Tel: 508-660-2221 Creatine Kinase-MB Reagent Set

Fax: 508-660-2224
E-mail: info@htmed.com Catalog №
Web: http://htidiagnostics.com HT-C124E-65 HT-C124E-340
HT-C124E-150 HT-C124E-540
High Technology, Inc.

MỤC ĐÍCH SỬ DỤNG

CK-MB nhằm đo lường hoạt động của isoenzyme CK-MB 1. Tổng Hoạt độ CK: Xác định Hoạt độ CK toàn phần trong huyết thanh theo hướng dẫn được cung cấp
trong huyết thanh người. trong tờ hướng dẫn sử dụng Thuốc thử CK.

GIỚI THIỆU 2. Hoạt động CK-B:

Creatine kinase là các phân tử điện tử bao gồm các tiểu đơn vị M và B và tồn tại dưới dạng isoenzyme IU / L = ΔAbs. / Phút. × TV × 1000 = Abs / phút. × 1.050 × 1000
MM, MB và BB. Các tiểu đơn vị M và B khác biệt về mặt miễn dịch học; CK-MM và CK-MB lần lượt phân d × ∈ × SV1 × 6,22 × 0,050
bố chủ yếu ở cơ xương và cơ tim. Trong khi CK-BB hiện diện chủ yếu trong não và trong các mô cấu tạo = ΔAbs. / Phút. × 3376
bởi cơ trơn. Sau nhồi máu cơ tim cấp, hoạt độ CK-MB tăng lên đáng kể và mức tăng này rất đặc hiệu cho
chẩn đoán nhồi máu cơ tim trong phòng thí nghiệm. Mặc dù hoạt độ CK toàn phần thường tăng sau nhồi Where:
máu cơ tim, ở một số bệnh nhân chỉ có hoạt độ CK-MB tăng lên, trong khi CK toàn phần vẫn ở mức bình ΔAbs. / Phút. = Thay đổi độ hấp thụ trung bình mỗi phút
thường. TV = Tổng khối lượng phản ứng (1.050)
Trong các phương pháp thông thường, các isoenzyme CK được định lượng sau khi lần đầu tiên tách ba 1000 = Chuyển đổi IU / ml sang IU / L
loại bằng điện di, trao đổi anion cột, hoặc sắc ký trao đổi anion theo lô. Tuy nhiên, các phương pháp này D = Đường đi của ánh sáng tính bằng cm (1,0)
tốn nhiều thời gian. Trong thời gian gần đây, Wurzburg et al. đã giới thiệu một phương pháp ức chế miễn ∈ = Độ hấp thụ milimolar của NADH (6.22)
dịch. Phương pháp luận này là cơ sở cho thuốc thử CK-MB của chúng tôi. SV = Thể tích mẫu tính bằng ml
(0,050) 3. Hoạt động CK-MB:
NGUYÊN TẮC Hoạt động CK-MB được tính từ hoạt động CK-B như sau:
Mẫu được ủ trong thuốc thử CK-MB bao gồm kháng thể kháng CK-M. Hoạt động của CK-B không bị ức
chế được xác định bằng cách sử dụng một loạt các phản ứng sau: Hoạt động CK-MB (U / L) = CK-B Hoạt động U / L x 2 *
CK * Phân tử CK-MB là một dimer bao gồm một tiểu đơn vị B và một tiểu đơn vị M. Kháng thể tạo phức với
ADP + Creatine Phosphate ----------Creatine + ATP tiểu đơn vị M làm mất một nửa hoạt tính xúc tác của phân tử CK-MB. Do đó, hoạt độ CK-MB trong mẫu
HK bằng hai lần hoạt tính CK-B.
ATP + Glucose------------ ADP + Glucose-6-Phosphate
G6PDH Thí dụ:
G-6-P + NAD+--------- 6-Phosphogluconate + NADH + H+ Nếu sự thay đổi độ hấp thụ trung bình của bạn mỗi phút là 0,020, thì:
CK-B xúc tác quá trình phosphoryl hóa thuận nghịch của ADP, với sự có mặt của creatine phosphate, để 0,020 × 3376 = 67,5 IU / L (Hoạt động CK-B)
tạo thành ATP và creatine. Enzyme phụ trợ hexokinase (HK) xúc tác quá trình phosphoryl hóa glucose
