Machine Translated by Google

THỊT
KHOA HỌC
Khoa học về Thịt 74 (2006) 676–
680
www.elsevier.com/locate/meatci

Phương pháp sắc ký để sàng lọc và phát hiện khẳng định

dexamethasone

Milagro Reig, Leticia Mora, Jose' L. Navarro, Fidel Toldra' *

Viện Hóa học Nông nghiệp và Công nghệ Thực phẩm, (CSIC), PO Box 73, Burjassot 46100, Valencia, Tây Ban Nha

Nhận ngày 27 tháng 1 năm 2006; nhận theo mẫu sửa đổi ngày 16 tháng 5 năm 2006; được chấp nhận ngày 20 tháng 5 năm 2006

trừu tượng

Corticosteroid, chẳng hạn như dexamethasone, đã được sử dụng bất hợp pháp làm tác nhân thúc đẩy tăng trưởng để thu được lợi ích kinh tế từ việc tăng cường

phát triển cơ bắp. Những chất này vẫn tồn tại trong thịt và các sản phẩm động vật khác và có thể gây ra hậu quả độc hại tiêu cực cho người tiêu dùng. Một

phương pháp sàng lọc và xác nhận để phát hiện dexamethasone trong thức ăn và nước uống ở vật nuôi đã được phát triển và xác nhận. Phương pháp này dựa trên sắc

ký ái lực miễn dịch, sau đó là sắc ký lỏng hiệu năng cao pha đảo (IAC–
HPLC) với phát hiện dãy điốt (DAD) ở bước sóng 242 nm. Flumethasone được sử dụng làm chất

chuẩn nội.
Phương pháp này đã được xác nhận theo quy định 2002/657/EC của Liên minh Châu Âu đối với các chất bị cấm và do đó đã xác định được độ đặc hiệu, giới hạn

quyết định, khả năng phát hiện, độ thu hồi và độ lặp lại. Giới hạn quyết định (CCa) là 26 ng/mL đối với nước và 190 ng/g đối với thức ăn trong khi khả năng

phát hiện (CCb) là 30 ng/mL đối với nước và 217 ng/g đối với thức ăn. Phương pháp này cho thấy độ chính xác và độ chính xác tốt. Độ ổn định của dexamethasone
khi bảo quản đông lạnh đã được nghiên cứu trong khoảng thời gian 3,5 tháng. Không có tổn thất nào được quan sát, do đó xác nhận rằng các mẫu nước do thanh tra

viên lấy có thể được bảo quản đông lạnh trong vài tuần cho đến khi phân tích. Phương pháp này đã được chứng minh là tương đối đơn giản và hữu ích để sàng lọc

và xác nhận nhanh chóng sự hiện diện của dexamethasone trong nước và thức ăn dùng cho động vật lấy thịt.

2006 Elsevier Ltd. Mọi quyền được bảo lưu.

Từ khóa: Thuốc thú y; Phát hiện dư lượng; Dexamethason; Corticosteroid; Phát hiện HPLC; Thực phẩm có nguồn gốc động vật

