i

APPROVAL SHEET REPORT OF

BIOCHEMISTRY PRACTICUM

URINE

Arranged by:
Muhammad Raihan Al Baihaq
210105511001

It has been accepted and approved as a report of Biochemistry Experiment

Makassar, May 2023

Approved by,
Asisstant Coordinator, Assistant,

Rezky Amalia Tri Saldi

ID. 1913042028 ID. 1913041013

Known by,
Responsibility Lecturer
Biochemistry Experiment

Nita Magfirah Ilvas, S.Si, M.Si

NIP. 1994100420199220123
 ii

ABSTRACT

An experiment entitled urine has been conducted. This experiment aims to find
out what content is contained in urine, identify oragnik substances in urine and
measure pH in urine. Urine or urine is the waste fluid excreted by the kidneys
which will then be removed from the body through the urination process. Urinary
excretion is necessary to remove residual molkeul-molecules in the blood filtered
by the kidneys and to maintain homeostatic body fluids. In this experiment,
several tests were carried out to be able to determine the content contained in the
urine tested, namely, chloride, phosphate, magnesium, calcium, ketone, protein
coagulation, nitroperusid keratin, reducing sugar, ketones, urea formation, and
biuret formation.

Keyword: urine, organic substance, pH

 iii

ABSTRAK

Telah dilakukan percobaan yang berjudul urine. Percobaan ini bertujuan untuk
mengetahui kandungan apa saja yang terdapat di dalam urine, mengidentifikasi
zat oragnik dalam urine serta mengukur pH pada urine. Urin atau air seni adalah
cairan sisa yang diekskresikan oleh ginjal yang kemudian akan dikeluarkan dari
dalam tubuh melalui proses urinisasi. Ekskresi urin diperlukan untuk membuang
molekul-molkeul sisa dalam darah yang disaring oleh ginjal dan untuk menjaga
homeostatis cairan tubuh. Pada percobaan ini dilakukan beberapa uji untuk dapat
mengetahui kandungan yang terdapat pada urine yang diuji yaitu, uji klorida,
fosfat, magnesium, kalsium, keton, koagulasi protein, nitroperusid keratin, gula
pereduksi, keton, pembentukan urea, dan pembentukan biuret.

Kata kunci: urine, zat organik, pH

 iv

TABLE OF CONTENT

APPROVAL SHEET REPORT OF ..................................................................... i

ABSTRACT ........................................................................................................... ii
ABSTRAK ............................................................................................................ iii
TABLE OF CONTENT ....................................................................................... iv
CHAPTER I ........................................................................................................... 1
A. Background .................................................................................................. 1
B. Problem Formulation ................................................................................... 1
D. Benefits of Experiment ................................................................................ 2
CHAPTER II ......................................................................................................... 3
CHAPTER III ....................................................................................................... 8
A. Apparatus and Chemicals ................................................................................ 8
1. Apparatus .................................................................................................. 8
2. Chemicals ................................................................................................. 8
B. Work Procedure ........................................................................................... 8
BAB IV ................................................................................................................. 11
A. Observation Result ..................................................................................... 11
B. Discussion .................................................................................................. 13
BAB V................................................................................................................... 22
A. Conclussion ................................................................................................ 22
B. Suggestion .................................................................................................. 22
BLIBIOGRAPHY ............................................................................................... 23
 1

CHAPTER I
INTRODUCTION

A. Background
Urine is a metabolic product containing various substances that are no
longer used by the body. These substances such as nitrogen, urea, and
ammonia. Urine content is an indication of various facial functions in the body
related to metabolism and excretion, including the condition of the kidneys,
liver, and pancreas.
Urine is not only waste substance of metabolic products that must be
disposed of because it is a useless fluid, but the urine can also be used to
detected a disease or infection that occurs in a person’s body. For example,
someone suffers from a disease in the genital urea or urinary tract infection,
then in the urine test will be found microorganism that cause the infection. In
the urine, there are microorganisms because the organs, urinary tract there is
another something else that cause the infection.
The main function of urine is to remove waste substances such as toxins or
drugs from the body. It is common assumption that urine is dirty substances.
This is related to the presence of metabolic waste substances that must be
disposed of because these waste substances will cause toxins in the body if it
not removed.
Accordance to the purpose of the experiment, this experiment has been done
with many test of the substance that containing by the urine
B. Problem Formulation
The formulation of the problem in this experiment are;
1. What is the content of ammonia, chlorine, protein and glucose in the urine?
2. What is the pH of the urine?
3. Are there organic substances in the urine?

C. The Aim of Experiment

Based on the formulation of the problem, the objectives of the experiment
include:
 2

1. To know the content of ammonia, chlorine, protein and glucose in urine.

2. To know the amount of pH in urine.
3. To know the content of organic substances in the urine.
D. Benefits of Experiment
1. Can determine the content of ammonia, chlorine, protein and glucose in the
urine.
2. Can determine the amount of pH in urine.
3. Can determine the content of organic substances in the urine.
 3

