Machine Translated by Google

Tài nguyên tảo (2015) 8:113-120

Sắc ký phân chia pha thông thường để phân tích monosacarit và disacarit
trong ba loại bột laver xanh

Hirotaka KAKITA* và Hideki OBIKA

Tóm tắt: Để phát triển một kỹ thuật nhanh đơn giản trong sắc ký phân chia pha thông thường để phân tích

monosacarit và disacarit trong rong biển ăn được, so sánh giữa cột TSKgel NH2-100 được đóng gói bằng gel amino-

silica liên kết hóa học và cột TSKgel Amide-80. được đóng gói bằng gel amide-silica liên kết hóa học, đã được

thực hiện. Hành vi sắc ký, độ phân giải và tốc độ rửa giải của sacarit đã được đánh giá. Các đỉnh dị thường của

sacarit khử phân tách ở 25 oC và 40 oC trong cột TSKgel Amide-80, mặc dù chúng không phân tách ở 40 oC trong

cột TSKgel NH2-100. Sự gia tăng nồng độ acetonitril trong pha động làm tăng thời gian lưu giữ saccharide. Thông

thường, nhưng không phải luôn luôn, việc tăng nhóm hydroxyl của sacarit có xu hướng làm tăng thời gian lưu.

Thời gian lưu sacarit tăng lên

chủ yếu theo thứ tự sau: deoxyhexosepentoseketohexosealdohexose. Độ phân giải sacarit và chiều cao pic trong

cột TSKgel NH2-100 cao hơn cột TSKgel Amide-80. Do đó, cột TSKgel NH2-100 đã được sử dụng làm cột phân tích

sacarit trong nghiên cứu này. Kỹ thuật hiện tại đã được áp dụng thành công để phân tích monosacarit và

disacarit và sẽ hữu ích cho việc phân tích monosacarit và disacarit trong rong biển ăn được.

Từ khóa: disaccharide, rong biển ăn được, bột rong biển xanh, HPLC, monosaccharide

Giới thiệu mặt khác, hàm lượng carbohydrate được thể hiện bằng trọng

lượng còn lại sau khi loại bỏ tổng trọng lượng ẩm, protein,

Việc cung cấp thông tin liên quan đến thành phần thực lipid và tro khỏi tổng trọng lượng. Tuy nhiên,

phẩm được người tiêu dùng và người bán lớn yêu cầu vì quảng monosaccharide, oligosaccharide (từ disac-charide đến

cáo rầm rộ về thành phần thực phẩm đã trở thành đối tượng decasacarit) và polysaccharide khác nhau về chức năng và

được công chúng quan tâm và vì người tiêu dùng trên toàn giá trị dinh dưỡng như sau: Monosaccharide, đặc biệt là glu-

quốc ngày càng quan tâm đến các vấn đề sức khỏe. Thông tin cose, là nguồn năng lượng quan trọng cho cơ thể sống. Một

về thành phần chung (tức là độ ẩm, protein, lipid, disaccharide cũng là một nguồn năng lượng. Một số

carbohydrate và tro), chất vô cơ và hàm lượng vitamin trong oligosacarit (từ trisaccha-ride đến decasacarit) kích thích

thực phẩm có sẵn trong cơ sở dữ liệu thành phần thực phẩm vi khuẩn bifido (Kohmoto et al. 1988). Polysaccha-ride tiêu

(http://fooddb.mext.go.jp/ ) . Hơn nữa, thành phần chi hóa được là nguồn năng lượng. Trong số các polysacchar-

tiết của chất vô cơ, vitamin, axit béo và axit amin trong ides, chất xơ được định nghĩa là một polysaccharide của

thực phẩm cũng được đề cập trong cơ sở dữ liệu. TRÊN thành tế bào mà con người không thể tiêu hóa được.

