Professional Documents
Culture Documents
Full Microbiology With Diseases by Taxonomy 5Th Edition Bauman Solutions Manual Online PDF All Chapter
Full Microbiology With Diseases by Taxonomy 5Th Edition Bauman Solutions Manual Online PDF All Chapter
https://testbankdeal.com/product/microbiology-with-diseases-by-
taxonomy-5th-edition-bauman-test-bank/
https://testbankdeal.com/product/microbiology-with-diseases-by-
taxonomy-4th-edition-bauman-test-bank/
https://testbankdeal.com/product/microbiology-with-diseases-by-
body-system-5th-edition-bauman-test-bank/
https://testbankdeal.com/product/microbiology-with-diseases-by-
body-system-4th-edition-bauman-solutions-manual/
Microbiology with Diseases by Body System 4th Edition
Bauman Test Bank
https://testbankdeal.com/product/microbiology-with-diseases-by-
body-system-4th-edition-bauman-test-bank/
https://testbankdeal.com/product/microbiology-with-diseases-by-
body-system-3rd-edition-bauman-test-bank/
https://testbankdeal.com/product/computer-accounting-with-
peachtree-by-sage-complete-accounting-2012-16th-edition-yacht-
solutions-manual/
https://testbankdeal.com/product/econometrics-by-example-2nd-
edition-gujarati-solutions-manual/
https://testbankdeal.com/product/microbiology-1st-edition-
wessner-solutions-manual/
CHAPTER
Recombinant DNA Technology
8
Chapter Outline
The Role of Recombinant DNA Technology in Biotechnology (p. 236)
Chapter Summary
The Role of Recombinant DNA Technology in Biotechnology
(p. 236)
Biotechnology is the use of microorganisms to make practical products, such as bread, wine,
paper, and antibiotics. Since the 1990s, scientists have become increasingly adept at
intentionally modifying the genomes of organisms, by natural and artificial processes, for a
55
56 Instructor’s Manual for Microbiology with Diseases by Taxonomy, 5e
variety of practical purposes. This recombinant DNA technology has expanded the
possibilities of biotechnology. Scientists who manipulate genomes have three main goals:
1. To eliminate undesirable phenotypic traits in humans, animals, plants, and microbes
2. To combine beneficial traits of two or more organisms to create valuable new organisms
3. To create organisms that synthesize products that humans need, like insulin
Recombinant DNA technology utilizes a variety of tools and techniques to manipulate genomes
in vitro.
Mutagens
Mutagens are chemical and physical agents used to create changes in a microbe’s genome to
effect desired changes in the microbe’s phenotype. For example, researchers exposed the fungus
Penicillium to mutagenic agents and then selected strains that produce greater amounts of
penicillin.
Restriction Enzymes
Restriction enzymes (restriction endonucleases) are enzymes that cut DNA at locations with
specific and usually palindromic nucleotide sequences called restriction sites. They are used by
bacterial cells to protect against phages by cutting phage DNA into nonfunctional pieces.
Chapter 8 Recombinant DNA Technology 57
Scientists use restriction enzymes to obtain specific DNA fragments. They then combine these
bits of DNA with ligase to form recombinant DNA molecules.
Video Tutor: Action of Restriction Enzymes
Vectors
In recombinant DNA technology, a vector is a small DNA molecule (such as a viral genome,
transposon, or plasmid) that carries a particular gene into a cell so that the cell will develop a
new phenotype. Vectors must be small enough to manipulate in the laboratory, be able to
survive inside cells, contain a recognizable genetic marker, and may provide the required
genetic elements to ensure expression. A typical sequence of steps is to (1) use restriction
enzymes to produce a DNA fragment and plasmid with sticky ends (2) use DNA ligase to join
the DNA pieces (3) insert the DNA into bacteria and (4) grow on selective medium. Vectors
based on viruses and transposons can carry more DNA than plasmids.
