‫السنة الثالثة‬ ‫د‪ .

‬أحمد قجة‬ ‫م ( ‪)6‬‬ ‫علمي علم الجراثيم الطبي‬

‫الخميس ‪3032-11-32‬‬

‫االختبارات الكيميائية الحيوية على الجراثيم‬

‫يعتبر الكشف عن الجرثوم المسبب للمرض عند المريض و من ثم تحديد الصادات التي تقضي عليه هو الغاية‬
‫الذهبية ألي مخبر جرثومي‪ ،‬و بعد التعرف على شكل الجرثوم بالصبغات المختلفة‪ ،‬و رؤيته عيانيا تحت‬
‫المجهر‪ ،‬نحتاج إلى المضي قدما ُ في تحديد هوية الجرثوم (‪ ) ID‬و لتحقيق هذا الهدف كان البد من االستعانة‬
‫ببعض االختبارات الكيميائية الحيوية للوصول إلى الهدف المنشود‪ ،‬و لما كانت هذه العملية مرهقة للمخابر و‬
‫تحتاج وقتا و ذات تكلفة عالية‪ ،‬تم تطوير أجهزة مخبرية تعتمد على مبادئ هذه االختبارات السابقة و تستهلك‬
‫موادا كيميائية أقل بشكل ملحوظ و توفر الجهد و الوقت و المال مقارنة باالختبارات التقليدية‪ ،‬هذه األجهزة تم‬
‫تطويرها اعتمادا على الذكاء الصنعي ( ‪.)Artificial intelligence‬‬

‫‪50‬‬
 ‫السنة الثالثة‬ ‫د‪ .‬أحمد قجة‬ ‫م ( ‪)6‬‬ ‫علمي علم الجراثيم الطبي‬

‫الخميس ‪3032-11-32‬‬
‫سندرس فيما يلي أهم هذه االختبارات والمبادئ التي تقوم عليها ثم نقوم بعرض لمحة عن األجهزة الحديثة‪،‬‬
‫تقسم االختبارات الكيميائية الحيوية التي تجرى على الجراثيم إلى ‪ 2‬مجموعات أساسية‪:‬‬
‫المجموعة األولى (اختبارات عامة ‪:)Universal‬‬
‫هي التي تجرى على العزالت الجرثومية بشكل عام لكي توجه أخصائي األحياء الدقيقة الستخدام زمرة معينة‬
‫من االختبارات التشخيصية التالية‪.‬‬
‫أمثلة‪:‬‬
‫نموذج حل الدم‪ ،‬اختبارات الحركة‪ ،‬الكاتالز‪ ،‬االوكسيداز‪.‬‬
‫المجموعة التانية (اختبارات تفريقية ‪:)Differential‬‬
‫هي التي تجرى بشكل حزمة من االختبارات‪ ،‬على العزالت الجرثومية و تنتهي بالتحديد النوعي للجرثوم‬
‫(‪.)Species Level‬‬
‫مثال‪ :‬يمكن التفريق بين اإلمعائيات اعتمادا على الخصائص الكيميائية الحيوية لها و امتالكها أنزيمات معينة‬
‫و أهم األمثلة عليها هو اختبارات الـ ‪ IMViC‬حيث تشير إلى مجموعة االختبارات الكيميائية التي تجرى‬
‫على اإلمعائيات ‪ ،Coliform‬كذلك اختبار الـ ‪ ، TSI‬و اختبارات االستفادة الجرثومية من السكاكر‪.‬‬
‫المجموعة الثالثة (اختبارات نوعية ‪:)Specific‬‬
‫هي االختبارات التي تستخدم لتحديد األنواع الجرثومية أو تحت األنواع (‪.)SubSpecies Level‬‬
‫مثال‪ :‬اختبار غاما علوتاميل أمينوببتيداز(‪ )γ-glutamyl aminopeptidase‬لتأكيد وجود النيسيريا‬
‫السحائية في السائل الدماغي الشوكي ‪.CSF‬‬

