Machine Translated by Google

Báo cáo Hóa sinh và Lý sinh 5 (2016) 35–54

Danh sách nội dung có sẵn tại ScienceDirect

Báo cáo Hóa sinh và Lý sinh

trang chủ tạp chí: www.elsevier.com/locate/bbrep

Cảm biến sinh học dựa trên phát hiện lactate điện hóa: A

đánh giá toàn diện

b
Kavita Rahee , Vikas Dhull , Rekha Dhull
MỘT
Một Một

, Sandeep Singh
Khoa Hóa sinh, Đại học Maharshi Dayanand, Rohtak 124001, Ấn Độ
Một

b
Khoa Công nghệ Sinh học & Nano, Đại học Khoa học & Công nghệ Guru Jambheshwar, Hisar 125001, Ấn Độ

thông tin bài viết trừu tượng

Lịch sử bài viết: Phát hiện Lactate đóng một vai trò quan trọng trong chăm sóc sức khỏe, công nghiệp thực phẩm và đặc biệt cần thiết trong
Nhận vào ngày 17 tháng 9 năm 2015 các tình trạng như xuất huyết, suy hô hấp, bệnh gan, nhiễm trùng huyết và thiếu oxy mô. Thông thường
Nhận được ở dạng sửa đổi
phương pháp xác định lactate không chính xác và nhanh chóng nên điều này làm tăng nhu cầu về độ nhạy
8 tháng 11 năm 2015
cảm biến sinh học để sàng lọc lactate hiệu suất cao trong các mẫu khác nhau. Đánh giá này tập trung vào các ứng dụng và
Được chấp nhận ngày 10 tháng 11 năm 2015
phát triển các cảm biến sinh học điện hóa khác nhau dựa trên việc phát hiện lactate dưới dạng lactate
Có sẵn trực tuyến vào ngày 11 tháng 11 năm 2015
là chất chuyển hóa thiết yếu trong con đường trao đổi chất kỵ khí. Một nghiên cứu so sánh để tóm tắt các cảm biến sinh
Từ khóa: học L-lactate trên cơ sở các đặc tính phân tích khác nhau về chế tạo, độ nhạy, giới hạn phát hiện, độ tuyến tính, thời
lactat
gian đáp ứng và độ ổn định bảo quản đã được thực hiện. Nó cũng đề cập đến những giá trị và
Cảm biến sinh học
nhược điểm của cảm biến sinh học lactate dựa trên enzyme hiện nay. Cảm biến sinh học Lactate có hai loại chính – lactate
Lactate oxydase
dựa trên oxidase (LOD) và lactate dehydrogenase (LDH). Các chất hỗ trợ khác nhau đã được thử nghiệm để sản xuất lactate
Lactate dehydrogenase
Vật liệu nano cảm biến sinh học bao gồm màng, ma trận polyme dẫn điện hoặc không dẫn điện, gel trong suốt
ma trận, chất hỗ trợ hydrogel, điện cực in lưới và hạt nano. Tất cả các ví dụ trong những hỗ trợ này
các danh mục đã được thảo luận một cách khéo léo. Cuối cùng, bài đánh giá này bao gồm kết luận và triển vọng mới nổi
trong tương lai của cảm biến lactate.
& 2016 Được xuất bản bởi Elsevier BV Đây là bài viết truy cập mở theo giấy phép CC BY-NC-ND
(http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/).

Nội dung

1. Giới thiệu . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 36

2. Enzyme tham gia vào cảm biến sinh học lactate . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 36

2.1. Lactate oxydase (LOD). . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 37

2.2. Lactate dehydrogenase (LDH hoặc LD). . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 37

3. Cảm biến sinh . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 37

3.1. học Nguyên lý cơ bản của cảm biến sinh học điện hóa . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 37
3.2. Vật liệu điện cực . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 38

4. Cố định enzyme 5. Hệ thống chuyển . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 38

điện tử. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .39.

6. Người hòa giải . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 40
7. Yếu tố hiệu suất. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 40

8. Phân loại cảm biến sinh học L-lactate 8.1. Màng . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 48

dùng trong chế tạo cảm biến sinh học L-lactate . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 49
8.1.1. Hỗ trợ được sử dụng để cố định. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 49

8.1.2. Ưu điểm . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 49

8.1.3. Nhược điểm. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 49

.

8.2. Cảm biến sinh học LDH dựa trên nền polyme 8.2.1. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 49

Cảm biến sinh học L-lactate dựa trên ma trận polymer không dẫn điện . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 49

8.2.2. Cảm biến sinh học L-lactate dựa trên ma trận polymer . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 50

8.3. Cảm biến sinh học lactate dựa trên Sol–gel. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 50

N
Đồng tác giả.
Địa chỉ email: sandeep_rtk@yahoo.com (S. Singh).

http://dx.doi.org/10.1016/j.bbrep.2015.11.010
2405-5808/& 2016 Được xuất bản bởi Elsevier BV Đây là bài viết truy cập mở theo giấy phép CC BY-NC-ND (http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/).
Machine Translated by Google

36 K. Rahee và cộng sự. / Báo cáo Hóa sinh và Lý sinh 5 (2016) 35–54

8.3.1. Chất hỗ trợ gel Sol được sử dụng để cố định enzym. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 50 50

8.3.2. Ưu điểm 8.3.3. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

Nhược điểm. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .50

8.4. Cảm biến sinh học lactate dựa trên hydrogel 50 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

8.4.1. Chất hỗ trợ hydro gel được sử dụng để cố định enzym. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 50

8.4.2. Ưu điểm 8.4.3. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 50

Nhược điểm. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .50

8,5. Cảm biến sinh học lactate dựa trên điện cực in màn hình (SPE) 50 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

8.5.1. Chất hỗ trợ được sử dụng để cố định enzyme. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 50

8.5.2. Công trạng . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 50

8.6. Cảm biến sinh học L-lactate dựa trên hạt nano (NP) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 51

8.6.1. Các chất hỗ trợ hạt nano được sử dụng để cố định enzyme. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 51
8.6.2. Ưu điểm 9. Ứng . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 51

dụng thực tế của cảm biến sinh học L-lactate 10. Kết luận và triển . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 51

vọng trong tương lai. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 51

Nhìn nhận . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 51

Phụ lục A. Tài liệu bổ sung. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 51

Người giới thiệu . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 52

1. Giới thiệu thể lực trong môn điền kinh. Mức độ lactate trong máu khi tập thể dục được sử dụng

như một chỉ báo về tình trạng tập luyện thể thao và thể lực kể từ khi
Nồng độ Lactate đã được sử dụng rộng rãi như một thông số chính nồng độ lactate trong máu tăng cao dẫn đến độ pH trong cơ thể giảm
trong chẩn đoán lâm sàng để đánh giá tình trạng sức khoẻ của bệnh nhân máu cuối cùng dẫn đến mệt mỏi.
và nghiên cứu bệnh tật cũng như giám sát liên tục trong phẫu thuật Tầm quan trọng của việc ước tính lactate cũng có thể được tìm thấy trong nhiều

[1,2], y học thể thao [3], sốc/chấn thương [4] và công nghiệp thực phẩm công nghiệp thực phẩm và lên men. Các sản phẩm lên men như
[5,6]. Nồng độ lactate cơ bản trong máu dao động từ 0,5 đến sản phẩm sữa lên men, rượu vang, thịt và cá đã qua xử lý cũng như
1,5 mmol/l khi nghỉ ngơi [1] nhưng có thể tăng lên tới 25 mmol/L trong thời gian rau muối sản xuất lactate. Vì thực tế này, lactate là
gắng sức mãnh liệt [7]. Lactate là chất chuyển hóa quan trọng của vi sinh vật kỵ khí thường được sử dụng như một chỉ số cụ thể về sự hiện diện của vi khuẩn

con đường trao đổi chất. Khi nhu cầu năng lượng của các mô không thể quá trình lên men, do đó như một chỉ số cho độ tươi và chất lượng của

được đáp ứng bởi hô hấp hiếu khí, sự gia tăng nồng độ lactate thức ăn [16]

sẽ xảy ra từ quá trình chuyển hóa kỵ khí. Không có đầy đủ Như đã đề cập ở trên, rõ ràng lactate là một chất chuyển hóa có

thanh thải qua gan và thận, nồng độ tích lũy của đã gợi lên sự quan tâm lớn trong nhiều ngành công nghiệp vì tầm quan trọng của

axit lactic dẫn đến nhiễm axit lactic [8]. Vì vậy việc sản xuất và phát hiện và đo lường sự tồn tại của nó trong các phương tiện truyền thông khác nhau. Phân tích

Việc sử dụng lactate được kiểm soát chặt chẽ bằng cân bằng nội môi lactate Các phương pháp được sử dụng phổ biến nhất để xác định lactate là sắc ký lỏng

ở một người khỏe mạnh. Cân bằng lactate có ý nghĩa quan trọng đối với axit-bazơ hiệu năng cao (HPLC)
cân bằng nội môi, vì sự hình thành lactate có liên quan đến việc tăng cường [17] với các phương pháp khác là đo huỳnh quang [18], thử nghiệm đo màu

nồng độ proton bên trong tế bào và việc sử dụng [19,20], phát quang hóa học [21] và quang phổ cộng hưởng từ [22,23]. Mặc dù

lactate và tái tạo bicarbonate là cần thiết để chống lại các phương pháp này mang lại kết quả nhưng chúng

cân bằng việc sản xuất proton và mất bicarbonate [9]. gặp phải những hạn chế như yêu cầu tốn thời gian của mẫu

Sự tương tác được điều chỉnh tinh vi của các thông số ảnh hưởng đến hệ thống tiền xử lý, tốn kém do yêu cầu máy móc đắt tiền

cân bằng lactate tinh tế là cần thiết bởi vì cơ thể chúng ta và nhân lực được đào tạo. Tuy nhiên, cảm biến sinh học có thể khắc phục được những điều này

chỉ khả thi trong phạm vi pH cực kỳ hẹp (giữa pH những hạn chế. Khi so sánh với các phương pháp khác nhau có sẵn để phát hiện

7.2 và 7.4) [10]. Về mặt lâm sàng, nguyên nhân gây nhiễm toan lactic có thể L-lactate, phương pháp cảm biến sinh học có những ưu điểm là

được phân loại theo hai cách: rối loạn loại A, trong đó có sự giảm đơn giản, trực tiếp và theo thời gian thực mà không cần chuẩn bị trước mẫu

oxy hóa mô như sốc, suy thất trái, (có lẽ ngoại trừ việc pha loãng mẫu), kết hợp

nhiễm trùng huyết và ngộ độc carbon monoxide và xyanua; hoặc gõ phản ứng nhanh với độ đặc hiệu cao, tiết kiệm và thân thiện với người sử dụng

Rối loạn B, do một số loại thuốc/độc tố gây ra, cùng với các bệnh toàn thân [24].

bệnh, bao gồm suy thận và suy gan, tiểu đường và Trong bài đánh giá hiện tại này, chúng tôi đã giới thiệu ngắn gọn về sự phát triển

bệnh ác tính hoặc rối loạn chuyển hóa bẩm sinh [11]. Theo dữ liệu của Medi- và ứng dụng của cảm biến sinh học L-lactate. Chúng tôi cũng đã tóm tắt các

care và tài liệu được xuất bản vào năm 2000, ước tính Cảm biến sinh học dựa trên L-lactate bằng cách so sánh các cảm biến phân tích khác nhau của chúng

4,4 triệu bệnh nhân nhập viện ICU ở Mỹ hàng năm, trong đó các đặc tính về mặt chế tạo, độ nhạy, giới hạn phát hiện, độ chính xác tuyến

khoảng 25% số bệnh nhân trên bị nhiễm trùng huyết (điều này là do tính, thời gian đáp ứng và độ ổn định khi lưu trữ. Cùng với điều này

phản ứng gây đông máu và viêm toàn thân) [12]. Khi ưu điểm và nhược điểm của cảm biến sinh học lactate dựa trên enzyme hiện nay

tình trạng này kết hợp với một hoặc nhiều rối loạn chức năng cơ quan quan đã được làm nổi bật. Cuối cùng, đánh giá này bao gồm kết luận và triển vọng

trọng, bệnh nhân sẽ bị nhiễm trùng huyết nặng. Tỷ lệ tử vong mới trong tương lai của cảm biến lactate.

tỷ lệ nhiễm trùng huyết được ước tính khoảng 30–50%, tương ứng với

ít nhất 225.000 ca tử vong hàng năm [13,14]. Các nghiên cứu gần đây đã cho thấy

thanh thải lactate sớm có thể cải thiện kết quả điều trị 2. Enzyme tham gia vào cảm biến sinh học lactate
trong nhiễm trùng huyết nặng và sốc nhiễm trùng, có khả năng dẫn đến

giảm tỷ lệ tử vong liên quan đến nhiễm trùng huyết [15]. Vì vậy, nồng độ lactate máu Khái niệm về điện cực cảm biến sinh học kết hợp enzyme liên quan đến việc
của bệnh nhân có thể đóng vai trò là tín hiệu cảnh báo về mức độ nghiêm trọng của bệnh. đặt enzyme ở gần điện cực

bệnh và cũng có thể được sử dụng để cải thiện việc chẩn đoán và điều trị nhiều bề mặt. Enzym tham gia phải xúc tác cho phản ứng

loại bệnh. Lactate cũng có tác dụng đáng kể liên quan đến việc tiêu thụ chất phản ứng điện động hoặc tạo ra