theo định dạng ATP, để tạo ra ADP và glucose-6-phosphate (G-6-P) được oxy hóa thành 6- GHI CHÚ: Hoạt động CK-MB (IU / L) = Hoạt động
phosphogluconate với việc sản xuất đồng thời NADH. Tốc độ hình thành NADH, được đo ở bước sóng CK-B (IU / L) × 2 Ví dụ: nếu hoạt động CK-B là
340 nm, tỷ lệ thuận với hoạt tính CK-B huyết thanh. 67,5 IU / L thì
CK-MB = 67,5 × 2 = 135,0
THÀNH PHẦN THU HỒI Phần trăm hoạt động của CK-MB trong mẫu là:
CK-MB Reagent:
Creatine Phosphate 30 mM; Adenosine-5'-Phosphate 2mM; Nicotinamide Adenine Dinucleotide (NAD) 2mM; % Hoạt động CK-MB = Hoạt động CK-
Hexokinase (Yeast) ≥ 3000 U/L; Glucose-6-Phosphate Dehydrogenase (Bacterial) ≥ 2000 U/L MB × 100 Tổng hoạt động CK
Ví dụ, nếu tổng hoạt độ CK là 1007 IU / L, hoạt độ CK-B
CẢNH BÁO VÀ THẬN TRỌNG là 67,5 IU / L và hoạt động CK-MB là 135 IU / L, thì
1. Để sử dụng chẩn đoán trong ống nghiệm.
2. Thực hiện các biện pháp phòng ngừa thông thường cần thiết để xử lý tất cả các thuốc thử trong phòng % Hoạt động CK-MB = 135 × 100% = 13,5%
thí nghiệm. Dùng pipet không được khuyến cáo cho bất kỳ loại thuốc thử nào trong phòng thí nghiệm. 1007
HIỆU CHUẨN
CHUẨN BỊ THU HỒI Hiệu chuẩn là không cần thiết. Hoạt độ CK trong mẫu được tính dựa trên khả năng hấp thụ milimolar của
Pha lại mỗi lọ thuốc thử CK-MB bằng thể tích nước DI ghi trên nhãn lọ. Xoáy cho tan. NAD. Thuốc thử CK-MB thích hợp cho xét nghiệm isoenzyme CK khi tổng hoạt độ CK trong mẫu không
vượt quá 1500 IU / L ở
BẢO QUẢN VÀ ỔN ĐỊNH 37 ° C.
Thuốc thử và chất pha loãng chưa được pha loãng phải được bảo quản ở 2-8 ° C. Chúng ổn định cho đến
ngày hết hạn. Thuốc thử đã hoàn nguyên bền trong 5 ngày trong tủ lạnh (2-8 ° C). KIỂM SOÁT CHẤT LƯỢNG
Sử dụng huyết thanh đối chứng với các giá trị bình thường và bất thường đã biết để theo dõi tính toàn vẹn
BỘ SƯU TẬP MẪU VẬT của phản ứng trong mỗi bộ xét nghiệm. Các giá trị phải được chấp nhận đối với phương pháp và nhiệt độ
Huyết thanh là mẫu được lựa chọn cho xét nghiệm này. Tránh để mẫu tiếp xúc với ánh sáng mạnh. Bảo này.
quản mẫu trong tủ lạnh (2-8 ° C), nhưng không quá một tuần. Việc đông lạnh mẫu (-20 ° C) làm mất hoạt
tính ở mức tối thiểu. CÁC YẾU TỐ CHUYỂN ĐỔI NHIỆT ĐỘ
Để chuyển đổi hoạt độ CK-MB ở 37 ° C thành giá trị 30 ° C, nhân kết quả với 0,60
CÁC CHẤT GIỚI THIỆU
Các mẫu bị tan máu cực cao không thích hợp cho thử nghiệm vì chúng có thể chứa hàm lượng adenylate CÁC GIÁ TRỊ DỰ KIẾN
kinase, ATP và glucose-6-phosphate cao, gây cản trở xét nghiệm và dẫn đến kết quả sai. Thuốc và các 0-24 IU / L (37 ° C)
chất khác, có thể cản trở việc xác định hoạt tính creatine kinase, đã được liệt kê bởi Young và cộng sự. 0-14 IU / L (30 ° C)
Quy trình được mô tả có thể đánh giá quá cao giá trị CK-MB nếu hoạt tính CK-BB trong huyết thanh rất % CK-MB <5,5%
