PDF The Biological Resources of Model Organisms 1St Edition Robert L Jarret Ebook Full Chapter

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The Biological Resources of Model

Organisms 1st Edition Robert L. Jarret


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The Biological Resources
of Model Organisms
The Biological Resources
of Model Organisms

Edited by
Robert L. Jarret
Kevin McCluskey
CRC Press
Taylor & Francis Group
6000 Broken Sound Parkway NW, Suite 300
Boca Raton, FL 33487-2742

© 2020 by Taylor & Francis Group, LLC


CRC Press is an imprint of Taylor & Francis Group, an Informa business

No claim to original U.S. Government works

Printed on acid-free paper

International Standard Book Number-13: 978-1-138-29461-5 (Hardback)

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have been made to publish reliable data and information, but the author and publisher cannot assume
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used only for identification and explanation without intent to infringe.

Library of Congress Cataloging‑in‑Publication Data

Names: Jarret, R. L., editor. | McCluskey, Kevin, 1961- editor.


Title: The Biological Resources of Model Organisms / [edited by] Robert L.
Jarret, Kevin McCluskey.
Description: Boca Raton, Florida : CRC Press, [2019] | Includes
bibliographical references and index.
Identifiers: LCCN 2019009290 | ISBN 9781138294615 (hardback : alk. paper) |
ISBN 9781315100999 (ebook)
Subjects: | MESH: Biological Specimen Banks | Databases, Genetic |
Collections as Topic
Classification: LCC QH447 | NLM QU 24.51 | DDC 572.8/629--dc23
LC record available at https://lccn.loc.gov/2019009290

Visit the Taylor & Francis Web site at


http://www.taylorandfrancis.com

and the CRC Press Web site at


http://www.crcpress.com
Contents
Foreword ..................................................................................................................vii
Editors .......................................................................................................................xi
Contributors ........................................................................................................... xiii

Chapter 1 Introduction to the Laboratory Axolotl and the Ambystoma


Genetic Stock Center ............................................................................1
S. Randal Voss, Laura Muzinic and Chris Muzinic

Chapter 2 The Genetic Resources of Arabidopsis thaliana:


The Arabidopsis Biological Resource Center .................................... 13
Christopher S. Calhoun, Deborah K. Crist, Emma M. Knee,
Courtney G. Price, Benson E. Lindsey, D. Mariola Castrejon,
Eva Nagy, James W. Mann, Julie A. Miller, Erich Grotewold,
R. Keith Slotkin and Jelena Brkljacic

Chapter 3 The Bacillus Genetic Stock Center/Bacillus subtilis ......................... 35


Daniel R. Zeigler

Chapter 4 Genetic Resources of Rotifers in the Genus Brachionus ................... 55


Terry W. Snell

Chapter 5 The Caenorhabditis Genetics Center (CGC) and the


Caenorhabditis elegans Natural Diversity Resource......................... 69
Aric L. Daul, Erik C. Andersen and Ann E. Rougvie

Chapter 6 The Chlamydomonas Resource Center.............................................. 95


Paul A. Lefebvre, Matthew Laudon and Carolyn Silflow

Chapter 7 The Zebrafish International Resource Center .................................. 113


April Freeman, Ron Holland, Jen-Jen Hwang-Shum,
David Lains, Jennifer Matthews, Katrina Murray,
Andrzej Nasiadka, Erin Quinn, Zoltan M. Varga
and Monte Westerfield

v
vi Contents

Chapter 8 The Bloomington Drosophila Stock Center: Management,


Maintenance, Distribution, and Research....................................... 145
Cale Whitworth

Chapter 9 The Fungal Genetics Stock Center Supporting Foundational


and Emerging Model Systems ........................................................ 163
Kevin McCluskey

Chapter 10 The Peromyscus Genetic Stock Center........................................... 183


Amanda Havighorst, Vimala Kaza and Hippokratis Kiaris

Chapter 11 The Tetrahymena Stock Center: A Versatile Research


and Educational Resource .............................................................. 197
Donna Cassidy-Hanley, Eduardo Orias, Paul Doerder
and Theodore Clark

Chapter 12 The National Xenopus Resource .................................................... 223


Marcin Wlizla, Sean McNamara and Marko E. Horb

Chapter 13 Xiphophorus Fishes and the Xiphophorus Genetic Stock Center ..... 237
Ronald B. Walter, Yuan Lu and Markita Savage

Chapter 14 ATCC: The Biological Resource Center for the Future.................. 263
Marco A. Riojas, Samantha L. Fenn,
Manzour Hernando Hazbón, Frank P. Simione
and Raymond H. Cypess

Index ...................................................................................................................... 275


Foreword
Biology is built on collections. All over the world, biological resource centers keep
alive thousands of collections of yeast, bacteria, viruses, plasmids, cell cultures, ani-
mals, and plants used in scientific research. These institutions curate such collections
in ways that crucially shape the practices and progress of biological science. But
their expertise and organization are largely invisible, even to their scientist users.
For several years in the early 2000s I worked as a fruit fly geneticist, regularly order-
ing mutant Drosophila through the post, which would arrive in our lab within a
matter of days. But the ease with which I could order them online and the rapidity
of their arrival by post meant that I rarely questioned how this was possible. In my
new career as a historian of science I have had cause to reflect further on just how
little we know about how stock centers were established, who has worked in them,
and what differences they have made to biology. Work carried out at such institu-
tions is rarely acknowledged in publications and has been inconsistently recorded in
archives. This remarkable volume is a testimony to the complex nature of the opera-
tions that take place at such institutions, and to the dedication of the people who
maintain them. The chapters that follow are written by these scientists, managers,
and curators, who describe in detail the history of these centers, their practices of
curation and care, and the rich array of expertise and biological knowledge that these
sites have accumulated.
The collections described here are astonishingly diverse, but in different ways.
Some are composed of a rich diversity of species; others contain hundreds of strains
or mutants of a single species. Testifying to the wide array of organisms used as
models, discussed here are collections of Ambystoma (axolotl) salamanders, the
model plant Arabidopsis, aquatic rotifers, the nematode C. elegans, the green algae
Chlamydomonas, the zebrafish (Danio sp.), the fruit fly Drosophila, a wide array of
fungi and bacteria, the deer mouse Peromyscus, the eukaryotic ciliate Tetrahymena,
Xenopus frogs, Xipophora fish, as well as cell cultures, plasmids, plant tissue cul-
tures, protozoa, yeast, viruses, and molecular genomic tools. Some of these collec-
tions were first established over 100 years ago; some were founded in the twenty-first
century. All originated in research labs, where a scientist (or group of scientists)
with expertise on a particular organism chose to establish a resource collection for
their respective research community. This raises fascinating questions as to why and
how a scientist might choose and manage such a task, which several of the follow-
ing chapters reflect on. Today, the centers described here are scattered throughout
the United States—from Kentucky to Kansas, from New York to Texas—and send
stocks to laboratories across the world.
The following chapters underline the profound (if obvious) fact that much scien-
tific research depends on highly specialized practices of care that occur at biological
resource centers. Care is always tailored to the unique characteristics of organisms.
Some are relatively straightforward to look after. Arabidopsis seeds can be kept long
term in ultra-cold storage. Rotifer eggs are dried, powdered, and stored for decades.
Most sporulating fungi can be stored on silica gel or freeze dried. Bacillus cultures

vii
viii Foreword

and C. elegans worms are often deep-frozen. All of these depend on technologies
of preservation, but demand limited interim maintenance. Other collections are far
more labor intensive. Xipophorus stock keepers must feed their fish 2–3 times a
day on different foods, check their health daily, and rigorously sterilize all equip-
ment. Xenopus workers need to pay careful attention to the water quality, health,
and diet of frogs. Surprising to many is the fact that the Drosophila life cycle cannot
be suspended by freezing embryos; instead, thousands of fruit fly cultures must be
regularly fed and checked for viability by stock keepers generation after generation.
The kinds of workers who carry out these tasks vary, from teams of undergraduates
at the Chlamydomonas Resource Center to the 50-member strong team of profes-
sional Drosophila stock keepers at the Drosophila Stock Center in Bloomington,
Indiana. Scholars in the history of biology are increasingly interested in the fact that
although ‘care’ is often overlooked, research could not happen without it.
Curators and collection managers are vigilant in maintaining the composition of
collections and often negotiate with users and advisory boards to decide which stocks
and cultures to introduce into collections and which to jettison. Continued support
for such collections often depends on their continued relevance to the communities
that they serve—even when the needs of a community change over time. Keeping
biological resources alive takes time and money, and stock centers must routinely
assess which stocks they can afford to keep. Nevertheless, there can be important
advantages to retaining cultures and stocks that do not appear to have an obvious
current or future role in research. Serendipitous (and important) discoveries have
been made using seemingly unremarkable strains kept by stock centers. For exam-
ple, Taq polymerase was isolated from an apparently commonplace bacterial culture
accessioned into the American Type Culture Collection in 1967. In another instance
at the same collection, a strain of the Zika virus first deposited in 1953 has suddenly
become medically relevant and urgently important.
Documentation matters. A crucial aspect of curatorial work for any biological
collection is the rigorous labeling of stocks and the management of clear relation-
ships to their entries in databases. For more than 80 years, the maintenance of living
research organisms has been intimately connected to technologies for documenting
and circulating information. In the 1940s, the US National Research Council (NRC)
convened a meeting—the Conference on the Maintenance of Pure Genetic Strains—
to recommend guiding principles for the provision of standardized organisms. One
of its conclusions was that the most successful research communities used regular
newsletters to distribute up-to-date information about mutants, new findings, and
the location of stocks. At the time, the best known of these were the Maize Genetics
Cooperation News Letter and the Drosophila Information Service. Delegates agreed
that timely, accurate, and standardized information was crucial for the distribution
of reliable, standardized research organisms.
This is still true today. A crucial aspect of curating genetic resources is the care-
ful documentation and management of identifiers and names associated with each
accession, tasks that often require negotiation with community database managers and
researchers beyond those centers. Many of the essays here describe the processes used
to label stocks and to link those labels with databases that are cross-referenced with
other kinds of genetic information (examples mentioned include FlyBase, WormBase,
Foreword ix

