Тисленко Дар’я 203

МЕТОДИЧНІ РЕКОМЕНДАЦІЇ
до практичного заняття №4
Тема: Мікроби та навколишнє середовище.
Дезінфекція і стерилізація в баклабораторії.
Фахові компетентності:
- сформувати чітке уявлення про асептику та антисептику, дезінфекцію,
стерилізацію
- підкреслити застережні заходи під час роботи із дезінфекційними
засобами
- сформувати уміння дезінфекції піпеток, інфікованого матеріалу, рук,
робочого місця тощо
- закріпити методи стерилізації медичного інструментарію,
перев’язувального матеріалу, лабораторного посуду
- ознайомити з апаратурою для термічної стерилізації та тестами
контролю якості стерилізації.
- дотримуватись правил охорони праці, техніки безпеки,
протиепідемічного режиму, чинних наказів МОЗ України під час
роботи з інфікованим матеріалом, культурами мікроорганізмів,
обладнанням, пальниками, дез. розчинами.

Хід роботи

Завдання 1. Ознайомитися з підготовкою до стерилізації та стерилізацією

інструментарію, перев’язувального матеріалу, живильних середовищ та
лабораторного посуду, заповнити таблицю у щоденнику.

Матеріал для Режим Термін Примітка

стерилізації стерилізації
Інструментарій Повітряний. Сухим 180 о С – 60хв. На полум’ї
багаторазового жаром 160 о С– 150хв. короткочасно
користування у печі Пастера обпалюють
Стерилізують горличка колб,
прожарюванням пробірок,
(фламбуванням) пляшок, а
також ватяні
пробки при
пересіваннях
культур і
розливі
середовищ. У
полум’ї гинуть і
 клітини, і спори
мікроорганізмів
.

Перев’язувальни Водяною парою в 112 о С, 0,5 атм, Прості поживні

й стерилізаторі 15 хв. середовища,
матеріал паровому(автоклаві чистий
) лабораторний
посуд, вата,
марля, папір,
інструменти,
забрудненні
аспорогенною
культурою.
Поживні
середовища, що
містять
вуглеводи.
Живильні Автоклавування Такі, що легко Температура й
середовища руйнуються тривалість
субстрати – як автоклавування
молоко чи визначаються
желатинові складом
середовища, а живильного
також субстрати, середовища.
що містять
цукри, вітаміни
(сусло
пивне,соки,
дріжджовий
автолізат й ін.)
завичай
стерилізують
при 0,5 атм.
протягом 20-30
хв. М’ясо-
пептонні
середовища
стерилізують
 при 1,0 атм. 20–
30 хв.
Особливо важко
простерилізуват
и ґрунт. Його
зазвичай
стерилізують
один раз при
1 атм. 2 години,
або 2 дні підряд,
по годині при
тому ж тиску, а
іноді – при 2
атм. 2
години.
Лабораторний Стерилізація 132 о С, 2 атм, Споровмісний
посуд гарячим повітрям. 30-60хв. матеріал,
Посуд стерилізують інструменти,
й в автоклаві. посуд,
забруднений
спорогенною
культурою.
Вегетативні
форми
мікроорганізмів
.

Завдання 2. Ознайомтеся та запишіть у протокол методи контролю

якості стерилізації.
Контроль якості стерилізації проводять з допомогою трьох видів тестів:
Фізичний метод –полягає у використанні максимального термометра в
паровому стерилізаторі (автоклаві) і звичайного ртутного термометра в
сухожаровій шафі та інактиваторах.
Хімічний метод -використання кристалічних хімічних речовин з певною
температурою плавлення: бензонафтол - 110°С, антипірин -113 °С, резорцин,
сірка-119°С, бензойна кислота, бета-нафтол - 120°С, сечовина, фенацетин,
манноза -132°С, саліцилова кислота, стрептоцид -160°С, тіосечовина,
альбуцид -180°С.
Біологічний метод –використання біотестів. Для їх виготовлення
використовують тест-культуру (мікроорганізми з групиантракоїдів, які
витримують кип’ятіння протягом 25-30хв і вплив текучої пари
температурою 100 °С протягом 4-6хв) або зразки ґрунту, що містять спори
термостабільних сапрофітів (витримують температуру 120°С протягом 2-
3хв).

