Professional Documents
Culture Documents
أحياء دقيقة 1 - عملي 9
أحياء دقيقة 1 - عملي 9
عملي 00
12
زرع البول والفحص الجرثومي للماء
9
مقدمة
عينة البول :هي العينة الأكثر تواترًا على المخبر ،تؤخذ بشكل عام من منتصف التدفق البولي،
ولا تؤخذ الدفقة الأولى لأنها تحتوي على جراثيم الفلورا الطبيعية.
يتم العمل على عينة البول مباشرة ولمدة أقصاها نصف ساعة (يجب نقلها بسرعة للمخبر) لأنه
في حال التأخر لن يصلح العمل على العينة بسبب تكاثر الجراثيم.
مالحظة:
في حال التأخر من الممكن وضع العينة في البراد حيث يقل نمو الجراثيم للحد األدنى.
وفي حال كان التأخر 3ساعات مثالً فيجب وضع مادة حافظة (حمض البور boric
)acidمن قبل المخبري للحفاظ عليها وتثبيط النمو الجرثومي.
زرع البول والفحص الجرثومي للماء
زرع البول
زرع البول هو الزرع الوحيد الكمي ،كل الزروعات الأخرى تُعد زروعات كيفية.
فأي عينة حيوية ستأتي إلى المخبر ،نقوم بزرعها زرع كيفي وفي حال وجود جرثوم ممرض
نحسس (نُعالج) ،أما في حال عدم وجود جرثوم ممرض لا نعالج.
أما البول فهو بشكل طبيعي يحوي جراثيم ،يحوي .normal flora
الـ normal floraموجودة في الإحليل وعند تدفق البول سيمر من الإحليل ويأخذ فلورا معه،
بالإضافة إلى أنه وسط سائل أي يحوي مغذيات بكمية جيدة ومناسبة ،لذلك تتكاثر الجراثيم
فيه بالتالي وجود الجراثيم فيه ليس غريب وهو أمر طبيعي لكن يجب ألاّ يتجاوز عددها حد
معين ،فإذا تجاوزت الحد ستتشكل الإمراضية ،لذلك نزرع البول زرع كمي.
إذا كان عدد الجراثيم أكبر أو يساوي 105 CFU/mlيكون الشخص مريض ويجب المعالجة.
تتم بواسطة strapأو يسمى شائط وهي شريحة من السللوز تحوي مربعات ،كل مربع يحتوي على
كاشف معين للتفاعل مع المادة الموجودة في عينة البول حيث يغمس الشريط في عينة البول
لثواني ونخرجه ويلاحظ التغير اللوني لكل مربع ويقارن مع ستاندر (عياري) خاص فيه.
/groups/RBCs.Pharmacy.2025
2
زرع البول والفحص الجرثومي للماء
.2البروتين:
البول لا يحوي بروتين في الحالة الطبيعية وفي حال وجوده في البول دليل على القصور الكلوي ،أو
على التهابات (فالكريات البيض تفرز أنزيمات وهذه الانزيمات عبارة عن بروتينات).
.3النتريت:
ناتج استقلاب النترات ،وهي مواد تطرحها الجراثيم ،وجودها دليل على وجود جراثيم ،لكن في حال
عدم وجودها هذا لا يدل على عدم وجود جراثيم ،فقد تكون الجرثومة غير مخمرة للنترات.
.4السكر (الغلوكوز):
البول في الحالة الطبيعية لا يحوي سكر ،وفي حال وجوده في البول على أن السكر في الدم قد
تجاوز العتبة الكلوية ( 081ملغ/دل) بالتالي يدل على الإصابة بمرض السكري ،وليس له علاقة
بالجراثيم.
.5البيليروبين واليوروبيلينوجين:
هو الذي يعطي البول لونه أي وجوده في البول طبيعي لكن زيادة مستواه غير طبيعي ،حيث يزيد
مستواه في البول في حالات اضطراب الكبد أو انسداد القناة الصفراوية (اليرقان) وليس له علاقة
بالجراثيم.
.6الخضاب (الهيموغلوبين):
يدل على الإصابة بالحصى أو بالرمل وليس له علاقة بالجراثيم.
3 /groups/RBCs.Pharmacy.2025
زرع البول والفحص الجرثومي للماء
.8الكيتون:
ناتج استقلاب الدسم (عند الصيام) ،يوجد حالة خطيرة يرتفع فيها الكيتون وهي عندما يكون لدى
المريض سكر عالي جداً وليس لديه أنسولين لإدخاله للخلية عندها الجسم سيستهلك الدسم
بالتالي سيتراكم الكيتون وهذا اسمه حماض خلوني سكري (هي حالة مهددة للحياة لكن ليس لها
علاقة بالجراثيم).
