Machine Translated by Google

Xem các cuộc thảo luận, số liệu thống kê và hồ sơ tác giả của ấn phẩm này tại: https://www.researchgate.net/publication/224946644

Sắc ký lỏng hiệu năng cao đồng thời xác định Paracetamol và Acid Ascorbic trong dạng bào

chế viên nén

Bài báo trên Tạp chí Dược và Dược học Châu Phi · Tháng 5 năm 2012

DOI: 10.5897/AJPP12.163

TRÍCH DẪN ĐỌC

19 1,814

4 tác giả, trong đó:

Ivanka Pencheva Alex Zlatkov

Đại học Y Sofia Đại học Y Sofia

64 CÔNG BỐ 400 TRÍCH DẪN 118 CÔNG BỐ 399 TRÍCH DẪN

XEM HỒ SƠ XEM HỒ SƠ

Tất cả nội dung sau trang này được tải lên bởi Alex Zlatkov vào ngày 28 tháng 5 năm 2014.

Người dùng đã yêu cầu nâng cao tệp đã tải xuống.

Machine Translated by Google

Tạp chí Dược và Dược học Châu Phi Vol. 6(17), trang 1332-1336, ngày 8 tháng 5 năm 2012
Có sẵn trực tuyến tại http://www.academicjournals.org/AJPP
DOI: 10.5897/AJPP12.163
ISSN 1996-0816 ©2012 Tạp chí học thuật

Tài liệu nghiên cứu đầy đủ

Sắc ký lỏng hiệu năng cao đồng thời

Xác định Paracetamol và Acid Ascorbic ở dạng viên nén

Boyka Tsvetkova*, Ivanka Pencheva, Alexander Zlatkov và Plamen Peikov

Khoa Hóa Dược, Khoa Dược, Đại học Y – Sofia, 2 Dunav St., 1000 Sofia, Bulgaria.

Được chấp nhận ngày 23 tháng 4 năm 2012

Một phương pháp sắc ký lỏng pha đảo (RP-LC) đơn giản, cụ thể và chính xác đã được phát triển để xác định đồng thời Paracetamol
và axit ascorbic ở dạng bào chế dạng viên nén. Việc phân tách sắc ký đạt được trên cột LiChrosorb C18, 250 mm × 4,6 mm, 5 μm
ở bước sóng máy dò 254 nm và tốc độ dòng 1,0 ml/phút . Pha động là 1 mM natri pentane sulphonate trong hỗn hợp gồm 0,4 thể
tích axit formic, 25 thể tích metanol và 75 thể tích nước. Thời gian lưu của axit ascorbic và paraxetamol lần lượt là 3,53 và
6,09 phút. Phương pháp này đã được xác nhận về các thông số như độ đặc hiệu, độ tuyến tính, độ chính xác, độ chính xác, độ
tin cậy, giới hạn định lượng và giới hạn phát hiện. Phương pháp này được cho là đặc hiệu vì không quan sát thấy các đỉnh tạp
chất và tá dược khác. Bình phương các hệ số tương quan (R2 ) của paracetamol và axit ascorbic là 0,9999 và 0,9998 trong khi
tỷ lệ thu hồi trung bình phần trăm lần lượt là 99,16 và 98,76%. Độ lệch chuẩn tương đối trong ngày và giữa các ngày của cả
hai thành phần là <2,0%. Phương pháp RP-LC được đề xuất có thể được áp dụng để phân tích thường xuyên các công thức thương
mại có sẵn của các loại thuốc này hoặc ở dạng kết hợp.

Từ khóa: Sắc ký lỏng, thẩm định, paracetamol, axit ascorbic.

