INFORME TINCIÓ DE GRAM DIA 4

FONAMENT: Amb aquest dia farem la tinció de Gram-Hucker, es la tinció més

utilitzada en microbiologia per diferenciar els bacteris de grams postius i de
grams negatius.Els microorganismes tenyits amb el primer colorant (Violeta
Cristall) són els denominats Gram-positius. Es tenyeixen de violeta a causa de la
presència d'una gruixuda capa de peptidoglicà en les seves parets cel·lulars,que
reté el violeta cristall que tenyeix aquestes cèl·lules Els microorganismes tenyits
amb el colorant de contrast (safranina O) són els Gram-negatius. Es tenyeixen
de vermell, el que s'atribueix a una capa de peptidoglicà més fina, que no reté
el violeta cristall durant el procés de decoloració.La tinció de Gram-Nicolle és
una tinció diferencial en la que la Fucsina bàsica fenicada s'utilitza com un
colorant de contrast alternatiu a la Safranina per revelar certs microorganismes
Gram-negatius que, encara que acolorits, ho fan molt dèbilment.

MATERIAL:
- Ansa
- Bunsen
- Portaobjectes
- Violeta cristall
- Aigua destilada
- Yodo/lugol
- Etanol 75%
- Safranina.
- Pinsa de fusta
- Suport de tincions
- Batea
- Oli de
- Microscopi
- Plaques de petri sembrades amb les bacteries
- Oli d’inmersió
MOSTRES BIOLOGIQUES:
Bacteris en el meu cas es Bacils negatius i Cocs postius.

REACTIUS:
Violeta Cristall
Lugol
Alcohol-Acetona
Safranina
TECNICA:
1. Flamejar ansa bacteriológica i esperar que s’arrofredi.
2. Amb l’ansa treure bacetria .
3. Una cop obtinguda la bacteria ficar al portaobjectes .
4. Realitzar l’extensión i deixar-la secar a l’aire o amb ajuda del bunsen.
5. Cubrir suficient violeta cristal a la mostra i deixar actuar durante 1 minut.
6. Llimpiar la mostra amb aigua destilada.
7. Aplicar lugol durante 1 minuto mes.
8. LLimpiar la mostra amb aigua destilada
9. Ficxar la mostra amb Alcohol-Acetona 30 segons.
10. Llimpiar la mostra amb aigua destilada.
11. Tornar a cubrir amb safranina i deixar un minut.
12. Llimpiar amb aigua destilada.
13. Un cop fet tots aquests processos deixar secar el portaobjcetes i ja
podem ficar al microscopi el portaobjcetes.
VALORACIÓ:

Cocs positius Bacils negatius

Doncs la imatge igual no es veu gaire bé però a la mostra 22 un cop mirat per
microscopi vam veure Bacils negatius es veuen una coloració més rosa i la
mostra 6 son cocs positius i es veuen més violetes.*