Escherichia coli

• fermentacja laktozy

• β-glukuronidaza

• tryptofanaza
 Referencyjna metoda oznaczania E.coli – metoda
płytkowa

Agar TBX (Tryptone Bile X-Glucuronide)

Inhibicja gram+

chromogenny substrat 24 h,
44°C
 Oznaczanie NPL E.coli w próbkach– metoda
rozcieńczeń

1. Przednamnażanie selektywne – bakterie grupy coli

Pożywka z laktozą, siarczanem laurylowym
i peptonem, buforowana fosforanami
37°C, 24-48h
2. Namnażanie selektywne
Bulion EC (Escherichia coli broth) – 45°C, 24h – potem
możliwy wysiew na płytki

Inhibicja gram+
3. Potwierdzenie
Woda tryptonowa 45°C, 48h (obecność indolu)
Oznaczanie gronkowców
chorobotwórczych
Staphylococcus aureus
 Referencyjna metoda oznaczania – metoda
płytkowa z oznaczaniem aktywności lecytynazy

Pożywka selektywna Baird-Parkera 24-48h, 37°C

Inhibicja innych
bakterii
stymulacja
wzrostu

Inhibicja innych
bakterii

Redukcja do Te0
 Referencyjna metoda oznaczania – badania potwierdzające

aktywność katalazy – hodowla na agarze

odżywczym, 37°C, 18-24h + 3%H2O2

aktywność koagulazy – inkubacja hodowli

bulionowej (bulion mózgowo-sercowy) z

roztworem liofilizowanej plazmy krwi królika

 Referencyjna metoda oznaczania – metoda
rozcieńczeń

1. Namnażanie selektywne
Pożywka Giolitti-Cantoni
37°C, 24 - 48h, war.beztlenowe
Inhibicja innych bakterii

3.5% telluryn potasu

Inhibicja innych bakterii
2. Różnicowanie na pożywkach stałych
Pożywka Baird-Parkera
Pożywka Baird-Parkera z RPF – z plazmą króliczą i
fibrynogenem – liczenie - koagulazo(+)
37°C, 24 - 48h

3. Badania potwierdzające
Test na katalazę
Wykrywanie beztlenowych laseczek przetrwalnikujących
redukujących siarczany (IV)
 Wykrywanie beztlenowych laseczek przetrwalnikujących redukujących
siarczany (VI)

▪ Szok termiczny (10 min, temp. 80°C)

▪ Hodowla w warunkach beztlenowych w namnażającej,

nieselektywnej pożywce Wrzoska (tioglikolan sodu,

rezazuryna)

▪ zmętnienie, pęcherzyki gazu

▪ Laseczki, gram +
 Wykrywanie beztlenowych laseczek przetrwalnikujących redukujących
siarczany (VI)

Wykluczenie względnych beztlenowców – hodowla na podłożu

stałym w warunkach tlenowych.

Różnicowanie - podłoże Wilson-Blaira – warunki beztlenowe

siarczan żelazawy - akceptor ostateczny – redukcja do FeS przez bakterie -
wydzielanie

Inhibicja gram –

Inhibicja gram+
Wykrywanie bakterii z
rodzaju Salmonella
 Referencyjna metoda wykrywania

1. Przednamnażanie w nieselektywnej pożywce płynnej

Zbuforowana woda peptonowa
37°C, 18±2 h
2. Namnażanie selektywne
Bulion Rappaport-Vasiliadis
37°C, 24±3 h

Pożywka MKTTn (Muller-Kauffmann Tetrathionate-Novobiocin Broth)

+ Novobiocyna

+KJ
3. Różnicowanie c.d.

37°C, 24±3 h

Pożywka agarowa do wyboru

3. Różnicowanie w obrębie rodzaju (+/-) H2S
I) Agar XLD (Xylose lysine deoxycholate agar)
37°C, 24±3 h
zakwaszenie do wyczerpania cukrów (fermentacja z produkcją kwasów)
dekarboksylacja Lys (selektywna przez Salmonella) – alkalizacja

Wizualizacja

Wydzielanie H2S, reaguje w warunkach zasadowych

z cytrynianem i wydziela się FeS w koloniach
 Agar Hektoena (HE agar)

Inhibicja gram+

Wizualizacja
w warunkach
alkalicznych

Wydzielanie H2S;
FeS – czarne wnętrza kolonii
 BGA (Brillant green agar)

Inhibicja gram+