quan trọng trong y học thể thao, đặc biệt là để xác định thể chất các loại có tính điện động. Quá trình cạn kiệt hoặc sản xuất sau đó được
Machine Translated by Google
K. Rahee và cộng sự. / Báo cáo Hóa sinh và Lý sinh 5 (2016) 35–54
được theo dõi và đưa ra phép đo trực tiếp của chất phân tích
sự tập trung.
Các enzyme khác nhau đã thu hút sự chú ý trong việc tách lactate như
một trường hợp thử nghiệm cho một số ứng dụng sinh học. bên trong
chế tạo cảm biến sinh học L-lactate, yếu tố nhận dạng logic sinh học được
sử dụng phổ biến nhất là L-lactate dehydrogenase (LDH) và
L-lactate oxyase (LOD) do sự phổ biến của enzym đơn giản
phản ứng liên quan và thiết kế cảm biến đơn giản đáng kể
sự bịa đặt.
2.1. Lactate oxydase (LOD)
L-LOD (EC 1.13.12.4), có thể thu được flavoprotein hình cầu
từ nhiều nguồn vi khuẩn khác nhau như Pediococcus, Aerococcus
viridans và Mycobacteria smegmatis. Nó xúc tác quá trình oxy hóa
L-lactate thành pyruvate với sự có mặt của oxy hòa tan và
tạo thành hydrogen peroxide, có hoạt tính điện hóa và
có thể bị khử hoặc bị oxy hóa để tạo ra dòng điện tỉ lệ với
nồng độ L-lactate [25,26].
Nguyên lý của cảm biến sinh học điện hóa dựa trên LOD
phản ứng đã được mô tả dưới đây.
Tuy nhiên, hydrogen peroxide được tạo ra bởi phản ứng enzyme đòi hỏi
khả năng oxy hóa cao, từ đó dẫn đến
nhiễu gây ra bởi các loài có khả năng oxy hóa điện. Hơn nữa,
sự dao động nồng độ oxy trong dung dịch mang lại
độ phức tạp của hệ thống, ảnh hưởng đến giới hạn phát hiện và dẫn đến
tốn kém và làm cho việc thu nhỏ trở thành một nhiệm vụ khó khăn đối với
các ứng dụng thực tế. Một cách để khắc phục các vấn đề liên quan đến oxy
nồng độ là sử dụng L-lactate dehydrogenase.
2.2. Lactate dehydrogenase (LDH hoặc LD)
LDH, một loại protein bậc bốn được tìm thấy ở động vật, thực vật và
sinh vật nhân sơ. Nó có ý nghĩa y tế quan trọng vì nó hiện diện
khắp các mô, chẳng hạn như tế bào máu và cơ tim. Nó là
được giải phóng khi mô bị tổn thương, nên về cơ bản nó hoạt động như một dấu hiệu của
thương tích và bệnh tật thông thường.
L-LDH (EC 1.1.1.27 và EC 1.1.1.28) có hoạt tính xúc tác cao
để chuyển đổi L-lactate thành pyruvate và NADH. LDH thuộc về
lớp oxyoreductase xúc tác quá trình oxy hóa α-hydro-xyaxit. Là một
dehydrogenase, nó chuyển hydrua từ một
phân tử này sang phân tử khác.
L-LDH cũng được sử dụng rộng rãi như một ứng cử viên quan trọng trong
chế tạo cảm biến sinh học [27–29]. Đã có sự cải tiến liên tục các cảm biến
sinh học dựa trên LDH với sự cải tiến thường xuyên về
sử dụng các đầu dò khác nhau và sự sẵn có của các chất có độ tinh khiết cao
enzim. Cảm biến sinh học dựa trên LDH hoạt động với sự có mặt của coen-
zyme (NAD hoặc NADP), hoạt động như chất trung gian đưa các electron giữa
enzyme và điện cực. LDH chuyển hóa L-lactate
thành pyruvate và NAD thành NADH. Trên bề mặt điện cực, NADH
bị oxy hóa dưới ảnh hưởng của điện thế ứng dụng và
dòng oxy hóa tỷ lệ thuận với nồng độ L-lactate trong dung dịch. Nguyên lý
của điện hóa
cảm biến sinh học dựa trên phản ứng LDH và quá trình oxy hóa NADH thành các
electron tạo ra (e) được thể hiện trong Hình 1
Hình 1. Các phản ứng điện hóa liên quan đến cảm biến sinh học LOD.
37
3. Cảm biến sinh học
Cảm biến sinh học là một thiết bị cảm biến bao gồm một bộ phận sinh học
thực thể như một phần quan trọng của quá trình lắp ráp trong quá trình
tách chất phân tích. Một cảm biến sinh học bao gồm hai yếu tố: (i) sinh học
phần tử và (ii) phần tử đầu dò. Thành phần sinh học
(thụ thể sinh học) bao gồm các thụ thể cụ thể được mô hình hóa
sau hệ thống sinh học để tương tác với các chất phân tích quan tâm.
Sự tương tác này được đo bằng cảm biến phát ra tín hiệu có thể đo được tỷ
lệ thuận với sự hiện diện của chất phân tích mục tiêu trong
mẫu. Vì vậy, một loạt các yếu tố sinh học bao gồm cả hạt nhân
axit, kháng thể, enzyme, lectin, bào quan tế bào, mô và vi sinh vật đã
được cố định cho cảm biến sinh học. Cảm biến sinh học
khai thác tính đặc hiệu và độ nhạy của các phân tử nói trên như một
chất phân tích.
Tín hiệu được tạo ra do sự tương tác giữa
phần tử sinh học cố định và chất phân tích có thể mang điện,
quang, nhiệt, v.v. được biến đổi bằng phần tử đầu dò riêng thành thông số
điện có thể đo được
chẳng hạn như dòng điện hoặc điện áp. Độ chọn lọc của cảm biến sinh học đối với
chất phân tích mục tiêu được xác định bởi lớp nhận dạng sinh học, trong
khi độ nhạy phụ thuộc vào đầu dò ( Hình 2 và 3).
Cho đến nay, so với các phương pháp khác nhau có sẵn để phát hiện
của lactate như phương pháp so màu, phát quang hóa học,
phương pháp đo huỳnh quang, sắc ký lỏng hiệu năng cao
(HPLC) và quang phổ cộng hưởng từ, cảm biến sinh học lac-tate bằng cường
độ dòng điện đã đạt được những bước phát triển đáng kể nhất
được cung cấp bởi các ưu điểm như tính đơn giản, tính di động, phản hồi nhanh,
độ đặc hiệu cao, chi phí thấp, chuẩn bị mẫu tối thiểu hoặc không cần chuẩn bị
và vận hành thân thiện với người dùng.
3.1. Nguyên lý cơ bản của cảm biến sinh học điện hóa
Cảm biến sinh học đo cường độ khai thác dòng điện được tạo ra khi
phản ứng oxy hóa hoặc khử xảy ra ở điện cực; hiện hành
Phản ứng sinh ra trong phản ứng tỷ lệ thuận với
nồng độ của loài đó có trong mẫu cụ thể. Do đó, nó
hoạt động bằng cách đo dòng điện được tạo ra khi đặt điện thế giữa điện
cực làm việc và điện cực tham chiếu
dẫn đến quá trình oxy hóa xúc tác điện hoặc khử
các loại chất điện động liên quan. Độ lớn của dòng điện này là
tương quan trực tiếp với nồng độ của thuốc thử có hoạt tính oxi hóa khử
hoặc sản phẩm trong phản ứng enzym. Nhìn chung, cảm biến sinh học để phát
hiện L-lactate trong mô hoặc máu tập trung vào các cảm biến đo cường độ
enzym nhờ thiết kế và hiệu suất đơn giản của chúng.
Enzyme liên quan ở đây phải có khả năng xúc tác cho phản ứng liên quan
đến chất phân tích với việc tiêu thụ chất phản ứng có hoạt tính điện và/
hoặc tạo ra sản phẩm có hoạt tính điện.
Quá trình cạn kiệt hoặc sản xuất sau đó được theo dõi bằng phương pháp đo
ampe và đưa ra phép đo trực tiếp chất phân tích
sự tập trung.
Nói chung các cảm biến sinh học đo cường độ dòng điện dựa trên các enzyme,
hoặc tiêu thụ oxy, ví dụ như tất cả các oxydase, hoặc tạo ra hydro
peroxide (loại trừ nước sản xuất oxyase), hoặc sản xuất gián tiếp dạng
khử β-nicotinamide adenine di-nucleotide như dehydrogenase, với sự phân
hủy xúc tác
của chất nền [30]. Các phương trình tổng quát nêu trên
các loại cảm biến sinh học đo cường độ dòng điện được đưa ra dưới đây trong Hình 4:
Hình 2. Các phản ứng điện hóa liên quan đến cảm biến sinh học LDH.
Machine Translated by Google
38 K. Rahee và cộng sự. / Báo cáo Hóa sinh và Lý sinh 5 (2016) 35–54
Hình 3. Nguyên lý cơ bản của cảm biến sinh học điện hóa.
Hình 4. Sơ đồ biểu diễn việc tạo ra các sản phẩm khác nhau.
3.2. Vật liệu điện cực
Các phép đo cường độ dòng điện thường được thực hiện với một tổ
hợp chứa tế bào điện hóa với hệ thống ba điện cực, bao gồm một enzyme
cố định, điện cực tham chiếu và một điện cực ngược dòng. Điện cực
làm việc là điện cực chính được chế tạo bằng các vật liệu điện động
khác nhau. Sự chuyển điện tử xảy ra ở bề mặt của điện cực làm việc.
Việc lựa chọn điện cực làm việc chủ yếu phụ thuộc vào đặc tính oxy
hóa khử của chất phân tích mục tiêu và dòng điện nền trên vùng điện
thế cần thiết cho phép đo. Một điện thế không đổi được duy trì ở
điện cực làm việc hoặc dãy điện cực làm việc (vật liệu dựa trên kim
loại hoặc carbon) [31]. Điện cực tham chiếu (Ag/AgCl hoặc điện cực
ca-lomel bão hòa) cung cấp điện thế ổn định và có thể tái tạo, để so
sánh điện thế điện cực làm việc. Trong hệ thống ba điện cực, điện
thế đặt vào được kiểm soát bằng cách sử dụng điện cực tham chiếu,
dòng điện chạy qua dung dịch giữa điện cực làm việc và điện cực đếm
được đo. Điện cực đếm duy trì sự ổn định. Trong quá trình chế tạo
cảm biến sinh học L-lactate, vàng và bạch kim là vật liệu điện cực
phổ biến nhất. Ví dụ, người ta thấy rằng với dehy-drogenase, điện
cực làm việc bằng bạch kim ít bị bám bẩn hơn điện cực carbon thủy
tinh [32]. Mặt khác, điện cực làm việc dựa trên carbon được sử dụng
ở dạng dán carbon, bột carbon, sợi carbon, điện cực carbon thủy
tinh, điện cực in lụa với mực in dựa trên than chì hoặc điện cực
than chì. Vì các điện cực carbon dẫn đến sự truyền điện tử chậm nên
chúng ít được khai thác hơn trong chế tạo cảm biến sinh học dựa trên
L-lactate [33].
Diện tích bề mặt điện cực cũng có thể được thay đổi để
tăng độ nhạy của cảm biến sinh học enzyme. Điều này liên quan đến
việc tăng diện tích bề mặt điện cực dẫn đến việc nạp lượng enzyme cao
hơn vào lớp nhận biết. Vật liệu nano đóng vai trò quan trọng trong
việc tăng diện tích bề mặt điện cực và bao gồm các hạt nano như ống
nano carbon (CNTs) [34,35], hạt nano vàng (AuNPs) [36,37], hạt nano
bạch kim (PtNP) [38,39], kim loại các hạt nano dựa trên oxit, tức
là, oxit niobium [40] hoặc oxit molypden [41] và các hạt nano dựa
trên vật liệu bán dẫn như oxit kẽm [42].
4. Cố định enzyme
Cố định enzyme để hoạt động như chất nhận cảm sinh học là một
trong những bước quan trọng nhất trong quá trình phát triển cảm
biến sinh học dựa trên enzyme. Mục tiêu chính là đạt được độ ổn định
sinh học và hiệu quả phản ứng tối ưu của enzyme. Có một số quan trọng
Các yếu tố phải được tính đến khi cố định enzyme. Yếu tố chính là
hiệu suất của điện cực enzyme về độ nhạy, độ chọn lọc, tuổi thọ, dải
tuyến tính, thời gian đáp ứng và độ ổn định. Tính nhạy cảm với các
tác nhân gây nhiễu cũng phải được xem xét vì nó phụ thuộc nhiều vào
phương pháp cố định enzyme. Enzim phải được cố định ở dạng hoạt động
và hoạt tính phải được duy trì mà độ đặc hiệu của chất phân tích ít
bị giảm đi. Độ ổn định của nó cũng phải được duy trì hoặc tốt nhất
là tăng lên để đảm bảo độ ổn định của cảm biến sinh học về khả năng
tái sử dụng và lưu trữ lâu dài. Các loại chất nền (chất mang) mà
enzyme sẽ được cố định cũng cần phải được tính đến. Sự lựa chọn và
điều kiện của chất nền phải phù hợp để enzyme duy trì hoạt động.
Hiện nay có nhiều phương pháp cố định en-zyme bao gồm hấp phụ vật lý,
giam giữ màng, liên kết cộng hóa trị, hình thành liên kết ngang,
trùng hợp điện và cuối cùng là hình thành đơn lớp bằng cách tự lắp
ráp. Phương pháp hấp phụ vật lý dựa vào sự tương tác vật lý không
đặc hiệu giữa protein enzyme và bề mặt của chất nền (như thủy tinh,
nhựa và xenlulo) được tạo ra bằng cách trộn dung dịch enzyme đậm đặc
với chất rắn. Các lực tương tác cơ bản là các liên kết yếu như liên
kết van der waal, liên kết hydro và liên kết muối.
Nhưng kỹ thuật cố định này không phải là phương pháp có thể lặp lại
và đáng tin cậy vì những vấn đề liên quan đến việc lọc trong quá
trình bảo quản lâu dài [43]. Bẫy vật lý liên quan đến việc bẫy enzyme
trong nền polyme hoặc nền sol-gel. Trong đó, enzyme được trộn với
tiền chất sol–gel hoặc với các monome được liên kết chéo thông qua
phản ứng trùng hợp điện, liên kết ngang hình ảnh, liên kết ngang
bằng cách sử dụng chiếu xạ gamma, isocyanate và các tác nhân khác
hoặc các enzyme được bẫy bằng tương tác tĩnh điện. Trong phương pháp
sol–gel, mạng lưới silica gel được hình thành xung quanh enzyme quan
tâm và sự ngưng tụ hóa học [44,45].
Lớp phủ như vậy có tác dụng mở rộng phạm vi tuyến tính bằng cách
giảm nồng độ cơ chất cục bộ và loại bỏ các nhiễu tiềm ẩn (ví dụ: các
loại chất điện động cùng tồn tại). Mặt khác, sự liên kết hóa học của
enzyme cung cấp các bề mặt cảm biến sinh học ổn định, có khả năng
chịu được phạm vi pH, nhiệt độ và ion rộng để đảm bảo độ ổn định
enzyme lâu dài hơn. Tuy nhiên, liên kết cộng hóa trị của enzyme với
chất nền sẽ làm giảm hoạt động của nó. Vì vậy, quá trình liên kết
phải xảy ra trong những điều kiện không làm biến tính enzyme [46].
Quá trình liên kết ngang sử dụng tác nhân hai chức năng để tạo
thành cầu nối giữa các protein xúc tác sinh học khác nhau.
Glutaraldehyde là một ví dụ về thuốc thử liên kết ngang mang lại độ
ổn định cao hơn cho enzyme cố định, mặc dù chắc chắn một số hiện
tượng bất hoạt xảy ra do các hóa chất được sử dụng trong liên kết
ngang có thể chặn vị trí hoạt động có trên enzyme. Cần cẩn thận để
đảm bảo rằng các liên kết chéo giữ lại phân tử và quá trình lọc không
xảy ra [29]. Phương pháp trùng hợp điện liên quan đến quá trình
trùng hợp khi có dòng điện. Màng polyme mong muốn được cho vào thế
oxy hóa thích hợp của monome hoặc phép đo vôn-ampe tuần hoàn liên
tiếp được sử dụng trong vùng điện thế quét dương thích hợp. Kỹ thuật
cố định này được biết là có tác dụng loại trừ các chất gây nhiễu
khỏi bề mặt điện cực. Nó cũng ngăn ngừa sự tắc nghẽn điện cực, từ đó
giúp bảo vệ cấu trúc enzyme [47,28]. Các bề mặt kim loại quý cũng có
thể được chức năng hóa bằng lớp đơn tự lắp ráp (SAM) vì quy trình
này khai thác các phân tử hữu cơ (aliphatic và thơm) có chứa amin,
disulfua, ankanesilanes (R–S–S–R), sul-fides (R–S–R) là nhóm neo tự
do để cố định enzyme.
Quá trình này bao gồm sự lắng đọng các lớp đơn lớp được đóng gói ổn
định và được kiểm soát trực tiếp lên bề mặt đầu dò [48]. Để duy trì
độ ổn định cao của lớp, thông thường n-alkylthiol hoặc silane chuỗi
dài (C12 hoặc cao hơn) được sử dụng vì việc sử dụng độ dài chuỗi ngắn
hơn dẫn đến giảm độ ổn định và ít tổ chức cấu trúc hơn [49] . Trong
phương pháp cố định trên,
Machine Translated by Google

K. Rahee và cộng sự. / Báo cáo Hóa sinh và Lý sinh 5 (2016) 35–54 39

sự sắp xếp không gian và sự định hướng của các enzym có thể được huyết thanh người và sữa thương mại.

được kiểm soát và cũng không có rào cản khuếch tán, nhưng Ma trận dựa trên gel Sol cũng đã được sử dụng cho cảm biến sinh học.

hạn chế lớn tồn tại là tạo ra sự phân lớp có thể tái tạo của Đây là những cấu trúc xốp tương thích sinh học cung cấp không gian

enzym [50]. để tích hợp các hạt có cấu trúc nano, từ đó đóng vai trò

vai trò quan trọng trong việc tăng tốc độ chuyển điện tử. Parra-Alfambra

et al. trình bày một cảm biến sinh học lactate điện hóa bằng cách tích hợp

5. Hệ thống truyền điện tử hạt nano vàng (AuNPs) và enzyme lactate oxidase (LOx) thành

nền polyme sol–gel thu được từ (3-mercaptopropyl)-

Chức năng cảm biến sinh học bằng cường độ dòng điện dựa trên việc đo dòng trimethoxysilane (MPTS) [101]. Điều này dẫn đến một môi trường vi mô thuận lợi
điện liên quan đến sự chuyển giao của điện tử cho LOx bằng cách duy trì hoạt tính xúc tác và kết hợp với AuNP để nạp lượng lớn

từ vị trí hoạt động của enzyme cố định đến vị trí hoạt động LOx và hỗ trợ chuyển điện tử trực tiếp ở điện cực làm việc. Cảm biến

bề mặt điện cực [131]. Nói chung phản ứng chuyển điện tử này ở

thời gian xúc tác của các phân tử sinh học ở bề mặt điện cực bậc 2 rất chậm. Vì thể hiện phản ứng tuyến tính với axit L-lactic trong khoảng 50 μM–

vậy, vật liệu điện cực được sử dụng để cố định các phân tử nhận dạng sinh học 0,25 mM, với độ nhạy cao 3,4 mA mM1 và khả năng phát hiện

trong cảm biến sinh học phải là giới hạn 4,0 μM.

sao cho nó có khả năng vận chuyển điện tử tốt. Khác biệt Ma trận hydrogel đóng vai trò như một mạng lưới polymer có khả năng
chiến lược có thể được sử dụng liên quan đến việc xây dựng ampe kế trương nở trong nước, trong đó các yếu tố nhận biết sinh học được nhúng vào. Zanini
điện cực enzyme để tạo thuận lợi cho quá trình chuyển điện tử trực tiếp et al. báo cáo cảm biến sinh học lactate dựa trên sự cố định L-lactate oxydase
trong việc phát hiện L-lactate. Chúng bao gồm việc sử dụng các phương pháp được sửa đổi qua trung gian trong hydrogel laponite/chitosan trên carbon thủy tinh

enzyme, điện cực được biến đổi bằng màng để chuyển điện tử, điện cực chứa ferrocene-metanol (FcMe) dùng làm nhân tạo

bằng ma trận polyme dẫn điện hoặc không dẫn điện, bằng sol–gel trung gian [86]. Mục đích là để phát triển thành phần hydrogel tốt nhất. Cảm

chất hỗ trợ dựa trên, bằng chất hỗ trợ hydrogel, bằng chất hỗ trợ in trên màn hình hoặc biến sinh học cho thấy phản ứng phân tích tuyệt vời

dụng các hạt nano làm vật liệu điện cực. Một số chiến lược này đã được xem xét với thời gian phản hồi thấp (5 giây). Độ nhạy của

và ứng dụng của chúng đối với cảm biến sinh học L-lactate là (0,32670,003) A cm2 M1 và giới hạn phát hiện là (3,87
mô tả. 0,2) thu được 106 M. Cảm biến được đề xuất phù hợp với

Màng tương thích sinh học với các độ xốp khác nhau đóng vai trò như một định lượng nồng độ lactate trong các mặt hàng sữa và rượu

ma trận cố định thông thường do ứng dụng của chúng giống như đồ uống.

một rào cản chống nhiễu, hoạt động như một điện cực chống bẩn và Điện cực in lụa (SPE) được thu nhỏ dùng một lần

bảo vệ cấu trúc enzyme và có thể dẫn đến tăng tuyến tính thiết bị được sản xuất bằng cách gửi nhiều lần liên tiếp

phản ứng. Độ dày của màng cũng ảnh hưởng đến tốc độ các lớp mực khác nhau trên nền rắn. Carbon in lụa

sự chuyển giao điện tử có thể được điều chỉnh trong quá trình khử vị trí của lớp bề mặt điện cực có thể dễ dàng được sửa đổi bằng các chất trung gian,

màng theo lượng điện tích được áp dụng. polyme dẫn điện hoặc cấu trúc nano để sử dụng trong cảm biến sinh học

Romero và cộng sự. đã chế tạo được máy đo cường độ dựa trên lactate oxidase như một bộ chuyển đổi để cải thiện tốc độ truyền điện tử. Pianoa và cộng sự.
cảm biến cố định trên nền hydrogel mucin/albumin với đã chuẩn bị một cảm biến dựa trên điện cực in trên màn hình cho lactate

màng nafion đóng vai trò như lớp bảo vệ trên bề mặt điện cực [70]. Họ đạt được đo trong huyết thanh [77]. Điện cực carbon in lụa

hiệu quả hoạt động cao hơn đáng kể đã được biến tính bằng muối meldola blue-reinecke. Muối Blue-Reinecke của Meldola

độ ổn định và độ nhạy (0,53770,007) mA M1 . Nghiên cứu của họ hoạt động như một chất trung gian điện tử nhân tạo hỗ trợ

cho thấy màng nafion đóng vai trò là chất hỗ trợ cho quá trình vận chuyển điện tử tốc độ truyền electron giữa bề mặt điện cực SPCE và enzyme LDH nhanh hơn. Cảm

chuyển và do đó tăng tốc độ chuyển điện tử. Hơn nữa nó biến sinh học cho thấy phản ứng tuyến tính

cũng phục vụ như một rào cản đối với axit ascorbic và do đó giảm thiểu trong khoảng 0,55–10 mM và có độ tái lập tốt ở
tác dụng can thiệp của nó. điện thế ứng dụng þ0,05V. Cảm biến đã hiển thị phản hồi

Các polyme dẫn điện dần dần thu hút được sự chú ý như một vật liệu thời gian 10s.

vật liệu cố định các phân tử sinh học nhằm tăng cường Với sự tiến bộ của công nghệ nano, cấu trúc nano

hiệu suất cảm biến. Các polyme dẫn điện có điện cực dựa trên đã đạt được sự công nhận đáng kể trong

tính chất hấp dẫn dẫn đến sự vận chuyển điện tử được cải thiện quy định các đặc tính phân tích của các thiết bị cảm biến sinh học. Các điện cực

năng, độ ổn định và độ nhạy của cảm biến sinh học. Rahman và cộng sự. đã phát dựa trên không có cấu trúc Na cho thấy các đặc điểm độc đáo như

triển cảm biến lactate có độ ổn định cao và độ nhạy cao dựa trên điện cực Au cải Tỷ lệ bề mặt trên thể tích lớn, năng lượng phản ứng bề mặt cao, cao

tiến màng poly-5,2′-5′,2′′-terthiophene-3′-carboxylic (pTTCA)/MWCNT [28] . Nhóm độ nhạy, hiệu suất xúc tác cao, thời gian đáp ứng nhanh và mạnh mẽ

axit cacboxylic khả năng hấp phụ để cố định ổn định các phân tử sinh học. Họ

polymer dẫn điện có chức năng cho phép các vị trí hoạt động khổng lồ hoạt động như một đầu nối điện trực tiếp giữa điện cực khối

lên lớp cảm biến sinh học dẫn đến cố định LDH vật liệu và trung tâm oxy hóa khử của enzyme và ở đó bằng cách tạo điều kiện thuận lợi

thông qua sự hình thành liên kết cộng hóa trị và đóng vai trò là electron sự chuyển điện tử. Vật liệu nano, chẳng hạn như cấu trúc nano oxit kẽm (ZNO),

môi trường chuyển trong quá trình oxy hóa xúc tác điện của NADH. TRONG ống nano carbon (CNT) và hạt nano vàng

