中国男科学杂志 2023 年第 37 卷第 2 期 3

·指南与共识·

精液常规分析中国专家共识
中国性学会生殖检验分会《 精液常规分析中国专家共识》 编写组 ∗#

摘要 精液常规分析是男性生育力评估和男科疾病诊治的最基本实验依据。 精液常规分析结果影响因素多、个体
内和个体间差异大、质量控制困难。 为进一步规范精液常规分析过程,提高分析结果准确性,促进实验室间结果互认,中
国性学会生殖检验分会发起并组织业内专家,基于世界卫生组织、国际标准化组织颁布的操作手册和标准化文件,结合
近年来发表的相关文献和我国临床实践,共同讨论并制定本共识。 共识涉及精液常规分析内容、分析前准备、分析方法、
质量控制、报告内容、存在问题与展望等方面内容,旨在为从事生殖医学、男科学及生殖检验专业的医务人员提供参考。
关键词 精液分析; 质量控制; 生育力; 专家共识
do:10. 3969 / j. issn. 1008- 0848. 2023. 02. 001
i
指南注册号 IPGRP-2022CN379
中图分类号 R446. 144

Chinese experts’ consensus on routine semen analysis

Compiling Group of Chinese Experts’ Consensus on Routine Semen Analysis from the
Reproductive Testing Branch of China Sexology Association ∗
∗
Corresponding author: Lu Jin-Chun. E-mail: 406646227@ qq. com

Abstract Routine semen analysis is the most basic experimental evidence for male fertility assessment and
the diagnosis and treatment of andrological diseases. Due to multi-factor influence, large intra-individual and
inter-individual variation, quality control for semen analysis results was difficult to be performed. In order to
further standardize the process of routine semen analysis, improve the accuracy of analysis results, and promote
the mutual acceptance of the results among laboratories, the Reproductive Testing Branch of China Sexology
Association initiated and organized the laboratory experts in the field of andrology to jointly discuss and formulate
this consensus according to the operation manual and standardized documents issued by the World Health
Organization ( WHO) and International Organization for Standardization ( ISO) , in combination with the relevant
literature published in recent years and clinical practice of China. The consensus covered the contents of routine
semen analysis, preparation before analysis, analysis methods, quality control, report contents, existing problems
and prospects, which will be aimed at providing reference for medical personnel engaged in reproductive
medicine, andrology and reproductive medicine testing.
Key words semen analysis; quality control; fertility; experts’ consensus
∗
通信作者:陆金春,E-mail: 406646227@ qq. com
#
执笔作者:陆金春( 东南大学附属中大医院) 、李红林( 南京医科大学附属淮安第一医院)
共识编写组专家成员( 按姓氏汉语拼音排序) :安庚( 广州医科大学附属第三医院) 、葛燕梅( 东南大学附属中大医院) 、侯建华( 内蒙古自治
区人民医院) 、蒋祥龙( 江西中医药大学附属生殖医院 / 江西省人类精子库) 、焦瑞宝( 安徽省铜陵市人民医院) 、李福平( 四川大学华西第二医
院) 、李红林( 南京医科大学附属淮安第一医院) 、李婷( 山东大学附属生殖医院) 、林典梁( 福建医科大学附属福建省妇幼保健院 / 福建省人类精
子库) 、陆金春( 东南大学附属中大医院) 、卢义娥( 花生医疗北京花生医院) 、石亮( 南京大学医学院附属鼓楼医院) 、唐亮( 江西省妇幼保健院) 、
王家雄( 南京医科大学附属苏州医院 / 苏州市立医院) 、王瑞雪( 吉林大学第一医院) 、伍细言( 湖南省妇幼保健院 / 湖南省生殖医学研究院) 、吴颖
( 浙江省妇幼和生殖保健中心) 、夏欣一( 东部战区总医院) 、谢晓东( 上海交通大学医学院附属第六人民医院) 、徐院花( 东南大学附属中大医
院) 、杨杰( 西北妇女儿童医院) 、袁人培( 北京大学第三医院) 、朱文兵( 中南大学基础医学院)
 4 Chinese Journal of Andrology Vol. 37 No. 2 2023