and The Arabidopsis Information Resource). When a center accessions a stock, manag-
ers assess how it will be entered into its catalog, sometimes changing its name so that
it conforms to nomenclatural standards. For some organisms—such as the Peromyscus
deer mice—collection managers also need to keep a careful record of birth date, gen-
der, weaning date, and litter size, so that pedigrees can be traced back to foundation
stocks. The following chapters on the National Xenopus Resource, the Tetrahymena
Stock Center, and the Ambystoma Genetic Stock Center discuss their participation
with the Research Resource Identification (RRID) Initiative, a project that aims to allow
researchers to unambiguously identifying strains, reagents, and tools used in research.
A striking feature of the centers described here is that the care of living biologi-
cal collections can position an institution as a site not only of rich resources but also
of expertise and authority. Many of the institutions in this volume have invested
time, physical facilities, knowledge, and other resources in developing educational
tools for high-school students, undergraduates, and teachers. Of particular note in
this regard are the Arabidopsis Resource Center, the Chlamydomonas Resource
Center, and the Tetrahymena Stock Center. Others have fashioned additional roles for
themselves as centers of expertise for their respective communities. The Zebrafish
International Resource Center offers diagnostic testing and consultation services,
the Fungal Genetics Stock Center provides cloning vectors and cloned genes, the
Tetrahymena Stock Center maintains the Tetrahymena Genome Database and offers
fee-based genetic transformation services, the Xenopus Genetic Stock Center hosts
genome assemblies, while the National Xenopus Resource partly serves as a site for
researchers to convene and collaborate.
Finally, many of the resource centers described here carry out research alongside
their other responsibilities. The Caenorhabditis Genetics Center is developing new
strains and molecular tools; the Fungal Genetics Stock Center is studying the char-
acteristics of its cultures; the Zebrafish International Resource Center is developing
new methods for detecting pathogens; the Bloomington Drosophila Stock Center has
generated new kinds of genetically useful stocks; while the American Type Culture
Collection has a research programme to find more effective ways of identifying,
characterizing, and authenticating the biological materials it distributes.
Collections can tell us what we value, and what we have valued, in biology.
They offer a trace of past endeavors, struggles for scientific authority, colossal invest-
ments of money and time, and the accumulation of knowledge about organisms that
are at once unique and generative of fundamental biological knowledge. Moreover,
the collections described in this book are made not just the living organisms them-
selves, but also of the apparatus, people, and practices that keep them alive. These
are the material representations of the collaborative and negotiated character of the
biological sciences. When historians look back at early twenty-first century biology,
thousands of carefully managed and documented living collections will testify to
the curators, collections managers, stock keepers, and database curators that make
science possible.

Jenny Bangham
Department of History and Philosophy of Science
University of Cambridge
Editors
Robert L. Jarret was born and raised in Franklin, Massachusetts and graduated
from the local high school. After a tour with the US Navy, he attended Bridgewater
State College majoring in Biology. Graduate studies were completed at Purdue
University (M.S. and Ph.D.) and Colorado State University (MBA). He worked for
a period of time at the Centro Agronomico Tropical de Investigacion y Ensenanza
(CATIE) in Costa Rica and subsequently at the University of Florida (Homestead),
eventually moving to his present position. His research activities combine field and
laboratory activities and are often multi-disciplinary and typically focused on the
conservation and characterization of genetic resources/diversity. In addition to con-
ducting research, he curates collections of various crop and crop-related taxa. He
currently resides in Griffin, Georgia.

Kevin McCluskey obtained his Bachelor’s and Master’s degrees at Stanford


University. After working in an MIT lab developing applications for a prototype
Positron Emission Tomography system, he obtained his Doctorate in Botany and
Plant Pathology at Oregon State where he pioneered the application of pulsed field
gel electrophoresis to study the genomes of plant pathogenic fungi. Following a post-
doctoral fellowship studying Fusarium at the University of Arizona, he accepted the
position of Curator of the Fungal Genetics Stock Center. As curator, he developed the
FGSC website and the databases that allow clients to identify and request materials.
He became a leader in the national and international culture collection communities
and was elected twice to the Executive Board of the World Federation for Culture
Collections. After two terms on the Executive Board, he was elected Vice President
of the WFCC. Dr. McCluskey was the Principal Investigator of the NSF Research
Coordination Network grant that established the US Culture Collection Network.
He has also served on the Convention on Biological Diversity Global Taxonomy
Initiative and also the CBD ad hoc Technical Expert Group on Digital Sequence
Information. He is a scientific member of the US National Genetic Resources
Advisory Council and also served two terms on the American Phytopathological
Society Public Policy Board. Dr. McCluskey has published over 50 articles and chap-
ters on fungal genetics and genomics. He retired from the FGSC in 2018 and is cur-
rently working in biotechnology.

xi
Contributors
Erik C. Andersen Deborah K. Crist
Department of Molecular Biosciences Arabidopsis Biological Resource Center
Northwestern University Center for Applied Plant Sciences
Evanston, Illinois The Ohio State University
Columbus, Ohio
Jelena Brkljacic
Arabidopsis Biological Resource Center Raymond H. Cypess
Center for Applied Plant Sciences American Type Culture Collection
The Ohio State University (ATCC)
Columbus, Ohio 10801 University Boulevard
Manassas, Virginia
Christopher S. Calhoun
Arabidopsis Biological Resource Center Aric L. Daul
Center for Applied Plant Sciences Department of Genetics
The Ohio State University University of Minnesota
Columbus, Ohio Minneapolis, Minnesota

Donna Cassidy-Hanley Paul Doerder


Tetrahymena Stock Center Tetrahymena Stock Center
Microbiology and Immunology Microbiology and Immunology
C5 152 Veterinary Medical Center C5 152 Veterinary Medical Center
Cornell University Cornell University
Ithaca, New York Ithaca, New York

D. Mariola Castrejon Samantha L. Fenn


Arabidopsis Biological Resource Center American Type Culture Collection
Center for Applied Plant Sciences (ATCC)
The Ohio State University 10801 University Boulevard
Columbus, Ohio Manassas, Virginia

Theodore Clark April Freeman


Tetrahymena Stock Center Zebrafish International Resource Center
Microbiology and Immunology Institute of Neuroscience
C5 152 Veterinary Medical Center University of Oregon
Cornell University Eugene, Oregon
Ithaca, New York

xiii
xiv Contributors

Erich Grotewold Vimala Kaza


Arabidopsis Biological Resource Center Peromyscus Genetic Stock Center
Center for Applied Plant Sciences University of South Carolina
and Columbia, South Carolina
Department of Molecular Genetics
The Ohio State University Hippokratis Kiaris
Columbus, Ohio Department of Drug Discovery and
and Biomedical Sciences
College of Pharmacy
Department of Biochemistry and and
Molecular Biology Peromyscus Genetic Stock Center
Michigan State University University of South Carolina
East Lansing, Michigan Columbia, South Carolina

Amanda Havighorst Emma M. Knee


Department of Drug Discovery and Arabidopsis Biological Resource Center
Biomedical Sciences Center for Applied Plant Sciences
College of Pharmacy The Ohio State University
University of South Carolina Columbus, Ohio
Columbia, South Carolina
David Lains
Manzour Hernando Hazbón Zebrafish International Resource Center
American Type Culture Collection Institute of Neuroscience
(ATCC) University of Oregon
10801 University Boulevard Eugene, Oregon
Manassas, Virginia
Matthew Laudon
Ron Holland Department of Plant and Microbial
Zebrafish International Resource Center Biology
Institute of Neuroscience University of Minnesota
University of Oregon St. Paul, Minnesota
Eugene, Oregon
Paul A. Lefebvre
Marko E. Horb Department of Plant and Microbial
The National Xenopus Resource Biology
Marine Biological Laboratory University of Minnesota
Eugene Bell Center for Regenerative St. Paul, Minnesota
Biology and Tissue Engineering
Woods Hole, Massachusetts Benson E. Lindsey
Arabidopsis Biological Resource Center
Jen-Jen Hwang-Shum Center for Applied Plant Sciences
Zebrafish International Resource Center The Ohio State University
Institute of Neuroscience Columbus, Ohio
University of Oregon
Eugene, Oregon
Contributors xv

Yuan Lu Chris Muzinic


Department of Chemistry & Department of Neuroscience
Biochemistry Spinal Cord and Brain Injury Research
Xiphophorus Genetic Stock Center Center
Texas State University and
San Marcos, Texas Ambystoma Genetic Stock Center
University of Kentucky
James W. Mann Lexington, Kentucky
Arabidopsis Biological Resource Center
Center for Applied Plant Sciences Laura Muzinic
The Ohio State University Department of Neuroscience
Columbus, Ohio Spinal Cord and Brain Injury Research
Center
Jennifer Matthews and
Zebrafish International Resource Center Ambystoma Genetic Stock Center
Institute of Neuroscience University of Kentucky
University of Oregon Lexington, Kentucky
Eugene, Oregon
Eva Nagy
Kevin McCluskey Arabidopsis Biological Resource Center
Fungal Genetics Stock Center Center for Applied Plant Sciences
Department of Plant Pathology The Ohio State University
Kansas State University Columbus, Ohio
Manhattan, Kansas
Andrzej Nasiadka
Sean McNamara Zebrafish International Resource Center
The National Xenopus Resource Institute of Neuroscience
Marine Biological Laboratory University of Oregon
Eugene Bell Center for Regenerative Eugene, Oregon
Biology and Tissue Engineering
Woods Hole, Massachusetts Eduardo Orias
Tetrahymena Stock Center
Julie A. Miller Microbiology and Immunology
Arabidopsis Biological Resource Center C5 152 Veterinary Medical Center
Center for Applied Plant Sciences Cornell University
The Ohio State University Ithaca, New York
Columbus, Ohio
Courtney G. Price
Katrina Murray Arabidopsis Biological Resource Center
Zebrafish International Resource Center Center for Applied Plant Sciences
Institute of Neuroscience The Ohio State University
University of Oregon Columbus, Ohio
Eugene, Oregon
xvi Contributors

