Júlia Muñoz Rodríguez

EXPRESSIÓ DEL GEN DE LA GALACTOSIDASA

Observeu en el tutorial següent com el bacteri Escherichia coli regula l'expressió del gen
de la galactosidasa. Contesteu les preguntes amb les vostres observacions.

A. EXPRESSIÓ DEL GEN DE LA GALACTOSIDASA

1. Com es forma la molècula repressora del gen de la galactosidasa?
La molècula repressora del gen de la galactosidasa es forma mitjançant la transcripció. En
aquest procés, el gen regulador Lacl es transcriu per a produir ARN missatger. Després,
aquest ARNm es tradueix en una proteïna específica als ribosomes, la proteïna repressora.

2. Quin efecte té l'acció de la molècula repressora? La molècula repressora té la funció

d'unir-se a la regió operadora de l'operó. Això produeix que s'impedeixi la unió de l'ARN
polimerasa a la part promotora de l'operó, com a resultat s'inhibeix la transcripció dels gens
estructurals lacZ, lacY i lacA. Com a conseqüència, no es produirà ARNm i la síntesi de la
galactosidasa es veurà boicotejada.

3. Esbrineu què representa cada número de la imatge, i l'acció que fa cadascú en

l'animació:
1. Aquesta regió de l'ADN no conté cap informació específica

2. Gen Regulador Lacl → El gen regulador Lacl és el responsable de produir la proteïna

reguladora. Com he mencionat anteriorment, aquesta proteïna és l'encarregada d'impedir la
transcripció dels gens estructurals lacZ, lacY i lacA. Provocant que no es formi ARNm i que la
síntesi de l'enzim galactosidasa no es produeixi.
Júlia Muñoz Rodríguez

3. Regió Promotora de l'Operó → La part promotora de l'Operó és el lloc on s'uneixen

molècules reguladores com la proteïna repressora i l'enzim ARN polimerasa. És essencial per
al procés de transcripció.

4. És el lloc on la proteïna repressora i la zona promotora s'uneixen, produint-se així el seu

efecte inhibidor sobre la transcripció dels gens de l'operó lac.

5. Gen Estructural Y → Aquest gen dona lloc a una proteïna estructural anomenada
permeasa. La permeasa es necessita per a transportar la lactosa a l'interior de la cèl·lula.

6. Enzim ARN Polimerasa → L'enzim ARN polimerasa és essencial per al procés de la

transcripció de l'ADN en ARNm.

7. L'ARNm format consta de tres parts que, a la seva traducció, donen lloc a tres proteïnes
diferents. Aquestes proteines provenen dels gens estructurals lacZ, lacY i lacA, tenen la
funció d'ajudar a la cèl·lula a utilitzar la lactosa.
El gen lacZ → S'encarrega de codificar un enzim anomenat β-galactosidasa, que és el
responsable de dividir la lactosa en glucosa i galactosa.
El gen lacY → S'encarrega de codificar una proteïna que s'anomena permeasa, és una
"bomba" transmembrana que permet que la cèl·lula importi la lactosa.
El gen lacA → S'encarrega de codificar l'enzim transacetilasa, al qual li correspon un paper
en la descomposició de la lactosa.

8. Una de les parts de l'ARNm,porta la informació necessària per a la síntesi d'una proteïna
en particular.

9. Proteïna repressora → S'uneix a la regió promotora de l'operó, impedint la producció

d'ARN missatger. És essencial per a la regulació de l'expressió gènica en les cèl·lules.

10. Lactosa → Font d'energia.

Júlia Muñoz Rodríguez

4. Expliqueu com afecta la presència de lactosa a l'expressió de l'operó lac.

La lactosa s'uneix a la proteïna repressora, realitzant-se un canvi en la seva estructura i
convertint-la en no apta per a poder-se unir a la regió operadora de l'operó. Això significa
que la proteïna repressora ja no bloqueja la regió promotora, per tant, l'ARN polimerasa es
pot unir. L'ARN polimerasa provoca la transcripció dels gens estructurals lacZ, lacY i lacA,
originant ARNm. Finalment, es produirà la síntesi de l'enzim galactosidasa.

5. Com afecta a la síntesi de galactosidasa quan el medi no té lactosa? No es produirà un

canvi en l'estructura de la proteïna repressora, per tant, romandrà activa i es vincularà a la
regió operadora. Aquesta unió bloquejarà l'accés de l'ARN polimerasa a la regió promotora,
impedint la transcripció dels gens estructurals. Sense transcripció, no es forma ARNm, i en
conseqüència, no es produeix la síntesi de l'enzim galactosidasa.

REGIONS DE L'ARN POLICISTRÒNIC

6. Quina funció té la proteïna que es forma a partir de

l'ARN 780? És una permeasa que incorpora lactosa a la
cèl·lula.

7. Quina funció té la proteïna que es forma a partir de

l'ARN 3510? Trenca la molècula de lactosa (disacàrid) en
glucosa i galactosa (monosacàrids).