GIỚI THIỆU

Paracetamol (acetaminophen) là thuốc giảm đau, hạ sốt được sử
dụng rộng rãi. Nó được dung nạp tốt và không có nhiều tác dụng
phụ của aspirin, vì vậy nó thường được sử dụng để giảm sốt, nhức
đầu và đau nhức nhẹ cũng như để kiểm soát cơn đau nghiêm trọng
hơn, trong đó nó cho phép giảm liều bổ sung. sử dụng thuốc chống
viêm không steroid, do đó giảm thiểu tác dụng phụ tổng thể
(Goyal và Singh, 2006; Dongre và cộng sự, 2009; Graham và Scott,
2005).
Vitamin C hay axit ascorbic, một loại vitamin tan trong
nước, có mặt rộng rãi trong nhiều hệ thống sinh học và trong
các chế phẩm vitamin tổng hợp. Axit ascoricic thường được sử
dụng để bổ sung chế độ ăn uống không đủ và như một chất bổ sung
chất chống oxy hóa (Kleszczewski và Kleszczewska, 2002). Các
*Đồng tác giả. +35929236543. Email: bojka@abv.bg. Điện thoại:
Tác dụng hiệp đồng và bảo vệ đạt được trong quá trình sử dụng
Paracetamol cho mục đích điều trị bằng cách kết hợp với vitamin
C và/hoặc các hợp chất dược lý và hoạt tính sinh học khác cũng
cần được đề cập đến (Raghavendran và cộng sự, 2004). Việc sử
dụng sự hiện diện bổ sung của axit ascorbic sẽ tăng cường tác
dụng có lợi chính của Paracetamol đồng thời với việc bù đắp độc
tính tiềm ẩn trong chức năng của gan (Grundman và cộng sự, 2006).
Mặt khác, hầu hết các tài liệu khoa học đều báo cáo về sự can
thiệp chính giữa acetaminophen và/hoặc vitamin C và một số lượng
lớn các loại hóa chất trong nhiều nền mẫu khác nhau (Sandulescu
và cộng sự, 2000).
Mặc dù nhiều bài báo về việc xác định riêng lẻ hai chất phân
tích, đặc biệt là axit ascorbic, đã được xuất bản, nhưng rất ít
bài báo báo cáo việc xác định đồng thời cả hai hợp chất bằng
phương pháp sắc ký lỏng (Gioia et al., 2008; Akay et al., 1999;
Thomis et al. ., 1984), điện di (Wang và cộng sự, 2000),
Machine Translated by Google

Tsvetkova và cộng sự. 1333

Hình 1. Sắc ký đồ thu được từ paracetamol và axit ascorbic RS.

axit, 25 thể tích metanol và 75 thể tích nước với tốc độ dòng 1,0 ml/phút .
Phương pháp quang phổ UV (Dogan và Duran, 1998; Khajehsharifi
Phân tích được thực hiện ở nhiệt độ môi trường xung quanh và thể tích tiêm là
và cộng sự, 2010) và phương pháp điện hóa (Habibi và cộng
20 μl. Detector UV đặt ở bước sóng 254 nm.
sự, 2011; Muszalska và cộng sự, 2000) đã được sử dụng để
xác định cả hai loại thuốc trong chế phẩm dược phẩm.

Mục đích của bài viết này là phát triển một phương pháp Chuẩn bị các giải pháp tham khảo

sắc ký cụ thể, chính xác và chính xác có thể áp dụng trong

kiểm soát chất lượng để xác định đồng thời các loại thuốc
theo yêu cầu của Dược điển Châu Âu và ICH (ICH, 2005).
Dung dịch gốc paraxetamol và axit ascorbic đối chứng được chuẩn bị ở nồng độ
330 và 200 µg/ml trong pha động dưới dạng chất pha loãng. Dung dịch làm việc
của paracetamol và axit ascorbic được điều chế ở nồng độ lần lượt là 33,00 và
20,00 μg/ml bằng cách pha loãng dung dịch gốc trong pha động.

NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP

Chuẩn bị mẫu

Vật liệu và thuốc thử

Một dạng bào chế dạng viên có bán trên thị trường chứa Paracetamol 330 mg và
Paracetamol RS và axit ascorbic RS được sử dụng làm chất chuẩn. Một viên thuốc axit ascorbic 200 mg được phân tích bằng phương pháp này.

chứa 330 mg Paracetamol và 200 mg axit ascorbic đã được bán trên thị trường. Hai mươi viên thuốc đã được cân và nghiền thành bột mịn. Cân chính xác lượng

Metanol loại LC được cung cấp từ Merck (Đức). Tất cả các thuốc thử hóa học
khác đều thuộc loại phân tích.
bột tương đương với khối lượng trung bình của một viên được chuyển vào bình
định mức 100,0 ml.
Khoảng 70 ml pha động được thêm vào, siêu âm trong 10 phút và lắc trong 15
phút. Thể tích được pha loãng đến vạch bằng pha động và trộn kỹ. Dung dịch

này được lọc qua màng lọc 0,45 μm và được pha loãng thêm bằng pha động để
Điều kiện thiết bị và sắc ký đạt được nồng độ cuối cùng lần lượt là 33,00 và 20,00 μg/ml của paraxetamol
và axit ascorbic.

