‫‪000‬‬

‫عملي‬ ‫‪00‬‬
‫‪61‬‬
‫‪00‬‬
‫قياس فاعلية الصادات الحيوية واختبارات‬

‫‪7‬‬ ‫التحسس‬

‫‪6‬‬
‫أحياء دقيقة ‪Microbiology 1 | 1‬‬

‫السلام عليكم *__*‬

‫أعزاءنا الطلبة‪‬‬
‫نقدم لكم محاضرتنا السابعة في مادة األحياء الدقيقة القسم العملي‪.‬‬
‫مع العلم أن هذا العمل هو نتاج طالبي بحت ال عالقة لدكاترة المادة به‪.‬‬
‫آملين أن نحقق لكم الفائدة المرجوة من وراء هذا العمل المتواضع‪.‬‬
‫راجين من المولى عزّ وجل التوفيق لنا ولكم ^__^‬

‫اختبارات التحسس‬

‫تذكرة‪:‬‬

‫في الجلسة السابقة تم القيام بمجموعة من الاختبارات الحيوية لتحديد هوية الجرثوم وتحديد إن‬
‫كان ممرض أو غير ممرض‪ ،‬ولمعرفة العلاج وما هو الصاد الحيوي المناسب للعلاج نلجأ الى اختبارات‬
‫التحسس (أهم طريقة لاختيار الصاد الحيوي هي تحديد هوية الجرثوم وبعدها نقوم باختبار‬
‫التحسس للصادات الحيوية)‪.‬‬
 ‫قياس فاعلية الصادات الحيوية واختبارات التحسس‬

‫مبدأ اختبار التحسس للصادات الحيوية‬

‫‪ ‬نقوم بوضع الصاد الحيوي بتماس مع الجرثوم ونراقب تأثير الصاد الحيوي على الجرثوم‪:‬‬
‫‪ ‬فإذا استطاع قتله أو تثبيطه عن النمو ‪‬الصاد الحيوي فعّال‪.‬‬
‫‪ ‬وإذا لم يستطع قتله ‪‬الصاد الحيوي غير فعّال‪.‬‬
‫‪ ‬ونقوم باختبار ذلك في الزجاج ‪ in vitro‬فإذا كان فعّال بالزجاج ‪‬إذًا احتمال كبير أن يكون‬
‫فعّال في الحيوية ‪ in vivo‬وبالتالي نستطيع إعطاء الصاد للمريض‪.‬‬

‫هل أستطيع إعطاء نفس الصاد الحيوي لنفس الجرثومة لمريضين مختلفين أو حتى لنفس‬
‫المريض لكن بوقت مختلف؟‬

‫لا‪ ،‬بسبب وجود سلالات جرثومية مقاومة‪ ،‬حيث عامل الطفرة بالنسبة للجراثيم مرتفع جدًا‬
‫‪1‬‬
‫) وبالتالي يجب القيام باختبار تحسس لكل جرثومة لوحدها‪.‬‬ ‫(نسبته‬
‫مليون‬

‫تأثير الصاد الحيوي ال عالقة له بالتركيز أي لن يزيد مفعوله كلما زاد التركيز (التركيز‬
‫يهمنا لحساب الجرعة فقط)‪.‬‬
‫يوجد العديد من الطرق لاختبارات للتحسس سنتكلم فقط عن طريقتين أساسيتين‪:‬‬
‫‪ .1‬اختبار الأنابيب الممددة‪.‬‬
‫‪ .2‬انتشار الصادات الحيوية من الأقراص (‪.)Kirby Bauer test‬‬

‫‪ .1‬اختبارات التمديد في أنابيب ‪:Tube Dilution Test‬‬

‫‪ ‬وهي الطريقة الأساسية الأكاديمية التي بُنيت عليها الطرق الأخرى‪.‬‬
‫‪ ‬تسمى أيضا بطريقة الشلال أو التمديد المتتالي أو التمديد الثنائي‪.‬‬
‫‪ ‬تعتبر هذه الطريقة نصف كمية‪.‬‬
‫‪ ‬مبدأ التمديد بالأنابيب‪ :‬نحضر الصاد الحيوي الذي نريد اختباره على الجرثومة ونعمل منه سلسلة‬
‫تمديدات ثنائية ونضع بكل أنبوب ‪1‬مل من مصل فيزيولوجي عقيم أو مرق عقيم (سائل التمديد)‬
‫فيتشكل لدينا سلسلة من التمديدات (شلال تمديد) وكل أنبوب يكون فيه تركيز الصاد الحيوي‬
‫نصف الأنبوب الذي قبله‪.‬‬

‫‪/groups/RBCs.Pharmacy.2025‬‬
‫‪2‬‬
 ‫قياس فاعلية الصادات الحيوية واختبارات التحسس‬

‫‪6‬‬ ‫‪5‬‬ ‫‪4‬‬ ‫‪3‬‬ ‫‪2‬‬ ‫‪1‬‬ ‫الشاهد‬ ‫األنبوب‬

‫تركيز‬
‫‪32x‬‬ ‫‪16x‬‬ ‫‪8x‬‬ ‫‪4x‬‬ ‫‪2x‬‬ ‫‪X‬‬ ‫‪0‬‬
‫الصاد(ميكروغرام)‬
‫‪14‬‬ ‫‪32‬‬ ‫‪11‬‬ ‫‪8‬‬ ‫‪4‬‬ ‫‪2‬‬ ‫‪0‬‬ ‫مثال‬
‫‪ ‬ثم يتم زرع كمية محددة وثابتة من معلق الجرثوم في كل الأنابيب (‪ 1‬مل لكل أنبوب)‪.‬‬

