Translated from English to Vietnamese - www.onlinedoctranslator.

com

Bài viết này đã được tải xuống bởi: [Dipartmento di Studi E Reicerche] Ngày:
22 tháng 9 năm 2013, Lúc: 09:27
Nhà xuất bản: Taylor & Francis
Informa Ltd Đã đăng ký tại Anh và xứ Wales Số đăng ký: 1072954 Văn phòng đăng ký: Mortimer
House, 37-41 Mortimer Street, London W1T 3JH, UK

Tạp chí Khoa học Vật liệu Sinh học,

Phiên bản Polyme
Chi tiết xuất bản, bao gồm hướng dẫn cho tác giả và
thông tin đăng ký:
http://www.tandfonline.com/loi/tbsp20

Hydrogel pectin/gelatin củ cải đường

có thể tiêm và phân hủy sinh học cho
các ứng dụng y sinh
Takei TakayukiMột, Kotaro Sugiharab, Masahiro YoshidaMột& Koei
Kawakamib
MộtKhoa Kỹ thuật Hóa học, Trường Cao học Khoa học và Kỹ
thuật, Đại học Kagoshima, 1-21-40 Korimoto, Kagoshima,
890-0065, Nhật Bản
bKhoaKỹ thuật Hóa học, Trường Cao học Kỹ thuật , Đại học
Kyushu , 744 Motooka, Nishi-ku, Fukuoka , 819-0385 , Nhật
Bản
Xuất bản trực tuyến: ngày 10 tháng 1 năm 2013.

Để trích dẫn bài viết này:Takayuki Takei , Kotaro Sugihara , Masahiro Yoshida & Koei Kawakami
(2013) Hydrogel pectin/gelatin củ cải đường có thể tiêm và phân hủy sinh học cho các ứng dụng y
sinh, Tạp chí Khoa học Vật liệu Sinh học, Phiên bản Polyme, 24:11, 1333-1342, DOI:
10.1080/09205063.2012.757727

Để liên kết đến bài viết này:http://dx.doi.org/10.1080/09205063.2012.757727

VUI LÒNG CUỘN XUỐNG ĐỂ XEM BÀI VIẾT

Taylor & Francis cố gắng hết sức để đảm bảo tính chính xác của tất cả thông tin (“Nội dung”) có trong
các ấn phẩm trên nền tảng của chúng tôi. Tuy nhiên, Taylor & Francis, các đại lý của chúng tôi và
người cấp phép của chúng tôi không đưa ra tuyên bố hay bảo đảm nào về tính chính xác, đầy đủ
hoặc phù hợp cho bất kỳ mục đích nào của Nội dung. Bất kỳ ý kiến và quan điểm nào được thể hiện
trong ấn phẩm này là ý kiến và quan điểm của các tác giả, không phải là quan điểm của hoặc xác
nhận bởi Taylor & Francis. Không nên dựa vào tính chính xác của Nội dung và phải được xác minh
độc lập với các nguồn thông tin chính. Taylor và Francis sẽ không chịu trách nhiệm pháp lý đối với bất
kỳ tổn thất, hành động, khiếu nại, thủ tục tố tụng, yêu cầu, chi phí, phí tổn, thiệt hại và trách nhiệm
pháp lý nào khác hoặc bất kỳ nguyên nhân nào phát sinh trực tiếp hoặc gián tiếp liên quan đến,

Bài viết này có thể được sử dụng cho mục đích nghiên cứu, giảng dạy và nghiên cứu cá nhân.
Bất kỳ hoạt động sao chép, phân phối lại, bán lại, cho vay, cấp phép lại,
 việc cung cấp có hệ thống hoặc phân phối dưới bất kỳ hình thức nào cho bất kỳ ai đều bị nghiêm cấm. Điều
khoản & Điều kiện truy cập và sử dụng có thể được tìm thấy tạihttp://www.tandfonline.com/page/termsand-
conditions
Được [Dipartmento di Studi E Reicerche] tải xuống lúc 09:27 ngày 22 tháng 9 năm 2013
 Tạp chí Khoa học Vật liệu Sinh học, Phiên bản Polyme,2013
tập 24, Số 11, 1333–1342, http://dx.doi.org/10.1080/09205063.2012.757727

Hydrogel củ cải đường tiêm và phân hủy sinh học pectin/gelatin cho
ứng dụng y sinh
Takei TakayukiMột*, Kotaro Sugiharab, Masahiro YoshidaMộtvà Koei Kawakamib