Erin Quinn R. Keith Slotkin


Zebrafish International Resource Center Arabidopsis Biological Resource Center
Institute of Neuroscience Center for Applied Plant Sciences
University of Oregon and
Eugene, Oregon Department of Molecular Genetics
The Ohio State University
Marco A. Riojas Columbus, Ohio
American Type Culture Collection
and
(ATCC)
10801 University Boulevard Donald Danforth Plant Science Center
Manassas, Virginia St. Louis, Missouri
and
Ann E. Rougvie
Department of Genetics Division of Biological Sciences
University of Minnesota University of Missouri
Minneapolis, Minnesota Columbia, Missouri

Markita Savage Zoltan M. Varga


Department of Chemistry & Zebrafish International Resource Center
Biochemistry Institute of Neuroscience
Xiphophorus Genetic Stock Center University of Oregon
Texas State University Eugene, Oregon
San Marcos, Texas
S. Randal Voss
Carolyn Silflow Department of Neuroscience
Department of Plant and Microbial Spinal Cord and Brain Injury Research
Biology Center
University of Minnesota and
St. Paul, Minnesota Ambystoma Genetic Stock Center
University of Kentucky
Frank P. Simione Lexington, Kentucky
American Type Culture Collection
(ATCC) Ronald B. Walter
10801 University Boulevard Department of Chemistry &
Manassas, Virginia Biochemistry
Xiphophorus Genetic Stock Center
Terry W. Snell Texas State University
School of Biological Sciences San Marcos, Texas
Georgia Institute of Technology
Atlanta, Georgia
Contributors xvii

Monte Westerfield Marcin Wlizla


Zebrafish International Resource Center The National Xenopus Resource
Institute of Neuroscience Eugene Bell Center for Regenerative
University of Oregon Biology and Tissue Engineering
Eugene, Oregon Woods Hole, Massachusetts

Cale Whitworth Daniel R. Zeigler


Bloomington Drosophila Stock Center Department of Microbiology
Department of Biology The Ohio State University
Indiana University Bloomington Columbus, Ohio
Bloomington, Indiana
1 Introduction to the
Laboratory Axolotl
and the Ambystoma
Genetic Stock Center
S. Randal Voss, Laura Muzinic and Chris Muzinic

CONTENTS
Introduction ................................................................................................................1
The Axolotl Model Organism .................................................................................... 2
The Ambystoma Genetic Stock Center ......................................................................4
Website .......................................................................................................................5
Axolotl Stocks............................................................................................................5
Extrinsic Environmental Variables—Ensuring Reproducible Axolotl Research ....... 6
Water Quality ........................................................................................................6
Housing and Diet...................................................................................................7
Temperature and Light ..........................................................................................9
Conclusions .............................................................................................................. 10
References ................................................................................................................ 10

Abstract: Laboratory populations of the Mexican axolotl have been sustained


for over 150 years in support of biological research. With recent advances in
genetic and genome resource development, the axolotl is attracting considerable
attention from new researchers, especially in the area of tissue regeneration. To
reduce the learning curve and generally facilitate broader use of the axolotl, we
introduce the Ambystoma Genetic Stock Center (AGSC), a research resource
center that sustains and makes axolotl stocks available to researchers nationally
and internationally. In order to assist researchers who are unfamiliar with axo-
lotl biology, we describe our methods of husbandry, highlighting water quality
and extrinsic environmental variables that the stock center controls and moni-
tors to ensure axolotl health and well-being.

INTRODUCTION
In this chapter we introduce the primary salamander model in laboratory research,
the Mexican axolotl (Ambystoma mexicanum). We also introduce the Ambystoma
Genetic Stock Center (AGSC), which is funded by the National Institutes of Health

1
2 The Biological Resources of Model Organisms

(NIH) to provide axolotls in support of biomedical research. Our objective is to pro-


vide useful information to those that use, or are planning to use, axolotls in research
and educational activities.

THE AXOLOTL MODEL ORGANISM


The axolotl has a deep and rich history as a laboratory model organism. Present
day laboratory populations trace their ancestry back to an original collection of 34
axolotls that were shipped to Paris in 1863 from aquatic habitats near present day
Mexico City (Reiß et al. 2015). Over the next few decades, axolotls were propa-
gated in laboratories across Europe and used to study questions related to develop-
ment and evolution, and these studies helped to originate the field of experimental
zoology. During the twentieth century, axolotls factored prominently in studies
of embryonic and post-embryonic development, sex determination, cloning, and
tissue regeneration (Smith and Smith 1971, Voss et al. 2009). Today, axolotls are
attracting increased attention from biomedical researchers due to their unrivaled
ability to regenerate entire organs. They share the body plan of tetrapod vertebrates
(Figure 1.1) and are unique in their ability to regenerate a broad spectrum of dam-
aged organs throughout life, including limbs, spinal cord, brain, lens, skin, ovary,
and heart (Amamoto et al. 2016, Cano-Martínez et al. 2010, Erler et al. 2017, Haas
and Whited 2017, Ponomareva et al. 2015, Suetsugu-Maki et al. 2012, Tazaki et al.
2017, Yokoyama et al. 2018). Understanding the cellular and genetic mechanisms

FIGURE 1.1 (See color insert.) Three different Mexican axolotl stocks that differ in their
pigment pattern. The wildtype axolotl has three different pigment cells (xanthophores, mela-
nophores, and iridophores) that combine to yield a dark greenish coloration (left). The white
axolotl (center) is homozygous for a mutated endothelin 3 gene that results in the loss of dark
melanocytes soon after hatching. The golden albino (right) has an abundance of yellow xantho-
phores but lacks a functional tyrosinase gene for melanin production. (Courtesy of Lee Thomas.)
Introduction to the Laboratory Axolotl 3

by which axolotls regenerate tissues could have clinical significance for treating
human trauma, disease, and aging.
In several ways, the axolotl was pre-adapted to become a laboratory model.
Axolotls are members of the Tiger salamander complex, a group of ambystoma-
tids that exhibit considerable variation in life history and modes of development
(Shaffer and Voss 1996, Voss et al. 2015). Some species undergo a metamorphosis
after an aquatic larval phase and gain traits for terrestrial life. Other species like
the axolotl are paedomorphic and remain in the aquatic habitat throughout their
life cycle. While it is possible to rear metamorphic forms in the lab, the axolotl’s
totally aquatic life history greatly simplifies laboratory culture. Moreover, axo-
lotls are capable of breeding more than one time a year and produce considerably
more offspring per spawn than metamorphic forms, which are seasonal breed-
ers. Axolotls are ideal laboratory models because they can be propagated as cap-
tive managed populations that are self-sustaining and capable of providing living
stocks (embryos, larvae, juveniles, and adults) to meet the needs of a research com-
munity. In contrast, other salamanders that are used in biomedical research are
annual breeders that are harvested from natural populations. In particular, newts
(Notophthalmus) and Tiger salamanders (A. tigrinum) continue to be harvested
from natural populations in the US for regeneration and retina electrophysiology
preparations, respectively. Because amphibians in general are declining around the
world, it is difficult to justify the collection of salamanders from natural popula-
tions for laboratory studies when axolotl stocks are available from a sustainable,
captive-bred population (Baddar et al. 2015).
Axolotls are interesting research models because they maintain juvenile morphol-
ogy throughout their life. Unlike their ancestors, axolotls typically do not undergo
metamorphosis and transition to land during their life cycles. This mode of develop-
ment is called paedomorphosis (Gould 1977) and the evolution of paedomorpho-
sis is associated with changes in neuroendocrine axes that regulate metamorphosis
(Johnson and Voss 2013). Paedomorphosis evolved so recently in axolotls that the
ancestral metamorphic mode of development can be induced by adding thyroid hor-
mone to an axolotl’s rearing water (Page and Voss 2009).
Because of the recent development of a chromosome scale genome assembly
(Smith et al. 2019) and tools to manipulate gene function (Fei et al. 2017, Flowers
et al. 2014, Khattak and Tanaka 2015, Khattak et al. 2014, Woodcock et al. 2017),
it is now possible to investigate the molecular basis of thyroid hormone signaling
and paedomorphosis. Indeed, the impact of having an axolotl genome assembly
on future research efforts cannot be overstated. The assembly of the enormous
~30 Gb axolotl genome enables sequence-based methods of inquiry that are typi-
cal of genetic model organisms. For example, researchers can access gene mod-
els from which to identify mutants and design molecular tools for PCR, reporter
constructs, and genome editing. Additionally, information from coding and non-
coding regions enriches our understanding of amphibian genome structure and
function, and provides context for annotating and interpreting transcriptomic,
genomic, and epigenetic datasets. Further improvements in the quality of the
assembly and databases from which to access information will facilitate broader
use of the axolotl in biomedical research.
4 The Biological Resources of Model Organisms

THE AMBYSTOMA GENETIC STOCK CENTER


Almost all of the domesticated axolotls in the world trace their ancestry to the AGSC at
the University of Kentucky, which is funded by the NIH (P40-OD019794) to provide
axolotls in support of research and educational efforts. This collection is irreplace-
able because decades of inbreeding have yielded homogeneous genetic stocks that
thrive in the lab (Voss and Kump 2016). The collection provides standard living stocks
(embryos, larvae, and adults) and supplies to culture axolotls in investigator labs. By
supplying living material from a single facility, the AGSC minimizes the need for
smaller satellite collections. This effectively reduces the cost of animal use for inves-
tigators, and yearly expenses for the entire research community are greatly reduced
because axolotl material is obtainable on demand. Many AGSC users are located at
institutions that do not have the equipment, expertise, or dedicated space to rear axo-
lotls. For investigators that maintain relatively large numbers of axolotls, the AGSC
serves as a back-up facility to replenish stocks and as a source of genetic variation
to maintain the vigor of strains. For investigators that need early stage embryos, the
AGSC provides breeders with advice about performing crosses and maintaining axo-
lotls. Thus, the AGSC serves the needs of investigators in a variety of ways, and it is
the historical with contemporary source of axolotl stocks in the world.
The AGSC has approximately 3000 sq ft for maintaining approximately 1000
juvenile and adult axolotls, and thousands of embryos and larvae. The AGSC pri-
marily functions as a custom order business as it is too costly to maintain all axolotl
stocks in sufficient numbers to meet immediate user needs. Thus, it is important
that users plan their experiments well ahead of time as it can take several months to
produce some stocks and a year to produce adults (Figure 1.2).