‫المتغير هو تركيز الصاد الحيوي والثابت كمية الجراثيم (أي نرى تأثير الصاد الحيوي‬
‫الذي يستطيع أن يقتل الجراثيم)‪.‬‬
‫‪ ‬أيضاً نعمل بالإضافة للسلسة أنبوب شاهد إيجابي يكون فيه تركيز الصاد صفر (معدوم) للتأكد‬
‫أن الوسط مناسب لنمو الجراثيم‪.‬‬
‫‪ ‬بعدها نحضن سلسلة التمديدات بدرجة حرارة ‪ 33‬لمدة ‪ 24‬ساعة‪ ،‬وبعد الحضن نرى إذا كان‬
‫الصاد سيؤثر على الجرثوم أم لا‪ ،‬فإذا أثر على الجرثوم سيقتله أو سيثبطه فلن يتشكل عكر أم إذا‬
‫لم يؤثر ستشكل عكر‪.‬‬
‫اآلن سنقارن بين‪:‬‬
‫‪MBC:‬‬
‫‪MIC:‬‬
‫‪Minimum Bactericidal‬‬
‫‪Minimum Inhibitory Concentration‬‬
‫‪Concentration‬‬
‫‪ :MBC‬التركيز األدنى من الصاد القاتل‬
‫‪ :MIC‬التركيز األدنى من الصاد المثبط للنمو‬
‫للجراثيم وذلك بزرع األنابيب التي لم يحدث‬
‫الجرثومي المرئي بالعين المجردة في‬
‫فيها نمو فقط على أطباق بتري فإن نمت‬
‫الزجاج ‪ ( in vitro‬نقصد بالمرئي أي العكر‬
‫الجراثيم إذاً تركيز الصاد لم يقتلها بل قام‬
‫في الوسط السائل أو مستعمرات في‬
‫بتثبيطها وإن لم قام بقتل ‪ %99.9‬إذاً‬
‫الوسط الصلب)‬
‫تركيز الصاد مناسب‬
‫ويتم اختيار أدنى تركيز من الصاد القادر‬ ‫ويتم اختيار أصغر تركيز من الصاد الحيوي‬
‫على قتل ‪ %99.9‬من النمو البدئي‬ ‫بناءً على عدم وجود العكر (حيث نرى العكر‬
‫للجراثيم‬ ‫عندما تكون كمية الجراثيم أكثر من ‪)105‬‬
‫يأتي بعد ‪ MIC‬في تحديد حساسية‬
‫وهو األهم في تحديد حساسية الجراثيم‬
‫الجراثيم‬

‫‪3‬‬ ‫‪/groups/RBCs.Pharmacy.2025‬‬
 ‫قياس فاعلية الصادات الحيوية واختبارات التحسس‬

‫‪ ‬بعد الحضن نلاحظ النتائج كما ذكرنا لتحديد ‪ MIC‬و‪.MBC‬‬

‫‪ ‬مثالا‪:‬‬
‫‪ ‬إذا كان بتركيز الصاد الحيوي ‪ 2‬مكغ (يوجد عكر) ‪‬الصاد غير مؤثر‪.‬‬
‫‪ ‬إذا كان بتركيز الصاد الحيوي ‪ 11‬مكغ (لا يوجد عكر) ‪‬يتثبط النمو الجرثومي للجراثيم وهو‬
‫‪.MIC‬‬
‫‪ ‬إذا حصل نمو في كافة أنابيب السلسلة ‪‬تراكيز الصاد المستخدمة غير كافية ويجب إعادة‬
‫السلسلة‪.‬‬
‫‪ ‬بالأنبوب الشاهد الإيجابي نلاحظ نمو الجراثيم ووجود عكر لعدم احتواءه على صاد حيوي‪.‬‬
‫‪ ‬يقل عدد الجراثيم كلما انتقلنا إلى الأنبوب الذي يحوي صاد أكثر وذلك بملاحظة العكر‪ ،‬حيث‬
‫يكون العكر كثيف في الأنابيب الأولى ويخف حتى يصل إلى الأنبوب الذي لا يظهر فيه النمو‬
‫المرئي للجراثيم (عكر) وهو أقل تركيز لم يسمح بالنمو أي هو ‪.MIC‬‬
‫‪ ‬لتحديد ‪ MBC‬نقوم بزرع الأنبوب الشاهد أو الأنابيب التي لم يحدث فيها نمو (التي لا تحوي‬
‫عكر) على وسط بتري لذا نقوم بالزرع في الأنبوب الذي يحوي التركيز الأدنى المثبط فما فوق‬
‫وهناك احتمال أن يحصل نمو في الأنبوب الذي تركيزه ‪ 11‬مكغ "لأن الجراثيم كانت مثبطة ثم‬
‫بعد زرعها على الوسط استطاعت العيش مرة أخرى"‪.‬‬
‫‪ ‬إذا كان النمو بالأنبوب ذو التركيز ‪ 32‬مكغ مستعمرة واحدة أو لم ينمو يكون هذا هو‬
‫الـ ‪.MBC‬‬
‫‪ ‬في هذه الطريقة نرى إن كان الصاد مؤثر على الجرثوم أو لا‪ ،‬أي أننا لم نعلم حتى الآن ما هو‬
‫التركيز الذي سنعطيه للمريض‪.‬‬
‫‪ ‬إن أي دواء حتى نتمكن من اعطاؤه للمريض يجب أن يكون ضمن النافذة العلاجية‬
‫‪.Therapeutic Window‬‬
‫‪ ‬هذه النافذة تكون ضمن خطين‪:‬‬
‫‪ .1‬السفلي ‪ Cmin‬اسمه التركيز الأدنى المؤثر تحته لا يوجد تأثير‪.‬‬
‫‪ .2‬العلوي ‪ Cmax‬اسمه التركيز الأعلى المؤثر أكثر منه يصبح تأثير سمّي‪.‬‬

‫‪/groups/RBCs.Pharmacy.2025‬‬
‫‪4‬‬
 ‫قياس فاعلية الصادات الحيوية واختبارات التحسس‬

‫‪1‬‬ ‫‪1‬‬
‫‪ ‬نقارن ‪ MIC‬و‪ MBC‬مع ‪ Cmax‬و‪ Cmax‬إذا كانت ‪ MIC‬و‪ MBC‬ضمن ‪ Cmax‬و‪ Cmax‬إذًا الصاد‬
‫‪4‬‬ ‫‪4‬‬
‫فعّال‪.‬‬
‫‪1‬‬
‫‪  MIC < Cmax 4 ‬الجرثوم حساس‪.‬‬
‫‪1‬‬
‫‪  4Cmax < MIC < Cmax ‬حساسية متوسطة‪.‬‬
‫‪  MIC > Cmax ‬الجرثوم مقاوم‪.‬‬
‫‪ ‬وهذا فقط لصاد حيوي واحد على جرثومة واحدة‪ ،‬أي لنستطيع وصف الصاد الحيوي المناسب‬
‫يجب تجريب عدة صادات على الجرثومة وإعطاء احتمالات عن الصادات الممكن استخدامها‪.‬‬
‫مناقشة‬

