Tel: 508-660-2221

Fax: 508-660-2224 Ammonia Reagent Set

Email: info@htmed.com Catalog №
Web：http://htidiagnostics.com HT-A107E-85
HT-A107E-340
High Technology, Inc. HT-A107E-540
ΔA = R1c - R2
Mục đích sử dụng Lưu ý: Chạy thử nghiệm trắng bằng cách sử dụng nước vào vị trí của mẫu để kiểm tra độ nhiễm bẩn. Giá trị thu được
Thuốc thử này dùng để đo Amoniac bằng enzym trong huyết tương. Đối với TRONG ỐNG NGHIỆM chỉ sử dụng chẩn đoán. đối với mẫu trắng sau đó phải được trừ đi giá trị tìm được của mẫu.

Ý nghĩa lâm sàng Hạn chế

Phần lớn Amoniac trong cơ thể được tạo ra trong hệ tiêu hóa do tác động của các enzym vi khuẩn trên nội dung của ruột
kết và từ quá trình thủy phân glutamine. Nó được loại bỏ trong gan và chuyển thành Urê thông qua một loạt các phản
ứng enzym trong chu trnh Krevs-Henseleit. Trong số các tình trạng khác, gan tiến triển bệnh và bệnh não gan làm tăng
nồng độ amoniac trong máu. Tăng canxi huyết cũng thường gặp trong sự thiếu hụt di truyền của các Enzym liên quan
đến việc chuyển đổi amoniac thành urê. Các xác định amoniac rất hữu ích trong chẩn đoán và tiên lượng Hội chứng Reye.
Tăng máu amoniac gây độc cho hệ thần kinh trung ương.
Tóm tắt thử nghiệm
Các mẫu có nồng độ amoniac vượt quá 600 umol / L (ΔA> 0,600) nên được thử nghiệm lại sau pha loãng với một thể tích
tương đương của nước cất hoặc nước đã khử ion. Nhân kết quả với 2.
Hiệu chuẩn
Có thể thu được các giá trị thử nghiệm với quy trình thử nghiệm này bằng cách sử dụng hệ số hoặc bằng cách sử dụng chất
chuẩn Amoniac. (Tham khảo vào phần Tính toán bên dưới.) Có thể sử dụng các chất chuẩn hoặc chất hiệu chuẩn
amoniac bán sẵn trên thị trường. Các tiêu chuẩn amoni sulfat cũng có thể được lấy từ Trường Cao đẳng Bệnh học
Hoa Kỳ hoặc có thể được điều chế từ amoni sulfat cấp thuốc thử hút ẩm.