CHAPTER II
LITERATURE REVIEW

Urine is a complex solution that contains organic and non-organic

compounds. Most of these ingredients come from unused materials from the
body's metabolism or products derived from food. Urine is a solution of salt (NaCl
and KCL), urea, metabolism, and organic materials such as calcium, magnesium,
ammonia, phosphate, and sulfate. Certain substances are present in urine in
pathological conditions for example, bile, glucose (Nugraha et.al, 2019).
Urine is actually a fluid biopsy of the kidney and provides a ―fountain‖ of
information The kidney is the only organ with such a noninvasive means by which
to directly evaluate its status. In addition, because urine is an ultrafiltrate of the
plasma, it can be used to evaluate and monitor body homeostasis and many
metabolic disease processes. Usually, urine specimens are readily obtainable, and
their collection inconveniences the patient only briefly. Some individuals feel
uncomfortable discussing body fluids and body function (Brunzel, 2013: 38)
The new normal urine is always clear, pH 4.8 – 7.4. The yellowish color of
the gall due to the influence of colored pigments and unpleasant smell. Water is
the largest component of urine contained in inorganic salts in the form of cations,
such as Na+, K+, Ca 2+, Mg 2+, NH4+ a little Fe3+, Cu 2+, Zn 2+
, while
compounds in the form of anions, such as Cl-, PO 4-, SO42-, -
CO3 , and a little
NO3+. Some organic compounds contained in urine are waste from metabolic
processes, including ureum, organic acids (acetic acid, formic acid, butyric acid,
citric acid, ocralic acid, lactic acid, glucuronic acid, acid some enzymes (amilose,
trypsin, lipase), several hormones (sex hormones and vitamins (vitamin C and
vitamin B), found in the urine as well. Potological urine may contain protein,
glucose, acetone, bilirubin, urobilinogen, and uribilin (Sumardjo, 2009).
Normal urine is usually clear but it may become cloudy due to the
precipitation of amorphous phosphates in alkaline urine, or amorphous urates in
an acid urine. Amorphous phosphates are a white precipitate which will dissolve
when acid is added. Amorphous urates frequently have a pink color from urinary
 4

pigments, and they will dissolve if the specimen is heated. Urine can be cloudy
from the presence of leukocytes or epithelial cells. The presence of these cells can
be confirmed by microscopic examination of the sediment. Bacteria can also
cause cloudiness, especially if the specimen has been Chapter 3—Collection and
Physical Examination of Urine 29 sitting at room temperature. Mucus can give the
urine a hazy appearance, and RBCs can result in a smoky or turbid urine. Fat and
chyle give urine a milky appearance (Mund & Shanahan, 2011: 29).
Urine formation is the primary excretory function of the kidneys. Urine
formation consists of three processes: plasma filtration at the glomeruli followed
by reabsorption and secretion of selective components by the renal tubules.
Through these processes, the kidneys play an important role in removal of
metabolic waste products, regulation of water and electrolytes (e.g., sodium,
chloride), and maintenance of the body’s acid-base equilibrium. The kidneys are
the true regulators of the body, determining which substances to retain and which
to excrete, regardless of what has been ingested or produced. The kidneys process
approximately 180,000 mL (125 mL/min) of filtered plasma each day into a final
urine volume of 600 to 1800 mL. The largest component of urine is water. The
principal solutes present are urea, chloride, sodium, and potassium, followed by
phosphate, sulfate, creatinine, and uric acid. Other substances initially in the
ultrafiltrate, such as glucose, bicarbonate, and albumin, are essentially completely
reabsorbed by the tubules (Brunzel, 2013: 38).
Urinary metabolites such as flavoproteins, tryptophan, and phenylalanine
were responsible for the spectral differences between these three groups. In
another study, classification sensitivity and specificity of the e-tongue in urine
analysis of bladder cancer cells can be optimized by excitation wavelengths and
sample substrates (Zniber, 2023).
The urinary system is composed of four main components: the kidney,
where urine is formed from the filtration of blood; the ureters that carry the urine
to the bladder; the bladder that stores the urine produced; and the urethra that
delivers the urine for excretion outside the body. The kidneys are paired organs
that are located inside the small of the back. They are essential for maintaining
 5

homeostasis including the regulation of body fluids, acid–base balance, electrolyte

balance, and the excretion of waste products. They are also concerned with the
maintenance of blood pressure and erythropoiesis. Renal function is influenced by
the blood volume, pressure, and composition, as well as by hormones from the
adrenal and pituitary glands (Mund & Shanahan, 2011: 12).
Iron, magnesium, zinc, manganese, and molybdenum were consumed in
much higher amounts than those available in urine. It is necessary to supplement
them to guarantee full recovery of nitrogen especially iron, magnesium, and
manganese given their important role in the metabolism of Synechocystis sp.
PCC6803. Sulfate was also consumed in higher amount than it is present in urine.
Potassium, sodium, calcium, and boron were present in urine in sufficient amount
to support full nitrogen recovery; therefore, these would not need to be
supplemented to achieve full nitrogen recovery from urine (Canizales,2023).
Creatinine formation begins in the kidneys and is completed in the liver. In
the first step of creatinine formation, which occurs in the kidneys, glycine
combines with arginine to form guanidinoacetate. In this reaction, the guanidium
group in arginine (the group that also forms urea), is transferred to glycine, and
the remaining arginine molecule is liberated as ornithine. Guanidininoacetate then
undergoes methylation in the liver by S-adenosylmethionine (SAM) to form
creatinine (Marks, 2000: 610).
A very dilute urine can give a false-negative reaction because the
concentration of protein fluctuates with the urine flow.3 Therefore, it is important
to interpret the protein result by correlating it with the specific gravity. A trace of
protein in a dilute urine indicates a greater loss of protein than does a trace
amount in a concentrated specimen. If protein is present in large quantities, the
surface tension of the urine will be altered. Agitation of the urine will cause a
white foam to develop on the surface of the urine (Brunzel, 2013: 39).
Creatine phosphate, which serves as a high-energy phosphate store (in
small amounts) that quickly produces ATP from ADP plays an important role in
contracting muscles. It also carries high-energy phosphates from mitochondria,
where ATP is formed, to myosin filaments, where ATP is used for muscle
 6