男性不育是指育龄夫妇有规律的性生活,且未采 仪、高速离心机及配套离心管、冰箱等。 没有 CASA 系

取避孕措施,由男方因素导致女方在 12 个月内未能自 统的基层医院,开展精液常规分析时,需配备精子计数
然受孕 [1]
。 随着人类社会的不断发展,自然环境的逐 板、普通光 学 显 微 镜 或 相 差 显 微 镜、精 子 计 数 稀 释 液
渐改变,男性不育症的患病率也在不断增加 [2]
。 据世 ( NaHCO3 -甲醛溶液) 等 [15] 。
界卫生组织( WHO) 估计,全球约有 1 亿 8 600 万的育 精液常规分析前,实验室技术人员应询问患者禁
龄夫妇存在生育问题,其中男方因素约占 50% [3]
。 目 欲时间,告知患者到指定的取精室留取精液,并给患者
前,评估 男 性 生 育 能 力 最 基 本 的 方 法 为 精 液 常 规 分 提供贴有唯一标识的取精杯,告知患者留取精液前洗
析 [4]
。 为了能够给临床医生的诊断和治疗提供可靠的 手、通过手淫法留取全部精液于取精杯中,留取精液后
实验依据,精液常规分析报告就显得尤为重要。 然而, 尽快将精液样本交至实验室技术人员手中,接收精液
除精液常规分析报告内容和格式不够统一外,由于国 样本时要标注接收时间,并询问患者是否留取全部精
内不同医疗机构所使用的仪器设备及检验技术人员水 液,若有 丢 失, 则 在 报 告 中 备 注 精 液 丢 失 详 细 情 况,
平的参差不齐,精液常规分析规范程度不同,不同实验 精液样本接受后立即置于 37℃ 恒温 孵 育 箱 中 待 精 液
室之间的精液常规包含项目、检验方法学选择和操作 液化 [16] 。
细节往往差异很大 [5-6] 。 全国 124 家实验室参与的室间 三、精液常规分析方法
质量评价中精子浓度的变异系数高达 26. 6% ,非前向 ( 一) 精液颜色与气味
运动精子百分率的变异系数高达 50. 8% ,检测结果差 采用目视法检测。 正常液化后的精液质地均匀、
异很大 [7]
。 尽管最近有精液常规检验中国专家共识出 呈灰白色,具有一种特殊的刺激性腥味,可描述为“ 栗
版 [8] ,但与临床一线需求仍存在差距。 为进一步规范 子花味” 或“ 石楠花味” 。 禁欲时间长时精液可略带黄
精液常规分析,提高分析结果的准确性,中国性学会生 色。 如果精子浓度非常低或无精子,精液可能稍显透
殖检验分会成立《 精液常规分析中国专家共识》 编写 明。 含有红细胞的精液可呈红色或褐色。 如有黄疸或
组,在《 WHO 人类精液检查与处理实验室手册》 第 5 版 服用某些维生素,精液可呈黄色或深黄色。 精液量极
( WHO5) 、第 6 版( WHO6 ) 、ISO23162:2021 《 精液基础 少伴随精子数多时精液常呈乳白色。
检查———规范 和 检 测 方 法 》 等 文 献 和 标 准 的 基 础 ( 二) 精液体积
上 [9-11]
,结合我国的实情,编写本共识,以指导临床医疗 推荐采用称重的方法计算精液的体积。 用电子天
机构从事生殖检验的技术人员更规范地进行精液常规 平预先测定贴有标识的取精杯重量,采集精液后再次称
分析。 重,减去原始重量得到的差值即为精液体积(假定精液密
一、精液常规分析内容 度为 1 g / mL,精液实际密度平均约为 1. 01 g / mL) [17] 。
推荐精液常规分析包括精液颜色、气味、体积、pH 正常生育男性每次射精量(精液体积)应≥1. 5 mL [9] 。
值、液化时间、黏稠度、精子浓度及总数、精子活力分级 ( 三) 精液液化
与精子活动率、有无精子凝集或聚集以及有无圆形细 待液化的精液样本每隔 15 min 从孵育箱中取出,
胞等 [12]
。 精子形态学分析、精子存活率检测等项目虽 混匀后观察精液是否液化,如果已液化,进入后续精液
然也属于精液标本的基础性检验项目,但检验过程均 分析流程。 如 果 未 液 化, 继 续 等 待 至 60 min, 如 超 过
需特殊染色,样本周转时间( turnaround time,TAT) 与前 60 min 仍未完全液化,则采用吸管反复吹打、加入 1%
述项目不尽相同 [13] ,且精子存活率评估需在精子活力 的菠萝蛋白酶( 终浓度 75 U / mL) 或 1% 的糜蛋白酶( 终
分析结果的基础上进行 [14]
,故不建议将这两类项目纳 浓度为 1000 U / mL 或 0. 1 mg / mL) 处理 30 min 后再检
入精液常规分析内容。 测,并将处理方法记录在报告单上,因为其可能影响精
二、精液常规分析前准备 子活力、精子形态学、精子 DNA 碎片指数( DFI) 、精浆
精液 常 规 分 析 前, 实 验 室 应 有 如 下 设 施 和 耗 材: 生化指标及精子顶体酶的测定结果 [18-19] 。 糜蛋白酶和
电子天平、 恒 温 孵 育 箱、 计 算 机 辅 助 精 子 分 析 系 统 菠萝蛋白酶可能会降解精子细胞内蛋白( OXPHOS 复
( computer-aided sperm analysis, CASA) 及 配 套 的 计 数 合物和 HIST1H2BA) 和精子表面蛋白( HSPA2、BAG6 和
板、一次性无毒取精杯( 需经精子活力实验验证合格) 、 SPA17) [20] 、诱导精子膜损伤、降低精子对获能刺激的
移液器及配套吸头、载玻片及盖片、已通过 pH 计校正 反应 [21] ,因此不推荐使用这两种酶处理辅助生殖[ 宫腔
的 pH 试纸( pH5. 5-9. 0) 、一次性无毒移液管、涡旋混匀 内人工受精( IUI) / 体外受精-胚胎移植( IVF-ET) / 卵细
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胞质内单精子注射( ICSI) ] 周期中的精液样本。 础上,对常规精液样本进行分析。 每次分析的视野数