Viện Nghiên cứu Sức khỏe, AIST Shikoku, Viện Khoa học và Công nghệ Công nghiệp Tiên tiến Quốc gia,
Hayashi, Takamatsu, Kagawa 761-0395, Nhật Bản
Tác giả liên hệ : Tel: +81-878-693561, fax: +81-878-693553, e-mail: h-kakita@aist.go.jp

113
Machine Translated by Google

Hirotaka KAKITA và Hideki OBIKA

enzyme tiêu hóa (Trowell 1972). Chất xơ là phy, sắc ký trao đổi ion và ion

cũng được đặt tên là chất dinh dưỡng thứ sáu, bởi vì một số sắc ký loại trừ. Trong số các phương thức HPLC nêu

chất xơ có tác dụng sinh lý. Như vậy, trên, sắc ký phân chia pha thông thường là một trong
việc cung cấp thông tin về monosaccharide, những phương pháp được sử dụng nhiều nhất.

hàm lượng oligosaccharide và polysaccharide chế độ cho monosacarit và disacarit

dường như có ích cho người tiêu dùng và phân tích, bởi vì sắc ký phân chia pha thông thường

người bán chính. cung cấp độ phân giải cao hơn

Carbohydrate là thành phần chính trong thực phẩm ăn được monosacarit và disacarit, và nhanh chóng

rong biển, vì lượng carbohydrate có trong phân tích disaccharide Trong tảo sacarit

phạm vi từ 38% đến 64% trên cơ sở khô nghiên cứu, thành phần saccharide trong phân tử

(http://fooddb.mext.go.jp/). Chlorophyceae, rho- polysaccharide và trọng lượng phân tử

dophyceae và phaeophyceae khác nhau ở dạng tự do sự phân bố của polysaccharides thường được

sacarit (tức là chúng là chất dự trữ của được báo cáo cho đến nay (Gomez-Ordonez và cộng sự 2012;

trọng lượng phân tử thấp) và polysac-charit dự trữ. Yang và cộng sự. 2004; Konishi và cộng sự. 2012). Tuy nhiên,

Hầu hết các loài diệp lục đều chứa tinh bột, một số phương pháp HPLC cho sacarit không chứa tảo

glucose, fructose và sucrose, vì quá trình chuyển hóa (tức là monosacarit và disacarit) có

chloro-phyceae về cơ bản giống như đã được báo cáo.

trao đổi chất của thực vật trên đất (Meeuse 1962). Mức độ Vì vậy, để phát triển một cách nhanh chóng và đơn giản

chứa tinh bột, glucose, fructose và sucrose kỹ thuật sắc ký phân chia pha thông thường để phân

trong rhodophyceae rất thấp so với tích monosaccharide tảo và disac-charide trong rong
với những chất ở chlorophyceae. Hầu hết các loài rhodophyceae biển ăn được, chúng tôi đã thực hiện một

chứa nhiều tinh bột tảo đỏ, floridoside và so sánh giữa cột amino-silica và

trehalose (Craigie 1974). Hầu hết các loài thực vật cột amit-silica. Trong bài báo này, chúng tôi mô tả

hầu như không chứa bất kỳ hoặc không có đường các điều kiện tối ưu thích hợp cho phân tích monosac-

saccharide tự do và polysaccharide dự trữ nào xuất hiện charide và disacarit và ứng dụng kỹ thuật này vào

ở rhodophyceae và chlrorophyceae. Tuy nhiên, monosacarit.

hầu hết các loài thực vật đều có mannitol và lami- và phân tích disacarit trong ba loại

narin (Meeuse 1962). Vì vậy, sacarit tự do và bột laver xanh.

Polysacarit dự trữ có trong thực phẩm được chiết xuất từ

rong biển khác nhau tùy theo loại rong biển ăn được ban Nguyên liệu và phương pháp

đầu.

Sắc ký lỏng hiệu năng cao Hóa chất và thiết bị

(HPLC) là một trong những công cụ thiết thực nhất để Saccharit được mua từ Wako

phân tích sacarit Phân tích sacarit bằng (Tokyo, Nhật Bản). TSKgel NH2-100 được đóng gói kèm theo

HPLC được phân loại thành ba nhóm. gel amino-silica liên kết hóa học (cột

Nhóm đầu tiên là phân tích monosaccharide và disac- chiều dài, 150mm×4,6mm, ID; kích thước hạt, 3 m),

charide, được gọi là phân tích thành phần saccharide TSKgel Amide-80 được đóng gói bằng hóa chất