8. Què creieu que significa que l'ARNm és policistrònic?

Significa que pot sintetitzar a més d’una proteïna.

B. ALTRES MOLÈCULES REGULADORES: INTERACCIÓ DE LA GLUCOSA

9. Expliqueu com afecta la presència de Glucosa en el medi a l'expressió de l'operó lac.

Quan hi ha glucosa en el medi, les concentracions d'adenosina monofosfat cíclic (AMPc)
disminueixen. Aquesta disminució de l'AMPc afecta el complex AMPc-CRP, ja que està
implicat en la regulació positiva de l'operó lac. En presència d'AMPc, aquest complex s'uneix
a la regió promotora de l'operó lac i augmenta l'afinitat de l'ARN polimerasa, facilitant així la
transcripció dels gens estructurals. Amb baixes concentracions d'AMPc degudes a la
presència de glucosa, la formació del complex AMPc-CRP es veu inhibida. Amb la inhibició
del complex AMPc-CRP, la transcripció dels gens lacZ, lacY i lacA es dificulta, i la síntesi de
galactosidasa és pràcticament nul·la.

10. Què representa el número 11? Quin paper

té? Molècula d’AMPc, s’uneix a la molècula CRP.
Júlia Muñoz Rodríguez

11. Què representa el número 10? Quin paper té? Molècula CRP, s’uneix a la molècula
d’AMPc.

12. Com es relacionen aquestes dos molècules amb la síntesi de galactosidasa? El complex
AMPc-CRP està format per aquestes dues molècules, l'AMPc i el CRP. La unió d'aquest
complex a la regió promotora de l'operó facilita l'accés de l'ARN polimerasa, l'enzim
encarregat de la transcripció dels gens estructurals. Aquesta millora en la transcripció
promou una producció més eficient d'ARNm que guia la síntesi de la galactosidasa.

13. Com s'expressa l'operó quan en el medi amb lactosa, s'esgota la glucosa? Quan en el
medi amb lactosa s'esgota la glucosa la lactosa s'unirà a la proteïna repressora, realitzant-li
un canvi en la seva estructura i convertint-la en no apta per a poder-se unir a la regió
operadora de l'operó. Per tant, la regió promotora quedarà lliure i l'ARN polimerasa es podrà
unir. Aquesta unió donarà pas a la transcripció dels gens lacZ, lacY i lacA, i així, la síntesi de
l'enzim galactosidasa.
Per altra banda, si s'acaba la glucosa, però hi ha lactosa els nivells d'AMPc augmentaran,
donant pas a la formació del complex AMPc-CRP. Aquest, s'unirà a la regió promotora de
l'operó lac, facilitant la síntesi d'ARNm que per traducció originarà l'enzim galactosidasa.

14. Per què creieu que passa això? La glucosa exerceix un control sobre l'expressió de
l'operó. Quan la lactosa està present en el medi juntament amb la glucosa, la síntesi de
l'enzim galactosidasa es veu inactivada. En canvi, en un medi sense glucosa, però amb
lactosa, s'activa la síntesi de galactosidasa, com hem observat anteriorment.

15. Com s'atura la formació de l'enzim galactosidasa?

La formació de l'enzim galactosidasa s'atura mitjançant la regulació negativa exercida per la
proteïna repressora LacI. Quan no hi ha presència de lactosa en el medi, la repressora LacI
s'uneix a la regió operadora de l'operó, impedint l'accés de l'ARN polimerasa a la regió
promotora. Aquest bloqueig impedeix la transcripció dels
gens estructurals, incloent-hi el que codifica per la
galactosidasa. Per tant, sense la transcripció activa dels gens
necessaris per a la síntesi de galactosidasa, aquest enzim no
es produeix, aturant així el seu procés de formació.

16. Quin avantatge suposa pel bacteri que s'aturi la

formació de galactosidasa? Quan no hi ha galactosa en el
medi, la formació de galactosidasa s'atura. Això és beneficiós
per al bacteri, ja que evita la producció innecessària d'aquest
enzim i estalvia energia. Sense la presència de galactosa,
l'absència de síntesi de galactosidasa permet al bacteri
Júlia Muñoz Rodríguez

dirigir els seus recursos energètics cap a altres funcions vitals.

17. Feu un resum del feedback en el que intervenen AMPc-CRP, glucosa, galactosa, enzim
galactosidasa:
En el sistema de feedback que involucra AMPc-CRP, glucosa, galactosa i l'enzim
galactosidasa, l'AMPc actua com a senyal que respon a la baixa concentració de glucosa.
Amb poca glucosa, l'AMPc activa la formació del complex AMPc-CRP, que s'uneix a la regió
promotora de l'operó Lac. Això millora la unió de l'ARN polimerasa, estimulant la
transcripció dels gens estructurals, incloent-hi la sintesi de l'enzim galactosidasa. En
presència de galactosa, encara s'afavoreix mes la transcripció dels gens i, per tant, la síntesi
de la galactosidasa.