FIGURE 1.2 Diagram illustrating the integration of the axolotl life history in the laboratory
with husbandry variables.
Introduction to the Laboratory Axolotl 5

WEBSITE
Users initiate the purchasing process by first completing an online registration form
that is available from the AGSC webpage (http://www.ambystoma.org/genetic-stock-
center). After registering, users are put into contact with AGSC staff to discuss their
order and the timeframe for receiving purchased stocks.
In addition to supplying axolotl stocks and associated husbandry supplies,
the AGSC serves as an informatics hub where investigators obtain information
about the collection, technical procedures, potential collaborators, and research
findings. Several times each week, AGSC staff respond to user questions and
every effort is made to provide answers to queries within 24 hours. An indepen-
dent website was developed for the AGSC to ensure flexibility and control of
web and database design, networking, and file storage. Information on the AGSC
website provides researchers with a list of available stocks, pricing, and instruc-
tions on how to order axolotls and related supplies. Also, the AGSC website
provides information concerning axolotl husbandry, development, and genetics.
The AGSC website is accessible through Sal-Site (Baddar et al. 2015) which
was developed under NIH-funding (R24-OD010435) to distribute genome-based
informatics to the research community. A newsletter (Axolotl) is distributed
annually to keep the community informed about axolotl services, new advances
in the field, NIH policies and opportunities, and techniques (Keinath et al. 2018,
Voss and Kump 2016).

AXOLOTL STOCKS
The AGSC maintains a variety of axolotl stocks of all life stages, as well as
mutants and transgenics. Each stock is associated with a unique Research
Resource Identifier (RRID) number (Table 1.1) as recommended by the
Resource Identification Initiative at SciCrunch (SciCrunch.org). The RRID is a
database-driven initiative that seeks to ‘barcode’ all of the critical reagents and
tools that are used in the course of scientific research with RRIDs. In addition
to wild types, there are three pigment mutants (melanoid, white, albino), two
lethal mutants (cardiac and short toes), one sterile mutant (eyeless), and two
transgenics (green fluorescent protein and red fluorescent protein) that were
donated by Elly Tanaka (IMP, Vienna). The color mutants and ubiquitously
expressing transgenic axolotls facilitate tissue grafting and cell lineage experi-
ments. Three of the mutants were recently cloned (Smith et al. 2019, Woodcock
et al. 2017) and others are in various stages of gene identification. For example,
the albino mutant traces to an interspecific hybridization in 1962 that introduced
a mutated, A. tigrinum tyrosinase allele into the AGSC population, as well as
additional A. tigrinum genomic DNA. The number of stocks in the AGSC is
expected to increase over the next few years as a result of community efforts in
making transgenics and mutants.
6 The Biological Resources of Model Organisms

TABLE 1.1
Research Resource Identifier (RRID) Numbers for the Various Axolotl Stocks
Available or Not Available (NA) from the Ambystoma Genetic Stock Center
Life Stage
Stock Embyro Hatchling Larva Juvenile Sub-Adult Adult
Wildtype C_100E C_100H C_100L C_100J C_100S C_100A
White C_101E C_101H C_101L C_101J C_101S C_101A
Albino C_102E C_102H C_102L C_102J C_102S C_102A
Melanoid C_103E C_103H C_103L C_103J C_103S C_103A
GFP-white C_110E C_110H C_110L C_110J C_110S C_110A
RFP-white C_112E C_112H C_112L C_112J C_112S C_112A
Cardiaca C_104E NA NA NA NA NA
Short toesa C_106E NA NA NA NA NA
Eyelessa C_108E NA NA NA NA NA
Cardiac-Cb NA NA NA C_104J C_104S
C_104A Short toes-Cb NA NA NA C_106J
C_106S C_106A Eyeless-Cb NA NA NA
C_108J C_106S C_108A

a Available as a complete spawn with 25% frequency of mutants.


b Carrier.

EXTRINSIC ENVIRONMENTAL VARIABLES—ENSURING


REPRODUCIBLE AXOLOTL RESEARCH
There is growing appreciation for the need to monitor and report extrinsic envi-
ronmental variables that can affect the reproducibility of scientific experiments
(Federation of American Societies for Experimental Biology 2016). This includes all
of the variables that are standardized in the rearing of animals in stock centers like
the AGSC. It seems likely that new standards for reporting extrinsic environmental
variables will be codified by granting agencies and journals in the near future. Thus,
to aid axolotl users going forward, we address the most important extrinsic environ-
mental variables for ensuring reproducibility of scientific research using the axolotl.
This information will be useful to those that obtain axolotl stocks from the AGSC
or want to establish satellite axolotl facilities with parallel standard operating pro-
cedures. These variables include water quality, temperature, housing, diet, and light.

Water Quality
Axolotl health and well-being is critically tied to water quality. Axolotls are freshwa-
ter organisms that thrive in a dilute saline solution. The AGSC uses reverse osmosis
(RO) water to make Axolotl Rearing Water (ARW) that contains 1.75 g NaCl, 100 mg
MgSO4, 50 mg CaCl2, and 25 mg KCl per liter. The water is buffered by manual or
automatic-dosing of NaHCO3 to achieve a pH in the range of 7.1–7.6. Larvae, juve-
niles, and adults are reared in 100% ARW while 50% ARW is used to rear embryos.
Introduction to the Laboratory Axolotl 7

Recognizing that many investigators might not have access to RO water, we note that
it is possible to use other water sources and filtration systems to prepare ARW. In the past,
we have used distilled water and charcoal filtered municipal water to make ARW, and
some labs have reported success in rearing axolotls in minimally conditioned well-water
and municipal water. Water chemistry, including pH, can vary dramatically when using
municipal water and it is important to mitigate municipal water additives (e.g. chorine,
chloramine, and ammonia) that are toxic to axolotls. Chlorine and chloramine can be
removed by charcoal filtering or by aging water with an air bubbler. Ammonia can be
removed by adding conditioners like Amquel Plus (Kordon). When using municipal water,
pH, ammonia, and chlorine/chloramine should be carefully and frequently monitored to
ensure axolotl health. Ammonia is less of a concern when rearing axolotls statically in
bowls because the frequency of water changes can be scheduled to mitigate ammonia
buildup. However, it is important to carefully and frequently measure ammonia when
rearing axolotls in recirculating systems or large tanks with filters. When measured along-
side nitrites and nitrates, ammonia provides an indicator of water quality. When ammonia
levels exceed 2.0 ppm within a recirculating system, the system is not in equilibrium in
regards to the nitrogen cycle. This can be a serious problem if the pH is also high because
high pH increases ammonia toxicity. To mitigate high ammonia and pH (>8.0) in recir-
culating systems, 10% of the water is replaced daily with fresh, 100% ARW. Additional
water changes may be needed to bring non-equilibrium systems below pH 8.00, at which
time an ammonia detoxifier (e.g. Amquel Plus) can be added to alleviate ammonia
buildup. However, a second reason for high ammonia levels in a recirculating system is
inefficient biological filtration. To mitigate this problem, nitrifying bacteria can be added
to a system to increase ammonia processing through the nitrogen cycle. The AGSC uses
ProLine Nitrifying Bacteria (Pentair Aquatic Eco-Systems) following manufacturer dos-
ing instruction for both initial set up and maintenance of recirculating systems.

Housing and diet


Several methods are used to house axolotls in research and educational settings.
The three primary methods are static housing (still water that is changed frequently),
filtered aquaria, and recirculating systems. The AGSC uses static housing and recircu-
lating systems to house all stocks (Figure 1.3). An advantage of static housing is that a

FIGURE 1.3 Ambystoma Genetic Stock Center axolotl adults housed using both automated
recirculating systems (left) and statically maintained containers on rolling carts (right).
8 The Biological Resources of Model Organisms

larger number of animals can be maintained within a small foot print. For example, 66
adult animals can be maintained on a single 36″ × 21″ × 60″ mobile rack. However,
static housing requires frequent water changes and bowl cleaning and thus signifi-
cantly more labor. Recirculating systems require less hands-on cleaning because water
changes are automatic and continuous, and tanks only need to be cleaned every two
weeks. However, recirculating systems require a larger footprint. Each double-sided
recirculating system in the AGSC supports 60 animals but occupies the same space
as three mobile racks (198 animals). Also, recirculating systems require a significant
upfront financial investment and greater technical expertise to maintain. These trade-
offs should be considered well in advance of establishing a facility to rear axolotls.
As a general rule, the size of a housing container should scale with animal number
and body size. In the AGSC, husbandry begins with embryos that are housed in circular
1.5-L glass bowls with no more than 200 individuals per bowl. The water is manually
stirred once daily to ensure oxygenation and dead embryos are removed. When neces-
sary to slow down or speed up development, embryos are reared for short periods of
time at 6°C and 24°C respectively. After larvae hatch, they are transferred to clean
1.5-L glass bowls with 100% ARW and reared in mass. When larvae make air bubbles
at the surface of the water to indicate the onset of feeding behavior, they are fed newly
hatched brine shrimp. Setting up a brine shrimp hatchery is fairly simple with a kit
available from the AGSC (Table 1.2) and instructions provided on the AGSC website.
Regardless of what method is used to rear brine shrimp, unhatched eggs and egg
shells should be removed before feeding because brine shrimp shells and unhatched
eggs can block the intestines of larvae. Larvae are maintained at moderate-to-
low densities to prevent bite injuries to limbs and tails; however, such injuries are
inevitable unless individuals are housed separately. The vast majority of larvae in
bowls incur bite injuries that are repaired by regeneration (Thompson et al. 2014).
The AGSC offers a pay-for-fee service to rear individuals separately for investigators
that require non-bite injured axolotls.
When larvae reach 3 cm in length, individuals are moved into 2-L plastic bowls
with approximately 1 L of water. At this time, individuals are fed California black-
worms to increase their growth rate and better facilitate the transition from live
food to pelleted food, although axolotls can be reared throughout the adult phase on