‫سندرس بالتفصيل العديد من االختبارات السابقة كل على حدى‪:‬‬

‫‪ TSI ( Triplen Iron Agar ) )1‬أو اختبار ‪: Kligler‬‬

‫‪ -‬منبت يحتوي على كل من السكاكر الثالثة ‪ :‬الغلوكوز ‪ - %0,1‬الالكتوز ‪ - %1‬السكروز ‪%1‬‬
‫‪ -‬يحتوي المنبت أيضا على سلفات الحديد و أحمر الفينول ككواشف‪.‬‬
‫‪ -‬يحتوي بروتين فيه حمض أميني كبريتي ( سيستئين مثال ) لتحري إطالق غاز ‪. H2S‬‬
‫‪ -‬يُستخدم للتمييز بين اإلمعائيات‪ ،‬و نستطيع من خالله تمييز أربع صفات هامة للبكتيريا و هي‪:‬‬
‫‪ -1‬تخمير الغلوكوز‪.‬‬
‫‪ -3‬تخمير الالكتوز‪.‬‬
‫‪ -2‬انتاج ‪.H2S‬‬
‫‪ -4‬إنتاج الغاز‪.‬‬
‫تعطي اإلمعائيات عادة عدة نماذج للتخمير على هذا المنبت كما في الشكل التالي‪.‬‬

‫‪51‬‬
 ‫السنة الثالثة‬ ‫د‪ .‬أحمد قجة‬ ‫م ( ‪)6‬‬ ‫علمي علم الجراثيم الطبي‬

‫الخميس ‪3032-11-32‬‬

‫اختبار كليغلر‬
‫طريقة العمل و مناقشة النتيجة‪:‬‬
‫يُزرع هذا المنبت بالوخز في القعر و الفرش على المائل‪.‬‬ ‫‪-‬‬
‫يكون اللون العادي له أحمر ال يلبث أن يتحول إلى اللون األصفر خالل فترة ‪ 13‬ساعة بعد‬ ‫‪-‬‬
‫الحضن‪.‬‬
‫إذا كان الجرثوم ال يخمر الالكتوز يبدو قعر األنبوب بلون أصفر ( تخمر الغلوكوز فقط ) و أعاله‬ ‫‪-‬‬
‫بلون أحمر‪.‬‬
‫إذا كان الجرثوم يخمر الغلوكوز و الالكتوز معا يتحول كامل المنبت للون األصفر‪.‬‬ ‫‪-‬‬
‫إذا كان الجرثوم يُنتج ‪ H2S‬يظهر لون أسود في القعر‪.‬‬ ‫‪-‬‬
‫‪ -3‬مجموعة اختبارات الـ ‪:IMViC‬‬
‫تجرى لتحديد العامل الجرثومي من مجموعة اإلمعائيات ‪ ،Coliforms‬حيث تتميز هذه المجموعة بعد‬
‫خصائص مشتركة (عصيات سلبية الغرام‪ ،‬هوائية أو ال هوائية مخيرة‪ ،‬تنتج الغاز من تخمير الالكتوز)‪،‬‬
‫حيث يرمز كل حرف من االسم السابق إلى اختبار معين كالتالي‪:‬‬
‫‪ I‬ترمز إلى اختبار اإلندول‪.‬‬ ‫‪-‬‬
‫‪ M‬ترمز إلى اختبار حمرة الميثيل‪.‬‬ ‫‪-‬‬
‫‪ V‬اختبار فوكس بروسكاور (‪.)Voges-Proskauer test‬‬ ‫‪-‬‬
‫‪ C‬اختبار سيمون سيترات ‪.Simmon Citrate Agar‬‬ ‫‪-‬‬

