vertical para assegurar que nenhuma
micropartí cula seja perdida antes do uso.
7. Não érecomendável usar o pacote de reagente
aberto a mais de 28 dias.
8. A confiabilidade dos resultados do ensaio não
poderá ser garantida se as instruções no
encarte deste pacote não forem seguidas.
9. Todos os espécimes e dejetos de reação devem
ser considerados potencialmente perigosos. As
amostras e os dejetos de reação devem ser
manuseados de acordo com os regulamentos e
diretrizes locais.
10. A folha de dados de segurança de material
(MSDS) estádisponí vel mediante solicitação.
Sí
mbolos Gráficos
Bibliografia
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Precision Performance of Quantitative
Measurement Method; Approved Guideline –
Second Edition.
© 2017 Shenzhen Mindray Bio-Medical Electronics
Co., Ltd.
Todos os direitos reservados
Fabricante: Shenzhen Mindray Bio-Medical
Electronics Co., Ltd.
Endereço: Mindray building, Keji 12th Road South,
Hi-tech Industrial Park, Nanshan, Shenzhen,
518057 P.R.China
Endereço de e-mail: service@mindray.com.cn
Tel: +86-755-81888998
Fax: +86-755-26582680
2020-04

VIH
Antígeno y anticuerpos para el
Virus de Inmunodeficiencia
Humana (CLIA)
Información para pedidos
N.ºde catálogo Tamaño del paquete
HIV111 2 ×50 análisis
HIV112 2 ×100 análisis
Uso previsto
La prueba para la detección del VIH de la serie CL es
un inmunoensayo de quimioluminiescencia para la
determinación cuantitativa simultánea del antí geno
p24 del VIH y los anticuerpos del VIH-1 o VIH-2 en
suero o plasma humano.
Resumen
El Virus de Inmunodeficiencia Humana (VIH) es el
agente etiológico causante del sí ndrome de
inmunodeficiencia adquirida (SIDA), que pertenece
a los retrovirus, clasificados en la categorí a de
Lentivirus, subgénero de inmunodeficiencia en
primates. El VIH se transmite por contacto sexual,
por exposición a la sangre o productos sanguíneos o
por infección prenatal de un feto o recién nacido 1.
Existen dos tipos de virus de inmunodeficiencia
humana, el VIH-1 y el VIH-2, los dos compuestos por
múltiples subtipos genéticos2, 3. Los subtipos
prevalentes en diferentes áreas podrí an variar. El VIH-1
estáclasificado en tres grupos principales: El Grupo M
(principal), el Grupo O (atí pico) y el Grupo N (el que no
es ni M ni O) 4-6. En el Grupo M del VIH-1 existen nueve
subtipos (A, B, C, D, F, G, H, J y K) y formas circulantes
recombinadas (o CRF por sus siglas en inglés). El VIH
de trasmisión más amplia es el VIH-14. Los VIH-1 del
Grupo O y Grupo N se descubrieron en Camerún, son
raros y endémicos solo de la región del África Central
Occidental. Sin embargo, se han identificado
infecciones del Grupo O también en otras áreas5, 6. El
VIH-2 estáclasificado en subtipos genéticos A-H, entre
los cuales, A y B son los subtipos más endémicos7.
Cuando el VIH infecta a un ser humano, el sistema
inmunológico del organismo responderá con la
generación de una variedad de anticuerpos a las
proteí nas del virus. Los anticuerpos contra la proteí
na
transmembranaria (TMP, por sus siglas en inglés) del
virus están entre los primeros en aparecer en la
seroconversión de individuos infectados con el VIH.
Además, la respuesta antiTMP sigue siendo
relativamente fuerte durante el transcurso de la
enfermedad. Por tanto, los anticuerpos antiTMP son
buenos blancos para la prueba de detección del VIH8-13.
Además de los anticuerpos, las pruebas del VIH de
cuarta generación también buscan el antí geno p24 del
VIH en suero o plasma para la identificación de
individuos infectados recientemente14, 15.
La prueba de detección del VIH de Mindray pertenece a
las pruebas de cuarta generación que detectan tanto
anticuerpos del VIH-1 (incluidos los de los grupos M y O)
como del VIH-2, así como el antígeno p24 del VIH antes
de la seroconversión, con lo que se hace más breve el
tiempo de detección y se mejora la sensibilidad para la
detección de la infección del VIH en etapas tempranas.
Principios de la prueba
P/N: 046-003271-00 (8.0) Español-4
La prueba para la detección del VIH de la serie CL es
una prueba tipo sándwich de dos partes, para
determinar el nivel del antígeno p24 del VIH y los
anticuerpos del VIH-1 o VIH-2.
En el primer paso, se agregan a un vaso de reacción,
la muestra, la solución de tratamiento de la muestra,
micropartí culas paramagnéticas recubiertas con
anticuerpos monoclonales p24 antiVIH de ratón,
y micropartí culas recubiertas con antígenos
especí ficos del VIH-1 y VIH-2. Tras el periodo de
incubación, el antígeno p24 del VIH en la muestra se
uniráespecí ficamente a los anticuerpos monoclonales
con los que están recubiertas las micropartí culas, en
tanto que los anticuerpos del VIH-1 y VIH-2 en la
muestra se fijarán a las micropartí culas recubiertas
con los antí genos del VIH-1 o VIH-2. Después, las
micropartí culas se capturan magnéticamente y las
sustancias sin unir se eliminan por lavado.
En el segundo paso, se agregan al vaso de reacción
una solución diluyente, anticuerpos monoclonales
p24 antiVIH etiquetados con fosfatasa alcalina
(ALP), y antígenos del VIH-1 y VIH-2 etiquetados
con ALP. Después de la incubación, los anticuerpos
monoclonales p24 antiVIH etiquetados con ALP y los
antígenos del VIH-1 y VIH-2 etiquetados con ALP
formarán un sándwich con el antí geno p24 del VIH
capturado en las micropartí culas, anticuerpos del
VIH-1 o VIH-2 respectivamente. Después, las
micropartículas se capturan magnéticamente y las
sustancias sin unir se eliminan por lavado.
En el tercer paso, la solución de substrato se agrega
al vaso de reacción. El substrato se cataliza con ALP
en el complejo inmunológico capturado en las
micropartí culas. La reacción quimioluminiscente
resultante se mide en unidades de luz relativas (RLU)
con el fotomultiplicador integrado en el sistema.
Existe una relación directa entre la cantidad de
antígenos p24 y los anticuerpos del VIH-1 o VIH-2 o
ambos en la muestra y las unidades de luz relativa
(RLU) generadas durante la reacción. La presencia o
ausencia de antí genos p24 del VIH, anticuerpos del
VIH-1 o VIH-2 en la muestra se determina
comparando la señal quimioluminiscente de la
reacción con la señal de corte determinada a partir
de la calibración. El í
ndice de corte (COI) se calcula
mediante el RLU de la muestra/RLU de corte.
Componentes reactivos
El kit de reactivos está formado por cuatro
componentes: Ra, Rb, Rc y Rd. Los componentes no
pueden intercambiarse, y la información detallada
de cada componente se lista a continuación:
Micropartículas paramagnéticas recubiertas
con antígenos recombinados especí ficos del
Ra VIH-1 o 2 (E. Coli.) y anticuerpos
monoclonales p24 del VIH (con IgG de
ratón) en búfer HEPES con conservador.
Antígenos recombinados especí ficos del
VIH-1 o 2 etiquetados con ALP (E. Coli.) y
Rb anticuerpos monoclonales p24 del VIH (con
IgG de ratón) en búfer TRIS con
conservador.
Diluyentes de muestra en búfer TRIS con
Rc
conservador.
Bloqueadores en búfer TRIS con
Rd
conservador.
La posición de cada componente se muestra en la
siguiente figura (vista delantera a la izquierda y
vista superior a la derecha):
VIH Página 1 de 2
Almacenamiento y estabilidad
El kit de reactivo del VIH sin abrir se mantiene estable
hasta por un año cuando se almacena a entre 2 y 8 °C.
La fecha de vencimiento se indica en la etiqueta.
El kit de reactivo del VIH (CLIA) se puede almacenar
a entre 2 y 8 °C en el analizador y usarse hasta un
máximo de 28 dí as después de abierto.
Preparación del reactivo
Ra: Listo para usar
Rb: Listo para usar
Rc: Listo para usar
Rd: Listo para usar
Materiales necesarios, pero no
suministrados
Analizador para inmunoensayo de
quimioluminiscencia serie CL de Mindray
N.º Cat. HIV211: Calibradores del VIH, 1 de 2 ml
para cada nivel de calibrador C0 y C1
N.º Cat. HIVN311: Control negativo de Ag/Ab del
VIH, 3 de 2 ml
N.º Cat. HIVN312: Control negativo de Ag/Ab del
VIH, 6 de 2 ml
N.ºCat. HIVP311: Control positivo de Ag/Ab del VIH,
12 de 2 ml
(Control positivo de Ag del VIH: 6 de 2 ml, Control
positivo de Ab del VIH: 6 de 2 ml)
N.ºCat. HIVP312: Control positivo de Ag/Ab del VIH,
6 de 2 ml
(Control positivo de Ag del VIH: 3 de 2 ml, Control
positivo de Ab del VIH: 3 de 2 ml)
N.ºCat. CS511: Solución de substrato, 4 de 115 ml
N.ºCat. WB411: Búfer de lavado
Vaso de reacción
Sistema del instrumento
Analizador para inmunoensayo de quimioluminiscencia
serie CL de Mindray
Preparación y obtención de muestras
Suero humano, plasma en heparina o plasma en
citrato son adecuados para el análisis. Se
recomienda utilizar suero humano.
Las muestras se deben separar de los coágulos o
glóbulos rojos mediante centrifugación según las
recomendaciones del fabricante del tubo después
de que se complete la formación de coágulos.
Las muestras se deben analizar con la mayor brevedad
posible después de su obtención y tratamiento
preanalí tico. Realice el análisis de las muestras dentro
de las dos horas posteriores al centrifugado. Si el
análisis no se completa en un lapso de 12 horas,
transfiera el sobrenadante a tubos para su
almacenamiento. Las muestras deberán cerrarse
perfectamente y refrigerarse a entre 2 y 8 °C. Si el
análisis se retrasa durante más de 7 dí as, las muestras
deben congelarse a -20 °C o a una temperatura inferior.
Evite ciclos repetidos de congelación y descongelación
que puedan causar el deterioro de la muestra. La
muestra se puede usar después de un máximo de
cinco ciclos de congelación y descongelación. Las
muestras previamente congeladas deben mezclarse
con suavidad y por completo después de
descongelarse, y deben centrifugarse a 10,000 g
durante 10 minutos.
No utilice muestras en las siguientes condiciones:
 inactivadas con calor
 muy hemolizadas
 con contaminación microbiana evidente
 Con fibrinas u otros restos visibles
Procedimiento de la prueba
Para obtener resultados óptimos con esta prueba, los
operadores deben leer detenidamente el manual de
funcionamiento del sistema para informarse bien
sobre las instrucciones de funcionamiento, el control
y la conservación de las muestras, las precauciones
de seguridad y el mantenimiento. Prepare también
todos los materiales necesarios para el ensayo.
Antes de introducir el kit de reactivo del VIH en el
instrumento por primera vez, el frasco de reactivo sin
abrir debe ponerse boca abajo suavemente al menos
30 veces para volver a suspender las micropartí culas
que se hayan asentado durante el enví o o
almacenamiento. Inspeccione visualmente el frasco
para confirmar que las micropartí culas se han
mezclado bien. Si las micropartí culas permanecen
adheridas al frasco, siga poniéndolo boca abajo hasta
que se mezclen por completo. Si las micropartí culas
no se pueden homogeneizar, se recomienda no usar
ese frasco de reactivo. Póngase en contacto con el
servicio de atención al cliente de Mindray. No ponga
boca abajo los frascos de reactivo abiertos.