MộtKhoa Kỹ thuật Hóa học, Trường Cao học Khoa học và Kỹ thuật, Đại học Kagoshima,
1-21-40 Korimoto, Kagoshima 890-0065, Nhật Bản;bKhoa Kỹ thuật Hóa học, Trường Cao học
Kỹ thuật, Đại học Kyushu, 744 Motooka, Nishi-ku, Fukuoka 819-0385, Nhật Bản
Được [Dipartmento di Studi E Reicerche] tải xuống lúc 09:27 ngày 22 tháng 9 năm 2013

(Nhận ngày 27 tháng 10 năm 2012; chấp nhận ngày 7 tháng 12 năm 2012)

Hydrogel tiêm có lợi thế hơn so với hydrogel tạo hình sẵn trong các ứng dụng y sinh. Trong nghiên cứu trước
đây của chúng tôi, chúng tôi đã chỉ ra tính hữu ích của pectin củ cải đường (SBP) dưới dạng vật liệu gel tiêm.
Tuy nhiên, cáctrong cơ thể sốngkhả năng phân hủy sinh học của gel thấp do động vật thiếu các enzym thủy
phân thích hợp của SBP. Trong nghiên cứu này, chúng tôi đã phát triển các loại gel tiêm dựa trên SBP với hàm
lượng cao hơntrong cơ thể sốngkhả năng phân hủy sinh học so với các loại gel SBP trước đó bằng cách kết
hợp gelatin có thể phân hủy sinh học vào loại sau. Một dung dịch nước với SBP hòa tan và gelatin nhanh
chóng (<1 phút) hình thành gel thông qua phản ứng ghép đôi oxy hóa được xúc tác bởi peroxidase cải ngựa
giữa các gốc feruloyl trên các phân tử SBP và các gốc phenolic trên các phân tử gelatin. Thời gian tạo gel và
tính chất cơ học của gel có thể điều chỉnh được bằng cách điều chỉnh nồng độ polymer. Các gel có chứa
doxorubicin, một loại thuốc chống ung thư, đã ngăn chặn thành công sự phát triển của một khối u rắn được
tạo ra bằng cách tiêm dưới da các tế bào u ác tính B16F1 của chuột vào chuột không lông. Những kết quả này
chỉ ra rằng gel SBP/gelatin có thể tiêm và phân hủy sinh học rất hữu ích trong các ứng dụng y sinh.

từ khóa:hydrogel tiêm; Pectin củ cải đường; gelatin; peroxidase; trùng hợp oxy hóa

1. Giới thiệu
Hydrogel là mạng lưới ba chiều bao gồm (các) polyme ưa nước liên kết ngang có thể
hấp thụ phần trăm nước cao.[1] Vì cấu trúc của chúng tương tự như mô cơ thể nên
hydrogel đã được sử dụng rộng rãi làm vật liệu sinh học trong nhiều ứng dụng khác
nhau như kỹ thuật mô và vận chuyển thuốc.[2] Gel tiêm được ưa chuộng hơn trong
các ứng dụng như vậy so với gel tạo hình sẵn vì phẫu thuật cấy ghép có thể được thay
thế bằng quy trình tiêm xâm lấn tối thiểu đơn giản. Sau khi tiêm dung dịch tiền chất,
một loại gel được hình thànhtại chỗvà có thể lấp đầy một khiếm khuyết có hình dạng
bất thường.[3] Hơn nữa, gel cho phép kết hợp đồng nhất các vật liệu hoạt tính sinh
học như tế bào động vật có vú và các yếu tố tăng trưởng. của các polyme sinh học sở
hữu các gốc phenolic trong điều kiện ôn hòa. Một số polyme sinh học, bao gồm axit
hyaluronic, dextran, alginate, carboxymethylcellulose, chitosan và gelatin đã được sử
dụng để điều chế gel tiêm qua phản ứng xúc tác HRP.[6–11] Hầu hết các polyme sinh
học này

