Machine Translated by Google

Công nghệ tách và tinh chế 330 (2024) 125541

Danh sách nội dung có sẵn tại ScienceDirect

Công nghệ tách và tinh chế

trang chủ tạp chí: www.elsevier.com/locate/seppur

Chiết xuất xanh của berberine từ Coscinium fenestratum (Gaertn.) Colebr.

sử dụng dung dịch nước có hỗ trợ siêu âm của axit hữu cơ, rượu đa và
dung môi eutectic sâu

Nhan Trong Le , Ngoc Huyen Thi Chau , Phu Quynh Dinh Nguyen , Linh Thuy Thi Tran ,
Một Một Một Một

b Một,*
Huong Thanh Phung , Hoai Thi Nguyen

Khoa Dược, Đại học Y Dược Huế, Đại học Huế, Thành phố Huế, Việt Nam
Một

b
Khoa Công nghệ sinh học, Đại học Dược Hà Nội, Thành phố Hà Nội, Việt Nam

THÔNG TIN BÀI VIẾT TRỪU TƯỢNG

Từ khóa: Berberine thể hiện nhiều hoạt tính sinh học tiềm năng và được tìm thấy trong một số loại dược liệu, chẳng hạn như
Berberin
Coscinium fen-estratum. Việc chiết xuất berberine từ sinh khối được thực hiện bằng cách sử dụng dung môi hữu cơ dễ
Dung môi xanh
bay hơi, dung dịch axit vô cơ và gần đây hơn là chất lỏng ion và dung môi eutectic sâu. Để phát triển các quy trình
A-xít hữu cơ
chiết xuất hiệu quả và bền vững hơn, nghiên cứu này đã sử dụng các dung môi xanh rẻ tiền, chẳng hạn như dung dịch
Rượu đa chức
nước axit cacboxylic và rượu nhiều rượu, để chiết xuất berberine từ Coscinium fenestratum. Việc sàng lọc ban đầu
được thực hiện để so sánh hiệu suất chiết xuất berberine của các dung môi khác nhau, bao gồm dung dịch nước của axit
cacboxylic, rượu đa chức và dung môi eutectic sâu của chúng. Kết quả thu được cho thấy axit lactic là dung môi tiềm
năng để chiết xuất berberine. Sau khi tối ưu hóa quy trình bằng phương pháp bề mặt đáp ứng (RSM), điều kiện chiết
xuất có sự hỗ trợ của siêu âm tối ưu được xác định là nồng độ axit lactic là 60 % (w/w), tỷ lệ lỏng-rắn là 17,25 mL/
g, tỷ lệ lỏng-rắn là 17,25 mL/g. thời gian chiết là 20 phút và nhiệt độ chiết là 66 C.
Điều này mang lại hiệu suất chiết là 38,23 ± 0,69 mg/g, tương ứng với nồng độ berberine là 2,22 ± 0,04 mg/mL. Ngoài
ra, việc sử dụng axit lactic làm dung môi chiết mang lại hiệu quả chiết và độ tinh khiết berberine vượt trội so với
các dung môi hữu cơ dễ bay hơi thông thường và các axit, bazơ vô cơ.
Việc thu hồi berberine đạt được bằng cách sử dụng nhựa xốp, cho phép thu hồi 99,52 ± 0,67% berberine từ dung dịch
axit lactic. Dung môi axit lactic và nhựa AB-8 đã được thu hồi và tái sử dụng thành công trong tối thiểu ba chu kỳ
chiết liên tiếp, duy trì hiệu quả tối đa của chúng trong toàn bộ quá trình. Berberine thu hồi từ chiết xuất axit
lactic thể hiện hoạt tính kháng khuẩn mạnh hơn so với chiết xuất thu được bằng ethanol, metanol và axeton, cũng như
berberine thu hồi từ chiết xuất nước vôi và axit sulfuric. Hơn nữa, dung môi axit lactic và chiết xuất của nó cho
thấy không có độc tính tế bào đối với dòng tế bào thận phôi người. Những phát hiện của cuộc điều tra này thiết lập
nền tảng cho các nghiên cứu trong tương lai sử dụng dung môi thân thiện với môi trường để chiết xuất alkaloid từ cây
thuốc. Điều này đặt nền tảng cho việc thực hiện quy trình chiết xuất quy mô lớn các hợp chất hoạt tính tự nhiên một
cách an toàn và có ý thức về môi trường.

1. Giới thiệu chinensis [1]. Từ lâu, berberine đã được sử dụng trong y học cổ truyền để điều

trị các bệnh viêm nhiễm, rối loạn tiêu hóa, các vấn đề về da và khối u . Một số

Berberine, có tên khoa học là 5,6-dihydro-9,10-dimethoxybenzo [g]-1,3- lượng đáng kể các nghiên cứu thực nghiệm và lâm sàng gần đây đã chỉ ra rằng

benzodioxolo[5,6-a]quinolizinium (Hình 1), là một alkaloid benzylisoqui-noline berberine có nhiều tiềm năng điều trị cho các bệnh khác nhau, bao gồm tiểu đường,

được tìm thấy tự nhiên với nhiều tiềm năng các hoạt động sinh học. Berberine chủ ung thư, bệnh mạch máu, viêm, trầm cảm và béo phì [3,4]. Ngoài ra, berberine còn

yếu được tìm thấy trong một số cây thuốc thuộc họ Berberidaceae, Rutaceae, đóng vai trò quan trọng trong việc phát triển các loại thuốc mới thông qua việc

Ranunculaceae và Menispermaceae, như Coscinium fenestratum, Phellodendri sửa đổi và thay thế ở các vị trí chiến lược để

amurensis và Coptis.