đây là LDH cố định trên màng composite pTTCA/MWCNT (AuNP) được nghiên cứu chuyên sâu nhất trong việc chế tạo cảm biến sinh học

khử NADþ thành NADH trong phản ứng sinh hóa với L-lactate. Điều này dẫn đến quá lactate. Nesakumar và cộng sự. chế tạo cảm biến sinh học axit lactic bằng enzyme

trình oxy hóa NADH ở điện cực hoạt động giải phóng hai electron ở hiệu điện thế cố định lactate dehydrogenase với chitosan trên

0,3 V. Màng composit pTTCA/MWCNT hoạt động như chất nhận điện tử và do đó bị khử. Các thanh nano ZnO [132]. Điện cực Au/NanoZnO/LDH này được thể hiện

có giới hạn phát hiện là 4,73nmol L1 và độ nhạy là 1,832 m

Điện cực biến đổi màng composite này kết hợp các đặc tính của Một mmol1 L có thời gian phản hồi dưới 1 giây. ISO cao

MWCNT và polyme dẫn điện và cho thấy phản ứng oxy hóa xúc tác điện tốt ở điện Điểm điện (9.5) của thanh nano ZnO tạo ra enzyme dễ dàng

thế ứng dụng là 0,3 V so với cố định và chuyển điện tử trực tiếp giữa hoạt động

Ag/AgCl với độ nhạy 0,0106 mA/mM và giới hạn phát hiện là vị trí của LDH và bề mặt điện cực và cho thấy một đường tuyến tính

1 μM, dựa trên tỷ lệ tín hiệu/nhiễu là 3. Hiệu suất của phản ứng trong khoảng 0,2–0,8 mmol L1 . Tính ổn định của LDH này

Cảm biến rất xuất sắc về độ nhạy, độ chọn lọc, phản hồi cảm biến sinh học được tìm thấy là 28 ngày. Như vậy có thể kết luận rằng

thời gian và khả năng tái tạo. Hơn nữa, cảm biến thu được còn cho phép ứng dụng đặc tính phân tích của cảm biến sinh học lactate có thể được tối ưu hóa

để đo nồng độ lactate trong thông qua việc kiểm soát quá trình chuyển điện tử.
Machine Translated by Google
40 K. Rahee và cộng sự. / Báo cáo Hóa sinh và Lý sinh 5 (2016) 35–54
6. Người hòa giải
Khi cố định enzyme vào bộ chuyển đổi, bẫy đồng yếu tố xảy ra tại vị trí
hoạt động của enzyme nằm ở một khoảng cách nào đó trong enzyme, do đó nó không
có khả năng phản ứng khi tiếp xúc với bề mặt của điện cực làm việc. Để giải
quyết vấn đề trên, người hòa giải được sử dụng. Chất hòa giải về cơ bản là
một loại chất điện động nhân tạo hoạt động như một chất chuyển điện tử bằng
cách hoạt động như một con thoi hoặc cầu nối giữa đồng yếu tố và điện cực.
Chất trung gian được đồng yếu tố khử thành Mred , sau đó bị oxy hóa trở lại
thành Mox khi nó tiếp xúc với cực dương, được phân cực ở điện thế thích hợp.
Có nhiều lợi ích khác nhau của việc sử dụng các chất trung gian như ngăn ngừa
ô nhiễm điện cực. Cùng với đó, tốc độ chuyển điện tử rất chậm đến bề mặt điện
cực, như trường hợp của nhiều enzym oxi hóa khử, có thể được tăng cường bằng
cách sử dụng các chất trung gian [51]. Việc sử dụng chất trung gian giúp giảm
khả năng khử trong chiến lược cảm biến nhưng cũng gặp phải nhược điểm là một
số loài có thể bị oxy hóa khi áp dụng điện thế, có thể cản trở quá trình phát
hiện do quá tiềm năng. cần thiết cho quá trình oxy hóa trực tiếp NADH hoặc
H2O2 được tạo ra bởi phản ứng enzyme [52] (Hình 5).
Để chọn chất trung gian phù hợp, điều quan trọng là phải xem xét thế năng
cơ bản của các hợp chất tham gia vào quá trình phản ứng. Tiềm năng chính thức
của chất hòa giải phải gần với tiềm năng của thành phần sinh học đang được
nghiên cứu [53]. Để đảm bảo sự chuyển điện tử lành mạnh, chất trung gian phải
ở dạng oxy hóa cũng như dạng khử. Điều này có nghĩa là người hòa giải phải
luôn
huy động gần điện cực. Tuy nhiên, vấn đề chính với hầu hết các chất trung
gian là độ hòa tan trong dung dịch nước và độc tính của chúng, đặc biệt khi
mục tiêu là ứng dụng in vivo.
Các chất trung gian được sử dụng trong cảm biến sinh học lactate có thể
được phân thành 3 loại là polyme dẫn điện, hợp chất kim loại chuyển tiếp và
chất trung gian dựa trên thuốc nhuộm hữu cơ. Các chất trung gian dựa trên
polyme dẫn điện bao gồm các polyme như poly(aniline)–poly(acrylate) [54],
poly(aniline)–poly(vinyl sulfonate) [55], poly(pyrrole) [56], poly(pyrrole)–
poly (vinyl sulfonate) và poly(vinylpyrrolidone)
[57]. Các chất trung gian dựa trên hợp chất kim loại chuyển tiếp bao gồm các
phức chất với màu xanh Phổ [58,59], coban phthalocyanine [60,61], hydroxymethyl
ferrocene [62,63], phức hợp osmium với nhiều loại polyme oxi hóa khử [64].
Loại thứ ba bao gồm các chất trung gian dựa trên thuốc nhuộm hữu cơ như xanh
methylene [65], xanh Meldola [40,66], tetrathiafulvalene [67] hoặc nhóm
quinine [68]. Ví dụ, flavin adenine dinucleotide trùng hợp (FAD) cũng được
khai thác làm chất trung gian trong cảm biến sinh học lactate vì nó thân thiện
với enzyme.
Các cảm biến sinh học được điều chế bằng cách sử dụng các enzyme như lactate
de-hydrogenase (LDH), lactate oxyase (LOD) hoặc men làm bánh (BY) cố định trên
bề mặt điện cực. Các cảm biến cho thấy
tuyến tính tốt, ổn định và độ nhạy [69].
Hình 5. Sơ đồ biểu diễn bộ cảm biến sinh học hoạt động với bộ hòa giải.
7. Yếu tố hiệu suất
Thông tin thiết lập của các cảm biến sinh học dựa trên Lactate khác nhau
được so sánh trong Bảng 1–7 và các đặc tính hiệu suất tương ứng sẽ được thảo
luận. Việc phân loại trong bảng được thực hiện trên cơ sở các chất hỗ trợ
khác nhau được sử dụng để cố định enzyme LDH hoặc LOD trong cảm biến sinh học
lactate. Các thông số cơ bản kiểm soát hiệu suất của cảm biến Lactate về độ
nhạy, độ ổn định khi vận hành, thời gian phản hồi, độ tuyến tính và giới hạn
phát hiện được tổng hợp trong α cùng với các ứng dụng thương mại của chúng.
Giới hạn phát hiện hoặc giới hạn phát hiện (LOD) là đặc tính hiệu suất
quan trọng trong thiết kế thiết lập tối ưu của cảm biến sinh học lactate và
được định nghĩa là nồng độ thấp nhất của chất nền được đo, mang lại tín hiệu
chênh lệch tối thiểu có thể phát hiện được (giảm hoạt động ) có thể được xác
định bằng phương pháp thống kê bằng 2 hoặc 3 độ lệch chuẩn (S.
D.) của phản ứng trung bình của các mẫu trắng (nồng độ chất ức chế bằng 0)
hoặc dựa trên phương pháp tiếp cận tín hiệu trên nhiễu [133]. Giới hạn phát
hiện thấp hơn là đặc điểm quan trọng trong việc xác nhận hiệu suất của cảm
biến sinh học. Bằng cách thu nhỏ kích thước của cảm biến sinh học và cải
thiện ái lực liên kết của các phân tử sinh học, đặc tính này có thể được cải
thiện dần dần. Ibupoto và cộng sự. đã báo cáo một cảm biến sinh học axit
lactic dựa trên enzyme lactate oxidase được cố định bằng liên kết chéo với
gluteraldehyd trên các thanh nano ZnO [117].
Điện cực sinh học Au/NanoZnO/LOD này đã được chứng minh là có giới hạn phát
hiện (LOD) là 1.104 mmol L1 và độ nhạy là 41,3371,58 mV thập kỷ1 với độ tuyến
tính trên 0,1–1 mmol L1 .
Cảm biến sinh học này được phát hiện là ổn định trong hơn ba tuần
với thời gian đáp ứng là 10s. Điện cực Au/Nano ZnO này cho thấy giới hạn phát
hiện thấp và độ nhạy cao hơn đối với lactate do điện cực sinh học dựa trên
cấu trúc nano ZnO.
Độ nhạy của điện cực là một đặc tính quan trọng khác trong việc xác nhận
hiệu suất của cảm biến lactate. Độ nhạy tương ứng với độ dốc của đường chuẩn
và diện tích điện cực làm việc. Có nhiều yếu tố khác nhau chi phối vai trò
tăng độ nhạy của cảm biến sinh học. Vì độ nhạy của cảm biến sinh học phụ thuộc
vào chức năng của thiết kế điện cực vật lý và cố định phân tử sinh học. Diện
tích bề mặt điện cực nói chung có thể được sửa đổi để tăng độ nhạy của cảm
biến sinh học enzyme. Điều này liên quan đến việc tăng diện tích bề mặt điện
cực dẫn đến việc nạp lượng enzyme cao hơn vào lớp nhận biết.
Vật liệu nano đóng vai trò quan trọng trong việc tăng diện tích bề mặt điện
cực và bao gồm các hạt nano như ống nano carbon (CNTs) [34,35], hạt nano vàng
(AuNPs) [36,37], hạt nano bạch kim (PtNP) [38,39], kim loại các hạt nano dựa
trên oxit, tức là, oxit niobium [40] hoặc oxit molypden [41] và các hạt nano
dựa trên vật liệu bán dẫn như oxit kẽm [42]. Nesa-kumar và cộng sự. tổng hợp
các thanh nano ZnO để phát hiện lactate trong các sản phẩm thực phẩm [132].
Các thanh nano ZnO cung cấp diện tích bề mặt tăng lên để cố định enzyme
lactate dehydrogenase.
Điện cực Au/NanoZnO/LDH này được chứng minh là có giới hạn phát hiện là
4,73nmol L1 và độ nhạy là 1,832 mA mmol1 L với thời gian đáp ứng dưới 1 giây.
Điểm đẳng điện cao (9,5) của thanh nano ZnO dẫn đến việc cố định enzyme dễ
dàng và chuyển điện tử trực tiếp giữa các vị trí hoạt động của LDH và bề mặt
điện cực và cho thấy phản ứng tuyến tính trong khoảng 0,2–0,8 mmol L1 Độ ổn
định của LDH này cảm biến sinh học được tìm thấy là 28 ngày. Một cách khác để
tăng độ nhạy của cảm .biến sinh học enzyme là sử dụng các chất trung gian.
Chất trung gian đóng vai trò quan trọng hỗ trợ chuyển điện tử từ phân tử sinh
học sang bề mặt điện cực làm việc để cải thiện độ nhạy của cảm biến sinh học.
Pereira và cộng sự. đã chế tạo cảm biến sinh học lac-tate dựa trên ống nano
carbon đa thành bằng cách kết hợp meldola blue làm chất trung gian để đưa các
electron giữa NADH và điện cực làm việc dưới sự xúc tác của LDH [66] . Với
việc sử dụng bộ hòa giải, điện thế hoạt động của cảm biến sinh học đã giảm
xuống 0,0 V so với SCE. Cảm biến
Machine Translated by Google

Ra
c
vs
K.
H
c
sB
Bảng 1

Các tính chất khác nhau của cảm biến sinh học L-lactate dựa trên màng.

Enzim; nguồn gốc; số tiền sử dụng Ma trận cố định; Loại đầu dò; Nhạy cảm Giới hạn phát hiện Ứng dụng/chất ức chế Phản ứng Kho Thẩm quyền giải quyết

Điện cực làm việc sự cố định thời gian sự ổn định

vật liệu phương pháp (ngày)

L-LDH (không có EC); cơ thỏ; 5/ Màng CA/Meldola Ampe kế; NR 24,38 nA mmol1 L 0,5–8 mmol L1 1–20 mmol L1 NR; ascorbat, pyruvat NR 3 [73]
10/20U màu xanh, NADP; màn hình cacbon

điện cực mực in

LOD (EC 1.1.3.2); Pediococcus sp.; Điện cực màng /Pt 0,15U Ampe kế; Cái 7.270.1 nA Mmol1 L NR NR Nước ép cà chua; NR 60 [75]
Polypyrrole (PPYox) bẫy acet-aminophen, ascorbate,
nước tiểu

LOD (không có EC); Aerococcus vi- Màng bán thấm sử dụng Ampe kế; NR NR 0,05 mmol L1 0–0,1 mmol L1 Bột cà chua, thức ăn trẻ em; 70 NR [76]
idans; 22UmL công nghệ SIRE; Điện NR
cực Pt
L-LDH (EC 1.1.1.27); cơ thỏ; Poly(carbamoyl) sulfonate Ampe kế; NR 3,05–276,35 mA 4,3 mmol L1 0–400 μM Bổ sung sức khỏe, 2 11 [78]
3,34UmL1; pyruvate oxydase (EC (PCS) hydrogel trên Teflon mmol1 L soda, đồ uống thể thao,
1.2.3.3); Aerococcus viridans; màng/Pt sữa chua; có tính điện động
1,40 U mL1; salicylat hydroxylase vật liệu xây dựng

(EC 1.14.13.1); Pseudomonas sp;

0,56 U mL1
LOD(không có EC); loài Pedicoccus Màng composit phủ PolyDVB/ Ampe kế; liên kết NR NR 0–2 mM Mẫu máu; NR 1 21 [72]
;20–40 đơn vị/mg EVB; Âu chéo với
hỗ trợ polyester tráng glutaraldehyde
LDH; (EC 1.1.1.27); Tim lợn;257 U/ MBRS-SPCE/màng axetat FIA/ampe kế; NR NR NR 0,55–10 mM mẫu huyết thanh; NR NR 17 [77]
mg xenluloza/điện cực
cacbon in lụa
LOD (không có EC); NR; NR Amucin/albumin hydrogel Ampe kế;NR 0,53770,007 mA M1 0,8 mM 2 –1000M Mẫu máu; NR NR 150 [70]
ma trận/màng Nafion;
Điện cực Pt
LOD (không có EC); NR; NR Silica trung tính/Prussian Điện hóa; NR 150–1,1 mM NR NR NR NR NR [71]
Blue in lụa (PB)-/
màng xốp ưa nước; NR

LOD (không có EC);(Pediococcussp.); NR màng CNT/polysulfon; Ampe kế; NR NR 0,05 mg L1 0,1–5 mg L1 Mẫu rượu và bia; NR NR [74]
HRP(không có EC nào được đưa ra); (Loại II từ điện cực in màn hình NR
cải ngựa); NR

CA: Cellulose axetat.

Pt: Bạch kim.
SIRE: Cảm biến dựa trên việc tiêm phần tử nhận dạng.
DVB: Divinylbenzen.
EVB: Ethylvinylbenzen.
MBRS-SPCE: Điện cực carbon in lụa Blue-Reinecke của Meldola.
CNT: Ống nano cacbon.

NR: Không được báo cáo.

Machine Translated by Google

v
R
Kc
sB
c
ban 2
So sánh các đặc tính phân tích của cảm biến sinh học L-lactate dựa trên ma trận polymer không dẫn điện.

Enzim; nguồn gốc; số lượng Ma trận cố định; Loại đầu dò; Nhạy cảm Giới hạn phát hiện tuyến tính Các ứng dụng/ Phản ứng Kho Thẩm quyền giải quyết

đã sử dụng
vật liệu điện cực làm việc sự cố định chất ức chế thời gian sự ổn định
phương pháp (ngày)

LOD (không có EC); Pedio- Ma trận rượu poly-vinyl Đo áp suất; 1,71 mmA mmol1 10mmM 2 105–4 103 M Sản phẩm từ sữa; NR 10–45 90 [82]
coccus sp.; 5,5 U (PVA) trên than chì được platin hóaliên kết chéo
điện cực
LOD (không có EC); Pedio- Màng Sol-gel có nguồn gốc từ Ampe kế; NR 1,02 mA mmol1 L 0,05 mmol L1 0,1–9 mmol L1 NR; NR 10 7 [84]
coccus sp.; 2.04 U MTEOS/Os-polymer /GCE
LOD (EC 1.1.3.2); Pedio- Phức osmium dựa trên Ampe kế; NR NR NR 0–1 mmol L1 NR; NR NR NR [85]
coccus sp.; 17 bạn hydrogel trong polyme oxi hóa khử/
GCE
LOD (không có EC); NR; Poly(carbamoyl)sulfonat Đo áp suất; NR 0,682–0,321 nA mmol1 L 0,5 mmol L1 0–0,5/0–1 mmol L1 Sản phẩm từ sữa và 50 42 [83]
5 bạn (PCS) hydrogel/than chì in máu toàn phần của con người

trên màn hình/nafion/Pt và huyết thanh; NR

điện cực
LOD (không có EC); Pedio- Chitosan/poly-vinyl imida- Đo áp suất; NR NR 0,6 μM 0–600 μM Phân tích thực phẩm; NR NR NR [81]
coccus sp.; NR zole Os (PVI-Os)/CNT/vàng
điện cực
LOD (không có EC); NR; NR Amucin/albumin hydrogel Ampe kế; NR 0,53770,007 mA M1 0,8 M 2–1000M Mẫu máu; NR NR 150 [70]
ma trận/Polyme Nafion; Pt
điện cực
LOD(không có EC); NR; Hydrogel Laponite-chitosan/ Ampe kế, NR (0,32670,003) Một cm 2 M1 (3.870,2) 106 triệu NR Đồ uống có cồn 5 NR [86]
0,5 U mL1 GCE và các sản phẩm từ sữa;
NR
LOD (không có EC); Pedio- Điện cực Chitosan/MWCNT/ Ampemertic; NR NR 1,66 M 5–340 M Mẫu thực phẩm và 15 NR [80]
coccus sp.; NR HRP (không ferrocya-nide/vàng đồ uống thực tế; NR
EC đã cho); củ cải ngựa
(Loại II); NR
LOD (không có EC); NR; NR Nafion/coban phthalocya-nine/ Ampe kế; NR NR NR 18,3 μM–1,5 mM NR; NR 90 270 [60]
rượu poly-vinyl/
carbon in lụa
điện cực

MTEOS: Methyltriethoxysilane.
GCE: Điện cực cacbon thủy tinh.
PVI-Os: Poly Vinyl Imidazole-Osmium.
MWCNT: Ống nano cacbon đa vách.
Machine Translated by Google

K.
H
c
sB
c
v
R
bàn số 3

Hiển thị đặc tính của các cảm biến sinh học L-lactate dựa trên polymer dẫn điện khác nhau.