(Bruijn 2012). Nhóm thứ hai gel amide-silica liên kết (150 mm×4,6 mm, ID 3

là phân tích oligosaccharide (Kato et al. 2004). Các m) và TSKgel Amide-80 (250mm×4.6mm, I.

nhóm thứ ba là phân tích polysaccharide, và D. 5 m) được mua từ Tosoh (Tokyo,

được gọi là phép đo phân bố trọng lượng phân tử Nhật Bản). Tất cả các hóa chất khác là thuốc thử

(Churms 1996). HPLC đã được thường xuyên cấp. Sắc ký được thực hiện với hai

được sử dụng để phân tích monosaccharide và disac- Máy bơm Model DP-8020 được trang bị Model

charides trong thực phẩm và đồ uống (Montero et al. 2004; Máy khử khí SD-8022, vòi phun tự động Model AS-8020,

Molna r-Perl 2000; Zhang và cộng sự. 2010). Các chế độ lò sấy cột Model CO-8020, Model
HPLC cho monosacarit và disacarit Máy dò chỉ số khúc xạ RI-8022 và Model

phân tích như sau: phân vùng pha bình thường Bộ xử lý dữ liệu SC-8020 (Tosoh, Tokyo, Nhật Bản).

sắc ký, sắc ký tương tác ưa nước (HILIC), sắc ký Bột laver xanh có nguồn gốc từ

thay đổi phối tử tảo xanh Monostroma nitidum, Ulva prolifera,

114
Machine Translated by Google

Sắc ký phân chia pha thông thường để phân tích monosacarit và disacarit trong ba loại bột laver xanh

và U. pertusa (bột laver xanh A, B và C), tương ứng. Ba thời gian lưu trên cột TSKgel NH2-100.

loại bột laver xanh đã được mua và thử nghiệm thương mại. Các đồng phân monosacarit riêng lẻ không được phân tách

trong cột TSKgel NH2-100. Thời gian lưu của 4 loại pentose

(số nhóm hydroxyl là 4) ngắn hơn so với 4 loại hexose (số

Quy trình phân tích Bốn nhóm hydroxyl là 5). Sự gia tăng số lượng nhóm hydroxyl

gam bột tảo laver được giã trong cối bằng chày, đồng trong sacarit làm tăng thời gian lưu giữ của sacarit, bởi

nhất hóa với 40mL etanol 85% trong 1 phút và được chiết vì sự gia tăng số lượng nhóm hydroxyl trong sacarit làm

dưới thiết bị ngưng tụ hồi lưu trong 1 giờ ở nhiệt độ sôi tăng tính ưa nước của sacarit . Thời gian lưu của D-glucose

85% etanol. Dịch chiết đầu tiên được tách bằng cách ly tâm ngắn hơn so với D-galactose trong cột TSKgel NH2-100. Thời

thành phần nổi phía trên (siêu thấm đầu tiên) và kết tủa. gian lưu của sacarit tăng chủ yếu theo thứ tự như sau: deoxy-

Kết tủa được đồng nhất hóa với 40 mL etanol 85% trong 1 hexose (L-rhamnose và D-fucose)pentose (D-ribose, D-lyxose,

phút và được chiết dưới thiết bị ngưng tụ hồi lưu trong 1 D-xylose và D-arabinose) ketohexose (D-fructose) aldohexose

giờ khi đun sôi etanol 85%. Dịch chiết thứ hai được tách (D-mannose, D-glucose và D-galactose). Trong số các pha động

bằng cách ly tâm thành phần nổi phía trên (phần nổi phía được thử nghiệm, nồng độ 80% là nồng độ acetonitril phù hợp

trên thứ hai) và kết tủa. trong cột TSKgel NH2-100, vì độ phân giải giữa các

monosacarit ở nồng độ acetonitril 80% cao hơn ở nồng độ

acetonitril 75%.