TABLE 1.2
Supplies Available from the Ambystoma Genetic
Stock Center for Axolotl Husbandry
Item Catalog No.
Axolotl pellets—4 mm–1/2 lb AGSC_PL_L
Axolotl pellets—5 mm–1/2 lb AGSC_PL_S
Brine shrimp eggs–1 oz AGSC_BS
Brine shrimp hatchery kit AGSC_BSH
100% Axolotl rearing water salts–40 g AGSC_ARW
AmQuel Plus–2 oz AGSC_AMQ
NovAqua Plus–2 oz AGSC_NOV
Introduction to the Laboratory Axolotl 9

blackworms. The pelleted food is available in two sizes (4 mm for 4–8 cm animals
and 5 mm for larger animals) and is aged for 6 months prior to use. Aging the food
is necessary because the pellets contain an ingredient (most likely thyroid hormone
from bovine blood) that can induce spontaneous metamorphosis. Individuals are fed
2–3 pellets twice a week. When individuals reach 8–9 cm in length they are moved
into larger 4-L bowls containing 2.5 L of water. The AGSC sells pelleted food and
salts to make ARW to better ensure reproducibility of axolotl husbandry (Table 1.2).
The method of husbandry (static vs. recirculating system) determines the fre-
quency of cleaning axolotl housing containers. During the embryonic period, water
is changed as needed. Embryos do not produce a lot of waste but dead embryos and
residual feces from the mating parents can foul water. During the larval period, all
the individuals in a bowl are strained into a net and the net is placed into a tempo-
rary holding container while the bowl is cleaned with a dilute bleach solution (5%)
or baking soda, and then thoroughly rinsed. After the addition of fresh 100% ARW,
larvae are returned to their original bowl. This procedure ensures that larvae from
different spawns are not mixed during the cleaning process. When larvae/juveniles/
adults are reared individually in single bowls, water is changed every 3–4 days using
the same cleaning method described above. In general, the frequency of cleaning
needs to be optimized for animal and container size, and as was mentioned earlier,
water quality. Animals that foul their bowls before their scheduled cleaning should
be attended to immediately.
Aquarius (Aquatic Enterprises) recirculating systems are used within the AGSC to
house the majority of the adult breeding population. Each system is constructed of pow-
der coated steel or aluminum racks with molded polycarbonate boxes. The life support
system includes an 80-gallon sump per rack (8 per system) with screen filters, a self-
cleaning rotating drum filter, high efficiency pumps, a 100-W UV sterilizer, carbon
filter, with an automatic water change system, drawing water from a 100-gallon reser-
voir tank. Each system is automated using a NEMA protected ProFilux touchscreen
monitoring system that includes sensors for pH, conductivity, temperature, and water
level. Dosing tanks are maintained at pH 7.5 and conductivity at 4.2 μS (based on 100%
ARW). Males are housed individually in 8-L containers, while females are housed three
per 23-L container. As was mentioned previously, approximately 10% of the water in
each system is changed daily and containers are cleaned every 2 weeks.
Although the AGSC utilizes static and recirculating housing methods, it is pos-
sible to house axolotls in filtered aquaria. Ideally, no more than two adults should be
housed together in a 10-gallon tank. The use of substrate is discouraged as axolotls
will ingest small rocks and gravel during feeding. Low current power filters with
biological filtration can efficiently mitigate ammonia and nitrates; however, it is still
necessary to perform weekly 10% water changes and monitor water chemistry.

temperature and ligHt


To maintain a relatively constant temperature of 15°C–17°C the AGSC relies upon
both the building HVAC system and auxillary air-cooling units. A 12 hr light/12 hr
dark photoperiod is maintained throughout the year and the facility is lit by cool-
white fluorescent lighting that is typical of research and educational buildings.
10 The Biological Resources of Model Organisms

CONCLUSIONS
In this chapter we introduced the Mexican axolotl and the primary stock center that
provides axolotls to researchers and educators. The axolotl has the deepest labora-
tory pedigree of all animal models and with the recent development of a genome
assembly its use will likely expand in coming years, especially in the area of tissue
regeneration. This will present new opportunities and challenges for the AGSC. To
meet the needs of an expanding research community it will be important to priori-
tize production of the most useful stocks and develop methods to cryopreserve an
increasing number of transgenic and mutant lines that are being produced within the
community. It will also be important to sustain the central role that the AGSC plays
in facilitating axolotl research and education by providing homogeneous stocks, sup-
plies, services, and useful information about axolotl husbandry.

REFERENCES
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num). Cold Spring Harbor Protocols. doi:10.1101/pdb.prot5268.
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NOTAS:
[7] Este artículo fué leído por su autor en una velada literario-
musical, dispuesta por el Alcalde de Santander, don Tomás C. de
Agüero, á beneficio de los pobres.
MANÍAS