Quá trình phân tách sắc ký được thực hiện trên hệ thống HPLC mô-đun LC-10A
Shimadzu (Nhật Bản) được bố trí với máy bơm LC-10A, bộ khử khí dung môi
DGU-3A, kim phun Rheodyne, lò cột CTO-10A, đầu dò mảng diode SPD-M10A và mô-
đun bus truyền thông CBM- 10A. Cột LiChrosorb C18, 250 mm × 4,6 mm, 5 μm
KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
được sử dụng làm pha tĩnh. Các thành phần được phân tách đẳng cấp bằng pha
động gồm 1 mM natri pentane sulphonat trong hỗn hợp 0,4 thể tích formic.
Từ sắc ký đồ ở Hình 1, có thể thấy rõ
rằng trong các điều kiện sắc ký đề xuất,
Machine Translated by Google

1334 Châu Phi J. Pharm. Dược phẩm.

Bảng 1. Các thông số về mức độ phù hợp của hệ thống.

Tham số Axit ascorbic Paracetamol

Thời gian lưu (phút) ± % RSD 3,53 ± 0,09 6,09 ± 0,08

Hệ số đuôi ± % RSD 0,81 ± 0,10 0,83 ± 0,11

Đĩa lý thuyết ± % RSD 1963 ± 0,58 2914 ± 0,61

2,95 -
Độ phân giải (R)
Giới hạn phát hiện (μg/ml) 0,4 0,5

Bảng 2. Số liệu thống kê về độ chính xác.

Paracetamol Axit ascorbic

tham số thống kê
Phục hồi (%) SD RSD (%) Phục hồi (%) SD RSD (%)

Độ lặp lại 99,02 0,45 0,46 98,98 0,88 0,89

Độ chính xác trung gian

Ngày qua ngày 98,93 0,59 0,60 98,38 0,98 0,99

Nhà phân tích đến nhà phân tích 99,06 0,72 0,73 99,20 0,58 0,59

axit ascorbic và paraxetamol được tách hoàn toàn, điều này tương ứng đối với axit ascobic. Có mối tương quan tuyệt vời
cho thấy rằng phương pháp này có tính chọn lọc và có thể được giữa diện tích pic và nồng độ của cả hai hợp chất.
sử dụng để nhận dạng, định lượng và kiểm tra độ tinh khiết
đồng thời của chúng.
Thời gian lưu, số lượng đĩa lý thuyết và hệ số đuôi thu
Độ chính xác
được bằng phương pháp HPLC được liệt kê trong Bảng 1.

Độ lặp lại

Các dung dịch pha loãng có nồng độ khác nhau đã được chuẩn bị
Nghiên cứu xác nhận
và ba lần của mỗi độ pha loãng được phân tích trong cùng một
ngày để đảm bảo độ lặp lại và kết quả được phân tích thống
Phương pháp đề xuất đã được xác nhận theo hướng dẫn của ICH
kê. %RSD là 0,46 đối với paracetamol và 0,89 đối với axit
về tính đặc hiệu, độ tuyến tính, độ chính xác, độ chính xác,
ascorbic theo tiêu chuẩn ICH.
độ tin cậy, giới hạn định lượng (LOQ) và giới hạn phát hiện
(LOD).