Chất nổi phía trên thứ nhất và thứ hai được gộp lại với

nhau, và hỗn hợp nổi phía trên này được làm bay hơi trong

chân không đến gần khô ở 30oC. Chất còn lại được đưa đến

tổng thể tích 25 mililít bằng cách thêm nước cất, sau đó

được lọc và pha loãng với 80% acetonitril - 20% nước. Dịch

pha loãng được lọc và bơm vào cột HPLC. Hỗn hợp axetonitril

và nước cất được sử dụng làm pha động cho sắc ký phân chia

pha thông thường. Tốc độ dòng của chất rửa giải là 1,0 mL/

phút . Độ ẩm trong rong xanh được đo bằng chênh lệch trọng Các đỉnh dị thường của chất khử sacarit phân chia ở 25

lượng trước và sau khi đun nóng ở 105oC trong 5 giờ. oC và 40 oC trong cột TSKgel Amide-80 (dữ liệu không được

hiển thị). Sự phân chia này biến mất ở nhiệt độ 80oC trong

cột. Vì vậy, chúng tôi đã sử dụng 80oC làm nhiệt độ cột cho

cột TSKgel Amide-80 trong nghiên cứu này. Sự tăng nồng độ

acetonitril trong pha động

Kết quả
Bảng 1. Thời gian lưu của sacarit trong cột TSKgel
NH2-100

Điều kiện tối ưu và cột thích hợp để phân tích monosaccharid

và disacarit

Ảnh hưởng của nồng độ acetonitril đến thời gian lưu

saccharide được nghiên cứu bằng cách sử dụng ba cột HPLC.

Các sacarit được thử nghiệm là D-ribose, D-arabinose, D-

xylose, D-lyxose, L-rhamnose, D-fucose, D-glucose, D-mannose,

D-galactose, D-fructose, sucrose và maltose. Sac-charit

được tách ở 40 oC trong cột TSKgel NH2-100 (150 mm×4,6 mm,

ID 3 m).

Thời gian lưu của các sacarit được thử nghiệm trong cột

TSKgel NH2-100 được tóm tắt trong Bảng 1. Sự gia tăng nồng

độ acetonitril trong pha động làm tăng hàm lượng sacarit

115
Machine Translated by Google

Hirotaka KAKITA và Hideki OBIKA

Bảng 2. Thời gian lưu của sacarit trong cột TSKgel Bảng 3. Thời gian lưu của sacarit trong cột TSKgel
Amide-80 Amide-80

đã tăng thời gian lưu của sacchar-ides được thử nghiệm

trong cột TSKgel Amide-80 (150 mm× 4,6 mm, ID 3 m)

(Bảng 2). Thứ tự rửa giải của deoxyhexose, pentose,

ketohexose và aldo- hexose trong cột TSKgel Amide-80

tương tự như trong cột TSKgel NH2-100.

Tuy nhiên, thời gian lưu của D-glucose lâu hơn D-

galactose. Trong số các pha động được thử nghiệm, nồng

độ 85% là nồng độ axetonitril phù hợp trong

Cột TSKgel Amide-80, do độ phân giải giữa các

monosaccharide ở nồng độ acetoni-trile 85% là cao nhất. Hình 1. Phân tích đường sacarit của bốn monosacarit và

Độ phân giải giữa các sacarit được thử nghiệm trong cột một disaccharide trong cột TSKgel NH2-100 (150
mm × 4,6 mm, ID 3 m).
TSKgel Amide- 80 (150mm×4,6mm, ID 3 m) với 85%
Nhiệt độ cột: 40oC. Mẫu tiêm: một hỗn hợp
acetonitril ở dạng pha động thấp hơn so với cột TSKgel
(monosacarit mỗi 0,4 mg mL-1 disacarit 0,2 mg ,
NH2-100 (150 mm×4,6 mm, ID 3 m) với 80% acetonitril ở
mL-1 ) chứa L-rham-nose, D-arabinose, D-
dạng pha mật di động. fructose, D-glucose và sucrose. Thể tích tiêm:
20 L.