Gene Libraries
A gene library is a collection of bacterial or phage clones, each of which carries a fragment
(typically a single gene) of an organism’s genome. Alternatively, a cDNA library may contain
the full set of cDNA complementary to an organism’s mRNA. Genetic researchers create each
of the clones in a gene library by using restriction enzymes to generate fragments of the DNA of
interest and then ligase to synthesize recombinant vectors. They insert the vectors into bacterial
cells, which are then grown on culture media. Many gene libraries are now commercially
available.
DNA Microarrays
DNA microarrays consist of molecules of single-stranded DNA that have been immobilized on
glass slides, silicon chips, or nylon membranes. A single array may contain thousands of
different sequences, either all from one organism, or from numerous species. Single strands of
fluorescently labeled DNA in a sample washed over an array adhere only to locations on the
array where there are complementary DNA sequences. DNA microarrays can be used in a
number of ways including monitoring gene expression, diagnosing infection, and identifying
organisms in an environmental sample.
Genetic Mapping
Genetic mapping involves locating genes on a nucleic acid molecule, frequently by using DNA
probes to identify restriction fragments (restriction fragmentation) or clones containing the gene
of interest. Scientists have elucidated complete gene maps of numerous viruses, bacteria, and
eukaryotic organisms. When a gene unique to an organism is identified, the technique known as
fluorescent in situ hybridization (FISH) can be used to locate the organism in samples
(diagnostic or environmental) using a single strand sequence tagged with fluorescent molecules.
Genomics is the sequencing, analysis, and comparison of genomes. Modern DNA sequencing
started when Fredrick Sanger started using modified DNA nucleotides that terminated DNA
replication when incorporated. The technique has been improved by the use of fluorescent dyes,
one for each of the four nucleotides, and speeded up by an automated machine that distinguishes
among fluorescent dyes attached to each type of nucleotide base. Automated sequencing with
fluorescent dyes, now called first-generation sequencing, was used to determine the entire
human genome, as well as the genomes of numerous microbes. Next-generation sequencing
(NGS) methods like four-color reversible termination sequencing are now used. In this method
each of the four types of nucleotides is modified by the addition of a different color fluorescent
dye as well as a terminating group. Single-strand DNA fragments (produced by PCR) are
attached to glass slides and DNA synthesis begins. When a modified nucleotide is incorporated
in a growing DNA strand, synthesis is halted. Light detectors record the colors emitted when a
laser triggers fluorescence, enzymatic treatment removes the dye and the terminating
modification, and synthesis resumes until the next modified base is incorporated. The process
repeats until the complementary sequence of the DNA fragment has been synthesized. This
method can sequence 40 billion nucleotides a day and has been used to determine the genome
sequence of thousands of organisms. Genetic sequences of pathogens may lead to improved
therapies and vaccines.
Another use for genomics is to relate DNA sequence data to protein function. Understanding the
structure of enzymes that function in extreme conditions (high radiation, cold temperatures) may
provide a means of reversing genetic damage caused by radiation or produce new tools for
industry.
Understanding what genes do is called functional genomics. The phenotypes of organisms
missing a single nonessential gene (gene knockout) or overexpressing a gene product can reveal
the gene’s function.
Agricultural Applications
Recombinant DNA technology has been applied to the realm of agriculture to produce
transgenic organisms (genetically modified organisms, GMOs), recombinant plants and
animals that have been altered for specific purposes by the addition of genes from other
organisms. Many crop plants have been made resistant to pest damage by the addition of the
gene for Bt toxin (Bt) from Bacillus thuringiensis, which kills many insect larva. Agricultural
uses of recombinant DNA technology include advances in herbicide resistance, salt tolerance,
freeze resistance, and pest and disease resistance, as well as improvements in nutritional value
Chapter 8 Recombinant DNA Technology 61
and yield. Examples include tomatoes that remain firm after harvest; cattle that grow faster,
produce more milk and are leaner; and rice that produces beta carotene.