* Đồng tác giả.

Địa chỉ email: nthoai@hueuni.edu.vn (H. Thị Nguyên).

https://doi.org/10.1016/j.seppur.2023.125541 Nhận ngày 10

tháng 8 năm 2023; Nhận ở dạng sửa đổi ngày 12 tháng 10 năm 2023; Được chấp nhận ngày 27 tháng 10 năm 2023 Có sẵn trực tuyến
ngày 30 tháng 10 năm 2023

1383-5866/© 2023 Elsevier BV Mọi quyền được bảo lưu.

Machine Translated by Google

N. Trong Le et al. Công nghệ tách và tinh chế 330 (2024) 125541

berberine từ dược liệu.

2. Vật liệu và phương pháp

2.1. Sinh khối

Thân và rễ của Coscinium fenestratum (Gaertn.) Colebr. được lấy từ một

công ty dược liệu chuyên ngành có trụ sở tại tỉnh Thừa Thiên Huế, Việt Nam.
Các mẫu thu thập được sấy khô, sau đó nghiền thành bột (sàng qua lưới 0,5–
Hình 1. Cấu trúc hóa học của berberine.
1,0 mm) và bảo quản trong môi trường tránh ánh sáng cho các thí nghiệm
chiết tiếp theo.
tăng cường các hoạt động sinh học mong muốn [2]. Với những lợi ích mà
berberine mang lại, việc chiết xuất berberine từ dược liệu trở thành một
2.2. Chất chuẩn, thuốc thử và dung môi
nhu cầu tất yếu.
Trước đây, hầu hết các quy trình chiết xuất berberine từ dược liệu đều
Chất chuẩn clorua berberine được mua từ Công ty Sigma-Aldrich (Missouri,
sử dụng dung môi hữu cơ dễ bay hơi (như metanol, ethanol và cloroform) và
Hoa Kỳ). Nhựa HP-20 được lấy từ Supelco™ Analyt-ical (Pennsylvania, Hoa
axit vô cơ (như axit photphoric, axit clohydric, axit nitric và axit
Kỳ). Nhựa D-101 và AB-8 có nguồn gốc từ Công ty TNHH Công nghệ nhựa Haoju
sulfuric) [2]. Tuy nhiên, các dung môi này thường độc hại, dễ nổ và gây ô
Thiên Tân (Thiên Tân, Trung Quốc). Ethanol, metanol, axeton, axit tartaric,
nhiễm môi trường. Để hưởng ứng phong trào xanh được xúc tác bởi “Đạo luật
axit citric, axit formic, axit axetic, axit lactic, ethylene glycol,
ngăn ngừa ô nhiễm” do Cơ quan bảo vệ môi trường Hoa Kỳ ban hành năm 1990,
propylene glycol, glycerol, canxi hydroxit, axit sulfuric và natri clorua
khái niệm về kỹ thuật khai thác xanh đã xuất hiện. Những kỹ thuật này nhằm
được mua bởi Xilong Scientific Co., Ltd. (Quảng Đông, Trung Quốc). Choline
mục đích giảm mức tiêu thụ năng lượng và cho phép sử dụng các dung môi thay
clorua được mua lại từ Thermo Fisher Scientific, Co. (Massachusetts, Hoa
thế và các sản phẩm tự nhiên có thể tái tạo một cách an toàn, tạo ra các
Kỳ). Các tế bào thận phôi người (HEK-293A) được sử dụng trong nghiên cứu
sản phẩm hoặc chiết xuất chất lượng cao [5]. Hơn nữa, dung môi xanh mang
này được lấy từ Đại học Quốc gia Yang Ming Chiao Tung, Đài Loan. Tất cả các
lại nhiều lợi ích so với các dung môi hữu cơ và vô cơ dễ bay hơi được sử
hóa chất được sử dụng trong các thử nghiệm hoạt tính sinh học đều được lấy
dụng trong các phương pháp chiết xuất trước đó, bao gồm an toàn, không
từ các nguồn tiêu chuẩn.
độc hại, giá cả phải chăng, dễ phân hủy sinh học và thân thiện với môi
Việc chuẩn bị dung môi được trình bày trong Bảng 1. Dung môi eutectic
trường [6,7].
sâu (DES) được điều chế bằng cách trộn choline clorua với axit/rượu đa
Cho đến nay, hầu hết các nghiên cứu tập trung vào ứng dụng dung môi xanh để chiết xuất
theo tỷ lệ mol xác định. Hỗn hợp này được gia nhiệt ở nhiệt độ 80 C trong
berberine từ dược liệu chủ yếu xử lý các hợp chất ở dạng chất lỏng ion và dung môi
2–4 giờ đồng thời đảm bảo khuấy liên tục để đạt được chất lỏng ổn định và
eutectic sâu [8–11]. Cụ thể, Wenchao et al. đã báo cáo việc chiết xuất berberine được hỗ
đồng nhất. Sau đó, DES được phép làm mát ở nhiệt độ phòng trong 24 giờ. Các
trợ bằng siêu âm từ Phellodendron amurense bằng cách sử dụng dung dịch nước-lỏng ion có
dung môi này được bảo quản trong lọ kín, tránh ánh sáng để sử dụng cho các
chứa 1-butyl-3-methylimidazolium brom-mide. Ngoài ra, tính khả thi của dung dịch nước dung
thí nghiệm tiếp theo.
môi eutectic sâu dựa trên clorua choline đã được đánh giá để chiết xuất berberine.
Thí nghiệm sử dụng tỷ lệ mol-mol của eutectic sâu
dung môi (DES), choline clorua và axit/rượu đa.

từ Phellodendri amurensis và Coptis chinensis [8,10]. Yuanbin và cộng sự.

