Photo: NIH, retina

Mikroglia

This image shows a sample of tissue from

the light-sensitive retina in the back of
the eye, as seen through a microscope.
The green cells around the red blood
vessels are called microglia. The blood
vessels and microglia overlap in the
yellow areas. Both the microglia and
blood vessels are surrounded by retinal
nerve cells that are not seen in this
picture. Microglia are an important part of
the immune system in the retina. They
survey the retina for signs of disease and
cell damage by constantly moving their
long, arm-like extensions back and forth
in the space around blood vessels and
nerve cells.

kornyei@koki.hu
 A ‘MIKROGLIA’ felfedezése
1921, Pio del Rio-Hortega, Cajal tanítványa volt. Bevezette az
ezüst karbonátos festést, ami szelektíve jelölte az
oligodendrocitákat, melyeket 1928-ban osztályozott. Ő vezette be
a mikroglia fogalmát is, eredetileg “szemétgyűjtő” („garbage
collecting”) sejteknek nevezve őket. Kimutatta, hogy a mikroglia
születés után jut az idegrendszerbe és reagál a sérülésekre.
1882-1945,
Spanish physician,
histologist,
anatomist

Evolution of microglia during its

phagocytic activity.
A, cell with thick, rough
prolongations; B, cells with short
prolongations and enlarged cell
body; C, hypertrophic cell with
pseudopodia; D-E, amoeboid and
pseudopodic forms; F, cell with
phagocytosed leukocyte; G, cell
with numerous phagocytosed
microglia erythrocytes; H, fat-granule cell; I,
Río-Hortega rajzai. Different cell in mitotic division.
[Photomicrographs by Rio-Hortega, 1932]
morphological types of microglial
cells in the rabbit Ammon's horn.
Verkhratsky A, Parpura V, Rodríguez JJ. 2011 Kettennmann 2011
Mikroglia eredete

colony stimulating factor 1 receptor/ Il34 ennek ligandja

transforming growth factor b
 nyugvó
Mikroglia aktiváció aktivált
resting

(Bal) GFP+ mikroglia

neuronok között, P12 kéreg
- szeletkultúra,
highly ramified, resting
mikroglia

(Jobb) GFP+ -mikroglia HC

szeletkultúrában, P6 egér,
aktivált mikroglia
nagy sejttest, rövid
nyúlványok

http://www.biology.uiowa.edu/daileylab/projects.html Stence 2001

… motilis, in vitro
fagocitál..
Green: microglia
Red: astrocytes
… motilis, in vivo
 Green: neuron
spontaneous neuron activities Orange: microglia
Mikroglia Mikroglia szerepe az egészséges agyban:

• fejlődő idegrendszerben: szinaptogenezis és

remodelling (több kontaktus alakul ki, mint
ami megmarad; synaptic pruning – éretlen
és nem kellő szinapszisok eliminálódása)
• felnőtt agyban: apoptotizáló neuronok
eltávolítása pl. felnőtt agyi neurogén zónákból

• hippocampus szubgranuláris zónájában

született sejtek nagy része 1-4 napon belül
apoptotizálni kezd: ezeket „unchallenged”
microglia gyorsan eltávolítja
 microglia marker Iba-1 Mikroglia szerepe az egészséges agyban:
(gold particles) • mikroglia-szinapszis kapcsolatok: 2 foton
mikroszkópia: mikroglia átlagosan óránként min.
egyszer, kb 5 percre kontaktusba kerül axon
terminálisokkal és dendrittüskékkel

• neuronhálózatok mikroglia általi reorganizációja: 1 hétig vizuális ingerektől

megfosztották egereket – szinaptikus gyengülés : mikroglia nyúlványok
érintkezése zsugorodó dendrittüskékkel gyakoribb lett és fagocitózis jelei
gyakoribbak
• ischaemia alatt a kontaktus hosszú (120
min) lesz
• sérüléseknél mikroglia is részt vesz a
„synaptic stripping”- ben (preszin. és
posztszin neuron szeparálása glia-
nyúlványokkal)
 Mikroglia érzékeli a neuronális aktivitást