contraction. Creatine phosphate is an unstable compound. Creatine phosphate

forms a ring structure spontaneously into creatinine. Creatinine cannot be
metabolized further. This compound is excreted through urine. In individuals with
restricted diets, creatinine excretion reflects that loss of compounds providing
methyl groups is displaced by SAM (Marks, 2000).
Measuring the amount of urine is useful to help determine the presence of
kidney disorders and abnormalities in body fluid balance. Urine volume is closely
related to diuretic use because it can cause diuresis. Diuretics are compounds or
drugs that can increase urine volume. The term diuresis itself has two meanings,
the first indicates an increase in the volume of urine produced and the second
indicates the amount of solute release in the urine (Suratman, 2003).
Factors that can affect the results of urine examination are the time delay
in urine examination which causes bacteria to multiply to interfere with the results
of glucose examination. The use of inappropriate preservatives that can cause
urine glucose levels or results to interfere with the results of the examination. The
damage to some urine sediments such as uric acid and phosphate settles, making
microscopic examination difficult. Exposure to free air causes ketones to be easily
oxidized by air. Exposure to light can cause bilirubin and urobilinogen to oxidize
easily. Another thing that can affect the results of the examination is that if the
urine contains a lot of albumin, then urine can be reduced (Sufia, et.al, 2018).
Due to the dynamic nature of cfDNA in the urine of NSCLC patients,
collecting multiple urine samples per patient could also increase the accuracy of
NSCLC detection in urine. A genome-wide screen across gene promoter regions
using urinary cfDNA of nonmetastatic NSCLC patients may yield more accurate
biomarkers applicable to urine samples. The combination of DNA methylation
with other ctDNA aberrations, such as mutations, copy number alterations or
differences in fragment lengths, but also non-DNA tumor derivatives in urine such
as proteomics or metabolomics, might further improve the performance of urine-
based cancer tests (Wever, 2022).
In urea reacted with NaOH and CuSO4 which is then heated will produce
a purple solution which indicates there are peptide bonds and the presence of
 7

biuret. This is in accordance with the theory that if urea is heated it will form
ammonia that smells rancid, cyanuric acid and biuret. The reactions that occur in
this experiment, namely:

H2N HN OH
NH2
C=O HN C

NH3 NH
H2N :

C
H

H O +NH3 HN OH

amoniak

O O
H2N C
OH
NH

N N
C

H2N O
OH N OH

(Tim Dosen Biokimia, 2016: 23)

The presence of significant amounts of glucose in the urine is called
glycosuria (or glucosuria). The quantity of glucose that appears in the urine is
dependent upon the blood glucose level, the rate of glomerular filtration, and the
degree of tubular reabsorption. Usually, glucose will not be present in the urine
until the blood level exceeds 160–180 mg/dL, which is the normal renal threshold
for glucose. When blood glucose exceeds the renal threshold, the tubules cannot
reabsorb all of the filtered glucose, and so glycosuria occurs. Normally, this level
is not exceeded even after the ingestion of a large quantity of carbohydrate. A
small amount of glucose may be present in the normal urine, but the level in an
adult only about 2–20 mg of glucose per 100 mL(Mund & Shanahan, 2011: 39).
 8

CHAPTER III
EXPERIMENTAL METHOD

A. Apparatus and Chemicals

1. Apparatus
The appparatus we used in this experiment are big test tube, medium tet tube,
big test tube rack, medium test tube rack, drop pipette, hot plate, analytical
balance, spatula, 50 ml measuring cup, 10 ml measuring cup, ordinary funnel, 800
ml beaker glass, small watch glass, stirring rod, 250 ml erlenmeyer, spray bottle,
spirit burner, asbestos gauze, tripod, rough rag, and soft cloth.
2. Chemicals
The chemicals we used in this experiment are 0,1 M silver nitrate, ammonium
molibdate, concentrated nitric acid, 0,1 M barium chloride, concentrated
hydrochloric acid, ammonium oxalic, concentrated acetic acid, glacial acetic acid,
0,1 M sodium hydroxide, ammonium hydroxide, ammonium sulfate, concentrated
ammonium hydroxide, 0,1 M sodium nitroperiside, 5% sodium nitroperuside, 2,5
M sodium hydroxide, copper sulfate, aquadest, urea, 0,04% phenol red, soybeen,
fehling reagent, benedict reagent, tollens reagent, filter paper, litmus paper, and
lable.
B. Work Procedure
1. Cl- Test
Insert 3 ml of urine into a test tube then add 5 drops of AgNO3. After that,
observe the change.
2. PO42-Test
Insert 3 ml of urine into a test tube then add 1 ml of (NH4)2Mo5O24 5 drops of
concentrated HNO3. After that, observe the change.
3. SO42-Test
Insert 3 ml of urine into a test tube then add 5 drops of 0,1 M BaCl 2. After
that, observe the change.
4. Ca2+ Test
 9