‫‪52‬‬
 ‫السنة الثالثة‬ ‫د‪ .‬أحمد قجة‬ ‫م ( ‪)6‬‬ ‫علمي علم الجراثيم الطبي‬

‫الخميس ‪3032-11-32‬‬

‫مخطط التعرف على الجراثيم بوساطة االختبارات المختلفة‬

‫‪ -1‬اختبار األندول ‪: Indol Test‬‬

‫‪ -‬المبدأ‪ :‬بعض الجراثيم تستطيع التريبتوفان باستخدام انزيم التريبتوفيناز‪.‬‬
‫‪ -‬االستخدام ‪ :‬نتحرى وجود مركب األندول الناتج عن استقالب الحمض األميني ( التربتوفان )‪،‬‬
‫حيث نضيف كاشف ‪ Covax‬إلى سطح المزرعة فنالحظ حصول حلقة حمراء تدل على تحرر‬
‫األندول مما يعني إيجابية االختبار ‪.‬‬

‫‪53‬‬
 ‫السنة الثالثة‬ ‫د‪ .‬أحمد قجة‬ ‫م ( ‪)6‬‬ ‫علمي علم الجراثيم الطبي‬

‫الخميس ‪3032-11-32‬‬

‫‪ -‬طريقة العمل ‪ :‬يحضن الجرثوم في وسط مغذي يحوي التريبتوفان لمدة ‪ 44‬ساعة بحرارة ‪23‬‬
‫مئوية‪.‬‬
‫‪ -‬النتائج‪ :‬إذا ظهرت حلقة حمراء بعد إضافة كاشف كوفاكس ‪ Covax‬فاالختبار إيجابي‪ ،‬أما إذا‬
‫ظهرت حلقة صفراء فاالختبار سلبي‪.‬‬

‫يكون االختبار إيجابي مع‪ :‬اإلشريكية الكولونية‪ ،‬المتقلبات الرائعة‪.‬‬

‫يكون االختبار سلبي مع‪ :‬السالمونيال‪ ،‬الكليبسيال‪ ،‬المعوية‪.‬‬

‫‪ -3‬اختبار حمرة الميثيل ‪:‬‬

‫‪ -‬المبدأ ‪ :‬يعتمد على مبدأ انخفاض ‪ PH‬الوسط إلى ما دون ‪ 4.4‬تقريبا نتيجة تكون كمية كافية من‬
‫الحموض أثناء تخمر الغلوكوز ‪.‬‬
‫مكون من المرق‬
‫التعرف على حموضة الوسط ( ‪ ) PH‬بعد زرع الجرثوم في وسط ّ‬ ‫ّ‬ ‫‪ -‬االستخدام ‪:‬‬
‫المغذي المضاف له محلول موقي فوسفاتي بنسبة ‪ %0.4‬و الغلوكوز بنسبة ‪. %0.4‬‬
‫طريقة العمل ‪:‬‬
‫‪ -1‬نضبط ‪ PH‬األنبوب على قيمة ‪ 6.6‬و نعقم بالدرجة ‪ 131‬لمدة ‪ 30‬دقيقة ‪.‬‬
‫‪ -3‬نزرع الجرثوم و نحضن بدرجة ‪ 23‬مئوية بدرجة ‪ 23‬مئوية لمدة ‪ 34‬ساعة‪.‬‬
‫‪ -2‬نضيف قطرتين من مشعر حمرة الميثيل بعد نهاية مدة التحضين‪.‬‬
‫النتيجة‪ :‬تتجلّى إيجابية االختبار بظهور اللون األحمر الكرزي ( االختبار إيجابي مع كل اإلمعائيات‬
‫عدا الكليبسيال ) ‪.‬‬