Завдання 3. Ознайомитися з методикою дезінфекції відпрацьованого

патологічного матеріалу, заповніть таблицю:
Матеріал для Спосіб та засіб Термін
дезінфекції дезінфекції
Градуйовані, Фламбування в полум’ї Кілька секунд
пастерівські піпетки, Спиртівки
шпателі, металеві Повітряний. Сухим 180 о С – 60хв.
інструменти жаром у печі Пастера 160 о С– 150хв.
Патологічний матеріал в 1% розчині дезактину Протягом 6-х годин з
послідуючим
автоклавуванням.

Посуд Водяною парою в 132оС, 2 атм, 30-60хв.

стерилізаторі паровому
(автоклаві)

Завдання 4. Ознайомтеся та запишіть у щоденник Алгоритм

«Дезінфекція робочого місця»
1.Зробіть із вати кульку діаметром 2 см;
2.Візьміть пінцетом кульку, змочіть її в 3%розчині хлораміну.
3.Протріть цією кулькою поверхню стола.
4.Кульку опустіть у посудину з дезінфекційним розчином;
5. Витріть стіл вологою серветкою.

Для дезінфекції робочого столу (для обеззараження матеріалу) протерти

робочу його поверхню 3% р-ном карболової кислоти (попередньо надівши
гумові рукавички).

Завдання 5. Вирішіть ситуаційні задачі та тести:

1. Патологічний матеріал, який містить патогенні ентеробактерії, для
знезаражування заливають 3 % розчином хлораміну на 2 год. Патологічний
матеріал, що містить мікобактерії туберкульозу, заливають 5 % розчином
активованого хлораміну на 24 год. Чим пояснити різницю в режимі
дезінфекції?
Різницю в режимі дезінфекції можна пояснити тим, що різні види
бактерій мають різний рівень чутливості до дезінфікуючих засобів. Патогенні
ентеробактерії можуть бути знищені за 2 години за допомогою 3% розчину
хлораміну, тоді як мікобактерії туберкульозу більш стійкі до засобів
дезінфекції і для їх знищення потрібно застосовувати більш концентровані і
тривалі методи, наприклад, 5% розчин активованого хлораміну на 24 години.
2. У сухожарову шафу помістили металічні інструменти, вату, піпетки,
флакони з ізотонічним розчином натрію хлориду, гумові рукавички і
простерилізували за температури 180 °С протягом 60 хв. Дайте оцінку цим
діям.
Простерилізування за температури 180 °C протягом 60 хвилин є
ефективним методом знищення мікроорганізмів та забезпечення стерильності
обладнання та матеріалів у сухожаровій шафі. Такий процес включає високу
температуру, яка сприяє знищенню бактерій, вірусів і грибів, тим самим
забезпечуючи безпечні умови для зберігання інструментів та матеріалів у
лабораторії чи медичному середовищі.
Оцінка цих дій є позитивною, оскільки стерилізація є важливим етапом
в забезпеченні безпеки та запобіганні інфекціям. Такий процес гарантує, що
обладнання і матеріали, які використовуються в медичних чи наукових
дослідженнях, є вільними від живих мікроорганізмів, які можуть впливати на
результати досліджень або можуть становити ризик для пацієнтів.