Enzim; nguồn gốc; số lượng Ma trận cố định; Loại đầu dò; Nhạy cảm Giới hạn phát hiện tuyến tính Các ứng dụng/ Phản ứng Kho Thẩm quyền giải quyết

đã sử dụng
điện cực làm việc sự cố định chất ức chế thời gian sự ổn định
vật liệu phương pháp (ngày)

D-LDH (EC 1.1.1.28); Leuco- PEI/NADþ3/dán cacbon Ampe kế; NR NR 30 mmol L1 0,05–5 mmol L1 NR; pyruvat, axit NR 31 [90]
nostoc mesenteroides ssp. điện cực DL-α-hydroxybutyric
hỏa táng; 23–187 U mg1
L-LDH (EC 1.1.1.27); con thỏ Màng PPD/dán carbon Ampe kế, NR 0,56–1,1 mA Mmol1 L 0,03–0,6 mmol L1 0,5–77 mmol L1/0,5– Rượu táo; ascorbate, urate, 40–80 1 [93]
cơ bắp; 16–80 U mg1 điện cực 8,5 mmol L1 L-cysteine, glutathione,
Glutamic pyruvic transa-
minase (GPT) (EC 2.6.1.2);
tim lợn; 0–5 U mg1
LOD (không có EC); Pedio- Phim PPY pha tạp Polyanion/ Ampe kế, NR 5 mA mmol1 L cm2 5 mmol L1 0–2/0/16/0–30 mmol L1 NR; NR 20–30 50 [56]
coccus sp.; NR Điện cực Pt
L-LDH (EC 1.1.1.27); con thỏ Tấm kính phủ PANI/ITO Ampe kế, 5,5–38,5 mA mmol1 L 5 105 M 0,1-1 đến 1–4 mmol L1 NR; NR NR 21 [43]
cơ bắp; 1–4,5 U LOD (EC sự hấp phụ
1.1.3.2); Pediococcus sp.;
0,1–0,8 U
L-LDH (EC 1.1.1.27); con thỏ PPY–PVS/NR Ampe kế, liên kết NR NR 0,5–6 mmol L1 NR; ascorbat, citrat, 40 14 [91]
cơ bắp; 0,1 mg ngang với glucose, glutamat
glutaraldehyde
L-LDH (EC 1.1.1.27); con thỏ Phim PANI/Kính phủ ITO Ampe kế, NR 0,05–1 mmol L1 0,1–1 đến 1–4 mmol L1 NR NR 21 [92]
cơ bắp; 4,5 U LOD (EC đĩa sự hấp phụ
1.1.3.2); Pediococcus sp.;
0,1 U
L-LDH (EC 1.1.1.27); Trực khuẩn PANI–PAA/GCE Ampe kế; NR NR NR 0,4–0,55 mol L1 NR; NR NR NR [55]
Stearothermophilus.; NR
LDH (không có EC); NR; NR MWCNT/ P3 MT polyme/ Ampe kế, NR NR 5,6 107 triệu 1,0 106–5,0 104 triệu NR; NR NR NR [35]
GCE
L-LDH (không có EC); con thỏ tổ hợp pTTCA/MWCNT Ampe kế, cộng hóa trị 0,0106 1 5–90 Mẫu huyết thanh người, NR 30 [28]
cơ;811 U/mg phim/điện cực Au sữa; NR

NAD: nicotinamide adenine dinucleotide.

PPD: Poly-(o-phenylenediamine).
PANI/ITO: Polyaniline.

43
PPY–PVS: Polypyrrole–Polyvinylsulphonate.
P3 MT: Poly (3-metylthiophene).
PAA: Polyacrylat.
pTTCA: Axit Poly-5,2′-5′,2″-terthiophene-3′-carboxylic.
 Ra
Machine Translated by Google

c
vs
K.
H
c
sB
Bảng 4

Hiển thị các đặc tính của các cảm biến sinh học L-lactate dựa trên sol–gel khác nhau.

Enzim; nguồn gốc; số tiền sử dụng Ma trận cố định; Loại đầu dò; Nhạy cảm Giới hạn phát hiện Các ứng dụng/ Phản ứng Kho Thẩm quyền giải quyết

điện cực làm việc sự cố định chất ức chế thời gian sự ổn định
vật liệu phương pháp (ngày)

LOD (không có EC); Pediococcus sp.; 2,04 U Màng Sol-gel có nguồn gốc từ Ampe kế; NR 1,02 mA mmol1 L 0,05 mmol L1 0,1–9 mmol L1 NR; NR 10 7 [84]
MTEOS/Os-polymer/GCE
LOD (không có EC); NR; 26–40 mg mL1 Than chì gốc Sol–gel/ Ampe kế; NR 870–2800 mA mol1 L 4 nmol L1 0–0,3 mmol L1 Rượu; NR NR 14 [103]
cacbon bạch kim
LDH (không có EC); NR; NR Khớp nối carbodiimide/ Điện hóa; 1,47 mA/mM 1,5 μM NR NR; NR NR 7 [102]
gốc sol–gel cộng hóa trị

LDH (không có EC); NR; NR (APTMS)/sol–gel xốp/Pt Ampe kế; NR NR NR 5 105–5 103 triệu NR; NR NR 30 [99]
điện cực
L-LDH (EC 1.4.1.3); cơ thỏ hoặc thịt gà Than chì epoxy/Graphit Ampe kế; NR 80 mA mol1 L 0,87 mmol L1 1–1,2 mmol L1 NR; NR 30 tuổi 7 [98]
trái tim; 200 U mL1 mực in lụa (sol–
gel)
LOD (không có EC); NR; NR Màng silica sol–gel/ Ampe kế; NR 6,031 μA mM1 0,3 103 mM 0,2–2,0 mM Mẫu máu; NR NR NR [96]
MWCNT/GCE
LDH (không có EC); NR; NR Mạng lưới silicat 3-D Ampe kế; NR 0,446 nA/nM 100 nM 0–0,8 mM NR; NR NR NR [37]
Sol–gel có nguồn gốc từ 3-

(mercaptopropyl)tri-
methoxysilan (MPTS)/
AuNP
LOD (không có EC); NR; NR Phim Sol–gel/MWCNTs/Pt Ampe kế; 6,36 µA mM1 NR 0,2–2,0 mM Mẫu máu; NR NR 28 [97]
nano/GCE sự hấp phụ
LOD; NR; NR Điện cực MWCNTs/Pt-nano Ampe kế; Ampe 6,36 µA/mmol/L NR 0,2–2,0 mmol/L NR; NR 5 28 [39]
dựa trên Sol–gel kế cộng
LOD; (không có EC nào được đưa ra); NR; NR Phổ dựa trên Sol–gel hóa trị; NR 0,18 A M1 cm2 NR NR Chẩn đoán không NR NR [100]
Điện cực biến đổi màu xanh xâm lấn và thực phẩm

kiểm soát chất lượng; NR

LOD (không có EC); NR; NR Sol–gel có nguồn gốc từ Ampe kế; NR 3,4 mA mM1 4,0 M 50 μM–0,25 mM NR; NR NR NR [101]
MPTS/AuNP
LOD (không có EC); NR; NR Silica sol gel phủ Ampe kế; 6,5 107 mol L1. NR 0,1–5,0 mmol L1 Mẫu máu; NR NR 45 [40]
Niobi oxit/cacbon sự hấp phụ
dán điện cực

(APTMS): 3-(aminopropyl)trimethoxysilan.
AuNP: Hạt nano vàng.
MPTS: 3-(mercaptopropyl)-trimethoxysilane.
Machine Translated by Google

K. Rahee và cộng sự. / Báo cáo Hóa sinh và Lý sinh 5 (2016) 35–54 45

cho thấy độ nhạy tuyệt vời 3,46 mA cm2 mmol L1 với phạm vi rộng

]75[

]58[

]87[

]401[

]68[
tmy
nế
ề
iảhq
ẩu
iT
g
phạm vi đáp ứng tuyến tính 0,10–10 mmol L1 . Điều này chứng tỏ

cảm biến sinh học này có thể được sử dụng để đo trực tiếp lac-tate trong mẫu máu.

Một cách tiếp cận khác để khuếch đại độ nhạy

của cảm biến sinh học enzyme là bằng cách sử dụng hệ thống bienzymatic

11
RN

RN

RN

RN
)yàgn(
ohK

liên quan đến sự đồng động của enzyme lactate oxidase và lactate de-hydrogenase

[92]. Chaubey và cộng sự. lactate đồng hỗn hợp

oxidase (LOD) và lactate dehydrogenase (LDH) lên màng polyaniline được chuẩn bị

điện hóa (PANI). PANI/LOD/LDH này

01

5
RN

RN

2
hứ
P

hgt
ản

ời
ng

ia

hệ thống điện cực bienzym cho thấy khả năng khuếch đại tín hiệu được cải thiện
n

bằng cách tái chế cơ chất, giúp phát hiện L-lactate ở

nồng độ thấp hơn (0,1–1 mM). Độ ổn định của PANI/LOD/LDH

điện cực bienzym được tìm thấy là 21 ngày. Tuy nhiên, trong hầu hết

trường hợp tất cả các phương pháp này đều có những hạn chế nhất định.

Tăng cường độ ổn định hoạt động của cảm biến sinh học mà không cần

mất độ nhạy là một trong những vấn đề mà lactate phải đối mặt

phát hiện. Độ ổn định khi vận hành nhìn chung phụ thuộc vào loại
ồys
đ
u
t
;RN

ổkB
s
cc
ứ

ữđs
c
h
t

ưNR
v
c
p
t
s

ốNĐ
u
v
c
p
t
s
ádC
ứ

ấh
cụn

doố
h
tế

nhu
ứ

aiặ
h
ó
o
í
/gn
g

ợRà
á
ả
h
ừ
ữ

cRó
ồ
à
á
ả
h
ừ
ữ
a-n
ể
a
gỏc

;ệc
ấ
ạ
n

uac
n
ẩ

gan
ẩ
,o
g
,e

t
h
n

m
;

m
; cảm biến sinh học được sử dụng. Cảm biến dùng một lần cho thấy sự ổn định trong vài giây đến

vài phút trong khi các cảm biến tái sử dụng có thể cho thấy sự ổn định

trong vài ngày đến vài tháng. Yếu tố sinh học được sử dụng để

cảm biến lactate thường ảnh hưởng đến độ ổn định lâu dài. Các

Hoạt động sinh học của enzyme bị ảnh hưởng bởi môi trường

điều kiện [134], các phương pháp được sử dụng để cố định nó trên
RN
,a0
1
m
L
N

–L0
m
1

àMv
0
4
ut
yí

2sm
1
R

lo1
m

00
ến
nh

–o
tabr 5c
l 5
o
;

đầu dò. Các loại chất nền (hỗ trợ) nơi chứa enzyme

cố định phải phù hợp để enzyme duy trì hoạt động

cho sự ổn định hoạt động thích hợp của cảm biến. Enzim đa dạng

phương pháp cố định có thể được sử dụng như hấp phụ vật lý

[43], bẫy liên quan đến việc bẫy enzyme trong ma trận polyme [85,43] hoặc ma trận

sol–gel [44,45], giam giữ màng [70], liên kết cộng hóa trị [46], hình thành liên
RN

RN
iệ
t
n ới
n
á ạh
h G
p

kết ngang [29] ],

hình thành đơn lớp bằng cách tự lắp ráp [48]. Gần đây, các điện cực dựa trên cấu

trúc nano cho thấy các đặc tính độc đáo của độ bền cao

khả năng hấp phụ để cố định ổn định các phân tử sinh học

lần lượt hỗ trợ cải thiện độ ổn định lưu trữ. Teymourianc và cộng sự. đạt được độ

ổn định lưu trữ rất tốt bằng cách tải LDH trên

Màng tổ hợp nano Fe3O4/MWCNTs bằng phương pháp đồng kết tủa

[109]. Hạt nano Fe3O4 có đặc tính oxi hóa khử tương tự như
những chất trung gian được sử dụng để chuyển điện tử nhanh giữa NADH
ạả
ym hc
N

và điện cực có điện thế thấp 0,0 mV so với Ag/AgCl ở trạng thái trung tính

môi trường pH. Cảm biến cho thấy phản hồi tuyến tính lên tới 300 μM với

giới hạn phát hiện là 0,3 μM. Hoạt động ban đầu của điện cực đề xuất được dự trữ

(96%) trong hơn 2 tuần khi

giữ trong không khí ở nhiệt độ phòng. Tính ổn định nội tại cao của điều này
điện cực bị biến đổi là do tính ổn định hóa học và cơ học của Fe3O4/MWCNTs.
ựđs
c

ưhp

mNA
k

mNA
k

ếLA
k
N
3
2
4
m

ếMk
(
c
A
3
1
N
odL
đ

ơá
hnị
ố

pRế

pRế

p1R
7
A
,
m

pRm
1
,
0
ạòầ

gnp

e;

e;

eo;
0
6
3

e6;
,
2
8
i;
u

–l5
,

273
51
3

7,
)300,02 60

Để có được phạm vi tuyến tính rộng là một đặc tính quan trọng mà

xác định hiệu suất cảm biến. Nó được định nghĩa là phạm vi của

nồng độ chất phân tích mà cảm biến có thể hoạt động và

phản ứng của cảm biến thay đổi tuyến tính với nồng độ này. Jena và

al. đã phát triển một cảm biến sinh học đo cường độ mới để đo L-lactate [37]. Bẫy

các hạt nano LDH và vàng bằng

mạng lưới silicat 3-D sol–gel có nguồn gốc từ 3-(mercaptopropyl)

ytH
c
n
g

nệiĐ

shO
d
t

ytH
p
s
n
(

eNh
L
G
0
c
A
M
oG
p
xkp
c
o
h

ro
d
G
3
m
U
p
ađ
M
t
c

ậl
v

àPM
T
nệiĐ

lC
ti

dừó
g
ố

myự
r

dr
o
u
a
P

lR
y
a
C
,
m
1
ứh
ó

oxC
,
L
y
ậị
r
ố

/emyE

nt
e
uệ

rc
u

id
a
ê

rêl
t
C

r2d
E
p
3
cửấ
i
a

gyE
3
1
r
nn

gf
oồ

ur
n

(ny
f
e
S

o3o
e
t

ed
4
u
;h

/nol

trimethoxysilane (MPTS) dẫn đến phạm vi tuyến tính rộng từ 0–

legn

mo

g)o

i7n
r

lav
leg

e-c

t0o

/sa
la

e,
m

ee
t
)lyomabr

/0
;cir1
t

0,8 mM. Cảm biến cho thấy độ nhạy tuyệt vời 0,446 nA/nM

với giới hạn phát hiện là 100 nM. Bộ cảm biến sinh học này phản ứng tuyến tính

với L-lactate trong khoảng 0–0,8 mM.

Giới hạn định lượng (LOQ), thời gian đáp ứng, độ lặp lại, khả năng tái sản

xuất và độ chính xác là những yếu tố khác chịu trách nhiệm cho quá trình hoạt

động hóa than của hiệu suất cảm biến sinh học. Giới hạn định lượng

(LOQ) là một thông số đáng tin cậy của xét nghiệm định lượng để định lượng

xác định lượng chất nền thấp nhất trong mẫu với độ chính xác và độ chính xác phù

hợp [133]. Nesakumar và cộng sự. báo cáo một

7b
1

yUh
x
(
1
P
n
s
0
m
RN

Ev(
1
A

,U0
m
nạ

4L
E
.
s
a
p
,
Ci.
e

5L

cảm biến sinh học axit lactic bằng cách cố định en-zyme lactate dehydrogenase với
01d
l
C
e
s
.
5
.r
2

51
c;i
r
a
4
u
6
3io

ydo
s
.
.dc

lo
-
e
1
3ao

am3
OsL
(
c
E
P

OsL
(
1
P

-tL
(
1
c

ONL
(
c
E

Oh(
E
N
0
m
U
L
c
nd
E
n
g
t
s

)nc

to.
Dpk
ó
C
e

DpE
.
e

HhD
E
.
ơ

DRk
ó
C

Dy
k
ó
C
R
,
L
a
h
zụg
ố
i
ử

us
c

e-1
ô.
h
)
d

..
C
1
d

.ỏ
C
1

ô;h
)

ô-h
)
;
5
1
p
i
inu
c
ề

s;

;)
n;
i

3;i

;)72.1;

gn;

nt
;
o
mgồ
;
n

go

.o

go
;n

succoc

2c

ts
i

chitosan trên các thanh nano ZnO [132]. Điện cực Au/Na-noZnO/LDH này được chứng
Vp
P
ặnH
đ
c
b
s
L
l
d
t
h
g
k
gnả5
B

)o

ea

Pyo
ểh
í
ủ
á
ả
i
ọ
-
a
ự
r
y
e

;c

-n

:rl
haị
m
ế
n
c
ê
d
l
á

suc

vi
y
aut
n
r
c

ynid
t.
e- o

l.

minh là có độ nhạy 1,832 mA

mmol1 L, đáp ứng tuyến tính trong khoảng 0,2–0,8 mmol L1 với một
 Ra
Machine Translated by Google

c
vs
K.
H
c
sB
Bảng 6

Hiển thị các đặc tính của các cảm biến sinh học L-lactate dựa trên điện cực được in trên màn hình khác nhau.

Enzim; nguồn gốc; số tiền sử dụng bất động Loại đầu dò; Nhạy cảm Giới hạn phát hiện Ứng dụng/chất Thời gian Độ ổn Thẩm quyền giải quyết

ma trận; đang làm việc phương pháp cố ức chế đáp ứng) định lưu
vật liệu điện cực định trữ (ngày)

L-LDH (không có EC); cơ thỏ; 5/ Màng CA/ Ampe kế; NR 24,38 nA mmol1 L 0,5–8 mmol L1; 1–20 mmol L1 NR; ascorbat, NR 3 [73]
20/10 Meldola xanh, NAD; pyruvat
màn chắn cacbon

mực in
điện cực
LOD (không có EC); NR; 5 bạn Poly(carbamoyl) Đo áp suất; NR 0,682–0,321 nA mmol1 L 0,5 mmol L1 0–0,5/0–1 mmol L1 Sản phẩm sữa 50 42 [83]
sulfonate (PCS) hy- và con người

drogel / than máu toàn phần

chì in lụa và huyết thanh; NR

/nafion/điện cực Pt
LOD (EC 1.1.3.4); NR; 2,4–3,5 U mg1 Màn chắn cacbon Đo áp suất; NR 0,27–1,30 nA mol1 L 10 mmol L1 5–40 mmol L1 đến 20–250 mmol L1 Sữa, màu trắng NR 14 [107]
peroxidase (EC 1.11.1.7) cải ngựa.; mực in phô mai và sữa
5,4 U mg1 điện cực chua; NR
LOD (không có EC); NR; 5 bạn Màn chắn cacbon Đo áp suất; NR NR 1 mmol L1 1–50 mmol L1 Nước giải khát 50 300 [108]
mực in lên men Lactic;
điện cực NR
L-LDH (EC 1.4.1.3); cơ thỏ hoặc Graphit epoxy/ Ampe kế; NR 80 mA mol1 L 0,87 mmol L1 1–1,2 mmol L1 NR; NR 30 7 [98]
tim gà; 200 U mL1 Màn hình than chì
mực in (sol–
gel)
L-LDH (EC.1.1.1.27); NR; NR SWCNTSs/Var- Ampe kế; Cái NR 1 mM 5–450 M Sữa đông Probiotic NR NR [106]
iamine xanh/điện bẫy
cực in lụa
LDH; (EC 1.1.1.27); Tim lợn; 257 bạn/ Màng MBRS-SPCE/ Ampe kế; NR NR NR 0,55–10 mM Mẫu huyết thanh; NR 17 [77]
mg cellu-lose axetat/ NR
carbon in lưới

điện cực
LOD (không có EC); NR; NR Silic trung tính/ Điện hóa; 150–1,1 mM NR NR NR NR NR [71]
màn hình in NR
Xanh Phổ (PB)-/
xốp ưa nước
màng; NR
LOD (không có EC); NR; NR Nafion/coban Ampe kế, NR NR NR 18,3 μM–1,5 mM NR; NR 90 270 [60]
phthalocyanin/
điện cực carbon in
lụa
LOD (không có EC); Pediococcus sp.; NR CNT/polysulfon Ampe kế; NR NR 0,05 mg L1 0,1–5 mg/L1 Rượu và bia NR NR [74]
HRP (không có EC); cải ngựa. (Kiểu màng; màn hình mẫu; NR
II); NR điện cực in
Machine Translated by Google

Ra
s
K.
H
c
Bảng 7

sB
Hiển thị các thuộc tính của các cảm biến sinh học L-lactate dựa trên NP khác nhau.