Thời gian lưu của sacarit trong cột TSKgel Amide- 80 cột (150 mm×4,6 mm, ID 3 m) với 80% axetonitril làm pha

(250 mm×4,6 mm, ID 5 m) được tóm tắt trong Bảng 3. động. Tuy nhiên, độ phân giải giữa các sacarit được thử

Trong số các pha động được thử nghiệm, nồng độ 80% là nghiệm trong

nồng độ acetonitril phù hợp trong TSKgel Amide -80 Cột TSKgel Amide-80 (150mm×4,6mm. ID, 3 m) với 85%

(250mm×4.6mm, ID 5 m), do độ phân giải giữa các acetonitril làm pha động cao hơn cột TSKgel Amide-80

monosaccharide ở nồng độ acetonitril 80% cao hơn so với (250 mm × 4,6 mm. ID, 5 m) với 80% acetonitril làm pha
nồng độ acetonitril 75%. Nghị quyết động.

Hình 1 thể hiện sắc ký đồ của hỗn hợp sacarit tiêu

Tỷ lệ giữa các sacarit được thử nghiệm trong cột TSKgel chuẩn trong cột TSKgel NH2-100 (150 mm×4,6 mm, ID 3 m)

Amide-80 (250 mm×4,6 mm, ID 5 m) với 80% axetonitril ở với 80% axetonitril làm pha động. Một hỗn hợp chứa bốn

dạng pha động cao hơn so với giá trị được thử nghiệm monosacarit (L-rhamnose,

trong TSKgel Amide-80

116
Machine Translated by Google

Sắc ký phân chia pha thông thường để phân tích monosacarit và disacarit trong ba loại bột laver xanh

Hình 2. Phân tích đường sacarit của bốn monosacarit và Hình 3. Sắc ký đồ của monosaccharide và disacarit trong
một disaccharide trong cột TSKgel Amide-80 (250 bột Laver xanh A.
mm × 4,6 mm, ID 5 m). Cột: cột TSKgel NH2-100 (150mm× 4,6 mm, ID 3
Nhiệt độ cột: 80oC. Mẫu tiêm: một hỗn hợp m).
(monosacarit mỗi 0,4 mg mL-1 disacarit 0,2 mg , Nhiệt độ cột: 40oC. Mẫu tiêm: laver xanh A. Thể
mL-1 ) chứa L-rham-nose, D-arabinose, D- tích tiêm: 20 L.
fructose, D-glucose và sucrose. Thể tích tiêm:
20 L.

D-arabinose, D-fructose và D-glucose) và một disaccharide

(sucrose) đã được thử nghiệm (mỗi monosaccharide 0,4 mg

mL-1 20 L tiêm). Như được hiển , sucrose 0,2mg mL-1,

thị trong Hình 1, năm loại đường đã đạt được độ phân giải

cao và tốc độ rửa giải nhanh (dưới 25 phút). Hình 2 thể

hiện sắc ký đồ của hỗn hợp sac-charit tiêu chuẩn trong cột

TSKgel Amide-80 (250 mm×4,6 mm, ID 5 m) với 80% acetoni-

trile làm pha động. Giống như trong cột TSKgel NH2-100, quá

trình phân tách sacarit trong cột TSKgel Amide-80 (250

mm×4,6 mm, ID 5 m) đã được thực hiện với độ phân giải cao

và tốc độ rửa giải nhanh (dưới 15 phút). Độ phân giải và Hình 4. Sắc ký đồ của monosaccharide và disacarit trong

chiều cao pic của các sacarit được thử nghiệm trong cột bột rong biển xanh B.
Cột: cột TSKgel NH2-100 (150mm× 4,6 mm, ID 3
TSKgel NH2-100 cao hơn so với cột TSKgel Amide-80, mặc dù
m).
tốc độ rửa giải của các sacarit được thử nghiệm trong cột
Nhiệt độ cột: 40oC. Mẫu tiêm: laver xanh B. Thể
TSKgel NH2-100 thấp hơn so với cột TSKgel NH2-100. Cột
tích tiêm: 20 L.
TSKgel Amide-80. Do đó, cột TSKgel NH2-100 (150mm×4,6mm, ID