‫إذا كانت النتيجة عند أدنى تركيز ‪ 2‬مكغ ال يوجد عكر؟ ما السبب؟‬
‫‪ ‬الصاد فعاليته عالية جدًا والحل هو عمل تمديدات أصغر أي ان تراكيز الصاد غير مناسبة لذلك‬
‫نعيد السلسلة باستخدام تركيز أدنى من الصاد الحيوي‪.‬‬
‫‪ ‬قد يكون وسط المرق المغذي غير مناسب لنمو الجراثيم لذلك لا بد من عمل شاهد إيجابي‬
‫لضمان صلاحية الوسط للزرع الجرثومي‪.‬‬

‫كيف نعرف ان الصاد قاتل للجرثوم؟‬

‫‪ ‬تركيز الصاد يجب أن يكون بعد الزرع قد قتل ‪ %99.9‬الجراثيم لذلك ندرس قدرة الجراثيم على‬
‫العيش بالزرع على وسط صلب وذلك بغسل الجرثوم من أثر الصاد وبعدها ننقل الجرثوم على‬
‫طبق بتري ونحضن لمدة ‪ 24‬ساعة‪ ،‬ويجرى ذلك على الأنابيب التي لا تحوي عكر‪.‬‬
‫‪ ‬الطبق الذي لا يحدث فيه نمو يكون تركيزه هو الأدنى القاتل للجرثوم ‪.MBC‬‬

‫ماذا حصل للجراثيم في األنابيب التالية لألنبوب ذو التركيز ‪ 61‬مكغ التي لم يحصل فيها عكر؟‬
‫‪ ‬إما تكون تثبطّت أو قُتِلت‪ ،‬ولمعرفة ذلك نزرع على الوسط الصلب دون وجود صادات فـ‪:‬‬
‫‪ .1‬إذا عادت للنمو فإن الصاد مثبط‪.‬‬
‫‪ .2‬إذا لم تنمو فإن الصاد قاتل‪.‬‬

‫‪5‬‬ ‫‪/groups/RBCs.Pharmacy.2025‬‬
 ‫قياس فاعلية الصادات الحيوية واختبارات التحسس‬

‫سلبيات هذه الطريقة‪:‬‬

‫‪ .1‬مستهلكة للوقت والجهد‪.‬‬

‫‪ .2‬مكلفة وتحتاج لخبرة‪.‬‬
‫‪ .3‬حساسية هذه الطريقة منخفضة ونسبة الخطأ فيها كبيرة جداً تصل إلى ‪ 100%‬لأنه مثلًا بين‬
‫الأنبوب ‪ 5‬و‪ 1‬يوجد مئات التراكيز التي لم نأخذها بعين الاعتبار‪.‬‬

‫مالحظات‪:‬‬

‫‪ ‬يكون ‪ MIC‬و‪ MBC‬بتراكيز قريبة من بعضهم حيث في مثالنا كان ‪ MIC‬عند تركيز ‪11‬‬
‫مكغ وكان ‪ MBC‬عند تركيز ‪ 32‬مكغ‪.‬‬
‫‪ ‬ومن الممكن أن يكون ‪ MIC‬و‪ MBC‬عند نفس التركيز وخصوصاً لدى الصادات القاتلة‪.‬‬

‫‪ .2‬طريقة انتشار الصادات الحيوية من األقراص الورقية (كيربي باور) ‪Kirby Bauer‬‬
‫‪:)antibiogram( Disk Diffusion Test‬‬
‫‪ ‬طريقة كيفية (إن الطرق السابقة هي طرق بحثية يجريها طلاب الدراسات أما في المخابر نحتاج‬
‫لطريقة سريعة وموفرة للجهد والتكلفة المادية لذا نلجأ لهذا الاختبار)‪.‬‬
‫‪ ‬المبدأ األساسي لالنتشار القرصي‪ :‬تعتمد على انتشار الصاد الحيوي من أقراص مشربة‬
‫بتراكيز معينة من هذا الصاد على وسط صلب زرع عليه الجرثوم‪.‬‬
‫‪ ‬أي نأخذ الصاد الحيوي اعتمادًا على تركيز ‪ MIC‬و‪ MBC‬ثم نشرب التركيز المناسب على قرص‬
‫من ورق ترشيح وننتظر جفاف الصاد على الورقة ثم نضع الصاد على تماس مع الجرثوم بعد‬
‫زرعه على وسط زرعي‪.‬‬
‫‪ ‬عندما نضع القرص على سطح الوسط سيتشرب الماء الموجود ضمن الوسط وسينتشر الصاد‬
‫بشكل شعاعي بكل الاتجاهات‪.‬‬
‫‪ ‬وبعد الحضن إذا لم تستطع الجرثومة أن تنمو أي أن الصاد ثبطها أو قتلها ‪‬سيتشكل حول‬
‫القرص هالة من عدم النمو‪/‬هالة من التثبيط ‪.zone of inhibition‬‬
‫‪ ‬بهذه الطريقة يتم الزرع على وسط آغار صلب‪ ،‬لكن يوجد عدة عوامل لهذه الطريقة يجب‬
‫اتباعها‪.‬‬

‫‪/groups/RBCs.Pharmacy.2025‬‬
‫‪6‬‬
 ‫قياس فاعلية الصادات الحيوية واختبارات التحسس‬

‫شروط اختبار كيربي باور‪:‬‬

‫‪ .A‬استخدام وسط مولر هينتون ‪:Muller Hinton‬‬

‫هو وسط بسيط عام ينمي كل الجراثيم دون انتقائية نستخدمه في اختبار التحسس للصادات‬
‫الحيوية لأنه يعطي ثباتية وتكرارية للنتائج (وسط متوفر بكل أنحاء العالم وتركيبه ثابت)‪،‬‬
‫ويساعد على انتشار الصادات الحيوية‪.‬‬

‫‪ .B‬سماكة الوسط‪:‬‬
‫‪ ‬يجب أن تكون سماكة الآغار ضمن الطبق ‪ 4-2‬ملم لأن الهالة تتناسب عكسًا مع سماكة الآغار‪.‬‬
‫‪ ‬هذه التقنية تعتمد على الانتشار بشكل شعاعي بالعمق وأفقي على السطح‪:‬‬
‫‪ ‬فإذا كان الوسط سماكته أكثر من ‪ 4‬فإن الصاد سوف ينتشر بشكل أكبر في العمق وبالتالي يكون‬
‫قطر الهالة أصغر (سلبي كاذب)‪.‬‬
‫‪ ‬أما إذا كان الوسط سماكته أقل من ‪ 2‬فإن الصاد سوف ينتشر أفقياً أي على السطح بشكل أكبر‬
‫ويكون قطر الهالة أكبر من الحقيقية (إيجابي كاذب)‪.‬‬
‫‪ ‬كيف نحصل على هذه السماكة؟‬
‫‪ o‬إن الآغار يكون بشكل بودرة نقوم بحلها بالماء ثم نسخن حتى تمام الانحلال‪.‬‬
‫‪ o‬ثم نصب الوسط على حافة الطبق حتى الامتلاء التلقائي (أي دون تحريك) حيث أنه تصبح‬
‫السماكة قليلة عند وضع القليل من الوسط مع تحريكه وبالفرش وتصبح السماكة كبيرة في‬
‫حال قمت بصب الآغار بعد الامتلاء التلقائي‪.‬‬