Enzim; nguồn gốc; Ma trận cố định; Loại đầu dò; Phương pháp cố định Nhạy cảm Giới hạn phát hiện tuyến tính Các ứng dụng/ Thời Độ ổn Thẩm quyền giải quyết

số tiền sử dụng Vật liệu làm điện chất ức chế gian phản định lưu

c
cực hồi (giây) trữ (ngày)

v
LDH (EC 1.1.1.27);NR; Meldola xanh/MWCNT Ampe kế; liên kết chéo 3,46 mA cm2 mmol L1 7,5 106 mol L1 0,10–10 mmol L1. Mẫu máu; NR NR NR [66]
876 U mg1 điện cực với glutaraldehyde
LDH (không có EC); NR; AuNP/MPTS Ampe kế; NR 0,446 nA/nM 100 nM 0–0,8 mM NR; NR NR NR [37]
NR
LOD (không có EC); NR; MWCNT/GCE Ampe kế; NR 6,031 µA mM1 0,3 103 mM 0,2–2,0 mM Mẫu máu; NR NR NR [96]
NR
LDH(không có EC); NR; Đo điện thế bề mặt PAA/Si4N3 (ND); cộng hóa trị 49,7 mV 2 107 M 105M. Mẫu máu; NR 60 NR [113]
NR
LDH (EC 1.1.1.27); con thỏ Tổ hợp MWCNT/CHIT/GCE Ampe kế; Cái bẫy 0,0083 Một M1 cm2 0,76 M 5–120 M NR; NR 3 7 [110]
cơ bắp; 811 U mg1
LOD(không có EC); Ped- Chitosan/poly-vinyl Đo áp suất; NR NR 0,6 μM 0–600 μM Phân tích thực phẩm; NR NR NR [81]
iococcus sp.; NR imidazole Os (PVI-Os)/
Điện cực CNT/vàng
LOD (không có EC); NR; MWCNTs/Ptnano/GCE Ampe kế, hấp phụ 6,36 µA mM1 NR 0,2–2,0 mM Mẫu máu; NR NR 28 [97]
NR
LOD (không có EC); NR; Ống nano H2Ti3O7 Điện hóa 0,24 mA cm2 mM1 NR 0,5–14 mM NR; NR 5 NR [114]
NR mạng
LDH (không có EC); NR; MWCNT/ P3 MT polyme/ Ampe kế; NR NR 5,6 107 triệu 1,0 106–5,0 104 triệu NR; NR NR NR [35]
NR GCE
LOD(EC1.1.3.2);Các loài Hạt nano đen/ Ampe kế;NR 1,43 mA mM1 NR 1–20 mM Mẫu huyết thanh; 50 60 [112]
vi khuẩn Aero-coccus; vàng Pt NR
42 U mg1 điện cực
L-LDH (không có EC); Phim tổng hợp pTTCA/ Ampe kế, cộng hóa trị 0,0106 1 5–90 Mẫu huyết NR 30 [28]
cơ thỏ; 811 U/ MWNT/điện cực Au thanh người, sữa; NR
mg
L-LDH (EC.1.1.1.27); NR; SWCNTS/Variamine Ampe kế, bẫy NR 1 mM 5–450 M sữa đông Probiotic; NR NR NR [106]
NR màu xanh da trời

LOD (không có EC); NR; ZNO/mwCNT NR; NR NR NR NR NR; NR NR NR [42]

NR
LOD (không có EC); NR; Dựa trên Sol-gel Ampe kế; cộng hóa trị 6,36 µA/mmol/L NR 0,2–2,0 mmol/L NR; NR 5 28 [39]
NR MWCNT/Pt-nano
điện cực
LOD (không có EC); NR; CNT pha tạp nitơ/ Ampe kế; NR 0,04070,002 A M1 cm–2 4,171,6 M 14–325 M NR; NR NR 90 [34]
NR GCE
LOD (không có EC); NR; NanoZnO-MWCNT/ Điện hóa phát quang; NR NR 4nmol L1 0,01–10 μmol L1 và 10– Mẫu máu; NR NR NR [118]
NR GCE 200 mol L1
LOD (không có EC); NR; Niobi oxit/cacbon Ampe kế, hấp phụ 6,5 107 mol L1. NR 0,1–5,0 mmol L1 Mẫu máu; NR NR 45 [40]
NR dán điện cực
LOD (không có EC); Ped- Màn hình CNT/polysulfon Ampe kế; NR NR 0,05 mg L1 0,1–5 mg/L1 Rượu và bia NR NR [74]
iococcus sp.; NR HRP điện cực in mẫu; NR
(không có EC nào được đưa

ra); củ cải ngựa (loại II); NR

L-LOD (EC 1.1.3.2); Ped- Thanh nano ZnO/Au chiết áp; liên kết chéo 41,3371,58 mV/thập kỷ 1 104–1 100 mM 0,01–0,4 và 1,0–5,0 Thuốc, thực phẩm và 10 21 [117]
iococcus sp.; chất nền thủy tinh tráng với glutraldehyd sinh học khác
40 U mg1 mẫu; NR
LOD (EC 1.1.3.2); Pedio- MoO3/Au phủ SiO2 Điện hóa; NR 0,87 mA/mM 0,15 mM 0,5–8mM NR; NR 10 NR [41]
cocus sp.; điện cực
38 đơn vị mg1
LOD (không có EC); Ped- Chitosan/MWCNT/fer- Ampemertic; NR NR 1,66 M 5–340 M Mẫu thực phẩm thực tế 15 NR [80]
iococus sp.; NR HRP rocyanide/vàng và đồ uống; NR
(Loại II từ điện cực
cải ngựa)
LOD (không có EC); NR ZnO nanotetrapod Điện hóa; tĩnh điện 28,0 μA cm2 mM1 1,2 Μm 3,6 μM–0,6 mM NR; NR NR NR [120]
Machine Translated by Google

48 K. Rahee và cộng sự. / Báo cáo Hóa sinh và Lý sinh 5 (2016) 35–54

thời gian phản hồi dưới 1s. Đã tìm thấy giới hạn phát hiện (LOD)
là 4,73nmol L1 và giới hạn định lượng (LOQ¼3,33 LOD) là
15,75nmol L1 . Tính ổn định của cảm biến sinh học LDH này đã được chứng minh là
tmy
nế
ề
iảhq
ẩu
iT
g

được 28 ngày.
Thời gian đáp ứng ngắn và khả năng lặp lại nhanh nói chung là
yêu cầu cho một cảm biến sinh học hoạt động tối ưu. Thời gian đáp ứng là
41

RN

RN

RN

32
ộ(
nn
ị
ư
rĐ
ổ
đ
l
t

về cơ bản là thời gian mà bộ chuyển đổi thực hiện để phát hiện các thông số có thể đo được
hg
)yàu
ữ

những thay đổi trong phản ứng sinh học đối với tín hiệu đầu vào có thể phát hiện được.

Thời gian đáp ứng của cảm biến sinh học phụ thuộc vào nhiều yếu tố khác nhau như
tốc độ khuếch tán cơ chất qua dung dịch lên bề mặt màng để xúc tác tại vị

1
RN

RN

RN
ii
)yâ
n ờg
a
ả i(
h
ồ T
g
p
h

trí hoạt động của enzyme, tốc độ

khuếch tán sản phẩm đến bề mặt điện cực làm việc và các chất trung gian được
sử dụng dẫn đến sự truyền điện tử nhanh [135]. Pianoa và cộng sự.
chế tạo cảm biến dựa trên điện cực in lụa để phát hiện lactate
đo trong huyết thanh [77]. Điện cực carbon in lụa
đã được biến tính bằng muối meldola blue-reinecke. Muối Blue-Reinecke của Meldola
ậNv
m
un
H
t

ẫ4
M
m
Q

;RN

;RN

ảp
S
t

êru
cc
ứ
ád
C
ứ

tRẫ
ấh

yg
h

;uL
á

nh
tế

;u
cụ
n

ếư
a

cẩ
ự
/gn
g

tờ
n

;m
h
i

hoạt động như một chất trung gian điện tử nhân tạo hỗ trợ

tốc độ truyền electron giữa bề mặt điện cực SPCE và enzyme LDH nhanh hơn.

Cảm biến sinh học cho thấy phản ứng tuyến tính
trong phạm vi 0,55–10 mM và thu được khả năng tái tạo tốt
tín hiệu ở điện thế ứng dụng þ0,05 V. Cảm biến cho thấy
thời gian đáp ứng là 10 giây. Rahaman và cộng sự. cũng thu được khả năng tái
sản xuất tốt cho cảm biến pTTCA/MWNT/LDH/NADþ với họ hàng
độ lệch chuẩn (RSD) là 4,3% [28]. Cảm biến tới cảm biến và
2μ
1
0m5

0m2

,m
2
μ
0

,L0
m
ut

–M
yí

005-M

–0M

0M

21m
ến

00
04
–

–o8
nh

độ tái lập từ lần chạy này được tìm thấy lần lượt là 1,7% và 1,1% bằng cách
0

tiến hành một loạt năm phép đo liên tiếp

lactate khoảng 5 mM trong 0,1 mM PB.
Độ lặp lại đề cập đến số lần cảm biến có thể được vận hành và sẵn sàng
cho lần đọc tiếp theo. Mặt khác, khả năng tái tạo của cảm biến đề cập đến
các kết quả có thể dự đoán được có thể
thu được bằng cách sử dụng lặp đi lặp lại. Kriz và cộng sự. đã phát triển
0M
5

,Μ0
ạhG
p

,L4
6m
ớih

lomn371
iệ
t
n n
á

cảm biến đo lactate amperometric dựa trên việc bẫy lactate oxyase
với màng bán thấm sử dụng công nghệ SIRE trên Pt
điện cực. Nồng độ L-lactate hòa tan được sử dụng để

đo độ tươi của sản phẩm thực phẩm [76]. Họ nghiên cứu khả năng tái tạo của
bột cà chua và thức ăn trẻ em và các phép đo
được tìm thấy là 2,5% (RSD, n¼15) và 4,0% (RSD, n¼15) và cho
độ tái lập là 13,0% (RSD, n¼45) và 3,0% (RSD, n¼45),
tương ứng.
5μc
m
1

,L1
m
,m7

RN

,m6
μ
hc
N

,MA
m
2

8mA
6MA
ạả

0MA

61
2

3o
ym

71

2l

Để xác định độ chính xác của cảm biến sinh học, phép đo
1

các giá trị thu được từ cảm biến đã phát triển được so sánh với phương pháp
tham chiếu khác để xác định mối tương quan giữa

hai. Pereira và cộng sự. chế tạo cảm biến sinh học lactate dựa trên LDH/
Điện cực MWCNT-MB làm việc ở điện thế 0,0 V [66]. Các
cảm biến cho thấy độ nhạy tuyệt vời 3,46 mA cm2 mmol L1
với phạm vi đáp ứng tuyến tính rộng 0,10–10 mmol L1 . Kết quả

thu được có mối tương quan tốt với các nghiên cứu đo quang phổ tham chiếu.
Người ta thấy rằng giá trị trung bình thu được bằng
hai phương pháp có độ tin cậy như nhau về mặt thống kê
nệiĐ

;RN

nệiĐ
ựps
h

mNA
k

mNA
k
ođL
d
P
p
c

phấ

pRế

pRế
ạịầ
ò
h
ố

e;

e;
in
gnh
ơ
p u
;
ư
á

95% bằng cách áp dụng bài kiểm tra t-Student để xác minh điểm trung bình thu được bằng

hai phương pháp và do đó cảm biến sinh học được đề xuất đã được tìm thấy là
chính xác.

8. Phân loại cảm biến sinh học L-lactate

Việc phân loại cảm biến sinh học L-lactate dựa trên sự khác biệt
eGF
M

iGĐ
c
N
C

icđ
acM
t
V
l
đ

âZd
n
iGT
N
P

uZA
N

ệự
3CW

ệCự
a
e
ậựr
ố
ị
ậ
à
i

yNa
OCP
R

/na

nc
OE
C

nEc
n
O
hcn
t
m
ệ

oO
n
2E/
G

oO
n
4N

-2o
;n
u

-/
/T

chất hỗ trợ được sử dụng để cố định enzym LDH hoặc LOD.

Cảm biến sinh học L-Lactate có LDH cố định hoạt động cùng với
coenzym (NAD hoặc NADP). Enzym sẽ chuyển hóa L-lactate thành
pyruvate và NAD thành NADH. Trên bề mặt điện cực NADH sẽ
bị oxy hóa dưới ảnh hưởng của điện thế ứng dụng và
ih
ếe tt
(

dòng oxy hóa sẽ tỷ lệ thuận với L-lactate

po
)

nồng độ trong dung dịch.

4U
1
m

oEi
s
N
P
L
(
c

ơUc
t
1

gm
ơbc

ơNc
b
piắ
ủ

0g
;t
a

cCp
R
O
e
-
D
k
ó

ỏ/h
3
pRắ
ủ
i
1

o).
D
d
H
h

;0
;t
a

cn
sug c;
-
ô
EN1
(
r
L
c
E
ngE
n

ốdt
s

CR.
D
k
a
O
ó
C
zốg

ềụ
i
ử

.;1
H
h
b
D
)
icu

nn

1;ô
-
(
m;ồ

Mặt khác, cảm biến sinh học L-Lactate đã cố định

.kn
;n

2hg

ApP
A

DnN
C
t

ot
M
7ô

4in
S
HC

noZ
K
gnả7
B

Aox

:aấ
r

Or
)n

Ih

Oxẽ
:li

cnu
ú

3il
g

Ntl
Ti

:im
.cilyrcay
t

.o

:oy
3ri
:t

.t

dxp
:uc
.naso

ei
nao

nt
.

LOD xúc tác cho phản ứng oxy hóa cơ chất L-lactate
Machine Translated by Google

K. Rahee và cộng sự. / Báo cáo Hóa sinh và Lý sinh 5 (2016) 35–54 49

Hình 6. Các giá đỡ khác nhau có sẵn để chế tạo điện cực làm việc.

đến pyruvat. Phản ứng này xảy ra với sự có mặt của chất hòa tan 8.1.3. Nhược điểm

ôxy. Hydrogen peroxide được tạo ra do phản ứng trên; có hoạt tính điện Gặp phải vấn đề tắc nghẽn màng. Các lỗ chân lông của
hóa và có thể bị khử hoặc màng bán thấm có thể bị chặn dẫn đến
bị oxy hóa. Dòng điện sinh ra do quá trình oxy hóa hoặc khử tỷ lệ cản trở sự đi qua của chất tan. Bảng 1 cho thấy các đặc tính khác nhau
thuận với nồng độ L-lactate có trong của cảm biến sinh học L-lactate dựa trên màng.

mẫu (Hình 6).

8.2. Cảm biến sinh học LDH dựa trên ma trận polyme

8.1. Màng dùng trong chế tạo cảm biến sinh học L-lactate
Polyme cung cấp ứng dụng trong lĩnh vực điện tử
thiết bị đo lường, đặc biệt là trong cảm biến sinh học, do khả năng
Các màng có độ xốp khác nhau có thể được sử dụng để gắn các
tạo thành lớp phủ chọn lọc perm trên bề mặt điện cực làm việc để làm
enzyme ở gần bề mặt điện cực trong lactate
giảm hoặc ngăn chặn các hợp chất gây cản trở
cảm biến sinh học. Về cơ bản, điều này liên quan đến việc cố định
xuyên qua lớp cảm biến trên bề mặt điện cực. Luận văn
enzyme trên màng tự nhiên hoặc nhân tạo tương thích sinh học và gắn
ma trận polyme linh hoạt, tương thích sinh học và ít tốn kém hơn [79].
màng vào đầu dò để cải thiện độ nhạy và độ chọn lọc của cảm biến sinh
học được chế tạo. Màng
cảm biến sinh học dựa trên cung cấp một giải pháp rẻ tiền, di động và nhanh chóng
8.2.1. Cảm biến sinh học L-lactate dựa trên ma trận polymer không dẫn điện
cách dùng một lần để xác định nồng độ lactate. Nó cũng giúp ích trong
Các polyme không dẫn điện cũng được sử dụng rộng rãi làm chất hỗ trợ
duy trì sự ổn định của enzym và tăng cường
màng trên bề mặt điện cực để cố định LDH/LOD. Những cái này
thời hạn sử dụng của cảm biến sinh học. Ngoài ra nó còn giải quyết được nhiều vấn đề khác nhau
vật liệu polymer không dẫn điện về cơ bản có những đặc điểm khác nhau
những hạn chế như khả năng cố định enzyme trực tiếp vào
nhóm chức như amin, axit cacboxylic, thiol và
đầu dò, ngăn ngừa mất enzyme, cho phép sản xuất hàng loạt và
những người khác trước hoặc sau khi sửa đổi bề mặt với sự trợ giúp của
do đó làm giảm thời gian phản ứng của enzyme, từ đó
tác nhân oxy hóa khác nhau. Chúng có thể dễ dàng được chuẩn bị trong
giúp cải thiện khả năng tái tạo tín hiệu cảm biến sinh học.
phòng thí nghiệm.