Wir wußten, daß wir heute die Grenze von Rudok erreichen
würden. Am Westende des Sees standen bereits 7 Zelte, und eine
Menge Leute war dort zu sehen. Ein dreister alter Mann kündigte
uns an, daß wir hierzubleiben hätten. In einem benachbarten Tale
sei das Gras gut, und dort weideten auch ihre eigenen Pferde und
Yake. Wir lagerten in der Nähe der Tibeter, und der Lama begab sich
sofort zu ihnen, um Erkundigungen einzuziehen. Als er zurückkam,
war er ganz aufgeregt; der Gouverneur von Rudok war ein rechter
Grobian gewesen und hatte erklärt, daß er uns ohne Paß vom Dalai-
Lama nimmermehr durch sein Gebiet ziehen lassen werde. Ich
schickte zu diesem Bombo, der beim Dewaschung besonders gut
angeschrieben sein soll und Oberaufseher des Tschokk-dschalung
war, wo er im Sommer residierte; im Winter wohnte er in der Stadt
Rudok. Tschokk-dschalung ist ein Goldfeld, das einige Tagereisen
südwestlich der Gegend liegt, in der wir uns befanden. Im Winter
sollen sich dort nur einige zwanzig Menschen aufhalten, im Sommer
aber 300 und darüber, die von allen Seiten, sogar von Lhasa,
dorthinkommen, um Gold zu suchen. Tschokk-dschalung gilt für den
höchstgelegenen ständig bewohnten Ort der Erde.
Mit großem Gefolge und arroganter Sicherheit in seinem
Auftreten kam er in seinem schönsten Paradeanzug, sobald er
meine Aufforderung erhalten hatte; ich bat ihn, auf einer Filzmatte
vor meinem Zelte Platz zu nehmen. Ich selbst blieb drinnen neben
meinem Kohlenbecken sitzen. Der Bombo schien zuerst
unschlüssig, wie er sich zu der zweideutigen Artigkeit verhalten
sollte, setzte sich aber schließlich doch und forderte mir den Paß
vom Dalai-Lama ab. Ich antwortete ihm, daß wir diesen Herrn nie
gesehen hätten und folglich auch keinen Paß von ihm haben
könnten.
„Ich habe nichts von euch gehört“, entgegnete er, „weiß nicht,
wer ihr seid, habe kein Schreiben aus Lhasa erhalten, bin nie
beauftragt worden, euch mit Yaken zu versorgen, aber ich weiß, daß
es Europäern ein für allemal verboten ist, durch Rudok zu reisen.“
„Wenn ihr ein hoher Beamter seid, müßt ihr wissen, daß ihr
verpflichtet seid, uns für die Reise nach Ladak zur Verfügung zu
stehen.“
„Verdächtigen Personen gegenüber, die keinen Paß haben, bin
ich zu gar nichts verpflichtet; doch wenn ihr wollt, werde ich nach
Lhasa schreiben, und ihr müßt hier 2½ Monate warten, bis die
Antwort da ist.“
„Das paßt uns außerordentlich gut“, erwiderte ich, „unsere Tiere
sind erschöpft und bedürfen der Ruhe. Schreibt nur nach Lhasa, wir
haben Zeit zu warten.“
„Gut, ihr begreift, daß ich den Kopf verliere, wenn ich euch durch
meine Provinz ziehen lasse.“
Er war außerordentlich bestimmt, ruhig und würdevoll in seinem
Auftreten, obgleich etwas unverschämt, wenn man ihn mit unseren
Freunden in der Nähe von Lhasa vergleicht. Die Kosaken waren so
außer sich, daß sie vor Wut schäumten, — fast alle sehnten sich
jetzt nach Hause oder wenigstens von diesen kalten winterlichen
Bergen fort. Ich beruhigte jedoch ihre aufgeregten Gemüter, denn ich
sah nur zu wohl ein, daß ich nicht das geringste Recht hatte, Rudok
den Fehdehandschuh hinzuwerfen. Es waren schon wieder über
hundert gut bewaffnete Krieger versammelt. Der Zustand unserer
Karawane erlaubte auch keine Umgehung der Provinz auf einem
nördlichen Wege, und mir war dies auch ganz lieb, da ich nicht Nain
Singhs, Bowers und Deasys Routen oder die noch nördlicher
liegenden Wege Malcolms und Wellbys berühren wollte.