2.3. Định lượng berberine bằng HPLC
đã khám phá các dung môi eutectic sâu dựa trên betaine để chiết xuất sáu
alkaloid, bao gồm berberine, palmitine, coptisine, epiberberine,
Hàm lượng berberine của tất cả các mẫu được định lượng bằng thiết bị
jatrorrhizine và coumbamine, từ Coptidis Rhizoma [9]. Tuy nhiên, việc sử
RP-HPLC (Agilent Technologies, California, US), theo phương pháp được mô
dụng các hợp chất an toàn và chi phí thấp, chẳng hạn như axit cacboxylic
tả trước đây bởi Yuanbin et al. với những sửa đổi nhỏ [9]. Để phân tách,
và rượu poly, dưới dạng dung dịch nước để chiết xuất berberine từ cây
cột sắc ký được sử dụng là Agilent Eclipse XBD-C18 có kích thước 4,6 × 150
thuốc vẫn chưa được nghiên cứu rộng rãi. Ở đây, chúng tôi sử dụng các hợp
mm (id) và kích thước hạt là 5 μm. Berberine được phân giải bằng cách sử
chất này để chiết xuất berberine từ Coscinium fenes-tratum. Cách tiếp cận
dụng pha động bao gồm acetonitril (A), cùng với dung dịch nước chứa 0,3%
này đóng vai trò là giải pháp thay thế hiệu quả về mặt chi phí và góp phần
axit photphoric và 0,2% trimethylamine (B), với tỷ lệ thể tích tương ứng
giảm thiểu tác động môi trường liên quan đến các dung môi thông thường.
là 20:80. Tốc độ dòng và bước sóng hấp phụ tối đa được đặt tương ứng ở
Hơn nữa, các dung môi được nghiên cứu trong nghiên cứu này là các thành
mức 0,7 mL/phút và 345 nm. Hình S1 hiển thị sắc ký đồ của berberine tiêu
phần hoặc chất đã được phê duyệt để sử dụng trong ngành thực phẩm, mỹ phẩm
chuẩn và mẫu thử. Dữ liệu thu được được tính toán bằng cách sử dụng đường
và dược phẩm.
cong hiệu chuẩn đã thiết lập trước đó, được biểu thị bằng y = 16,642x +
Trong nghiên cứu hiện tại, các dung dịch nước khác nhau của axit cacboxylic (axit
124,85, với giá trị R2 là 0,9997. Trong phương trình này, x biểu thị nồng
tartaric, axit citric, axit axetic, axit formic, axit lactic), rượu poly (ethylene
độ của chất chuẩn berberine (μg/mL), trong khi y biểu thị diện tích pic
glycol, propylene glycol, glycerol) và dung môi sâu eutectic (DES) dựa trên choline clorua
tương ứng (mAU).
đã được đánh giá để xác định dung môi xanh tối ưu để chiết xuất berberine từ Coscinium

fen-estratum. Sau khi chọn dung môi hiệu quả nhất, các yếu tố chính ảnh hưởng đến hiệu

suất chiết đã được tối ưu hóa bằng phương pháp bề mặt đáp ứng (RSM). Sau đó, quá trình
2.4. Chiết xuất berberin từ C. fenestratum
thu hồi berberine từ dung dịch chiết được thực hiện bằng cách sử dụng các loại nhựa xốp

lớn riêng biệt và cả dung môi chiết và nhựa đều được tái chế. Ngoài ra, người ta còn tiến
Ban đầu, 0,2 g bột C. fenestratum được chiết bằng cách sử dụng 4 mL mỗi
hành so sánh hoạt tính kháng khuẩn của chiết xuất berberine thu được từ các dung môi khác
dung môi tương ứng. Quá trình chiết xuất được thực hiện thông qua siêu âm
nhau.
ở nhiệt độ 30 C, với thời gian 30 phút. Sau đó, hỗn hợp phản ứng thu được
được ly tâm ở tốc độ 4000 vòng/phút trong thời gian 10 phút, tạo điều kiện
thuận lợi cho việc tách chất rắn và chất lỏng. Thu thập các dung dịch tiếp
Cuối cùng, một nghiên cứu về độc tế bào trên dòng tế bào thận phôi người
theo, pha loãng gấp 10 lần và sau đó được lọc bằng bộ lọc 0,45 μm. Cuối
(HEK-293A) đã được thực hiện để khẳng định tính an toàn của dung môi đã
cùng, việc định lượng berberine trong các mẫu thử nghiệm được thực hiện
chọn. Theo hiểu biết tốt nhất của chúng tôi, báo cáo khoa học này trình bày
bằng HPLC. Để đảm bảo độ chính xác, mỗi thí nghiệm được lặp lại ba lần, từ
tài liệu ban đầu về quy trình chiết xuất xanh sử dụng dung dịch nước của
đó duy trì độ chính xác. Thu được
axit cacboxylic và rượu polyalcohol để chiết xuất.