3 m) với 80% axetonitril làm pha động đã được sử dụng làm

cột để phân tích monosacarit và disaccha-ride trong nghiên Ứng dụng phân tích monosaccharide và disaccharide trong ba

cứu sau. Cường độ tỷ lệ thuận với nồng độ saccharide được loại bột rong biển xanh

tiêm trên phạm vi rộng (0,0625 - 1,00 mg mL-1 ) với hệ số Hình 3, 4 và 5 cho thấy các ví dụ về ứng dụng kỹ thuật

tương quan tốt (sucrose: r = 0,9997). hiện tại để phân tích monosacarit và disacarit trong ba

loại bột laver xanh. Giới hạn phát hiện của sucrose là 0,52

mg/g tảo khô . Như được hiển thị trong Hình 3, bột laver

xanh A có nguồn gốc từ tảo xanh M. nitidum có chứa sucrose

(4,5 mg g tảo khô-1 ). Hình 4 cho thấy bột laver xanh B có

nguồn gốc từ tảo xanh U. proliferra có chứa su-crose (2,7

mg g tảo khô-1 ). Tuy nhiên số tiền

117
Machine Translated by Google

Hirotaka KAKITA và Hideki OBIKA

cột. Chúng tôi cho rằng việc các đỉnh dị thường không bị

phân tách là do tốc độ đột biến tăng tốc do nhiệt độ tăng.

Trong số các cột được thử nghiệm, cột TSKgel NH2-100 (150

mm×4,6 mm, ID 3 m ) với 80% axetonitril làm pha động có độ

phân giải sacarit cao nhất. Độ phân giải cao thứ hai là cột

TSKgel Amide-80 (150mm× 4,6 mm, ID 3 m) với 85%

acetonitril là pha động. Độ phân giải cao thứ ba là cột

TSKgel Amide-80 (250mm×4,6mm, ID 5 m ) với 80% acetonitril

là pha động.

Hình 5. Sắc ký đồ của monosaccharide và disacarit

trong bột Laver xanh C. Chúng tôi cho rằng pha động chứa 85% acetonitril dường như
Cột: cột TSKgel NH2-100 (150mm× 4,6 mm, ID 3 là pha động không phù hợp để phân tích sacarit, vì độ hòa
m).
tan của saccha-ride giảm khi tăng nồng độ aceto-nitrile
Nhiệt độ cột: 40oC. Mẫu tiêm: laver xanh C.
Thể tích tiêm: 20 L. trong pha động. Vì vậy, chúng tôi cho rằng nồng độ

acetonitril phù hợp dường như là 80% hoặc thấp hơn. Nói

chung, độ phân giải saccharide tăng lên bằng cách giảm kích

sucrose chứa trong bột laver xanh B thấp hơn so với bột thước hạt của gel amide-silica liên kết hóa học và bằng

laver xanh A. Hình 5 cho thấy rằng laver xanh C có nguồn cách tăng chiều dài cột. Tuy nhiên, gel hạt nhỏ (kích thước

gốc từ tảo xanh U. pertusa có chứa sucrose (2,2 mg g tảo hạt 3 m) không thể được đóng gói thành cột dài (cột dài

khô-1 ). 250 mm) do áp suất cao. Độ phân giải giữa các sacarit được

thử nghiệm trong cột TSKgel Amide-80 (250 mm×4,6 mm, ID 5

m) với 80% axetonitril ở dạng pha động cao hơn so với cột
Cuộc thảo luận TSKgel Amide-80 (150 mm× 4,6 mm, ID 3 m) với 80% ace-

tonitrile ở dạng pha động. Do đó, chúng tôi coi cột TSKgel

Các đỉnh dị thường của đường khử không bị phân tách ở Amide-80 (250 mm×4,6 mm, ID 5 m) với 80% axetonitril làm

nhiệt độ 40oC trong cột TSKgel NH2-100. Tốc độ đột biến pha mật có thể là cột đứng thứ hai.

monosacarit được xúc tác bởi axit và bazơ. Ví dụ, tốc độ

biến đổi glucose đạt mức tối thiểu trong khoảng pH 7,0 và

pH 3,0. Mặt khác, quá trình biến đổi glucose diễn ra nhanh

chóng ở pH trên 7,0 hoặc dưới pH 3,0 (Hudson 1910). Độ pH

của pha mật di động trong cột amino-silica (ví dụ cột TSKgel

NH2-100) trở nên kiềm, do nhóm amino có tính bazơ và thực

hiện phối hợp kết hợp với các nguyên tử hydro trong dung Như được hiển thị trong Hình 1 và 2, tốc độ rửa giải của