* Đồng tác giả. Email: takei@cen.kagoshima-u.ac.jp

- 2013 Taylor & Francis

 1334 T. Takeiet al.

đã được biến đổi về mặt hóa học với các gốc phenolic nhưng gelatin không biến tính có ưu điểm
là nó có thể tạo thành gel thông qua phản ứng được xúc tác bởi HRP vì polyme sinh học tự
nhiên có các gốc phenolic (dư lượng tyrosine) trong chuỗi axit amin của nó.[11] Tuy nhiên, gel
gelatin tan chảy trong vòng 24 giờ ở nhiệt độ sinh lý (37 ° C) do mức độ liên kết ngang thấp do
hàm lượng tyrosine tự nhiên thấp trong polyme sinh học. Độ ổn định nhiệt thấp này hạn chế
khả năng của chúng dưới dạng gel tiêm.
Trước đây chúng tôi đã chứng minh tính hữu ích của pectin củ cải đường (SBP) như một vật liệu
gel tiêm cho các ứng dụng y sinh.[12] SBP có thể tạo thành gel thông qua phản ứng ghép đôi do HRP
xúc tác mà không cần biến đổi hóa học do các gốc feruloyl tự nhiên của nó. Sự khác biệt lớn nhất giữa
gel SBP và gelatin được chuẩn bị thông qua phản ứng xúc tác HRP là gel SBP ổn định hơn ở 37°C so
với gel gelatin. Trước đây chúng tôi đã chỉ ra rằng gel SBP được tiêm vào cơ thể chuột hầu như không
bị phân hủy sau 1 tuần sau khi tiêm, mặc dù gel cho thấy hành vi nghịch đảo trong quá trìnhtrong ống
nghiệmkiểm tra.[12] Chúng tôi xác nhận thêm rằng ngay cả 3 tuần sau khi tiêm, gel được tiêm vẫn
Được [Dipartmento di Studi E Reicerche] tải xuống lúc 09:27 ngày 22 tháng 9 năm 2013

duy trì thể tích ban đầu, cho thấy khả năng phân hủy sinh học thấp của gel SBPtrong cơ thể sống.Mặc
dù điều này có thể được coi là một lợi thế trong một số ứng dụng, nhưng việc giữ mô cấy trong thời
gian dài do thiếu các enzym thủy phân thích hợp trong cơ thể có thể gây ra các phản ứng sinh học bất
lợi.[13]
Mục đích của nghiên cứu này là phát triển các loại gel tiêm dựa trên SBP với hàm lượng cao hơntrong cơ
thể sống khả năng phân hủy hơn so với gel SBP ban đầu. Cuối cùng, gelatin đã được tích hợp vào mạng
polymer của gel SBP thông qua phản ứng xúc tác HRP. Cơ chế liên kết ngang có thể có giữa SBP và gelatin
được thể hiện trong Hình 1.[14] Các gel SBP/gelatin được cho là sẽ phân hủy nhanh hơntrong cơ thể sốngso
với gel SBP, thông qua sự phân hủy của các phân tử gelatin bằng các enzym thủy phân thích hợp (ví dụ như
gelatinase) trong cơ thể. Ban đầu, chúng tôi đã kiểm tra tác động của việc kết hợp gelatin đối với các đặc tính
của gel SBP/gelatin, chẳng hạn nhưtrong cơ thể sốngkhả năng phân hủy sinh học, thời gian tạo gel, độ ổn
định nhiệt ở 37°C và các tính chất cơ học của gel. Cuối cùng, chúng tôi đã đánh giá tính hữu ích của gel với tư
cách là chất mang doxorubicin giải phóng để điều trị khối u.

Hình 1. Sơ đồ hình thành gel SBP/gelatin thông qua phản ứng oxy hóa được xúc tác bởi HRP và sự phân hủy
thông qua quá trình thủy phân gelatin.
 Tạp chí Khoa học Vật liệu Sinh học, Phiên bản Polyme 1335

2. Vật liệu và phương pháp

2.1. Vật liệu và tế bào
SBP (hàm lượng gốc feruloyl: 0,3-10-7mol mg-1–SBP) được tài trợ bởi San-Ei Gen FFI, Inc. (Osaka,
Nhật Bản). HRP và doxorubicin hydrochloride (Dox) được lấy từ Wako Pure Chemical Industries
(Osaka, Nhật Bản). Gelatin (loại A từ da lợn) được mua từ Công ty Sigma-Aldrich (St. Louis, MO,
Hoa Kỳ). Các tế bào B16F1 khối u ác tính của chuột (RCB2649) được lấy từ Ngân hàng tế bào
Riken (Tsukuba, Nhật Bản). Các tế bào được duy trì trong môi trường RPMI-1640 chứa huyết
thanh bào thai bò 10% (w/v), penicillin 100 U/mL và streptomycin 100 μg/mL.

