Copilot

Phương pháp được sử dụng để định lượng anti-CCP (antibody to cyclic citrullinated peptide)
trong phòng thí nghiệm là phương pháp miễn dịch sandwich sử dụng công nghệ hóa phát
quang hoặc điện hóa phát quang [1]. Dưới đây là các bước cơ bản của quy trình này:

1. Nguyên lý: Anti-CCP trong mẫu thử đóng vai trò kháng nguyên được kẹp giữa hai
kháng thể đặc hiệu:
○ Kháng thể thứ nhất đánh dấu biotin.
○ Kháng thể thứ hai đánh dấu ruthenium (chất có khả năng phát quang). Khi
kích thích bằng ánh sáng, ruthenium phát ra ánh sáng và cường độ phát
quang tỷ lệ thuận với nồng độ Anti-CCP có trong mẫu thử.
2. Chuẩn bị:
○ Người thực hiện: Cán bộ đại học, kỹ thuật viên chuyên ngành hóa sinh.
○ Phương tiện, hóa chất: Máy xét nghiệm như Cobas e411, e170, e601,
Architect; hóa chất xét nghiệm Anti-CCP, chất chuẩn Anti-CCP, chất kiểm tra
chất lượng Anti-CCP.
3. Lấy bệnh phẩm:
○ Lấy 3 ml máu tĩnh mạch vào ống không có chất chống đông hoặc ống có chất
chống đông như Li-Heparin, EDTA.
○ Máu không vỡ hồng cầu, sau khi lấy máu, ly tâm tách lấy huyết thanh hoặc
huyết tương.
4. Bảo quản bệnh phẩm:
○ Bệnh phẩm ổn định 3 ngày ở 2–8°C, 1 tháng ở -20°C.
○ Bệnh phẩm chỉ rã đông 1 lần và phải để bệnh phẩm đạt nhiệt độ phòng trước
khi phân tích.
5. Tiến hành kỹ thuật:
○ Máy phân tích cần chuẩn bị sẵn sàng để thực hiện phân tích mẫu: Máy đã
được cài đặt chương trình xét nghiệm Anti-CCP.
○ Nhập dữ liệu về thông tin người bệnh và chỉ định xét nghiệm vào máy phân
tích.
○ Nạp mẫu bệnh phẩm vào máy phân tích và ra lệnh cho máy thực hiện phân
tích mẫu.
6. Đánh giá kết quả:
○ Trị số bình thường: <17 U/ml.
○ Anti-CCP tăng bệnh lý trong viêm khớp dạng thấp, Anti-CCP tăng sớm nên có
thể giúp cho chẩn đoán sớm viêm khớp dạng thấp [1].

Hy vọng thông tin này giúp bạn hiểu rõ hơn về quy trình định lượng anti-CCP trong phòng thí
nghiệm. 😊

Nguồn: Cuộc hội thoại với Bing, 20/5/2024

 1. ️Định lượng anti-CCP (antibody to cyclic citrullinative peptid)
2. Xét nghiệm Anti-CCP chẩn đoán viêm khớp dạng thấp | Vinmec
3. ️Định lượng anti-CCP (antibody to cyclic citrullinative peptid)
4. Chỉ định và ý nghĩa xét nghiệm Anti CCP

Để sử dụng phương pháp Sandwich ELISA nhằm nhận diện kháng thể anti-CCP, bạn cần thực
hiện theo các bước sau:

Phủ Kháng Thể Bắt Giữ: Đĩa ELISA được phủ một lớp kháng thể đơn dòng đặc hiệu cho anti-
CCP.

Thêm Mẫu: Mẫu thử chứa anti-CCP được thêm vào đĩa, nơi kháng nguyên (anti-CCP) sẽ liên
kết với kháng thể bắt giữ.

Kháng Thể Phát Hiện: Thêm kháng thể phát hiện đánh dấu biotin vào đĩa, nó sẽ liên kết với
anti-CCP.

Kháng Thể Thứ Cấp: Kháng thể thứ cấp đánh dấu ruthenium (chất có khả năng phát quang)
được thêm vào và liên kết với kháng thể phát hiện, tạo thành phức hợp miễn dịch kiểu
sandwich.

Phát Tín Hiệu: Thêm cơ chất của enzyme để phát tín hiệu. Cường độ phát quang tỷ lệ thuận
với nồng độ anti-CCP có trong mẫu thử.

Trong quá trình này, việc chuẩn bị mẫu và máy móc cũng rất quan trọng:

Chuẩn Bị Mẫu: Lấy máu tĩnh mạch và ly tâm để tách lấy huyết thanh hoặc huyết tương.
Bệnh phẩm ổn định ở 2–8°C trong 3 ngày hoặc -20°C trong 1 tháng.

Chuẩn Bị Máy: Máy xét nghiệm cần được chuẩn bị sẵn sàng, đã được cài đặt chương trình
xét nghiệm anti-CCP và đã được chuẩn với xét nghiệm anti-CCP.

Sau khi thực hiện xét nghiệm, kết quả sẽ được đánh giá dựa trên trị số bình thường và tăng
bệnh lý. Trị số bình thường dưới 17 U/ml. Trong viêm khớp dạng thấp, anti-CCP tăng sớm có
thể giúp chẩn đoán sớm bệnh1.

Lưu ý rằng, việc sử dụng các thuốc có chứa Biotin cần được ngưng ít nhất 8 giờ trước khi lấy
máu để tránh nhiễu xét nghiệm1. Đây là một phương pháp có độ nhạy và độ đặc hiệu cao,
thích hợp cho việc phát hiện các kháng nguyên trong mẫu phức tạp mà không cần tinh sạch
trước2.