dịch. Vì vậy, chúng tôi cho rằng việc các đỉnh dị thường cột TSKgel Amide-80 (250 mm×4,6 mm, ID 5 m) với 80%

không bị phân tách là do tốc độ đột biến nhanh chóng. Mặt acetonitril ở dạng pha mật nhanh hơn so với TSKgel NH2 Cột

khác, sắc ký đồ monosacarit ở 40oC trên cột TSKgel Amide-80 -100 (150mm×4.6mm, ID 3 m) với 80% acetonitril làm pha

rất phức tạp do sự phân tách anome monosacarit (dữ liệu động. Tuy nhiên, chiều cao pic saccharide trong cột TSKgel

không được hiển thị). Độ pH pha động trong cột amide-silica NH2-100 (150 mm×4,6 mm, ID 3 m) với 80% acetonitril ở dạng

(ví dụ cột TSKgel Amide-80) là trung tính, vì nhóm amide pha động cao hơn so với chiều cao pic trong cột TSKgel

trung tính trong dung dịch. Tuy nhiên, mỗi monosacarit được Amide-80 (250 mm×4,6 mm). , ID 5 m) với 80% axetonitril

rửa giải dưới dạng đỉnh đơn ở 80oC trong TSKgel Amide-80 làm pha động. Chúng tôi cho rằng sự gia tăng chiều cao cực

đại của saccharide trong cột TSKgel NH2-100 có thể phát

sinh từ việc tăng tốc độ đột biến bởi pha động kiềm. Một

TSKgel

118
Machine Translated by Google

Sắc ký phân chia pha thông thường để phân tích monosacarit và disacarit trong ba loại bột laver xanh

Cột NH2-100 (150mm×4,6mm, ID 3 m) với 80% acetonitril Sự nhìn nhận

làm pha động được đánh giá là cột tốt nhất để phân tích

saccharide trong nghiên cứu này, vì độ phân giải Nghiên cứu này được hỗ trợ một phần bởi Hiệp hội Xúc

saccharide và chiều cao pic trong cột TSKgel NH2-100 cao tiến Khoa học Nhật Bản (JSPS) Tài trợ cho Nghiên cứu Khoa

hơn so với cột TSKgel Amide-80. Phương pháp hiện tại có học (c), 25340080, 2013.

độ tuyến tính tốt (sucrose: r = 0,9997) trên phạm vi

rộng (0,0625 - 1,00 mg mL-1 ). Chúng tôi cho rằng độ

tuyến tính này nằm trong giới hạn chấp nhận được đối với Người giới thiệu

phân tích monosacchar-ides và disacarit.

Bidwell RGS, Krotkov G, Reed GB. Giấy sắc ký của đường

trong thực vật. Tạp chí Thực vật học Canada 1952 ;

Như được hiển thị trong Hình 3, 4 và 5, sacarit tự do 30: 291-305.

chính trong ba loại bột laver xanh được thử nghiệm là Bruijn JM. Thế giới ngọt ngào hấp dẫn của công nghệ

sucrose. Hàm lượng sucrose được tăng theo thứ tự như sau: đường, không bao giờ buồn tẻ.

bột laver xanh Cbột laver xanh B bột laver xanh A. Bidwell Sugar Ind. 2012 ; 137: 697-706.

và cộng sự (1952) đã làm rõ, bằng cách sử dụng sắc ký giấy, Churms MS. Những tiến bộ gần đây trong việc tách

rằng trong tảo xanh U. lactuca sucrose là đường chính trong carbohydrate bằng sắc ký lỏng hiệu năng cao dựa

khi glucose thì hiếm và không có fructose. Như được hiển trên việc loại trừ kích thước. J.

thị trong Hình 5, hàm lượng sucrose (2,2 mg g-1 ) của bột sắc ký. A 1996 ; 720: 151-166.

laver xanh C có nguồn gốc từ tảo xanh U. pertusa thấp hơn Craigie JS. Sản phẩm lưu trữ. Trong: Stewart WDP (ed.).

so với tảo xanh, U. lactuca, trong các giá trị tài liệu Sinh lý và hóa sinh của tảo.