2.2. thời gian tạo gel

Được [Dipartmento di Studi E Reicerche] tải xuống lúc 09:27 ngày 22 tháng 9 năm 2013

Một lượng nhỏ Ca2+- và Mg2+-dung dịch muối đệm phốt phát tự do (CMF-PBS, pH 7,4) chứa SBP
hòa tan và gelatin được trộn với 1/10 thể tích dung dịch HRP và 1/10 thể tích H2Ô2dung dịch
trong lọ, sau đó ủ ở 37°C. Nồng độ của HRP và H2Ô2trong hỗn hợp được cố định ở 1 đơn vị mL-1
và 1mM tương ứng. Quá trình tạo gel được đánh giá bằng phương pháp ống nghiệm đảo ngược
thông thường.[15]

2.3. Tính chất cơ học

Một lượng CMF-PBS chứa SBP hòa tan và gelatin được trộn với 1/10 thể tích dung dịch
HRP và 1/10 thể tích H2Ô2dung dịch trong khuôn hình trụ (đường kính 1,2 cm) và ủ
trong 6 giờ ở nhiệt độ phòng. Thể tích của hỗn hợp là 1,0 mL. Gel kết quả được thu
thập từ các khuôn mẫu. Các đặc tính biến dạng ứng suất của gel được xác định bằng
cách sử dụng máy thử vật liệu để bàn (EZ-Test, Shimadzu, Kyoto, Japan) với tốc độ nén
30 mmmin-1.

2.4. khả năng phân hủy sinh học

Một hỗn hợp của polymer, HRP, và H2Ô2dung dịch được tiêm dưới da vào ba con chuột Wistar
đực (6 tuần tuổi, động vật 0,5mL-1) sử dụng kim cỡ 26 dưới gây mê bằng pentobarbital. Chuột đã
bị giết 1 tuần sau khi tiêm thuốc mê quá liều để xác nhận sự xuống cấp của gel được tiêm. Tất
cả các thí nghiệm trên động vật được tiến hành theo các khuyến nghị trong 'Hướng dẫn chăm
sóc và sử dụng động vật thí nghiệm' của Đại học Kyushu.

2.5. Hành vi phát hành Dox

Gel nạp Dox đã được chuẩn bị như sau. Dung dịch SBP/gelatin có chứa Dox được trộn
với 1/10 thể tích dung dịch HRP và 1/10 thể tích H2Ô2dung dịch và ủ ở nhiệt độ phòng
trong 6 giờ. Thể tích gel và lượng Dox là 0,1mL và 0,9mg gel-1, tương ứng. Các gel
được ngâm trong 2,5mL CMF-PBS và lắc nhẹ ở 37°C. Tại các khoảng thời gian thích
hợp, toàn bộ phần dịch chiết được thay thế bằng CMF-PBS mới (2,5mL). Lượng Dox
trong dung dịch mẫu được xác định bằng đo quang phổ ở bước sóng 475 nm.[13]

2.6. hoạt động chống khối u

Chuột đực khỏa thân (BALB/cA Jcl-nu) có khối u rắn được sử dụng để đánh giá hoạt tính
kháng khối u của gel SBP/gelatin nạp Dox. Những con chuột (9 tuần tuổi, 25–30 g) được
 1336 T. Takeiet al.

tiêm dưới da các tế bào u ác tính B16F1 (1,0 -107tế bào động vật-1) lơ lửng trong 0,5mL
nước muối sinh lý vào hai bên sườn. Thể tích khối u đã phát triển được tính từ đường kính
dài nhất ( a ) và ngắn nhất ( b ) bằng phương trình sau; [16] thể tích khối u = (một + b2)/2.
Chuột có khối u >360 mm3được chia thành ba nhóm khác nhau (ba hoặc bốn nhóm chuột-1
). Trong nhóm đầu tiên, gel SBP/gelatin nạp Dox được tiêm vào khối u. Các gel đã được
chuẩn bị như sau. Dung dịch SBP/gelatin trong CMF-PBS chứa Dox được trộn với 1/10 thể
tích dung dịch HRP và 1/10 thể tích H2Ô2giải pháp. Hỗn hợp được tiêm vào khối u bằng kim
26 thước. Thể tích của gel và liều Dox là 0,1mL động vật-1và động vật 0,9mg-1, tương ứng.
Trong điều kiện thứ hai, khoảng 0,1mL CMF-PBS chứa 0,9mg Dox được tiêm vào khối u.
Trong điều kiện thứ ba, gel SBP/gelatin không chứa Dox (0,1mL động vật-1) được tiêm vào
khối u. Kích thước khối u và thay đổi trọng lượng cơ thể của những con chuột đã được theo
dõi.
Được [Dipartmento di Studi E Reicerche] tải xuống lúc 09:27 ngày 22 tháng 9 năm 2013

2.7. Phân tích thống kê

Dữ liệu được trình bày dưới dạng trung bình ± độ lệch chuẩn. Sự khác biệt thống kê giữa ba nhóm
được phân tích bằng phân tích phương sai một chiều (ANOVA) với phân tích Scheffe.