1. Giới thiệu
Corticosteroid, chẳng hạn như dexamethasone, có nhiều
vai trò sinh lý. Dexamethasone (9-a-fluoro-16-a-meth-
ylprednisolone) là một glucocorticoid tổng hợp được cấp
phép để sử dụng điều trị trong thú y nhưng việc sử dụng nó
như một chất thúc đẩy tăng trưởng bị cấm ở Liên minh Châu
Âu. Glucocorticosteroid nồng độ thấp được biết là làm tăng
tăng trọng, cải thiện chuyển hóa thức ăn và có tác dụng
hiệp đồng với các phân tử khác như chất chủ vận b hoặc
steroid đồng hóa ( Croubels, Daeselaire, De Baere, De
Backer, & Courtheyn, 2004). Do những tác dụng này,
dexamethasone đã được sử dụng bất hợp pháp để thu được lợi
ích kinh tế thông qua việc tăng cường phát triển cơ bắp. Cortico-
*
Đồng tác giả. ĐT.: +34 96 3900022x2112; fax: +34 96 3636301.
Địa chỉ email: ftoldra@iata.csic.es (F. Toldra').
steroid có hoạt tính qua đường uống nên có thể được cung
cấp qua thức ăn hoặc nước uống mà không để lại dấu vết
tiêm qua da (Van Peteghem & Daeselaire, 2004).
Một số phương pháp phát hiện, xác định và xác nhận
dexamethasone trong các nền mẫu sinh học khác nhau như thức
ăn, nước tiểu, phân, gan hoặc sữa đã được báo cáo trước đây
(Cherlet, De Baere, & De Backer, 2004; Creaser, Feely,
Houghton, & Seymour, 1998; Dela-haut và cộng sự, 1997;
Draisci, Marchiafava, Palleschi, Camma-rata, & Cavalli,
2001; Stolker, Schwillens, Van Ginkel, & Brinkman, 2000).
Cần có các phương pháp phát hiện nhanh chóng (Toldra' &
Reig, 2006). Gần đây, việc thực hiện các phương pháp và
tiêu chí giải thích kết quả thử nghiệm của các phòng thí
nghiệm kiểm soát chính thức trong Liên minh Châu Âu đã
được quy định trong Quyết định 2002/657/EC (EC, 2002).
Trong bài báo này, một phương pháp sàng lọc và xác nhận
đơn giản và nhanh chóng để phát hiện dexamethasone trong