( 四) 精液 pH 值
精液液化后应立即检测精液 pH 值。 将精液样本
混匀后,在 pH 试纸上均匀地涂上一滴精液,等浸渍区
颜色均匀后于 30 秒内与标准条带颜色对比,读出 pH
值。 正常生育男性精液 pH 值≥7. 2。 梗阻性无精子症
患者的精液会出现 pH 值低于 6. 0 的情况
( 五) 精液黏稠度
将精液吸入一支广口径( 直径 1. 5 mm) 的一次性
塑料吸液管 [9]
,稍用力挤压吸液管,使精液借助重力滴
下,观察拉丝的长度,可以评估精液的黏稠度。 正常精
液会形成不连续的小滴,黏稠度异常时液滴会形成超
过 2 cm 的拉丝,此时应记录为黏稠度异常。
( 六) 精子浓度及活力分析
推荐首选 CASA 分析精子浓度和活力。 CASA 分
析结果相比于手工法,偏倚小,重复性更好,检测速度
更快,可自动记录数据和瞬时图像,对检测人员操作技
能和工作经验依赖性较小,检验结果更为客观可靠、易
于标准化 [23]
。 精子。 每个样本至少系统地观察 5 个不同视野,分析
1. CASA 分析
推荐使用带相差显微镜的 CASA 同时分析精子浓
度及总数、精子活力( 包括快速前向运动精子百分率、
前向运动精子百分率、精子活动率等) 以及快速前向运
动精子总数等参数。
推荐使用计 数 池 深 度 已 校 准 的 可 重 复 性 使 用 的
精子计数 板 检 测 精 子 浓 度 和 活 力 [24] ,也 可 使 用 经 过
验证检测 误 差 在 允 许 范 围 内 的 一 次 性 精 子 计 数 池。
精子计数池充池时 应 根 据 计 数 池 深 度 准 确 吸 取 一 定
量的液化精液样本充池,同一类型的精子计数池每次
充池 的 样 本 量 须 一 致 [25]
。 精 液 样 本 充 池 后, 待 视
野稳定( 通常 在 1 min 内) 即 刻 进 行 精 子 浓 度 和 活 力
分析。
按照 CASA 操作流程,在每日进行室内质控的基
要足够( 至少 6 个视野) [9] ,保证每次分析的精子数至
少 200 个 以 上。 有 条 件 的 实 验 室 每 份 样 本 可 分 析
2 次,每次分析精子 200 个 以 上,然 后 按 照 两 次 分 析
结 果 的 95 % 可 信 区 间 可 接 受 差 异 的 要 求, 取 均 值
报告。
[22]
。 2. 手工法
推荐使用相差显微镜进行新鲜精液样本的精子浓
度和活力分析。
(1) 精子活力分析:液化精液充分混匀后,立即将
10 μL 的精液置于干净载玻片上,盖上 22 mm × 22 mm
× 0. 4 mm 的盖玻片( 形成的厚度约为 20 μm) 。 注意避
免在盖玻片和载玻片之间产生气泡。 静置 1 min 后进
行精子活力评估,并确定检测精子浓度所需的精液稀
释倍数( 详细见后) 。 建 议 采 用 带 有 网 格 的 目 镜 评 估
精子活力,评估区域应距离盖玻片边缘至少 5 mm 以
上。 先仔细观察网格区计数前向运动精子,接下来在
相同的网格内计数非前向运动精子,最后计数不活动
的精子数应 > 200 个。 两 次 分 析 结 果 之 间 的 差 异 应
在 95% 可信区 间 内,如 果 两 次 分 析 结 果 超 过 95% 可
信区间的可接受差异,则应重新混匀样本后重复取样
检查。
(2) 精子浓度分析以及精液稀释倍数测算:根据精
子活力分析时对精子浓度的初估,确定精子计数时所
需要的精液稀释倍数( 表 1) [9] 。 如果每个视野中的精
子数目差异较大,提示样本混匀不充分,应重新混匀样
本再取 样 检 测。 精 液 稀 释 液 的 配 制 方 法 为: 将 50 g
NaHCO3 和 10 mL 35% ( v / v) 甲醛溶液加入 1 000 mL
纯水中,可添加 0. 25 g 台酚蓝或 5 mL 饱和甲紫溶液
( > 4 mg / mL) 加深背景以使精子头部更清晰,4℃ 保存
备用,可使 用 12 个 月。 根 据 所 计 数 精 子 计 数 池 体 积
( 深度 × 面积) 、稀释倍数计算精子浓度。