Insert 5 ml of urine into a test tube then add 5 drops of saturated (NH4)2C2O4.
After that, add 15 drops of concentrated CH3COOH and observe the change.
5. Mg2+Test
Insert 10 ml of urine into a test tube then add 15 drops of NaOH, after
dripping, test with red litmus paper dripped with NaOH to prove the base state.
After that, add 10 drops of concentrated CH3COOH, after dripping, test with blue
litmus paper dripped with CH3COOH to prove the acid state. Then, add 10 drops
of saturated (NH4)2C2O4 untull formed prepitate and on the filtrat added 10 drops
of NH4OH.
6. Keton Test
Insert 10 ml of urine into a test tube then add (NH4)SO4 solid and 3 drops of
concentrated NH4OH. After that, mix well and let it stand for 30 minutes.
7. test
Insert 5 ml of urine into a test tube then add CaFeN6(Na)20 0,1 M and 10
drops of NaOH untill it turns red. After that, heated and acidify with CH 3COOH
then heated again for 1 minute.
8. Reducing Sugar Test
a. Fehling Reagent
Insert 10 ml of urine into a test tube then add 5 drops of fehling
reagent then heated.After that repeat the step while change the urine with
glucose, insert 10 ml of glucose 1% into a test tube and add 5 drops of
fehling reagent then heated.
b. Benedict Reagent
Insert 10 ml of urine into a test tube then add 5 drops of benedict
reagent then heated.After that repeat the step while change the urine with
glucose, insert 10 ml of glucose 1% into a test tube and add 5 drops of
benedict reagent then heated.

c. Tollens Reagent
Insert 10 ml of urine into a test tube then add 5 drops of tollens
reagent then heated.After that repeat the step while change the urine with
 10

glucose, insert 10 ml of glucose 1% into a test tube and add 5 drops of tollens
reagent then heated.
9. Protein Coagulation
5 ml of urine boiled for 2 minutes then add 10 drops of CH3COOH. After
that, record all the result.
10. Decomposition Urea with Urease
Into 3 ml of urea 0.1 m added 4 drops of 0.04% phenol red. After that, add 20
drops of NaOH 0,1 M if the solution not yet formed a pink color. After that, add
0,5 gram of soybeen and shake it. Observe the change.
11. Biuret Formation
Carefully heat 1 gram of urea in a test tube, pay attention to the smell that
arises after melting. After that, add 2 ml of H2O , shake it then add 10 ml of of
NaOH 2,5 N and 15 drops of CuSO4 until a color change occurs.
 11

BAB IV
RESULT AND DISCUSSION

A. Observation Result

No Activity Result
1. Cl- Test

3 mL of urine + 5 drops of AgNO3 0,1 M Yellow solution with white

precipitate
2. PO43- Test

3 mL of urine + 1 mL of (NH4)2Mo7O24 1 M
→ Yellow solution
+ 5 drops of concentrated HNO3 → Turbid green solution with
yellow precipitate
3. SO42- Test

3 mL of urine + 3 drops of BaCl2

0,1 M→ Turbid yellow solution
+ 5 drops of concentrated HCl + shake →
Clear yellow solution
2+
4. Ca Test

5 mL of urine + 5 drops of saturated

(NH4)2C2O7 → Yellow solution
+ 15 drops of concentrated CH3COOH → Turbid yellow solution with
white precipitate
2+
5. Mg Test

10 mL of urine + NaOH 0,1 N → Yellow solution

+ 10 drops of CH3COOH + litmus paper →
+ 10 drops of (NH4)2C2O7 →
Filter the solution →
Filtrate + 10 drops of NH4OH→
6. Ketonic Test
Turbid solution, litmus
paper turns to red
Turbid yellow solution with
white precipitate
Filtrate: yellow solution
Turbid yellow solution

10 mL of urine + (NH4)2SO4 solid + 3 drops

of → Yellow solution
+ concentrated NH4OH →
Mix well and let it stand for a while → Yellow solution

7. Xanhydrol Test
 12

5 mL of urine + 5 drops of C5FeN6(Na)2O20

0,1 m → Turbid orange solution
+ 10 drops of NaOH → Brick red solution
Heated → Dark green solution with
brown precipitate
+ CH3COOH glacial → Dark green solution
Heated for 1 minute Dark green solution
8. Reducing Sugar Test

 Fehling Reagent
10 mL of urine + 5 drops of fehling
reagent → Colorless solution
Heated → Colorless solution
10 mL of glucose 1% + 5 drops of
fehling reagent → Colorless solution
Heated → Colorless solution
 Benedict Reagent
10 mL of urine + 5 drops of benedict
reagent → Light blue solution
Heated → Light blue solution
10 mL of glucose 1% + 5 drops of
benedict reagent → Light blue solution
Heated → Light blue solution
 Tollens Reagent
10 mL of urine + 5 drops of tollens
reagent → Colorless solution
Heated → Colorless solution
10 mL of glucose 1% + 5 drops of
tollens reagent → Light yellow solution
Heated → Light yellow solution
9. Protein coagulation

5 mL of urine boiled for 2 minutes → Yellow solution

+ 10 drops of CH3COOH → Turbid yellow solution
10. Decomposition of Urea with Urease

3 mL of urea + 4 drops of phenol red 0,04%

→ Colorless solution
+ 20 drops of NaOH 0,1 M → Colorless solution
+ 0,5 gram of soybean → Turbid yellow solution and
white precipitate
11. Biuret Formation

