PRÀCTICA 2: FEM CULTIUS DE BACTERIS!

MARC TEÒRIC:

En microbiologia, un cultiu és un mètode per a la multiplicació de microorganismes, com ho

són bacteris en què es prepara un mitjà òptim per afavorir el procés desitjat. Un cultiu s’utilitza
com a mètode fonamental d’estudi dels bacteris i altres microorganismes.

Higiene alimentària: Els aliments poden transmetre patògens que poden provocar malalties.

Microbiologia clínica: Es basa en l'estudi amb diferents tècniques per a identificar el

microorganisme causant de les diferents infeccions que patim, així com la determinació de la
sensibilitat que poden presentar els bacteris als diferents antibiòtics i antifúngics.

 PREGUNTA: Podem fer cultius de bacteris per deteminar on hi ha més bacteris a l’institut?

 HIPÒTESIS:

 ELABORACIÓ DE L’EXPERIMENT:

Objectiu:
Realitzar un cultiu d’enriquiment senzill
Detectar altes concentracions de bacteris al teu entorn

Material:

Procediment 1: preparació del medi

Pas 1

Hidrata la placa de gelatina neutra amb aigua freda durant 5-7 minuts en un vas de precipitats.

Pas 2

Extreu amb delicadesa la gelatina hidratada del vas de precipitats i elimina l’excés d’humitat.

Pas 3
Posa l’aigua escalfada prèviament al vas de precipitats i afegeix la gelatina, el petit dau de brou (1 g) i
dilueix completament remenant amb la vareta fins que quedi dissolt completament.

Nota: és preferible també donar-li un punt de bull per començar a «esterilitzar» el medi.

Pas 4

Coloca un disc de cotó a l’embut colocat sodre un erlenmeier per filtrar i eliminar les partícules sòlides.

Pas 4

Aboca la barreja amb el medi a cadascuna de les plaques de petri. I tanca ràpidament cadascun dels
recipients després d'abocar-hi el medi.

Nota: és aconsellable abocar la barreja estant calenta (vigila de no cremar-te), per evitar la contaminació
de la solució.

Pas 5

Deixem reposar, a temperatura ambient o fred, fins que solidifiqui. Normalment estaria preparat en unes
5 hores. Però les teves dues plaques ja estant esperant-te a la nevera (les vaig preparar jo ahir)

Pas 6

Recull mostres a diferents zones on puguis creure que hi podria haver una alta concentració de bacteris
amb l’ajut de l’hisop humitejat amb aigua destil·lada.

Pas 7

El primer de tot, a la placa petri indica què fas: el tipus de microorganisme que conrees o de quina zona és
el cultiu, la data i la hora… Sempre retolar-lo! Al teu cas tens dues plaques, per exemple: a una
posarem «mà», “mòbil”, ... i s'hi afegeix la data i l’hora. Molt important: retola les plaques de petri a la
cara del darrere (a la cara que hi ha el medi de cultiu), perquè si perds la placa de dalt, et quedaries
sense saber quins microorganismes són.

Pas 8

Abans de fer un cultiu és molt important que s'encengui l’espelma per tal que tota la zona estigui asèptica
i només ens surtin microorganismes que nosaltres desitgem. Ara treballaràs SEMPRE al voltant de
l'encenedor d'alcohol, MAI fora de la seva influència. Alerta amb els cabells llargs!

Pas 9

A continuació procediràs a fer la sembra. Destapa la placa el menor temps possible i fes un ziga-zaga suau
amb molta cura de no trencar el medi.

Pas 10
Quan tinguis les dues mostres tancades, apaga la flama (MOLT IMPORTANT). Ara ho cultivarem. Perquè es
desenvolupin microorganismes a les plaques de petri necessitem que transcorrin 24 hores com a
mínim i amb una temperatura controlada (37 º): una estufa de cultiu que ja està preparada. Col·loca
les plaques cap per avall i deixa-les allà durant 24 hores.

Fes fotografies de tots els passos. Caldrà que algú del grup passi pel laboratori a observar i fotografiar els
resultats del cultius

Metodologia:

1. Enumera totes les variables que creus Hauries de controlar. I utilitzar una mostra de control? Per quin
motiu?

2. Per quina raó hem estat tan “obsessionats” en la manipulació dels medis (escalfar la mostra, posar
una flama, tancar ràpid, ...)? Podries afegir altres precaucions complementàries?

3. Quines consideracions heu tingut en la recollida de mostres?

4. Per quina raó es col·loquen les plaques cap per avall a l’estufa?

5. Fes fotos de les dues plaques. Assenyala les formes que puguis identificar.
6. Valora els resultats obtinguts. S’ha complert la teva hipòtesi? Saps per què?

7. Investiga els diferents tipus de cultius de bacteris. T’han fet alguna vegada un cultiu? Pensa en quines
situacions seria adequat fer un cultiu

8. Compara els teus resultats amb els dels teus companys. On hi ha més bacteris? Creus que es
important que compartiu els vostres descobriments?.

Conclusions