(sucrose 8,0 mg /g ) (Bidwell và cộng sự 1952). Chúng tôi Khoa học Blackwell. Quán rượu, Oxford. 1974 ; 206-235.

cho rằng sự khác biệt về hàm lượng sucrose giữa U. pertusa Gomez-Ordonez E, Jimenez-Escrig A, Ruperez P.

và U. lactuca xuất phát từ sự khác biệt về loài tảo hoặc Phân bố trọng lượng phân tử của polysac-
mùa thu hoạch. Không có đỉnh nào trên Hình 3, 4 và 5 có thể charit từ rong biển ăn được bằng sắc ký loại
được chỉ định ngoại trừ sucrose. Tuy nhiên, Hình 3, 4 và 5 trừ kích thước hiệu suất cao.
chỉ ra sự khác biệt về dạng monosaccharide và disaccharides Tài năng 2012; 93: 153-159.

giữa ba loại bột laver xanh được thử nghiệm. Các xét nghiệm Hudson CS. Một đánh giá về những khám phá về sự đột biến

mẫu monosaccharide và disacarit như vậy, tương tự như của đường. Tạp chí của Hiệp hội Hóa học Hoa Kỳ năm

phương pháp in dấu vân tay và lập bản đồ peptide, sẽ hữu 1910; 32 : 889-894.

ích cho việc kiểm soát và kiểm tra chất lượng bột laver Kato Y, Ito S, Mitsuishi Y. Nghiên cứu cấu trúc của

xanh. xyloglucans bằng cách sử dụng enzyme đặc hiệu

xyloglucan. Xu hướng Glycoscience Gly-cotechnology

2004 ; 16: 393-406.

Kohmoto T, Fukui F, Takaku H, Machida Y, Arai M, Mitsuoka

T. Ảnh hưởng của isomalt- oligosaccharides lên hệ

vi sinh vật trong phân người.

Chúng tôi kết luận rằng cột TSKgel NH2-100 (150 mm×4,6 Vi khuẩn Bifidobacteria 1988 ; 7 : 61-69.

mm, ID 3 m) với 80% axetonitril làm pha động được đánh giá Konishi T, Nakata I, Miyagi Y, Tako M.

là cột tốt nhất để phân tích monosacarit và disacarit trong Chiết xuất -1,3 xylan từ rong biển xanh Caulerpa
bột laver xanh. Chúng tôi cũng kết luận rằng kỹ thuật nhanh lentillifera. J. Ứng dụng. Glycosci. 2012 ; 59:

đơn giản này sẽ hữu ích cho việc phân tích saccharide tự 161-163.

do trong rong biển ăn được. Meeuse BJD. Sản phẩm lưu trữ. Trong: Lewin RA (ed.).

Sinh lý học và Hóa sinh. Nhà xuất bản Aca-demia,

New York. 1962 ; 289-313.

Molna r-Perl I. Vai trò của sắc ký trong phân tích đường,

axit cacboxylic và axit amin trong thực phẩm. J. Sắc

ký. Một năm 2000; 891: 1-32.

119
Machine Translated by Google

Hirotaka KAKITA và Hideki OBIKA

Montero CM, Rodriguez DMC, Guillen SDA, Barroso CG. Phân tích Polyme carbohydrate 2004 ; 58: 115-121.

carbohydrate trọng lượng phân tử thấp trong thực phẩm Zhang Z, Yang R, Wang H, Ye F, Zhang A, Hua X. Xác định

và đồ uống: Đánh giá. Sắc ký đồ 2004;59: 15- 30. lactulose trong thực phẩm: đánh giá các nghiên cứu gần

đây. Int. J. Khoa học thực phẩm.

Technol. 2010 ; 45: 1081-1087.

Trowell H. Chất xơ thô, chất xơ ăn kiêng và xơ vữa

động mạch. Xơ vữa động mạch 1972 ; 16 : 138-140.

Dương Z, Lý JP, Quan HS. Điều chế và mô tả đặc Nhận vào ngày 8 tháng 9 năm 2015

tính của oligomannuronate từ alginate bị Được chấp nhận ngày 16 tháng 10 năm 2015

phân hủy bởi hydrogen peroxide.

120