.9الكثافة النوعية:
مثل العكر تدل على وجود موجودات في البول (كريات–خلايا–جراثيم-رمل.)...
اختبارات مجهرية (فحص الراسب)
نقوم بتثفيل عينة البول لمدة ربع ساعة بسرعة 0111دورة في الدقيقة لنحصل على راسب ،ثم
نضعه على سلايد ونضع فوقه ساترة ونفحص تحت المجهر على التكبير 01بشكل مباشر لرؤية
(كريات بيضاء-كريات حمراء) بحدود خلية إلى خليتين من كل منهما في الساحة والزيادة قد
تدل على وجود انتان جرثومي.
ومن المحتمل أيضا مشاهدة بلورات (فوسفات أو بلورات حمض البول اليوريا) ،أوكزالات حمض
البول ،أسطوانات (وهي كريات بيضاء تغير شكلها للأسطواني).
الذي يهمنا من الناحية الجرثومية :الكريات البيض والجراثيم حيث يدل وجودهم على التهاب.
يكتب الأطباء غالباً :إجراء فحص بول وراسب وزرع إن لزم.
/groups/RBCs.Pharmacy.2025
4
زرع البول والفحص الجرثومي للماء
يدلّنا على ذلك عدد الكريات البيضاء حيث وجودها في البول طبيعي لكن بحدود خلية لخليتين في
الساحة (تحت المجهر):
نزرع ،حيث يكون الالتهاب فعّال oعندما يكون عددها أكثر من 01كريات في الساحة الواحدة
وبحاجة لمعالجة ،نزرع حتى لو لم نرى معها جراثيم ،إذا رأينا جراثيم فهذا يؤكد لنا أن الالتهاب
جرثومي حتماً.
لا oإذا رأينا جراثيم ولم نرى كريات بيضاء أكثر من 01في الساحة (ومثلاً كان النتريت إيجابي)
نزرع فهذا تلوث ،فالجرثوم حتى يسبب التهاب يجب أن يتثبت (جرثوم غير ملتصق هو غير
ممرض).
5 /groups/RBCs.Pharmacy.2025
زرع البول والفحص الجرثومي للماء
اختبار التحسس:
نقوم به عندما يكون عدد الجراثيم أكثر من ،105 CFU/mlنقوم بإجراء اختبار التحسس لمعرفة
الصاد المؤثر على الجرثوم ،حيث يجب استخدام صادات خاص للجرثوم الموجود في العينة ،مثلًا إذا
كان لدينا جرثوم كلبسيلا نختار صاد مؤثر على سلبيات الغرام.
الكلور ال يقوم بتنقية الماء إنما يحافظ على الجراثيم كي ال تتكاثر أو تزيد.
الذي يلوث الماء بالأساس (إن كانت ينابيع أو مياه جوفية) هو الصرف الصحي وذلك يتم عن طريق
ارتشاح مياه الصرف الصحي للمياه الجوفية ،عندها ستُرتَشح الجراثيم أيضًا وستلوث المساه
وسيصبح عددها أكثر من 100 CFU/mlوبالتالي تصبح المياه غير صالحة للشرب.
الجراثيم التي تؤكد لنا أنه يوجد تلوث بالصرف الصحي هي من زمرة الإمعائيات المخمرة للاكتوز
coliformمثل الإيكولاي والكلبسيلا ...
/groups/RBCs.Pharmacy.2025
6
زرع البول والفحص الجرثومي للماء
.1كشف كيفي:
كي نرى أن كان الماء يحوي .coliform
نزرع على وسط ماكونكي السائل وهو وسط انتقائي لـ coliformتنمو هذه الجراثيم إن كانت
موجودة في الماء فيصبح الوسط عكر ويتغير لونه من الأصفر إلى الزهري.
نحتاج لتمييز الجراثيم التي نمت على ماكونكي السائل وذلك بالزرع مثلًا على وسط EMB
الصلب (أكثر انتقائية من ماكونكي) الذي يُعطي الإيكولاي لمعة يودية ،وتكون مستعمرات
الكلبسيلا مخاطية.
.2كشف كمي:
عدد الجراثيم يجب آلا يتجاوز .100 CFU/ml
نأخذ حجم معين من الماء ونعد الجراثيم فيه نستطيع العد في السطح أو العمق لكن المشكلة
أن كمية الجراثيم قليلة أي أنها غير ممثلة.