0309-1740/$ - xem mặt trước 2006 Elsevier Ltd. Mọi quyền được bảo lưu.
doi:10.1016/j.meatci.2006.05.018
Machine Translated by Google
M. Reig và cộng sự. / Khoa học về Thịt 74 (2006) 676–
thức ăn chăn nuôi và nước uống được sử dụng trong các trang
trại dành cho động vật lấy thịt đã được xác nhận theo tiêu chuẩn này dòng nitơ và phần cặn được hòa lại trong 200 lL
Phán quyết. Phương pháp này dựa trên phương pháp sắc ký ái lực
miễn dịch, sau đó là phương pháp sắc ký hiệu năng cao pha đảo.
sắc ký lỏng (IAC-HPLC).
2. Vật liệu và phương pháp
2.1. Vật liệu và thuốc thử
Các thuốc thử hóa học và sắc ký được sử dụng là
thuộc loại HPLC. Acetonitrile, ethanol, tert-butyl methyl-eter
(TBME) và metanol được mua từ Scharlau
(Barcelona, Tây Ban Nha). Corticosteroid tổng hợp dexa-methasone
và flumethasone được lấy từ Sigma–
Aldrich Chemie. Hộp mực SPE Amino propyl (NH2) được
mua từ Waters (Etten-Leur, Hà Lan). Cột chiết sắc ký không có
ái lực chứa
gel có kháng thể cố định, đặc hiệu cho
dexamethasone, flumethasone và betamethasone là
được mua từ Phòng thí nghiệm Randox (Ardmore, Vương quốc Anh).
Dung dịch gốc chứa 100 lg/mL dexamethasone
và 100 lg/mL flumethasone, được điều chế trong metha-nol và bảo
quản ở 20 C. Dung dịch làm việc (10 lg/mL)
được điều chế bằng cách pha loãng dung dịch gốc 10 lần.
2.2. Thiết bị và điều kiện HPLC-DAD
Sắc ký được thực hiện trên máy HPLC Agilent
Dòng 1100 được trang bị bộ lấy mẫu tự động và mảng diode.
Việc phân tách sắc ký được thực hiện ở
30 phút với các điều kiện đẳng cấp trên Sinergy MAX-RP
Cột phân tích 80A (150 · 4,60 mm, 4 lm) (Phenome-nex, Torrance,
CA, USA). Pha di động đẳng cấp
được bơm với tốc độ dòng 1 mL/phút. Máy dò đã được đặt
ở bước sóng 242nm.
2.3. Mẫu và củng cố
Các mẫu thức ăn được bổ sung dexamethasone ở mức từ 100 đến
600 ng/g. Các mẫu nước được
được bảo quản đông lạnh cho đến khi phân tích, được tăng cường ở
nồng độ từ 15 đến 150 ng/mL. Với mỗi mẫu,
flumethasone chuẩn nội đã được thêm vào dưới dạng
300 ng/g thức ăn hoặc 125 ng/mL nước được Draisci sử dụng
et al. (2001).
2.4. Thủ tục
Thức ăn được đồng nhất và cân 2 g. Sau khi chuẩn hóa, cân
bằng và bổ sung chất chuẩn nội (flumethasone), mẫu được chiết
bằng
10 mL TBME, lắc trong 20 phút và ly tâm trong
10 phút ở mức 1000g. Pha TBME rõ ràng đã được thu thập
và việc chiết xuất được lặp lại. Những chất chiết xuất này, đã
áp dụng cho cột chiết pha rắn (NH2) (SPE)
và rửa giải bằng 4 mL nước-metanol (80:20, v/v).
680 677
Dịch rửa giải được làm bay hơi đến khô ở 45 C trong điều kiện
metanol và 4,5 ml nước. Chất rửa giải được treo lại
được áp dụng cho cột ái lực miễn dịch SPE và quy trình thực
hiện được thực hiện theo mô tả của nhà sản xuất.
Dung dịch rửa giải được làm bay hơi đến khô, được hòa lại trong
200 lL axetonitril-nước (30:70, v/v) và
sau đó bơm vào hệ thống HPLC-DAD.
Trong trường hợp là nước, lấy 5 mL và lượng bên trong
tiêu chuẩn (flumethasone) cũng được thêm vào trước khi áp dụng
vào cột ái lực miễn dịch SPE.
2.5. Nghiên cứu độ ổn định
Các phần dung dịch đậm đặc dexamethasone khác nhau (10 lg/
mL) đã được chuẩn bị. Một trong số đó đã được phân tích
ngay lập tức và các mẫu còn lại được giữ trong điều kiện
bảo quản đông lạnh (20 C) và phân tích ba lần sau 1,
2, 3, 4, 9 và 13 tuần. Tương tự, ma trận nước
được tăng cường bằng dexamethasone theo quyết định (CCa)
mức độ và phân tích ba lần sau 1, 2, 4 và 6 tuần
của kho đông lạnh.
2.6. Phân tích và xác nhận
Việc phân tích thức ăn và nước uống được thực hiện theo các
hướng dẫn được xác định trong quyết định 2002/657/EC (EC,
2002). Bằng cách này, giới hạn quyết định (CCa) cần phải được
tính toán vì nó cho lượng chất phân tích tối thiểu
có trong mẫu cho phép chúng tôi kết luận rằng
mẫu không tuân thủ, với mức xác suất 99%.
Giới hạn quyết định (CCa) được thiết lập bằng cách phân tích 22
nguyên liệu thô cho nước và 22 nguyên liệu trống cho thức ăn chăn nuôi
và tính toán tỷ số tín hiệu trên tạp âm tương ứng tại
cửa sổ thời gian mà chất phân tích được mong đợi. Cho mỗi
nền, thức ăn hoặc nước, giới hạn quyết định CCa được đặt là 3
lần tỷ số tín hiệu trên tạp âm.
Sự phục hồi được xác định trong hai bộ 18 kiên cố
mẫu trắng, một bộ dùng cho nước và một bộ dùng cho thức ăn. Mẫu
được tăng cường chất phân tích để đạt được nồng độ
tương đương với 1, 1,5 và 2 lần CCa. Ở mỗi cấp độ
phân tích được thực hiện với sáu lần lặp lại. Hàm lượng đo
được, % thu hồi (thể hiện bằng 100 · đo được
hàm lượng/mức độ củng cố), độ lệch chuẩn và hệ số biến thiên
được xác định trong từng trường hợp. Khả năng lặp lại và độ tái
lập trong phòng thí nghiệm là
tính toán bằng cách phân tích 18 mẫu nước và 18 mẫu
thức ăn được tăng cường chất phân tích để đạt được nồng độ
tương đương với 1, 1,5 và 2 lần CCa. Ở mỗi cấp độ
phân tích được thực hiện với sáu lần lặp lại. Các
khả năng tái lập trong phòng thí nghiệm được thực hiện bởi
những người thực hiện, ngày và lô hóa chất khác nhau. Nghĩa
nồng độ, độ lệch chuẩn và hệ số biến thiên được xác định trong
từng trường hợp.
Khả năng phát hiện (CCb) được lấy bằng giá trị của
giới hạn quyết định cộng với 1,64 lần độ lệch chuẩn của
khả năng tái tạo trong phòng thí nghiệm của kết quả đo được
Machine Translated by Google

