Professional Documents
Culture Documents
أحياء دقيقة 1 - عملي 6
أحياء دقيقة 1 - عملي 6
عملي 00
21
االختبارت المصلية
6
مقدمة
تحدثنا في المحاضرات السابقة عن الكشف المباشر عن الجراثيم باستخدام المجهر أو العزل
والاستفراد ،سنتناول في هذه المحاضرة الكشف غير المباشر عن الجراثيم.
.1الجرثومة تحتاج لمتطلبات خاصة للزرع أي صعبة الزرع .مثال :جرثومة اللولبية الشائعة.
.2الجرثومة تحتاج وقت طويل لتنمو .مثال :جرثومة السل.
.3الجرثومة متنقلة من مكان لمكان آخر في الجسم تؤدي إلى صعوبة في الحصول على العينة
مثال :الجراثيم التي تسبب التهاب بالأمعاء ثم تنتقل لتسبب انتان في الدم.
.4وجود مشكلة في الأضداد.
االختبارات المصلية
يوجد الكثير من مبادئ الكيمياء المناعية التي نعتمد عليها حتى نُشخص الجراثيم بطريقة غير
مباشرة.
المبدأ الأساسي:
عند دخول جراثيم إلى جسم الإنسان يؤدي إلى تحريض جهاز المناعة لتشكيل أضداد تجاه
المستضدات الجرثومية.
التفاعل بين الضد والمستضد يسمى تفاعل نوعي (أي أن الضد لا يتفاعل إلا مع هذا
المستضد فقط) وسأكشف بهذا عن معقد مناعي (هذا المعقد المناعي يعطي إنذار لجهاز
المناعة على أن الخلية الجرثومية غريبة فيقوم جهاز المناعة بالقضاء عليها).
يوجد الكثير من الطرق المناعية التي نكشف بها عن الجراثيم بطرق غير مباشرة (وحتى عن
الفيروسات) مثل ،ELISA :التألق المناعي ،التراص ،تثبيت المتممة والكروماتوغرافيا
المناعية.
سنتكلم عن:
:ELISA .1
طريقة المقايسة بالممتز المناعي بالإنزيم (لدينا إنزيم نقوم بالوسم فيحدث تفاعل مناعي ثم
نقايس فيعطينا لون التي تتناسب طردًا مع تركيز المادة التي نكشف عنها).
ميزة :ELISAنستطيع الكشف عن نمط واحد من أنماط الأضداد (ليس كل الأضداد بشكل
عام).
الأضداد Antibodiesبالجسم هي 5أنواع.IGG, IGM, IGA, IGE, IGD :
/groups/RBCs.Pharmacy.2025
2
االختبارات المصلية
.2تفاعالت التراص:
هو تفاعل الضد مع المستضد لكنه يكون مرئي عيانياً.
يحدث التراص المرئي بالعين المجردة عندما يكون تركيز الضد مع المستضد
متساوي.
بينما إذا لم يكن مرئي عيانياً من الممكن أن:
.1نوسمه بمادة متألقة فيصبح اسمه تألق مناعي.
.2أو نوسمه بمادة ملونة فيصبح اسمه ( Immuno chramatagraphyالاستشراب
المناعي).
.3أو نوسمه بإنزيم فيصبح اسمه .ELISA
سنتكلم عن تفاعلات التراص التي هي أبسط الطرق المستخدمة للكشف عن الجراثيم بطريقة
غير مباشرة ،سنتكلم عن اختبارين متلازمين مع بعضهما وهما:
.1اختبار فيدال :Widalيتم الكشف فيه عن جرثومة السالمونيلا التي تسبب الحمى
التيفية.
.2اختبار رايت :Wtightيتم الكشف فيه عن جرثومة البروسيلا التي تسبب الحمى
المالطية.
تُسمى هذه الاختبارات بالاختبارات المصلية وذلك لأنها تتم على مصل الدم.