8.1.1. Hỗ trợ được sử dụng để cố định

8.2.1.1. Các hỗ trợ khác nhau được sử dụng để cố định.
Amucin/albumin hydrogel nền/màng Nafion [70], silica xốp me/Prussian
Chất nền Amucin/albumin hydrogel/điện cực Nafion Polymer Pt
Blue (PB) in lụa/ưa nước
[70], Chitosan/MWCNT/ferrocyanide/điện cực vàng [80], Chitosan/
màng xốp [71], polydivinylbenzen/etylvinylbenzen
poly-vinyl imidazole Os (PVI-Os)/CNT/điện cực vàng [81], ma trận rượu
Màng phủ (DVB/EVB) [72], màng cellulose axetat (CA) [73], màng CNT/
poly-vinyl (PVA) trên điện cực than chì được platin hóa [82],
polysulfon [74], polypyrrole (PPYox)
polyethyleneimine (PEI) và poly(carbamoyl)sulfonate (PCS) hy-drogel/
màng chống nhiễu [75], Màng bán thấm
điện cực than chì/nafion/Pt in lụa [83], sol–gel
Sử dụng công nghệ SIRE/điện cực Pt [76], màng/sàng lọc Blue-Re-inecke
màng có nguồn gốc từ MTEOS/Os-polymer /GCE [84], dựa trên hydrogel
Salt (MBRS-SPCE)/cellulose acetate của Meldola
phức hợp osmium [Os(byp)2ClPyCH2NH Poly(allylamine)] oxi hóa khử
điện cực cacbon in [77], poly(carbamoyl) sulfonate (PCS) polyme/GCE [85], Hydrogel Laponite-chitosan/GCE [86], Nafion/
hydrogel trên màng Teflon/Pt [78]. cobalt phthalocyanine poly-vinyl rượu/carbon in lụa
điện cực [60].
8.1.2. Công trạng