Para esta prueba se necesita una muestra con un
volumen de 100 μl para un solo análisis. Este
volumen no incluye el volumen muerto del
contenedor de la muestra. Si se realizan más análisis
de la misma muestra, se necesita un volumen
adicional. Los operadores deben consultar el manual
de funcionamiento del sistema y el requisito
específico del ensayo para determinar el volumen
mínimo de muestra.
Calibración
La información de calibración se almacena en el
código de barras adjunto en el reactivo y el paquete
calibrador. Para realizar la calibración, primero
escanee la información del código de barras en el
sistema y, a continuación, pruebe los calibradores
en dos niveles. Debe realizarse una calibración
antes de hacer cualquier análisis del VIH. Se
recomienda repetir la calibración cada 4 semanas,
cuando se use un nuevo lote de reactivos o cuando
los controles de calidad no se ajusten a los
intervalos de valores especificados. Para obtener
instrucciones detalladas de la calibración, consulte
el manual de funcionamiento del sistema.
Control
Para confirmar la confiabilidad del sistema de
prueba, se deben realizar controles de calidad al
menos una vez cada 24 horas, cuando se cargue un
nuevo paquete de reactivos o después de cada
calibración. Los dos controles para esta prueba son
el Control Negativo del VIH y el Control Positivo del
VIH de Mindray.
Los resultados de los controles de calidad deben
ajustarse a los intervalos admisibles. Si un control
no se ajusta a su intervalo especificado, los
resultados del análisis correspondiente no serán
válidos y las muestras deberán volver a analizarse.
2020-04
Podría ser necesario repetir la calibración. Consulte
el manual de funcionamiento del sistema para llevar
a cabo una revisión de sistema. Si los resultados de
los controles de calidad siguen sin ajustarse a los
intervalos especificados, póngase en contacto con el
servicio de atención al cliente de Mindray.
Cálculo
El analizador serie CL calcula la media de las señales
RLU tanto del calibrador C1 como del C0.
El analizador serie CL calcula el resultado del VIH a
partir de la proporción de RLU de la muestra con la
RLU de corte (Í ndice de corte, COI) por cada
muestra y control.
RLU de corte = [(Media de RLU de C1 – Media de
RLU de C0) x Coeficiente de calibración] + Media de
RLU de C0
El Coeficiente de calibración es especí fico para cada
reactivo y lote del calibrador.
COI = RLU de muestra/RLU de corte
Dilución de la muestra
Las muestras no se pueden diluir para la prueba del
VIH de Mindray.
Interpretación de los resultados
Las muestras con un COI<1 se consideran no
reactivas en la prueba del VIH de Mindray. Estas
muestras se consideran negativas para el VIH, y no
se requiere la realización de más análisis.
Las muestras con un COI I≥1 se consideran
inicialmente reactivas.
Todas las muestras inicialmente reactivas deben
transferirse a un tubo de centrifugado y
centrifugarse a ≥10,000 RCF (fuerza centrífuga
relativa) durante 10 minutos, y luego volver a
analizarse dos veces.
Si el COI es de <1 en ambos análisis, esta muestra
se considera negativa para el antí
geno p24 del VIH y
anticuerpos del VIH-1 o 2.
Si el COI es de ≥ 1 en cualquiera de los análisis, la
muestra se considera como repetidamente reactiva
y es positiva ya sea para el antígeno p24 del VIH,
para los anticuerpos del VIH-1 o 2, o ambos.
Las muestras repetidamente reactivas deben
confirmarse de acuerdo con el procedimiento de
confirmación recomendado por la autoridad
regulatoria, como los análisis Western Blot y de ARN
del VIH.
Lí
mite de la medición
El resultado del VIH de una muestra concreta puede
variar según las pruebas de los distintos fabricantes,
debido a las diferencias en los métodos de ensayo,
la calibración y la especificidad de los reactivos.
Es posible que la prueba del VIH de la serie CL no
detecte a todos los individuos infectados. Un
resultado negativo en la prueba no excluye la
posibilidad de infección con el VIH o exposición a
este virus. Los anticuerpos del VIH o el antígeno p24
pueden ser indetectables en algunas etapas de la
infección y en algunas afecciones clí nicas. Un
resultado negativo en la prueba no excluye por
completo la posibilidad de una infección con VIH. En
algunas ocasiones, las muestras de la fase muy
temprana (previa a la seroconversión) o de la fase
final de la infección del VIH pueden producir
hallazgos negativos. Sin embargo, la presencia de
variantes desconocidas del VIH también puede dar
lugar a un resultado negativo.
Al igual que en todas las pruebas que contienen
P/N: 046-003271-00 (8.0) Español-4
anticuerpos monoclonales de ratón, en casos
excepcionales, se podrí an obtener resultados
anómalos de muestras de pacientes que recibieron
anticuerpos monoclonales de ratón para diagnóstico
o tratamiento.
Los resultados de las pruebas deberán usarse junto
con otros datos, como sí ntomas, resultados de otros
análisis, historia clí
nica, etc. para tomar decisiones
clí
nicas.
La presencia del antí geno del VIH o de anticuerpos
contra el VIH no es un diagnóstico de SIDA.
Caracterí
sticas de rendimiento
Sensibilidad
La sensibilidad al p24 del VIH en el corte es de
<2 IU/ml. La precisión de la medición es trazable
conforme al estándar internacional de la OMS para
el antí
geno p24 del VIH (código de la NIBSC:
90/636).
Se han diagnosticado clí nicamente 505 muestras
con infección del VIH y se han clasificado con el
estado de enfermedad. Entre ellas, cinco muestras
resultaron positivas con anticuerpos del VIH-O,
30 resultaron positivas con anticuerpos del VIH-2,
y 23 fueron positivas con el antí geno p24 del VIH.
La prueba del VIH en el sistema CL-2000i de
Mindray detectó505 muestras como positivas, con
un índice de coincidencia positiva del 100 %.
Precisión
La prueba del VIH de la serie CL estádiseñada para
una precisión de ≤10 % (conforme al CV del
dispositivo). La precisión se determinósiguiendo los
estándares del protocolo EP5-A2 del National
Committee for Clinical Laboratory Standards
(NCCLS)16. Se probaron tres niveles de controles de
calidad en duplicado en dos series independientes
por día, durante un total de 20 dí as, usando solo un
lote de reactivo y una curva de calibración. Los
datos de precisión se resumen en la siguiente tabla.
Dentro de
Entre la Dentro del
Promedio la
Muestra ejecución CV del
(COI) ejecución
del CV dispositivo
del CV
Control
0.14 2.42 % 3.44% 6.46%
negativo
Control
6.95 1.15% 2.98% 3.40%
positivo 1
Control
5.95 1.18% 3.02% 3.66%
positivo 2
Especificidad
Las muestras enriquecidas con hemoglobina de
hasta 500 mg/dl, bilirrubina de hasta 20 mg/dl,
triglicéridos de hasta 3000 mg/dl, proteí
na total de
hasta 10 g/dl, factor reumatoideo (FR) de hasta
1500 IU/ml, anticuerpos anti-ADN (ANA) de hasta
400 U/L, o los anticuerpos humanos antiratón
（HAMA） muestran resultados invariables (criterio:
recuperación dentro de ± 10 % del valor inicial).
El kit del VIH de Mindray se evaluó en busca de
sustancias que pudiera causar una reactividad
cruzada potencial, con individuos con problemas
médicos no relacionados con la infección del VIH. Se
probaron, al menos cinco muestras con el kit para
detección del VIH de Mindray y un reactivo de
referencia, cada una de las cuales contení a las
VIH Página 2 de 2
siguientes sustancias con posibilidad de causar
interferencia: HAV, antiHBs, HCV, HEV, HGV,
antiHTLV-I/II, HBsAg, TP, EBV, RV, CMV, HSV-1,
Toxo, Rubella, E.coli, Levaduras, y Lentivirus. Todos
los resultados entre la prueba de Mindray y la
prueba de referencia fueron coherentes.
1021 muestras han resultado negativas siguiendo
los métodos de referencia. La prueba del VIH en el
sistema CL-2000i de Mindray detectó 1019
muestras como negativas, en tanto que 2 muestras
resultaron positivas, con una especificidad de
diagnóstico del 99.8 %.
Advertencias y precauciones
1. Exclusivo para uso diagnóstico in vitro.
2. Siga todas las reglas para manipular los
reactivos de laboratorio y tome todas las
precauciones de seguridad necesarias.
3. Debido a las diferencias de metodologí a y la
especificidad de los anticuerpos, los resultados
de los ensayos de la misma muestra pueden
ser diferentes si se usan kits de reactivos de
otros fabricantes en el sistema Mindray o si se
usan kits de reactivos Mindray en otros
sistemas.
4. No use kits de reactivos con la fecha de
caducidad vencida.
5. No use reactivos mezclados de distintos lotes.
6. Mantenga el paquete de reactivos siempre en
posición vertical para garantizar que no se
pierdan micropartí culas antes de su uso.
7. No se recomienda usar paquetes de reactivos
abiertos más de 28 dí as.
8. La fiabilidad de los resultados del ensayo no se
puede garantizar si no se siguen las
instrucciones de este prospecto.
9. Los residuos de las reacciones y las muestras
deben tratarse como riesgos biológicos
potenciales. Las muestras y los residuos de las
reacciones deben manejarse conforme a las
normativas y directrices locales.
10. La hoja de datos de seguridad de los materiales
(MSDS) estádisponible previa solicitud.
Sí
mbolos gráficos
Bibliografí
a Fabricante:
1. Schochetman G, George JR, editors. AIDS
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type 2: evidence for distinct sequence
subtypes with differences in virus biology.
J Virology 1994; 68:7433-47.
9. Sarngadharan MG, Popovic M, Bruch L, et al.
Antibodies reactive with human T-lymphotropic
retroviruses (HTLV-III) in the serum of patients
with AIDS. Science 1984; 224:506-8.
10. Allan JS, Coligan JE, Barin F, et al. Major
glycoprotein antigens that induce antibodies in
AIDS patients are encoded by HTLV-III.
Science 1985; 228:1091-4.
11. Barin F, McLane MF, Allan JS, et al. Virus
envelope protein of HTLV-III represents major
target antigen for antibodies in AIDS patients.
Science 1985; 228:1094-6.
12. Hunt JC, Johnson-Paepke J, Boardway K, et al.
Discrimination between HIV-1 and HIV-2
seropositive individuals using mouse
monoclonal antibodies directed to HIV
transmembrane proteins. AIDS Res Hum
Retroviruses 1990;6: 883-98.
13. Clavel F, Guyader M, Gutard D, et al. Molecular
cloning and polymorphism of the human
immune deficiency virus type 2. Nature 1986;
324:691-5.
14. Allain J-P, Laurian Y, Paul DA, et al. Serological
markers in early stages of human
immunodeficiency virus infection in
haemophiliacs. Lancet 1986; 2(8518):1233-6.
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Expression of human immunodeficiency virus
antigen (HIV-Ag) in serum and cerebrospinal
fluid during acute and chronic infection. Lancet
1986; 2(8500):177-80.
16. CLSI. EP5-A2: Vol. 24, No. 25, Evaluation of
Precision Performance of Quantitative
Measurement Method; Approved Guideline –
Segunda edición.
© 2017 Shenzhen Mindray Bio-Medical Electronics
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Todos los derechos reservados
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Hi-tech Industrial Park, Nanshan, Shenzhen,
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Tel: +86-755-81888998
Fax: +86-755-26582680
2020-04

HIV
Antigene e anticorpi per il virus
dell'immunodeficienza umana
(CLIA)
Informazioni per gli ordini
Numero di catalogo Dimensione della
confezione
HIV111 2×50 test
HIV112 2×100 test
Uso designato
Il dosaggio per l’HIV della serie CL è immunodosaggio
chemiluminescente per la determinazione simultanea
qualitativa dell'antigene p24 dell'HIV e degli anticorpi
anti-HIV-1 e/o HIV-2 nel siero o nel plasma umano.
