Листівка-вкладка 21.08.

2023
Листівка CM-NA203-100 Редакція №8
«Biocore® Nucleo-M» (100 виділень) Сторінка 1 з 2

штатив – для ручного виділення; набір

Інструкція з дозаторів.
використання Витратні для KingFisher® Duo/Duo Prime
матеріали: 12 tip combs for 96 deep-well plate,
elution strip for 12 pin magnet,
Набір реагентів для екстракції нуклеїнових кислот elution strip cap for 12 pin magnet,
(РНК/ДНК) з клінічного матеріалу «Biocore® Nucleo-M» 2.2ml 96 deep-well plate, v-bottom;
(100 виділень). для інших платформ
Для in vitro діагностики. 2.2ml 96 deep-well plate, v-bottom,
0.5ml 96 well elution plate, v-bottom,
96 deep-well tip comb;
Призначення
Набір реагентів «Biocore® Nucleo-M» призначений для Реагенти: 96% етанол.
екстракції сумарної РНК/ДНК зі зразків крові, плазми, Увага! Для використання Набору лабораторія має бути
сироватки, а також мазків з верхніх та нижніх дихальних оснащеною відповідним обладнанням та витратними
шляхів, кон’юнктивального секрету, сперми та секрету матеріалами для екстракції НК та проведення ПЛР у
простати, зішкрібів з цервікального каналу та уретри, реальному часі і відповідати вимогам Державних санітарних
виділеннь піхви, зішкрібів з виразково-ерозивних норм і правил «Організація роботи лабораторії при
елементів, калу. Набір підходить як для ручного, так і дослідженні матеріалу, що містить біологічні патогенні
автоматичного формату виділення нуклеїнових кислот. агенти I-IV груп патогенності молекулярно-генетичними
методами».
При автоматичному виділенні машинний час становить
до 30 хвилин. Етапи екстракції НК:
Увага! Набір реагентів призначений для екстракції
Застосування: Набір реагентів може застосовуватися у нуклеїнових кислот (НК) з рідких зразків (змиви і т. ін.).
клінічних діагностичних лабораторіях, науково- Не використовувати набір реагентів для
дослідних лабораторіях, а також інших установах, які негомогенізованих твердих зразків, оскільки це може
працюють в області in vitro діагностики. призвести до зниження виходу НК.
1. Програмування приладу
Загальна інформація
Перед початком автоматичного виділення НК слід
В основі Набору реагентів «Biocore® Nucleo-M» лежить
створити протокол виділення «скрипт» у програмному
сорбентний метод екстракції НК на магнітних частках.
забезпеченні відповідного приладу (табл. 1).
Аналітичні характеристики Таблиця 1.
Отримана НК може бути використана для проведення № Назва Час, хв. t⁰C
досліджень: зворотної транскрипції, ПЛР, ПЛР у 1 Лізис і зв’язування НК 8 56
реальному часі, секвенування, молекулярного 2 Відмивка 1 2 кімнатна
клонування. 3 Відмивка 2 2 кімнатна
Увага! Під час проведення процедури виділення НК 4 Сушка НК 3 кімнатна
необхідно дотримуватись стандартних заходів безпеки, 5 Елюція НК 2 56
що попереджають забруднення навколишнього Швидкість перемішування на всіх етапах, окрім сушки,
середовища, керуючись при цьому Державними середня (Medium).
санітарними нормами і правилами. 2. Підготовка зразків
1. Відібрати необхідну кількість зразків із розрахунку
Склад 200 мкл дослідного матеріалу на одне виділення;
Набір реагентів «Biocore® Nucleo-M» розрахований на 2. У випадку недостатньої кількості дослідного матері-
100 виділень. До складу набору входять: алу довести об’єм до 200 мкл 1x PBS або фізіологічним
Лізуючий буфер – 1 флакон 12 мл розчином.
Реагент для осадження – 1 флакон 30 мл 3.1 Підготовка приладу та проведення екстракції НК
Буфер для промивання-1 – 1 флакон 30 мл автоматичним методом
Буфер для промивання-2 – 1 флакон 30 мл 1. Рознести по 50 мкл Реагенту для елюції по лунках
Реагент для елюції – 1 флакон 6 мл стрипу (KingFisher Duo/Duo Prime) або плашки №4
Розчин Протеїнази К – 1 пробірка 0,5 мл (інша платформа);
Магнітний сорбент – 1 пробірка 1,2 мл 2. Рознести по 290 мкл Буферу для промивання-2 по
Компоненти набору зберігаються при температурі плюс лунках рядка E плашки (KingFisher Duo/Duo Prime) або
(15-25)0С. Перед першим використанням Набору плашки №3 (інша платформа);
реагентів у Буфер для промивання-2 необхідно додати 3. Рознести по 290 мкл Буферу для промивання-1 по
25 мл 96%-й етанолу. лунках рядка C плашки (KingFisher Duo/Duo Prime) або
плашки № 2 (інша платформа);
Необхідне оснащення та реагенти, що не входять до 4. Із розрахунку на один зразок: змішати 120 мкл
набору Лізуючого буферу, 300 мкл Реагенту для осадження, 5
Обладнання: KingFisher® Duo/Duo Prime, King Fisher® мкл розчину Протеїнази К, 12 мкл Магнітного сорбенту
Flex, Auto-Pure 96, Nexor 96 або інша та рознести в кількості 400 мкл по лунках рядка А
аналогічна платформа – для плашки (KingFisher Duo/Duo Prime) або плашки №1
автоматичного виділення; магнічний (інша платформа) (табл. 2);
 Листівка-вкладка 21.08.2023
Листівка CM-NA203-100 Редакція №8
«Biocore® Nucleo-M» (100 виділень) Сторінка 2 з 2