Màng cho thấy mức độ linh hoạt cao và cơ học 8.2.1.2. Công đức. Có thể chuẩn bị dễ dàng; cung cấp môi trường vi mô
độ bền trên phạm vi pH rộng hơn, có tính chọn lọc cao ngăn ngừa thuận lợi cho các phân tử enzyme nhằm nâng cao tính ổn định trong bảo
các chất gây nhiễu đi qua và cuối cùng giúp khuếch đại phản ứng. quản, có thể tổng hợp được nhiều loại chất hỗ trợ do khả năng
những biến đổi hóa học.
Machine Translated by Google
50 K. Rahee và cộng sự. / Báo cáo Hóa sinh và Lý sinh 5 (2016) 35–54
8.2.1.3. Nhược điểm. Chất hỗ trợ có thể đóng vai trò là rào cản giữa điện
tử và bề mặt đầu dò, từ đó ảnh hưởng đến độ nhạy của cảm biến sinh học.
Bảng 2 cung cấp sự so sánh các đặc tính phân tích của tất cả các cảm biến
sinh học L-lactate dựa trên polymer không dẫn điện.
8.2.2. Cảm biến sinh học L-lactate dựa trên ma trận polymer
Polyme dẫn điện là các polyme liên hợp hữu cơ có độ dẫn điện cao do sự
hiện diện của hệ thống π-hoặc-bital mở rộng [87]. Chúng chủ yếu được tổng
hợp bằng các phản ứng liên quan đến quá trình khử hydro, bao gồm sự liên
kết oxy hóa của các tiền chất đơn vòng. Có nhiều tính chất khác nhau như
độ dẫn điện, tính chất cơ học có thể được sửa đổi bằng mô hình hóa học.
Chúng có thể được tổng hợp về mặt điện hóa trên kích thước rất nhỏ của
điện cực có chất nền có hình dạng và kích thước bất kỳ với sự trợ giúp của
màng polymer và cũng được sử dụng để polyme hóa điện để bẫy enzyme [88,89] .
8.2.2.1. Các hỗ trợ khác nhau được sử dụng để cố định.
Polyethyleneimine (PEI)/Điện cực dán cacbon [90], poly (3-me-thylthiophene)
(P3 MT)/MWCNT/điện cực cacbon thủy tinh (GCE) [35], poly-5,2′-5′,2′′
-terthiophene-3′-carboxylic acid (pTTCA)/ màng tổ hợp MWCNT/điện cực Au
[28], màng polyaniline (PANI)/tấm thủy tinh phủ indium–tin-oxide (ITO) làm
điện cực làm việc [43], poly- Phim anilin–poly acrylate (PANI–PAA)/GCE
[55], polypyrrole–polyvinylsulphonate (PPY–PVS) [91], màng poly(pyrrole)
pha tạp polyanion/điện cực Pt [56], polyaniline (PANI)/ITO [92 ], điện cực
poly(o-phenylenediamine) (PPD)/cacbon [93].
8.2.2.2. Công đức. Tương thích sinh học trong môi trường nước trung tính,
tăng cường độ nhạy và độ chọn lọc nhờ tính dẫn điện tốt và kênh truyền
điện tử của chúng.
8.2.2.3. Nhược điểm. Chi phí cao, khó khăn trong chế tạo, pha tạp dẫn đến
thiếu độ ổn định cơ học và tuổi thọ ngắn hơn, v.v. Bảng 3 cho thấy các đặc
tính của các cảm biến sinh học L-lactate dựa trên polymer dẫn điện khác
nhau.
8.3. Cảm biến sinh học lactate dựa trên Sol–gel
Phương pháp Sol–gel bao gồm việc bẫy và cố định enzym trong một nền
gel xốp, trong suốt về mặt quang học. Đây là một trong những hỗ trợ quan
trọng đang được sử dụng và được biết là thu hút sự chú ý cho việc chế tạo
các sản phẩm sửa đổi
điện cực. Nó cung cấp một phương pháp cố định linh hoạt nhờ sự hiện diện
của orthosilicate hữu cơ hoặc vô cơ được hình thành bằng kỹ thuật hóa học
ướt. Nó cung cấp các cầu nối M–O hoặc M–OH–M giúp cố định enzyme [94].
Trong chiến lược trên, sol (hoặc dung dịch) chuyển thành mạng lưới giống
như gel xung quanh enzyme và bao gồm cả pha rắn và pha lỏng [95].
8.3.1. Chất hỗ trợ Sol gel dùng để cố định enzyme
Mạng lưới silicat 3-D Sol–gel có nguồn gốc từ 3-(mercaptopropyl)
trimethoxysilane (MPTS)/GNPs [37], màng gel silica sol/MWCNT/GCE [96], màng
sol–gel/MWCNTs/Ptnano/GCE [97] , silica sol gel phủ điện cực Niobium oxit/
cacbon dán [40], mực in lụa Graphite epoxy/graphit(sol–gel) [98], 3-
(aminopropyl) trimethoxysilane, 2-(3,4-epoxycyclohexyl)ethyl-
trimethoxysilane (APTMS)/điện cực xốp sol–gel/điện cực dựa trên bạch kim
[99], MWCNTs/điện cực Pt-nano dựa trên sol–gel [39], điện cực biến đổi
Prussian Blue dựa trên sol–gel [100], mạng polyme 3D sol–gel được khử từ (3-
mercaptopropyl)-trimethoxysilane (MPTS)/na-noparticles vàng (AuNPs) [101],
khớp nối carbodiimide/dựa trên sol–gel [102], Graphite/Carbon platin hóa
dựa trên sol–gel [103], sol –màng gel có nguồn gốc từ metyltriethoxysilane
(MTEOS)/polyme oxi hóa khử osmium (Os-polymer) /GCE [84].
8.3.2. Ưu điểm
Dễ chuẩn bị, trơ về mặt hóa học, độ xốp có thể điều chỉnh được, thể
hiện tính ổn định quang hóa và nhiệt; ngăn chặn sự rò rỉ enzyme trong môi
trường.
8.3.3. Nhược điểm
Không dẫn điện, có các bước hạn chế khuếch tán, kém nhạy, tương tác
giữa chất xúc tác-ma trận và động học liên quan là không rõ ràng. Bảng 4
cho thấy các đặc tính của các cảm biến sinh học L-lactate dựa trên sol–gel
khác nhau.
8.4. Cảm biến sinh học lactate dựa trên hydrogel
Về cơ bản, hydrogel có thể được mô tả như một mạng lưới polyme ba chiều
trong đó tất cả các chuỗi polyme được liên kết với nhau và hiện diện trong
nước dưới dạng môi trường phân tán. Các chuỗi polyme có bản chất ưa nước
và có khả năng hấp phụ cao.
Hydrogel có thể được phân loại thành hydrogel tự nhiên và hydrogel tổng
hợp. Loại tổng hợp được sử dụng nhiều hơn do các ứng dụng như khả năng
hấp thụ nước cao hơn và tuổi thọ dài.
8.4.1. Chất hỗ trợ hydro gel dùng để cố định enzyme
Hydrogel có nguồn gốc từ poly(vinyl pyridine) được tạo phức với [Os
(4,4′- dimethoxy-2,2′-bipyridine)2Cl]þ/2þ/Au điện cực [57], phức osmium
dựa trên hy-drogel [Os(byp) 2ClPyCH2NH Poly(ally-lamine)] oxi hóa khử
polyme/GCE [85], poly(carbamoyl) sulfonate (PCS) hydrogel trên màng Teflon/
Pt [78], Laponite hydro gel/GCE [104], Laponite-chitosan hydrogel/GCE [86].
8.4.2. Ưu điểm
Cung cấp môi trường vi mô tương thích sinh học cho enzyme, thể hiện độ
nhạy cao, cung cấp đủ độ thấm cho cả phân tử dung môi và cơ chất.
8.4.3. Nhược điểm
Khó khăn trong việc xử lý do độ bền cơ học thấp. Bảng 5 cho thấy các
đặc tính của các cảm biến sinh học L-lactate dựa trên hydro-gel khác nhau.
8,5. Cảm biến sinh học lactate dựa trên điện cực in màn hình (SPE)
Phương pháp in lụa cung cấp một kỹ thuật hấp dẫn và được sử dụng rộng
rãi để chế tạo cảm biến sinh học. Nó bao gồm một chất nền trơ về mặt hóa
học, trên đó hệ thống ba điện cực, bao gồm điện cực làm việc, điện cực
tham chiếu và điện cực đối diện, được in bằng chiến lược in lụa [105] .
Các phân tử sinh học hoặc thụ thể sinh học ở dạng hoạt động của chúng
được cố định trên chất nền trơ về mặt hóa học này.
8.5.1. Chất hỗ trợ cố định màng enzyme CA/Meldola blue,
NADP; carbon Điện cực mực in lụa [73], CNT/polysulfon/SPE [74],
Meldola's Blue-Reinecke Salt (MBRS)/SPCE/cellulose acetate (CA) màng/SPCE
[77], silica trung tính/Prussian Blue in lụa ( PB) /màng xốp ưa nước [71],
hydrogel poly(carbamoyl)sulfonate (PCS)/graphit in lụa/nafion/điện cực Pt
[83], SWCNTs/Var-iamine blue/SPE [106], carbon/SP-ink -E [107,108], Điện
cực Graphite epoxy/graphit SP-ink-(sol–gel) [98], Nafion/CoPC-SPCE [60].
8.5.2. Ưu điểm
Cung cấp hệ thống điện cực tiết kiệm, di động và dùng một lần, thích
hợp để làm việc với thể tích cực nhỏ, dễ chuẩn bị và sửa đổi hơn, có độ
đặc hiệu và độ chọn lọc tuyệt vời.
Bảng 6 thể hiện đặc tính của các điện cực in lụa khác nhau
cảm biến sinh học dựa trên L-Lactate.
Machine Translated by Google
K. Rahee và cộng sự. / Báo cáo Hóa sinh và Lý sinh 5 (2016) 35–54
8.6. Cảm biến sinh học L-lactate dựa trên hạt nano (NP)
Các hạt nano cũng có thể được sử dụng để nối dây điện hiệu quả cho
enzyme LDH hoặc LOD để phát hiện L-lactate. Các vật liệu nano khác nhau,
chẳng hạn như cấu trúc nano oxit kẽm (ZNO), ống nano carbon (CNT) và hạt
nano vàng (Au) đã được sử dụng làm đầu nối điện giữa điện cực và trung
tâm oxy hóa khử của enzyme.
Nhiều loại hạt nano đã được sử dụng trong cảm biến sinh học lactate do
ưu điểm của chúng cả về độ ổn định và cải thiện độ nhạy. Do các đặc tính
có giá trị của tỷ lệ bề mặt trên thể tích lớn, hoạt tính phản ứng bề
mặt tuyệt vời, hiệu suất xúc tác điện cao và đặc tính hấp phụ cao, vật
liệu nano là ứng cử viên quan trọng cho việc cố định enzyme trong chế
tạo cảm biến sinh học lactate.
8.6.1. Chất hỗ trợ hạt nano dùng để cố định enzyme
Các hạt nano, chẳng hạn như ống nano carbon đa thành (MWCNT)/Meldola
blue [66], MWCNT/poly (3-methylthiophene)
(P3 MT) điện cực carbon thủy tinh biến tính polyme (GCE) [35], CNT pha
tạp ni-trogen [34], điện cực in màn hình ferrocene CNT/polysulfon [74],
màng composite pTTCA/MWNT/điện cực Au [94], MWCNT /GCE [96], Fe3O4/MWCNT/
GCE [109], MWCNT/CHIT com-posite/GCE [110], SWCNTSs/Variamine blue [106],
Chitosan/ MWCNT/ferrocyanide/điện cực vàng [80], Chitosan/poly -vinyl
imidazole Os (PVI-Os)/CNT [81], điện cực MWCNTs/Pt-nano [39], hạt nano
vàng (GNP)/mạng lưới silicat 3-D gel có nguồn gốc từ 3-
(mercaptopropyl)trimethoxysilane (MPTS) [37], na-norod vàng [111], hạt
nano bạch kim (Hạt nano Pt đen) với điện cực vàng [112], màng sol–gel/
MWCNT/hạt nano Pt [97], axit polyacrylic (PAA)/Si3N4 có cấu trúc nano
[113 ], Mạng ống nano hydro titan-nate (H2Ti3O7) [114], các hạt nano
oxit kim loại như niobium oxit/điện cực dán cacbon [40], hạt nano Tita-
nium dioxide (TiO2-NPs)/Graphene khử quang xúc tác (PRG)/GCE [115], điện
cực Cerium oxit Nano-CeO2/GCE [116], dây nano oxit molypden, điện cực
SiO2 được phủ MoO3/Au [41] và các hạt nano của vật liệu bán dẫn như oxit
kẽm (ZNO)/MWCNT [42], ZNO chất nền thanh nano/được phủ thủy tinh [117],
nano-ZnO-MWCNTs/GCE [118], điện cực Au/Nano ZnO [132], dây nano ZNO [119],
bốn chân nano ZnO [120].
8.6.2. Công trạng
Các hạt nano đóng một vai trò to lớn trong việc chế tạo các cảm biến
sinh học có cấu trúc nano mới, các ứng dụng cảm biến của chúng như khả
năng chuyển điện tử cực tốt; chúng có kích thước nhỏ và diện tích bề mặt
lớn, chúng có tính điện động cao và ổn định về mặt hóa học trong môi
trường nước cũng như không chứa nước. Trong số các ZnO, CNT, AuNP này
được sử dụng rộng rãi để cố định enzyme, nhờ khả năng tương thích sinh
học tốt và khả năng bảo quản hoạt động của enzyme. Bảng 7 cho thấy các
đặc tính của các cảm biến sinh học L-lactate dựa trên NP khác nhau.
9. Ứng dụng thực tế của cảm biến sinh học L-lactate
Có một yêu cầu cấp thiết về cảm biến sinh học L-lactate trong lĩnh
vực y tế để xác định mức độ lactate chính xác và dễ dàng. Việc theo dõi
nồng độ L-lactate trong huyết thanh là rất cần thiết vì nó đóng vai trò
quan trọng trong chẩn đoán lâm sàng của bệnh nhân, tại phòng chăm sóc
đặc biệt và trong quá trình phẫu thuật. Việc sản xuất axit lactic có
thể tăng lên trong cơ thể do các tình trạng như tập thể dục vất vả hoặc
các tình trạng khác - chẳng hạn như suy tim [121], xuất huyết [10], suy
hô hấp [122], bệnh gan [123], nhiễm trùng nặng ( nhiễm trùng huyết),
hoặc sốc [124], thiếu oxy mô [125]. Mức độ axit lactic cũng có thể tăng
lên khi gan bị tổn thương hoặc bị bệnh cấp tính, vì thông thường gan
chịu trách nhiệm phân hủy axit lactic trong cơ thể [126]. Vì vậy việc
xác định nồng độ lactate bằng
51
sự hỗ trợ của cảm biến sinh học có thể giúp dự đoán kết quả ở những
bệnh nhân nhập viện chăm sóc đặc biệt [127]. Trong lĩnh vực y học thể
thao cũng vậy, cảm biến sinh học L-lactate đóng vai trò quan trọng vì
nồng độ lactate trong máu đóng vai trò là chỉ số về tình trạng tập luyện
và thể lực trong quá trình tập luyện của vận động viên. Vì vậy nồng độ
lactate không chỉ được xác định trong máu toàn phần mà còn trong mồ
hôi, nước bọt và dịch kẽ. Việc theo dõi nồng độ lactate bằng sự trợ giúp
của cảm biến sinh học không chỉ giới hạn trong chẩn đoán lâm sàng mà còn
rất quan trọng trong ngành công nghiệp thực phẩm, đặc biệt là trong quá
trình lên men các sản phẩm sữa. Sự hiện diện của lượng Lactate có thể có
tác động lớn đến độ ổn định, hương vị, độ tươi, thời gian bảo quản và
chất lượng của sữa và các sản phẩm từ sữa khác, cũng như trái cây, rau
quả [76,128], thịt [129] và rượu vang [ 130 ] . Vì vậy, nồng độ L-lactate
đóng vai trò quan trọng trong chẩn đoán lâm sàng, xác nhận thuốc và phân tích thực
Cảm biến sinh học dựa trên Lactate hoạt động như một phương pháp nhanh
chóng và đáng tin cậy để phát hiện nồng độ lactate tại chỗ. Hơn nữa, khi
so sánh với HPLC truyền thống và các phương pháp khác, cảm biến sinh học
có ưu điểm là rất chọn lọc, nhạy cảm, dùng một lần, không yêu cầu thiết
bị đo đạc rộng rãi, không tốn kém và hoạt động hoàn toàn tự động hóa
cũng như cung cấp kết quả nhanh chóng.
10. Kết luận và triển vọng tương lai
Nhiều nỗ lực phát triển và nghiên cứu để tạo ra cảm biến sinh học
siêu nhạy dựa trên việc theo dõi lactate cung cấp cái nhìn sâu sắc về
vai trò quan trọng của nó trong chẩn đoán lâm sàng và phân tích thực phẩm.
Trong số các phương pháp phát hiện lactate khác nhau, cảm biến lactate
điện hóa dựa trên enzyme là loại chiếm ưu thế do độ nhạy, giới hạn phát
hiện thấp, chế tạo tương đối đơn giản, thân thiện với người dùng, tính
di động, độ tin cậy và chi phí hợp lý. Tuy nhiên, cần nhiều nghiên cứu
hơn về cảm biến lactate có thể cấy ghép, thường được cấy vào mạch máu
(nội mạch) hoặc dưới da (dưới da) và có thể đáp ứng nhu cầu theo dõi
liên tục lượng lactate. Điều này về cơ bản sẽ ngăn chặn yêu cầu pha
loãng mẫu và sẽ mang lại hiệu quả cho bệnh nhân trong bệnh viện được
theo dõi nghiêm ngặt. Mặc dù loại cảm biến này phải đối mặt với thách
thức về khả năng tương thích sinh học, phản ứng động chậm và các vấn đề
kỹ thuật. Tuy nhiên, với sự ra đời của tiến bộ công nghệ nano, các hạt
nano hứa hẹn sẽ hỗ trợ phù hợp làm điện cực làm việc để phát hiện
lactate về mặt thu nhỏ và phát triển các thiết bị cảm biến bán xâm lấn
hoặc cuối cùng là không xâm lấn để thương mại hóa. Vật liệu nano (dựa
trên oxit kim loại, SWCNTs/MWCNTs, hạt nano vàng (Au)) nhờ những ưu
điểm như tỷ lệ bề mặt trên thể tích lớn, giá trị IEP cao, hoạt tính phản
ứng bề mặt cao, hiệu suất xúc tác cao và khả năng hấp phụ mạnh. cung cấp
một bề mặt tốt hơn cho việc cố định lactate. Thật vậy, mối quan tâm
nghiên cứu đang bùng nổ của cảm biến lactate sẽ tiếp tục với mức độ phổ
biến ngày càng tăng trong chẩn đoán lâm sàng, phân tích thực phẩm và
nghiên cứu thực nghiệm thu được thông qua việc điều tra các cảm biến
lactate có cấu trúc nano sẽ sớm cách mạng hóa ngành công nghiệp cảm biến
sinh học trong tương lai.
Nhìn nhận
Một trong những tác giả cảm ơn sự hỗ trợ tài chính từ Sở Khoa học &
Công nghệ, New Delhi, vì đã cung cấp học bổng IN-SPIRE dưới dạng SRF-P
(IF110655).
Phụ lục A. Tài liệu bổ sung
Dữ liệu bổ sung liên quan đến bài viết này có thể được tìm thấy trong phiên
bản trực tuyến tại http://dx.doi.org/10.1016/j.bbrep.2015.11.010.
Machine Translated by Google
52 K. Rahee và cộng sự. / Báo cáo Hóa sinh và Lý sinh 5 (2016) 35–54
Người giới thiệu
[1] GJ Kost, Máy phân tích máu toàn phần mới và tác động của chúng đối với việc chăm sóc tim mạch và quan trọng,
Crit. Mục sư lâm sàng. Phòng thí nghiệm. Khoa học. 30 (1993) 153–202.
[2] J. Bakker, P. Gris, M. Coffernils, RJ Kahn, JL Vincent, Lactate máu nối tiếp
mức độ có thể dự đoán sự phát triển của suy đa cơ quan sau sốc nhiễm trùng, Am. J. Phẫu thuật.
171 (1996) 221–226.
[3] A. Parra, E. Casero, L. Vazquez, F. Pariente, E. Lorenzo, Thiết kế và ký tự
kích hoạt cảm biến sinh học lactate dựa trên enzyme lactate oxydase cố định trên bề mặt vàng,
Anal. Chim. Acta 555 (2006) 308–315.
[4] J. Wang, Cảm biến sinh học đo cường độ dòng điện để theo dõi thuốc điều trị và lâm sàng:
đánh giá, J. Pharm. Sinh học. Hậu môn. 19 (1999) 47–53.
[5] R. Pilloton, TN Nwosu, M. Mascini, Xác định bằng ampe kế axit lactic. Ứng dụng trên mẫu sữa,
Hậu môn. Lett. 21 (1988) 727–740.
[6] F. Mazzei, A. Azzoni, B. Cavalieri, F. Botre, C. Botre, Một loại sinh vật đa enzyme-
lectrode để xác định nhanh tổng nồng độ lactate trong cà chua, nước ép cà chua và bột cà
chua, Food Chem. 55 (1996) 413–418.
[7] ML Goodwin, JE Harris, A. Hernandez, LB Gladden, Đo lượng lactate máu-
sự chắc chắn và phân tích trong quá trình tập luyện: hướng dẫn dành cho bác sĩ lâm sàng, J. Diab Sci.
Technol. 1 (2007) 558–569.
[8] J. Uribarri, MS Oh, HJ Carroll, nhiễm toan D-lactic. Đánh giá về biểu hiện lâm sàng, đặc
điểm sinh hóa và cơ chế sinh lý bệnh, Y học 77 (1998) 73–82.
[9] G. Kemp, Tích lũy Lactate, đệm proton và thay đổi độ pH trong cơ bắp do thiếu máu cục bộ,
Am. J. Physiol. Quy định. Tích phân. Comp. Physiol. 289 (2005) R895–R901.
[10] F. Valenza, G. Aletti, T. Fossali, G. Chevallard, F. Sacconi, M. Irace, L. Gattinoni, Lactate như
một dấu hiệu cho thấy tình trạng suy giảm năng lượng ở những bệnh nhân nguy kịch: giả thuyết, Crit.
Chăm sóc 9 (2005) 588–593.
[11] RA Kreisberg, Sinh bệnh học và quản lý nhiễm axit lactic, Annu. Rev.
Med. 35 (1984) 181–193.
[12] PJ Pronovost, ML Rinke, K. Emery, C. Dennison, C. Blackledge, S.
M. Berenholtz, Các biện pháp can thiệp để giảm tỷ lệ tử vong ở những bệnh nhân được điều trị
tại phòng chăm sóc đặc biệt, J. Crit. Chăm sóc 19 (2004) 158–164.
[13] DC Angus, WTL Zwirble, J. Lidicker, G. Clermont, J. Carcillo, MR Pinsky, Dịch tễ học về
nhiễm trùng huyết nặng ở Hoa Kỳ: phân tích tỷ lệ mắc, kết quả và chi phí chăm sóc liên
quan, Crit. Chăm sóc Med. 29 (2001) 1303–1310.
[14] RA Fowler, M. Hill-Popper, J. Stasinos, C. Petrou, GD Sanders, AM Garber, Hiệu quả chi phí của
protein tái hoạt C tái tổ hợp ở người và ảnh hưởng của mức độ nghiêm trọng của bệnh trong
điều trị bệnh nhân mắc bệnh nhiễm trùng huyết nặng, J.
Chí mạng. Chăm sóc 18 (2003) 181–191.
[15] HB Nguyễn, EP Rivers, BP Knoblich, G. Jacobsen, A. Muzzin, JA Ressler, M.
C. Tomlanovich, Độ thanh thải lactate sớm có liên quan đến kết quả được cải thiện trong nhiễm
trùng huyết nặng và sốc nhiễm trùng, Crit. Chăm sóc Med. 32 (2004) 1637–1642.
[16] F. Shapiro, N. Silanikove, Xác định nhanh chóng và chính xác D- và L-lac-
tate, lactose và galactose bằng các phản ứng enzym kết hợp với sự hình thành chất
fluorochromophore: ứng dụng trong kiểm soát chất lượng thực phẩm, Food Chem. 119 (2010)
829–833.
[17] MP Milagres, SC Brandao, MA Magalhaes, VP Minim, LA Minim, Phát triển và xác nhận phương pháp
sắc ký lỏng hiệu năng cao– loại trừ ion để phát hiện axit lactic trong sữa, Food Chem. 135
(2012) 1078–1082.
[18] J. Galban, S. de Marcos, JR Castillo, chất khử lactate enzyme huỳnh quang
chấm dứt dựa trên huỳnh quang enzyme cytochrome b2, Hậu môn. Chem. 65 (1993) 3076–3080.
[19] SB Barker, WH Summerson, Xác định màu axit lactic trong vật liệu sinh học, J. Biol. Chem. 138
(1941) 535–554.
[20] B. Heinemann, Phương pháp đo màu nhanh để xác định hàm lượng lactic
axit trong sữa, J. Dairy Sci. 23 (1940) 969–972.
[21] F. Wu, Y. Huang, C. Huang, Hệ thống cảm biến sinh học phát quang hóa học cho axit lactic sử
dụng mô động vật tự nhiên làm yếu tố nhận dạng, Biosens. Điện tử sinh học. 21 (2005) 518–522.
[22] DP Soares, M. Law, Quang phổ cộng hưởng từ của não: xem xét
chất chuyển hóa và ứng dụng lâm sàng, Clin. Radiol. 64 (2009) 12–21.
[23] J. Ren, A. Dean Sherry, CR Malloy, Giám sát không xâm lấn thuốc nhuộm lactate
namics trong cơ cẳng tay của con người sau khi tập luyện toàn diện bằng (1) Quang phổ cộng
hưởng từ H ở 7 tesla, Magn. Cộng hưởng. Med. 70 (2013) 610–619.
[24] N. Nikolaus, B. Strehlitz, Cảm biến sinh học Amperometric lactate và ứng dụng của chúng
trong y học (thể thao), về chất lượng cuộc sống và sức khỏe, Microchim. Acta 160 (2008) 15–
55.
[25] C. Meyerhoff, F. Bischof, FJ Mennel, F. Sternberg, J. Bican, EF Pfeiffer, Giám sát liên tục
trực tuyến lượng lactate trong máu ở nam giới bằng một thiết bị đeo được dựa trên cảm biến
đo cường độ lactate bằng enzym, Biosens. Điện tử sinh học. 8 (1993) 409–414.
[26] D. Pfeiffer, B. Moller, N. Klimes, J. Szeponik, Ống thông Amperometric lactate oxidase để
theo dõi lactate theo thời gian thực dựa trên công nghệ màng mỏng, Biosens. Điện tử sinh
học. 12 (1997) 539–550.
[27] AM Gue, H. Tap, P. Gros, F. Maury, Bộ cảm biến sinh học enzyme dựa trên silicon thu nhỏ: hướng
tới cấu trúc và công nghệ chung cho các xét nghiệm đa chất phân tích , Sens. Actuators B
82 (2002) 227–232.
[28] MM Rahman, MJ Shiddiky, MA Rahman, YB Shim, Một cảm biến sinh học lactate dựa trên lactate
dehydrogenase/nictotinamide adenine dinucleotide (dạng oxy hóa) được cố định trên màng
composite ống nano carbon đa vách/polyme dẫn điện, Anal. Hóa sinh. 384 (2009) 159–165.
[29] C. Arnaldo, R. Marina, K. Alexandre, V. Denise, T. Lauro, Amperometric
cảm biến sinh học để phát hiện lactate dựa trên lactate dehydrogenase và Meldola Blue
đồng cố định trên ống nano carbon đa thành, Sens. Actuators B 124 (2006) 269–276.
[30] P. Mamas, IK Miltiades, Cảm biến sinh học đo cường độ dòng điện dựa trên enzyme cho thực phẩm
phân tích, Điện phân 14 (2002) 241–261.
[31] DR Thevenot, K. Toth, RA Durst, GS Wilson, Cảm biến sinh học điện hóa: định nghĩa và phân
loại được khuyến nghị, Biosens. Điện tử sinh học. 16 (2001) 121–131.
[32] WJ Blaedel, RC Engstrom, Điện cực enzyme không thuốc thử cho ethanol, lactate và malate,
Anal. Chem. 52 (1980) 1691–1697.
[33] A. Salimi, A. Noorbakhsh, H. Mamkhezri, R. Ghavami, Sự khử bằng xúc tác điện của H2O2 và
oxy trên bề mặt thionin được tích hợp vào điện cực carbon thủy tinh đã biến đổi của
MWCNTs: ứng dụng để phát hiện glucose, Electroanalysis 19 (2007) 1100–1108.
[34] JM Goran, JL Lyon, KJ Stevenson, Phát hiện ampe kế của L-lactate
sử dụng ống nano carbon pha tạp nitơ được biến đổi bằng lactate oxyase, Anal.
Chem. 83 (2011) 8123–8129.
[35] L. Agui, M. Eguilaz, C. Pena-Farfal, P. Yanez-Sedeno, JM Pingarron, cảm biến sinh học Lactate