1 gram of urea was heated → Formed crystal

+ 2 mL of H2O → Turbid solution
 13

+ 1 mL of NaOH 2,5 M → Turbid solution

+ 15 drops of CuSO4 solution → Purple solution

B. Discussion
Percobaan ini bertujuan untuk mengidentifikasi zat-zat yang terkandung
dalam urine dan membedakan antara urin normal dan urin abnormal. Urine adalah
cairan sisa reaksi biokimiawi rumit yang terjadi di dalam tubuh, yang dibuang dari
dalam tubuh melalui sistem saluran kencing yang terdiri atas ginjal, ureter,
kandung kencing, dan uretra. Urin mengandung berbagai bahan yang berlebihan
dan tidak dipergunakan lagi oleh tubuh (Sari, 2010: 326).
Air merupakan komponen terbesar dari urine yang terkandung di dalamnya
garam-garam anorganik yang berupa kation, seperti Na+, K+, Ca2+, Mg2+, NH4+
sedikit Fe3+, Cu2+, Zn2+, sedangkan senyawa berupa anion, seperti Cl-, PO4-, SO42-,
CO3-, dan sedikit NO3+. Sebagian senyawa organik yang terdapat dalam urine
merupakan sampah dari proses metabolisme, antara lain ureum, asam organik
(asam asetat, asam format, asam butirat, asam sitrat, asam okralat, asam laktat,
asam glukuronat, asam beberapa enzim (amilose, tripsin, lipase), beberapa
hormon (hormon kelamin dan vitamin (vitamin C dan vitamin B), terdapat dalam
urin juga. Urin potologis kemungkinan mengandung protein, glukosa, aseton,
bilirubin, urobilinogen, dan uribilin (Sumardjo, 2006: 19).
Urine yang digunakan pada percobaan ini adalah urine laki-laki. Hal ini
dikarenakan kandungan kreatinin dalam urine laki-laki lebih besar dibandingkan
dengan urine perempuan. Kreatinin banyak dihasilkan pada jaringan otot.
Berdasarkan hasil eksperimen, kadar kreatinin pada laki-laki adalah 1,507 ± 0,599
gr/24 jam dan perempuan adalah 1,280 ± 0,312 gr/24 jam (Elistiana, 2006).
Adapun urine yang digunakan ialah urine setelah bangun tidur di pagi hari. Hal ini
dikarenakan pada saat itu urine lebih pekat dan belum ada campuran lain dari
makanan dan minuman yang dikonsumsi sehingga cocok untuk pengujian
kualitatif.
1. Cl- Test
Percobaan ini bertujuan untuk mengidentifikasi ion Cl- dalam urine. Langkah
awal yang dilakukan adalah mereaksikan urine dengan larutan AgNO3 0,1 M.
 14

Fungsi AgNO3 adalah untuk mengidentifikasi adanya ion Cl- pada urine dengan
membentuk endapan putih. Hasil pengamatan menunjukkan terbentuknya
endapan putih. Hal ini sesuai dengan teori bahwa jika AgNO3 direaksikan dengan
Cl- maka akan membentuk endapan AgCl putih (svehla,1985). Hal ini
menandakan bahwa urine mengandung zat-zat organik yang salah satunya adalah
Cl-. Adapun reaksi yang terjadi, yaitu :
Cl- + AgNO3 → AgCl (putih) ↓+ NO3-
(perak nitrat) (perak klorida)

Hasil pengujian menunjukkan bahwa urin mengandung ion Cl-. Ion Cl-
berfungsi untuk menjaga kesetimbangan asam basa dalam tubuh. Adanya
kandungan Cl- dalam urin merupakan hal yang biasa karena apabila Cl- tidak
dikeluarkan oleh tubuh maka akan menimbulkan penyakit.
2. PO43- Test
Percobaan ini bertujuan untuk mengidentifikasi ion PO43- dalam urine
dengan mereaksikan urine dengan ammonium molibdat (NH4)2Mo7O24 0,1 M
yang berfungsi untuk mengikat PO43- yang ada dalam urine. Kemudian
ditambahkan larutan HNO3 pekat yang berfungsi sebagai katalis yang dapat
mempercepat reaksi. Hasil pengamatan menunjukkan terbentuknya endapan
kuning kehijauan yang menandakan bahwa terdapat ion PO43- dalam urine. Hal ini
sesuai dengan teori menurut (Svehla, 1985) yang menyatakan bahwa jika pada
reaksi urin dengan ammonium molibdat akan menghasilkan endapan kuning,
maka urine tersebut mengandung ion PO43-. Adapun reaksi yang terjadi, yaitu :
PO43- + 3NH4+ + 12MoO42- + 23H+ → (NH4)3[P(Mo3O10)4]↓ + 12H2O
(kuning kehijauan)

3. SO42- Test
Reaksi antara ion SO42-dengan larutan BaCl2 akan menghasilkan endapan
putih barium sulfat yang tak larut dalam asam klorida encer panas dan asam nitrat
encer, tapi larut didalam asam klorida pekat. Penambahan HCl berfungsi sebagai
pemberi suasana asam dan sebagai katalis yang dapat mempercepat reaksi.
Adapun reaksi yang terjadi yaitu:
SO42- + BaCI2 → BaSO4(putih) ↓ + 2Cl-
(barium klorida) (barium sulfat)
 15