2
Machine Translated by Google

N. Trong Le et al. Công nghệ tách và tinh chế 330 (2024) 125541

Bảng 1 nhiệt độ chiết xuất (dao động từ 30 C đến 80 C). Sau đó, thiết kế Box-
Danh sách các dung môi, bao gồm dung môi hữu cơ, axit cacboxylic và rượu poly được sử dụng để sàng Behnken (BBD) đã được sử dụng, sử dụng phương pháp bề mặt đáp ứng để
lọc ban đầu quá trình chiết xuất berberine từ C. fenestratum. tối ưu hóa toàn diện các điều kiện chiết xuất. Trong thiết kế này, các

Kiểu dung môi Viết tắt Nồng độ (% w/w) biến độc lập bao gồm nồng độ dung môi (A), tỷ lệ lỏng-rắn (B) và nhiệt
độ chiết (C), trong khi hiệu suất chiết berberine được coi là biến phụ

Ethanol EtOH 100 thuộc. Một phạm vi gồm ba mức tham số (như được nêu trong Bảng 2) đã
Chất hữu cơ dễ bay hơi

75 được kết hợp, tạo ra tổng cộng 17 thử nghiệm, bao gồm năm thử nghiệm
50
điểm trung tâm, trong thiết kế thử nghiệm. Phần mềm thống kê Design-
25
Expert 13.0 (Stat-Ease Inc., Minnesota, USA) đã được sử dụng để lấy dữ
Metanol MeOH 100
75
liệu tối ưu và kết quả được coi là có ý nghĩa thống kê nếu giá trị p
50 nhỏ hơn 0,05.
25
Aceton Át chủ 100
75
50
2.6. Thu hồi berberine từ dịch chiết nước
25
Nước chanh Lim –
Axit, bazơ vô cơ Sau khi xác định các điều kiện chiết xuất tối ưu cho berberine từ C. fenestratum, ba
Axit sunfuric Trên 0,4
loại nhựa xốp lớn là HB-20, D-101 và AB-8 đã được chuẩn bị để thu hồi berberine từ dịch
Axit cacboxylic Axit tartaric MẶT ĐỐI 50
chiết nước axit lactic. Để bắt đầu quy trình, các cột phải được xử lý trước bao gồm xử
Axit citric CÁI ĐÓ 50
Axit formic NHƯNG 100 lý tuần tự bằng etanol tuyệt đối, NaOH 5% và HCl 5%. Sau đó, các cột này được rửa bằng

50 nước khử ion để đạt được độ pH trung tính. Sau khi chiết trong các điều kiện tối ưu đã
A-xít a-xê-tíc AA 100
được thiết lập, 5 mL dung dịch chiết chứa berberine được đưa qua các cột. Sau khi chiết,
50
các cột được xử lý bằng nước khử ion để khôi phục độ pH trung tính. Bước này tạo điều
Axit lactic CÁC 100
kiện thuận lợi cho việc thu hồi axit lactic, trong khi berberine được giữ lại trong các
50
Axit lactic – Formic Từ A đến F (1:1) 100 cột. Giai đoạn cuối cùng bao gồm việc rửa giải berberine bằng cách sử dụng etanol tuyệt

axit (1:1)* đối và làm bay hơi etanol sau đó để thu được sản phẩm giàu berberin. Với mục đích so
Rượu đa chức Ethylene glycol VÍ DỤ 100
sánh, việc thu hồi berberine thông qua kết tủa được tiến hành trên cả nước vôi và dịch
50
chiết nước axit sulfuric 0,4%. Dịch chiết nước vôi được điều chỉnh đến độ pH bằng 3
Propylen glycol PG 100
50 bằng dung dịch HCl 10%. Sau đó, 1,5 g NaCl được thêm vào mỗi 30 mL dung dịch chiết. Sự

Glyxerin GL 100 kết tủa berberine được phép diễn ra trong khoảng thời gian 24 giờ ở nhiệt độ 25 C. Sau
50 đó, hỗn hợp này được ly tâm ở cùng nhiệt độ trong 15 phút để tách kết tủa giàu berberine.
Dung môi Choline clorua- ChCl-TA (1:2) 50
Hiệu suất thu hồi berberine (REberb, %) được xác định bằng công thức sau: REberb = (w/wo)
eutectic sâu (DES) Axit tartaric (1:2)
× 100 %, trong đó 'w' biểu thị lượng berberine trong sản phẩm cuối cùng và 'wo' biểu thị
Choline clorua- ChCl-CA (1:2) 50

Axit xitric (1:2) lượng berberine trong dung dịch chiết ban đầu.

Choline clorua- ChCl-AA (1:2) 50

Axit axetic (1:2)

Choline clorua- ChCl-FA (1:1) 50

Axit formic (1:1)

Choline clorua- ChCl-FA (1:2) 50

Axit formic (1:2)

Choline clorua- ChCl-LA (1:1) 50

Axit lactic (1:1)

Choline clorua- ChCl-LA (1:2) 50

Axit lactic (1:2)

Choline clorua- ChCl-LA-FA 50
Axit lactic-Axit (1:1:1)

2.7. Tái chế dung môi và nhựa xốp AB-8

formic (1:1:1)
Choline clorua- ChCl-LA-FA 50
Axit lactic-Formic (2:1:1) Với mục đích tái chế dung môi, dung dịch axit lactic thu được từ
axit các cột được làm bay hơi nước bằng thiết bị bay hơi chân không (R-300,
(2:1:1)
Buchi Labortechnik, Thụy Sĩ) để thu hồi axit lactic. Sau đó, axit lactic
Choline clorua- ChCl-EG (1:2) 50
thu hồi được trộn với nước để tạo ra dung dịch axit 60%, do đó làm cho
Etylen glycol (1:2)
Choline clorua- ChCl-PG (1:2) 50 dung môi có thể tái sử dụng trong các điều kiện tối ưu đã xác định