‫‪54‬‬
 ‫السنة الثالثة‬ ‫د‪ .‬أحمد قجة‬ ‫م ( ‪)6‬‬ ‫علمي علم الجراثيم الطبي‬

‫الخميس ‪3032-11-32‬‬

‫نتائج اختبار حمرة الميتيل‬

‫‪ -2‬اختبارفوكس بروسكاور (‪:)Voges-Proskauer test‬‬

‫يمكن كشف الجراثيم التي تخمر الغلوكوز وتحوله إلى أسيتون‪ ،‬بإضافة هيدروكسيد البوتاسيوم وألفا نفثول‬
‫ليتشكل معقد زهري محمر ‪.‬‬
‫طريقة العمل ‪:‬‬
‫ازرع كمية من الجراثيم المعزولة في أنبوب حاوي على مرق ‪.VP broth‬‬ ‫‪-‬‬
‫احضن في الدرجة ‪ 24‬مئوية م لدة ‪ 34‬ساعة‪.‬‬ ‫‪-‬‬
‫نأخذ ‪1‬مل من المرق في أنبوب ثان ونضيف ‪ 0.6‬مل ألفا نفثول ثم ‪ 0.3‬مل هيدروكسيد‬ ‫‪-‬‬
‫البوتاسيوم‪.‬‬
‫خض األنبوب برفق وراقب تشكل معقد أحمر اللون قرب السطح خالل ‪ 14‬دقيقة‪ ،‬دليل على‬ ‫‪-‬‬
‫وجود االستون في الوسط‪.‬‬
‫النتيجة‪:‬‬
‫التفاعل إيجابي مع الكليبسيال ‪(.Klebsiella‬‬

‫‪55‬‬
 ‫السنة الثالثة‬ ‫د‪ .‬أحمد قجة‬ ‫م ( ‪)6‬‬ ‫علمي علم الجراثيم الطبي‬

‫الخميس ‪3032-11-32‬‬
‫سلبي مع الجراثيم التالية‪:‬‬
‫‪. Escherichia coli, Shigella, Salmonella, Proteus, Pseudomonas‬‬

‫الشكل يمثل مجمل المعادالت الجارية في اختبار فوكس بروسكاور‬

‫‪ -4‬اختبار سيمون سيترات ‪: Simmon Citrate Agar‬‬

‫االستخدام‪ :‬للتفريق بين أنواع الجراثيم سلبية الغرام التابعة لفصيلة اإلمعائيات على أساس استخدام السيترات‬
‫‪ ،‬فالجراثيم القادرة على استخدام فوسفات األمونيوم ثنائية الهيدروجين كمصدر لآلزوت و سترات الصوديوم‬
‫كمصدر للكربون هي القادرة فقط على النمو على هذا الوسط‪.‬‬
‫طريقة العمل‪:‬‬
‫‪ -1‬يتم زرع الجرثوم على السطح المائل للوسط فقط‪.‬‬
‫‪ -3‬تحضن لمدة ‪ 4‬أيام بدرجة حرارة ‪ 23‬مئوية‪.‬‬
‫النتيجة‪ :‬يكون االختبار إيجابيا عند تحول لون المشـــــــــــعــر (أزرق البروموثيمول) من لونه األخضر إلى‬
‫اللون األزرق‪.‬‬

‫‪56‬‬
 ‫السنة الثالثة‬ ‫د‪ .‬أحمد قجة‬ ‫م ( ‪)6‬‬ ‫علمي علم الجراثيم الطبي‬

‫الخميس ‪3032-11-32‬‬

‫يكون التفاعل إيجابي مع‪ :‬الكلبسيال‪ ،‬األمعائية‪ ،‬الليمونية‪ ،‬بروفيدنسيا‪ ،‬بروتيوس‪ ،‬السراتيا‪،‬‬
‫ضمة الكوليرا‪ ،‬الزائفة‪ ،‬السالمونيال المعوية وأعضاء من أجيال السالمونيال ‪ III ،II‬و ‪.IV‬‬
‫يكون التفاعل سلبي‪ :‬عندما ال يحدث نمو جرثومي على الوسط‪ ،‬و ذلك في حالة كون الجراثيم‬
‫اإلشريكية القولونية‪ ،‬الشيغال‪ ،‬يرسينيا‪ ،‬إدواردسيال‪.‬‬
‫ملخص نتائج اختبار ‪ IMViC‬مع بعض الجراثيم‪:‬‬