Riepilogo
Il virus dell'immunodeficienza umana (HIV) è
l'agente eziologico che causa la sindrome
dell'immunodeficienza acquisita (AIDS); appartiene
ai retrovirus, classificato nella categoria dei
lentivirus, sottogenere dell’immunodeficienza nei
primati. L'infezione da HIV ètrasmessa per contatto
sessuale, l'esposizione a sangue o emoderivati, o da
infezione prenatale di un feto o un neonato 1.
Esistono due tipi di virus dell'immunodeficienza
umana, l'infezione da HIV-1 e HIV-2, entrambe
composte da più sottotipi genetici2, 3. I sottotipi
prevalenti in aree diverse possono variare. HIV-1
viene classificato in tre gruppi principali: Gruppo M
(major), gruppo O (outlier) e il gruppo N (Non-M e
Non-O)4-6. All’interno del gruppo M di HIV-1
esistono nove sottotipi (A, B, C, D, F, G, H, J e K) e
forme circolanti ricombinanti (CRF). HIV-1 èil virus
HIV più ampiamente trasmesso4. Il gruppo O e il
gruppo N di HIV-1 sono stati scoperti in Cameron,
sono rari ed endemici esclusivamente nell’Africa
centro-occidentale. Tuttavia, le infezioni del gruppo
O sono state individuate anche in altre aree5, 6.
l'HIV-2 viene classificato nei sottotipi genetici A-H,
in cui A e B sono i sottotipi piùendemici7.
Quando l’HIV infetta un essere umano, il sistema
immunitario dell’organismo risponde, generando
numerosi anticorpi per contrastare le proteine del virus
dell’HIV. Gli anticorpi contro la proteina
trans-membrana (TMP) del virus sono tra i primi a
comparire alla sieroconversione degli individui infettati
con HIV. Inoltre, la risposta anti-TMP rimane
relativamente alta durante tutto il corso della malattia.
Pertanto, gli anticorpi anti-TMP sono buoni bersagli per
il dosaggio per l’HIV8-13. In aggiunta all'anticorpo, il
dosaggio di quarta generazione mira inoltre
all’antigene p24 nel siero o nel plasma per
l'identificazione degli individui infettati di recente14, 15.
Il dosaggio per HIV Mindray appartiene alla quarta
generazione di dosaggi per HIV che rilevano sia gli
anticorpi anti-HIV-1 (Gruppo M e O inclusi) che
quelli anti-HIV-2, nonché l’antigene p24 dell’HIV
prima della sieroconversione, abbreviando cosìla
finestra di rilevazione e migliorando la sensibilitàdi
rilevazione dell'infezione da HIV precoce.
Principi del dosaggio
Il dosaggio per HIV della serie CL è un dosaggio a
P/N: 046-003271-00 (8.0) Italiano-5
sandwich a due siti per determinare il livello
dell’antigene p24 dell’HIV e degli anticorpi
anti-HIV-1 e/o anti-HIV-2.
Nella prima fase, il campione, la soluzione per il
trattamento dei campioni, le microparticelle
paramagnetiche rivestite con anti-HIV p24 mAB di
topo e microparticelle rivestite con antigeni
anti-HIV-1 e anti-HIV-2 specifici sono aggiunti in un
contenitore di reazione. Dopo l'incubazione,
l’antigene p24 dell’HIV nel campione si legherà in
maniera specifica all’anticorpo monoclonale
rivestito con microparticelle, mentre gli anticorpi
anti-HIV-1 e anti-HIV-2 nel campione si legheranno
alle microparticelle rivestite di antigene anti-HIV-1
o anti-HIV-2. Dopo, le microparticelle sono
catturate magneticamente, mentre le altre sostanze
non legate sono rimosse mediante lavaggio.
Nella seconda fase, la soluzione diluente, l’anticorpo
monoclonale p24 anti-HIV marcato ALP e gli antigeni
anti-HIV-1 e anti-HIV-2 marcati ALP vengono aggiunti
al contenitore di reazione. Dopo un periodo di
incubazione, l’anticorpo monoclonale p24 anti-HIV
marcato ALP, gli antigeni anti-HIV-1 e anti-HIV-2
marcati ALP formano il sandwich rispettivamente con
l’antigene p24 dell’HIV catturato nelle microparticelle,
l’anticorpo anti-HIV-1 o anti-HIV-2. Dopo, le
microparticelle sono catturate magneticamente,
mentre le altre sostanze non legate sono rimosse
mediante lavaggio.
Nella terza fase, nel contenitore di reazione viene
aggiunta la soluzione substrato. Il substrato è
catalizzato dall’ALP nel complesso immunitario
catturato sulle microparticelle; la reazione
chemiluminescente risultante viene misurata in unità
relative di luce (RLU) mediante un fotomoltiplicatore
integrato nel sistema. Esiste una relazione diretta tra
la quantità di antigene p24, anticorpi anti-HIV-1 o
anti-HIV-2 nel campione e le RLU generate durante la
reazione. La presenza o l'assenza dell’antigene p24
dell’HIV, di anticorpi anti-HIV-1 o anti-HIV-2 nel
campione viene determinata confrontando il segnale
chemiluminescente della reazione al segnale soglia
determinato mediante una calibrazione. Un Indice di
cut-off (COI) viene calcolato mediante la formula RLU
campione/RLU cut-off.
Componenti del reagente
Il kit di reagenti ècomposto da quattro componenti:
Ra, Rb, Rc, e Rd. Il componente non può essere
scambiato e le informazioni dettagliate di ciascun
componente sono riportate di seguito:
Microparticelle paramagnetiche rivestite
con gli antigeni specifici anti-HIV-1/2
Ra ricombinante (E. coli) e anticorpo
monoclonale p24 dell’HIV (IgG di topo)
in tampone HEPES con conservante.
Antigeni specifici anti-HIV-1/2 (E. coli)
ricombinanti e marcati con AlP e anticorpo
Rb
monoclonale p24 dell’HIV (IgG di topo) in
tampone TRIS con conservante.
Diluenti del campione in tampone TRIS
Rc
con conservante.
Bloccanti in tampone TRIS con
Rd
conservante.
La posizione di ciascun componente èillustrata nella
figura seguente (vista frontale a sinistra e vista
dall'alto a destra):
HIV Pagina 1 di 2
Conservazione e stabilità
Il kit di reagenti per HIV intatto è stabile fino a un
anno intero se conservato a una temperatura di
2~8 °C. La data di scadenza èriportata sull'etichetta.
Il kit di reagenti per HIV puòessere conservato nel
dispositivo a 2~8 °C e utilizzato per un massimo di
28 giorni dopo l'apertura.
Preparazione del reagente
Ra: Pronto per l'uso
Rb: Pronto per l'uso
Rc: Pronto per l'uso
Rd: Pronto per l'uso
Materiale necessario ma non fornito
Analizzatore per immunodosaggio
chemiluminescente Mindray serie CL
N. Cat. HIV211: Calibratori per HIV, 1×2,0 ml per
ciascun livello del calibratore C0 e C1
N. Cat. HIVN311: Controllo negativo HIV Ag/Ab,
3×2,0 ml
N. Cat. HIVN312: Controllo negativo HIV Ag/Ab,
6×2,0 ml
N. Cat. HIVP311: Controllo positivo HIV Ag/Ab,
12×2,0 ml
(controllo positivo HIV Ag: 6×2.0ml, Controllo
positivo HIV Ab: 6×2,0 ml)
N. Cat. HIVP312: Controllo positivo HIV Ag/Ab,
6×2,0 ml
(controllo positivo HIV Ag: 3×2.0ml, Controllo
positivo HIV Ab: 3×2,0 ml)
N. Cat. CS511: Soluzione substrato, 4 ×115 ml
N. Cat. WB411: Tampone di lavaggio
Contenitore di reazione
Sistema dello strumento
Analizzatore per immunodosaggio
chemiluminescente Mindray serie CL
Prelievo e preparazione dei campioni
Il siero umano, il plasma eparinato o il plasma
citrato sono adatti per l'analisi. Si raccomanda l'uso
di siero umano.
I campioni devono essere separati da coaguli o
globuli rossi mediante centrifugazione, come
raccomandato dal produttore della provetta al
termine della formazione del coagulo. I campioni
devono essere testati il prima possibile una volta
effettuato il prelievo e prima del trattamento
analitico. Testare i campioni entro due ore dopo la
centrifugazione. Se l'analisi non viene eseguita
entro 12 ore, trasferire il supernatante in provette
per la conservazione. Chiudere ermeticamente i
campioni e refrigerarli a 2~8 °C. Se l'analisi viene
ritardata per piùdi 7 giorni, congelare i campioni a
-20 °C o a temperatura inferiore.
Evitare di ripetere i cicli di congelamento e
scongelamento che potrebbero causare
deterioramento del campione. Il campione può
essere utilizzato dopo al massimo cinque cicli di
congelamento e scongelamento. I campioni
congelati in precedenza devono essere mescolate
delicatamente e accuratamente
scongelamento e centrifugati a 10.000 G per
10 minuti.
dopo lo
Non utilizzare il campione nelle seguenti condizioni:
 disattivati con calore
 emolizzati grossolanamente
 evidente contaminazione microbica
 fibrina o altri corpi estranei visibili
Procedura di dosaggio
Per garantire le prestazioni ottimali di questo
dosaggio, gli operatori sono tenuti a leggere
attentamente il relativo manuale operativo del
sistema per ottenere informazioni sufficienti
riguardanti istruzioni d'uso, trattamento e
conservazione del campione, precauzioni di
sicurezza e manutenzione. Preparare inoltre tutti i
materiali necessari per il dosaggio.
Prima di caricare per la prima volta il kit di reagenti
per HIV sullo strumento, è necessario capovolgere
delicatamente il flacone di reagente sigillato per
almeno 30 volte in modo da risospendere le
microparticelle depositatesi durante la spedizione o
la conservazione. Ispezionare visivamente il flacone
per assicurarsi che le microparticelle siano ben
mescolate. Se le microparticelle rimangono
attaccate al flacone, continuare a capovolgerlo
finché le microparticelle non sono completamente
mescolate. Se non èpossibile rendere omogenee le
microparticelle, si consiglia di non utilizzare il
flacone di reagente. Contattare il servizio clienti
Mindray per ricevere assistenza. Non capovolgere il
flacone di reagente aperto.
Questo dosaggio richiede 100 μl in volume di
campione per un singolo test. Tale volume non
comprende il volume morto del contenitore del
campione. Quando si realizzano ulteriori test sullo
stesso campione, è necessario un volume
supplementare. Gli operatori sono tenuti a fare
riferimento al manuale operativo del sistema e ai
requisiti specifici del dosaggio per stabilire il volume
minimo del campione.
Calibrazione
Le informazioni sulla calibrazione sono memorizzate
nel codice a barre allegato con la confezione di
reagente e calibratore. Durante la calibrazione,
effettuare prima una scansione dei codici a barre
contenenti le informazioni e successivamente
utilizzare i calibratori di CT a tre livelli. Ènecessario
eseguire la calibrazione prima di eseguire i test per
l'HIV. Si consiglia la ricalibrazione ogni 4 settimane,
oppure quando si utilizza un nuovo lotto di reagenti
o quando i controlli qualità non rientrano
nell'intervallo specificato. Per istruzioni dettagliate
sulla calibrazione, consultare il manuale operativo
del sistema.
Controllo
Per verificare l'affidabilitàdel sistema di dosaggio, è
necessario effettuare i controlli qualitàalmeno una
volta ogni 24 ore, dopo aver caricato una nuova
confezione di reagente o a seguito di ogni
calibrazione. I due controlli per questo test sono il
controllo negativo per HIV e il controllo positivo per
HIV Mindray.