‫‪ .C‬كثافة المعلق الجرثومي‪:‬‬

‫يجب أن يكون تركيز الجراثيم بالعينة ‪ 105-101 ml/CFU‬لأني بحاجة أن أجعل الجراثيم عندما‬
‫تنمو تشكل طبقة رقيقة (كل خلية جرثومية ملتصقة بالخلية التي بجانبها أي ليس فوق بعضهم)‬
‫وهذه الكمية تُعطي هذه الصفة‪.‬‬

‫كيف نعلم أن المعلق كثافته ‪105-101 ml/CFU‬؟‬

‫إما طريقة مقياس العكر (أي أول ظهور العكر حيث تكون كمية الجراثيم ‪ 105‬وما فوق) أو طريقة‬
‫اكتشفها عالم بعمل سلسلة وهي طريقة ماكفارلاند (العكر يتناسب طردًا مع كمية الجراثيم)‪.‬‬

‫‪7‬‬ ‫‪/groups/RBCs.Pharmacy.2025‬‬
 ‫قياس فاعلية الصادات الحيوية واختبارات التحسس‬

‫طريقة ماكفارالند‬

‫نساوي مادة ثابتة (عيارية وهي ملح كبريتات الباريوم) تعطي عكر ثابت ثم نقارن عكر المعلق‬
‫الجرثومي بهذه المادة العيارية وعندما نصل لنفس العكر نعرف كمية الجراثيم الموجودة‪.‬‬
‫تتكون من سلسلة محاليل أو معلقات من كبريتات الباريوم أو جزيئات اللاتكس بتراكيز مختلفة‪.‬‬
‫تستخدم كمحاليل مقارنة لتقدير عكر النمو الجرثومي‪ ،‬مثلاً‪:‬‬
‫تراكيز السلسة (‪ )0.5 ،0.4 ،0.4 ،0.3 ،0.2 ،0.1‬يجب أن يكون المعلق الجرثومي موافقًا لعكر‬
‫أنبوب ‪ 0.5‬ماكفارلاند ‪‬أي بذلك يكون كثافة المعلق ‪.101‬‬
‫إذا كان المعلق أكثر من ‪ 101‬إن الصاد الحيوي سوف يؤثر لكن ستكون الهالات صغيرة وإذا كان‬
‫المعلق كثافته ‪ 102‬ستكون الهالات كبيرة‪.‬‬
‫إذا لتحضير معلق جرثومي انقل ‪ 5-4‬مستعمرات جرثومية باللوب المعقم إلى أنبوب اختبار يحتوي‬
‫‪2‬مل مصل فيزيولوجي أو ماء مقطر وامزج بشكل جيد حتى الحصول على معلق جرثومي متجانس‬
‫وحتى ظهور أول عكر‪.‬‬
‫افحص المعلق الجرثومي وعدّله حتى الحصول على عكر موافق لعكر أنبوب ماكفارلاند ‪.0.5‬‬
‫كبريتات الباريوم تعطي عكر مماثل لمعلق جرثومي تركيزه ‪.101‬‬
‫تطورت طريقة ماكفارلاند وأصبح الآن جهاز السبيكتروفوتومتر يقيس العكر ومنه قراءة العكر‬
‫ومعرفة كمية الجراثيم نسبة للسلسلة العيارية ماكفارلاند‪.‬‬

‫‪ .D‬فرش الجراثيم بشكل متجانس بطريقة الغمر أو الماسحة‪:‬‬

‫نزرع على الوسط الصلب ويوجد طريقتان‪:‬‬
‫‪ )1‬طريقة الصب أو الغمر‪:‬‬
‫وذلك بوضع ‪1‬مل من المعلق الجرثومي الموجود على سطح الطبق ونحرك حتى ينتشر السائل‬
‫بشكل مائل وتدويره لضمان تغطية كل الوسط الزرعي بالجراثيم‪.‬‬
‫‪ ‬سيئات هذه الطريقة‪ :‬عند زيادة السائل نحن بحاجة لارتشاف هذا السائل فيكون احتمال التلوث‬
‫عالي جدا وأيضاً يجب حضن الطبق لمدة ربع لنصف ساعة‪.‬‬
‫‪ ‬بعد الزرع نحضن من ‪ 15‬حتى ‪ 30‬دقيقة‪.‬‬

‫‪/groups/RBCs.Pharmacy.2025‬‬
‫‪8‬‬
 ‫قياس فاعلية الصادات الحيوية واختبارات التحسس‬

‫‪ ‬السبب‪:‬‬
‫‪ .1‬لأن الجراثيم تحتاج إلى وقت لتتعرف على الوسط‪.‬‬
‫‪ .2‬لأن الجرثوم يكون قد قطع مرحلة ‪ log phase‬الاستعراف والنمو "تنشيط الجرثوم"‪.‬‬
‫‪ .3‬لضمان جفاف الوسط لأنه يكون مبلل وحتى يتشرب الآغار بالجراثيم ولنتخلص من الفائض‬
‫منها‪.‬‬
‫‪ )2‬طريقة الماسحة‪:‬‬
‫‪ ‬وذلك باستخدام الماسحة القطنية ‪ swab‬ونغمسها في المعلق الجرثومي فتشرب القطنة‬
‫من المعلق‪.‬‬
‫‪ ‬ثم نمسح على كامل سطح الآغار لوسط مولر هينتون في علبة البتري بشكل عمودي وأفقي‬
‫ومائل وعلى الحواف لضمان تغطية كل الوسط الزرعي بالجراثيم‪.‬‬
‫‪ ‬سيئاتها‪ :‬أن الهالة ستبدو مشرشرة ولن تبدو بشكل منتظم‪ ،‬وأحد الشروط الأساسية لهالة‬
‫التثبيط هي أن تكون الهالة دائرية منتظمة‪.‬‬