Afirmo que no existe, ni ha existido, un nieto de Adán sin ellas. Por


lo que á mí toca, desde luego declaro que tengo una. Por ser lo que
es y de quien es, no quiero aburrir al lector diciéndole en qué
consiste; pero, en cambio, voy á hablarle de las suyas y de las de
sus amigos y allegados, con la previa advertencia de que la palabra
manía no ha de tener aquí la única significación de locura que le da
la ciencia; yo la uso, además, en su acepción vulgar de
extravagancia, resabio, etc. Así las cosas, repito que la humanidad
entera es una pura manía. Me he convencido de ello desde que al
conocer la mía, y por el deseo de consolarme de ella, di en la de
observar las del prójimo.
Yo era de los cándidos que ven á los hombres privilegiados sólo á la
luz de su fama ó de sus relumbrones, y á los colaterales, con las
cataratas que da la costumbre de mirarlos sin reparar en ellos.
Un escritor ilustre, un pensador profundo, era á mis ojos el hombre
que veía en sus libros. Representábamele, escribiéndolos, lo mismo
que se retratan los poetas cursis: vestidos de etiqueta, arrimados al
pupitre, graves y solemnes, y observando aquella regularidad
matemática que encarga Torío que haya entre la mesa y el asiento;
rodeados de libros en pasta, unos cerrados, otros abiertos; la
cabeza alta, los ojos casi en blanco, y las ideas pasando de la
mente á la pluma con la facilidad con que bajan las cristalinas
murmurantes aguas del monte á la llanura. De una inocentada por el
estilo debe de haber nacido la admitida creencia de que Buffon
escribió su Historia Natural con guantes blancos.
Si la celebridad era del género cáustico, veíala yo igualmente
sentada á la mesa, ataviada en carácter, con cierto desaliño
artístico, la melena revuelta y ondulante, por pluma una saeta con
cascabeles, la boca sonriente y los ojos chispeantes; y éste y el
otro, y todos los hombres de su talla, escribían á todas horas y
siempre que se les antojaba. Los chistes de los unos y las
profundidades de los otros, eran tan necesarios en ellos, como la
facultad de ver en cuanto se abren los ojos. Sus cerebros estaban
en constante elaboración, sin fatigas, sin violencias, sin la menor
dificultad, y derramaban las ideas digeridas y á borbotones sobre el
papel, tan pronto como la voluntad alzaba las compuertas con la
pluma.
Á los guerreros famosos representábamelos siempre como se ven
en el teatro, con la mirada napoleónica, cargados de cruces y
alamares, y andando á paso trágico; á los diplomáticos, con la
casaca bordada, la diestra en el pecho, sentados en áureo sillón,
muchos protocolos encima de la mesa, y la izquierda mano sobre
uno de ellos; á los músicos, á los pintores, abismados en las
profundidades de su inspiración. En unos y en otros casos, nada de
prosa doméstica, nada de dolores del cuerpo, nada de
extravagancias, ni de resabios, ni de vulgar...
¡Qué candor el mío! Precisamente en esta aristocracia de la
humanidad es donde andan el desorden, las miserias, las pasiones
y las manías como Pedro por su casa; y no habría libro más
curioso... ni más triste, que el que tratara de las preocupaciones,
ridiculeces, vicios y extravagancias de los grandes hombres, y de
los que levantan una pulgada más que el vulgo de las gentes.
Desde luego puede asegurarse que no hay, ni ha habido sabio, ni
escritor de nota, que haya tenido ni tenga método, ni orden, ni
gobierno en el estudio, ni en la comida, ni para escribir; y rara es la
obra que leemos y contemplamos con admiración, que no
necesitara, como auxiliar poderoso en su nacimiento, alguna manía
prosaica y hasta grotesca.
Os dirán de un poeta célebre sus amigos, que escribe de pie y sobre
un montón de libros colocados en una silla.
Mezerai, el historiador, trabajaba con luz artificial de día, y despedía
á las personas que iban á verle acompañándolas, con la bujía en la
mano, hasta la puerta de la calle.
Á Corneille le daba por lo contrario: buscaba la obscuridad para
componer sus obras.
¿Quién no ha visto á Walter Scott retratado con un perro á su lado?
La fama dice que manoseando la cabeza de este animal, era como
mejor pensaba y escribía el célebre novelista escocés.
Malherbe era muy friático, y se ponía varios pares de medias á la
vez; por lo cual, y temiendo ponerse en una pierna más que en la
otra, las marcaba con letras. Él mismo confiesa que hubo día en que
llegó á calzarse hasta la L.
De un literato español, de reciente fecha, Zea, dice uno de sus
amigos que, mientras meditaba, se golpeaba la cabeza con una
reglilla.
Gretry, el músico, para inspirarse ayunaba rigorosamente y tomaba
café á pasto, y enardecía su musa tocando el piano sin cesar, hasta
arrojar sangre por la boca. Sólo entonces descansaba y trataba de
contener la hemorragia. Refiérelo el doctor Reveille-Parise, famoso
higienista.
Paer, mientras componía, gritaba con todas sus fuerzas y mandaba
á su mujer, á sus amigos y á sus criados que gritasen también.
Paisiello componía en la cama, y Zingarelli leyendo los clásicos
latinos y los Padres de la Iglesia.
Á Byron le envanecía más su renombre de nadador que de poeta; y
el haber pasado seis veces el Helesponto por realizar la fábula de
Leandro, le halagaba más el orgullo que el haberse vendido en un
solo día 18.000 ejemplares de su Don Juan. Tenía pasión por andar
en mangas de camisa por parques y alamedas; y antojándosele que
los transeúntes reparaban demasiado en su cojera, muy á menudo
se enredaba á sopapos con ellos. En Inglaterra fué su vida un
perpetuo escándalo que jamás le perdonó aquella encopetada
aristocracia. Teniendo miedo á la obesidad, que él llamaba
hidropesía de aceite, cuando fué á Grecia sólo se alimentó de
manteca y vegetales; y como este alimento no bastaba á su
naturaleza poderosa, entretenía el hambre, que sin cesar le
asaltaba, con una oblea empapada en aguardiente. Todas las
mañanas se medía la cintura y las muñecas. (Véanse sus
Memorias).
Edgard Poe buscaba la luz fatídica y misteriosa con que alumbra
sus portentosas investigaciones por los abismos del espíritu
humano, en el alcohol. Era un borracho contumaz: matóle el delirium
tremens, y se halló su cadáver en medio de la vía pública.
La vida de Swift, el inmortal autor de los Viajes de Gulliver, fué una
cadena de deslealtades y prevaricaciones, terminada con la locura.
Al célebre J. Jacobo le atormentaba sin cesar la duda de su final
destino. Refiérese que en sus frecuentes paseos solitarios, lo mismo
que en su habitación, solía elegir un blanco en los árboles ó en la
pared, al cual lanzaba su bastón desde cierta distancia.—«Si doy en
él, pensaba, mi alma será salva; si no le toca, se condenará».
Lichtemberg dice textualmente: «Nadie es capaz de saber lo que yo
padezco al considerar que, desde veinte años hace, no he podido
estornudar tres veces seguidas... ¡Ah! si yo consiguiera persuadirme
de que estoy bueno, ¡qué feliz, sería!».
Carlos Nodier no admitía en su biblioteca más que libros en 8.°, y
Joubert arrancaba de los que adquiría todas las hojas que no le
agradaban; y como era hombre de gusto, quedábase con poco más
que la encuadernación de cada libro.
El pintor Rembrandt se moría de hambre teniendo tesoros
amontonados en los sótanos de su miserable vivienda.
Balzac sentía verdadera fiebre especuladora, y se pasó la vida
tanteando negocios, siempre de baja estofa y desatinados, porque
tenía poco dinero y no sabía más que escribir novelas...
Y ¿á qué seguir, cándido lector, si no cabría en libros la lista de las
especies de rarezas, vicios y debilidades que tienen y han tenido los
hombres cuyas obras admira el mundo y vencerán al tiempo?
¿Qué te diré yo ahora si de esa encumbrada región descendemos al
mísero polvo de la tierra, á la masa vulgar de los mortales? Mira en
tu casa, mira en tu calle, mira en la plaza, en la tertulia, en el paseo,
y verás que cada hombre es una manía cuando no un vivero de
ellas.
Tu mujer no se cortará las uñas en menguante, ni dormirá con
sosiego después de haber derramado la sal sobre la mesa; ni tú te
pondrás á comer con otros doce, ni emprenderás viaje en martes, ni
permitirás que en tal día se case ninguno de tus hijos.
Fíjate en el primer corrillo que encuentres al salir de casa, y
observa: un prójimo no halla palabras en su boca si no echa una
mano á la corbata, á las solapas, á la cadena del reló ó á las patillas
de su interlocutor. Otro se ve en igual apuro si no tira el sombrero
hacia la coronilla, y no agarra por el brazo al mártir que le escucha.
Otro necesita girar sobre sus talones para perjeñar una frase. Otro
será derrotado en una porfía, aunque defienda el Evangelio, si no se
rasca un muslo en cada premisa, y no deduce la consecuencia
sonándose las narices; y, de fijo, no faltará uno, á quien le apeste la
boca, que deje de arrimarla mucho á la tuya para darte el más breve
recado.
No digamos nada de las muletillas, hincapiés ó apoyaturas del
diálogo. Los «¿está usted?» «¿me entiende usted?««¿me explico?»
«pues»; «¿eh?» hasta el inescribible carraspeo de los que peroran,
y los «sí, señor»; «mucho que sí»; «comprendo, comprendo»;
«justo, justo»; «claro»; «¡pues digo!» «tiene usted razón»; «¡ajajá!»
de los que escuchan, aunque no entiendan lo que se les dice, son el
alma de la retórica de corrillos y cafés.
La manía de los números es de las más corrientes. Hay hombre que
la toma con el número tres, por ejemplo, y se lava de tres chapuces,
bebe de tres sorbos, se pone la corbata en tres tiempos, come á las
tres tres cosas en tres platos, da tres vueltas en el paseo y las tres
últimas chupadas al cigarro. Si el número tres no alcanza á
satisfacer sus deseos, como le sucede en la mesa, le triplica.
Las ramas de esta familia son innumerables, y á ella pertenecen por
un costado las personas que fían el éxito de sus negocios al
resultado de una apuesta que se hace in mente, por el estilo de la
que, según queda dicho, se hacía Rousseau á cada instante.
Verbigracia: un señor, á quien yo conozco, no da un paso en la calle
sin contar un día de la semana, y al salir de casa se propone él en
que ha de llegar al fin de su jornada; advirtiendo á ustedes que al
éxito de este propósito une la suerte del negocio que va á
emprender, ó del asunto que á la sazón le preocupe. Supongamos
que compra un billete de la lotería. Al salir de la administración se
dice: «Si llego á mi casa en jueves, me toca»; y hala que te vas,
comienza á contar: lunes, martes, miércoles... á razón de paso por
día. Ganará la apuesta si, al poner el pie en el umbral de la puerta
de su casa, le toca decir jueves. Estos monomaniacos son un
tantico tramposos; pues ya la experiencia les hace conocer desde
lejos si han de faltarles ó sobrarles días, por lo cual cambian el paso
en el sentido de sus conveniencias. Pero la duda de si es ó no lícita
la trampa, les hunde en nuevas preocupaciones, de lo cual les
resulta una manía-remedio tan molesta como la manía-enfermedad.
Sigue inmediatamente á ésta la de ir siempre por el mismo camino
para llegar al mismo punto; ó, al contrario, buscar una nueva senda
cada vez que se emprende el mismo viaje; la de no volver á hacer, á
comer ni á vestir, lo que hizo, comió y vistió el aprensivo el día en
que le descalabraron en la calle ó perdió el pleito; la de no pisar
jamás la raya mientras se anda por la acera; la de no embarcarse en
días de r; la de no acostarse sobre el lado izquierdo después de
beber agua... y tutti quanti.
Pues entremos con las carreras, oficios y empleos... ¿Han conocido
ustedes algún marino que no use en los negocios terrestres el
lenguaje náutico? Para el hombre de mar, si de mujeres se trata, la
jamona es una urca; la joven esbelta, una piragua; fijarse en ella,
ponerle la proa; hablarla, atracar al costado; casarse, zozobrar, irse
á pique. El amante es un corsario: si tiene mucha nariz, de gran
tajamar; si es alto, mucha guinda.
Como el marino en tierra, hay médicos, y abogados, y curiales de
toda especie, y militares... y zapateros, que usan el lenguaje técnico
de la profesión ó del oficio, siempre que pueden, que es siempre
que les da la gana, lo cual sucede cada vez que se ponen á hablar.
¿Y los aficionados á ciertos juegos? Para un sujeto á quien yo
conozco, que veinte años hace juega diariamente á la báciga, tres
muchachas bonitas juntas son un bacigote de ases; si tiene un pleito
ganado en primera instancia, dice que salió á buenas; si es amigo
del juez, que tiene comodín, y si busca recomendación para un
magistrado, es porque quiere hacer las cuatro cosas.
Es seguro que el lector conoce á más de una docena de caballeros,
de cuyos labios no se caen jamás el albur, el elijan, los párolis y
otros análogos donaires del caló de los garitos; pintoresca y culta
manía que anda ya retozando en la literatura humorística al
menudeo, y hasta en la comedia de costumbres españolas.
Y ¿qué diremos de la manía política, si la mitad del género humano
adolece de esa enfermedad? ¡Qué horas, Dios eterno, las de los
unos devorando periódicos, tragándose sesiones de Cortes,
preámbulos de decretos y movimientos del personal! ¡Qué disputas
en plazas y en cafés! ¡Qué jurar en la autoridad de ciertos nombres,
y qué renegar de otros! ¡Qué cavilaciones, qué presentimientos, qué
sudar el quilo corriendo de esquina en esquina, y qué alargar el
pescuezo, ponerse de puntillas y encandilar los ojos para leer partes
oficiales recién pegados, y hasta bandos de buen gobierno! ¡Y éstos
son hombres de arraigo, libres, independientes, que pagan sin cesar
para que vivan y engorden esos mismos personajes que caen, y se
levantan y alternan en la política imperante, y se ríen de los
cándidos babiecas que toman esas cosas por lo serio!
¡Qué vida la de los otros! El taller, el escritorio, las cajas de la
imprenta, la buhardilla angosta, el andamio... doce horas de trabajo
penoso, poco jornal, ocho de familia, deudas indispensables,
privaciones dolorosas... Y por todo consuelo, hablar muy bajito de la
que se está armando; acudir á sitios peligrosos para oir una noticia
absurda, ó entregar el roñoso ochavo del ahorro para pagar los
gastos de un viaje fantástico al falso emisario que tiene estas
estafas por oficio; ver al tirano siempre sobre sus cabezas y en su
sombra y en todas partes; dejar la herramienta, ó saltar del lecho al
menor ruido, creyéndole anuncio de la gorda; soñar con
pronunciamientos y barricadas; desechar honrosos acomodos por
amor á la idea que ni sienten ni penetran; triunfar al cabo los suyos;
echar la gorra al aire; enronquecerse victoreándolos, y quedarse tan
tejedores, tan escribientes, tan cajistas, tan zapateros, tan pobres y
tan ignorantes y tan paganos como antes... ¡y locos de contentos!...
¡Oh manía de las manías! ¡Oh candor de los candores!
He dicho que la mitad del género humano está tocada de esas
locuras. Pues la mitad de la otra mitad tiene, cuando menos, la
manía de meterse en todo lo que no le importa: lo que tiene su
vecino, lo que come, lo que viste, lo que gasta, lo que ahorra, lo que
debe; qué empresas acomete: si son atinadas, si son locuras, si se
arruinará: si lo merece, si no lo merece, si listo, si tonto, si terco, si
cándido. La casa que se construye á la plaza: por qué es tan
grande, por qué tan chica; si alta, si baja, si huelgan los peones, si
hay muchos, si hay pocos; si avanza la obra, que «así irá ello»; si va
lentamente, que «por qué no se acaba ya?» Estas cosas quitan el
sueño á muchísimos hombres, y por ellas sudan y porfían, y no
tienen paz ni sosiego.
¿Y los que se pasan lo mejor de la vida rascando las cuerdas de un
violín, hinchando las del pescuezo para hacer sonar un clarinete, ó
recortando figuritas de papel, persuadidos de que han nacido para
ello, aunque la vecindad se amotine contra la música, y hallen en los
basureros los primores que de las tijeras pasan, por paquetes, á los
álbum de sus amigas?
Y entre estos mismos seres, al parecer exentos de toda deformidad
maniática, ¿no hay cada manía que canta el credo? ¿No es un filón
de ellas cada estación del año, amén de otras que no cito por
respecto á la debilidad del sexo? ¿Qué son, sino manías, los
estatutos de la vida elegante y las exigencias de la moda?
¿Y la manía del matrimonio, y la de la paternidad, y la de la
propaganda con tan santos fines, y la de hacer versos, y la de ser
chistoso... y la de culotar pipas?
Pues todo esto, con ser tanto y tan frecuente, es un grano de anís
comparado con la manía coleccionista, que va invadiendo el mundo
con toda su redondez. Se coleccionan sellos, se coleccionan cajas
de fósforos, se coleccionan botones, y tachuelas, y sombreros, y
tirantes, y todo género de inmundicias, y se pagan precios fabulosos
por cosas que los traperos abandonan con desdén en las
barreduras. Un plato de Talavera vale ya tanto como una vajilla de la
Cartuja, y un trapo da para una capa; y si tiene auténtica y resulta
por ella ser un pedazo del herreruelo de don Rodrigo Calderón, vale
un tesoro; y no tendrá precio si se trata de un jirón de la casa de los
Jirones, ó de un pañal de la camisa de un cortesano de Felipe II. Un
Vargueño herrumbroso, infestado por las chinches y taladrado por
las polillas, vuelve tarumba al hombre de gusto que topa con él en el
desván de su vecino, ó en los montones del Rastro; y la espada
mohosa, y la daga roída, y el morrión aplastado... ¿quién sabe lo
que valen hoy si el vendedor lo entiende y el comprador es de
casta?
Y hétenos aquí, como traídos del brazo, de patitas entre los señores
bibliómanos, la flor y nata, como si dijéramos, de las extravagancias
y de los delirios.
Este loco (y perdóneme la franqueza) no busca libros, sino
ediciones; ejemplares raros por su escasez y por su fecha. Un
incunable, ¡qué felicidad! Los de ciertos impresores, como los Aldos,
los Estéfanos, Plantinos y Elzevirios; la letra gótica ó de tortis; y si el
ejemplar es en gran papel y está intonso, ¡Virgen María!... ¡qué
efervescencia en el gremio, qué ir y venir, qué mimos al poseedor,
qué ofertas, qué debates, qué descripciones del ejemplar, qué
historias de su procedencia y vicisitudes!... Y el asunto del libro es
una chapucería escrita en bárbaro casi siempre, porque no puede
ser otra cosa. Los libros buenos se reimprimen y abundan; los malos
se imprimen una vez sola, y por eso escasean los ejemplares de los
antiguos; y precisamente porque escasean, los pagan á peso de oro
los bibliómanos, con tal que estén cabales sus folios, tengan
íntegros los márgenes y no carezcan de colofón, aunque huelan á
demonios, y la pringue no deje por donde agarrarlos: por eso, por
ser tan raros y tan viejos, son los más inútiles para el literato.
Comúnmente tratan de esgrima, de jineta, caza, heráldica, cocina,
genealogía, juegos de manos, caballerías, ó de indecencias
(Celestinas) semejantes en el fondo, no en la forma, á la famosa de
Rodrigo de Cota.
He visto á un fanático ofrecer por una de éstas, á otro que tal, un
cuadro de Goya, tres porcelanas del Retiro, no sé qué empuñadura
de Benvenuto y cuatro mil reales en dinero... ¡Y se escandalizaron
los peritos circunstantes y el venturoso poseedor, de lo mezquino de
la oferta! Conocía yo el ejemplar codiciado, y te aseguro, lector, á fe
de hombre de bien, que sus hojas, atestadas de viñetas, no mejores
que las de las coplas de ciego, arranciadas y pringosas, no pasaban
de treinta, y que por todo forro tenían un retal de pergamino
ampollado y lacerioso, con lamparones de sebo y otras porquerías;
pero era un gótico rarísimo, y ¡ahí verá usted! Y yo dije para mí,
contemplando al poseedor, al que quería serlo y á los testigos:
—«Señor, ¿para cuándo son los manicomios!»...
Asombra oir narrar á estos hombres la historia de algunas
adquisiciones de mérito. ¡Qué de viajes, de intrigas, de asechanzas,
de astucia, de dispendios! ¡Cuántas enemistades, cuántos odios á
muerte entre prójimos, antes hermanos en el corazón, por la
conquista de unos papelejos hediondos, que ni siquiera se dejan
leer, en lo cual nada se pierde, porque se ventila en ellos
insípidamente un asunto ridículo, amén de trasnochado!
De la lealtad con que muy á menudo se juega entre estos señores,
no he de ser yo quien hable aquí, sino la gente del oficio.
Recuérdese la pelea habida años ha en la prensa entre el famoso
don Bartolomé Gallardo y otro bibliófilo, muy distinguido y docto, que
se firmaba con el seudónimo de Lupián Zapata.
Aplicaba éste al primero (cuya rapacidad en materia de libros es
proverbial en la casta), después de haberle dicho de propia cuenta
más de otro tanto en variedad de metros y de prosas, las siguientes
frioleras, obra, si no recuerdo mal, del famoso Solitario, padre grave
de la Orden:

«Caco, cuco, faquín, bibliopirata,


Tenaza de los libros, chuzo, púa,
De papeles, aparte lo ganzúa,
Hurón, carcoma, polilleja, rata.
Uñilargo, garduña, garrapata,
Para sacar los libros, cabría, grúa;
Argel de Bibliotecas, gran falúa
Armada en corso, haciendo cala y cata.
Te pones por corbata una maleta,
Un Simancas te cabe en el bolsillo,
Empapas un archivo en la bragueta;
Juegas del dos, del cinco y por tresillo,
Y al fin te sorberás, como una sopa,
De libros llenas África y Europa».

Por cierto que esta moral debe de ser muy antigua y corriente entre
la gente del rebusco, porque recuerdo haber leído, con referencia á
Barthélemy, que habiéndosele preguntado una vez cómo había
podido reunir la rica colección de medallas que poseía, respondió
con el candor de un niño:
—Me han regalado algunas; he comprado otras, y las demás las he
robado.
Dicho esto, lector (que, cuando menos, tendrás la manía de ser
buen mozo, por ruin y encanijado que seas), hago punto aquí,
apostándote las dos orejas á que siendo, como te juzgo, hombre de
bien, después de meter la mano en tu pecho no te atreves á tirar
una chinita á mi pecado.
1880.
LA INTOLERANCIA

(AL SEÑOR DON SINFOROSO QUINTANILLA)