I risultati del controllo qualitàdevono rientrare negli
intervalli accettabili. Se un controllo non rientra nel
suo intervallo specificato, i risultati del test associati
2020-04
non sono validi e il campione deve essere
nuovamente testato. Può essere richiesta la
ricalibrazione. Fare riferimento al manuale d'uso del
sistema per il controllo del sistema. Se i risultati del
controllo qualitànon rientrano ancora nell'intervallo
specificato, contattare il servizio clienti Mindray per
ricevere assistenza.
Calcolo
L’analizzatore della serie CL calcola i segnali RLU
medi dei Calibratori C1 e C0.
L'analizzatore della serie CL calcola il risultato
dell'HIV sulla base del rapporto tra il valore RLU del
campione e il valore RLU di cut-off (indice di cut-off,
COI) per ciascun campione e ciascun controllo.
RLU cut-off = [(RLU medio di C1 - RLU medio di C0) x
Coefficiente di calibrazione] + RLU medio di C0
Il coefficiente di calibrazione èspecifico per ciascun
lotto di reagenti e calibratori.
COI = valore RLU campione/RLU cut-off
Diluizione del campione
I campioni non possono essere diluiti per il dosaggio
per HIV Mindray.
Interpretazione dei risultati
I campioni con COI<1,00 sono Non reattivi nel
dosaggio per HIV Mindray. Tali campioni sono
considerati negativi per l'infezione da HIV e non
sono necessarie ulteriori analisi.
I campioni con un COI≥ 1,00 sono considerati
Inizialmente reattivi.
Tutti i campioni Inizialmente reattivi devono essere
trasferiti in una provetta da centrifuga e centrifugati
a ≥10.000 RCF (forza centrifuga relativa) per
10 minuti, quindi rianalizzati in duplicato.
Se COI è<1,00 in entrambi i nuovi test, il campione
viene considerato come negativo per l’antigene p24
dell’HIV e gli anticorpi anti-HIV-1/2.
Nel caso in cui COI è ≥ 1,00 in uno qualsiasi dei
nuovi test, il campione viene considerato come
Ripetutamente reattivo ed è positivo per l’antigene
p24 dell’HIV e gli anticorpi anti-HIV-1/2 o positivo
sia per l'antigene che gli anticorpi.
I campioni Ripetutamente reattivi devono essere
confermati in base alla procedura di conferma
consigliata dalle autorità di regolamentazione, ad
esempio i test Western Blot e HIV RNA.
Limitazione della misurazione
Il risultato dell'HIV in un dato campione puòvariare,
in base ai dosaggi di diversi produttori, a causa delle
differenze a livello di metodi di dosaggio,
calibrazione e specificitàdel reagente.
Il dosaggio per HIV serie CL potrebbe non rilevare
tutti i soggetti infetti. Un risultato negativo del test
non esclude la possibilità di esposizione a HIV o
infezione da HIV. Gli anticorpi anti-HIV e/o
l'antigene p24 possono non essere rilevabili in
alcuni stadi dell'infezione e in alcune condizioni
cliniche. Un risultato negativo del test non esclude
completamente la possibilità di infezione da HIV. I
campioni prelevati nella fase molto precoce
(pre-sieroconversione) o nella fase tardiva
dell'infezione da HIV possono occasionalmente
produrre risultati negativi. Tuttavia, anche le
varianti di HIV sconosciute possono portare a un
risultato negativo.
P/N: 046-003271-00 (8.0) Italiano-5
Come per tutti i test contenenti anticorpi
monoclonali di topo, in rari casi èpossibile ottenere
risultati anomali da campioni prelevati da pazienti
che hanno ricevuto anticorpi monoclonali di topo per
la diagnosi o la terapia.
I risultati del dosaggio vanno utilizzati insieme ad
altri dati, quali sintomi, risultati di altre analisi,
anamnesi clinica, ecc. per prendere le decisioni
cliniche.
La presenza dell'antigene dell’HIV o degli anticorpi
anti-HIV non costituisce una diagnosi di AIDS.
Caratteristiche di rendimento
Sensibilità
La sensibilità per p24 dell’HIV al cut-off è<2 UI/ml.
La precisione di misurazione è tracciabile allo
standard internazionale dell’OMS per l’antigene p24
dell’HIV (codice NIBSC: 90/636).
A 505 campioni è stata clinicamente diagnosticata
l'infezione da HIV e sono stati classificati come stato
di malattia. Tra questi, cinque campioni sono positivi
all’anticorpo HIV-O, 30 sono positivi agli anticorpi
anti-HIV-2 e 23 positivi all’antigene p24 dell’HIV.
Il dosaggio per HIV sul sistema CL-2000i Mindray ha
rilevato 505 campioni positivi, con tasso di
coincidenza positiva pari al 100%.
Precisione
Il dosaggio per HIV serie CL è progettato per
garantire una precisione ≤10% (CV
intra-dispositivo). La precisione èstata determinata
seguendo il protocollo EP5-A2 del National
Committee for Clinical Laboratory Standards
(NCCLS)16. I tre livelli di controlli qualitàsono stati
testati in duplicato in due cicli separati al giorno, per
un totale di 20 giorni, utilizzando un singolo lotto di
reagenti e una singola curva di calibrazione. I dati
sulla precisione sono riepilogati nella tabella di
seguito.
Media CV CV tra
CV inter-
Campione durante cicli
(COI) dispositivo
il ciclo diversi
Controllo
0,14 2,42% 3,44% 6,46%
negativo
Controllo
6,95 1,15% 2,98% 3,40%
positivo 1
Controllo
5,95 1,18% 3,02% 3,66%
positivo 2
Specificità
Il campione fortificato con emoglobina fino a 500
mg/dl, bilirubina fino a 20 mg/dl, trigliceridi fino a
3000 mg/dl, proteine totali fino a 10 g/dl, fattore
reumatoide (RF) fino a 1500 IU/ml, anticorpo
anti-DNA (ANA) fino a 400 U/l o anticorpi umani
antimurini (HAMA) mostra risultati invariati (criterio:
recupero entro ±10% del valore iniziale).
Il kit per HIV Mindray è stato valutato per la
presenza di sostanze a potenziale reattivitàcrociata
da persone con condizioni mediche non correlate
all’infezione da HIV. Almeno 5 campioni contenenti
ciascuna delle sostanze a potenziale interferenza
dei seguenti (HAV, anti-HBs, HCV, HEV, hgv,
anti-HTLV-I/II, HbsAg, TP, EBV, RV, CMV, HSV-1,
toxo, rosolia, E. coli, lieviti e lentivirus) sono
analizzati da HIV Mindray e un kit di reagenti di
riferimento. Tutti i risultati sono coerenti tra il
HIV Pagina 2 di 2
dosaggio Mindray e quello di riferimento.
1021 campioni sono stati dichiarati negativi con i
metodi di riferimento. Il dosaggio per HIV sul
sistema CL-2000i Mindray ha rilevato
1019 campioni negativi, mentre 2 campioni sono
risultati positivi al test, con una specificità
diagnostica del 99,8%.
Precauzioni e avvertenze
1. Solo per uso diagnostico in vitro.
2. Seguire tutte le regole riguardanti la
manipolazione dei reagenti di laboratorio e
adottare le necessarie precauzioni di sicurezza.
3. A causa delle differenze nella metodologia e
nella specificitàdell'anticorpo, i risultati del test
dello stesso campione possono essere
differenti quando si utilizzano kit di reagenti di
produttori diversi sul sistema Mindray, oppure
quando si usano i kit di reagenti Mindray su altri
sistemi.
4. Non utilizzare i kit di reagenti dopo la data di
scadenza.
5. Non miscelare reagenti di lotti diversi.
6. Mantenere sempre la confezione del reagente
in posizione eretta per evitare la perdita di
microparticelle prima dell'uso.
7. Non si consiglia l'utilizzo di una confezione di
reagente aperta da oltre 28 giorni.
8. L'affidabilitàdei risultati del dosaggio non può
essere garantita se non si seguono le istruzioni
del presente foglietto illustrativo.
9. Tutti i campioni e i rifiuti della reazione sono da
considerarsi come potenzialmente a rischio
biologico. I campioni e i rifiuti della reazione
devono essere manipolati in conformità alle
normative e linee guida locali.
10. La scheda sulla sicurezza dei materiali (MSDS)
èdisponibile su richiesta.
Simboli grafici
Bibliografia
1. Schochetman G, George JR, editors. AIDS
Testing: A Comprehensive Guide to Technical,
Medical, Social, Legal, and Management Issues.
2nd ed. New York: NY Springer-Verlag; 1994.
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Foley B, Hahn B, et al, editors. HIV Sequence
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Alamos National Laboratory, 2000:54-73.
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http://hiv-web.lanl.gov)
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antigen (HIV-Ag) in serum and cerebrospinal
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16. CLSI. EP5-A2: Vol. 24, No. 25, Evaluation of
Precision Performance of Quantitative
Measurement Method; Approved Guideline –
Second Edition.
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Tel: +86-755-81888998
Fax: +86-755-26582680
2020-04

HIV
İnsan İmmün Yetmezlik
VirüsüAntijeni ve
Antikorları (CLIA)
Sipariş Bilgileri
Katalog No. Ambalaj Boyutu
HIV111 2×50 test
HIV112 2×100 test
Kullanım Amacı
CL serisi HIV tayini, insan serumu veya plazmasında
HIV p24 antijeninin ve HIV-1 ve/veya HIV-2
antikorlarının eşzamanlı kalitatif tayinine yönelik bir
Kemilüminesans İmmünolojik Tayindir.
Özet
İnsan İmmün Yetmezlik Virüsü (HIV), retrovirüs
primat immün yetmezlik alt cinsine ait olup
Lentivirüs kategorisinde sınıflandırılan ve kazanılmış
immün yetmezlik sendromuna (AIDS) neden olan
etiyolojik ajandır. HIV; cinsel yolla, kan ve kan
ürünlerine maruz kalınması yoluyla veya bir fetüste
veya yenidoğanda meydana gelebilecek prenatal
enfeksiyon yoluyla bulaşır 1.
Her ikisi de birden çok genetik alt tipten oluşan iki
tip insan immün yetmezlik virüsübulunur: HIV-1 ve
HIV-22, 3. Farklı bölgelerde yaygın alt tipler değişiklik
gösterebilir. HIV-1 üçana grup altında sınıflandırılır:
Grup M (majör), Grup O (outlier) ve Grup N (M dışı
ve O dışı) 4-6. HIV-1 Grup M içinde dokuz alt tip (A, B,
C, D, F, G, H, J ve K) ve dolaşan rekombinant formlar
(CRF'ler) bulunur. HIV-1 en yaygın olarak bulaşan
HIV virüsüdür4. Kamerun'da keşfedilen HIV-1 Grup
O ve Grup N, nadir olup sadece Batı Orta Afrika'da
endemik olarak görülmektedir. Bununla birlikte,
başka bölgelerde de Grup O enfeksiyonlar tespit
edilmiştir5, 6. HIV-2; A-H genetik alt tipleri şeklinde
sınıflandırılmaktadır. Bunlar arasında en endemik alt
tipler ise A ve B'dir7.
HIV virüsü insana bulaştığında insan vücudunun
bağışıklık sistemi HIV virüsü proteinlerine karşı
çeşitli antikorlar üreterek enfeksiyona yanıt verir.
Virüsün transmembran proteinine (TMP) yönelik
antikorlar, HIV bulaşmış kişilerde serokonversiyon
sırasında ilk olarak ortaya çıkan antikorlardır. Ek
olarak, anti-TMP yanıtı hastalığın seyri boyunca
nispeten gücünü korur. Bu nedenle, anti-TMP
antikorları HIV tayini açısından iyi hedeflerdir 8-13. 4.
nesil HIV tayini, yakın zaman önce virüs bulaşmış
kişilerin tespit edilmesi amacıyla serum veya
plazmada antikora ek olarak HIV p24 antijenini de
hedef alır14, 15.