Propylen glycol (1:2) trước. Khả năng tái sử dụng dung môi thu hồi được đánh giá qua ba chu
Choline clorua- ChCl-GL (1:2) 50 kỳ chiết liên tiếp sử dụng sinh khối tươi. Về việc tái chế nhựa
Glycerol (1:2)
macroporous AB-8, sau khi rửa giải berberine khỏi cột bằng etanol tuyệt
đối, cột trải qua quá trình tái sinh bao gồm xử lý tuần tự bằng NaOH 5%

kết quả sau đó được trình bày dưới dạng giá trị trung bình của ba lần và

lặp lại này, với độ lệch chuẩn nằm trong giới hạn chấp nhận được.

Bảng 2

2.5. Phương pháp bề mặt đáp ứng Thiết kế thử nghiệm để chiết xuất berberine từ C. fenestratum bao gồm mức độ mã hóa và cài đặt cho

các biến độc lập.

Sau khi xác định dung môi thích hợp nhất để chiết xuất berberine từ
Biến Mức độ mã hóa của các biến
C. fenestratum, các yếu tố ảnh hưởng đến hiệu quả của quá trình chiết
1 0 +1
xuất đã được khám phá và sau đó được tối ưu hóa. Ban đầu, các yếu tố
riêng lẻ được nghiên cứu, bao gồm nồng độ dung môi (từ 0 % đến 100 %), Nồng độ dung môi (%) (A) 10 35 60

Tỷ lệ lỏng-rắn (mL/g) (B) 5 12,5 20

tỷ lệ lỏng-rắn (thay đổi từ 5:1 đến 30:1 mL/g), thời gian chiết (từ 5 ồ
Nhiệt độ chiết ( C) (C) 40 60 80
đến 70 phút) và

3
Machine Translated by Google

N. Trong Le et al. Công nghệ tách và tinh chế 330 (2024) 125541

5% HCl. Sau quá trình tái sinh này, cột được rửa kỹ bằng nước cho đến khi đạt được (LSD) với mức ý nghĩa p < 0,05. Để xác định các điều kiện tối ưu, phần mềm thống kê

độ pH trung tính. Các cột sau tái sinh sau đó được sử dụng cho các ứng dụng thu hồi Design-Expert (phiên bản 13.0, Stat-Ease Inc., Minnesota, USA) đã được sử dụng.

dung môi và berberine liên tiếp. Khả năng tái sử dụng của nhựa xốp lớn AB-8 được đánh

giá qua ba chu kỳ phục hồi liên tiếp. Các thông số như hiệu suất chiết, hiệu suất thu

hồi và độ tinh khiết của berberine được xem xét kỹ lưỡng trong mỗi chu kỳ, từ đó đánh 3. Kết quả và thảo luận

giá mức độ thành thạo của việc tái sử dụng dung môi và nhựa.

3.1. Lựa chọn dung môi chiết berberine

Trong nghiên cứu này, quy trình chiết xuất berberine bền vững từ dược liệu đã

2.8. Hoạt tính kháng khuẩn được phát triển. Cuộc điều tra tập trung vào việc sử dụng dung dịch nước của axit

cacboxylic, rượu đa và dung môi eutectic sâu (DES) làm chất thay thế tiết kiệm và thân

Hiệu quả kháng khuẩn của berberine thu được từ chiết xuất axit lactic, berberine thiện với môi trường cho dung môi hữu cơ. Mục đích là xác định các dung môi tiềm năng

tiêu chuẩn và chiết xuất berberine sử dụng các dung môi chiết khác nhau đã được thử để thay thế. Để so sánh, các điều kiện điều tra ban đầu đã được chuẩn hóa. Những điều

nghiệm và so sánh giữa ba chủng vi khuẩn: Staphylococcus aureus ATCC 6538, Bacillus kiện này bao gồm tỷ lệ rắn-lỏng cố định là 1:20 (g/mL), thời gian siêu âm là 30 phút

pumilus ATCC 14884 và Escherichia coli ATCC 8739. Thử nghiệm các mẫu được pha loãng và nhiệt độ chiết được đặt ở 30 C.

trong DMSO ở các nồng độ khác nhau. Sử dụng kỹ thuật pha loãng dựa trên các phương

pháp đã được thiết lập trước đó [12], giá trị Nồng độ ức chế tối thiểu (MIC) của các

mẫu đối với mầm bệnh được thử nghiệm đã được xác định. Giá trị MIC được đặc trưng

là nồng độ thấp nhất của mẫu dẫn đến sự ức chế rõ rệt sự phát triển của vi khuẩn sau 3.1.1. Hiệu suất chiết của dung môi hữu cơ và axit vô cơ, bazơ Dung môi hữu cơ dễ bay

thời gian ủ 24 giờ. Các biện pháp kiểm soát tích cực và tiêu cực được thiết lập tương hơi, bao gồm etanol (EtOH) ở các nồng độ 100 %, 75 %, 50 % và 25 % w/w, metanol (MeOH)

ứng bằng doxycycline và DMSO. Mỗi thí nghiệm được tiến hành lặp lại và lặp lại ba lần và axeton (Ace) ở cùng một mức nồng độ đã được chuẩn bị cho mục đích chiết xuất berberine