3. Kết quả và thảo luận

3.1. thời gian tạo gel
Tính năng tuyệt vời nhất của gel tiêm thu được thông qua phản ứng oxy hóa do HRP xúc tác là tạo gel
nhanh trong vòng vài phút sau khi trộn polyme, HRP và H2Ô2các giải pháp. Trong nghiên cứu này,
trước tiên chúng tôi kiểm tra xem dung dịch SBP/gelatin có hình thành gel nhanh (<1 phút) tại HRP và
H2Ô2nồng độ của 1 đơn vị mL-1và 1mM tương ứng.
Ở nồng độ SBP là 2,5% (w/v), thời gian tạo gel của các dung dịch tiền chất chứa 0%
(w/v) gelatin là 51 ± 4 giây (Hình 2). Thời gian tạo gel giảm khi tăng nồng độ gelatin.
Xu hướng này được duy trì đối với các dung dịch tiền chất có nồng độ SBP là 5,0% (w/
v). Nồng độ SBP tăng cũng dẫn đến giảm thời gian tạo gel. Thời gian tạo gel giảm với
nồng độ SBP và gelatin tăng sẽ là do

Hình 2. Sự phụ thuộc của thời gian tạo gel vào SBP và nồng độ gelatin (n =3).
 Tạp chí Khoa học Vật liệu Sinh học, Phiên bản Polyme 1337

sự gia tăng các vị trí liên kết ngang (các gốc feruloyl và phenolic). Những kết quả này cho thấy rằng
dung dịch SBP/gelatin có thể tạo gel trong vòng 1 phút thông qua phản ứng được xúc tác bởi HRP và
thời gian tạo gel có thể được kiểm soát bằng nồng độ polymer. Trong tất cả các thí nghiệm tiếp theo,
HRP và H2Ô2nồng độ được cố định ở 1 đơn vị mL-1và 1mM tương ứng. Chúng tôi cũng xác nhận rằng
nồng độ oxy hóa thấp không gây tổn hại đáng kể đến các tế bào nguyên bào sợi được gói gọn trong
gel SBP/gelatin (dữ liệu không được hiển thị).

3.2. Ổn định nhiệt ở nhiệt độ sinh lý

Như đã mô tả ở trên, dung dịch gelatin chưa biến tính tạo thành gel thông qua phản ứng được xúc tác bởi HRP. Tuy
nhiên, những loại gel như vậy được ủ ở 37°C sẽ tan chảy trong vòng 24 giờ, [11] và sự tan chảy nhanh chóng này làm
hạn chế tính hữu dụng của chúng dưới dạng gel tiêm. Vì sợ rằng gel SBP/gelatin cũng sẽ tan chảy ở 37°C trong vòng
24 giờ, nên chúng tôi đã kiểm tra độ ổn định nhiệt của gel.
Được [Dipartmento di Studi E Reicerche] tải xuống lúc 09:27 ngày 22 tháng 9 năm 2013

Gel gelatin chưa biến đổi thu được thông qua phản ứng được xúc tác bằng HRP tan chảy ở
37 °C trong vòng 24 giờ (Bảng 1 và Hình 3 (A–D)), phù hợp với báo cáo trước đó.[11] Việc kết hợp
2,5% (w/v) SBP vào gel gelatin đã ngăn chặn sự tan chảy hoàn toàn của chúng ở 37°C (Bảng 1). Ở
5% (w/v) SBP, gel không tan sau 24 giờ ủ (Bảng 1 và Hình 3(E–H)). Trước đây chúng tôi đã chỉ ra
rằng gel SBP hình thành thông qua phản ứng được xúc tác bởi HRP ổn định ở nhiệt độ sinh lý.
[12] Các gel SBP/gelatin ổn định nhiệt sẽ là kết quả của việc củng cố các mạng polyme của
gelatin bằng các mạng SBP được hình thành thông qua phản ứng xúc tác HRP. Trong các thí
nghiệm tiếp theo, chúng tôi đã sử dụng các loại gel ổn định nhất, với nồng độ SBP là 5% (w/v).