Mindray HIV tayini; hem HIV-1 (Grup M ve O dahil)
ve HIV-2 antikorlarını, hem de serokonversiyondan
önce HIV p24 antijenini saptayan ve dolayısıyla
saptama zaman aralığını kısaltan ve erken HIV
enfeksiyonunu saptama sensitivitesini iyileştiren 4.
nesil HIV tayinidir.
Tayin Prensipleri
CL serisi HIV tayini, HIV p24 antijeninin ve HIV-1
P/N: 046-003271-00 (8.0) Türkçe-6
ve/veya HIV-2 antikorlarının düzeyini belirlemeye
yönelik iki bölgeli bir sandviçtayindir.
İlk adımda, numune, numune işlem çözeltisi, fare
anti-HIV p24 mAb ile kaplı paramanyetik
mikropartiküller ve spesifik HIV-1 ve HIV-2
antijenleriyle kaplı mikropartiküller bir reaksiyon
kabına eklenir. İnkübasyondan sonra numunedeki
HIV p24 antijeni, spesifik olarak mikropartiküllerin
üzerine kaplı monoklonal antikora bağlanırken,
numunedeki HIV-1 ve HIV-2 antikorları HIV-1 veya
HIV-2 antijeniyle kaplı mikropartiküllere bağlanır.
Daha sonra, mikropartiküller manyetik olarak
yakalanırken, diğer bağlı olmayan maddeler
yıkamayla uzaklaştırılır.
İkinci adımda, seyreltici çözelti, ALP ile işaretli
anti-HIV p24 monoklonal antikoru ve ALP ile işaretli
HIV-1 ve HIV-2 antijenleri reaksiyon kabına eklenir.
İnkübasyondan sonra ALP ile işaretli anti-HIV p24
monoklonal antikoru ve ALP ile işaretli HIV-1 ve
HIV-2 antijeni sırasıyla mikropartikülle yakalanmış
HIV p24 antijeni, HIV-1 veya HIV-2 antikoru ile
sandviç oluşturur. Daha sonra, mikropartiküller
manyetik olarak yakalanırken, diğer bağlı olmayan
maddeler yıkamayla uzaklaştırılır.
Üçüncü adımda, substrat çözeltisi reaksiyon kabına
ilave edilir. Substrat; mikropartiküllerin üzerinde
yakalanan immünokomplekste ALP tarafından
katalize edilir. Ortaya çıkan kemilüminesans
reaksiyonu, sisteme entegre edilmiş bir
fotomultiplikatör ile bağıl ışık birimleri (RLU'lar)
cinsinden ölçülür. Numunedeki p24 antijeni ve
HIV-1 veya HIV-2 antikoru veya her ikisinin miktarı
ile reaksiyon sırasında üretilen RLU'lar arasında
doğrudan bir ilişki mevcuttur. Numunede HIV p24
antijeni ve HIV-1 veya HIV-2 antikorlarının varlığı ya
da yokluğu, reaksiyondaki kemilüminesans
sinyalinin kalibrasyondan elde edilen kesme değeri
sinyali ile karşılaştırılması yoluyla belirlenir. Numune
RLU'su/Kesme Değeri RLU'sunun oranı kullanılarak
bir kesme değeri indeksi (COI) hesaplanır.
Reaktif Bileşenleri
Reaktif kiti dört bileşenden oluşmaktadır: Ra, Rb, Rc
ve Rd. Bileşenler birbiriyle değiştirilemez; aşağıda
her bileşenle ilgili ayrıntılı bilgi verilmiştir:
Koruyucu içeren HEPES tamponu içinde
rekombinant HIV-1/2 spesifik antijenleri
Ra (E. Coli.) ve HIV p24 monoklonal
antikoru (fare IgG) ile kaplı
paramanyetik mikropartiküller.
Koruyucu içeren TRIS tamponu içinde
ALP ile işaretli rekombinant HIV-1/2
Rb
spesifik antijenleri (E. Coli.) ve HIV p24
monoklonal antikoru (fare IgG).
Koruyucu içeren TRIS tamponu içinde
Rc
numune seyrelticiler.
Koruyucu içeren TRIS tamponu içinde
Rd
blokerler.
Her bir bileşenin pozisyonu aşağıdaki şekilde
gösterilmektedir (solda önden görünüm ve sağda
üstten görünüm):
HIV Sayfa 1/2
Saklama ve Stabilite
Açılmamış HIV reaktif kiti, 2~8°C'de saklandığında
tam bir yıla kadar stabildir. Gerçek son kullanma
tarihi etiket üzerinde belirtilmektedir.
HIV reaktif kiti cihaz üzerinde 2~8°C'de saklanabilir ve
açıldıktan sonra en fazla 28 gün süreyle kullanılabilir.
Reaktiflerin Hazırlanması
Ra: Kullanıma hazır
Rb: Kullanıma hazır
Rc: Kullanıma hazır
Rd: Kullanıma hazır
Gereken Fakat Temin Edilmeyen
Malzemeler
Mindray CL Serisi Kemilüminesans İmmünolojik
Tayin Analizörü
Kat. No. HIV211: HIV Kalibratörleri, kalibratör C0 ve
C1'in her bir düzeyi için 1×2,0 ml
Kat. No. HIVN311: HIV Ag/Ab Negatif Kontrol
3×2,0 ml
Kat. No. HIVN312: HIV Ag/Ab Negatif Kontrol,
6×2,0 ml
Kat. No. HIVP311: HIV Ag/Ab Pozitif Kontrol, 12×2,0 ml
(HIV Ag Pozitif Kontrol: 6×2,0 ml, HIV Ab Pozitif
Kontrol: 6×2,0 ml)
Kat. No. HIVP312: HIV Ag/Ab Pozitif Kontrol, 6×2,0 ml
(HIV Ag Pozitif Kontrol: 3×2,0 ml, HIV Ab Pozitif
Kontrol: 3×2,0 ml)
Kat. No. CS511: Substrat Çözeltisi, 4×115 ml
Kat. No. WB411: Yıkama Tamponu
Reaksiyon Kabı
Cihaz Sistemi
Mindray CL Serisi Kemilüminesans İmmünolojik
Tayin Analizörü
Numune Alma ve Hazırlama
Test için insan serumu, heparinli plazma veya sitratlı
plazma uygundur. İnsan serumu önerilir.
Numuneler, pıhtı oluşumu tamamlandıktan sonra
tüp üreticisinin önerdiği şekilde santrifüjleme
işlemiyle pıhtılardan veya alyuvarlardan ayrılmalıdır.
Numuneler, numune alındıktan ve analiz öncesi
işlemden sonra en kısa sürede test edilmelidir.
Numuneleri santrifügasyondan sonra iki saat içinde
test edin. Test 12 saat içinde tamamlanmazsa üst fazı
saklamak için tüplere aktarın. Numuneler kapağı sıkıca
kapatılarak 2~8°C'de soğutulmalıdır. Test 7 günden
uzun süreyle ertelenecekse numuneler -20°C veya
daha düşük bir sıcaklıkta dondurulmalıdır.
Numunede bozulmaya neden olabilecek tekrarlı
dondurma ve çözdürme döngülerinden kaçının.
Numune en fazla beş dondurma ve çözdürme
döngüsünden sonra kullanılabilir. Önceden
dondurulmuş numuneler çözdürüldükten sonra
yavaşça ve iyice karıştırılıp 10.000 g'de 10 dakika
boyunca santrifüjlenmelidir.
Aşağıdaki özellikleri taşıyan numuneleri
kullanmayın:
 ısıyla inaktive edilmiş
kabaca hemolize edilmiş

 açık şekilde mikrobiyal kontaminasyona maruz
kalmış
 gözle görünür fibrin veya başka kalıntılar içeren
Tayin Prosedürü
Bu tayinden en iyi performansın alınabilmesi için
operatörler ilgili sistem kullanım kılavuzunu dikkatle
okuyarak kullanım talimatları, numunenin
muhafazası ve yönetimi, güvenlik önlemleri ve
bakım gibi konularda yeterli bilgi edinmelidir. Tayin
için gerekli tüm malzemeleri de hazırlayın.
HIV reaktif kitini cihaza ilk kez yüklemeden önce
açılmamış reaktif şişesini en az 30 kez yavaşça baş
aşağı çevirerek, nakliye veya saklama sırasında
çökelen mikropartikülleri yeniden süspansiyon
haline getirin. Şişeyi görsel olarak incelemek
suretiyle mikropartiküllerin iyice karıştığından emin
olun. Mikropartiküller şişeye yapışmış halde
kalıyorsa mikropartiküller tamamen karışana kadar
baş aşağı çevirmeye devam edin. Mikropartiküller
homojen bir hale getirilemiyorsa bu reaktif şişesinin
kullanılmaması önerilir. Yardım için Mindray Müşteri
Hizmetleri ile iletişime geçin. Açık bir reaktif şişesini
baş aşağı çevirmeyin.
Bu tayinde, tek bir test için 100 μL numune hacmi
gerekir. Bu hacim, numune kabının ölü hacmini
içermez. Aynı numuneden ek testler yaparken ilave
hacim gerekir. Operatörler, minimum numune
hacmini belirlemek için sistem kullanım kılavuzuna
ve tayine özgügereksinimlere başvurmalıdır.
Kalibrasyon
Kalibrasyon bilgileri, reaktif ve kalibratör paketine
takılı barkodda yer almaktadır. Kalibrasyonu
yaparken, önce barkodlardaki bilgileri tarayarak
sisteme aktarın ve sonra kalibratörleri iki düzeyde
test edin. Her HIV testinden önce kalibrasyon
yapılması gerekir. Her 4 haftada bir veya yeni bir
reaktif lotu kullanılırken ya da kalite kontrolleri
belirtilen aralıkların dışında olduğunda yeniden
kalibrasyon önerilir. Kalibrasyonla ilgili ayrıntılı
talimatlar için sistem kullanım kılavuzuna başvurun.
Kontrol
Tayin sisteminin güvenilirliğini doğrulamak için en
azından her 24 saatte bir, yeni bir reaktif paketi
yüklendikten sonra ya da her kalibrasyondan sonra
kalite kontrolleri çalıştırılmalıdır. Bu tayine yönelik
iki kontrol Mindray HIV Negatif Kontrol ve HIV Pozitif
Kontrol şeklindedir.
Kalite kontrol sonuçları kabul edilebilir aralıklar
dahilinde olmalıdır. Bir kontrol belirtilen aralığının
dışındaysa, ilişkili test sonuçlar geçersiz olur ve
numunelerin yeniden test edilmesi gerekir. Yeniden
kalibrasyon yapılması gerekebilir. Sistemi kontrol
etmek için sistem kullanım kılavuzuna bakın. Kalite
kontrol sonuçları halen belirtilen aralık dışındaysa
yardım için lütfen Mindray Müşteri Hizmetleri ile
iletişime geçin.
Hesaplama
CL serisi analizör, kalibratör C1 ve C0'un her ikisinin
ortalama RLU sinyallerini hesaplar.
CL serisi analizör, her numune ve kontrol için
numune RLU değeri ila kesme değeri RLU (Kesme
Değeri İndeksi, COI) oranına dayalı olarak HIV
sonucunu hesaplar.
2020-04
Kesme Değeri RLU = [(C1'in ortalama RLU değeri –
C0'ın ortalama RLU değeri) x Kalibrasyon Katsayısı] +
C0'ın ortalama RLU değeri
Kalibrasyon Katsayısı her reaktif ve kalibratör lotuna
özgüdür.
COI = Numune RLU/Kesme Değeri RLU
Numune Seyreltme
Mindray HIV tayini için numuneler seyreltilemez.
Sonuçların Yorumlanması
COI<1,00 olan numuneler Mindray HIV tayininde
Reaktif Değildir. Bu numuneler HIV için negatif
olarak değerlendirilir ve ek test gerektirmez.