Việc xác định amoniac bằng enzym cho phép đo trực tiếp hợp chất trong huyết tương, tránh được các phương pháp phân Tính toán
tách lâu và tốn công được áp dụng trong các phương pháp cũ. Xét nghiệm enzym cho một phương pháp đặc hiệu và có độ 1. Yếu tố
nhạy cao. Thử nghiệm dựa trên phản ứng sau: ΔA x 1,25 x 1000 = ΔA x 1005 = umol / L Amoniac trong mẫu
GLDH 6,22 x 1 x 0,2
NH4+ + α-KG + NADPH L-glutamate + NADP+ + H2O
Amoniac phản ứng với α-Ketoglutarate (α-KG) và nicotinamide adenine dinucleotide phosphate bị khử (NADPH) để tạo Trong đó: 1,25 = Tổng thể tích xét nghiệm(mL)
thành L-glutamate và NADP trong một phản ứng được xúc tác bởi glutamate dehydrogenase (GLDH) {L-glutamate: NAD (P) 1000 = Chuyển đổi sang thể tích lít
+ oxidoreductase (deaminating), EC 1.4 .1.3}. Lượng NADPH bị oxi hóa tính theo mol bằng hàm lượng amoniac trong mẫu. 6.22 = Hệ số tắt Millimolar của NADPH ở bước sóng 340nm
Phản ứng có thể được theo sau bởi sự giảm độ hấp thụ ở bước sóng 340nm. Thuốc thử được đựng trong hai lọ riêng biệt. Giữ 1 = Đường dẫn ánh sáng (cm)
cho các thành phần của thuốc thử được tách biệt cho đến thời điểm thử nghiệm sẽ làm tăng độ ổn định của chúng sau khi hoàn 0,2 = Thể tích của mẫu (mL)
nguyên. Việc sử dụng NADPH thay cho NADH giảm thiểu sự can thiệp của các thành phần như pyruvate và lactate Hệ số 1005 nhân với ΔA bằng nồng độ amoniac trong mẫu tính bằng umol / L.
dehydrogenase của huyết tương. 2. Tiêu chuẩn
Nồng độ của chất chuẩn x ΔA Mẫu = umol / L amoniac trong Mẫu
Thuốc thử ΔA Chuẩn
Ammonia Substrate/Reagent 1 Tính toán mẫu
Buffer 100 mmol / L 1. Hệ số
EDTA 2 mmol / L Nếu ΔA của mẫu là 0,050 thì 0,050 x 1005 = 50 umol / L amoniac trong mẫu
a-Ketoglutarate 3,4 mmol / L
2. Tiêu chuẩn
Adenosine diphosphate 0,5 mmol / L
Nồng độ amoniac chuẩn = 500 umol / L
NADPH 0,3 mmol / L
Fillers and Stabilizers ΔA của amoniac chuẩn = 0,496
pH = 8,6 ± 0,1 ΔA của mẫu = 0,115
Ammonia Enzyme/Reagent 2
Buffer 100 mmol / L 500 x 0,115 = 116 umol / L Amoniac trong mẫu
EDTA 2 mmol / L 0,496
Adenosine diphosphate 0,5 mmol / L
GLDH 400 KU / L Kiểm soát chất lượng
Fillers and Stabilizers Các biện pháp kiểm soát được khuyến nghị để theo dõi hiệu suất của xét nghiệm, giúp sàng lọc liên tục dụng
pH = 7,8 ± 0,1 cụ, thuốc thử và kỹ thuật.
Cảnh báo và phòng ngừa Giá trị bình thường
Chỉ sử dụng nước không có Amoniac, mới được khử ion hoặc nước cất. Hòa tan thuốc thử 1 và thuốc thử 2 với thể Phạm vi dự kiến được báo cáo đối với quy trình enzym được mô tả là 11 umol / L đến 35 umol / L.
tích nước ghi trên nhãn lọ. Bảo quản các dung dịch được đóng nắp chặt chẽ. Bảo quản thuốc thử và độ ổn định Mỗi phòng thí nghiệm nên thiết lập dải tham chiếu riêng của mình.
Thuốc thử khô trong lọ chưa mở sẽ ổn định cho đến ngày hết hạn trên nhãn lọ. Thuốc thử đã hoàn nguyên bền ít
nhất 15 ngày được bảo quản ở 2 ° C đến 8 ° C. Hiệu suất
Các biện pháp phòng ngừa 1. Độ tuyến tính: 600 umol / L
1. Tránh ô nhiễm amoniac từ không khí, nước và đồ thủy tinh. Có thể kiểm tra ô nhiễm amoniac bằng cách thử 2. So sánh: 60 mẫu bệnh phẩm được chia thành hai phần tương ứng và được bảo quản trong bể nước đá. Phân tích được thực
nước được sử dụng với các thuốc thử này. Tiến hành xét nghiệm trắng bằng cách thay thế nước được sử dụng hiện đồng thời ở hai địa điểm riêng biệt bằng cách sử dụng thuốc thử này trên Cobas FaraTM và thuốc thử của DuPont trên
cho mẫu.
DuPont ACATM. Các mẫu dao động ở nồng độ amoniac từ 8 umol / L đến 347 umol / L. Hệ số tương quan là 0,999 và
2. Tránh giao thông và hút thuốc trong phòng bệnh nhân và trong phòng thí nghiệm nơi thực hiện xét nghiệm. phương trình hồi quy là: y = 0,991 x - 561
Phlebotomist nên là một người không thích pha trò. Nếu bệnh nhân là người hút thuốc, rửa sạch vị trí chọc hút. 3. Độ chính xác:
Lấy máu trong phòng cấm hút thuốc. Trong vòng Run n = 10
3. Không sử dụng thuốc thử nếu độ hấp thụ của Thuốc thử 1 đọc ở bước sóng 340 nm so với mẫu trắng của Mean SD CV%
nước nhỏ hơn 1.200.
94 1,3 1,37
4. Tránh làm nhiễm bẩn thuốc thử. Nếu thuốc thử cho thấy bị nhiễm vi sinh vật, như được chỉ ra bởi độ đục, thì 209 1,47 0,70
không sử dụng. 411 0,92 0,22
5. CẢNH BÁO: Sản phẩm này chứa <0,1% natri azit. Natri azit có thể phản ứng với đường ống dẫn nước bằng chì
hoặc đồng để tạo thành các hợp chất dễ nổ. Khi thải bỏ sản phẩm này qua các đồ đạc trong hệ thống ống nước,
hãy xả với một lượng lớn nước để ngăn chặn azit tích tụ. Manufactured By
High Technology, Inc.
Thu thập và Lưu trữ Mẫu vật Tel: 1-508-660-2221 EMERGO EUROPE
Huyết tương EDTA là mẫu được lựa chọn. Việc sử dụng Heparin làm thuốc chống đông máu không được khuyến E-mail: info@htmed.com Prinsessegracht 20
khích. Lấy máu từ tĩnh mạch không bị ứ máu vào ống hút chân không EDTA; giải phóng chân không dư trong ống; www.htmed.com, http://htidiagnostics.com 2514 AP The Hague
trộn nhẹ nhàng, đặt trên đá và chuyển đến phòng thí nghiệm ngay lập tức. Tách huyết tương ra khỏi tế bào ngay lập The Netherlands
tức. Không sử dụng các mẫu đã bị tán huyết. Việc phân tích phải được thực hiện trong vòng 30 phút. Cho phép trì +31 70 345 8570
hoãn tối đa 2 giờ với huyết tương trên đá.