Độ chính xác trung gian

Tính đặc hiệu

Trong nghiên cứu này, ba lần của mỗi độ pha loãng được phân tích vào
những ngày khác nhau và bởi các nhà phân tích khác nhau. Trong mọi điều kiện,
Độ đặc hiệu của phương pháp được xác định bằng cách kiểm tra
%RSD gần bằng 1 chứng tỏ phương pháp này chính xác (Bảng 2).
sự tương tác với các thành phần của giả dược. Không quan sát
thấy nhiễu đối với bất kỳ thành phần nào như tá dược của cả
hai loại thuốc.
Sự chính xác

Hiệu chuẩn và tuyến tính Để xác định độ chính xác của phương pháp, độ thu hồi được kiểm
tra ở ba mức nồng độ khác nhau: 50, 100 và 150%. Giá trị của
Đường cong hiệu chuẩn được xây dựng trong khoảng 8,25 các thí nghiệm thu hồi phân tích được liệt kê trong Bảng 3.
đến 66,00 μg/ml đối với paracetamol và 5,00 đến 40,00 μg/ml
đối với axit ascorbic, để đạt được nồng độ dự kiến trong các
mẫu được đo. Các phương trình hồi quy tuyến tính tương ứng là
y = 15214.9x - 1340.1 Độ bền
với bình phương hệ số tương quan R2 là 0,9999 đối với
paracetamol và y = 26476,1x - 513,2 với R2 là 0,9998 Độ bền được nghiên cứu bằng cách đánh giá ảnh hưởng của
Machine Translated by Google

Tsvetkova và cộng sự. 1335

Bảng 3. Kết quả nghiên cứu độ chính xác.

nồng độ lý thuyết Nồng độ quan sát được (μg/ Độ thu hồi trung bình ±
Thuốc Mức độ (%) RSD (%)
(μg/ml) ml) SD (%)

50 16,62 16:33 99,04 ± 0,491 0,50

Paracetamol 100 33,24 33,08 99,53 ± 0,301 0,30

150 49,86 49,31 98,90 ± 0,331 0,33

50 10,34 13.10 98,00 ± 0,498 0,51

Axit ascorbic 100 20,69 20.45 98,84 ± 0,559 0,57

150 31.04 30,87 99,45 ± 0,367 0,37

Bảng 4. Kết quả đánh giá độ bền.

Xét nghiệm (%)

Tình trạng
Paracetamol Axit ascorbic

Tốc độ dòng 0,9 ml/ 99,15 98,16

phút Tốc độ dòng 1,1 98,58 98,40

ml/phút Metanol: nước, 22:78 (v/v) 98,87 98,51

Metanol: nước, 28:72 (v/v) 99,12 98,80

Thay đổi cột 98,45 98,79

những thay đổi nhỏ nhưng có chủ ý trong các điều kiện sắc ký. Các chính xác và nhanh chóng. Quy trình phân tích phù hợp để kiểm tra
điều kiện được nghiên cứu là tốc độ dòng (thay đổi ±0,1 ml/phút), chất lượng chế phẩm dược phẩm có chứa paraxetamol và axit ascorbic
thành phần pha động (% dung môi hữu cơ) và sử dụng cột LC từ các lô hoặc ở dạng riêng lẻ hoặc ở dạng kết hợp.
khác nhau.
Kết quả từ nghiên cứu về độ tin cậy của phương pháp được liệt kê
trong Bảng 4. Kết quả chuẩn bị thử nghiệm không bị ảnh hưởng bởi sự
thay đổi nhỏ của các điều kiện và do đó, chính xác, nghĩa là phù NHÌN NHẬN
hợp với kết quả thu được trong các điều kiện tối ưu.

Nghiên cứu hiện tại được hỗ trợ vui lòng bởi Dự án số. I-5/2010
của Hội đồng Khoa học Y tế.

Giới hạn định lượng và giới hạn phát hiện

NGƯỜI GIỚI THIỆU

Giới hạn định lượng và giới hạn phát hiện được tính toán từ độ lệch
chuẩn của phản hồi và độ dốc sử dụng tỷ lệ tín hiệu trên nhiễu theo
Akay C, Gumusel B, Degim T, Tartilmis S, Cevheroglu S (1999).
hướng dẫn ICH. Xác định đồng thời acetaminophen, axit acetylsalicylic và axit ascorbic ở dạng
LOQ của Paracetamol và axit ascorbic được tìm thấy là 2 và 1 μg/ml, viên nén bằng HPLC. Chuyển hóa thuốc. Tương tác Thuốc., 15: 197-205.

trong khi LOD lần lượt là 0,5 và 0,4 μg/ml.