表1 精液样本所需的稀释倍数、如何进行稀释、使用的计数板及可能评估的区域

每 400 倍视野下 每 200 倍视野下 精液量 固定液

需稀释倍数 计数池 计数区域
精子数目 精子数目 ( μL) ( μL)

> 101 > 400 1:20(1 + 19) 50 950 改良 Neubauer 血细胞计数板 第 5、4、6 网格

16 ~ 100 60 ~ 400 1:5(1 + 4) 50 200 改良 Neubauer 血细胞计数板 第 5、4、6 网格

2 ~ 15 8 ~ 60 1:2(1 + 1) 50 50 改良 Neubauer 血细胞计数板 第 5、4、6 网格

改良 Neubauer 血细胞计数板 所有 9 个网格

<2 <8 1:2(1 + 1) 50 50
或大容积的计数池 或整张玻片
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3. 严重少精子症的分析 野中活动精子以头对头、尾对尾、尾尖对尾尖、混合型、
当精子数目过少时,应根据检测目的和要求的不 缠结型相互粘附在一起的现象,应在检验报告中注明
同做如下处理。 “ 见到零散、中等、大量或全部精子凝集” 。 不活动精子
手工法检测时,如果不需要得到精确的精子浓度,那 之间、活动精子与粘液丝、非精子细胞或细胞碎片之间
么当每 400 倍视野中精子数目 < 4 个或者每 200 倍视野 粘附在一起,为非特异性聚集,不属于精子凝集,但可
中 < 16 个时,可以报告为“精子浓度 < 2 × 10 / mL”,同时 6
能影响 精 子 活 力 分 析 结 果, 也 应 在 检 验 报 告 中 如 实
应报告是否发现前向运动精子;如果需要获得精确的 记录 [9] 。
精子浓度,用于严重少精子症( 极度少精子症:0 < 精子 四、精液常规分析的质量控制
浓度 < 1 × 10 / mL;重度少精子症:1 × 10 / mL≤精子浓
6 6
( 一) 精液常规分析标准操作程序文件的编写
度 < 5 × 10 6 / mL) 的分级诊断时 [26] ,可通过减少精液稀 标准操作程序( standard operation procedure, SOP)
释倍数、增加计数池的计数体积( 计数整个计数池) 或 亦称为作业指导书,是实验室保证检验过程的质量而
换用一次性大容量(100 μm 深) 计数板而得到相对准 制定的程 序,因 此,要 想 做 好 精 液 常 规 分 析 的 质 量 控
确的精子浓度结果。 制,编写好 SOP 文件并严格按其实施是关键。
使用 CASA 分析精子浓度时,可以通过增加分析视 精液常 规 分 析 SOP 的 编 写 应 遵 循 以 下 几 点 [18] :
野的方法( 最多视野数) 提高精子浓度分析准确性,如 (1) 实用性。 SOP 的编写应力求简洁明确,在符合行业
果每次分析无法达到 200 个精子,报告中备注应提示 规定的基础上保持与日常工作相 一 致, 遵 照 “ 做 你 所
“ 分析精子数目有限,相对误差较大,结果供参考” ,或 写,写你所做” 的原则。 (2) 完备性。 与精液常规分析
者用手工法进行精确计数。 质量密切相关的仪器设备以及各个检测项目均应建立
4. 可疑无精子症的分析 相应的 SOP。 (3) 速查性。 即相关操作人员在工作地
当任一湿片全部扫描后都没有观察到精子时,应 点可以随时查阅。 也可以简易操作卡的形式在工作台
离心精液以确定在更大样本量中能否发现精子。 取所 上供操作人员快速查阅。 (4) 易懂性。 已形成的 SOP
有精液 3 000 g 离心 15 min,弃去大部分上清液,将全部 应使用操作人员都能理解的语言编写。 另需注意:当
沉淀物悬浮于约 50 μL 精浆中,再分别取两份 10 μL 沉 实验环境、仪器设备、试剂等发生改变时,SOP 应做相应
淀物制片,经仔细检查重复扫描全片后,如果仍无法找 的修改。
到精子,才能做出“ 无精子症” 的判断,并在报告中注明 ( 二) 加强操作技能的培训与考核
“ 精液经 3 000 g、15 min 离心沉淀检查未见精子” ,如果 实验室人员必须具备从事相关检验工作的资质。
本报告为首次检测报告,报告中添加“ 建议复查” ,同时 方法的标准化离不开操作技能的培训,应尽可能降低
报告有无见到圆形细胞;如果在任一样本中观察到精 同一实验室不同技术人员操作差异和主观判断所带来
子,则提示隐匿精子症,同样需在报告中注明“ 精液涂 的结果差异,如混匀、离心转速、加样方式、样本储存、
片镜检未见精子,经离心沉淀检查见 X 个精子 / 全片或 计数顺序、结果观察等。 初入职或离开超过 6 个月重
X 个精子 / 平均 n 个高倍视野,前向运动或非前向运动 新返回实验室工作的技术人员应经过《 WHO 人类精液
精子 Y 个 / 全片或 Y 个精子 / 平均 n 个高倍视野,余均 检查与处理实验室手册》 第 5 版或第 6 版的系统性培
为不动精子,建议复检” 。 如果是准备进行辅助生殖技 训,并在实验室主管或上级技术人员的指导下,独立检
术助孕的夫妇,建议对隐匿精子症患者进行稀少精子 测不少于 50 例的精液样本或质控品 [28] ,再与准确度高
冷冻,以保存其生育能力 [27] 。 的熟练技术人员共同检测至少 20 份精液样本,比较新
5. 精子浓度和活力的正常参考值 老技术人员检测结果的一致性 [29] 。 新人员的定量检测
正常生育男性的每次射精精子浓度应≥15 × 106 / mL, 误差达到 ± 10% 以内,定性评估( 如黏稠度、圆形细胞
精子总数应≥39 × 10 / 一次射精
6 [9]
。 前向运动精子百 等) 至少有 90% 的结果与熟练技术人员检测结果相一
分率 ( PR ) 应 ≥ 32% , 精 子 活 动 率 ( PR + NP ) 应 ≥ 致后才能通过操作考核,独立上岗 [11] 。 实验室主管应
40% [9]
。 但在结果解释时需注意,低于此临界值,并不 定期组织所有实验室技术人员检测同一份精液样本,
代表患者无法生育,而是生育能力降低。 并比对不同人员的检测结果,分析检测人员自身和彼
( 七) 精子凝集或聚集 此之间的 系 统 误 差 [30] ,对 误 差 较 大 的 人 员 应 再 次 培
如果采用 CASA 或手工法分析精子活力时,可见视 训和 考 核, 以 保 持 实 验 室 技 术 人 员 检 测 水 平 的 一
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致性。 表明,使用 10 μm 深和 20 μm 深的计数池检测精子活