3.3. Tính chất cơ học

Tính chất cơ học của gel là thông số thiết kế quan trọng cho các ứng dụng y sinh.[17] Do
đó, chúng tôi đã kiểm tra ảnh hưởng của nồng độ gelatin trong gel SBP/gelatin đến tính
chất cơ học của chúng. Hình 4 cho thấy cấu hình biến dạng lực đẩy đối với gel SBP/gelatin
có nồng độ gelatin là 0–15% (w/v). Lực đẩy tác dụng lên gel chứa 0% (w/v) gelatin là lực
thấp nhất trong tất cả các loại gel được thử nghiệm. Nồng độ gelatin tăng dẫn đến lực đẩy
cao hơn và giá trị của gel chứa 15% (w/v) gelatin ở chủng 40% lớn hơn 300 lần so với gel
chứa 0% (w/v) gelatin. Những kết quả này cho thấy các tính chất cơ học của gel có thể điều
chỉnh theo nồng độ gelatin và gợi ý rằng nồng độ gelatin cao hơn làm tăng mật độ liên kết
ngang của gel.

Bảng 1. Trạng thái của gel SBP/gelatin sau 24 giờ ủ ở 37°C.

Nồng độ SBP (%) Nồng độ gelatin (%) Trạng thái sau 24 giờ ủ ở 37°C
0 5 -
0 10 -
0 15 -
2,5 5 ±
2,5 10 ±
2,5 15 ±
5.0 5 +
5.0 10 +
5.0 15 +
Ghi chú: -, tan chảy hoàn toàn; ±, nóng chảy một phần; +, không bị tan chảy.
 1338 T. Takeiet al.
Được [Dipartmento di Studi E Reicerche] tải xuống lúc 09:27 ngày 22 tháng 9 năm 2013

Hình 3. Ảnh chụp SBP/gel gelatin trước (a, c, e, g) và sau (b, d, f, h) 24 giờ ủ ở 37°C. Nồng độ SBP
trong mỗi gel là 0% (A–D) và 5% (w/v) (E–H). Nồng độ gelatin trong mỗi gel là 5% (a, b, e, f) và
15% (w/v) (c, d, g, h).

Hình 4. Biên dạng biến dạng lực đẩy của gel SBP/gelatin (n =3). Nồng độ SBP được cố định ở mức 5%
(w/v).

3.4. khả năng phân hủy sinh học

Chúng tôi đã kiểm tratrong cơ thể sốngkhả năng phân hủy sinh học của chỉ gel SBP/gelatin chứa 15%
(w/v) gelatin 1 tuần sau khi cấy ghép để hạn chế số lượng động vật thử nghiệm vì lý do đạo đức. Tạo
gel của hỗn hợp polymer, HRP và H được tiêm2Ô2dung dịch dưới da chuột đã được xác nhận (Hình
5(A)) và tất cả các động vật đều sống sót sau khi cấy ghép cho đến khi chúng được
 Tạp chí Khoa học Vật liệu Sinh học, Phiên bản Polyme 1339
Được [Dipartmento di Studi E Reicerche] tải xuống lúc 09:27 ngày 22 tháng 9 năm 2013

Hình 5. Ảnh chụp SBP/gel gelatin được cấy dưới da ngay sau khi tiêm (A) và 1 tuần sau khi tiêm
(B, C). Mũi tên hiển thị các gel.
 1340 T. Takeiet al.
Được [Dipartmento di Studi E Reicerche] tải xuống lúc 09:27 ngày 22 tháng 9 năm 2013

Hình 6. (A)Trong ống nghiệmhồ sơ phát hành của Dox từ gel SBP/gelatin được ủ trong CMF-PBS (n =3). (B, C)
Thay đổi trọng lượng cơ thể tương đối (B) của chuột trần mang khối u rắn và thay đổi thể tích khối u tương
đối (C) sau khi tiêm gel SBP/gelatin không chứa Dox (n =3), gel SBP/gelatin nạp Dox (n =4) hoặc giải pháp Dox
(n =4).⁄tr<0,05.
 Tạp chí Khoa học Vật liệu Sinh học, Phiên bản Polyme 1341

hy sinh để kiểm tra sự xuống cấp của gel. Hai trong số ba loại gel đã bị phân hủy hoàn toàn trong
vòng một tuần (Hình 5(B)). Một trong ba loại gel không bị phân hủy hoàn toàn nhưng kích thước nhỏ
hơn đáng kể so với kích thước ngay sau khi tiêm (Hình 5(C)). Sự phân hủy của gel SBP/gelatin sẽ là do
sự phân hủy của các phân tử gelatin bởi các enzym thủy phân thích hợp của gelatin trong cơ thể (Hình
1). Những kết quả này chứng minh rằng việc kết hợp gelatin vào gel SBP giúp tăng cườngtrong cơ thể
sốngkhả năng phân hủy sinh học. Trong các thí nghiệm tiếp theo, chúng tôi chỉ sử dụng gel chứa 5%
SBP và 15% (w/v) gelatin.