dehydrogenase dựa trên điện cực biến đổi polyme dẫn ống nano cacbon lai, Phân tích điện 21
(2009) 386–391.
[36] M. Gamero, F. Pariente, E. Lorenzo, C. Alonso, Vàng thô có cấu trúc nano
các điện cực để phát triển cảm biến sinh học dựa trên lactate oxydase, Biosens.
Điện tử sinh học. 25 (2010) 2038–2044.
[37] BK Jena, CR Raj, Bộ cảm biến sinh học L-lactate Amperometric dựa trên các hạt nano vàng,
Phân tích điện 19 (2007) 816–822.
[38] YY Yu, Y. Yang, H. Gu, TS Chu, GY Shi, Hạt nano Pt có thể điều chỉnh kích thước như-
được sắp xếp trên carbon trung tính được sắp xếp theo chức năng để phát hiện đồng thời và
trực tuyến glucose và L lactate trong dịch lọc vi mô não, Biosens. Điện tử sinh học. 41
(2013) 511–518.
[39] XR He, JH Yu, SG Ge, XM Zhang, Q. Lin, H. Zhu, S. Feng, L. Yuan, J.
D. Huang, Bộ cảm biến sinh học Amperometric L-lactate dựa trên màng sol–gel và ống nano
cacbon đa vách/hạt nano bạch kim tăng cường, Chin. J.
Hậu môn. Chem. 38 (2010) 57–61.
[40] AC Pereira, A. Kisner, CRT Tarley, LT Kubota, Phát triển điện cực dán carbon để phát hiện
lactate dựa trên màu xanh của Meldola được hấp phụ trên silica gel được biến đổi bằng
niobium oxit và lactate oxyase, Electroanalysis 23 (2011) 1470–1477.
[41] I. Shakir, M. Shahid, HW Yang, S. Cherevko, CH Chung, DJ Kang, MoO3
Bộ cảm biến sinh học đo cường độ dòng điện dựa trên dây nano để phát hiện L-lactate, J. Solid
State Electrochem. 16 (2012) 2197–2201.
[42] YT Wang, YJ Bao, L. Lou, JJ Li, WJ Du, ZQ Zhu, H. Peng, JZ Zhu, Một cảm biến L- lactate mới
dựa trên điện cực enzyme được biến đổi bằng hạt nano ZnO và ống nano carbon đa vách, J. Điện
tử. Chem. 661 (2011) 8–12.
[43] A. Chaubey, KK Pande, VS Singh, BD Malhotra, Đồng cố định lactate oxidase và lactate
dehydrogenase khi tiến hành màng polyaniline, Hậu môn. Chim. Acta 407 (2000) 97–103.
[44] AC Pierre, Sự đóng gói sol–gel của enzyme, Biocatal. Biến đổi sinh học. 22 (2004) 145–170.
[45] CI Li, YH Lin, CL Shih, JP Tsaur, LK Chau, Sol–gel đóng gói lactate dehydrogenase để cảm biến
quang học của L-lactate, Biosens. Điện tử sinh học. 17 (2002) 323–330.
[46] F. Palmisano, GE DeBenedetto, CG Zambonin, cảm biến sinh học đo cường độ Lactate dựa trên
màng hai lớp được điện tổng hợp với enzyme cố định cộng hóa trị, Nhà phân tích 122
(1997) 365–369.
[47] SA Emr, AM Yacynych, Sử dụng màng polyme trong cảm biến sinh học đo cường độ dòng điện, Phân
tích điện 7 (1995) 913–923.
[48] T. Wink, SJ Van Zuilen, A. Bult, WP Van Bennekom, Lớp đơn lớp tự lắp ráp cho cảm biến
sinh học, Nhà phân tích 122 (1997) 43R–50R.
[49] JJ Gooding, DB Hibbert, Ứng dụng của alkanethiol tự lắp ráp
đơn lớp đến điện cực enzyme, Trends Anal. Chem. 18 (1999) 525–532.
[50] MM Rahman, Chế tạo cảm biến sinh học L-lactate dựa trên các loại oxy hóa khử qua trung
gian lactate oxydase bằng thiết bị vi mô, J. Biol. Med. Res. 1 (2010) 09–14.
[51] R. Antiochia, AEG Cass, G. Palleschi, Các ứng dụng tinh chế và cảm biến của diaphorase không
nhạy cảm với oxy, ưa nhiệt, Hậu môn. Chim. Acta 345 (1997) 17–28.
[52] HC Yoon, HS Kim, Đặc tính điện hóa của cảm biến sinh học L-lactate màng dày dựa trên carbon
sử dụng L-lactate dehydrogenase, Anal. Chim. Đạo luật 336 (1996) 57.
[53] ML Fultz, RA Durst, Các hợp chất hòa giải cho nghiên cứu điện hóa của các hệ thống oxy hóa khử
sinh học: một bản tổng hợp, Anal. Chim. Acta 140 (1982) 1–18.
[54] E. Simon, CM Halliwell, CS Toh, AEG Cass, PN Bartlett, Quá trình oxy hóa
NADH được sản xuất bởi lactate dehydrogenase cố định trên màng tổ hợp poly(aniline)–
poly(anion), J. Electroanal. Chem. 538–539 (2002) 253–259.
[55] CM Halliwell, E. Simon, CS Toh, PN Bartlett, AEG Cass, Cố định lactate dehydrogenase trên màng
poly(aniline)–poly(acrylate) và poly(aniline)–poly (vinyl sulphonate) để sử dụng trong
lactate cảm biến sinh học, hậu môn. Chim. Acta 453 (2002) 191–200.
[56] GF Khan, W. Wernet, Thiết kế điện cực enzyme để kéo dài thời gian sử dụng và bảo quản, Anal.
Chem. 69 (1997) 2682–2687.
[57] G. Kenausis, C. Taylor, I. Katakis, A. Heller, Dây' của glucose oxyase và
lactat oxydaza trong hydrogel tạo phức với poly(vinyl pyridine) với [Os(4,4′-dimethoxy-2,2′-
bipyridine)2Cl]þ/2þ, J. Chem. Sóc. 92 (1996) 4131–4136.
[58] P. Salazar, M. Martin, RD O'Neill, R. Roche, JL Gonzalez-Mora, Cảm biến sinh học dựa trên các
điện cực sợi carbon biến đổi màu xanh của Phổ để giám sát
Machine Translated by Google
K. Rahee và cộng sự. / Báo cáo Hóa sinh và Lý sinh 5 (2016) 35–54
lactate trong không gian ngoại bào của mô não, Int. J. Điện hóa. Khoa học. 7 (2012) 5910–
5926.
[59] P. Salazar, M. Martin, RD O'Neill, R. Roche, JL Gonzalez-Mora, Điện cực carbon biến tính
Prussian Blue được thúc đẩy bởi chất hoạt động bề mặt: tăng cường bước lắng đọng điện, sự
ổn định, tính chất điện hóa và ứng dụng đến cảm biến vi sinh lactate dành cho khoa học thần
kinh, Colloids Surf. B Giao diện sinh học 92 (2012) 180–189.
[60] T. Shimomura, T. Sumiya, M. Ono, T. Ito, T. Hanaoka, Cảm biến sinh học Amperometric L-lactate
dựa trên điện cực carbon in lụa có chứa coban phthalocyanine, được phủ một lớp liên
hợp silica trung tính lactate oxidase , Hậu môn . Chim. Acta 714 (2012) 114–120.
[61] RE Schmitt, HR Molitor, TS Wu, Phương pháp đo điện áp để xác định axit lactic bằng cách sử
dụng điện cực dán cacbon được biến tính bằng coban phthalocyanine, Int. J. Điện hóa.
Khoa học. 7 (2012) 10835–10841.
[62] A. Parra, E. Casero, L. Vazquez, J. Jin, F. Pariente, E. Lorenzo, Đặc tính bằng kính hiển vi
và điện áp kế của nền tảng phân tích sinh học dựa trên lactate oxydase, Langmuir 22 (2006)
5443–5450.
[63] S. Serban, N. ElMurr, Bộ cảm biến sinh học NADH oxydase linh hoạt oxi hóa khử: nền tảng cho
các xét nghiệm sinh học và cảm biến sinh học dehydrogenase khác nhau, Electrochim.
Acta 51 (2006) 5143–5149.
[64] LQ Mao, K. Yamamoto, Cảm biến đo trực tuyến Amperometric để đo liên tục hypoxanthine dựa
trên polyme gel osmiumpolyvinylpyridine và điện cực carbon thủy tinh biến đổi xanthine
oxidase bienzym, Anal.
Chim. Acta 415 (2000) 143–150.
[65] J. Kulys, LZ Wang, A. Maksimoviene, điện cực L-Lactate oxydase dựa trên xanh methylene và
bột carbon, Anal. Chim. Acta 274 (1993) 53–58.
[66] AC Pereira, MR Aguiar, A. Kisner, DV Macedo, LT Kubota, Bộ cảm biến sinh học Amperometric cho
lactate dựa trên lactate dehydrogenase và Meldola blue đồng cố định trên ống nano
cacbon nhiều vách, Sens. Thiết bị truyền động B Chem. 124 (2007) 269–276.
[67] SAM Marzouk, VV Cosofret, RP Buck, H. Yang, WE Cascio, SSM Hassan, Một cảm biến sinh học đo
cường độ dòng điện dựa trên muối để đo sự tích tụ lactate ngoại bào trong cơ tim thiếu
máu cục bộ, Hậu môn. Chem. 69 (1997) 2646–2652.
[68] J. Haccoun, B. Piro, LD Tran, LA Đặng, MC Phạm, Ampero-
Phát hiện số liệu L-lactate trên copolyme dẫn điện biến tính enzyme poly(5-hydroxy-1,4-
naphthoquinone-co-5-hydroxy-3-thioacetic acid-1,4- naphthoquinone), Biosens. Điện tử sinh
học. 19 (2004) 1325–1329.
[69] MD Leonida, DT Starczynowski, R. Waldman, B. Aurian- Blajeni, Polymeric FAD được sử dụng làm
chất trung gian thân thiện với enzyme trong phát hiện lactate, Anal. Sinh học.
Chem. 376 (2003) 832.
[70] MR Romero, F. Ahumada, F. Garay, AM Baruzzi, Bộ cảm biến sinh học Amperometric để phát hiện
lactate máu trực tiếp, Hậu môn. Chem. 82 (2010) 5568–5572.
[71] T. Shimomura, T. Sumiya, M. Ono, T. Itoh, T. Hanaoka, Một điện hóa
cảm biến sinh học để xác định axit lactic khi hết hạn, Procedia Chem. 6 (2012) 46–51.
[72] K. Bridge, F. Davis, SD Collyer, SPJ Higson, Màng tổng hợp polyDVB/EVB siêu mỏng linh hoạt để
tối ưu hóa Cảm biến Lactate, Phân tích điện 19 (2007) 567–574.
[73] SD Sprules, JP Hart, SA Wring, R. Pittson, Một chất sinh học dùng một lần, không thuốc thử
cảm biến axit lactic dựa trên điện cực carbon in lụa có chứa Meldola's Blue và được phủ
lactate dehydrogenase, NADþ và cellulose axetat, Hậu môn. Chim. Acta 304 (1995) 17–24.
[74] S. Perez, E. Fabregas, Bộ cảm biến sinh học hai enzyme Amperometric để phân tích L-
lactate trong các mẫu rượu và bia, Nhà phân tích 137 (2012) 3854–3861.
[75] F. Palmisano, R. Rizzi, D. Centonze, PG Zambonin, Theo dõi đồng thời glucose và lactate bằng
cảm biến sinh học đo cường độ điện cực kép không giao thoa và giao thoa dựa trên màng mỏng
điện phân, Biosens.
Điện tử sinh học. 15 (2000) 531–539.
[76] K. Kriz, L. Kraft, M. Krook, D. Kriz, Xác định cường độ L-lactate dựa trên việc bẫy lactate
oxyase trên bề mặt đầu dò có màng bán thấm sử dụng cảm biến sinh học dựa trên công nghệ
SIRE. Ứng dụng: bột cà chua và thức ăn trẻ em, J. Agric. Hóa chất thực phẩm. 50 (2002) 3419.
[77] M. Pianoa, S. Serbanb, R. Pittsonb, GA Dragoa, JP Hartc, Amperometric
cảm biến sinh học lactate để phân tích tiêm dòng dựa trên điện cực carbon in lưới có chứa
muối Blue-Reinecke của Meldola, được phủ lactate dehydrogenase và NADþ, Talanta 82 (2010)
34–37.
[78] RC Kwan, PY Hon, KK Mak, R. Renneberg, Xác định lactate bằng ampe kế bằng cảm biến dựa trên
hydrogel trienzym/poly(carbamoyl) sulfonate mới, Biosens. Điện tử sinh học. 19 (2004)
1745–1752.
[79] S. Cosnier, Cảm biến sinh học dựa trên màng điện phân: xu hướng mới, Hậu môn.
Sinh học. Chem. 377 (2003) 507–520.
[80] R. Monosik, M. Stredansky, G. Greif, M. Sturdik, Một phương pháp nhanh chóng để khử
chấm dứt axit L-lactic trong các mẫu thực bằng cảm biến sinh học ampe kế sử dụng
nanocompozit, Kiểm soát Thực phẩm 23 (2012) 238–244.
[81] X. Cui, CM Li, J. Zang, S. Yu, Bộ cảm biến sinh học lactate có độ nhạy cao bằng kỹ thuật
nanocompozit mạng chitosan/PVI-Os/CNT/LOD, Biosens. Điện tử sinh học. 22 (2007) 3288–3292.
[82] K. Hajizadeh, HB Halsall, WR Heineman, Cố định lactate oxydase trong ma trận poly (vinyl
alcol) trên các điện cực than chì platin hóa bằng liên kết ngang hóa học với isocyanate,
Talanta 38 (1991) 37–47.
[83] NG Patel, A. Erlenkotter, K. Cammann, GC Chemnitius, Chế tạo và
mô tả đặc tính của cảm biến lactate oxydase loại dùng một lần cho các sản phẩm sữa và phân
tích lâm sàng, Thiết bị truyền động cảm biến B: Chem. 67 (2000) 134–141.
[84] TM Park, EI Iwuoha, MR Smyth, R. Freaney, AJ McShane, bộ cảm biến sinh học đo cường độ dòng
điện dựa trên gel Sol– kết hợp polyme oxi hóa khử osmium làm
53
chất trung gian để phát hiện L-lactate, Talanta 44 (1997) 973–978.
[85] C. Danilowicz, E. Corton, F. Battaglini, EJ Calvo, An Os(byp)2ClPyCH2NH Chất trung gian
hydrogel poly (allylamine) để nối enzyme ở các điện cực, Electro- chim. Acta 43 (1998)
3525–3531.
[86] VP Zanini, BL de Mishima, V. Solis, Một cảm biến sinh học đo cường độ dựa trên lactate
oxyase được cố định trong hydrogel Laponite-chitosan trên điện cực carbon thủy tinh. Ứng
dụng phân tích L-lactate trong mẫu thực phẩm, Sens.
Thiết bị truyền động B Chem. 155 (2012) 75–80.
[87] F. Scholz, Một kỷ nguyên mới trong điện hóa học, Gyorgy: Inzelt, Monographs in
Điện hóa học, Springer, 2008, trang 1–6.
[88] MA Rahman, P. Kumar, DS Park, YB Shim, Cảm biến điện hóa dựa trên polyme liên hợp hữu cơ, Cảm
biến 8 (2008) 118–141.
[89] A. Guiseppi-Elie, GG Wallace, T. Matsue, Sổ tay về polyme dẫn điện, tái bản lần thứ 2, Marcel
Dekker, New York (1998), tr. 963–991.
[90] HC Shu, B. Mattiasson, B. Persson, G. Nagy, L. Gorton, S. Sahni, L. Geng,
L. Boguslavsky, T. Skotheim, Một điện cực đo cường độ không cần thuốc thử dựa trên bột
cacbon, được biến đổi về mặt hóa học với D-lactate dehydrogenase, NAD(þ) và chất trung gian
chứa polymer để phân tích axit D-lactic: I. cấu trúc, thành phần và đặc tính, Công nghệ
sinh học. Bioeng. 46 (1995) 270–279.
[91] A. Chaubey, M. Gerard, R. Singhal, VS Singh, BD Malhotra, Cố định lactate dehydrogenase trên
màng tổng hợp polypyrrole–poly-vinylsulphonate được chuẩn bị điện hóa để ứng dụng vào cảm
biến sinh học lactate, Electrochim. Acta 46 (2000) 723–729.
[92] A. Chaubey, KK Pande, MK Pandey, VS Singh, Khuếch đại tín hiệu bằng cách tái chế cơ chất
trên điện cực bienzym polyaniline/lactate oxidase/lactate dehydrogenase , Appl. Hóa
sinh. Công nghệ sinh học. 96 (2001) 239–248.
[93] MJ Lobo-Castanon, AJ Miranda-Ordieres, P. Tunon-Blanco, Một điện cực dán cacbon biến đổi
bienzym-poly-(o-phenylenediamine) để phát hiện ampe kế của L-lactate, Anal. Chim. Acta
346 (1997) 165–174.
[94] AK Sarma, P. Vatsyayan, P. Goswani, SD Minteer, Những tiến bộ gần đây trong khoa học vật
liệu để phát triển điện cực enzyme, Biosens. Điện tử sinh học. 24 (2009) 2313–2322.
[95] CS Blackman, IP Parkin, Polymer cho cấu trúc cảm biến sinh học, Chem. Mẹ-
ter. 9 (1997) 2354–2375.
[96] J. Huang, Z. Song, J. Li, Y. Yang, H. Shi, Wu Baoyan, J. Anzai, T. Osa, Q. Chen, Một cảm biến
sinh học L-lactate có độ nhạy cao dựa trên sol- màng gel kết hợp với điện cực biến tính
ống nano cacbon đa thành (MWCNTs), Mater. Khoa học.
Tiếng Anh: C 27 (2007) 29–34.
[97] J. Huang, J. Li, Y. Yang, X. Wang, B. Wu, J. Anzai, Tetsuo Osa, Q. Chen, De-
tốc độ của cảm biến sinh học L-lactate bằng cường độ dòng điện dựa trên L-lactate oxydase
được cố định qua màng silica sol–gel trên ống nano carbon đa vách/ điện cực carbon thủy tinh
biến đổi hạt nano bạch kim, Mater. Khoa học. Anh. C 28 (2008) 1070–1075.
[98] B. Prieto-Simon, E. Fabregas, A. Hart, Đánh giá các chiến lược khác nhau để phát triển cảm
biến sinh học đo cường độ dòng điện cho L-lactate, Biosens. Điện tử sinh học. 22 (2007) 2663–
2668.
[99] SP Gomes, M. Odlozilikova, MG Almeida, AN Araujo, Couto CMCM,
M. Montenegro, CBSM, Ứng dụng cảm biến sinh học sol–gel đo cường độ lactate để xác định
tiêm tuần tự L-lactate, J. Pharm. Sinh học. 43 (2007) 1376–1381.
[100] EI Yashina, AV Borisova, EE Karyakina, OI Shchegolikhina, Âm đạo của tôi, D.
A. Sakharov, AG Tonevitsky, AA Karyakin, Sol–gel cố định lactate oxyase từ dung môi hữu cơ:
hướng tới cảm biến sinh học lactate tiên tiến, Anal.
Chem. 82 (2010) 1601–1604.
[101] AM Parra-Alfambra, E. Casero, MD Petit-Dominguez, M. Barbadillo,
F. Pariente, L. Vazquez, E. Lorenzo, Cảm biến sinh học điện hóa cấu trúc nano mới dựa
trên mạng ba chiều (3-mercaptopropyl)-trimethoxy-ysilane, Nhà phân tích 136 (2011) 340–
347.
[102] CL Lin, CL Shih, LK Chau, Cảm biến Amperometric L-lactate dựa trên quá trình xử lý sol–gel của
silicon alkoxide liên kết với enzyme, Anal. Chem. 79 (2007) 3757–3763.
[103] M. Albareda-Sirvent, AL Hart, Ước tính sơ bộ axit lactic và malic trong rượu vang bằng cách sử
dụng các điện cực được in từ mực có chứa tiền chất sol–gel, Sens. Thiết bị truyền động B
87 (2002) 73–81.
[104] VP Zanini, BL de Mishima, P. Labbe, V. Solis, An ampe kế L-lactate
điện cực enzyme dựa trên L-lactate oxyase được cố định trong gel Laponite trên điện cực
carbon thủy tinh. Ứng dụng cho các sản phẩm sữa và rượu vang đỏ, Phân tích điện 22 (2010)
946–954.
[105] M. Li, YT Li, DW Li, YT Long, Những phát triển và ứng dụng gần đây của
điện cực in lụa trong các thử nghiệm môi trường – một bài đánh giá, Anal. Chim.
Acta 734 (2012) 31–44.
[106] A. Radoi, D. Moscone, G. Palleschi, Cảm nhận axit lactic trong sữa chua chứa men vi sinh bằng
cách sử dụng cảm biến sinh học L-lactate kết hợp với sợi vi phân được đưa vào hệ thống phân
tích dòng chảy, Hậu môn. Lett. 43 (2010) 1301–1309.
[107] F. Ghamouss, S. Ledru, N. Ruille, F. Lantier, M. Boujtita, Điện cực carbon in lụa biến đổi
số lượng lớn với cả lactate oxidase (LOD) và horseradish peroxide (HRP) để xác định của L-
lactate ở chế độ phân tích tiêm dòng chảy, Hậu môn. Chim. Đạo luật 570 (2006) 158.
[108] N. Sato, H. Okuma, Hệ thống cảm biến đồng thời Amperometric cho D-glucose và L-lactate dựa
trên các điện cực hai lớp được biến đổi bằng enzyme, Anal. Chim. Acta 565 (2006) 250–254.
[109] H. Teymourianc, A. Salimia, H. Rahman, Phát hiện tiềm năng thấp của NADH dựa trên Fe3O4 các
hạt nano/hỗn hợp ống nano carbon đa vách: chế tạo cảm biến sinh học lactate dựa trên
dehydrogenase tích hợp, Biosens.
Điện tử sinh học. 33 (2012) 60–68.
[110] YC Tsai, SY Chen, HW Liaw, Cố định lactate dehydrogenase
Machine Translated by Google
54 K. Rahee và cộng sự. / Báo cáo Hóa sinh và Lý sinh 5 (2016) 35–54
trong vật liệu nanocompozit ống nano cacbon-chitosan đa thành để ứng dụng vào cảm
biến sinh học lactate, Sens. Actuators B 125 (2007) 474–481.
[111] HW Yang, DC Kim, SH Yoo, S. Park, DJ Kang, Xây dựng kiến trúc sinh học chức năng lắp
ráp LBL bằng cách sử dụng thanh nano vàng để phát hiện lactate, Mater.
Res. Bò đực. 47 (2012) 3056–3060.
[112] CX Liu, HM Liu, QD Yang, Q. Tian, XX Cai, Phát triển cảm biến sinh học lactate ampe
kế được biến đổi bằng hạt nano Pt-đen để xét nghiệm nhanh, Chin.
J. Hậu môn. Chem. 37 (2009) 624–628.
[113] A. Lupu, A. Valsesia, F. Bretagnol, P. Colpo, F. Rossi, Phát triển cảm biến sinh
học đo điện thế dựa trên bề mặt có cấu trúc nano để xác định lactate, Sens.
Thiết bị truyền động B Chem. 127 (2007) 606–612.
[114] ML Yang, J. Wang, HQ Li, JG Zheng, NQ Wu, Cảm biến sinh học điện hóa lactate với
ống nano titanate làm chất xúc tiến chuyển điện tử trực tiếp, Công nghệ nano 19
(2008) 075502.
[115] C. Elena, A. Conception, Maria Dolores Petit-Domingueza, L. Vazquezc, A.
M. Parra-Alfambraa, P. Merinod, S. alvarez-Garciac, A. Andresc, E. Suareza, F.
Parientea, E. Lorenzoa, Cảm biến sinh học Lactate dựa trên hỗn hợp sinh học bao
gồm các hạt nano oxit titan, graphene khử xúc tác quang , và lactate oxydase,
Microchim. Đạo luật 181 (2014) 79–87.
[116] N. Nesakumar, S. Sethuraman, UM Krishnan, JB Rayappan, Chế tạo cảm biến sinh học
lactate dựa trên lactate dehydrogenase cố định trên hạt nano oxit xeri, J. Colloid
Interface Sci. 410 (2013) 158–164.
[117] ZH Ibupoto, SMUA Shah, K. Khun, M. Willander, Cảm biến axit L-lactic điện hóa dựa
trên các thanh nano ZnO cố định với lactate oxydase, Cảm biến 12 (2012) 2456–2466.
[118] B. Haghighi, S. Bozorgzadeh, Chế tạo bộ cảm biến sinh học lactate phát quang hóa
điện có độ nhạy cao sử dụng hạt nano ZnO được trang trí bằng ống nano carbon
nhiều vách, Talanta 85 (2011) 2189–2193.
[119] Y. Zhao, X. Yan, Z. Kang, X. Fang, X. Zheng, L. Zhao, H. Du, Y. Zhang, Cảm biến sinh
học điện hóa dựa trên dây nano oxit kẽm để phát hiện cường độ axit L-lactic , J.
Nanopart. Res. 16 (2014) 2398.
[120] Y. Lei, N. Luo, X. Yan, Y. Zhao, G. Zhang, Y. Zhang, Một cảm biến sinh học điện
hóa có độ nhạy cao dựa trên các chân máy nano oxit kẽm để phát hiện axit L-
lactic , Nanoscale 4 (2012 ) 3438–3443.
[121] J. Karlsson, JT Willerson, SJ Leshin, CB Mullins, JH Mitchell, Skeletal-
chất chuyển hóa cơ ở bệnh nhân bị sốc tim hoặc suy tim sung huyết nặng, Scand. J.
Lâm sàng. Phòng thí nghiệm. Điều tra. 35 (1975) 73–79.
[122] D. De Backer, J. Creteur, HB Zhang, M. Norrenberg, JL Vincent, Lactate
phổi sản xuất trong tổn thương phổi cấp tính, Am. J. Hô hấp. Chí mạng. Chăm sóc
Med. 156 (1997) 1099–1104.
[123] R. Bellomo, Đánh giá từ bàn đến giường: lactate và thận, Crit. Chăm sóc 6 (2002)
322–326.
[124] MM Sayeed, PNA Murthy, chuyển hóa nucleotide Adenine và lactate trong phổi trong
sốc nội độc tố, Circ. Cú sốc 8 (1981) 657–666.
[125] R. Rimachi, FB de Carvahlo, C. Orellano-Jimenez, F. Cotton, JL Vncent, D. De Backer,
Tỷ lệ Lactate/pyruvate như một dấu hiệu của tình trạng thiếu oxy mô trong sốc tuần
hoàn và nhiễm trùng, Anaesth. Chăm sóc Chuyên sâu 40 (2012) 427–432.
[126] JA Kruse, SA Zaidi, RW Carlson, Ý nghĩa của nồng độ lactate trong máu ở những
bệnh nhân mắc bệnh gan nguy kịch, Am. J. Med. 83 (1987) 77–82.
[127] I. Smith, P. Kumar, S. Molloy, A. Rhodes, PJ Newman, RM Grounds, E.
D. Bennett, Base dư thừa và lactate là chỉ số tiên lượng cho bệnh nhân nhập viện
chăm sóc đặc biệt, Intensive Care Med. 27 (2001) 74–83.
[128] MS Thakur, KV Ragavan, Cảm biến sinh học trong chế biến thực phẩm, J. Food Sci.
Technol. 50 (2013) 625–641.
[129] FK Stekelenburg, MLT Kant-Muermans, Ảnh hưởng của natri lactate và các chất phụ gia
khác trong sản phẩm giăm bông nấu chín đến chất lượng cảm quan và sự phát triển của
chủng Lactobacillus curvatus và Listeria monocytogenes, Int. J. Thực phẩm Mi-
crobiol. 66 (2001) 197–203.
[130] LV Shkotova, TB Goriushkina, C. Tran-Minh, J. Chovelon, AP Soldatkin, Cảm biến
sinh học Amperometric để phân tích lactate trong rượu vang và phải trong quá
trình lên men, Mater. Khoa học. Anh. C 28 (2008) 943–948.
[131] K. Habermuller, M. Mosbach, W. Schuhmann, Cơ chế truyền điện tử trong cảm biến sinh
học đo cường độ dòng điện, Fresenius J. Anal. Chem. 366 (2000) 560–568.
[132] N. Nesakumar, K. Thandavan, S. Sethuraman, UM Krishnan, JBB Rayappan, Một cảm biến
sinh học điện hóa với giao diện nano để phát hiện lactate dựa trên lactate
dehydrogenase cố định trên các thanh nano oxit kẽm, Colloid Interface Sci. 414
(2014) 90–96.
[133] DA Armbruster, T. Pry, Giới hạn mẫu trắng, giới hạn phát hiện và giới hạn định
lượng, Clin. Hóa sinh. Bản sửa đổi 1 (2008) S49–S52.
[134] PU Abel, T. Von woedtke, B. Schulz, T. Bergann, A. Schwock, Tính ổn định của
enzyme cố định làm cảm biến sinh học cho ứng dụng liên tục in vitro và in vivo, J.
Mol. Catalunya. B – Enzim. 7 (1999) 93.
[135] CH Suelter, L. Kricka, Phương pháp phân tích sinh hóa: Ứng dụng phân tích sinh học
sự nhân bản của Enzyme, tập. 36, 2006.