Professional Documents
Culture Documents
Seminárna Práca - Mikrobiológia
Seminárna Práca - Mikrobiológia
Dôvodom pre vyšetrenie súčastí komplementu – v praxi ide najmä o vyšetrenie C3 a C4 sa využíva pri
suspekte na
Stanovenie zložiek komplementu sa ukazuje byť nie jednoduchým, nakoľko jednotlivé zložky
komplementu majú krátky polčas rozpadu a ich koncentrácia v sére je zanedbateľná – malá. Krv je
vyšetrovaná ako zrazená prípadne sa odobratý materiál môže zamraziť. V klinickej praxi sa obvykle
stanovujú len dve zložky komplementu a to C3 a C4.
Najskôr sa vylieva na sklenené prípadne plastové platne horúci roztok agarózy prípadne agaru, ktorý
už je zmiešaný s antigénom. Po ochladení roztok stuhne a vyrežú sa do neho otvory podľa predlohy.
Do týchto otvorov je vpravený štandardný roztok so známimi koncentráciami antigénu a do druhej
časti dierok je napipetovaná vzorka vyšetrovaného séra, v ktorej teda hľadáme danú zložku
komplementu. Ako jednoduchú označujeme túto imunodifúziu, pretože môže difundovať len antigén
ale všetkými smermi – teda radiálne. Pokiaľ dochádza k reakcií medzi antigénom a protilátkou vytvára
a precipitačný prstenec. Tento je neskôr meraný a čím je väčší, tým väčšia koncetrácia antigénu sa
nachádza vo vyšetrovanej vzorke. Z analytickej čiary vytvorenou zmeraním prstencov okolo vzoriek so
známimi koncentráciami odčítame neznáme koncentrácie.
Tento test sa využíva najmä ak sa porucha komplementu predpokladá mimo C3 a C4 zložiek. Tieto
metódy sú založené na aktivácií celej komplementovej kaskády jednou z 3 možných ciest aktivácie,
pričom sa vyšetruje hemolytická aktivita komplementu.
CH 50
https://flexikon.doccheck.com/de/CH50-Test
https://www.gesundheit.gv.at/labor/laborwerte/immunsystem/komplementanalyse-ch50
Používa sa pri podozrení na poruchu niektorej z klasickej cesty aktivácie prípadne nedostatočnosti
niektorého z komplementových faktorov. CH je skratka pre hemolytic complement.
Pre tento test sú používané ovčie erytrocyty senzibilizované proti sebe samým Ig-G protiltkami. Tieto
ovčie erytrocyty sú pridané do vyšetrovaného séra v rôznych koncentráciach. Komplementové
faktory v sére sú prostredníctvom Ig-G aktivované a stupeň hemolýzy je meraný absorbanciou.
Alternatívna cesta