3.5. điều trị khối u

Dựa trên các kết quả trên, chúng tôi đã đánh giá khả năng sử dụng gel SBP/gelatin như một chất
mang giải phóng Dox, một loại thuốc chống ung thư, để điều trị khối u. Đầu tiên chúng tôi kiểm tra
mộttrong ống nghiệm phát hành hồ sơ của Dox từ gel. Không quan sát thấy sự bùng nổ quá mức ban
Được [Dipartmento di Studi E Reicerche] tải xuống lúc 09:27 ngày 22 tháng 9 năm 2013

đầu của Dox và thuốc dần dần được giải phóng trong hơn 6 ngày (Hình 6(A)). Dox có một nhóm amin,
mang lại khả năng liên kết cộng hóa trị với các nhóm feruloyl và phenolic của SBP và gelatin thông
qua phản ứng do HRP xúc tác.[18] Chúng tôi cho rằng việc giải phóng thuốc dần dần sẽ liên quan đến
sự phá vỡ mạng lưới polymer bằng cách thủy phân các liên kết glycoside và/hoặc liên kết peptide của
các polyme sinh học.
Để kiểm tra hoạt động chống khối u của gel SBP/gelatin được nạp Dox, chúng tôi đã tiêm gel
vào khối u rắn và xác định sự thay đổi về thể tích khối u và trọng lượng cơ thể của chuột. Chúng
tôi đã chọn các giải pháp Dox (Dox miễn phí) và gel SBP/gelatin không chứa Dox nhưng không
chọn gel SBP Doxloaded không có gelatin làm nhóm kiểm soát. Đó là bởi vì gel SBP không có
gelatin có khả năng thấp là vật liệu sinh học do khả năng phân hủy sinh học thấp. Chúng tôi xác
nhận rằng không có sự khác biệt có ý nghĩa thống kê về trọng lượng cơ thể của ba nhóm (Hình
6(B)). Kích thước của các khối u được tiêm gel SBP/gelatin không chứa Dox và Dox tăng dần
(Hình 6(C)). Hành vi của các khối u được tiêm Dox tự do sẽ dẫn đến nồng độ Dox giảm nhanh
chóng trong các khối u do khuếch tán vào các mô xung quanh. Mặt khác, Gel chứa Dox đã ngăn
chặn thành công sự gia tăng kích thước khối u trong 10 ngày. Đặc biệt, có sự khác biệt có ý
nghĩa thống kê giữa khối lượng khối u tương đối của ba nhóm trong khoảng thời gian từ 5 đến
10 ngày sau tiêm (tr<0,05). Việc ngăn chặn sự phát triển của khối u bằng gel chứa Dox có thể là
do nồng độ Dox cao hơn được duy trì trong các khối u so với Dox tự do, thông qua việc giải
phóng thuốc từ gel một cách bền vững.

Để kết luận, chúng tôi đã chế tạo gel tiêm SBP/gelatin thông qua phản ứng oxy hóa được xúc tác bởi
HRP. Các gel cho thấy khả năng phân hủy sinh học cao hơn so với gel SBP được chuẩn bị trong nghiên cứu
trước đây của chúng tôi. Các gel chứa Dox hiệu quả hơn đối với việc ngăn chặn sự phát triển của khối u so với
Dox tự do. Những kết quả này cho thấy rằng gel là một tiềm năng đầy hứa hẹn để sử dụng trong các ứng
dụng y sinh.

Sự nhìn nhận
Công trình này được hỗ trợ bởi Khoản viện trợ dành cho các nhà khoa học trẻ (B), 23760752, 2011, từ Hiệp
hội Xúc tiến Khoa học Nhật Bản (JSPS).

Người giới thiệu

[1] Seliktar D. Thiết kế hydrogel tương thích với tế bào cho các ứng dụng y sinh. Khoa học.
2012;336:1124–1128.
[2] Tomatsu I, Peng K, Kros A. Hydrogel phản quang cho các ứng dụng y sinh. quảng cáo Thuốc Deliv.
Rev. 2011;63:1257–1266.
 1342 T. Takeiet al.

[3] Jin R, Teixeira LSM, Dijkstra PJ, van Blitterswijk CA, Karperien M, Feijen J. Hydrogel tiêm được liên
kết ngang bằng enzym dựa trên liên hợp axit dextran-hyaluronic mô phỏng sinh học cho kỹ
thuật mô sụn. vật liệu sinh học. 2010;31:3103–3113.
[4] Jin R, Teixeira LSM, Dijkstra PJ, Karperien M, van Blitterswijk CA, Zhong ZY, Feijen J. Hydrogel
dựa trên chitosan có thể tiêm cho kỹ thuật mô sụn. vật liệu sinh học. 2009;30:2544–2551.