‫‪ .3‬وضع أقراص الصادات الحيوية المصنعة تجاريا فوق سطح اآلغار‪:‬‬

‫‪ ‬نأخذ القرص بالملقط (بعد تمريره على اللهب)‪.‬‬
‫‪ ‬نضع الأقراص على رأس الطبق بتماس مع الجرثوم بشرط أن يكون القرص بعيداً عن حافة علبة‬
‫بتري لمسافة ‪ 2.5-2‬سم لملاحظة هالات عدم النمو حول الأقراص والتمكن من قياس قطرها‬
‫وحتى لا تتداخل الهالة مع حافة العلبة (لانه لو كانت قريبة من الحافة سوف تصبح الهالة هلالية‬
‫بدل دائرية)‪.‬‬
‫‪( ‬الصغيرة)‪ :‬علب البتري ذات قطر ‪ 9‬سم نضع عليها ‪ 5‬أقراص على الأكثر‪.‬‬
‫‪( ‬الكبيرة)‪ :‬علب البتري ذات قطر ‪ 15‬سم نضع عليها ‪ 12‬صاد على الأكثر‪.‬‬
‫‪ ‬وأيضاً يجب أن تكون المسافة بين كل قرص صاد وآخر ‪ 2.5-2‬سم حتى لا تتداخل هالات عدم‬
‫النمو ببعضها وتؤثر على النتيجة سلباً‪.‬‬

‫‪ .4‬الحضن‪:‬‬
‫‪ ‬نحضن بدرجة حرارة ‪ 33‬لأنها الدرجة المثالية لنمو الجراثيم الممرضة‪ ،‬ولمدة ‪ 24‬ساعة لأنه‬
‫الوقت الكافي لتشكيل مستعمرات لمعظم أنواع الجراثيم‪ ،‬وبشكل أفقي حتى تنتج هالة دائرية‬
‫منتظمة (لانه إذا وضعت بشكل مائل سوف تكون الهالة بيضوية)‪.‬‬

‫‪9‬‬ ‫‪/groups/RBCs.Pharmacy.2025‬‬
 ‫قياس فاعلية الصادات الحيوية واختبارات التحسس‬

‫‪ .5‬قراءة النتيجة‪:‬‬
‫‪ ‬تتم قراءة النتائج بعد الحضن ‪ 24‬ساعة حصراً‪.‬‬
‫‪ ‬نقوم بقياس قطر هالة التثبيط حول كل قرص مقدرة بالميلي متر وهذه الهالات تشكلت نتيجة‬
‫انتشار الصاد الحيوي من القرص بكافة الاتجاهات فتمنع نمو الجراثيم حتى الوصول لمرحلة معينة‬
‫يصل فيها التركيز إلى ‪ MIC‬والمسافة بعدها يكون تركيز الصاد أقل من ‪ MIC‬فلا يتثبط نمو‬
‫الجراثيم (تركيز الصاد جنب القرص كبير وكلما ابتعدنا يقل)‪.‬‬

‫‪ ‬نقارن قطر هالة التثبيط بالمجال المرفق بكل صاد حيوي على حدى (باستخدام الجداول الخاصة‬
‫الموجودة مع الصادات "لكل صاد جدول خاص به")‪.‬‬
‫‪ ‬وذلك لتحديد حساسية الجرثوم واختبار الصاد الأكثر ملائمة وفعالية‪:‬‬
‫‪ ‬إذا كان قطر هالة عدم النمو أكبر من المجال فإن الجرثوم حساس )‪ Sensitive (S‬للصاد‬
‫الحيوي أي أن الصاد فعّال فيُعطى كعلاج إذا كان مناسب للمريض‪.‬‬
‫‪ ‬إذا كان قطر هالة عدم النمو أقل من الحد الأدنى للمجال فإن الجرثوم مقاوم )‪Resistant (R‬‬
‫وال يُعطى كعالج أبداً‪.‬‬
‫‪ ‬إذا كان قطر هالة عدم النمو ضمن المجال فإن الجرثوم متوسط الفعالية )‪Intermidiate (I‬‬
‫يُعطى كعالج بالمشاركة مع صاد آخر متوسط الفعالية أو نشاركه مع صاد فعّال‪.‬‬

‫مالحظات‪:‬‬

‫‪ ‬في حال عدم وجود هالة هذا يعني أن القطر ‪0‬ملم‪.‬‬

‫‪ ‬من خالل حساب قطر هالة عدم النمو نستطيع أن نحدد إذا كان الصاد فعال أم ال‪.‬‬

‫أطوار النمو الجرثومي‬

‫‪ .1‬طور التعرف ‪:lag phase‬‬

‫وهو يعبر عن مرحلة تعرف وتأقلم الخلية الجرثومية مع الجو المحيط بها‪.‬‬

‫‪ .2‬الطور اللوغاريتمي ‪:log phase‬‬

‫في حال كانت الظروف ملائمة تبدأ الخلايا بالتكاثر والانقسام بشكل أسي منتظم‪.‬‬

‫‪/groups/RBCs.Pharmacy.2025‬‬
‫‪10‬‬
 ‫قياس فاعلية الصادات الحيوية واختبارات التحسس‬