Bien saben los que á usted y á mí nos conocen, que de este pecado
no tenemos, gracias á Dios, que arrepentirnos.
No van, pues, conmigo ni con usted los presentes rasguños,
aunque mi pluma los trace y á usted se los dedique; ni van tampoco
con los que tengan, en el particular, la conciencia menos tranquila
que la nuestra, porque los pecadores de este jaez ni se arrepienten
ni se enmiendan; además de que á mí no me da el naipe para
convertir infieles. Son, por tanto, las presentes líneas, un inofensivo
desahogo entre usted y yo, en el seno de la intimidad y bajo la
mayor reserva. Vamos, como quien dice, á echar un párrafo, en
confianza, en este rinconcito del libro, como pudiéramos echarle
dando un paseo por las soledades de Puerto Chico á las altas horas
de la noche. El asunto no es de transcendencia; pero sí de perenne
actualidad, como ahora se dice, y se presta, como ningún otro, á la
salsa de una murmuración lícita, sin ofensa para nadie, como las
que á usted le gustan, y de cuya raya no pasa aunque le desuellen
vivo.
Ya sabe usted, por lo que nos cuentan los que de allá vienen, lo que
se llama en la Isla de Cuba un ¡ataja! Un quídam toma de una tienda
un pañuelo... ó una oblea; le sorprende el tendero, huye el
delincuente, sale aquél tras éste, plántase en la acera, y grita ¡ataja!
y de la tienda inmediata, y de todas las demás, por cuyos frentes va
pasando á escape el fugitivo, le salen al encuentro banquetas,
palos, pesas, ladrillos y cuanto Dios ó el arte formaron de más duro
y contundente. El atajado así, según su estrella, muere, unas veces
en el acto, y otras al día siguiente, ó sale con vida del apuro; pero,
por bien que le vaya en él, no se libra de una tunda que le balda.
Como se deja comprender, para que al hombre más honrado del
mundo le toque allí la lotería, basta la casualidad de que al correr
por una calle, porque sus negocios así lo requieran, le dé á un
chusco la gana de gritar ¡ataja! Porque allí no se pregunta jamás por
qué, después que se oye el grito: se ve quién corre, y, sin otras
averiguaciones, se le tira con lo primero que se halla á mano.
Pues bien: á un procedimiento semejante se ajusta, por lo común,
entre los hombres cultos de ambos hemisferios, la formación de los
caracteres. No diré que sea la fama quien los hace; pero sí quien los
califica, los define... y los ataja.
Me explicaré mejor con algunos ejemplos.
Un hombre, porque tiene la cara así y el talle del otro modo, es
cordialmente antipático á cuantos no le conocen sino de vista, que
son los más.
—¡Qué cara! ¡qué talle! ¡qué levita! ¡qué aire!—dice con ira cada
uno de ellos, al verle pasar. Y si averiguan que se ha descalabrado,
por resbalarse en la acera,
—¡Me alegro!—exclaman con fruición,—porque ¡cuidado si es
cargante ese mozo!
Y si se habla de un ahogado en el baño, ó de un infeliz cosido á
puñaladas en una callejuela, ó de un desgraciado mordido por un
perro rabioso, dícense, con cierta delectación, pensando en el
antipático:
—¡Él es!
Pero llega un día en que se le ve del brazo de quien más le
despellejaba; pregúntase á éste cómo puede soportar la compañía
de un hombre tan insufrible, y responde con el corazón en la mano:
—Amigo, estábamos en un grandísimo error: ese sujeto es lo más
fino, lo más discreto, lo más bondadoso... lo más simpático que
darse puede.
Así es, en efecto, el fondo de aquel carácter que en el concepto
público, según la fama, es todo lo contrario, por lo cual se le niega la
sal y el fuego.
Ilustraré este caso con otro dato, que si no es enteramente
irrecusable, es, cuando menos, de una ingenuidad meritoria. No sé,
ni me importa saber, la opinión de que goza mi propio carácter entre
la gente; pero es lo cierto que hombres que hoy son íntimos y bien
probados amigos míos, me han dicho alguna vez:
—¡Caray, qué insoportable me eras cuando no te conocía tan á
fondo como ahora!
Jamás me he cansado en preguntarles el por qué de su antipatía.
Cabalmente la sentía yo hacia ellos en igual grado de fuerza.
—¡Qué hombre tan célebre es Diego!—dice la fama.—Es un costal
de gracias y donaires.
Y es porque Diego hace reir á cuantas personas le escuchan, y sus
burlas son celebradas en todas partes, y sus bromazos corren de
boca en boca y de tertulia en tertulia, y hasta las anécdotas más
antiguas y resobadas se le atribuyen á él por sus admiradores.
Ocúrresele á usted un día estudiar un poco á fondo al célebre
Diego, y hállale hombre vulgarísimo, ignorante y sin pizca de ingenio
ni de cultura; capaz de desollar la honra de su madre, á trueque de
hacerse aplaudir de aquellos mismos que le han colocado con sus
palmoteos en la imprescindible necesidad de ser gracioso.
Al revés de Diego, Juan es ingenioso y prudente, seco y punzante
en sus sátiras, oportuno y justo al servirse de ellas; y, sin embargo,
Juan, según dicen, es una vulgaridad antipática.
Una dama espléndida y de buen humor, reúne en su casa, muy á
menudo, una escogida sociedad. La tal señora no tiene, en buena
justicia, prenda que digna de notar sea en su persona. En terreno
neutral, sería una completa vulgaridad. Pero hay lujo en sus salones
y gabinetes, variedad en sus fiestas, abundancia en sus buffets,
novedad en sus trajes, y siempre una sonrisa en su cara. Los
asiduos tertulianos se saturan de este conjunto; siéntense repletitos
de estómago en el elegante comedor, bien divertidos en el estrado
suntuoso, hartos de música y de danza, y todo de balde y cada día.
¿Cómo, á la luz de tantas satisfacciones, no ha de parecerles
encantadora, ó por lo menos distinguidísima, la persona que se las
procura, con celo y desinterés verdaderamente maternales?
Así nace la fama de esa distinción: pregónanla las bocas de los
tertulianos donde quiera que se baila y se cena de balde, y luego en
corrillos y cafés, y cátala proverbial en todo el pueblo, y á la dama,
autorizada para enmendar la plana á la moda reinante y acreditar
caprichosos aditamentos de su invención, como prendas de gusto
superfino.
Enséñansela en la calle á usted, que no baila, y dícenle los que la
saludan:
—¡Qué señora tan elegante, tan chic... y qué talento tiene!
Ni usted la halla elegante, ni eso que los elegantes llaman chic, no
sé por qué; ni ha visto usted una muestra del ensalzado talento;
pero tanto se lo aseguran, que antes duda usted de la claridad de su
vista y de la solidez de su juicio, que de la razón de la fama.
Al mismo tiempo pasa otra señora, bella á todas luces, elegante sin
trapos raros, y discreta á carta cabal; y usted, que es sincero, dice al
punto á los otros:
—¡Esto es lo que se llama un tipo elegante y distinguido!...
—Cierto que no es enteramente vulgo—le contestan con desdén;—
no es fea, no es tonta... pero le falta, le falta... vamos, le falta...
—¡Qué canario!—digo yo:—lo que le falta es dar un baile cada tres
días y una cena en cada baile, como la otra; pues la mayor parte de
los juicios que hacemos de las cosas, dependen, según afirmó muy
cuerdamente el poeta,

del cristal con que se miran.

Demuestran los casos citados, y otros parecidos que no apunto por


innecesarios, que la señora fama no juega siempre limpio en sus
pregones, y que al inocente que se descuida le vende gato por
liebre, ó, siguiendo el símil habanero, ataja sin caridad ni justicia al
primer transeúnte que corre delante de ella, mientras el verdadero
delincuente fuma tranquilo el robado veguero dos puertas más
abajo.
Pero, al fin, estos ejemplares no mueren en el trance, y, aunque
heridos y maltrechos, llegan á curarse; y, en ocasiones, hasta
parece el ratero y lleva su merecido en la cárcel de la opinión
pública.
Donde el ataja es de muerte, y completa la perversión del buen
sentido, es en lo referente al pecado social de la «intolerancia»,
contra el que bufan y trinan los hombres y las mujeres que tienen la
manía de creerse muy tolerantes, y, lo que es peor, la de contárselo
á todo el mundo. Aquí sí que puede decirse que van los proyectiles
á la cabeza de los atajados, cuando debieran estrellarse en las de
los atajadores.
Esto es lo que vamos á ver, con clarísimos ejemplos y no con
estiradas metafísicas, que marean más que convencen, y además
no caben en la paciencia angelical de usted ni en la mía.
Como punto de partida, y para los efectos legítimos de esta
conversación, hemos de fijar el verdadero alcance que tienen la
intolerancia y la tolerancia á que me refiero.
Llámase, en el ordinario trato social, intolerante, al hombre que, de
cuanto ve á su lado, solamente aplaude lo que le agrada, ó le
parece ajustado á las leyes del buen sentido; y se llama tolerante al
que lo aplaude todo, racional y absurdo, serio y ridículo, cómodo y
molesto; al que á todo se amolda en la sociedad, menos á tolerar
con calma que otros censuren algo de ello.
Y dice usted, como deducción lógica de estas dos definiciones:
—Luego viene á quedar reducido el caso, si no es cuestión de más
ó de menos franqueza, á tener ó no tener paladar en los sesos. De
cualquier modo, pierden el pleito los señores tolerantes.
Es la pura verdad; y para remacharla, vayan ahora los prometidos
ejemplos, pues, como decía el soldado de la comedia que tanta
gracia nos hizo en cierta ocasión, «con los deos se hacen los
fideos».
Concurre usted ordinariamente, para esparcir las nieblas de mal
humor, á un punto (llamémosle H), donde halla conversación,
siquiera tolerable, lectura deleitosa, espacio para revolverse y
muelles sillones en que tender, en un apuro, el cuerpo quebrantado.
Allí no choca que usted permanezca mudo y silencioso, si el hablar
le incomoda; ni lo que se hable le molesta, porque si no es
instructivo ni risueño, tampoco es sandio. Aunque el tal
esparcimiento no es cosa del otro jueves, para quien, como usted,
no los cuenta por docenas, vale más de lo que parece. Pero un día
se ve invadido el local por una turba de gomosos, que tararean
trozos de ópera, y hablan á gritos, y se tumban sobre los muebles, y
aporrean las mesas con los bastones, y se tirotean con chistes de
rincón á rincón, y se descubren sus calaveradas del gran mundo... y
lo demás de rúbrica en tales casos y entre tales gentes. Sufre usted
con paciencia esta primera irrupción, y casi, casi, la segunda; pero
al ver en la tercera que el mal se hace crónico, renuncia usted
generosamente á sus adquiridos derechos, y no vuelve á poner los
pies en aquel centro de racionales entretenimientos.
Uno de los tolerantes que con usted concurría á él, le encuentra en
la calle andando los días.
—¿Cómo no va usted ya por allá?—le dice, abrazándole.
—Pues, hombre,—responde usted con entera ingenuidad,—porque
no se puede sufrir aquello.
—¿Lo dice usted por esos chicos?...
—Cabal.
—¡Bah!... se ahoga usted en poca agua.
—Por lo visto, ¿á usted le divierten?
—Hombre, tanto como eso, no; pero no me incomodan.
—Pues á mí, sí.
—Porque, con franqueza, amigo: es usted ¡muy intolerante!
¡Vea usted qué jurisprudencia tan peregrina! Le echan á usted de
casa; ni mata usted ni encarcela á los invasores; se larga usted á la
calle sin despegar los labios, y distrae usted su fastidio brujuleando
por donde mejor le parece, probablemente en paz y en gracia de
Dios; hay quien halla tolerables las causas de este cambio forzoso
de vida, ¡que ya es tolerar! y, al propio tiempo, no tolera que usted
diga que huye de ellas porque no las puede resistir. ¡Y, sin embargo,
usted es el intolerante, y no los que con cuatro majaderías quieren
imponerse á cuarenta personas serias, ni las que se escandalizan
de que alguien halle insoportable la imposición!
Otro caso análogo: frecuenta usted una tertulia de su gusto;
concurren á ella las pocas personas que le han quedado á uno en
limpio, del expurgo que viene haciendo durante el curso de la vida,
en el montón de amigos que le tocó en suerte á la edad de color de
rosa. Está usted allí como en su propio hogar; sabe usted de qué pie
cojea cada uno, como cada uno lo sabe de usted, y se habla y se
discurre con entera libertad y á gusto de todos, sin producir otras
desazones que las puramente indispensables en toda reunión de
amigos que, por lo mismo que lo son á prueba, rara vez están de
acuerdo unos con otros. En estas reuniones semi-públicas, nunca

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