Ebensowenig hatte ich Lust, den größeren Teil des Gepäckes, der
Zelte, des Proviants und das Boot zu verbrennen, wie Captain
Deasy es einmal in einer schwierigen Lage tun mußte.
Dagegen sprach mich die Wartezeit von zweieinhalb Monaten
sehr an. Ich war müde und matt von Arbeit und Weststürmen und
bedurfte der Ruhe. Ich hielt mit den Kosaken Kriegsrat und entwarf
einen ganzen Überwinterungsplan. Wir wollten nach ein paar Tagen
nach den üppigeren Weiden des Perutse-tso zurückkehren und dort
ein befestigtes Lager anlegen. Mir würde es in der interessanten
Gegend nicht an Beschäftigung fehlen, und meine Leute sollten sich
im Anfang die Zeit damit vertreiben, daß sie aus Erdschollen eine
hohe Mauer rings um das Zeltlager und das Gepäck errichteten. Von
demselben Material wollten wir einen Aussichtsturm bauen, und die
Festung sollte mit einem Graben umgeben werden. Nachher wollten
wir ruhen, jagen, Ausflüge machen, unsere Tiere pflegen, um im
Frühling direkt nach Süden zu ziehen. Ich segnete den Bombo, der
mich zu einer neuen Kraftanstrengung in Tibet beinahe zwang,
obwohl ich im Grunde von diesem schwer zugänglichen Lande mehr
als genug hatte.
Am folgenden Morgen kündigte ich dem Gouverneur an, daß wir
wieder ostwärts ziehen würden; er hatte nichts dagegen
einzuwenden. Doch der Tadschinurmann erklärte, er habe Befehl,
uns bis an die Grenze von Rudok zu bringen, aber nicht, uns wieder
zurückzuführen. Die Sache würde sich jedoch leicht arrangieren
lassen; waren wir erst am Perutse-tso angelangt, so konnten wir
sowohl die Yake wie die Pferde mit Beschlag belegen und die
Männer gefangenhalten. Mit frischen Pferden würden wir leicht und
bequem operieren können.
Der Bombo kam jedoch auf andere Gedanken und teilte uns mit,
daß er uns Yake und Proviant besorgen werde, wenn wir
versprächen, nicht nach der Stadt Rudok zu gehen, was zu tun gar
nicht in meiner Absicht lag, da Littledale diesen südlicheren Weg
gegangen war.
So wurde der ganze Festungsplan hinfällig, und wir durften uns
dem Ende unserer Mühsale wieder nähern.
Sechsundzwanzigstes Kapitel.
Der Tso-ngombo.
304. Blick nach Süden auf den mittelsten Tso-ngombo. (S. 334.)
305. Der mittelste Teil des Tso-ngombo. (S. 334.)
306. Beförderung des Gepäcks auf einem improvisierten Schlitten über das Eis.
(S. 338.)
Am 27. (4379 Meter) und 28. hatten wir, als wir dem Laufe des
Tsangar-schar abwärts folgten, immerfort das schöne Gefühl, uns
tieferliegenden Gegenden zu nähern. Während des Marsches wird
Fischfang getrieben, und Tschernoff und Schagdur wollen es
einander darin zuvortun. Sie bedienen sich ihrer Säbel sowie
tibetischer Speere und harpunieren ihre Opfer. Einmal nahm
Schagdur ein gründliches Bad in dem eiskalten Wasser; er wagte
sich im Eifer zu weit hinaus, und sein Maulesel stürzte. Ich war
glücklicherweise in der Nähe und zündete ein loderndes Feuer in
dem Gesträuche an, woran er sich wärmen und seine Kleider
trocknen mußte; sonst wäre er, kühn und abgehärtet wie er war,
einfach weitergeritten, als sei nichts vorgefallen.