COI I≥1,00 olan numuneler Başlangıçta Reaktif
olarak değerlendirilir.
Başlangıçta Reaktif olan tüm numunelerin bir
santrifüj tüpüne alınarak ≥10.000 RCF'de (Bağıl
Santrifügal Kuvvet) 10 dakika boyunca
santrifüjlenmesi ve ardından tekrarlı olarak yeniden
test edilmesi gerekir.
Her iki yeniden testte de COI <1,00 ise bu numune
HIV p24 antijeni ve HIV-1/2 antikorları için negatif
olarak değerlendirilir.
Yeniden testlerin herhangi birinde COI ≥ 1,00 ise
numune Tekrarlı Reaktif olarak değerlendirilir ve
HIV p24 antijeni veya HIV-1/2 antikorları için
negatiftir ya da hem antijen hem de antikorlar için
pozitiftir.
Tekrarlı Reaktif olan numuneler; Western Blot ve
HIV RNA testleri gibi düzenleyici makam tarafından
önerilen doğrulama prosedürüne göre
doğrulanmalıdır.
Ölçüm Sınırlaması
Belirli bir numunenin HIV sonucu; tayin yöntemleri,
kalibrasyon ve reaktif spesifitesi açısından
farklılıklar barındıran çeşitli üreticilere ait tayinlere
bağlı olarak değişiklik gösterebilir.
CL Serisi HIV tayini, tüm enfekte bireyleri tespit
edemeyebilir. Negatif bir test sonucu, HIV'e maruz
kalma veya HIV enfeksiyonu olasılığını ortadan
kaldırmaz. HIV antikorları ve/veya p24 antijeni,
enfeksiyonun bazı aşamalarında ve bazı klinik
koşullarda saptanamayabilir. Negatif bir test sonucu,
HIV enfeksiyonu ihtimalini tamamen ortadan
kaldırmaz. Çok erken (serokonversiyon öncesi)
fazdan veya HIV enfeksiyonunun geç fazından
alınan numuneler, zaman zaman negatif bulgular
sağlayabilir. Bununla birlikte bilinmeyen HIV
varyasyonları da negatif sonuçlara yol açabilir.
Monoklonal fare antikorları içeren tüm testlerde
olduğu gibi sıra dışı durumlarda tanı veya tedavi için
monoklonal fare antikorları almış hastalardan alınan
numunelerde anormal sonuçlar elde edilebilir.
Klinik kararlar alınırken tayin sonuçları diğer
verilerle (semptomlar, diğer testlerin sonuçları,
klinik hikaye vb.) birlikte değerlendirilerek
kullanılmalıdır.
HIV antijeninin veya HIV antikorlarının varlığı, AIDS
tanısı değildir.
Performans Özellikleri
Sensitivt.
Kesme değerindeki HIV p24 sensitivitesi <2 IU/ml'dir.
P/N: 046-003271-00 (8.0) Türkçe-6
Ölçüm doğruluğu; WHO Uluslararası Standardı HIV
p24 Antijeni'ne (NIBSC kodu: 90/636) izlenebilirdir.
505 numunede HIV enfeksiyonu bulunduğu klinik
olarak teşhis edilmiş ve bu numuneler hastalık
durumu olarak sınıflandırılmıştır. Bu numunelerin
arasından beş numune HIV-O antikoru pozitif, 30'u
HIV-2 antikoru pozitif ve 23'ü ise HIV p24 antijeni
pozitiftir. Mindray CL-2000i sisteminde yürütülen
HIV tayininde 505 numune pozitif bulunmuş ve
pozitif tesadüf oranı %100 olarak belirlenmiştir.
Hassasiyet
CL Serisi HIV tayini, hassasiyeti ≤%10 (cihaz içi CV)
olacak şekilde tasarlanmıştır. Hassasiyet, Klinik
Laboratuvar Standartları Ulusal Komitesi (NCCLS)
Protokolü EP5-A2 dikkate alınarak belirlenmiştir 16.
Üçkalite kontrolüseviyesi, tek bir reaktif lotu ve tek
bir kalibrasyon eğrisi kullanılarak, toplam 20 gün
boyunca gün başına iki ayrı çalışmada iki kopya
halinde test edilmiştir. Tekrarlanabilirlik verileri
aşağıdaki tabloda özetlenmektedir.
Ortalama Çalışma Çalışma Cihaz
Numune
(COI) içi CV arası CV içi CV
Negatif
0,14 %2,42 %3,44 %6,46
Kontrol
Pozitif
6,95 %1,15 %2,98 %3,40
Kontrol 1
Pozitif
5,95 %1,18 %3,02 %3,66
Kontrol 2
Özgünlük
500 mg/dl'ye kadar hemoglobin, 20 mg/dl'ye kadar
bilirubin, 3000 mg/dl'ye kadar trigliseridler, 10
g/dl'ye kadar total protein, 1500 IU/ml'ye kadar
romatoid faktör (RF), 400 U/l'ye kadar anti-DNA
antikoru (ANA) veya insan anti-fare antikoru
（HAMA） ile bozulmuş numune sonuçları etkilenmez
(kriter: başlangıç değerinin ±%10 oranında geri
kazanım).
Mindray HIV kiti, HIV enfeksiyonuyla ilişkili olmayan
tıbbi rahatsızlıkları bulunan kişilerden alınan
potansiyel çapraz reaktif maddeler açısından
değerlendirilmiştir. Potansiyel olarak enterferansa
neden olan maddelerin (HAV, Anti-HBs, HCV, HEV,
HGV, Anti-HTLV-I/II, HBsAg, TP, EBV, RV, CMV,
HSV-1, Toxo, Rubella, E.coli, Yeast ve Lentivirüs)
her birini içeren en az 5 numune Mindray HIV kiti ve
bir referans reaktif kiti ile test edilir. Tüm sonuçlar
Mindray tayini ile referans tayin arasında tutarlılık
göstermektedir.
Referans yöntemler kullanılarak 1021 numunenin
negatif olduğu ileri sürülmüştür. Mindray CL-2000i
sisteminde yürütülen HIV tayininde 1019 numune
negatif olarak saptanırken, 2 numunenin test sonucu
pozitif olarak bulunmuştur; bu durum, %99,8'lik bir
diagnostik spesifisiteye işaret etmektedir.
Uyarı ve Önlemler
1. Sadece in vitro diagnostik kullanım içindir.
2. Laboratuvar reaktiflerinin muamelesinde tüm
kurallara uyun ve gerekli güvenlik önlemlerini alın.
3. Metodoloji ve antikor özgünlüğündeki
farklılıklar nedeniyle, farklı üreticilerin reaktif
kitleri Mindray sisteminde kullanıldığında veya
Mindray reaktifleri başka sistemlerde
kullanıldığında, aynı numunenin test sonuçları
farklı olabilir.
HIV Sayfa 2/2
4. Reaktif kitlerini, son kullanma tarihinden sonra retroviruses (HTLV-III) in the serum of patients
kullanmayın. with AIDS. Science 1984; 224:506-8.
5. Farklı reaktif lotlarından karıştırılmış reaktifleri 10. Allan JS, Coligan JE, Barin F, et al. Major
kullanmayın. glycoprotein antigens that induce antibodies in
6. Kullanım öncesi hiçbir mikro partikül AIDS patients are encoded by HTLV-III.
kaybedilmemesini sağlamak için reaktif Science 1985; 228:1091-4.
paketini her zaman dik pozisyonda tutun. 11. Barin F, McLane MF, Allan JS, et al. Virus
7. 28 günden fazla açık kalmış reaktif paketinin envelope protein of HTLV-III represents major
target antigen for antibodies in AIDS patients.
kullanılmaması önerilir.
Science 1985; 228:1094-6.
8. Bu prospektüsteki talimatlara uyulmadığı takdirde
tayin sonuçlarının güvenilirliği garanti edilemez. 12. Hunt JC, Johnson-Paepke J, Boardway K, et al.
Discrimination between HIV-1 and HIV-2
9. Tüm numune ve reaksiyon atıkları potansiyel seropositive individuals using mouse
olarak biyolojik tehlikeli madde kabul monoclonal antibodies directed to HIV
edilmelidir. Numuneler ve reaksiyon atıkları transmembrane proteins. AIDS Res Hum
yerel düzenlemelere ve yönetmeliklere uygun Retroviruses 1990;6: 883-98.
olarak işlenmelidir.
13. Clavel F, Guyader M, Gutard D, et al. Molecular
10. Madde Güvenliği Veri Sayfası (MSDS) istek cloning and polymorphism of the human
üzerine temin edilir.
immune deficiency virus type 2. Nature 1986;
324:691-5.
Grafiksel Semboller 14. Allain J-P, Laurian Y, Paul DA, et al. Serological
markers in early stages of human
immunodeficiency virus infection in
haemophiliacs. Lancet 1986; 2(8518):1233-6.
15. Goudsmit J, De Wolf F, Paul DA, et al.
Expression of human immunodeficiency virus
antigen (HIV-Ag) in serum and cerebrospinal
fluid during acute and chronic infection. Lancet
1986; 2(8500):177-80.
16. CLSI. EP5-A2: Vol. 24, No. 25, Evaluation of
Precision Performance of Quantitative
Measurement Method; Approved Guideline –
Bibliyografya Second Edition.
1. Schochetman G, George JR, editors. AIDS
Testing: A Comprehensive Guide to Technical,
Medical, Social, Legal, and Management Issues. © 2017 Shenzhen Mindray Bio-Medical Electronics
Co., Ltd.
2nd ed. New York: NY Springer-Verlag; 1994.
Tüm hakları saklıdır
2. Barre-Sinoussi F, Chermann JC, Rey F, et al.
Isolation of a T-lymphotropicretrovirus from a Üretici: Shenzhen Mindray Bio-Medical Electronics
patient at risk for acquired immune deficiency Co., Ltd.
syndrome (AIDS). Science 1983; 220:868-71. Adres: Mindray building, Keji 12th Road South,
3. Clavel F, Guetard D, Brun-Vezinet F et al. Hi-tech Industrial Park, Nanshan, Shenzhen,
Isolation of a new human retrovirus from West 518057 Çin
African patients with AIDS. Science 1986; E-posta adresi: service@mindray.com.cn
233:343-6.
Tel: +86-755-81888998
4. Peeters, M. Recombinant HIV sequences: their
role in the global epidemic. In: Kuiken C, Foley B, Faks: +86-755-26582680
Hahn B, et al, editors. HIV Sequence
Compendium 2000. Los Alamos, NM: Los Alamos
National Laboratory, 2000:54-73. (Çevrimiçi
erişim adresi: http://hiv-web.lanl.gov)
5. Khouri ME, et al. Hepatitis B: Epidemiological,
immunological, and serological considerations
emphasizing mutation. Rev. Hosp. Clin. Fac.
Med. S. Paulo 2004; 59(4):216-224.
6. Ayouba A, Souquieres S, Njinku B, et al. HIV-1
group N among HIV-1-seropositive individuals
in Cameroon. AIDS 2000; 14:2623-5.
7. Peeters M, Gueye A, Mboup S, et al.
Geographical distribution of HIV-1 group O
viruses in Africa. AIDS 1997; 11:493-8.
8. Gao F, Yue L, Robertson DL, et al. Genetic
diversity of human immunodeficiency virus
type 2: evidence for distinct sequence
subtypes with differences in virus biology.
J Virology 1994; 68:7433-47.
9. Sarngadharan MG, Popovic M, Bruch L, et al.
Antibodies reactive with human T-lymphotropic
2020-04

VIH
Antigène et anticorps contre le
virus de l'immunodéficience
humaine (CLIA)
Informations de commande
N°de référence Taille du paquet
HIV111 2×50 tests
HIV112 2×100 tests
Usage prévu
Le dosage VIH série CL est le dosage
immunologique par chimiluminescence pour la
détermination quantitative simultanée de l'antigène
p24 du VIH et des anticorps anti-VIH-1 et/ou
anti-VIH-2 dans le sérum ou le plasma humain.
