Generalitat de Catalunya

Departament d’Educació
Institut Pedraforca

UF Núm. 1 Nom i Cognoms: Laura Miguel Garrido

PRÀCTICA Núm. 9 Data: 14-12-2023 // 11-01-2024

TÍTOL: Comptatge d'eritròcits

OBJECTIU/S:

➢ Conèixer els mètodes bàsics de comptatge cel·lular.

➢ Familiaritzar-se amb les cambres de comptatge de tipus Neubauer.
➢ Realitzar el comptatge d’eritròcits per veure si la mostra està dins els valors de referència.

FONAMENTS TEÒRICS:

➢ Per fer el comptatge d’eritròcits amb cambra, primer s’ha de diluir la mostra en un líquid adient, com
ara el sèrum fisiològic, isotònic, per evitar l’hemòlisi.
➢ Posteriorment, es diposita una quantitat de la mostra diluïda en la cambra, i es compten les cèl·lules
presents en alguns dels quadrats del reticle.

MATERIAL:

• Cambra de Neubauer/ N. Millorada.

• Cobreobjectes adaptat a la cambra.
• Mostra de sang venosa anticoagulada amb EDTA. ( Nª 7194 )
• SSF. • Capil·lar sense heparina.
• Eppendorf.
• Micropipeta de 100 µl.
• Puntes de pipeta.
• Microscopi.

CFGS LABORATORI CLÍNIC I BIOMÈDIC

MP6 – Tècniques d’anàlisi hematològiques
Curs 2023-24
 Generalitat de Catalunya
Departament d’Educació
Institut Pedraforca

REACTIUS:

Nomes es fa servir SSFF per a la dilució.

PROCEDIMENT:

1. Homogeneïtzar la sang.
2. Amb una micropipeta, pipetejar 5 µl de sang a un tub Eppendorf.
3. Afegir-hi 995 µl de SSFF.
4. Homogeneïtzar la mescla.
5. Col·locar el cobreobjectes damunt la cambra de recompte.
6. Omplir la cambra de recompte amb un capil·lar sense heparina o amb una micropipeta.
7. Deixar que la sang se sedimenti durant uns 5’ abans de fer el comptatge, per tal que les cèl·lules es
dipositin al fons.
8. Enfocar amb l’objectiu de 4X, i comprovar que els eritròcits estan homogèniament distribuïts.
9. Enfocar el quadrat gran central amb l’objectiu de 10X.
10. Si la cambra és de 5x5 (Neubauer millorada), s’han de comptar els eritròcits dels 4 quadrats mitjans
de les cantonades i del quadrat central mitjà. Si la cambra és de 4x4 (Neubauer), s’han de comptar els
eritròcits dels 4 quadrats mitjans de les cantonades i dels 4 quadrats mitjans centrals. Es compten les
cèl·lules que queden sobre els marges inferior i esquerre. No es compten, en canvi les que estan en els
marges superior i dret.
11. Enfocar cada quadrat mitjà i fer el comptatge amb l’objectiu de 40X.

CALCULS

• RBC: “Red Blood Cells”, Nombre d’eritròcits/ml de sang.

• H: Nombre total d’eritròcits comptats en 5 quadrats mitjans dels quadrat gran central.
• Cambra de Neubauer millorada. Al quadrat gran central hi ha 25 quadrats mitjans. Com que hem
comptat els eritròcits que hi ha en 5 d’aquests quadrats mitjans, hem de multiplicar per 5, per saber els
eritròcits que hi haurà en total.
Cambra de Neubauer. Al quadrat gran central hi ha 16 quadrats mitjans. Com que hem comptat els
eritròcits que hi ha en 8 quadrats mitjans, hem de multiplicar per 2, per saber els que hi ha en total.
• La longitud de cada costat del quadrat gran és de 1 mm, i l’espai que queda entre la retícula i el
cobreobjectes és de 0,1 mm. El volum de sang que hi cap és, per tant, de 0,1 mm³. Per saber el nombre
d’eritròcits/mm³, haurem de multiplicar per 10.
• D: Factor de dilució.

RBC (NM) = H x 5 x 10 x D
RBC (N) = H x 2 x 10 x D

CFGS LABORATORI CLÍNIC I BIOMÈDIC

MP6 – Tècniques d’anàlisi hematològiques
Curs 2023-24
 Generalitat de Catalunya
Departament d’Educació
Institut Pedraforca

RESULTATS:

Quadrat Esquerra a dalt

8 6 5 5

4 5 7 5

5 6 4 6

5 4 6 5
TOTAL : 87

Quadrat Dreta a dalt

7 4 3 4

4 8 7 9

3 4 5 4

4 6 3 5
TOTAL : 80

CFGS LABORATORI CLÍNIC I BIOMÈDIC

MP6 – Tècniques d’anàlisi hematològiques
Curs 2023-24
 Generalitat de Catalunya
Departament d’Educació
Institut Pedraforca

Quadrat Esquerra a sota

6 5 6 4

6 6 5 3

8 4 4 3

7 7 6 4
TOTAL : 84

Quadrat Dreta a sota

6 7 6 5

7 5 4 4

5 6 5 7

5 6 8 7
TOTAL : 93

Quadrat del mig

5 6 3 4

7 7 4 5

6 4 7 7

7 7 4 6
TOTAL : 89

TOTAL D’ERITROCITS : 87+80+84+93+89 = 433

FORMULA : RBC = H x 5 X 10 X D

RBC = 433 X 5 X 10 X 200 = 4330000

RESULTAT AYESHA : 4420000
MITJANA DELS DOS RESULTATS . 4375000

CFGS LABORATORI CLÍNIC I BIOMÈDIC

MP6 – Tècniques d’anàlisi hematològiques
Curs 2023-24
 Generalitat de Catalunya
Departament d’Educació
Institut Pedraforca

VALORACIÓ DELS RESULTATS/CONCLUSIONS:

COMPTATGE D’ERITRÒCITS (RBC) – VALORS DE REFERÈNCIA

Eritròcits/mm³ Eritròcits/l

Nounats 4,7x10⁶- 4,7x10¹²-

6,3x10⁶ 6,3x10¹²

Nens fins a 10 4x10⁶-5,3x10⁶ 4x10¹²-5,3x10¹²

anys

Homes adults 4,34x10⁶- 4,34x10¹²-

5,72x10⁶ 5,72x10¹²
4,5x10⁶-6x10⁶ 4,5x10¹²-6x10¹²

Dones adultes 3,86x10⁶- 3,86x10¹²-

5,08x10⁶ 5,08x10¹²
4x10⁶-5,5x10⁶ 4x10¹²-5,5x10¹²

Una vegada analitzats els nostres resultats i tenint en compte els valors de referencia indicats en la taula
de a sobre, diriem que la nostra mostra estaria dins dels valors de normalitat, tant en homes, dones,
nens i nounats.

CFGS LABORATORI CLÍNIC I BIOMÈDIC

MP6 – Tècniques d’anàlisi hematològiques
Curs 2023-24