( 三) 质量控制过程 [31-33] 动率结果并无显著性差异 [39] ,但 20 μm 深的计数池在
1. 分析前质量控制 显微镜下会呈现不同的聚焦平面形成精子虚影,从而
样本的正确留取、运送、验收、编号、保存等,避免 增加计数误差或需稀释精子,增加了计数难度 [24] 。
饮食、药物、特殊习惯的影响,以及保证仪器设备处于 (8) 建议环境温度保持在 22℃ ~ 25℃ ,推荐使用
正常和准确的工作状态,是精液分析前质量控制的重 37℃ 培 养 箱 液 化 精 液, 推 荐 使 用 恒 温 37℃ 箱 体 式
要内容。 CASA,这样可保持计数板及其周围环境均为 37℃ 。 处
(1) 进行精液常规分析的患者禁欲天数规定为 2 ~ 于室温环境下的恒温计数平台可能会对精子活力分析
7 天,复查时禁欲天数应尽可能恒定。 如果患者仅仅为 产生影响。
了观察有无精子,禁欲时间可以不予考虑;如果患者为 (9) 对于接触精液的容器、吸头、移液管等均需要
隐匿精子症或无精子症,可以适当延长禁欲时间后再 进行毒性分析实验,推荐采用容器相容性实验:至少选
检测 [34]
。 择 5 例高精子活力、浓度的新鲜精液样本,一半置于对
(2) 推荐采用广口容器为采精容器,并保证精液没 照管里,一半置于新购耗材里,每隔 1 个小时取样观察
有丢失。 精液并不是均匀分布的液体,射出精液的初 精子活力,连续 4 个小时检测 4 次,然后将两组数据进
始部分主要是富含精子的前列腺液,而后面部分的精 行配对样本 t 检验,计算 P 值。 每个时间点的 P 值均
液则主要是精囊液,如果射精时丢失了富含精子的初 > 0. 05,则认为新耗材可以使用 [10] 。
始部分,对精液检测结果影响较大。 当部分精液丢失 (10) 对于移液器、监测恒温箱等恒温设施的温度
时需在报告中记录或建议下次复查。 计至少每年要校准一次。
(3) 推 荐 在 实 验 室 附 近 的 私 密 房 间 ( 专 用 取 精 (11) 对新启用的 pH 试纸,推荐在使用前用已知
室) 内采集精液 [35] ,不建议让患者在公共卫生间留取 pH 值的标准液进行检测。
精液,因为这既可能暴露患者隐私 [36] ,又可能导致患 (12) 不同厂家的精子分析仪之间 [40] 、不同进样方
者精液排 泄 不 充 分 或 部 分 样 本 丢 失, 影 响 精 液 检 验 式的精子计数板之间 [41] ,可能存在系统误差。 如在同
质量 [37] 。 一实验室使用两种以上品牌的精子分析仪或计数板,
(4) 建议手淫取精,手淫时不能采用润滑剂等矿物 应在使用前进行比对,验证其准确性,必要时联系厂商
油性物质。 特殊情况下可采用特制的对精子无毒性的 重新设置仪器参数或对计数板进行校正。
避孕套进行精液采集,并于采集后 1 h 内送到实验室。 2. 分析过程的质量控制
如果在家里或其他场所采集精液,在运送到实验室期 分析过程指的是从样本合格验收到测定完毕的全
间应保持 温 度 在 20℃ ~ 37℃ 之 间 ( 置 于 内 衣 胸 前 口 过程。 包括样本的预处理,建立稳定可靠的测定系统,
袋) ,并在报告里予以记录。 不推荐采用性交中断体外 实施完善的内部质控和参加室间质评。
射精的方式进行精液采集。 (1) 精液常规分析过程严格按照其 SOP 文件进行。
(5) 用于精液体积测定的电子天平,推荐使用自动 (2) 每天对精子浓度进行室内质控检定。 室内质
去皮的精密度达 0. 01 g 的电子天平,且每年应由有资 控品可以是实验室自制的、分装的精液冷藏样本 [42] ,也
质的计量机构检定一次。 可以是商用质控珠。 可通过刻录视频进行精子活动率
(6) 推荐 使 用 相 差 显 微 镜 或 配 备 相 差 显 微 镜 的 的室内质控检定,常规分析时应使用与室内质控评估
CASA 进行精液常规分析,因为其能使精液中的大部分 相同的视 频 获 得 方 式 或 计 算 机 屏 幕。 质 控 检 定 完 成
杂质与精子区分,减少人工校正。 后,要及时 判 断 结 果 是 否 在 控,并 将 结 果 加 至 质 控 图
(7) 计数池深度对精子浓度和活力分析结果均有 中。 如发现检测结果失控或患者样本检测结果波动过
影响。 为了保证精子计数池深度的准确性,建议使用 大,应按图 1 查 找 误 差 产 生 可 能 的 原 因 [18, 43] ,并 及 时
可重复使用的精子计数板,并应有计数池深度的检测 纠正。
报告,且计数池每 6 ~ 12 个月必须校准一次 [38]