để đảm bảo tính chính xác và thống nhất. từ C. fenestratum (như trong Bảng 1). Dung dịch nước vôi (Lim) và dung dịch axit sulfuric

(Sul) cũng được sử dụng làm dung môi đối chiếu. Kết quả thu được là

được biểu thị bằng đồ họa trong Hình 2 và Bảng S1, cho thấy phạm vi hiệu suất chiết

2.9. Hoạt tính gây độc tế bào trải dài từ 5,10 đến 29,00 mg/g. Đáng chú ý, dung môi Ace 50% và 0,4% Sul cho hiệu

suất chiết cao nhất, đạt lần lượt là 28,89 và 29,00 mg/g (p > 0,05). Ở nồng độ 75 %,

Tác dụng ức chế tăng trưởng của các mẫu nghiên cứu trên các dòng tế bào HEK-293A EtOH, MeOH và Ace thể hiện hiệu suất chiết tương tự lần lượt là 27,59, 28,11 và 27,75

được đánh giá bằng xét nghiệm Sulforhodamine B (SRB). Các tế bào HEK-293A được nuôi mg/g (với p > 0,05, cho thấy không có sự khác biệt đáng kể). Tuy nhiên, hiệu suất chiết

cấy trong bình T-75 với DMEM chứa 2 mM L-glutamine, 1,5 g/L natri bicarbonate và 10% thấp hơn đáng kể đối với 100 % EtOH và 100 % Ace, dẫn đến hiệu suất dưới 8,00 %, cho

FBS. Việc bổ sung môi trường diễn ra cứ sau 48 giờ và việc tách tế bào đạt được bằng thấy hiệu suất dưới mức tối ưu.

cách sử dụng 0,05% trypsin-EDTA. Các tế bào thu hoạch được nuôi cấy lại sau mỗi 3–5

ngày với tỷ lệ 1:3 và được ủ ở 37 C trong môi trường 5% CO2 .

Đối với xét nghiệm SRB, các tế bào sống sót được gieo hạt qua đêm trong các vi đĩa 96 3.1.2. Hiệu suất chiết của axit cacboxylic và dung dịch nước polyalcohols Trong nghiên

giếng với mật độ 4 × 104 tế bào mỗi giếng. Tiếp theo, các nồng độ khác nhau của mẫu cứu này,

thử nghiệm được thêm vào các giếng chứa tế bào. Sau đó, môi trường nuôi cấy được ủ dung dịch nước chứa nhiều axit cacboxylic khác nhau, cụ thể là axit tartaric (TA),

thêm 3 ngày trong điều kiện ổn định. Sau khi loại bỏ môi trường, các lớp đơn tế bào axit xitric (CA), axit formic (FA), axit axetic (AA) và axit lactic (LA). ), cũng như các

còn lại được cố định bằng axit trichloroacetic 20 % lạnh ở 4 C trong thời gian 1 rượu poly bao gồm ethylene glycol (EG), propylene glycol (PG) và glycerol (GL) ở các nồng

giờ. Các tế bào cố định được nhuộm bằng dung dịch nhuộm 1X SRB ở nhiệt độ phòng trong độ khác nhau (như nêu trong Bảng 1), đã được khám phá để xác định dung môi thay thế phù

30 phút, sau đó rửa bằng axit axetic 1 % để loại bỏ thuốc nhuộm không liên kết. Thuốc hợp nhất để chiết xuất berberine từ C. fenestratum. Như được mô tả trong Hình 3 và Bảng

nhuộm liên kết với protein được hòa tan trong bazơ Tris 10 mM và độ hấp thụ của dung S2, hiệu suất chiết berberine dao động từ 13,59 đến 35,43 mg/g trên các dung môi được

dịch thu được được đo ở bước sóng 515 nm. Ellipticine và 10 % DMSO lần lượt được sử nghiên cứu. Đáng chú ý, axit cacboxylic thể hiện hiệu quả chiết xuất vượt trội so với

dụng làm mẫu đối chứng dương tính và mẫu trắng. Tất cả các thí nghiệm đã được thực rượu poly. Hiệu suất chiết từ dung dịch axit dao động từ 22,73 đến 35,43 mg/g, trong khi

hiện trong ba lần. Tỷ lệ phần trăm ức chế (I%) được xác định bằng phương trình sau: đối với rượu đa, phạm vi là 13,59 đến 24,91 mg/g. Trong số các axit cacboxylic dạng lỏng,

FA, AA và LA mang lại lần lượt 34,14 ± 0,18, 28,84 ± 0,48 và 35,43 ± 0,56 mg/g. Điều thú

vị là, dung dịch nước chứa 50% axit cacboxylic thể hiện xu hướng giảm dần về hiệu quả

chiết xuất berberine, đặc biệt theo thứ tự LA, FA, AA, TA và CA.

I% = [1 (ODt OD0)/(ODc OD0)] × 100.

Ở đây, ODt biểu thị giá trị mật độ quang trung bình vào ngày thứ 3, OD0 biểu thị

giá trị mật độ quang trung bình tại thời điểm ban đầu và ODc biểu thị giá trị mật độ

quang trung bình của mẫu trắng.