الطريقة المناسبة لعد الجراثيم في الماء هي أن نقوم بترشيح الماء ،حيث تكون ثقوب ورقة
الترشيح 0.45ميكرون ،إذاً هذه الجراثيم ستُحتجز على سطح ورقة الترشيح.
أي نأخذ 100 mlمن الماء ونرشحها ثم نأخذ الورقة ونضعها على سطح الوسط العام فتنمو
الجراثيم ونقوم بعدّها.
7 /groups/RBCs.Pharmacy.2025
زرع البول والفحص الجرثومي للماء
مالحظات:
قد يحوي الماء على جراثيم ممرضة (أي أن وجودها مرفوض) مثل :الكوليرا-
السالمونيال-الشيغال وهنالك جرثومة إيجابية الغرام هي المطثية العثرة clostridium
.difficile
اإليكوالي غير ممرضة هي نورمل فلورا موجودة باألمعاء ،ولكن وجودها في الماء
ممنوع ألنها تؤكد لنا أن التلوث من مصدر صرف صحي وقريب ،ألن اإليكوالي ال
تتحمل أن تبقى في مياه الصرف الصحي أكثر من 40ساعة ،بينما وجود الكلبسيال
في المياه قد يكون تلوث من البيئة أو من الصرف الصحي.
كيف أعرف إن كان وجود الكلبسيال هو تلوث من البيئة أو من مصدر صرف صحي؟
نتحرى عن جرثومة ال هوائية من النورمل فلورا موجودة فقط في األمعاء تُرافق
الكلبسيال،يؤكد وجودها مع الكلبسيال أن التلوث من صرف صحي.
يجب أن تكون كمية الكلور المضافة مقبولة ال تتجاوز حد معيّن.
ال توجد طريقة مرجعية للتخلص منن الكلور لذلك عندما نزرع على ماكونكي السائل
1
نزرع بنسبة أي نلجأ للتمديد حيث نمدد الكلور وذلك بإضافة 10 mlمن الماء و 90
10
mlمن وسط ماكونكي السائل (نتخلص من الكلور بالتمديد بالوسط الزرعي).
نستخدم وسط سائل ليتحمل الحجم الكبير الذي هو .10 ml
ذُكر في الفئة :0أنه إلزاحة تأثير الكلور قد نضيف مادة مرجعة مثل تيوسلفات
الصوديوم أو ممكن أن نقوم بالتسخين لدرجة حرارة 01فيتطاير الكلور أي يجب أن
يكون تركيز الكلور أقل من الـ MICالمثبط.
/groups/RBCs.Pharmacy.2025
8
زرع البول والفحص الجرثومي للماء
أهم الأفكار:
9 /groups/RBCs.Pharmacy.2025
زرع البول والفحص الجرثومي للماء
في اختبار تحسس الصادات الحيوية عند وضع قرصين من الصاد الحيوي بالقرب من بعضهم:
فالصاد الأول سوف يشكل هالة والصاد الثاني سوف يشكل هالة فهنا احتمال أن تتداخل الهالات
ولدينا ثلاث حالات:
.0تتداخل الهالات ولا يوجد نمو جرثومي بمنطقة التداخل ،هنا لا يوجد تآثر
ونقول عنه 1 + 1 = 2
.4تتداخل الهالات ويوجد نمو للجراثيم ،أي أن كل صاد حيوي حجب فعل الآخر
أي 1 + 1 = 0
.3تتداخل الهالات ونلاحظ زيادة الهالة بمنطقة الالتقاء ،نسميه تآزر
وذلك يعني 1 + 1 = 3
جدول التصويبات
التصويب الخطأ السطر الصفحة المحاضرة
وبما أن البراز ثلث وبما أن العينة براز وثلث
األول 0 السادسة
وزن البراز ... وزن البراز
تكون نسبة
1 األضداد الخامس من
0 السادسة
160 1 األسفل
60
وإن لم قام الجدول
وإن قام بقتل 3 السابعة
بقتل (فقرة )MBC
نأخذ نساوي األول 8 السابعة
تركيز الصاد تركيز المعلق السادس 04 السابعة
1
MIC < Cmax MIC < 4Cmax الثاني 00 السابعة
/groups/RBCs.Pharmacy.2025
10
زرع البول والفحص الجرثومي للماء
11 /groups/RBCs.Pharmacy.2025
زرع البول والفحص الجرثومي للماء
/groups/RBCs.Pharmacy.2025
12