。 推荐 (3) 积极参加外部组织的 室 间 质 评,或 与 其 他 实
优先选用 10 μm 深的计数池,虽然 WHO 第 5 版手册推 验室结果进 行 比 对。 如 发 现 检 测 结 果 失 控 或 偏 倚,
荐不小于 20 μm 深的计数池,其原因是计数池的深度 应及时查找原 因,并 加 以 纠 正,同 时 记 录 相 应 的 质 控
小于 20 μm 会限制精子的旋转运动,然而近年来的研究 讨论。
 8 Chinese Journal of Andrology Vol. 37 No. 2 2023
图1 精液常规分析中误差产生的可能原因分析鱼骨图
(4) 每次检测前必须充分混匀精液样本。
(5) 对非严重少精子或非可疑无精子的样本,推荐
每份样本分析 2 次,每次分析精子 200 个以上,然后按
照两次结果的 95% 可信区间差异可接受的要求,取均
值报告。
3. 分析后质量控制
分析后质量控制是指精液分析完成初始报告后,
为确保检测报告的正确无误发出以及临床医生从检验
报告获取正确、客观信息所实施的质控。
(1) 报告的审核至关重要。 建议高年资检验技术
人员对检测结果进行审核,需核对患者信息、检测结果
的稀释倍数有无考虑、与以往的检测结果是否有较大
差异等。
(2) 有条件的实验室应通过信息化手段实施同一
患者不同时间检测结果的对比分析、患者自助领取图
文报告等功能,充分应用先进的信息化管理手段保证
患者信息和检测结果的完整、准确和报告的及时发放。
(3) 检验技术人员要为患者及临床医师提供必要
的咨询服务,即检验结果的合理解释及其为临床医师
应用的过程。
(4) 每个月月初统计分析上一个月所有标本的精
液量、pH 值、精子浓度、前向运动精子百分率等主要精
液参数的检验结果月均值,并绘制月均值 Xbar 图,回顾
性监测实验室结果的稳定性及各种影响因素
量较小的实验室可适当延长均值统计的时间,如一个季
度统计一次所有患者标本检测结果的均值并进行分析。
五、精液常规分析报告内容
精液常规分析报告应包含下列信息:(1) 患者基本
信息,包括姓名、年龄、性别、门诊号、临床诊断、样本编
号、禁欲天数等;(2) 精液常规检测的所有内容信息,包
括精液颜色、 气 味、 体 积 ( 量) 、 pH 值、 液 化 时 间、 黏 稠
度、精子浓度及总数、精子活力分级与精子活动率、以
及有无精子凝集或聚集等;(3) 精液常规检测项目的正
常参考值,包括精液量、精子浓度、前向运动精子百分
率、精子活动率等;(4) 样本接收时间、检测时间、报告
时间等;(5) 样本接收者、检测者和核对者信息等,检测
者和核对者均应签名;(6 ) 备注说明或其他陈述性建
议,如“ 精子浓度低、分析精子数少于 200 个,相对误差
较大,结果供参考” 等;(7) 如果精液中无头精子的尾部
(大头针状头) 、无尾的精子头或多条尾巴的精子超过了
精子总数的五分之一(每 100 个精子中有 20 个以上的上
述精子),应在报告中记录其相对百分率,并建议进一步
行精子形态学分析[9-10] ;(8)推荐保留小数点后一位有效
数字报告精子浓度及活力分级相关结果。
六、精液常规分析中存在的问题与展望
( 一) 精液液化与黏稠度
精液液化不全与精液黏稠度异常很难鉴别。 精液
射出后会很快呈现半固体凝胶的外观,通常在数分钟
内开始液化变得稀薄,液化大多在 15 min 内完成,正常
[44]
。 标本 液化的精液中可能含有不液化的胶冻状颗粒,这一现
象没有临床诊断意义,但可能会影响密度梯度离心法
制备精子的回收率 [45] 。 液化不全的精液常呈非均质状
 中国男科学杂志 2023 年第 37 卷第 2 期
态,并可见胶状物质,而黏稠度异常的精液一般呈均质
黏稠,观察不到类似凝胶样物质的存在 [46] 。 胶冻状颗
粒会影响加样制片,加样时需避免吸入颗粒。
( 二) 不同 CASA 分析系统的差异性
现有的 CASA 系统根据检测原理不同,可分为明场
检测法、相差检测法、光电法、荧光检测法等,它们对检
测结果的影响不同 [47]
。 明场检测法的 CASA 通过设定
的精子大小和灰度、精子运动移位等分析精子浓度及
运动参数,易受精液样本中其他细胞和非细胞颗粒影
响,精液参数设置的不同对结果影响较大,且必须进行
人工校正。 其他类型的 CASA 需经过性能评估后再确
定影响因素,然后进行相应的校正。 不同 CASA 系统之
间可能会存在显著系统误差,故进行室内质控和室间
质评非常必要 [48-50]
