14) Col·loqueu la tapa de la cubeta i connecteu-la a la font d'alimentació seguint les

indicacions del professorat. Les connexions dels cables a la font d’alimentació sempre han
de ser del mateix color (negre + negre i vermell + vermell).
5.2. Electroforesi.

Es requereix una intensitat fixa de 35 mA (amperatge) per a executar l’electroforesi en cada

gel (70 mA si feu servir 2 gels simultàniament). També és possible executar 2 cubetes amb
2 gels simultàniament (es requereixen 140 mA fixos).

1) Enceneu l'alimentació d'electroforesi amb les condicions següents:

i. Tensió màxima o voltatge: 300 V
ii. Intensitat o amperatge: 25 mA per gel

2) Inicieu l'electroforesi. S'han d'observar bombolles a l'elèctrode situat dins de la cambra

interior (càtode). La intensitat ha de ser sempre constant i la tensió pot variar.
No obstant això, si la tensió és molt alta, podria significar que tenim un volum de tampó
d’electroforesi insuficient a la cambra interior i la baixa tensió podria significar un contacte
entre cambres evitant el gel.

3) Cal comprovar la font d'alimentació de la cubeta i l'electroforesi durant l'electroforesi.

Comproveu el nivell interior de tampó d’electroforesi de la cubeta (ompliu-lo si cal, però
assegureu-vos d'aturar l'alimentació abans d'obrir la tapa de la cubeta).

4) L'electroforesi es pot seguir mitjançant l’evolució dels marcadors moleculars pretenyits. El

blau de bromofenol funciona més ràpid que la majoria de proteïnes (pes molecular de 670
g/mol) i ens permetrà preveure quan les proteïnes més petites poden estar a punt de sortir
del gel resolutiu quan aquest surt del gel. La sortida del gel apilador és evident perquè hi ha
un canvi en el comportament de les mostres quan accedeixen al resolutiu (la densitat de
l'acrilamida són significativament diferents).

5) Atureu l'electroforesi quan el blau de bromofenol arribi aproximadament a 5 mm de

l'extrem inferior del gel (part inferior de dels vidres).

5.2. Obtenció i tinció dels gels.

1) Tenyireu el gel amb solució BlueSafe, una tinció blava que tenyirà totes les proteïnes
presents en el gel. Prepareu una placa de Petri amb aproximadament 25 mL de la solució
BlueSafe (fins que el gel quedi completament cobert).

2) Traieu el mòdul d'electroforesi de la cubeta. Buida l'electroforesi amb precaució dins de la

cubeta.

3) Desmunteu les pinces i traieu els vidres que contenen els gels.

Separeu els vidres petit i gran amb l’ajuda del separador de plàstic (seguiu indicacions del
professorat). El gel s'enganxarà a una de les dues plaques de vidre.