Những kết quả này cho thấy hằng số phân ly axit, đặc biệt là các giá trị pKa của LA

2.10. Cộng hưởng từ hạt nhân (NMR) (3,86), FA (3,75), AA (4,75), TA (2,98, 4,34) và CA (3,13, 4,76 và 6,39) [13], đã làm

không ảnh hưởng đáng kể đến việc chiết xuất berberine từ cây thuốc. Tuy nhiên, cấu

Axit lactic thu hồi, berberine chuẩn và thu hồi trúc hóa học của axit, đặc biệt là chiều dài chuỗi ngắn hơn, dường như nâng cao hiệu
1
berberine được phân tích bằng máy quang Phổ H NMR qua Bruker quả chiết xuất của berberine, được chứng minh bằng thực tế là hiệu suất chiết của dung

phổ Avance 500 (Bruker, Massachusetts, Hoa Kỳ). Để tham khảo nội bộ, tetramethylsilane dịch nước 50% LA, FA và AA lớn hơn so với dung dịch nước của LA, FA và AA. TA và CA.

được sử dụng, trong khi deuterium oxit (D2O) được dùng làm dung môi. Để so sánh, các dung môi hữu cơ (EtOH, MeOH và Ace), cũng như nước, được sử dụng

làm dung môi đối chứng trong thí nghiệm này. Hiệu suất thuận lợi nhất thu được khi sử

dụng các dung môi này lần lượt là 27,59 ± 0,14, 28,11 ± 0,15, 28,89 ± 0,80 và 12,82 ±

2.11. Xử lí dữ liệu 0,53 mg/ g. Các giá trị này thấp hơn đáng kể so với giá trị đạt được khi sử dụng dung

dịch axit cacboxylic làm dung môi chiết. Tóm lại là,

Phân tích phương sai (ANOVA) được thực hiện bằng phần mềm SPSS.

Việc phân tách trung bình được thực hiện bằng cách sử dụng sai khác có ý nghĩa nhỏ nhất

4
Machine Translated by Google

N. Trong Le et al. Công nghệ tách và tinh chế 330 (2024) 125541

Hình 2. Hiệu suất chiết Berberine từ C. fenestratum bằng dung môi hữu cơ và axit, bazơ vô cơ. Các chữ cái khác nhau ở đầu mỗi cột biểu thị sự khác biệt đáng kể
(p < 0,05).

Hình 3. Hiệu suất chiết berberine từ C. fenestratum bằng dung dịch axit cacboxylic và rượu poly. Các chữ cái khác nhau ở đầu mỗi cột biểu thị sự khác biệt đáng
kể (p < 0,05).

dung dịch nước của axit lactic (LA) đã chứng minh hiệu quả chiết xuất berberine cao nhất (DES) là một ví dụ đáng chú ý [16]. DES bao gồm hai thành phần: chất cho liên kết hydro và

từ C. fenestratum, do đó làm cho nó trở thành dung môi được lựa chọn để tối ưu hóa hơn chất nhận liên kết hydro, thường liên quan đến các axit hữu cơ với tư cách là chất cho

nữa các điều kiện ảnh hưởng. liên kết hydro [17,18]. Vì vậy, chúng tôi bắt tay vào so sánh giữa hiệu quả chiết xuất

berberine từ C. fenestratum bằng cách sử dụng dung dịch axit cacboxylic và DES tương ứng

của chúng. Hơn nữa, DES có nguồn gốc từ polyalcohol cũng đã được nghiên cứu, kết quả

3.1.3. So sánh hiệu quả chiết của DES và dung dịch axit cacboxylic Là alkaloid, quyết được mô tả trong Hình 4 và Bảng S3. Trong khi berberine thể hiện khả năng hòa tan vừa
định sử phải trong nước, mang lại hiệu suất chiết là 12,82 ± 0,53 mg/g, thì việc sử dụng dung dịch

dụng dung dịch nước gốc axit hữu cơ để chiết xuất berberine từ C. fenestratum phù DES đã chứng minh khả năng chiết xuất của berberine được nâng cao. Đáng chú ý là dung

hợp với nguyên tắc chiết xuất axit-bazơ. Sự lựa chọn này bắt nguồn từ sự tương tác đáng dịch DES chứa choline clorua và axit cacboxylic mang lại hiệu suất chiết nằm trong khoảng

kể giữa dung môi và các hợp chất mục tiêu, tính đến hiệu quả và tính chọn lọc cao của từ 10,14 đến 22,56 mg/g, mặc dù thấp hơn hiệu suất đạt được với các dung dịch axit tương

phương pháp [14]. Chi tiết hơn, các ancaloit có thể được chiết xuất và tách bằng cách ứng. Do đó, việc lựa chọn dung dịch axit cacboxylic để chiết xuất berberine từ C.

tận dụng khả năng tạo muối của chúng khi kết hợp với các axit cụ thể. Quá trình này tăng fenestratum nổi lên như một lựa chọn khả thi và hiệu quả.

cường khả năng hòa tan của chúng trong các dung dịch gốc nước. Do đó, berberine dự kiến

sẽ chủ yếu tạo ra muối lactate và muối lactate này sẽ tận dụng tính phân cực đặc biệt của

dung dịch nước chứa axit lactic, dẫn đến đạt được hiệu suất chiết cao [15]. Cùng với sự

phát triển của hóa học xanh, các dung môi cải tiến đã xuất hiện để thay thế các dung môi

hữu cơ thông thường trong quá trình chiết xuất bằng dung môi eutectic sâu.