Mikroglia modulálhatja a neuronális aktivitást

SD: erős Ca++ jel • mikrogliális ATP/adenosin release → asztrogliális Glu

neuronban release amplifikációja → neuronális aktiváció (mGluR)
 Nyugvó (resting) mikroglia

ramified – nyúlványos, nyugvó fenotípus

részben neuronális szignálok (pl CX3C-chemokine ligand 1 (CX3CL1), CD47, CD200 and
CD22) tartják fent ezt az állapotot mikro megfelelő receptorain át

http://ucsf.edu/lm/introductionneuropathology/Response_to_Injury/Mi
croglia.htm
 Mikroglia toborzás: Chemokines

összesen két Cys van bennük: egy az két Cys egymás mellett egy aminosav van közöttük
N-terminálisnál, a másik távolabb

más sejtekhez
való kötődés
A család 4
csoportjának három aminosav van közöttük:
elnevezése: az első fractalkine (ez az egyetlen ilyen típusú citokin)
(N terminálishoz
közeli) két Cystein
milyen távolságra CX3CR1: receptor CX3CL1: ligand
van egymástól. MIKROGLIA NEURON
 Fractalkine
CX3CR1: konvencionális, Gαi-coupled 7-
transzmembrán receptor.

CX3CL1: nem konvencionális kemokin,

hiszen membrán-kötött: a CX3C domén
(N-terminális) egy erősen glikozilált,
mucin-szerű nyélen helyezkedik el.
CX3C domén: kell a receptor kötéshez,
de nem tud erős kötést biztosítani
(FIZIOLÓGIÁS shear stress –t sem bírja !)
Mucin-like stalk: 26nm hosszú, eltartja
a CX3C domént a sejttől, hogy az
optimális receptor kötését segítse;
hasonlít a szelektin megfelelő stalk-
régójához, amely a leukocita
kitapadásért és erős adhézióért felelős)
Szolubilis ligand: a CX3CL1 ligand
proteolitikusan lehasadhat a sejtről
(ADAM10/17) (klb méretű fragmensek)
A1Rs decrease Fractalkine and CX3CR1 in synaptic plasticity,
neurogenesis and neuroprotection. Schematic
glutamate diagram describing several mechanisms of action of
release and fractalkine (FKN) in modulating neuronal function.
Hippocampal neurons, in particular, express high
hyperpolarize levels of FKN and CX3CR1 receptors. Microglia also
neurons possess CX3CR1 and can release several chemicals
that modulate neurotransmission and synaptic
plasticity. First, FKN acting through CX3CR1
modulates AMPA receptor phosphorylation leading to
increased calcium (Ca2+) entry and inhibition of both
excitatory post-synaptic potentials (EPSPs) and long-
term potentiation (LTP). FKN can also increase
inhibitory post-synaptic currents (IPSCs), possibly by
enhancing neuronal responsiveness to GABA-
mediated chloride entry. How FKN enhances IPSCs
remains unknown, but this may be due to FKN
activating CX3CR1 on microglia and causing the
release of adenosine. This, in turn, could activate A3R
receptors on neurons, kick-starting a signalling
cascade which results in modulation of
GABAA receptors to increase their sensitivity to GABA.
Adenosine may also activate A2AR on microglial cells
and induce the release of D-serine which acts as a co-
agonist at the NMDA receptor leading to increased
calcium entry. In this way, FKN may also inhibit LTP
induction and modulate synaptic plasticity. The
adenosine released by microglia has also been
suggested to play a role in neuroprotection by
activating A1R receptor subtypes on neurons. Finally,
FKN may play a role in hippocampal neurogenesis by
inhibiting the release of IL-1β from microglial cell
types. Much of this schematic diagram is speculative
and based on our limited current knowledge of the
interplay between FKN and CX3CR1 in CNS
plusz még:szolubilis neurotransmission. There is still much work to be done
to dissect the signalling cascades involved in FKN-
fraktalkin hatások mediated neuromodulation.
 Mikroglia

photo: Alexander Osmand

• mikroglia eloszlás:
agyterületenként változó de nagyon
M. Dailey
egyenletes
Jung et al. 2000 Jinno 2007
 Mikroglia
knock in

Peripheral nerve transection experiment.