Sự can thiệp
Sự can thiệp chính đối với thử nghiệm này là do nhiễm Amoniac trong không khí và nước. Các biến số phân
tích và sinh lý bao gồm thuốc và các chất khác ảnh hưởng đến nồng độ Amoniac đã được liệt kê bởi Young.

Vật liệu cung cấp

Amoniac Thuốc thử ở dạng bột khô đựng trong lọ được hoàn nguyên như mô tả ở trên.
Vật liệu bắt buộc nhưng không được cung cấp
1. Thiết bị pipet chính xác
2. Cuvet có khớp, hình vuông, đường dẫn quang 1cm.
3. Chất chuẩn hoặc chất hiệu chuẩn Amoniac.
4. Máy quang phổ có thể đọc ở bước sóng 340 nm.
5. Thiết bị nhiệt độ không đổi là không cần thiết. Tuy nhiên, sử dụng cùng một nhiệt độ để xét nghiệm đối chứng
và mẫu.

Quy trình
Bước sóng: 340nm
Nhiệt độ: 25 ° C
Cuvette (hình vuông): Đường dẫn quang 1cm
Mẫu trắng: Nước
Thuốc thử 1: 1 mL
Mẫu vật: 0,2 mL
1. Pha trộn. Ủ trong 4 phút. Đọc độ hấp thụ ở bước sóng 340nm với dụng cụ đặt độ hấp thụ bằng không với mẫu
mẫu trắng. Đây là giá trị đọc R1, phải được hiệu chỉnh để bù cho việc bổ sung thể tích của Thuốc thử 2:
R1 x 0,96 = R1c
R1c được sử dụng để tính ΔA dưới đây.
2. Thêm: 0,05ml Thuốc thử 2. Trộn. Ủ. Sau 5 phút đọc lại độ hấp thụ. Đây là đọc R2. Tính sự thay đổi của độ hấp
thụ, ΔA. Sử dụng giá trị ΔA này trong phép tính dưới đây.