[5] Sakai S, Hirose K, Taguchi K, Ogushi Y, Kawakami K. Thuốc tiêm,tại chỗcó thể tạo gel bằng
enzyme, dẫn xuất gelatin để phân phối thuốc và kỹ thuật mô. vật liệu sinh học.
2009;30:3371–3377.
[6] Kurisawa M, Chung JE, Yang YY, Gao SJ, Uyama H. Hydrogel có thể phân hủy sinh học có thể tiêm bao
gồm các liên hợp axit hyaluronic-tyramine để vận chuyển thuốc và kỹ thuật mô. hóa học. cộng đồng.
2005;34:4312–4314.
[7] Jin R, Hiemstra C, Zhong ZY, Feijen J. Nhanh qua trung gian enzymetại chỗsự hình thành hydrogel từ liên
hợp dextran-tyramine. vật liệu sinh học. 2007;28:2791–2800.
[8] Sakai S, Kawakami K. Tổng hợp và mô tả đặc tính của alginate có khả năng liên kết chéo cả về mặt ion và
Được [Dipartmento di Studi E Reicerche] tải xuống lúc 09:27 ngày 22 tháng 9 năm 2013

enzyme. Chất sinh học Acta. 2007;3:495–501.

[9] Ogushi Y, Sakai S, Kawakami K. Tổng hợp carboxymethylcellulose có thể tạo gel bằng enzyme cho các ứng dụng
y sinh. J. Khoa học sinh học. sinh học. 2007;104:30–33.
[10] Sakai S, Yamada Y, Zenke T, Kawakami K. Dẫn xuất chitosan mới hòa tan ở pH trung tính và tại chỗ
gel thông qua phản ứng enzyme xúc tác peroxidase. J. Mater. hóa học. 2009;19:230–235.
[11] Sakai S, Moriyama K, Kawakami K. Kiểm soát khả năng đảo ngược nhiệt của gel gelatin thông qua phản ứng xúc
tác peroxidase trong điều kiện nhẹ đối với tế bào động vật có vú. J. Vật chất sinh học. Khoa học, Polym.
biên tập. 2011;22:1147–1156.
[12] Takei T, Sugihara K, Ijima H, Kawakami K.Tại chỗPectin củ cải đường có thể tạo gel thông qua phản ứng ghép
cặp được xúc tác bởi enzyme của các nhóm feruloyl cho các ứng dụng y sinh. J. Khoa học sinh học. sinh học.
2011;112:491–494.
[13] Takei T, Sato M, Ijima H, Kawakami K.Tại chỗpectin cam quýt bị oxy hóa có thể tạo gel để cung cấp thuốc
chống ung thư cục bộ và ngăn ngừa sự kết tụ tế bào ung thư đồng hình. Đại phân tử sinh học.
2010;11:3525–3530.
[14] Fukushima K. Rigunin [Lignin], 189. Trong: Fukushima K, Funada R, Sugiyama A, Takabe K, Umezawa T,
Yamamoto H, biên tập. Kishitsu-no-keisei [Sự hình thành của gỗ]. Otsu: Nhà xuất bản Kaiseisha; 2003.
189–262.
[15] Ganji F, Abdekhodaie MJ, Ramazani A. Thời gian tạo gel và tốc độ phân hủy của hydrogel tiêm dựa trên
chitosan. J. Sol-Gel Khoa học. công nghệ. 2007;42:47–53.
[16] Il Cho Y, Park S, Jeong SY, Yoo HS.trong cơ thể sốngVàtrong ống nghiệmHoạt động chống ung thư của hydrogel doxorubicin nhạy
cảm với nhiệt và có khả năng liên kết chéo với hình ảnh bao gồm các liên hợp chitosan-doxorubicin. Ơ.
J.Pharm. dược phẩm sinh học. 2009;73:59–65.
[17] Ogushi Y, Sakai S, Kawakami K. Các nhóm hydroxy phenolic được kết hợp để tạo gel được xúc tác bởi peroxidase
của chất hỗ trợ carboxymethylcellulose: sự kết dính và tăng sinh tế bào. Macromol. khoa học sinh học.
2009;9:262–267.
[18] Matheis G, Whitaker JR. Liên kết ngang của protein được xúc tác bởi peroxidase. J. Protein Hóa học.
1984;3:35–48.