678 M. Reig và cộng sự. / Khoa học về Thịt 74 (2006) 676–680

Bảng 1

Độ thu hồi, độ lặp lại và độ tái lập trong phòng thí nghiệm để phân tích dexamethasone

Cấp độ (ppb)a Phục hồi Độ lặp lại Khả năng tái tạo trong phòng thí nghiệm Độ tái lập được tính toánb

% SD CV (%) Kết quả trung bình SD CV (%) Kết quả trung bình (ppb)a SD CV (%) CV (%)
(ppb)a

Nước 26 105,10 1,73 6,33 27:90 2,05 7,35 26,96 1,69 6,27 27,7
39 98,50 1,08 2,80 44,94 0,73 1,62 39,61 2,89 7,30 26.1
52 94,50 1,09 2,22 59,25 2,86 4,83 54,65 4,24 7,76 25,0

Thức ăn 190 108,9 15.3 7.4 205,06 14.45 7.05 196,15 17:35 8:85 20,5
285 118,2 7.2 2.1 302,81 10,59 3,50 314,14 18,97 6,04 19.3
380 108,7 16,8 4.1 415,35 14,26 3,43 430,91 34,66 8,04 18,5

Một

ppb: ng/mL đối với mẫu nước và ng/g đối với mẫu thức ăn.
b
Độ tái lập được tính toán theo phương trình Horwitz làm tham chiếu cho độ chính xác của phương pháp.

lều. Khả năng phát hiện (CCb) mang lại mức tối thiểu methylprednisolone) thuộc nhóm thuốc thường xuyên
lượng chất phân tích có trong mẫu có thể quản lý trong chăn nuôi (Van den Hauwe,
được phát hiện, xác định hoặc định lượng với mức xác suất 95%. Schneider, Sahin, Van Peteghem, & Naegeli, 2003). Các
Độ chính xác được kiểm tra bằng cách tính hệ số biến thiên tái Hãy nêu công thức cấu tạo của ba chất này

lập (CV) ở mức tương ứng trong hình 1.

phân tích các phần khối lượng bằng phương trình Horwitz, Việc phân tích dexamethasone trong một nền phức tạp như
CV = 2(1 0,5log C) trong đó C là phần khối lượng được biểu thị thức ăn yêu cầu phải làm sạch đầy đủ các chất chiết xuất từ thức ăn. Vì thế,

là lũy thừa của 10 (xem các giá trị được tính ở cột cuối cùng của
Bảng 1). Sau đó, độ chính xác có thể chấp nhận được đạt được khi
CV độ tái lập trong phòng thí nghiệm thấp hơn CV độ tái lập
được tính toán.
3. Kết quả và thảo luận
Glucocorticoid tổng hợp dexamethasone (9a-fluoro-16a-
methylprednisolone), betamethasone (9a-fluoro-16a-
methylprednisolone) và flumethasone (9a-difluoro-16a-
Phương pháp phân tích đã được khảo nghiệm bao gồm ba bước:
Chiết lỏng-lỏng, làm sạch mẫu bằng chất rắn
hộp chiết pha và sắc ký ái lực miễn dịch sau đó phân tích HPLC.
Bước đầu tiên, bao gồm quá trình chiết lỏng-lỏng, được thực
hiện bằng cách sử dụng
tert-butyl metyl ete (TBME). Dung môi này cho hiệu quả tốt
thu hồi và đủ về độ hấp thụ nền trong quá trình phát hiện sau
khi tách bằng sắc ký
theo báo cáo của các tác giả khác (Stolker và cộng sự, 2000).
Bước thứ hai bao gồm pha rắn amino propyl (NH2)

Hình 1. Cấu trúc hóa học của dexamethasone, betamethasone và flumethasone.