Résumé
Le virus de l'immunodéficience humaine (VIH) est
l'agent étiologique à l'origine du syndrome
immunodéficitaire acquis (SIDA), qui appartient aux
rétrovirus, classés dans la catégorie des lentivirus,
sous-genre d'immunodéficience primate. Le VIH est
transmis par contact sexuel, par exposition à du
sang ou à des produits sanguins, ou par infection
prénatale d'un fœtus ou d'un nouveau-né1.
Il existe deux types de virus de l'immunodéficience
humaine, le VIH-1 et le VIH-2, tous deux constitués de
plusieurs sous types génétiques2, 3. Les sous types les
plus fréquents dans différentes zones sont
susceptibles de varier. Le VIH-1 est classédans trois
groupes principaux: Le groupe M (major), le groupe O
(outlier) et le groupe N (non-M et non-O) 4-6. Le groupe
M du VIH-1 est composéde neuf sous types (A, B, C, D,
F, G, H, J et K) et de formes recombinantes en
circulation (CRF). Le VIH-1 est le virus du VIH le plus
largement transmis4. Les groupes O et N du VIH-1, qui
sont rares et endémiques en Afrique Centrale de
l'Ouest, ont étédécouverts au Cameroun. Cependant,
des infections du groupe O ont également été
identifiées dans d'autres zones5, 6. Le VIH-2 est classé
en sous types génétiques de A àH, parmi lesquels A et
B sont les sous types les plus endémiques7.
Lorsque le VIH infecte un humain, le système
immunitaire de l'organisme humain répond en
générant une diversitéd'anticorps contre les protéines
du virus du VIH. Les anticorps contre les protéines
transmembranaires (PTM) du virus sont parmi les
premiers àapparaî tre au moment de la séroconversion
du VIH des individus contaminés. En outre, la réponse
anti-PTM reste relativement forte tout au long de la
maladie. Par conséquent, les anticorps anti-PTM sont
de bonnes cibles pour le dosage du VIH8-13. En plus des
anticorps, la 4e génération de dosage du VIH cible
également l'antigène p24 du VIH dans le sérum ou le
plasma pour l'identification d'individus récemment
infectés14, 15.
Le dosage du VIH Mindray appartient à la 4 e
génération de dosage du VIH qui détecte àla fois les
anticorps anti-VIH-1 (y compris les groupes M et O)
et anti-VIH-2, ainsi que l'antigène p24 du VIH avant
la séroconversion, ce qui permet de réduire la
fenêtre de détection et d'améliorer la sensibilitéde
détection d'une infection du VIH précoce.
Principe du dosage
Le dosage du VIH série CL est un dosage en
sandwich pour déterminer le niveau de l'antigène
p24 du VIH et les anticorps anti-VIH-1 et/ou
anti-VIH-2.
Réf.: 046-003271-00 (8.0) Français-7
Dans la première étape, l'échantillon, la solution de
traitement de l'échantillon, les microparticules
paramagnétiques recouvertes d'anticorps
monoclonaux de souris anti-p24 du VIH, et les
microparticules recouvertes d'antigènes spécifiques
anti-VIH-1 et anti-VIH-2 sont ajoutés dans une cuve
de réaction. Après incubation, l'antigène p24 du VIH
dans l'échantillon se lie spécifiquement àl'anticorps
monoclonal sur les microparticules, alors que les
anticorps anti-VIH-1 et anti-VIH-2 dans l'échantillon
se lient aux microparticules recouvertes d'antigènes
anti-VIH-1 ou anti-VIH-2. Ensuite, les
microparticules sont magnétiquement capturées
tandis que d'autres substances non liées sont
éliminées par lavage.
Dans la deuxième étape, le diluant, l'anticorps
monoclonal marqué PhoA anti-p24 du VIH, et les
antigènes anti-VIH-1 et anti-VIH-2 marqués PhoA
sont ajoutés àla cuve de réaction. Après incubation,
l'anticorps monoclonal marqué PhoA anti-p24 du
VIH, et les antigènes anti-VIH-1 et anti-VIH-2
marqués PhoA forment un sandwich avec des
microparticules capturées par l'antigène p24 du VIH
et les anticorps anti-VIH-1 ou anti-VIH-2
respectivement. Ensuite, les microparticules sont
magnétiquement capturées tandis que d'autres
substances non liées sont éliminées par lavage.
Dans la seconde étape, la solution de substrat est
ajoutée dans la cuve de réaction. Le substrat est
catalysépar PhoA dans le complexe immun capturé
sur les microparticules. La réaction de
chimiluminescence résultante est mesurée en
unités relatives de lumière (RLU) par un
photomultiplicateur intégré au système. Il existe
une relation directe entre la quantitéd'antigène p24
et d'anticorps anti-VIH-1 ou anti-VIH-2 ou les deux
dans l'échantillon et les RLU produites au cours de la
réaction. La présence ou l'absence de l'antigène p24
du VIH et d'anticorps anti-VIH-1 ou anti-VIH-2 dans
l'échantillon est déterminée par la comparaison du
signal chimiluminescent dans la réaction au signal
de la valeur seuil déterminéàpartir de l'étalonnage.
Un index de seuil (COI) est calculé par le rapport
RLU de l'échantillon/valeur RLU seuil.
Composants du réactif
Le kit de réactif est composéde quatre composants:
Ra, Rb, Rc et Rd. Le composant ne peut être
remplacé, et les informations détaillées de chaque
composant sont indiquées ci-dessous:
Microparticules paramagnétiques
recouvertes d'antigènes recombinants
spécifiques anti-VIH-1/2 (E. Coli) et de
Ra
l'anticorps monoclonal p24 du VIH (IgG
de souris) dans un tampon HEPES avec
conservateur.
Antigènes recombinants spécifiques
anti-VIH-1/2 marqués PhoA (E. Coli) et
Rb anticorps monoclonal p24 du VIH (IgG de
souris) dans un tampon TRIS avec
conservateur.
Diluants d'échantillon dans un tampon
Rc
TRIS avec conservateur.
Inhibiteurs dans un tampon TRIS avec
Rd
conservateur.
La position de chaque composant est représentée
sur la figure ci-dessous (vue avant sur la gauche et
vue de dessus àdroite):
VIH Page 1 sur 2
Stockage et stabilité
Le kit non ouvert de réactif du VIH est stable jusqu'à
un an complet lors qu'il est conservéentre 2 et 8 °C.
La date de péremption effective est indiquée sur
l'étiquette.
Le kit non ouvert de réactif du VIH peut être
conservé àbord entre 2 et 8 °C et utilisé pendant
28 jours maximum après ouverture.
Préparation du réactif
Ra: prêt àl'emploi
Rb: prêt àl'emploi
Rc: prêt àl'emploi
Rd: prêt àl'emploi
Matériel nécessaire, mais non fourni
Analyseur de dosage immunologique par
chimiluminescence Mindray série CL
Cat. N°HIV211: Calibrateurs VIH, 1 × 2,0 ml pour
chaque niveau de calibrateur C0 et C1
Cat. N° HIVN311: Contrôle négatif Ag/Ab du VIH
3 x 2,0 ml
Cat. N° HIVN312: Contrôle négatif Ag/Ab du VIH
6 × 2, ml
Cat. N° HIVP311: Contrôle positif Ag/Ab du VIH,
12 × 2,0 ml
(Contrôle positif Ag du VIH: 6 × 2,0 ml, Contrôle
positif Ab du VIH: 6 × 2,0 ml)
Cat. N° HIVP312: Contrôle positif Ag/Ab du VIH,
6 × 2,0 ml
(Contrôle positif Ag du VIH: 3 × 2,0 ml, Contrôle
positif Ab du VIH: 3 × 2,0 ml)
Cat. N°CS511: Solution de substrat, 4 × 115 ml
Cat. N°WB411: Tampon de lavage
Cuve de réaction
Système de la machine
Analyseur de dosage immunologique par
chimiluminescence Mindray série CL
Prélèvement et préparation des
échantillons
Le sérum humain, le plasma de l'héparine ou le
plasma citraté conviennent au test. Le sérum
humain est recommandé.
Les échantillons doivent être séparés des caillots ou
des hématies par centrifugation, comme
recommandé par le fabricant du tube une fois la
formation de caillots terminée. Les échantillons
doivent être testés dès que possible après leur
prélèvement et leur traitement pré-analytique.
Testez les échantillons dans un délai de deux heures
après la centrifugation. Si le test n'est pas effectué
dans les 12 heures, transférez le surnageant dans
des tubes de stockage. Les échantillons doivent être
hermétiquement fermés et réfrigérés entre 2 et
8 °C. Si le test doit être retardéde plus de 7 jours,
les échantillons doivent être congelés à -20 °C ou
en dessous.
Evitez les cycles de gel et de dégel qui peuvent
provoquer une détérioration de l'échantillon.
L'échantillon peut être utilisépendant cinq cycles de
gel et de dégel maximum. Les échantillons congelés
auparavant doivent être délicatement et
soigneusement mélangés après la décongélation et
centrifugés à10 000 g pendant 10 minutes.
N'utilisez pas l'échantillon dans les conditions
suivantes:
 Inactivépar la chaleur
 Grossièrement hémolysé
 Contamination microbienne évidente
 Fibrine ou autres débris visibles
Procédure du dosage
Pour des performances optimales de ce dosage, les
opérateurs doivent lire attentivement le manuel
d'utilisation du système concerné, afin d'obtenir
suffisamment d'informations telles que les
instructions de fonctionnement, la préservation et la
gestion des échantillons, les précautions de sécurité
et la maintenance. Préparez également tout le
matériel requis pour le test.
Avant de charger le kit de réactif du VIH sur la
machine pour la première fois, le flacon de réactif
non ouvert doit être retournédélicatement au moins
30 fois pour remettre en suspension les
microparticules qui se sont déposées pendant le
transport ou le stockage. Inspectez visuellement le
flacon pour vous assurer que les microparticules ont
bien été mélangées. Si les microparticules restent
collées au flacon, continuez àle retourner jusqu'àce
que les microparticules soient complètement
mélangées. Si les microparticules ne se mélangent
pas, il est recommandéde ne pas utiliser ce flacon
de réactif. Contactez le service clientèle de Mindray
pour obtenir de l'aide. Ne pas retourner un flacon de
réactif ouvert.
Ce dosage nécessite 100 μl du volume de
l'échantillon pour un seul test. Ce volume ne
comprend pas le volume mort du récipient
d'échantillon. Un volume supplémentaire est
nécessaire lors de l'exécution de tests
supplémentaires du même échantillon. Les
opérateurs doivent se référer au manuel
d'utilisation du système et aux exigences
spécifiques du dosage afin de déterminer le volume
d'échantillon minimal.
Etalonnage
Les informations d'étalonnage sont stockées dans le
code à barres sur la cartouche du réactif et du
calibrateur. Lors de l'étalonnage, commencez par
numériser les informations du code àbarres dans le
système, puis testez les calibrateurs àdeux niveaux.
L'étalonnage est nécessaire avant tout test de VIH.
Un nouvel étalonnage est recommandé toutes les
4 semaines, quand un nouveau lot de réactif est
utiliséou quand les contrôles qualitésont hors des
plages spécifiées. Pour des instructions détaillées
sur la calibration, reportez-vous au manuel
d'utilisation du système.
Contrôle
Pour vérifier la fiabilitédu système de dosage, des
contrôles qualité doivent être effectués au moins
une fois toutes les 24 heures, après le chargement
d'une nouvelle cartouche de réactif ou après chaque
étalonnage. Les deux contrôles pour ce dosage sont
le Contrôle négatif et le Contrôle positif du VIH
Mindray.