3 /groups/RBCs.Pharmacy.2025
االختبارات المصلية
لأنهما يكشفان عن جرثومتين متشابهتين ويسببان مرضين متشابهين بالأعراض السريرية أي لا
يمكننا التمييز بين الجرثومتين لوجود تداخل بالأعراض السريرية ،وهي:
ارتفاع حرارة قمي موجي متناوب (ترتفع الحرارة وتنخفض لوحدها).
أعراض هضمية حيث تسبب الجرثومتين التهاب في الأمعاء (عن طريق تناول طعام ملوث بهذه
الجراثيم) ثم تنتقل من خلال الأوعية المساريقية لتسبب إنتان في الدم لذلك يطلق عليها
جراثيم غازية (أي تنتقل من المكان الذي سببت فيه الإنتان لمكان آخر).
مالحظات:
أي جرثوم موجود بالدم يسبب تجرثم دم أما في حال ظهرت أعراض يسمى إنتان
دم.
إنتان الدم بالسالمونيال يسمى حمى تيفية أما إنتان الدم بالبروسيال يسمى حمى
مالطية.
أيضا تسبب وهن وضعف في كامل الجسم (لذلك يتم الخلط بينها وبين الإصابات الفيروسية).
oالشيء المشترك أيضاً بين هاتين الجرثومتين أنهما Zoonatic bacteriaأي جراثيم ذات
منشأ حيواني ،تصيب الحيوانات بشكل أساسي ،وبشكل ثانوي تصيب الإنسان وذلك عند
تناول مشتقات الحيوان المصاب الغير مطبوخة بشكل جيد.
oطريقة دخول الجرثوم ألى داخل جسم الإنسان عن طريق الفم ثم تصل إلى الأمعاء وتسبب
بالبداية التهاب أمعاء (يوجد الكثير من الجراثيم التي تسبب التهاب أمعاء).
السالمونيال
/groups/RBCs.Pharmacy.2025
4
االختبارات المصلية
oوبما أن البراز ثلث وزن البراز جراثيم لذلك نحتاج إلى إنتقائية للسالمونيلا والبروسيلا حتى تنمو
الجرثومة التي نريدها أي نحتاج لنعزل بشكل انتقائي.
oإن زرع البراز يكون على مرق سيلينيت ( (selenite brothثم الزرع على أوساط نوعية ومنه
نحتاج لأسبوع على الأقل.
oأما زرع الدم يحتاج لأوساط خاصة وهي عينة صعب الحصول عليها لذلك يحتاج الزرع لأسبوع أو
أسبوعين.
oإذًا زرع الدم والبراز يتطلبان وقت طويل لذلك نحتاج طريقة سريعة للتشخيص وسنعتمد على
طريقة غير مباشرة لأن الجرثوم صعب العزل والزرع أيضاً وهما . widal+wright
oتكشف السالمونيلا باختبار widalوتنتقل من حيوان إلى إنسان.
للكشف عن السالمونيلا (سأكشف عن الأضداد الموجود بالدم) ،يوجد أربعة كواشف لاختبار
:widal
5 /groups/RBCs.Pharmacy.2025
االختبارات المصلية
مالحظات:
يوجد أنواع من السالمونيال ليست غازية ،ال تسبب حمى تيفية ،تبقى فقط في
األمعاء وتسبب التهاب أمعاء فقط.
حساسية العزل والزرع لهاتين الجرثومتين منخفضة جداً (لذلك لم نزرع على وسط SS
agarهنا).
طريقة العدوى :تنتقل للإنسان من تناول لحم أو بيض غير مطبوخ جيدًا لحيون مصاب.
الطبخ الجيد هو تعرض اللحم أو البيض لدرجة حرارة الغليان أو درجة حرارة أكثر من 09⁰لمدة ربع
ساعة.