Machine Translated by Google

M. Reig và cộng sự. / Khoa học về Thịt 74 (2006) 676–

680 679

MỘT là nền sạch, chỉ yêu cầu ái lực miễn dịch

20
bước sắc ký (IAC) (Hình 2).
Độ ổn định của dung dịch dexamethasone được duy trì ở mức
10 bảo quản đông lạnh rất tốt. Dung dịch gốc (10 lg/mL)
duy trì nồng độ dexamethasone trong suốt 3,5
nμ
/cg) om
L c
(

tháng. Tương tự, nước tăng cường dexametha-sone ở mức CCa

0
0 2 4 6 số 8 10 12 14 cũng cho thấy độ ổn định tốt, chứng tỏ rằng các mẫu nước
tuần do thanh tra viên lấy có thể được lưu giữ.
đông lạnh trong vài tuần mà không ảnh hưởng đến nội dung của nó.
B
Phân tích cho thấy tính đặc hiệu rất tốt, có thể
40
để phân biệt rất tốt giữa chất phân tích (dexametha-sone)
30 và các chất có liên quan chặt chẽ như betamethasone
20 và flumethasone (tiêu chuẩn nội bộ). Sắc ký đồ
thể hiện sự tách biệt của ba chất này
10
g)
/ nL
g ồm
ộ
n n
đ
(

trong Hình 3. Tiêu chí hiệu suất cho sắc ký lỏng có phát
0
hiện DAD, như đã được cố định trong quyết định của EC (EC,
0 1 2 3 4 5 6 7
2002), đã được hoàn thành. Thời gian lưu của chất phân
tuần tích gấp đôi thời gian lưu tương ứng với
thể tích rỗng của cột. Tỷ lệ giữ lại
Hình 2. Độ ổn định của dexamethasone: (A) dexamethasone đậm đặc
dung dịch (10 lg/mL) bảo quản đông lạnh; (B) dexamethasone trong thời gian của chất phân tích trong nền so với thời gian của chất
ma trận nước được củng cố ở cấp độ CCa. chuẩn nội giống như thời gian của chất chuẩn hiệu chuẩn (tinh khiết
dexamethasone) trong phạm vi ±2,5%. Phát hiện bằng diode
chiết xuất và bước thứ ba là tiêm qua một mảng này là cần thiết cho mục đích xác nhận bằng cách so
cột sắc ký ái lực miễn dịch, là một cột rất sánh phổ của chất phân tích tại thời điểm rửa giải
kỹ thuật hữu ích để làm sạch mẫu và cô đặc chất phân tích dexamethasone với phổ của dexamethasone tinh khiết.
(Van Peteghem, Daeselaire, & Heeemans, 2001). Độ hấp thụ cực đại trong phổ của chất phân tích trong
Chất phân tích được tinh chế một phần sẽ giảm thiểu sự can thiệp ma trận có cùng bước sóng với dexa-methasone nguyên chất
hợp chất, tăng tỷ lệ tín hiệu trên tạp âm và trong phạm vi 2 nm.
tăng cường tính đặc hiệu (Antignac, Le Bizec, Monteau, Sau khi phân tích, giới hạn quyết định (CCa) được
Poulain, & Andre, 2001). Phân tích nước uống, được thiết lập là 26 ng/mL đối với nước và 190 ng/g đối với thức ăn.