Les résultats du contrôle qualité doivent être dans
les plages acceptables. Si un contrôle est hors de la
plage spécifiée, les résultats de test associés ne
sont pas valides et les échantillons doivent être
testés à nouveau. Une recalibration peut être
nécessaire. Consultez le manuel d'utilisation du
système pour vérifier le système. Si les résultats du
contrôle qualité sont toujours hors des plages
2020-04
spécifiées, veuillez contacter le service clientèle de
Mindray pour obtenir de l'aide.
Calcul
L'analyseur série CL calcule le signal RLU moyen des
calibrateurs C1 et C0.
L'analyseur série CL calcule un résultat VIH basésur
le rapport RLU de l'échantillon/valeur RLU seuil
(Index de seuil, COI) pour chaque échantillon et
contrôle.
Valeur RLU seuil = [(RLU moyenne du C1 - RLU
moyenne du C0) x Coefficient d'étalonnage] + RLU
moyenne du C0
Le coefficient d'étalonnage est spécifique àchaque
lot de réactifs et de calibrateurs.
COI = RLU de l'échantillon/valeur RLU seuil
Dilution des échantillons
Les échantillons ne peuvent pas être dilués avec le
dosage du VIH Mindray.
Interprétation des résultats
Les échantillons avec un COI<1,00 sont non réactifs
dans le dosage du VIH Mindray. Ces échantillons
sont diagnostiqués comme négatifs au VIH, et ne
nécessitent pas d'autres tests.
Les échantillons avec un COI I≥1,00 présentent une
réactivitéinitiale.
Tous les échantillons qui présentent une réactivité
initiale doivent être transférés vers un tube à
centrifuger et centrifugés à ≥10 000 FCR (force
centrifuge relative) pendant 10 minutes, et
re-testés en double.
Si le COI est <1,00 dans les deux tests de
confirmation, l'échantillon est diagnostiquécomme
négatif à l'antigène p24 du VIH et aux anticorps
anti-VIH-1/2.
Si le COI est ≥1,00 dans l'un des tests de
confirmation, l'échantillon est diagnostiquécomme
réactif de manière répétée et est positif soit à
l'antigène p24 du VIH soit aux anticorps
anti-VIH-1/2, ou positif aux deux.
Les échantillons réactifs de manière répétée doivent
être confirmés conformément à la procédure de
confirmation recommandée par l'autorité de
réglementation, tels que le transfert Western et les
tests ARN du VIH.
Limitation de mesure
Le résultat VIH d'un échantillon donné, selon les
dosages de différents fabricants, peut varier en
raison de différences dans les méthodes de dosage,
l'étalonnage et la spécificitédu réactif.
Le dosage du VIH série CL peut ne pas détecter tous
les individus infectés. Un résultat négatif n'exclut
pas la possibilitéd'exposition au VIH ou d'infection
par le VIH. Les anticorps anti-VIH et/ou l'antigène
p24 peuvent ne pas être détectés àcertains stades
de l'infection et en fonction de certains états
cliniques. Un résultat négatif n'exclut pas
complètement la possibilité d'une infection par le
VIH. Les échantillons issus de la phase très précoce
(pré-séroconversion) ou de la phase tardive de
l'infection par le VIH peuvent parfois donner des
résultats négatifs. Cependant, des variantes
inconnues du VIH peuvent également donner un
résultat négatif.
Comme pour tous les tests contenant des anticorps
monoclonaux de souris, des résultats anormaux
peuvent être obtenus à partir d'échantillons
prélevés sur des patients ayant reçu des anticorps
monoclonaux de souris àdes fins de diagnostic ou
de traitement, dans de rares cas.
Les résultats du dosage doivent être utilisés avec
Réf.: 046-003271-00 (8.0) Français-7
d'autres données, comme les symptômes, les
résultats d'autres tests, les antécédents cliniques,
etc. pour prendre des décisions cliniques.
La présence d'antigènes VIH ou d'anticorps anti-VIH
ne représente pas un diagnostic de SIDA.
Caractéristiques des performances
Sensibilité
Le seuil de sensibilitépour l'antigène p24 du VIH est
<2 IU/ml. La précision de mesure est conforme àla
norme internationale de l'OMS sur l'antigène p24 du
VIH (code NIBSC: 90/636).
505 échantillons ont étédiagnostiqués cliniquement
comme infectés par le VIH et classés en état de
maladie. Parmi eux, cinq échantillons sont porteurs
du VIH-1 de type O, 30 sont positifs au VIH-2 et
23 sont positifs àl'antigène p24 du VIH. Le système
de dosage du VIH Mindray CL-2000i a détecté
505 échantillons positifs, avec un taux de
coïncidence positif de 100 %.
Précision
Le dosage du VIH série CL est conçu pour avoir une
précision ≤10 % (CV dans l'appareil). La précision a
été déterminée en suivant le protocole EP5-A2 du
Comité national pour les normes de laboratoire
cliniques (NCCLS)16. Trois niveaux de contrôles
qualité ont été testés en double dans deux séries
distinctes par jour, sur un total de 20 jours, en
utilisant un seul lot de réactifs et une courbe
d'étalonnage unique. Les données de précision sont
résumées dans le tableau ci-dessous.
CV au CV
Echan- Moyenne sein entre CV dans
tillon (COI) d'une les l'appareil
analyse séries
Contrôle
0,14 2,42% 3,44% 6,46%
négatif
Contrôle
6,95 1,15% 2,98% 3,40%
positif 1
Contrôle
5,95 1,18% 3,02% 3,66%
positif 2
Spécificité
Les résultats des échantillons chargés en
hémoglobine jusqu'à 500 mg/dl, bilirubine jusqu'à
20 mg/dl, triglycérides jusqu'à 3 000 mg/dl,
protéine totale jusqu'à10 g/dl, facteur rhumatoï de
(FR) jusqu'à1 500 IU/ml, anticorps anti-ADN (ANA)
jusqu'à400 U/l ou anticorps de souris anti-humain
(HAMA) ne sont pas affectés (critère : récupération
dans ± 10 % de la valeur initiale).
Les kits de VIH Mindray ont étéévalués pour leurs
substances réactives croisées potentielles
provenant d'individus présentant un état de santé
sans lien avec le VIH. Au moins 5 échantillons
contenant chacun une substance potentiellement
interférente parmi les suivantes (VHA, anti-HBs,
VHC, HEV, HGV, Anti-HTLV-I/II, HBsAg, TP, EBV, RV,
VC, HSV-1, Toxo, Rubéole, E.coli, levures, et
lentivirus) sont testés par le dosage du VIH Mindray
et un kit de réactif de référence. Tous les résultats
sont cohérents entre le dosage Mindray et le dosage
de référence.
1 021 échantillons ont étédéclarés négatifs par des
méthodes de référence. Le système de dosage du
VIH Mindray CL-2000i a détecté1 019 échantillons
négatifs, tandis que 2 ont étédiagnostiqués positifs,
avec une spécificitédiagnostique de 99,8 %.
VIH Page 2 sur 2
Avertissements et précautions 7. Peeters M, Gueye A, Mboup S, et al.
1. Pour le diagnostic in vitro uniquement. Geographical distribution of HIV-1 group O
viruses in Africa. AIDS 1997; 11:493-8.
2. Suivez toutes les règles de manipulation de
8. Gao F, Yue L, Robertson DL, et al. Genetic
réactifs de laboratoire et prenez les précautions
de sécuriténécessaires. diversity of human immunodeficiency virus
type 2: evidence for distinct sequence
3. En raison des différences dans les méthodes et la subtypes with differences in virus biology.
spécificitédes anticorps, les résultats de test d'un
J Virology 1994; 68:7433-47.
même échantillon peuvent être différents en
9. Sarngadharan MG, Popovic M, Bruch L, et al.
utilisant des kits de réactif de fabricants différents
sur le système Mindray, ou en utilisant des kits de Antibodies reactive with human T-lymphotropic
réactif Mindray sur d'autres systèmes. retroviruses (HTLV-III) in the serum of patients
with AIDS. Science 1984; 224:506-8.
4. N'utilisez pas les kits de réactif au-delà de la
10. Allan JS, Coligan JE, Barin F, et al. Major
date de péremption.
glycoprotein antigens that induce antibodies in
5. N'utilisez pas de réactifs provenant de
AIDS patients are encoded by HTLV-III.
différents lots de réactif. Science 1985; 228:1091-4.
6. Maintenez toujours la cartouche de réactif en
11. Barin F, McLane MF, Allan JS, et al. Virus
position verticale afin de vous assurer envelope protein of HTLV-III represents major
qu'aucune microparticule n'a étéperdue avant
target antigen for antibodies in AIDS patients.
utilisation. Science 1985; 228:1094-6.
7. Il n'est pas recommandé d'utiliser une 12. Hunt JC, Johnson-Paepke J, Boardway K, et al.
cartouche de réactif ouverte depuis plus de Discrimination between HIV-1 and HIV-2
28 jours. seropositive individuals using mouse
8. La fiabilitédes résultats du dosage ne peut être monoclonal antibodies directed to HIV
garantie si les instructions de cette notice ne transmembrane proteins. AIDS Res Hum
sont pas respectées. Retroviruses 1990;6: 883-98.
9. Tous les échantillons et déchets de réactions 13. Clavel F, Guyader M, Gutard D, et al. Molecular
doivent être considérés comme cloning and polymorphism of the human
potentiellement à risque biologique. Les immune deficiency virus type 2. Nature 1986;
échantillons et les déchets de réactions doivent 324:691-5.
être manipulés en conformité avec les 14. Allain J-P, Laurian Y, Paul DA, et al. Serological
règlements et les directives locales. markers in early stages of human
10. La fiche d'information sur la sécurité du immunodeficiency virus infection in
matériel (FDSM) est disponible sur demande. haemophiliacs. Lancet 1986; 2(8518):1233-6.
15. Goudsmit J, De Wolf F, Paul DA, et al.
Symboles graphiques Expression of human immunodeficiency virus
antigen (HIV-Ag) in serum and cerebrospinal
fluid during acute and chronic infection. Lancet
1986; 2(8500):177-80.
16. CLSI. EP5-A2: Vol. 24, No. 25, Evaluation of
Precision Performance of Quantitative
Measurement Method; Approved Guideline –
Second Edition.
© 2017 Shenzhen Mindray Bio-Medical Electronics
Co., Ltd.
Tous droits réservés
Bibliographie
1. Schochetman G, George JR, editors. Test SIDA: Fabricant: Shenzhen Mindray Bio-Medical
A Comprehensive Guide to Technical, Medical, Electronics Co., Ltd.
Social, Legal, and Management Issues. 2nd ed.
Adresse: Mindray building, Keji 12th Road South,
New York: NY Springer-Verlag; 1994.
Hi-tech Industrial Park, Nanshan, Shenzhen 518057,
2. Barre-Sinoussi F, Chermann JC, Rey F, et al.
République populaire de Chine
Isolation of a T-lymphotropicretrovirus from a
Adresse de courrier électronique:
patient at risk for acquired immune deficiency
service@mindray.com.cn
syndrome (AIDS). Science 1983; 220:868-71.
3. Clavel F, Guetard D, Brun-Vezinet F et al. Tél.: +86-755-81888998
Isolation of a new human retrovirus from West
Fax: +86-755-26582680
African patients with AIDS. Science 1986;
233:343-6.
4. Peeters, M. Recombinant HIV sequences: their
role in the global epidemic. In: Kuiken C, Foley
B, Hahn B, et al, editors. HIV Sequence
Compendium 2000. Los Alamos, NM: Los
Alamos National Laboratory, 2000:54-73.
(Disponible en ligne sur le site
http://hiv-web.lanl.gov)
5. Khouri ME, et al. Hepatitis B: Epidemiological,
immunological, and serological considerations
emphasizing mutation. Rev. Hosp. Clin. Fac.
Med. S. Paulo 2004 ; 59(4):216-224.
6. Ayouba A, Souquieres S, Njinku B, et al. HIV-1
group N among HIV-1-seropositive individuals
in Cameroon. AIDS 2000; 14:2623-5.
2020-04