‫االختبارات الكيميائية األخرى‪:‬‬

‫اختبار اليورياز ‪:Urease Activity‬‬
‫االستخدام‪:‬‬
‫للتحري عن بعض أنواع البكتيريا التي تمتلك أنزيم اليورياز الذي يفكك الروابط األميدية في المركبات الحاوية‬
‫عليها مثل البولة إلى أمونيا و ‪ CO2‬و ماء ‪.‬‬
‫المكونات‪:‬‬
‫مشعر أحمر الفينول – الغلوكوز – محلول البولة – ببتون – فوسفات ثنائية البوتاسيوم – آغار ( يُزرع بشكل‬
‫مائل ) ‪.‬‬

‫‪57‬‬
 ‫السنة الثالثة‬ ‫د‪ .‬أحمد قجة‬ ‫م ( ‪)6‬‬ ‫علمي علم الجراثيم الطبي‬

‫الخميس ‪3032-11-32‬‬

‫طريقة العمل‪:‬‬
‫نزرع الجراثيم بكثافة على السطح المائل و نحضن بدرجة ‪ 23‬مئوية لمدة ‪ 4‬ساعات ( قد ال تظهر اإليجابية‬
‫إال بعد مرور ‪ 4‬أيام ) ‪.‬‬
‫النتيجة‪ :‬تكون اإليجابية بتحول الوسط من اللون األصفر إلى اللون الزهري الغامق أي تحول الوسط إلى‬
‫الحالة الــــــقلويــــة‪.‬‬

‫اختبار األوكسيداز ‪:Oxidase Test‬‬

‫االستخدام‪:‬‬
‫للجراثيم سلبية الغرام للتحري عن امتالكها أنزيم سيتوكروم أكسيداز ‪ ،‬الذي يحول كاشف األكسيداز عديم‬
‫اللون إلى مركب أرجواني غامق ‪.‬‬
‫طريقة العمل‪:‬‬
‫تُبلَّل ورقة االختبار الخا ّ‬
‫صة بكاشف أوكسيداز ثم ننشر عليها المستعمرة الجرثومية سلبية الغرام‬
‫بواسطة عود خشبي‪.‬‬

‫‪58‬‬
 ‫السنة الثالثة‬ ‫د‪ .‬أحمد قجة‬ ‫م ( ‪)6‬‬ ‫علمي علم الجراثيم الطبي‬

‫الخميس ‪3032-11-32‬‬
‫النتيجة‪ :‬االختبار إيجابي إذا أعطت المستعمرة لون أرجواني غامق على الورق خالل بضع ثواني (زوائف)‪.‬‬
‫االختبار سلبي إذا لم يتغير اللون أو حدث تغير لوني بطيء جدا (خالل دقائق)‪.‬‬

‫اختبار الكاتاالز‪:‬‬
‫االستخدام‪:‬‬
‫يتحرى هذا االختبار على امتالك المكورات اإليجابية الغرام ألنزيم الكاتاالز الذي يفكك الماء األكسجيني و‬
‫يحرر األوكسجين‪.‬‬
‫طريقة العمل‪:‬‬
‫نأخذ جزءا صغيرا من المستعمرة الجرثومية الموجودة في الطبق بواسطة ‪ Loop‬عقيم مبرد‪ ،‬و‬ ‫‪-1‬‬
‫نفرشها على ساترة زجاجية‪.‬‬
‫نضع قطرة من الماء األوكسجيني على شريحة زجاجية‪.‬‬ ‫‪-3‬‬
‫نالحظ التشكل السريع للفقاعات التي تمثل تحرر األوكسجسن من الماء األوكسجيني‪.‬‬ ‫‪-2‬‬
‫تخلص من المواد في المكان المخصص لها بعد االنتهاء من االختبار (ألن الجراثيم يمكن أن تبقى‬ ‫‪-4‬‬
‫حية)‪.‬‬
‫النتيجة‪ :‬االختبار إيجابي إذا تم إنتاج سريع للفقاعات تحت الساترة (المكورات العنقودية) ‪ ،‬و في حال عدم‬
‫تشكل الفقاعات أو كان تش ُّكلها بطيئا فاالختبار سلبي‪.‬‬