DAD1 A, Sig=242,8 Tham chiếu=500,80 (B2F-DEXA\6-04-05\004-0101.D)

MXD
MTB

Tôi

1.2
ÀL

0,8

0,6

0,4

0,2

-0,2

-0,4

0 2 4 6 số 8 10 12 14 16 18 phút

Hình 3. Sắc ký đồ của dexamethasone và các chất liên quan chặt chẽ. Thời gian lưu 10,14, 10,78 và 11,60 phút tương ứng với betamethasone
(BTM), dexamethasone (DXM) và flumethasone (IS), tương ứng.
Machine Translated by Google
680 M. Reig và cộng sự. / Khoa học về Thịt 74 (2006) 676–
Khả năng phát hiện (CCb) được tìm thấy là 30 ng/mL đối với nước
và 217 ng/g đối với thức ăn. Các nghiên cứu về độ thu hồi và
độ lặp lại được thực hiện với các mẫu nền được tăng cường ở
mức 1, 1,5 và 2 lần CCa. Vì vậy, các mẫu nước được tăng cường
ở mức 26, 39 và 52 ng/mL và các mẫu thức ăn được tăng cường ở
mức 190, 285 và 380 ng/g (xem Bảng 1). Tỷ lệ phục hồi cao hơn
nhiều so với báo cáo đối với cơ và gan (Mallinson, Dreas,
Wilson, & Henry, 1995) nhưng nằm trong khoảng từ 10% đến +10%
do đó cho thấy độ chính xác của phép đo. Chỉ có mẫu thức ăn ở
mức 285 ng/g là nằm ngoài phạm vi đó. Khả năng tái tạo trong
phòng thí nghiệm cũng được thực hiện bởi những người vận hành,
ngày và lô hóa chất khác nhau sử dụng cùng mức độ tăng cường.
Kết quả nồng độ trung bình, độ lệch chuẩn và hệ số biến thiên
được xác định trong mọi trường hợp và được trình bày trong
Bảng 1. Các mẫu thức ăn cho khả năng lặp lại và khả năng tái
sản xuất trong phòng thí nghiệm kém hơn so với nước ở các mức
đã được khảo nghiệm, điều này hợp lý vì thức ăn có nhiều ưu
điểm hơn. ma trận phức tạp. Tuy nhiên, độ chính xác của phương
pháp này tốt đối với cả nền mẫu, nước và thức ăn, ở tất cả các
cấp độ đã được thử nghiệm vì CV độ tái lập thử nghiệm trong
phòng thí nghiệm thu được nhỏ hơn một nửa, CV độ tái lập được
tính toán tương ứng như có thể được quan sát trong Bảng 1 .
4.Kết luận
Phương pháp phân tích dexamethasone trong nước uống và thức
ăn gia súc dựa trên sắc ký ái lực miễn dịch (IAC), sau đó là
sắc ký lỏng hiệu suất cao pha đảo (RP–
HPLC) đã được xác nhận
bằng cách sử dụng nước/thức ăn được tăng cường ở mức độ cao hơn
đến 150 ng/mL đối với nước và 380 ng/g đối với thức ăn. Độ thu
hồi chính là 99,4 ± 1,3%. Phương pháp này tỏ ra có độ chính
xác và độ đúng tốt. Giới hạn quyết định (CCa) là 26 ng/mL đối
với nước và 190 ng/g đối với thức ăn trong khi khả năng phát
hiện (CCb) là 30 ng/mL đối với nước và 217 ng/g đối với thức
ăn. Độ đặc hiệu, độ nhạy và độ lặp lại cũng đã được xác nhận
bằng giao thức này. Phương pháp này đã được chứng minh là tương
đối đơn giản và hữu ích để sàng lọc và xác nhận nhanh chóng sự
hiện diện của dexamethasone trong nước và thức ăn cho động vật
lấy thịt.
Nhìn nhận
Tài trợ từ Bộ Nông nghiệp, Thủy sản và Thực phẩm
tacio'n (Generalitat Valenciana, Tây Ban Nha) được thừa nhận.
680
Người giới thiệu
Antignac, J.-P., Le Bizec, B., Monteau, F., Poulain, F., & Andre, F.
(2001). Quy trình tinh chế – chiết xuất đa dư lượng đối với corticoste-