Berdasarkan hasil percobaan, dapat disimpulkan bahwa urine yang diujikan tidak
mengandung ion SO42- karena tidak terbentuk endapan putih. Adanya SO42-
ditandai dengan adanya endapan putih yang merupakan hasil reaksi antara BaCl2
dan ion SO42- (Svehla, 1985).
4. Uji Ca2+
Percobaan ini bertujuan untuk mengidentifikasi ion Ca2+ dalam urine
dengan mereaksikan ammonium oksalat jenuh kedalam urine. Penambahan
ammonium oksalat ini berfungsi untuk mengikat ion Ca2+. Kemudian
ditambahkan asam asetat yang berfungsi sebagai katalis. Hasil pengamatan
menunjukkan larutan berwarna kuning dan terdapat endapan putih dari CaC2O4.
Hasil ini menunjukkan uji positif dan sesuai dengan teori yang menyatakan bahwa
identifikasi ion Ca+ digunakan reagensia berupa amonium oksalat, dimana reaksi
antara ion Ca+ dengan amonium oksalat akan menghasilkan endapan putih
kalsium oksalat (Svehla, 1985). Hal ini sesuai dengan teori bahwa didalam urin
terkandung garam-garam anorganik yang berupa kation, seperti Ca2+. Reaksinya
yaitu:
Ca+ + (NH4)2C2O4 → Ca(C2O4)↓(endapan putih)+ 2NH4+
(kalsium oksalat)

5. Uji Mg2+
Pengidentifikasian ini dilakukan dengan menambahkan NaOH ke dalam
urine sampai suasana basa. Pada percobaan ini, suasana basa diketahui dengan
menggunakan kertas lakmus merah yang berubah menjadi biru. NaOH juga
berfungsi sebagai pereaksi yang dapat mengikat Mg2+ membentuk Mg(OH)2.
Setelah penambahan NaOH, menunjukkan terbentuknya endapan putih. Hasil ini
sesuai dengan teori menurut (Svehla, 1985) yang menyatakan bahwa reaksi antara
ion magnesium dengan larutan natrium hidroksida akan menghasilkan endapan
putih magnesium hidroksida, yang tak larut dalam reagensia berlebih, tetapi
mudah larut dalam garam-garam amonium. Reaksinya yaitu :
Mg2+ + 2NaOH → Mg(OH)2↓ + 2Na+
(endapan putih)
 16

Larutan kemudian ditambahkan asam asetat yang berfungsi sebagai

pemberi suasana asam dan mengurai Mg(OH)2 menjadi Mg2+. Suasana asam
dalam larutan diuji dengan menggunakan kertas lakmus biru yang berubah
menjadi merah yang menandakan larutan bersifat asam. Selanjutnya larutan
direaksikan dengan ammonium oksalat untuk mengendapkan ion Mg2+ dan
menghasilkan endapan putih MgC2O4. Larutan kemudian disaring, filtrat yang
dihasilkan kemudian ditambahkan NH4OH menghasilkan larutan bening. Hasil
percobaan menunjukkan terbentuknya endapan putih yang menandakan uji positif
adanya Mg2+ dalam urine. Hal ini sesuai dengan teori yang menyatakan bahwa
dalam urin mengandung ion Mg2+ (Sumardjo, 2006: 19). Reaksi yang terjadi
yaitu:

Mg(OH)2↓ + CH3COOH → CH3COO- + Mg2+ + H2O

Mg2+ + (NH4)2C2O4 → MgC2O4↓ + 2NH4+
(endapan putih)

6. Uji Keton
Hasil perlakuan adalah negatif, ini berarti tubuh tidak kekurangan
glukosa.Badan keton diproduksi ketika karbohidrat tidak dapat digunakan
untukmenghasilkan energi yang disebabkan oleh : gangguan metabolisme
karbohidrat (mis. diabetes mellitusyang tidak terkontrol), kurangnya asupan
karbohidrat (kelaparan, diet tidak seimbang: tinggi lemak – rendah karbohidrat),
gangguan absorbsi karbohidrat(kelainan gastrointestinal), atau gangguan
mobilisasiglukosa, sehingga tubuh mengambil simpanan asam lemak untuk
dibakar.
Badanketon terdiri dari 3 senyawa, yaitu aseton, asam aseotasetat, dan
asam β-hidroksibutirat, yang merupakan produk metabolisme lemak dan asam
lemak yang berlebihan. Peningkatan kadar keton dalam darah akan
menimbulkanketosis sehingga dapat menghabiskan cadangan basa (mis.
bikarbonat, HCO3) dalam tubuh dan menyebabkan asidosis. Pada ketoasidosis
diabetik, keton serummeningkat hingga mencapai lebih dari 50 mg/dl. Keton
memiliki struktur yang kecil dan dapat diekskresikan ke dalam urin. Namun,
 17

kenaikan kadarnya pertama kali tampak pada plasma atu serum, kemudian
baru urin.
Ketonuria (keton dalam urin) terjadi akibat ketosis. Benda keton yang
dijumpai di urine terutama adalah aseton dan asam asetoasetat. Uji keton positif
dapat dijumpai pada: Asidosis diabetic (ketoasidosis), kelaparan atau malnutrisi,
diet rendah karbohidrat, berpuasa, muntah yang berat, pingsan akibat panas,
kematian janin.Pengaruh obat: asam askorbat, senyawa levodopa, insulin,
isopropilalkohol, paraldehida, piridium, zat warna yang digunakan untuk berbagai
uji(bromsulfoftalein dan fenosulfonftalein).
Faktor yang Dapat Mempengaruhi Hasil Laboratorium: Diet rendah
karbohidrat atau tinggi lemakdapat menyebabkan temuan positif palsu. Obat
tertentu (Lihat pengaruh obat). Urin disimpan pada temperature ruangan dalam
waktu yang lama dapat menyebabkan hasil uji negaif palsu. Adanya bakteri
dalam urin dapat menyebabkan kehilanganasam asetoasetat. Anak penderita
diabetes cenderung mengalami ketonuria daripada penderita dewasa.