‫‪59‬‬
 ‫السنة الثالثة‬ ‫د‪ .‬أحمد قجة‬ ‫م ( ‪)6‬‬ ‫علمي علم الجراثيم الطبي‬

‫الخميس ‪3032-11-32‬‬
‫اختبار المخثراز‪:‬‬
‫االستخدام‪:‬‬
‫يُستخدم مع المكورات إيجابية الكاتاالز لتمييز المكورات العنقودية المذهبة التي هي إيجابية المخثراز عن‬
‫بقية األنواع التي تكون سلبية له ‪.‬‬
‫ّ‬
‫إن هذا األنزيم ( المخثراز ) يحول الفيبرونوجين الموجود في البالزما إلى خيوط الفيبرين التي ترتبط بخاليا‬
‫العنقوديات مسبّبة ظاهرة التالزن أو التجلط ‪. clump‬‬
‫كـــــــــــــــان هـــذا االخــــتبار يــُــــــجرى باستخدام البالزما البشرية على الشريحة ( اختبار الشريحة ) أو‬
‫في األنبوب ( اختبار األنبوب ) و لكن حاليا يُجرى هذا االختبار باستخدام جزيئات الالتكس المغلّفة‬
‫بالفيبرينوجين‪.‬‬
‫طريقة العمل‪:‬‬
‫مبرد‪.‬‬
‫نأخذ جزء من المستعمرة المدروسة بواسطة ‪ Loop‬عقيم ّ‬ ‫‪-1‬‬
‫ننشر المستعمرة على شريحة االختبار بشكل دائري‪.‬‬ ‫‪-3‬‬
‫نضيف قطرة واحدة من كاشف الالتكس الممزوج جيدا‪.‬‬ ‫‪-2‬‬
‫نحرك جيّدا بعود خشبي و نهز الشريحة لمدة ‪ 30‬ثانية‪.‬‬
‫ّ‬ ‫‪-4‬‬
‫النتيجة‪:‬‬
‫يكون االختبار إيجابيا إذا حدث تالزن ( تجلط ) على الشريحة ‪ ،‬و سلبيّا إذا بقي السائل أزرق ناعم دون‬
‫تجلّط ‪.‬‬

‫‪60‬‬
 ‫السنة الثالثة‬ ‫د‪ .‬أحمد قجة‬ ‫م ( ‪)6‬‬ ‫علمي علم الجراثيم الطبي‬

‫الخميس ‪3032-11-32‬‬

‫نظام التنميط األلي للكشف عن الجراثيم‪:‬‬

‫هناك عدة أنظمة تم تطويرها و منها نظام ‪ API‬الذي سنعطي لمحة عنه‪:‬‬
‫اختبار ‪ API‬عبارة عن مجموعة مصغرة وموحد لالختبارات البيوكيميائية‪ ،‬ويمكن استخدامه مع قواعد بيانات‬
‫تعريف كاملة‪ ،‬وأشهرها هو ‪ 30( api 20E‬حجرة لبكتيريا المعوية ‪.)Enterobacteriaceae‬‬
‫في ‪ ، API 20E‬يحتوي الشريط البالستيكي على ‪ 30‬غرفة اختبار صغيرة (آبار) تحتوي على وسائط مجففة‬
‫بتركيبات محددة كيميائيا لكل اختبار‪ .‬عادة ما يكتشفون النشاط األنزيمي‪ ،‬المرتبط بشكل أساسي بتخمير‬
‫الكربوهيدرات أو تقويض البروتينات أو األحماض األمينية بواسطة الكائنات الحية الملقحة‪.‬‬