roid trong các đơn vị sinh học để kiểm soát hiệu quả việc lạm dụng chúng
trong chăn nuôi. Tạp chí sắc ký B, 757, 11–19.
Cherlet, M., De Baere, S., & De Backer, P. (2004). Xác định định lượng
dexamethasone trong sữa bò bằng phương pháp sắc ký lỏng áp suất khí quyển-
ion hóa hóa học-khối lượng song song. Tạp chí sắc ký B, 805, 57–
65.
Creaser, CS, Feely, SJ, Houghton, E., & Seymour, M. (1998).
Sắc ký ái lực miễn dịch kết hợp trực tuyến với sắc ký lỏng hiệu suất cao
khối phổ để xác định corticosteroid. Tạp chí sắc ký A, 794, 37–43.
Croubels, S., Daeselaire, E., De Baere, S., De Backer, P., & Courtheyn, D.
(2004). Thức ăn và dư lượng thuốc. Trong W. Jensen, C. Devine, & M.
Dikemann (Eds.), Bách khoa toàn thư về khoa học thịt (trang 1172–
1187).
Luân Đôn, Vương quốc Anh: Elsevier.
Delahaut, Ph., Jacquemin, P., Colemonts, Y., Dubois, M., De Graeve, J., &
Deluyker, H. (1997). Định lượng một số corticosteroid tổng hợp bằng sắc ký
khí khối phổ sau khi tinh chế bằng sắc ký ái lực miễn dịch. Tạp chí Chroma-
tography B, 696, 203–215.
Draisci, R., Marchiafava, C., Palleschi, L., Cammarata, P., & Cavalli, S.
(2001). Chiết nhanh dung môi và định lượng bằng phương pháp sắc ký lỏng-
khối phổ song song của dư lượng corticosteroid trong gan bò. Tạp chí sắc ký
B, 753, 217–223.
EC. (2002). Quyết định của Ủy ban thực hiện Chỉ thị của Hội đồng 96/23/EC liên
quan đến việc thực hiện các phương pháp phân tích và diễn giải kết quả. Tạp
chí Chính thức của Cộng đồng Châu Âu, 17/8/2002.
Mallinson, ET, Dreas, JS, Wilson, RT, & Henry, AC (1995).
Xác định dexamethasone trong gan và cơ bằng sắc ký lỏng và sắc ký khí/khối
phổ. Tạp chí Hóa học Nông nghiệp và Thực phẩm, 43, 140–145.
Stolker, AAM, Schwillens, PLWJ, Van Ginkel, LA, & Brinkman, UA Th. (2000). So
sánh các phương pháp sắc ký lỏng khác nhau để xác định corticosteroid trong
nền sinh học. Tạp chí sắc ký A, 893, 55–67.
Toldra', F., & Reig, M. (2006). Các phương pháp phát hiện nhanh dư lượng hóa
chất, thuốc thú y trong thực phẩm chăn nuôi. Xu hướng Khoa học và Công nghệ
Thực phẩm, 17, 482–489.
Van den Hauwe, O., Schneider, M., Sahin, A., Van Peteghem, C., & Naegeli, H.
(2003). Sàng lọc miễn dịch hóa học và xác nhận bằng phương pháp quang phổ
khối sắc ký-đồ họa-song song chất lỏng về dư lượng thuốc trong các mô ăn
được của bê được tiêm liều điều trị glucocorticoids tổng hợp dexamethasone
và flumethasone. Tạp chí Hóa học Nông nghiệp và Thực phẩm, 51, 326–
330.
Van Peteghem, C., & Daeselaire, E. (2004). Dư lượng chất kích thích tăng trưởng.
Trong LML Nollet (Ed.), Sổ tay phân tích thực phẩm (tái bản lần 2) (trang
1037–
1063). New York: Công ty Marcel Dekker
Van Peteghem, C., Daeselaire, E., & Heeemans, A. (2001). Dư lượng chất kích
thích tăng trưởng. Trong L. M. L. Nollet (Ed.), Sổ tay phân tích thực phẩm
bằng HPLC (tái bản lần 2) (trang 965–985). New York: Công ty Marcel Dekker