Dogan H, Duran A (1998). Xác định đồng thời bằng quang phổ của aspirin,
acetaminophen và axit ascorbic trong chế phẩm dược phẩm. Nhà thuốc, 11: 781-784.

Dongre V, Shah S, Bayes G, Phadke M, Jadhav V (2009).

Xác định đồng thời etodolac và acetaminophen ở dạng bào chế dạng viên bằng RP-
Kiểm tra tính phù hợp của hệ thống
LC. Sắc ký đồ, 69: 1019-1023.
Gioia M, Andreatta P, Boschetti S, Gatti R (2008). Phát triển và xác nhận phương
Thử nghiệm tính phù hợp của hệ thống được thực hiện theo Dược điển
pháp sắc ký lỏng để xác định axit ascorbic, axit dehydroascorbic và acetaminophen
Châu Âu từ các thông số quy trình xác nhận đã xác định: LOD, độ trong dược phẩm. J. Pharm. Sinh học. Hậu môn., 48: 331-339.
phân giải, số lượng đĩa lý thuyết và hệ số đuôi (Bảng 1).
Goyal R, Singh S (2006). Xác định bằng phương pháp Voltammet trên điện cực cacbon
thủy tinh biến tính C60. Điện cực. Acta, 51: 3008-
3012.

Graham G, Scott K (2005). Cơ chế tác dụng của Paracetamol. Là. J.

Phần kết luận
Sau đó, 12: 46-55.
Grundman U, Wornle C, Biedler A, Kreuer S, Wrobel M, Wilhelm W (2006). Hiệu quả
Phương pháp LC mới được phát triển là cụ thể, chính xác, của thuốc giảm đau không chứa opioid parecoxib,
Machine Translated by Google
1336 Châu Phi J. Pharm. Dược phẩm.
Giảm đau sau phẫu thuật đau thắt lưng bằng Paracetamol và Metamizol
phẫu thuật vi phẫu. Thuốc mê. Analg., 103: 217-222.
Habibi B, Jahabakhshi M, Pournaghi-Azar M (2011). Xác định đồng thời bằng
phương pháp đo điện áp xung vi phân của acetaminophen và axit ascorbic
bằng cách sử dụng điện cực gốm-cacbon biến tính một ống đơn vách. Hậu môn.
Hóa sinh., 411: 167-175.
Khajehsharifi H, Eskandari Z, Asadipour A (2010). Ứng dụng của một số
phương pháp hóa học trong phân thông thường và phái sinh
tích quang phổ của acetaminophen và axit ascorbic.
Kiểm tra ma túy Hậu môn, 2: 162-167.
Kleszczewski T, Kleszczewska E (2002). Xác định quang phổ phun dòng chảy
của axit L-ascorbic trong các vấn đề sinh học. J. Pharm. Sinh học. Hậu
môn., 29: 755-759.
Muszalska I, Zajac M, Wrobel G, Nogowska M (2000). Phương pháp oxy hóa khử
xác nhận Paracetamol và axit ascorbic trong chế phẩm dược phẩm. Acta Pol.
Dược phẩm, 57: 27-32.
Xem số liệu thống kê xuất bản
Raghavendran H, Sathivel A, Devaki T (2004). Bản chất bảo vệ gan của chiết
xuất cồn rong biển đối với stress oxy hóa gan do acetaminophen gây ra. J.
Khoa học sức khỏe, 50: 42-46.
Sandulescu R, Mirel S, Orlean R (2000). Sự phát triển của các phương pháp
quang phổ và phân tích điện đối với axit ascorbic và acetaminophen và các
ứng dụng của chúng trong việc phân tích các dạng bào chế sủi bọt. J.
Pharm. Sinh học. Hậu môn., 23 : 77-87.
Thomis R, Roets E, Hoogmartens J (1984). Phân tích viên thuốc chứa aspirin,
acetaminophen và axit ascorbic bằng sắc ký lỏng hiệu năng cao. J. Pharm.
Khoa học, 73: 1830-1833.
Wang J, Chаtrathi M, Tian B, Polsky R (2000). Chip điện di được chế tạo vi
mô để phân tích sinh học đồng thời glucose, axit uric, axit ascorbic và
acetaminophen. Hậu môn. Hóa học, 72: 2514-
2518.