‫‪ .3‬طور الثبات ‪:stationary phase‬‬

‫ثبات العدد وتثبط النمو لمدة من الزمن‪.‬‬

‫‪ .4‬طور الموت ‪:death phase‬‬

‫تبدأ الخلايا الجرثومية تدريجياً بالموت وتصبح هرمة‪.‬‬
‫أسئلة‬

‫عند وصول عينة مريض إلى المخبر كيف سيتم اختيار الصادات الفعالة لجراثيم العينة هذه؟‬
‫بنا ًء على معلومات المريض الصحية والشخصية منها‪:‬‬
‫‪ ‬جنس المريض وعمره‪ :‬يوجد صادات لا تعطى للمسنين‪ ،‬ويوجد صادات لا تعطى تحت عمر ‪10‬‬
‫سنوات مع مراعاة الحوامل (بعض الصادات لها تأثير مشوه للأجنة)‪.‬‬
‫مثالا‪ :‬إذا كان المريض طفل لا أستطيع استخدام صاد التتراسكلين أو السيبروفلوكساسين لأنها‬
‫تسبب تصبغات على الأسنان ويؤثر بتركيب الأسنان (تذكرة من النظري)‪.‬‬
‫‪ ‬مكان اإلصابة‪ :‬مثلا حالة التهاب بلعوم لا يعطى صادات للعصيات سلبية الغرام لأننا نعلم وجود‬
‫المكورات‪.‬‬
‫‪ ‬حالة المريض الصحية‪ :‬إن كان يعاني من مشاكل في القلب أو الكلية أو الكبد ومعرفة جميع‬
‫الأدوية التي يتناولها لكيلا يحدث تنافرات دوائية‪.‬‬
‫‪ ‬أن تكون طبيعة الصاد مالئمة‪ :‬لنوع المرض والوصول إلى مكانه‪ ،‬مثلًا صاد التهاب السحايا‬
‫يجب أن يعبر الحاجز الدماغي الدموي‪ ،‬وصاد التهابات المهبل والبروستات يجب أن يخترق‬
‫الأنسجة المقيحة ويتحمل الـ‪ PH‬المسيطر في الوسط‪.‬‬
‫‪ ‬معرفة فعالية هذا الصاد‪ In Vivo :‬أو ‪ In Vitro‬أو في كليهما‪.‬‬
‫‪ ‬حسب نوع الجرثوم‪( :‬سلبي أو إيجابي) الغرام (عصيات أو مكورات)‪.‬‬
‫‪ ‬حسب طيف الصاد‪ :‬هل يؤثر على إيجابيات الغرام أم سلبيات الغرام؟‬
‫مثال‪ :‬لا أستخدم صاد البنسلين (يؤثر على إيجابيات الغرام) على الإيكولاي (سلبية الغرام)‬
‫وأبحث عن صاد تأثيره يكون على سلبيات الغرام‪.‬‬

‫‪11‬‬ ‫‪/groups/RBCs.Pharmacy.2025‬‬
 ‫قياس فاعلية الصادات الحيوية واختبارات التحسس‬

‫ماهي العوامل المؤثرة على انتشار الصاد الحيوي؟‬

‫‪ ‬الوزن الجزيئي‪ :‬حيث كلما زاد الوزن الجزيئي للصاد كلما كان انتشاره أقل‪.‬‬
‫‪ ‬االنحاللية‪ :‬حيث كلما كانت الانحلالية أكبر يكون الانتشار أكبر‪.‬‬

‫ماهي العوامل المؤثرة على هالة عدم النمو ‪Zone of inhibition‬؟‬

‫‪ -1‬كثافة المعلق‪.‬‬
‫‪ -2‬تركيز المعلق الجرثومي‪.‬‬
‫‪ -3‬الوزن الجزيئي للصاد الحيوي وانحلاليته‪.‬‬
‫‪ -4‬سماكة الوسط الزرعي‪.‬‬

‫لماذا يجب قراءة النتائج بعد الحضن ‪ 22‬حصراً؟‬

‫حتى تكون النتائج صحيحة لأنه من المكن بزيادة الوقت أن تزيد هالات عدم النمو وتكبر أو أن‬
‫تتداخل مع بعضها أو من الممكن حدوث نمو جرثومي فوق الهالة وبالتالي تكون النتائج خاطئة‪.‬‬
‫واآلن سنعرض جدول لحساسية الجراثيم تجاه الصادات مع طريقة تحديديها‬
‫‪ E.Coli and other enteric gram negative rods.‬‬
‫‪ (Zone diameter, nearset whole mm).‬‬
‫‪DISC‬‬ ‫‪Resistant‬‬ ‫‪Intermediate‬‬ ‫‪Susceptible‬‬
‫)‪Amikacin (30µg‬‬ ‫‪≤14‬‬ ‫‪15-16‬‬ ‫‪≥17‬‬
‫)‪Ampicillin (10µg‬‬ ‫‪≤13‬‬ ‫‪14-16‬‬ ‫‪≥17‬‬
‫)‪Cefazolin (30µg‬‬ ‫‪≤14‬‬ ‫‪15-17‬‬ ‫‪≥18‬‬
‫)‪Gentamicin (10µg‬‬ ‫‪≤12‬‬ ‫‪13-14‬‬ ‫‪≥15‬‬
‫)‪Tetracyclin (30µg‬‬ ‫‪≤14‬‬ ‫‪15-18‬‬ ‫‪≥19‬‬
‫)‪Ticarcillin (75µg‬‬ ‫‪≤14‬‬ ‫‪15-19‬‬ ‫‪≥20‬‬
‫)‪Trimethoprim (5µg‬‬ ‫‪≤10‬‬ ‫‪11-15‬‬ ‫‪≥16‬‬
‫)‪Tobramycin (10µg‬‬ ‫‪≤12‬‬ ‫‪13-14‬‬ ‫‪≥15‬‬

‫‪/groups/RBCs.Pharmacy.2025‬‬
‫‪12‬‬
 ‫قياس فاعلية الصادات الحيوية واختبارات التحسس‬

‫‪DISC‬‬ ‫‪Resistant‬‬ ‫‪Intermediate‬‬ ‫‪Susceptible‬‬

‫)‪Fusidic acid (10µg‬‬ ‫‪≤14‬‬ ‫‪15-16‬‬ ‫‪≥17‬‬
‫‪Chloramphenicol‬‬
‫‪≤14‬‬ ‫‪15-18‬‬ ‫‪≥19‬‬
‫)‪(25µg‬‬
‫)‪Erythromycine (5µg‬‬ ‫‪≤12‬‬ ‫‪13-17‬‬ ‫‪≥18‬‬
‫)‪Methicillin (10µg‬‬ ‫‪≤9‬‬ ‫‪10-13‬‬ ‫‪≥14‬‬
‫)‪Pencillin G (1unit‬‬ ‫‪≤25‬‬ ‫‪≥26‬‬
‫)‪Novobiocin (10µg‬‬ ‫‪≤13‬‬ ‫‪14-15‬‬ ‫‪≥16‬‬
‫)‪Streptomycin (10µg‬‬ ‫‪≤11‬‬ ‫‪12-14‬‬ ‫‪≥15‬‬
‫)‪Tetracycline (25 µg‬‬ ‫‪≤14‬‬ ‫‪15-18‬‬ ‫‪≥19‬‬

‫كيف تم تحديد هذه الجداول؟ وكيف نميز بين الجرثوم الحساس والمقاوم؟‬
‫‪1‬‬
‫حيث‪:‬‬ ‫‪4‬‬
‫‪ ‬عن طريق المقارنة بين ‪ MIC‬و‪Cmax‬‬
‫‪ :MIC ‬صفة مميزة للجرثوم‪.‬‬
‫‪ :Cmax ‬التركيز الأعظمي للدواء في البلازما‪.‬‬
‫‪ ‬فكما نعلم أن لكل دواء تركيز أعظمي لا يمكن تجاوزه في العضوية لكيلا يحصل سمية واذا زاد‬
‫تركيز الصاد عن هذا الحد يصبح تأثيره سمّي‪.‬‬