。 为 1 ~ 3 周。 如果两次精液分析的结果有明显差异,应
( 三) 必要时开展精子存活率分析
对于常规检测中未见到活动精子的情况下进行精
子存活率检测十分有意义。 WHO 手册推荐
活动率低于 40% 时,应当进行精子存活率检测;国内有
专家推荐精子存活率检测适用于不动精子百分率大于
90% ~ 95% 的特殊人群 [14]
。 而在男科临床实践中,一
般对前向运动精子百分率小于 10% 的男性进行精子存
活率检测。 精子存活率检测应在精液常规检测后立即
进行,以防止脱水或温度变化对精子存活率的有害影
响。 推荐采用伊红 苯胺黑染色法,也可通过单用伊红
染色试验或低渗膨胀试验进行检测。 伊红 苯胺黑染
色以及单用伊红染色试验的原理:存活精子的细胞膜
可阻止精子被染料伊红所染色,而死亡精子则因细胞
膜通透性改变而易被伊红染为红色,用光学显微镜或
相差显微镜检测可以区分活精子 ( 未着色) 和死精子
( 着色) ,而加用苯胺黑有利于更好地观察。 低渗膨胀
试验的基本原理则利用存活精子的细胞膜能够形成渗
透梯度的特性,当被置于低渗透压液体中时存活精子
可因细胞外水分进入细胞内而造成细胞的膨胀,死亡
精子则缺 乏 这 种 现 象,从 而 可 以 判 断 精 子 是 否 存 活。
正常生育男性的精子存活率应≥58% [9] 。
( 四) 高精子浓度的精液样本分析
使用 CASA 分析精子浓度和活力时,精子浓度过高
可能会影响精子浓度和活力分析结果的准确性。 根据
CASA 制造商提供的精子浓度分析线性范围,超过线性
范围上限的精液样本应进行稀释。 一般而言,精子活
力分析结果在精子浓度为(2 ~ 50) × 10 6 / mL 的范围内
检测结果较为理想,而高浓度精子样本,通常会增加精
子碰撞频 率, 影 响 精 子 轨 迹 的 准 确 捕 捉;精 子 浓 度 在
9
(50 ~ 100) × 10 6 / mL 范围时,检测结果可能受轻度影
响;精子浓度大于 100 × 10 6 / mL 时,检测结果受影响程
度增大,建议进行稀释后再检测。 精液样本稀释推荐
采用同源精浆稀释,即取部分精液进行 16 000 g 或最大
可用离心力离心 6 min [9] ,以获得的无精子精浆作为稀
释液稀释原始精液,精液分析后注意精子浓度结果乘
以稀释倍数。 若精液体积较少,不足以分离出足够的
精浆用于稀释时,可用生理盐水以 1 ∶ 3 比例替代精浆
进行稀释,但应在报告中注明以便临床医生更好地判
断实际情况 [51] 。
( 五) 精液采集次数
不育夫妇诊治过程中,男方应至少检测 2 次精液
样本以获取基线数据,两次精液采集的时间间隔至少
再采集样本进行第 3 次分析。 无精子症患者的精液复
查时间也应尽快安排在首次检测的 1 ~ 3 周后。 如果病
[10]
,当精子 史中无特殊原因如高热、各种原因导致昏迷等,不推荐
等到间隔 3 个月后再复查,以免延误患者的诊治 [52] 。
( 六) 逆行射精样本的分析
一些男性射精时精液进入膀胱,导致无精子症或
无明显射出物。 推荐对此类患者射出的精液和尿液进
行分析。 样本采集前,实验室人员应该告诉患者在取
精前先排尿,但不完全排空膀胱;患者手淫法取精,嘱
咐患者务必有射精感觉,将精液射入取精杯中;然后再
次排尿并收集所有尿液。 离心全部尿液,分析沉淀中
的精子数量及运动情况。 证实是逆行射精的患者,在
进行辅助生殖技术助孕前采集精子时,建议患者检查
前在医生指导下服用碳酸氢钠使尿液碱化以起到保护
精子的作用,因为精子对酸性环境十分敏感。 随后,将
手淫后再次排出的尿液用装有培养液的容器收集,再
以 500 g 离心尿液 8 min 获取精子 [9] 。
( 七) 精液常规分析的智能化
目前的主流全自动 CASA 主要停留在自动聚焦、自
动分析精子浓度和活力、创新扫描和追踪精子的算法
以提高 CASA 的准确性等关键步骤 [53] ,对精液理化参
数包括黏稠度、液化时间、颜色、pH 值、体积及浓度和
活力等多参数的全流程智能化分析尚处于摸索阶段。
具体包括采用比色法分析精液颜色,根据 pH 指示剂原
理分析 pH 值,通过取样针吸吐精液样本产生的压强大
小分析精液液化程度和黏稠度,同时能对高浓度精液
进行自动稀释,对不液化及黏稠的样本进行自动加酶
处理,但能否真正实现精液常规分析的全流程智能化,
还需要大量的临床验证。 目前市场上亦存在可以同时
 10 Chinese Journal of Andrology Vol. 37 No. 2 2023