3. Операційну прокварцували 20хв. У пацієнта виникло післяопераційне гнійне

ускладнення. З гною виділений збудник, що має форму кока, грампозитивний,
розміщений у вигляді грона винограду, на МПА – колоній з рівним краєм
гладкою поверхнею, золотистого кольору. Що це за збудник? Чи міг він бути
причиною ускладнення?
Цим збудником є Staphylococcus aureus або Стафілокок золотистий.
Staphylococcus aureus може бути причиною післяопераційних гнійних
ускладнень, таких як інфекції рани. Він може потрапляти до рани під час
операції, або через інфіковані інструменти, бинти або рукавички.
Золотистий стафілокок це санітарно – показовий мікроорганізм чистоти
повітря закритих приміщень. Внаслідок його стійкості до дії УФП операційну
слід кварцувати 1год.

4. Металеві хірургічні інструменти прокип’ятили у дистильованій воді

протягом 30 хв. Чи можна їх вважати стерильними?
Прокип’ятити металеві хірургічні інструменти у дистильованій воді
протягом 30 хвилин є одним з методів стерилізації. Однак для того, щоб вони
були стерильними, важливо впевнитися, що процедура стерилізації була
виконана належним чином, інструменти були належно очищені перед
стерилізацією і були збережені в умовах, що запобігають забрудненню після
стерилізації.
Для впевненості в стерильності інструментів, рекомендується провести
стерилізацію відповідно до встановлених стандартів і перевірити результат за
допомогою тестів на стерильність.

5. Під час бактеріологічного дослідження вовни був виділений збудник

сибірки. Після ідентифікації збудника лабораторний посуд, який був при
цьому задіяний, і культуру збудника простерилізували в паровому
стерилізаторі за температури 120°С протягом 30хв. Дайте оцінку цим
діям.
Дослідження та ідентифікація збудника сибірки в ході
бактеріологічного дослідження вовни є важливим етапом для забезпечення
якості та безпеки продукції. Ці кроки спрямовані на виявлення та контроль
мікроорганізмів, які можуть бути присутні у вовняних виробах.
Простерилізація лабораторного посуду та культури збудника в
паровому стерилізаторі при температурі 120 °C протягом 30 хвилин є
ефективним заходом для знищення бактерій і забезпечення безпеки
лабораторних умов. Висока температура та тривалий час експозиції є
надійним способом стерилізації, який забезпечує ефективну усунення
мікроорганізмів.
Оцінюючи ці дії, можна сказати, що вони відповідають вимогам
сучасних стандартів безпеки та гігієни в лабораторних умовах, сприяючи
впевненості у точності та надійності отриманих результатів.