‫مثال‪:‬‬
‫‪ Cmax ‬لصاد السيبروفلوكساسين هي ‪.2µg‬‬
‫‪ ‬والشخص قيمة ‪ MIC‬عند جرثومه هي ‪ µg 250‬للعلاج وقتل الجرثوم‪.‬‬
‫‪ ‬هنا نقرر أن الجرثوم مقاوم ولا يمكننا معالجته ‪ Resistant‬بالسيبروفلوكساسين لذا نبحث‬
‫عن صاد آخر للمعالجة‪.‬‬

‫‪13‬‬ ‫‪/groups/RBCs.Pharmacy.2025‬‬
 ‫قياس فاعلية الصادات الحيوية واختبارات التحسس‬

‫عندما‪:‬‬

‫‪ MIC >1/4 Cmax )1‬الجرثوم مقاوم للصاد‪.‬‬

‫‪ MIC<1/4 Cmax )2‬الجرثوم حساس للصاد‪.‬‬
‫‪ ‬إنّ بعض الجراثيم تتواجد بشكل أساسي في الأنسجة وكما نعلم أن التركيز الدوائي بالأنسجة‬
‫‪1‬‬
‫يختلف عن التركيز في الدوران‪ ،‬لذلك حدّدت قيمة ثابتة وهي ‪.4 Cmax‬‬
‫‪1‬‬
‫‪ :‬هي قيمة أقل من تركيز الدواء والتي تسمح له بالوصول للأنسجة التي يوجد بها‬ ‫‪4‬‬
‫‪Cmax ‬‬
‫الجرثوم‪.‬‬

‫أي‪:‬‬

‫‪ .1‬إذا كان الحد الأدنى المثبط للجرثوم ‪ MIC‬فوق تركيز ‪Cmax‬‬

‫(التركيز المسموح استخدامه في البشر دون تأثيرات سميّة) يكون‬
‫‪1) MIC‬‬
‫‪Cmax‬‬
‫الصاد المستخدم غير مجدي مع هذا الجرثوم أي أن الجرثوم‬
‫‪2) MIC‬‬
‫مقاوم للصاد ‪ Resistant‬فنبحث عن صاد آخر للمعالجة‪.‬‬
‫‪1‬‬
‫‪Cmax‬‬ ‫‪1‬‬
‫‪3) MIC‬‬
‫‪4‬‬ ‫يكون الصاد ف ّعال‬ ‫‪ .2‬إذا كانت قيمة ‪ MIC‬بين ‪ Cmax‬و ‪Cmax‬‬
‫‪4‬‬
‫وأستطيع استخدامه لأنه استطاع التأثير بالجرثوم "ولكن في حالات‬
‫خاصة"‪ .‬يكون الجرثوم متوسط الحساسية للصاد‬
‫‪.intermediate‬‬
‫‪1‬‬
‫‪ .3‬اذا كانت قيمة ‪ MIC‬تحت ‪( 4 Cmax‬التركيز الذي يصل للأنسجة)‪ ،‬يكون الجرثوم حساس‬
‫أكثر للصاد ‪ ، Sensitive/ suscebtible‬وهذه الحالة التي نريدها ونبحث عنها‪.‬‬
‫‪1‬‬
‫‪  MIC < 4Cmax‬الجرثوم حساس‪.‬‬
‫‪1‬‬
‫‪  4Cmax < MIC < Cmax‬حساسية متوسطة‪.‬‬
‫‪  𝑀𝐼𝐶 > Cmax‬الجرثوم مقاوم‪.‬‬

‫مالحظة‪:‬‬
‫‪ :Cmax ‬صفة خاصة بالصاد‬
‫‪ :MIC ‬صفة خاصة بالجرثوم‪.‬‬

‫‪/groups/RBCs.Pharmacy.2025‬‬
‫‪14‬‬
 ‫قياس فاعلية الصادات الحيوية واختبارات التحسس‬

‫المخبري‪1‬‬ ‫العمل‬

‫زرع الجراثيم على وسط مولر هينتون واستخدام طريقة ‪:Kirby bauer‬‬

‫‪ )1‬نحضر المعلق الجرثومي ثم نقوم بوضع كمية منه على طبق البتري‪.‬‬
‫‪ )2‬فرش المعلق على كامل سطح الاغار لوسط مولر هينتون في علبة بتري وذلك بتدوير الطبق‬
‫لضمان تغطية كامل الوسط الزرعي بالجراثيم‪ ،‬ثم نتخلص من الكمية الزائدة وننتبه حتى‬
‫لايحصل تجرثم‪.‬‬
‫‪ )3‬انتظار ربع ساعة حتى النصف ساعة بوضع الطبق بالحاضنة حتى يجف ويتشرب الاغار المعلق‬
‫الجرثومي (نضع الطبق بوضعه الصحيح ونترك غطاؤه مفتوحًا قليلاً)‬
‫‪ )4‬تعقيم ملقط باللهب ثم نستخدمه بعد أن يبرد لأخذ الصاد الحيوي ووضعه على الوسط الزرعي‬
‫الصلب بالضغط الخفيف بلطف لتثبيته‪.‬‬
‫‪ )5‬إعادة الخطوة مع كل قرص جديد‪.‬‬
‫‪ )1‬إعادة غطاء العلبة والحضن بالدرجة ‪.C33‬‬
‫‪ )3‬قراءة النتيجة حيث تتشكل حول الأقراص هالات عدم نمو يتناسب قطرها مع فعالية الصاد الحيوي‬
‫ويتم قياس هالة عدم النمو ومقارنتها باستخدام جداول خاصة لتحديد إذا ما كانت الجرثوم‪:‬‬
‫‪ ‬حساس‪ ،‬متوسط الحساسية‪ ،‬مقاوم للصاد‪.‬‬

‫فيديو يوضح طريقة كيربي باور‬

‫‪ 1‬معظم الفئات لم تقم بتطبيقه عملياً‬

‫‪15‬‬ ‫‪/groups/RBCs.Pharmacy.2025‬‬
 ‫قياس فاعلية الصادات الحيوية واختبارات التحسس‬