Die Felsenmauer, die wir bisher auf unserer linken Seite gehabt
haben, hört schließlich auf, und der Fluß macht einen scharfen
Bogen nach Süden. Gerade hier liegt auf dem linken Ufer das
Tempeldorf N o h , auch O d s c h a n g genannt (Abb. 302). Dort erhebt
sich ein malerischer kleiner Tempel in Rot und Weiß, mit
zwiebelförmigen Kuppeln, Flaggen, vergoldeten Spitzen und
anderen Zieraten. Die viereckigen Häuser mit flachen Dächern sind
wie gewöhnlich von weißgetünchten Mauern umgeben, die oben
eine rote Kante haben; auch sie sind mit Fahnenstangen und
Wimpeln geschmückt. Die Fußböden sind mit Filzteppichen belegt,
in der Decke ist ein Loch zum Entweichen des Rauches, große
Holzvorräte aus dem Gesträuchwalde liegen für den Winter bereit.
Unsere Tibeter hatten uns schon unterwegs mitgeteilt, daß man hier
kein Holz anrühren dürfe, da es dem Lama gehöre. Jetzt lag Noh
vom Sonnenscheine überflutet vor uns und gewährte, mit der
mächtigen Bergwand als Hintergrund, einen ungewöhnlich
malerischen Anblick.
Auf dem rechten Ufer treten Geröllterrassen dicht an den Fluß
heran. Nicht ohne Schwierigkeit lotsen wir die Kamele über sie
hinüber, damit die Tiere nicht in das kalte, tiefe Wasser zu tauchen
brauchen. Unsere Richtung führt nach Westen an der Basis der
Felsen entlang, wo Quellen von +15,9 Grad entspringen. Nachdem
wir einen kleineren Paß mit einer fahnengeschmückten
Steinpyramide passiert haben, öffnet sich nach Süden und Westen
eine großartige Aussicht über den See Ts o - n g o m b o (blauer See).
Im Süden glänzen mehrere pyramidenförmige Schneegipfel, und
nach Westen dehnt sich der bizarre See mit seinen Buchten,
Landspitzen, Inseln und steil abfallenden felsigen Ufern aus. Die
Breite beträgt nur wenige Kilometer. Auf einem ganz ebenen
Uferstreifen mit etwas Weide schlugen wir das Lager Nr. 138 (Abb.
300) auf. Kaum einen Kilometer vom Ufer liegt eine kleine
Felseninsel, die reich an gutem Brennholz ist; ganze Stapel davon
wurden über das Eis nach unserem Lager geschleppt. Die Tibeter
verbrachten die Nacht auf der Insel, wo sie Schutz und Wärme
hatten, und ihre großen Feuer warfen abends rotglänzende Reflexe
über das spiegelblanke Eis. In diesem verursachte die Spannung
unaufhörliche Knalle und Pfiffe; es klang wie ein sich im Kreise
drehendes Nebelhorn.
Während des folgenden Tages, der der Ruhe gewidmet wurde,
maß ich die Tiefen zwischen dem Ufer und der Insel, wobei sich
ergab, daß die größte 6,35 Meter betrug. Unser Offizier teilte mir mit,
daß er beauftragt sei, von hier einen Kurier nach Leh zu senden,
damit wir an der Grenze von Tibet und Kaschmir vorfänden, was wir
brauchten. Ich nahm die Gelegenheit wahr, einen Brief an den
englischen „Joint Commissioner“ für Ladak mitzuschicken, in
welchem ich um Entsatz an Yaken, Pferden und Proviant bat. Der
arme Reiter verschwand auf seinem langhaarigen Pferdchen in der
Nacht; als wir nachher den Weg sahen, den er in der Dunkelheit
geritten war, tat er mir doppelt leid.