Тести:
1.Фізичний фактор зовнішнього середовища, який використовують для
стерилізації операційних, пологових залів тощо:
А. Іонізуюча радіація
В. Ультрафіолетове випромінювання
С. Механічний струс
D. Висушування
Е. Атмосферний тиск
2.Вид дезінфекції, який використовують у епідемічному вогнищі:
А. Профілактична
В. Заключна
С. Автоклавування
D. Прожарювання
Е. Кип’ятіння
3.Система профілактичних заходів, спрямованих на попередження
проникнення мікробів у рану, тканини, органи, порожнини:
А. Дезінфекція
В. Стерилізація
С. Асептика
D. Антисептика
Е. Дератизація
4.Хімічні речовини, які використовують для знезараження чинників
навколишнього середовища:
А. Антисептики
В. Антибіотики
С. Дезінфектанти
D. Гормональні препарати
Е. Вітамінні препарати
5.Вид стерилізації, який використовують у мікробіологічній лабораторії для
знезараження бактеріологічних петель:
А. Фламбування
В. Кип’ятіння
С. Автоклавування
D. Сухий жар
Е. Хімічна холодна стерилізація
6.Режим стерилізації простих живильних середовищ (МПБ, МПА):
А. 2атм - 20хв.
В. 1атм - 20хв.
С .t°-180°- 60хв.
D .t°-100°- 30хв. 3 дні підряд
Е. 1атм - 10хв.
7. Комплекс лікувально- профілактичних заходів, спрямованих на знищення
або пригнічення росту мікроорганізмів на поверхні шкіри, слизових, у рані:
А. Дезінфекція
В. Стерилізація
С. Асептика
D. Антисептика
Е. Дератизація
8. Медична сестра прокварцувала операційну протягом 1 год. З повітря
операційної, посіяного за методом Коха, мікроорганізмів не виявлено.
Який фактор впливу на мікроорганізми застосовувався?
А. Ультрафіолетові промені
В. Рентгенівські промені
С. Радіоактивне випромінювання
D. Ультразвук
Е. Висушування
9. У приймальному відділенні при огляді пацієнта виявлений педикульоз.
Йому призначена повна санітарна обробка. Як називається знищення
членистоногих, переносників інфекційних захворювань?
А. Дератизація
В. Дезінсекція
С. Дезінфекція
D. Стерилізація
Е. Антисептика
10. У пацієнта з діагнозом: гостре респіраторне захворювання взяли мазок із
задньої стінки глотки стерильним ватним тампоном і помістили у ізотонічний
розчин натрію хлориду з додаванням антибіотика. Що це за спосіб
стерилізації?
А. Механічний
В. Біологічний
С. Променевий
D. Хімічний
Е. Термічний
11. У лабораторії приготували просте живильне середовище за всіма
вимогами. Стерилізацію його провели автоклавуванням при тиску 1атм. 10хв.
Виділити культуру мікроорганізмів не вдалося. У чому причина?
А. Недостатньо вологе
В. Гіпертонічне
С. Гіпотонічне
D. Нестерильне
Е. Ізотонічне
12. У мікробіологічній лабораторії для виконання досліджень необхідно
простерилізувати лабораторний посуд. Який метод та режим стерилізації для
цього використовується?
А. Фламбування
В. Кип’ятіння
С. Автоклавування
D. Сухий жар
Е. Хімічна холодна стерилізація
13. Через воду часто передаються збудники, що викликають кишкові
захворювання (шигельоз, холеру, лептоспіроз, туляремію). Який
мікроорганізм є показником санітарно-бактеріологічного стану води?
А. St.aureus
В. Cl.perfringens
C. Еsh.coli
D. β- гемолітичний стрептокок
Е. Термофільні мікроорганізми
14. Оберіть антисептики, які належить до групи детергентів:
A. Іхтіол
B. Хлоргексидин
C. Мило зелене
D. Перекис водню
E. Діамантовий зелений
15. Оберіть антисептики, які належить до групи фенолів:
A. Іхтіол
B. Хлоргексидин
C. Нафта нафталанська
D. Перекис водню
E. Діамантовий зелений

Питання для підсумкового контролю.

1. Збудники яких захворювань гинуть при відхиленні температури від 37 °С?
Де це враховується?
Мезофіли - зона оптимального росту 28 -37оС , максимальна 45оС,
мінімальна 15оС Проживають переважно в організмі людини і теплокровних
тварин. До них належить більшість збудників інфекційних хвороб.

2. Як діють на мікроорганізми хімічні бактерицидні речовини?

Згубно діють на клітини бактерій: пошкоджують клітинну стінку, генетичний
матеріал.

3. Як діють на мікроорганізми бактеріостатичні речовини?

Бактеріостатична дія - гальмує (зупиняє) ріст і розмноження мікроорганізмів

4. Класифікація хімічних речовин залежно від механізму їх дії на

мікроорганізми.
Розрізняють бактерицидну і бактеріостатичну дію хімічних речовин:
 бактеріостатична дія - гальмує (зупиняє) ріст і розмноження
мікроорганізмів
 бактерицидна дія - вбиває повністю мікроорганізми.

5. Чому перед стерилізацією посуд пакують у папір?

Посуд перед стерилізацією повинен бути ретельно вимитий й загорнений в
папір для збереження стерильності після прогрівання.

6. Для чого пишуть дату та час стерилізації?