‫مالحظات هامة‪:‬‬
‫إذا وقع الصاد في مكان غير مناسب نتركه في مكانه وال نغير المكان ألن الصاد عبارة‬ ‫‪‬‬
‫عن ورقة ترشيح مشربة ومشبع مباشرة عند وضعه ينتشر من القرص إلى الوسط‪.‬‬
‫االنتباه إلى تطبيق مختلف الصادات ويمكن للصاد الواحد أن يطبق بتركيزين مختلفين‪.‬‬ ‫‪‬‬
‫‪ CFU‬واحدة المستعمرة (‪.)Colony forming unit‬‬ ‫‪‬‬
‫يمكن استخدام أداة ‪ multi disk dispenser‬لوضع أكثر من قرص صاد بنفس‬ ‫‪‬‬
‫الوقت‪.‬‬
‫يكون مكتوب على أنبوب الصاد اسمه وتركيزه ويكتب على قرص الصاد اختصار للصاد‬ ‫‪‬‬
‫مثال‪ :‬اسم الصاد ‪ augmentin‬وتركيزه ‪  30 µg‬االختصار على القرص ‪30 Aug‬‬ ‫‪‬‬
‫قطر الهالة يقاس بال ‪mm‬‬ ‫‪‬‬
‫واحدة الـ‪ MIC‬و‪ MBC‬هي ‪µg/ml‬‬ ‫‪‬‬
‫الصاد القاتل قاتل والصاد المثبط مثبط‪ ،‬والصاد القاتل إذا قلّت تراكيزه ال يمكن أن‬ ‫‪‬‬
‫يصبح مثبط‪.‬‬

‫مراجعة سريعة ألهم األفكار‬

‫‪ ‬تكلمنا عن اختبارين للتحسس‪:‬‬
‫‪ .1‬اختبار التمديد في أنابيب‪.‬‬
‫‪ .2‬طريقة الانتشار من الأقراص (كيربي باور)‪.‬‬
‫‪ MIC ‬التركيز الأدنى من الصاد المثبط للنمو المرئي عيانياً للجراثيم‪.‬‬
‫‪ MBC ‬التركيز الأدنى القاتل للجراثيم‪.‬‬
‫‪ ‬العوامل المؤثرة بطريقة االنتشار من األقراص‪:‬‬
‫‪ ‬الوسط الزرعي مولر هينتون‪.‬‬
‫‪ ‬سماكة الوسط ‪.mm 4-2‬‬
‫‪ ‬تركيز الجراثيم بالعينة ‪.105-101 ml/CFU‬‬
‫‪ ‬فرش الجراثيم بشكل متجانس على كامل سطح طبق الوسط الزرعي‪.‬‬
‫‪ ‬وضع أقراص الصادات الحيوية المصنعة تجارياً‪.‬‬
‫‪ ‬الحضن بدرجة حرارة ‪ 33‬لمدة ‪ 24‬ساعة‪.‬‬

‫‪/groups/RBCs.Pharmacy.2025‬‬
‫‪16‬‬
 ‫قياس فاعلية الصادات الحيوية واختبارات التحسس‬

‫‪ ‬قراءة النتائج بعد الحضن وذلك بقياس قطر هالة التثبيط بالميليمتر لتحديد حساسية‬
‫الجرثوم حيث ممكن أن يكون ‪ R‬أو‪ S‬أو‪.I‬‬
‫‪ ‬اختيار الصاد الحيوي بناء على‪:‬‬
‫‪ .1‬عمر المريض‪.‬‬
‫‪ .2‬نوع الجرثوم‪.‬‬
‫‪ .3‬حالة المريض‪.‬‬
‫‪ .4‬مكان الإصابة‪.‬‬
‫‪ .5‬طيف الصاد‪.‬‬
‫‪ ‬العوامل المؤثرة على انتشار الصاد الحيوي‪:‬‬
‫‪ .1‬الوزن الجزيئي‪.‬‬
‫‪ .2‬الانحلالية‪.‬‬
‫‪ ‬العوامل المؤثرة على هالة عدم النمو‪:‬‬
‫‪ .1‬كثافة المعلق‪.‬‬
‫‪ .2‬تركيز الصاد الحيوي‪.‬‬
‫‪ .3‬سماكة الوسط الزرعي‪.‬‬
‫‪1‬‬
‫‪  MIC < Cmax 4 ‬الجرثوم حساس‪.‬‬
‫‪1‬‬
‫‪  4Cmax < MIC < Cmax ‬حساسية متوسطة‪.‬‬
‫‪ MIC > Cmax ‬الجرثوم مقاوم‪.‬‬

‫‪17‬‬ ‫‪/groups/RBCs.Pharmacy.2025‬‬
 ‫قياس فاعلية الصادات الحيوية واختبارات التحسس‬

‫جدول المصطلحات‬

‫‪English‬‬ ‫عربي‬
‫‪MIC‬‬ ‫تركيز مثبط أدنى‬
‫‪MBC‬‬ ‫تركيز قاتل أدنى‬
‫‪Resistant‬‬ ‫مقاوم‬
‫‪Intermidiate‬‬ ‫متوسط الحساسية‬
‫‪Sensitive‬‬ ‫حسّاس‬
‫‪Zone of inhibition‬‬ ‫هالة عدم النمو‬

‫إلى هنا نصل وإياكم إلى ختام المحاضرة السابعة‬

‫ال تنسونا من صالح دعائكم‪..‬‬
‫تمنياتنا لكم بالتوفيق ^__^‬

‫‪/groups/RBCs.Pharmacy.2025‬‬
‫‪18‬‬
 ‫قياس فاعلية الصادات الحيوية واختبارات التحسس‬

‫دوّن ملاحظاتك ^__^‬

‫‪................................................................................................................................‬‬

‫‪................................................................................................................................‬‬

‫‪................................................................................................................................‬‬

‫‪................................................................................................................................‬‬

‫‪................................................................................................................................‬‬

‫‪................................................................................................................................‬‬

‫‪................................................................................................................................‬‬

‫‪................................................................................................................................‬‬

‫‪................................................................................................................................‬‬

‫‪................................................................................................................................‬‬

‫‪................................................................................................................................‬‬

‫‪................................................................................................................................‬‬

‫‪................................................................................................................................‬‬

‫‪19‬‬ ‫‪/groups/RBCs.Pharmacy.2025‬‬
 ‫قياس فاعلية الصادات الحيوية واختبارات التحسس‬

‫‪/groups/RBCs.Pharmacy.2025‬‬
‫‪20‬‬