cao. Mỗi phòng thí nghiệm nên thiết lập phạm vi giá trị dự kiến của riêng mình, vì có sự khác biệt giữa các dụng
Tuy nhiên, hoạt động của CK-BB thường không có trong huyết thanh so với bình thường cụ, phòng thí nghiệm và dân số địa phương.
cá nhân và bệnh nhân nhồi máu cơ tim. Một số nhà điều tra đã quan sát thấy một dạng vĩ mô của BB
(immunoglobulin phức hợp), có thể được đo là B trong xét nghiệm này. Cần nghi ngờ sự hiện diện của ĐẶC ĐIỂM HIỆU SUẤT
macro BB trong bệnh phẩm nếu hoạt độ CK-B được đo bằng quy trình này chiếm hơn 20% tổng hoạt độ 1. Tuyến tính: 1500 IU / L
CK. 2. Nhạy cảm: Dựa trên độ phân giải của thiết bị là A = 0,001, quy trình này có độ nhạy 4 IU / L.
3. So sánh: Các nghiên cứu được thực hiện giữa quy trình này và quy trình Sigma mang lại hệ số tương quan
TÀI LIỆU BẮT BUỘC NHƯNG KHÔNG ĐƯỢC CUNG CẤP là 0,98 với một hồi quy
Pipet lấy mẫu và thuốc thử, ống nghiệm hoặc cuvet, bộ đếm thời gian, lưu lượng kế cách nhiệt, máy quang phổ, phương trình của Y = 0,98X - 0,823 (N = 40).
điều khiển huyết thanh. 4. Độ chính xác:
Trong vòng Run
QUY TRÌNH TỰ ĐỘNG Trung bình (IU / L) SD. CV (%)
Tham khảo hướng dẫn ứng dụng công cụ thích hợp của chúng tôi. Bình thường 34 2.8 8.2
LƯU Ý: Một số dụng cụ nhất định yêu cầu thể tích hoàn nguyên khác với thể tích ghi trên nhãn lọ. Tham Bất thường 13 29,9 7,5
khảo các tờ ứng dụng phù hợp.
Chạy để chạy
QUY TRÌNH Trung bình (IU / L) SD. CV (%)
1. Pha lại thuốc thử CK-MB theo hướng dẫn. Bình thường 32 3.1 9.8
2. Dùng pipet lấy 1,0 ml thuốc thử CK-MB cho vào các ống nghiệm thích hợp và làm ấm trước ở 37 ° C Bất thường 122,8 9,2 7,4
trong ít nhất hai (2) Manufactured By
High Technology, Inc.
phút. 20 Alice Agnew Dr. EMERGO EUROPE
3. Máy quang phổ không với nước ở bước sóng 340 nm. North Attleboro, MA 02763 USA Prinsessegracht 20
4. Thêm 0,050 ml (50μl) mẫu vào thuốc thử, trộn và ủ ở 37 ° C trong năm (5) phút. Tel: 1-508-660-2221 2514 AP The Hague
5. Sau năm phút, đọc và ghi lại sự thay đổi độ hấp thụ mỗi phút trong hai (2) phút E-mail: info@htmed.com The Netherlands
6. Tính độ chênh lệch độ hấp thụ trung bình mỗi phút (ΔAbs. / Phút.). www.htmed.com, http://htidiagnostics.com +31 70 345 8570
7. ΔAbs. / Phút. nhân với hệ số 3376 (xem phần Tính toán)sẽ
mang lại kết quả CK-B trong IU / L.
8. Các mẫu có giá trị trên 1500 IU / L nên được pha loãng theo
tỷ lệ 1: 1 với nước muối, xét nghiệm lại và kết quả nhân với
hai (2).

LƯU Ý: Nếu máy quang phổ đang được sử dụng yêu cầu thể tích cuối cùng lớn hơn 1,0 ml để đọc chính
xác,
Có thể sử dụng 3,0 ml thuốc thử và 0,15 ml (150 μl) mẫu. Nếu máy quang phổ đang được sử dụng được
trang bị
với cuvet được kiểm soát nhiệt độ, hỗn hợp phản ứng có thể được để lại trong cuvet trong khi thực hiện
các phép đọc.
GIỚI HẠN
Quy trình giả định rằng hoạt độ CK-BB trong mẫu là không đáng kể. Nếu có một lượng đáng kể hoạt động