7. Uji Nitroperusid
Urine direaksikan dengan Na-nitroprusid yang berfungsi sebagai agen
yang mengidentifikasi adanya gugus NO2 dan kreatinin dalam urine. Hasil
pengamatan menunjukkan terbentuknya larutan berwarna jingga.
Kemudian ditambahkan NaOH untuk memberi suasana asam pada larutan,
sedangkan penambahan CH3COOH berfungsi untuk mengasamkan larutan agar
warna merah pada larutan berubah menjadi warna hijau kemudian biru karena
terbentuk biruprusian (Tim Dosen Biokimia, 2016: 20-21). Selanjutnya dilakukan
pemanasan yang bertujuan untuk mempercepat reaksi. Pemanasan dilakukan
apabila pada larutan belum terbentuk biruprusian. Hasil pengamatan menunjukka
terbentuknya larutan berwarna hijau dengan cincin biru didalamnya. Hal ini sesuai
dengan teori yang menyatakan bahwa akan terbentuk larutan berwarna hijau yang
didalamnya terdapat endapan biruprusian yang menandakan bahwa didalam urin
terdapat gugus NO2 dan kreatinin.
Adapun reaksi yang seharusnya terjadi, yaitu:
 18

Na[Fe(CN)5NO] + NaOH + 2CH3COOH → [Fe(CN)5NO5]2+ + OH-

(biru prusi)

Identifikasi adanya gugus NO2 dan kreatinin dalam urin dengan

menggunakan reagensia atau pereaksi Ba(OH)2 diperoleh larutan berwarna jingga.
Hasil ini tidak dapat dijadikan sebagai acuan dalam mengidentifikasi adanya
kandungan gugus NO2 dan kreatinin dalam urin. Hal ini dikarenakan tidak
diperoleh endapan biruprusian sebab larutan bersifat basa dengan adanya
penambahan Ba(OH)2. Sedangkan berdasarkan teori warna biruprusian akan
muncul apabila kedalam larutan dimasukkan reagensia atau pereaksi yang bersifat
asam salah satu contohnya yaitu asam asetat (Tim Dosen Biokimia, 2016: 20).
8. Uji Gula Peruduksi
a. Fehling
Hasil percobaan menunjukkan larutan tidak berwarna pada urin dan
glukosa. Hal ini tidak sesuai dengan teori bahwa adanya gula pereduksi dalam
urin dapat diidentifikasi dengan adanya endapan merah bata yang terbentuk,
akibat reaksi reduksi ion Cu2+ menjadi Cu+ yang berwarna merah bata (Tim
Dosen Biokimia, 2016: 21). Tidak terbentuknya endapan merah bata pada
kedua sampel bisa diakibatkan bahan yang sudah tidak bagus taua kesalahan
saat melakukan percobaan. Adapun reaksinya, yaitu:
CH2OH CH2OH CH2OH
o OH
-H2O
OH OH C O C O
+ 2Cu2+ + 5OH- OH
HO OH HO
+ Cu2O + 3H2O
HO O-
OH (pereaksi fehling) OH merah bata
(D-glukosa) OH
(asam glukonat)

b. Benedict
Pengujian ini diawali dengan menambahkan pereaksi benedict ke
dalam urine dan larutan glukosa didalam tabung reaksi yang berbeda,
kemudian dipanaskan. Pemanasan ini bertujuan untuk mempercepat reaksi.
Hasil percobaan menunjukkan larutan berwarna biru muda pada urin dan
glukosa. Hasil ini menunjukkan bahwa urine yang diuji tidak mengandung
gula pereduksi, sedangkan pada larutan glukosa terdapat gula pereduksi.
 19

Adanya gula pereduksi dalam urin dapat diidentifikasi dengan adanya

endapan merah bata yang terbentuk, akibat reaksi reduksi ion Cu2+ menjadi
Cu+ yang berwarna merah bata (Tim Dosen Biokimia, 2016: 21). Adapun
reaksi yang terjadi yaitu:
CH2OH CH2OH CH2OH
o OH
-H2O
OH OH C O C O
HO + 2Cu2+ + 5OH- OH
HO OH HO O-
+ Cu2O + 3H2O
OH OH
glukosa
OH merah bata

asam glukonat

c. Tollens
Pereaksi Tollens yang akan digunakan dibuat dengan mereaksikan
larutan AgNO3 dengan larutan NaOH. Pengujian ini diawali dengan
menambahkan pereaksi Tollens ke urine dan larutan glukosa dalam tabung
reaksi yang berbeda. Kemudian dipanaskan untuk mempercepat reaksi. Hasil
percobaan menunjukkan larutan tidak berwarna pada urin dan glukosa.
Identifikasi adanya gula pereduksi dalam urin dengan menggunakan pereaksi
tollens dapat diketahui dengan terbentuknya cermin perak yang terlihat pada
dinding tabung reaksi, dimana cermin perak yang terbentuk merupakan hasil
reaksi reduksi ion Ag+ menjadi Ag (Tim Dosen Biokimia, 2017 : 21). Adapun
reaksi yang terjadi yaitu :

CH2OH CH2OH CH2OH

O O AgNO3 O
-H2O OH + Ag
OH C= O OH C= O
OH OH OH
OH
OH cermin perak
OH OH
glukosa

9. Protein Coagulation
Percobaan ini bertujuan untuk mengetahui adanya protein dalam urine
yang ditunjukkan dengan pembentukan gumpulan setelah penambahan asam
asetat berlebih. Menurut (Husain, 2017: 72) penambahan asam akan
menyebabkan protein terdenaturasi. Berdasarkan hasil percobaan, diperoleh
larutan tak kuning keruh yang menunjukkan bahwa didalam urin yang diuji tidak
 20

terdapat protein. Keberadaan sedikit protein dalam urine dapat disebabkan karena
suatu infeksi atau pendarahan di dalam ginjal, kandung kemih atau saluran air
kemih,tetapi kalah kehadiran protein dalam jumlah besar menunjukkan adanya
penyakit ginjal (Wahyuni, 2012). Adapun reaksi yang terjadi:

COO- COOH

H3N+ - C - H + H+ H3N+ - C - H
R R

(asam –
𝛼 amino) (ion zwitter)

10. Decomposition of Urea

Percobaan ini bertujuan untuk mengidentifikasi adanya urea pada urine
melalui proses penguraian urea oleh enzim urease. Pengujian diawali dengan
penambahan fenol merah kedalam larutan urea 0,1 M. Fenol merah berfungsi
sebagai indikator basa, kemudian di tambahkan NaOH sampai berubah warna
menghasilkan larutan warna merah jambu. Penambahan NaOH berfungsi untuk
mengetahui apakah larutan sudah bersifat basa atau belum. Kemudian
ditambahkan serbuk kedelai untuk menghasilkan enzim urease yang dapat
mengalami penguraian menjadi ammonia dan CO2. Berdasarkan pengamatan,
hasil yang diperoleh pada percobaan ini adalah terdapat endapan kacang putih.
Reaksi yang terjadi:

O
Urease
C
CO2 + 2NH3
+ H2O
H2N NH2

urea

Hasil yang diperoleh ini menunjukan uji positif, bahwa didalam urine
terdapat urea. Urine mengandung berbagai bahan yang berlebihan dan tidak
dipergunakan lagi oleh tubuh, salah satunya yaitu urea (Sari, 2010: 326).
11. Pembentukan Biuret
Percobaan ini bertujuan untuk mengetahui adanya ikatan peptida yang
dapat diketahui dengan terbentuknya biuret. Pada percobaan ini, urea dan urine
 21

dipanaskan untuk melepaskan kandungan ammonia yang ditandai dengan bau

amonia yang muncul pada saat pemanasan. Proses pemanasan pada urea
dilakukan bertujuan agar padatan urea melebur, dan dipanaskan kembali hingga
terbentuk padatan putih.
Padatan urea dan urin masing-masing ditambahkan NaOH dan CuSO4.
Berdasarkan hasil pengamatan, pada urea menunjukkan larutan berwarna ungu
yang menandakan terdapat ikatan peptida dan adanya biuret. Hal ini sesuai dengan
teori bahwa jika urea dipanaskan maka akan terbentuk amoniak yang berbau
tengik, asam sianurat dan biuret (0 ku lppI'll Dosen Biokimia, 2016: 23). Adapun
reaksi yang terjadi percobaan ini, yaitu :

H2N HN OH
NH2
C=O HN C

NH3 NH
H2N :

C
H

H O +NH3 HN OH

amoniak

O O
H2N C
OH
NH

N N
C

H2N O
OH N OH
 22

BAB V
PENUTUP

A. Conclussion
a. Based on the experimental results, the urine samples tested contained
inorganic substances, namely Cl-, SO 4 2-, Ca2 +, PO 4 3-
, NH4+ and
organic substances namely creatinine and urea.
b. The urine sample tested is normal urine because it does not contain
reducing sugar.
B. Suggestion
It is expected that the next practice will be more thorough and careful in
reacting each material in the experiment, in order to obtain results that are in
accordance with the theory.
 23

BLIBIOGRAPHY

Budiarso, Iwan T. 2002. Terapi Auto Urin. Jakarta: Penerbit PT. Gramedia Pustaka
Utama.
Canizales, S., Chen, P. H., Temmink, H., Wijffels, R. H., & Janssen, M. (2023).
Cyanobacteria cultivation on human urine for nutrients recovery. Algal
Research, 103064.
Marks, Dawn B., Allan D.Marks., dan Colleen M.Smith. 2000. Biokimia
Kedokteran Dasar. Jakarta: Penerbit Buku Kedokteran EGC.
Nugraha
Sumardjo, Damin. 2009. Pengantar Kimia. Jakarta: Penerbit Buku Kedokteran
EGC.
Suratman., Shanti Listyawati., Sutarno. 2013. Sifat Fisik Dan Kandungan Nacl
Urin Tikus Putih (Rattus Norvegicus L.) Jantan Setelah Pemberian Ekstrak
Rimpang Alangalang (Imperata Cylindrica L.) Secara Oral. Biofarmasi. Vol.
1 No. 1

1. Tim Dosen Biokimia. 2017. Penuntun Praktikum Biokimia. Makassar:

Penerbit UNM.j
Wever, B. M. M., Bach, S., Tibbesma, M., Ter Braak, T. J., Wajon, D., Dickhoff,
C., ... & Steenbergen, R. D. M. (2022). Detection of non-metastatic non-
small-cell lung cancer in urine by methylation-specific PCR analysis: A
feasibility study. Lung Cancer, 170, 156-164.
Zniber, M., Vahdatiyekta, P., & Huynh, T. P. (2022). Analysis of urine using
electronic tongue towards non-invasive cancer diagnosis. Biosensors and
Bioelectronics, 114810.
Sufia,E., Fikri, Z., Iswari. (2018). Pengaruh Kadar Glukosa Urine Metode
Benedict, Fehling Dan Stick Setelah Ditambahkan Vitamin C Dosis Tinggi/
1000 Mg. Jurnal Analis Medika Bio Sains Vol.5, No.2