Coronal section through contralateral control and operated (facial nerve nuclei of
axotomized CX3CR11/GFP mouse day 7 after axotomy. NeuN/CX3CR11/GFP
Jung S., Littman DR. et al MCB 2000 20(11):4106-14.
ramified resting

amoeboid activated
 nyugvó mikroglia
Mikroglia
klasszikusan alternatívan
aktivált aktivált
proinflammatorikus antiinflammatorikus
M1 M2
„potentially neurotoxic” „potentially neuroprotective”
A plasticity model proposes that cells of the
phagocyte lineage are sensitive to the
precise nature of the stimulus, its intensity,
the time for which it is present and many
other factors. Therefore, in different
pathological states, activated microglia
might synthesize a range of different
cytokines.

The profiles in different forms of injury and disease that are shown are: a model of excitotoxicity (acute neuronal injury) (Ba), intracerebral
lipopolysaccharide (LPS) challenge, experimental allergic encephalomyelitis (EAE), prion disease, and Wallerian degeneration. It is important to note that
these different states are not fixed or immutable, but can be switched between one state and another by a further stimulus. COX2, cyclooxygenase-2; IL,
interleukin; TGF1, transforming growth factor-1; TNF, tumour-necrosis factor.
Perry 2007
 Macrophage (microglia) activation states
Th1 responses
Microbicidal activity
Cytotoxicity, Tissue injury
↑MHC-II ↑Il-12, Il-23
↑B7 ↑TNFa
↑iNOS +APC
↑Il-1, Il-6

Th2 responses
Wound healing
Anti-inflammatory
Tissue repair
activity

↑ MHC-II ↓ TNFa
Macrophages can ↓MHC-II ↓ TNFa ↑ CD68 ↑Il-10
follow different ↓ CD68 ↑arginase Arginase: outcompetes iNOS to
downregulate production of ↑ iNOS ++APC
activation processes ↓ iNOS ↑Il-10 nitric oxide ↓ Il-12
depending on the
microenvironment. ↓ Il-12 -APC Gea-Sorli, Closi. World J Gastrointest Pharmacol Ther. 1(5): 107-111, 2010
Mikro/makrofág lineage
David, Kroner 2011
 DE !!!

túlegyszerűsítés..
modellbe gyömöszölés..

no evidence

29 klb kezelésből származó

ex vivo genomiális
299 humán makrofág
vizsgálatok,
transzkriptom analízise nem
sok klb betegségmodellből
igazolta, hogy az M1 - M2
(egér) nem bizonyították
profilok létezését
Mikroglia motilitás

kétféle mozgási aktivitás

sejttest migráció
transzlokációja
nélküli fejlődés sérülés
nyúlványmotilitás
(lézió, stoke, ND)

- migráció már 24 órán

ATP hatásra azonnali belül egyértelmű
nyúlvány-extenzió
(apiráz (ATP to AMP+P) gátolja) - csúcs 3 napnál
:
P2Y12 rec. - 5-10 um/min
- P2Y12 KO: jelentősen kisebb
nyúlvány-extenzió - nem kollektív, irányított
- P2Y12 : nyugvó állapotban migráció hanem random
expressziója robusztusabb, walk !! (?)
aktivációra csökken
Mikroglia
Mikroglia

Ohsawa, Kohsaka 2011

in vitro
culture
in vitro
culture
in vitro
organotypic
slice
culture