Am Todestage Karls XII. machten wir einen interessanten Marsch
am Nordufer des Tso-ngombo entlang. Hinter der Insel hat der See
ein Ende und geht in einen ganz kurzen Fluß mit offenem Wasser
über, der sich bald in ein neues zugefrorenes Becken ergießt; es
dauert nicht lange, so nimmt auch dieser zweite See ein Ende, und
wir reiten wieder an einem Flusse entlang. Dieser ist so gerade und
regelmäßig wie ein gegrabener Kanal, zirka 12 Meter breit und
höchstens 3 Meter tief. Das Wasser fließt außerordentlich langsam,
ist klar wie Kristall und schillert grün wie Smaragd. Auf dem Grunde
gedeihen üppige Wasserpflanzen, und in Vertiefungen zeigen sich
ganze Scharen von schwarzrückigen Fischen, die, den Kopf nach
der Strömung gerichtet, regungslos und faul im Wasser schweben
und zu grübeln scheinen. Das Ganze war ein großartiges
Schauspiel; die Kosaken waren sofort wieder mit ihren Angelruten
bei der Hand.
Nachdem der Fluß durch ein mittelgroßes und ein sehr kleines
Becken geströmt ist, ergießt er sich schließlich in einen vierten See,
der größer als die anderen ist und sich weit nach Westen und
Nordwesten erstreckt; er war völlig eisfrei und vom Winde aufgeregt.
Wahrscheinlich liegt es an seiner Tiefe, daß er trotz der windstillen,
kalten Nächte noch nicht zugefroren ist. Das Ufer ist dicht mit
Blöcken und steilen Schuttkegeln bedeckt und sehr beschwerlich für
die Kamele (Abb. 303). Auf der Ebene Bal, wo wir in der Nähe einer
tiefen Schlucht lagerten, gab es jetzt kein Gras, aber wir hatten Stroh
und Gerste von den Tibetern gekauft, und die Tiere waren gut
versorgt (Abb. 304, 305). Von Roh bis Bal waren wir dieselbe Straße
gezogen wie Nain Singh; hier aber trennten sich unsere Wege
wieder. Unterwegs waren wir einer Karawane von 200 mit Getreide
aus Ladak beladenen Schafen begegnet. Es machte Spaß zu sehen,
wie ordentlich sie marschieren und wie leicht sie zu regieren sind;
sie kommen an den steilsten Felswänden vorwärts, trotzdem sie
ziemlich schwere Lasten tragen. An der Grenze wird eine Art
Tauschhandel betrieben; für 100 mit Salz beladene Schafe erhalten
die Tibeter 80 Schafslasten Gerste.
Die Kälte sank auf −20,9 Grad, und in der Nacht überfiel uns ein
sehr heftiger Nordsturm. Der Rest des Strohvorrats wurde
rettungslos fortgeweht.
1. Dezember. Heute mußte ein Kamel getötet werden; es ist um
so bitterer, jetzt von den letzten Veteranen scheiden zu müssen, da
ihre Rettung so nahe ist. Wir folgen über oft sehr beschwerliche
Schutterrassen treu allen Biegungen und Buchten des Ufers. Der
See ist lang und schmal und gleicht einem norwegischen Fjord;
beständig entrollen sich neue, bewunderungswürdige Perspektiven
vor uns, die Landschaft glänzt in großartiger Schönheit, es ist ein
zwischen oft jähen, stets malerisch gestalteten Felsmassen
eingeschlossener Fluß. Hier und dort erhebt sich ein dominierender
Schneegipfel. Einige von unseren Leuten gehen voraus, um
scharfkantige Steine zu entfernen und Gruben auszufüllen.
Wildenten leben hier in ungeheurer Menge; es klingt wie das
Brausen eines herannahenden Sturmwindes, wenn ihre Scharen,
sobald wir uns nähern, seewärts fliegen und mit solcher Wucht auf
das Wasser niederschlagen, daß weißer Schaum hoch aufspritzt.
Der See ist überall offen; nur in geschützten Buchten liegt hier und
da ein kleines Band von zertrümmertem, vom Winde
hierhergetriebenem und wieder zusammengefrorenem Eise mit
dünnen, höchstens eine Nacht alten Eishäuten zwischen den
Schollen.
Nun zeigt sich ein ebener Uferstreifen von weichem Erdreich,
und die Berge treten zurück. Ein hier stehendes, einsames Zelt
dürfte für längere Zeit aufgeschlagen sein, denn es ist mit großen
Holzstapeln umzäunt. Bald darauf stehen wir an einem