البروسيال
/groups/RBCs.Pharmacy.2025
6
االختبارات المصلية
مالحظة:
الحمى التيفية :معالجتها من 15_19يوم ،تُعالج بصاد حيوي واحد (غالباً نستخدم أحد
السيفالوسبورينات).
الحمى المالطية :معالجتها 49يوم على األقل ،ممكن أن تسبب إمراضية مزمنة
ناكسة بشدة ،تُعالج بنوعين من الصادات الحيوية (والنوعين مزعجين بشدة لإلنسان)،
بما أننها جرثومة داخل خلوية إذاً نحتاج لصاد حيوي قادر على اختراق الخلية (دائماً
نستخدم دوكساسيكلين أو أحد التتراسيكلينات بالمشاركة مع صاد حيوي آخر مثل
ريفامبيسين بالنسبة لألطفال ،وسبروفلوكساسين بالنسية للكبار) ،المشكلة أن المريض
ممكن أال يلتزم باألدوية وال يسشتمر بشكل كامل لذلك ممكن أن تتحول اإلصابة من
حالة حادّة ومزمنة قد تكون فيها الجرثومة منحصرة ببعض األماكن مثل المفاصل أو
قد تذهب باتجاه الخصية وتسبب عقم.
آلية العمل:
7 /groups/RBCs.Pharmacy.2025
االختبارات المصلية
1
. إذا حصل تراص تكون نسبة الأضداد
40
إذا لم يحصل تراص نضاعف الكمية بإضافة 49ميكرون من مصل المريض.
1
. إذا حصل تراص تكون نسبة الأضداد
20
إذا لم يحصل تراص فالاختبار سلبي.
1 1
،وأقل عيار أضداد هو 20وكل عيار أضداد هو نصف الذي أعلى عيار أضداد هو
320
قبله.
إذًا متى نقول أن المريض مصاب لديه إصابة فعّالة بحاجة لعلاج أو غير مصاب؟
1
يوجد إصابة حديثة فعّالة وبحاجة لمعالجة. إذا كان عيار الأضداد أكثر من
80
1
لا يوجد إصابة فعّالة وقديمة وليس بحاجة لعلاج (إصابة إذا كان عيار الأضداد أقل من
80
سابقة أو تفاعلات مناعة متصالبة).
1
يجب إعادة الاختبار بعد 3_7أيام: إذا كان عيار الأضداد
80
.1إذا زاد عيار الأضداد تكون إصابة فعّالة وحديثة وبحاجة لمعالجة
.2أمّا إذا بقي العيار نفسه أو نقص إذًا تكون إصابة سابقة أو تفاعلات مناعة متصالبة.
مالحظة:
/groups/RBCs.Pharmacy.2025
8
االختبارات المصلية
قطرة من مصل المريض وقطرة من كاشف ستربتوليزين O+لاتيكس (لأن الوزن الجزيئي ل
ستربتوليزين O-صغير لذلك نحتاج إلى تكبيره وذلك يتم بإضافة اللاتيكس).
الكاشف هو الحالة العقدية +لاتيكس لجعل التفاعل مرئي عيانياً.
9 /groups/RBCs.Pharmacy.2025
االختبارات المصلية
................................................................................................................................
................................................................................................................................
................................................................................................................................
................................................................................................................................
................................................................................................................................
................................................................................................................................
................................................................................................................................
................................................................................................................................
................................................................................................................................
................................................................................................................................
................................................................................................................................
................................................................................................................................
/groups/RBCs.Pharmacy.2025
10
االختبارات المصلية
................................................................................................................................
................................................................................................................................
................................................................................................................................
................................................................................................................................
................................................................................................................................
................................................................................................................................
................................................................................................................................
................................................................................................................................
................................................................................................................................
................................................................................................................................
................................................................................................................................
................................................................................................................................
................................................................................................................................
11 /groups/RBCs.Pharmacy.2025
االختبارات المصلية
/groups/RBCs.Pharmacy.2025
12