Таблиця 2. відібрати розчин НК, не захоплюючи магніти, та

Кількість виділень перенести у нові пробірки.
Компоненти
12 96
Лізуючий буфер (мл) 1,44 12 При необхідності після завершення процедури
Реагента для осадження (мл) 3,6 30 екстракції НК перевірити її чистоту за допомогою
Протеїнази К (мкл) 60 500 спектрофотометру шляхом визначення співвідношення
Магнітного сорбенту (мкл) 144 1200 довжин хвиль A 260/280 , яке має наближатися до 2,0.
Увага! Допускається зберігання очищених зразків НК
5. Додати по 200 мкл дослідних зразків у лунки рядка А протягом 8 годин при температурі 0°С, до 1 тижня
плашки (KingFisher Duo/Duo Prime) або плашки №1 при температурі ≤ -18°С та більш тривале зберігання
(інша платформа). У лунку негативного контролю при температурі -70°С.
виділення внести 200 мкл 1x PBS або фізіологічного Додаткова інформація
розчину; Виробник гарантує придатність Набору реагентів
6. Помістити наконечники (12-tip combs) в рядок Н протягом 16 місяців з дати виготовлення при
плашки (KingFisher Duo/Duo Prime) або наконечники дотриманні умов зберігання, транспортування та
(deep-well tip combs) у плашку №1 / плашку для елюції використання. Компоненти набору зберігати при
(інша платформа); температурі від плюс 150С до плюс 250С.
7. Увімкнути автоматичний екстрактор та дочекатися
ініціалізації системи. Помістити стрип з плашкою Відгуки, пропозиції та рекламації щодо якості Набору
(KingFisher Duo) або плашки (інша платформа) з реагентів направляти:
внесеними розчинами до приладу. Обрати відповідний Юридична адреса: вул. Петра Болбочана, 4-А, м. Київ,
«Скрипт» та запустити процес виділення НК; Україна, 01133;
8. Після закінчення процесу екстракції розчини НК Адреса виробництва: Харківське шосе, 48, м. Київ,
будуть знаходитися у стрипі (KingFisher Duo/Duo Prime) Україна, 02160; тел.: +38 (044) 490-47-00,
або плашці №4 (інші платформа). Для подальшого e-mail: info@biocor-tech.com, www.biocor-tech.com
зберігання розчини НК можна зберігати у тих самих Графічний
стрипах/плашках, закривши їх кришками/плівками або Значення
символ
перенести в окремі пробірки. Ознайомитися із супровідними документами
Температурне обмеження
3.2 Проведення екстракції НК ручним методом
1. В окремій ємності приготувати суміш для лізису. Для Ознайомитися з інструкцією по застосуванню
цього змішати із розрахунку на один зразок: Знак відповідності технічним регламентам
120мкл Лізуючого буферу Для діагностики in vitro
300мкл Реагенту для осадження Код партії
5 мкл Розчину Протеїнази К Термін придатності
12 мкл Магнітного сорбенту;
Дата виробництва
2. Рознести отриману суміш по 400 мкл у пробірки,
додати по 200мкл зразків (дослідний матеріал);
3. Перемішати вміст пробірок на вортексі та інкубувати
при 560С 8 хв;
4. Поставити пробірки у магнітний штатив на 2 хв. Після
того як магніти зібралися на стінці пробірки, обережно
видалити рідину;
5. У кожну пробірку додати по 290 мкл Буферу для
промивання-1;
6. Перемішати вміст пробірок на вортексі. Поставити
пробірки у магнітний штатив на 2 хв. Після того як
магніти зібралися на стінці пробірки, обережно
видалити рідину;
7. У кожну пробірку додати по 290 мкл Буферу для
промивання-2;
8. Перемішати вміст пробірок на вортексі. Поставити
пробірки у магнітний штатив на 2 хв. Після того як
магніти зібралися на стінці пробірки, обережно
видалити всю рідину;
9. Залишити пробірки відкритими для підсушування на
10 хв при кімнатній температурі;
10. Додати 50 мкл Реагенту для елюції;
12. Перемішати вміст пробірок та інкубувати 2-3 хв при
560С, періодично перемішувати на вортексі;
13. Поставити у магнітний штатив на 2 хв. Після того як
магніти зібралися на стінці пробірки, обережно