‫االختبارات المختلفة في ‪ (: API 20E‬لالطالع)‬

‫‪ -1‬اختبار ‪ :ONPG‬يستخدم اختبار ‪ ONPG‬للكشف عن إنزيم ‪β-galactosidase‬‬
‫‪ :ADH -3‬نزع الكربوكسيل من حمض األرجينين األميني بواسطة األرجينين ثنائي هيدروالز‬
‫‪ :LDC -2‬نزع الكربوكسيل من الحمض األميني ليسين بواسطة ليسين ديكاربوكسيالز‬
‫‪ :ODC -4‬نزع الكربوكسيل من الحمض األميني األورنيثين بواسطة أورنيثين ديكاربوكسيالز‬
‫‪ :CIT -4‬استخدام السترات كمصدر وحيد للكربون‬
‫‪ :H2S -6‬إنتاج كبريتيد الهيدروجين‬
‫‪ -3‬اليوريا‪ :‬اختبار انزيم اليوريا‬
‫‪( TDA -4‬التربتوفان ديميناز)‪ :‬الكشف عن إنزيم التربتوفان ديميناز (يتم الكشف عنه بإضافة كلوريد‬
‫الحديديك)‪.‬‬
‫‪ :IND -6‬اختبار إندول‪ :‬إنتاج اإلندول من التربتوفان بواسطة إنزيم التربتوفاناز (يتم الكشف عن اإلندول‬
‫بإضافة كاشف كوفاك)‪.‬‬

‫‪61‬‬
 ‫السنة الثالثة‬ ‫د‪ .‬أحمد قجة‬ ‫م ( ‪)6‬‬ ‫علمي علم الجراثيم الطبي‬

‫الخميس ‪3032-11-32‬‬
‫‪ :VP -10‬اختبار ‪ Voges-Proskauer‬للكشف عن األسيتوين (أسيتيل ميثيل كاربينول) الناتج عن تخمير‬
‫الجلوكوز بواسطة البكتيريا باستخدام مسار البوتيلين جاليكول‬
‫‪ -11‬جل‪ :‬اختبار إنتاج إنزيم الجيالتيناز الذي يسيل الجيالتين‬
‫‪ :GLU -13‬تخمير الجلوكوز (سكر سداسي)‬
‫‪ -12‬اإلنسان‪ :‬تخمير المانوز (سكر الهكسوز)‬
‫‪ :INO -14‬تخمير اإلينوزيتول (كحول دوري)‬
‫‪ -14‬اسأل‪ :‬تخمير السوربيتول (كحول السكر)‬
‫‪ :RHA -16‬تخمير الرامنوز (ميثيل بنتوز سكر)‬
‫‪ :SAC -13‬تخمير السكروز (ديساكهاريد)‬
‫‪ :MEL -14‬تخمير الميلبيوز (السكاريد)‬
‫‪ -16‬إيمي‪ :‬تخمير األميجدالين (جليكوسيد)‬
‫‪ ARA -30‬تخمير أرابينوز (سكر بنتوز)‬
‫يتم استخدام معلق بكتيري لترطيب كل من اآلبار وحضانة الشرائط‪ .‬أثناء الحضانة‪ ،‬ينتج عن التمثيل الغذائي‬
‫البكتيري تغيرات في اللون تكون إما عفوية أو يتم الكشف عنها عن طريق إضافة الكواشف‪.‬‬
‫تحضير ‪:API‬‬
‫خذ مستعمرة واحدة معزولة (من مزرعة نقية) وقم بعمل معلق بكتيري في ماء مقطر معقم (‪5.0‬‬ ‫‪-1‬‬
‫مكفارالند)‪.‬‬
‫اجمع بين قاع وغطاء صندوق حضانة ووزع الماء في الخاليا لتكوين جو رطب‪ .‬ثم ضع المعرض في‬ ‫‪-2‬‬
‫صندوق الحضانة تحت ظروف معقمة‬
‫خذ ماصة ‪ Pasteur‬وامأل المكان المخصص بالمعلق البكتيري‪.‬‬ ‫‪-3‬‬
‫قم بتمييز الدرج برقم التعريف (معرف المريض) والتاريخ واألحرف األولى من اسمك‪.‬‬ ‫‪-4‬‬
‫احضن الصينية عند ‪ 23‬درجة مئوية لمدة ‪ 34-14‬ساعة‪.‬‬ ‫‪-4‬‬
‫بعد الحضانة تضاف الكواشف و تكون النتيجة‪:‬‬ ‫‪-6‬‬

‫انتهت المحاضرة العملية السادسة‪.‬‬

‫‪62‬‬