Для того, щоб знати придатність.

7. Як провести дезінфекцію рук і робочого місця?

дезінфекція робочого місця:
1.Зробіть із вати кульку діаметром 2 см;
2.Візьміть пінцетом кульку, змочіть її в 3%розчині хлораміну.
3.Протріть цією кулькою поверхню стола.
4.Кульку опустіть у посудину з дезінфекційним розчином;
5. Витріть стіл вологою серветкою.
(для дезінфекції робочого столу (для обеззараження матеріалу) протерти
робочу його поверхню 3% р-ном карболової кислоти (попередньо надівши
гумові рукавички).
дезінфекція рук:
Обробити руки антисептиком не менше 20 секунд: тільки експозиція в 20
секунд дозволяє знищити мікроби, вірусні агенти на поверхнях наших
долонь.

8. Що таке хіміотерапевтичний індекс?

Хіміотерапевтичний індекс - відношення максимально переносимої
організмом людини дози речовин без виникнення симптомів токсичного
впливу до мінімальної дози тієї ж речовини, що має лікувальну дію

9. Як класифікуються хіміотерапевтичні препарати?

Хіміотерапевтичні засоби можна класифікувати за багатьма ознаками:
 походженням (неорганічні, біоорганічні речовини та їх синтетичні
аналоги, органічні речовини абіогенної природи),
  хімічною будовою, спрямованістю дії (протибактеріальні,
протигрибкові, противірусні, протипаразитарні),
 метою застосування (профілактичні, терапевтичні, багатоцільові та ін.),
 механізмом дії, надзвичайно різноманітні і залежать від хімічної
природи діючої речовини.

10. Що таке антибіотики та їх біологічна активність?

Антибіотики (anti - проти, bios - життя) це речовини мікробного, рослинного
або тваринного походження, їх напівсинтетичні та синтетичні аналоги і
похідні, що вибірково пригнічують життєдіяльність мікроорганізмів, вірусів,
найпростіших, грибів, а також затримують ріст пухлин.
Антибіотики мають високу біологічну активність, тобто можуть діяти у дуже
малих кількостях (наприклад, пеніцилін викликає виражену бактерицидну
дію на бактерії у концентрації 0,001 мг/мл).

11. Як виникає антибіотикорезистентність у бактерій?

Розрізняють декілька типів стійкості мікробів.
Природна стійкість визначається властивостями даного виду або роду
мікроорганізмів.
Наприклад, резистентність грамнегативних бактерій до бензилпеніциліну,
бактерій – до протигрибкових, а грибів - до антибактеріальних препаратів.
Набута стійкість може бути первинною й вторинною.
Первинна стійкість формується в окремих клітин популяції внаслідок
спонтанних мутацій до початку лікування антибіотиками.
Вторинна стійкість виникає при контакті бактерій з антибіотиками. Мутації
при цьомуненаправлені та не пов’язані з дією антибіотиків.
Стійкість бактерій до антибіотиків виникає через їхнє надмірне
використання, неправильне призначення, недотримання пацієнтами курсу
лікування

12. У чому полягає побічна дія антибіотиків?

При введенні антибіотиків можуть виникати алергічні реакції: шкірні
висипки, кропивниця, астматичні приступи, риніт, кон’юнктивіт,
анафілактичний шок та ангіоневротичний набряк гортані (Квінке),
фотодерматози, антибіотики викликають токсичні реакції завдяки їх
органотропній дії. Ступінь їх вираження залежить від тривалості
прийому препаратів. Це є токсична дія на клітини крові, ураження печінки,
нирок, вестибулярного та слухового апарата.

13. Які основні принципи раціональної хіміотерапії?

Основні принципи хіміотерапії (раціональний вибір препарату, початок
лікування, шлях введення, доза, інтервал введення, тривалість терапії,
комбіноване лікування, підвищення імунологічної реактивності організму).