进行或连续进行多个样本检测的 CASA 系统,此时应避 供四级精 子 各 自 的 参 考 值。 而 且 WHO6 手 册 反 复 强

免样本间的相互干扰。 新一代基于智能手机的便携式
CASA 系统已通过性能验证,与传统 CASA 系统检验精
子浓度和活力的结果均呈高度正相关,但便携式 CASA
系统更具有成本效益优势,方便男性在家自助检测,能
够保护患者隐私,提高不育男性检测精液样本的依从
性,实现早期诊断和治疗 [54]
。 将基于机器学习的分光
光度法与训练有素的全光谱神经网络( FSNN) 模型一
起使用的新型 CASA,作为一种快速、低成本且强大的
技术来测量精子浓度,准确率超过了 93%
( 八) WHO5 与 WHO6 手册的区别及推荐理由
WHO5 和 WHO6 手册对精液常规分析的描述总体
变化不大,各正常参考值的浮动亦很小。 虽然 WHO6
推荐将精子活力分为四级:快速前向运动精子、慢速前
向运动精子、非前向运动精子及不动精子,但其并未提
调,文中提供的参考值并不能区分正常生育男性和不
育男性。 然而,没有正常参考值,临床医生诊治患者将
无所适从。 基 于 此, 并 结 合 中 国 的 实 情, 本 共 识 仍 以
WHO5 手册作为主要参考文献。
总之,精液标本为一特殊的具有活细胞的样本,个
体内和个体间变异较大,部分不液化或液化不全的精
液标本均 质 性 差,常 规 检 验 结 果 影 响 因 素 多 而 杂, 因
此,精液常规分析应在标准化流程的基础上分级、分类
[55]
。 选择个体化的检测方法( 图 2) 。 规范精液常规的检测
流程是临床进行精液分析的基础,是评估男性生育能
力的重要依据。 本共识主要从精液常规的检测内容和
质量控制两方面提出建议,规范流程,形成专家共识,
供生殖检验实验室人员参考,为规范精液常规分析提
供帮助。

图2 精液常规分析流程
 中国男科学杂志 2023 年第 37 卷第 2 期 11

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