3.2. Thiết kế dung môi tối ưu để chiết xuất berberine từ C. fenestratum

Để theo đuổi cách tiếp cận thân thiện với môi trường và bền vững, dung dịch axit

lactic trong nước nổi lên như một dung môi đầy hứa hẹn để chiết xuất berberine. Sau đó,

các thông số trích xuất quan trọng,

5
Machine Translated by Google

N. Trong Le et al. Công nghệ tách và tinh chế 330 (2024) 125541

nồng độ tăng từ 0 % lên 40 %, hiệu suất chiết tăng từ 12,82 mg/g lên 34,34 mg/

g. Ngược lại, vượt quá ngưỡng 40 %, việc tăng nồng độ axit lactic lên 100 %
không mang lại sự thay đổi đáng kể về hiệu suất chiết (với p > 0,05).

Do đó, với mục tiêu kép là tối ưu hóa hiệu quả kinh tế và hiệu suất chiết, dung
dịch nước axit lactic 40% đã được lựa chọn cẩn thận làm dung môi cho các thử

nghiệm tiếp theo.

3.2.2. Ảnh hưởng của tỷ lệ rắn-lỏng

Tỷ lệ sinh khối dược liệu và dung môi ảnh hưởng trực tiếp đến hiệu quả
chiết xuất các hoạt chất trong dược liệu. Lượng dung môi quá mức so với sinh
khối có thể dẫn đến lãng phí dung môi, trong khi lượng dung môi không đủ so

với sinh khối có thể không tạo điều kiện thuận lợi cho việc chiết xuất hoàn

toàn các hợp chất mục tiêu từ dược liệu [19]. Trong nghiên cứu này, các tỷ lệ
chất lỏng-chất rắn đa dạng đã được khám phá (5:1, 10:1, 15:1, 20:1, 25:1 và
30:1 mL/g) (như được trình bày trong Hình 5B và Bảng S5). Những phát hiện này
Hình 4. Hiệu suất chiết berberine từ C. fenestratum bằng dung dịch DES. Các
đã nhấn mạnh một mô hình khác biệt: hiệu quả chiết xuất berberine tăng lên song
chữ cái khác nhau ở đầu mỗi cột biểu thị sự khác biệt đáng kể (p < 0,05).
song với việc tăng tỷ lệ rắn-lỏng từ 5:1 lên 20:1 mL/g.

Ngoài phạm vi này, cụ thể là ở mức 25:1 và 30:1 mL/g, công suất chiết ổn định
bao gồm nồng độ axit lactic, tỷ lệ lỏng-rắn, thời gian chiết và nhiệt độ chiết
mà không có sự thay đổi đáng kể (với p > 0,05). Kết quả này hoàn toàn phù hợp
đều được tối ưu hóa.
với các nguyên tắc của hiện tượng chuyển giao khối lượng. Do đó, để đạt được
Ban đầu, một phân tích đơn yếu tố toàn diện đã được tiến hành để đánh giá tác
sự cân bằng giữa hiệu quả chi phí và các cân nhắc về môi trường, tỷ lệ chất
động của từng yếu tố riêng lẻ đến năng suất chiết xuất. Dựa trên những hiểu
lỏng-rắn 20:1 đã được lựa chọn một cách thận trọng làm thông số tối ưu cho các
biết sâu sắc này, Phương pháp bề mặt đáp ứng (RSM) sau đó đã được sử dụng để
thử nghiệm tiếp theo.
tinh chỉnh các điều kiện then chốt ảnh hưởng đến hiệu quả và hiệu suất chiết

xuất.
3.2.3. Ảnh hưởng của thời gian chiết

Trong nghiên cứu này, các khoảng thời gian chiết xuất khác nhau, từ 5 đến
3.2.1. Ảnh hưởng của nồng độ axit lactic
70 phút (5, 10, 20, 30, 40, 50, 60 và 70 phút), đã được kiểm tra tỉ mỉ để khám
Để xác định nồng độ axit lactic tối ưu, hiệu suất chiết xuất berberine từ
phá tính khả thi của việc chiết xuất berberine từ C. fenestratum vào thời điểm
C. fenestratum đã được kiểm tra trên phạm vi nồng độ từ 0 % đến 100 % (w/w)
đó. khoảng thời gian. Các kết quả, được minh họa trong Hình 5C và Bảng S6, đã
(như minh họa trong Hình 5A và Bảng S4 ). Những phát hiện này đã tiết lộ một
làm sáng tỏ một mô hình khác biệt: sản lượng berberine tăng từ 31,92 lên 35,23 mg/g
xu hướng rõ ràng: khi axit lactic

Hình 5. Ảnh hưởng của nồng độ axit lactic (A), tỷ lệ lỏng-rắn (B), thời gian chiết (C) và nhiệt độ chiết (D) đến hiệu suất chiết berberine từ C. fenestratum. Các
chữ cái khác nhau ở đầu mỗi cột biểu thị sự khác biệt đáng kể (p < 0,05).

6
Machine Translated by Google

N. Trong Le et al. Công nghệ tách và tinh chế 330 (2024) 125541

trong thời gian đầu từ 5 đến 20 phút. Tuy nhiên, việc kéo dài thời gian
chiết từ 20 đến 70 phút không mang lại sự thay đổi đáng kể về khả năng
chiết xuất berberine, với mức tăng nhẹ từ 35,23 đến 35,45 mg/g (với p >
0,05). Thời gian chiết xuất có tác động rõ rệt đến hiệu quả chiết xuất,
đặc biệt khi nhắm mục tiêu chiết xuất các hợp chất có hoạt tính sinh học
từ dược liệu dạng bột mịn. Một khía cạnh quan trọng cần xem xét là kích
thước của dược liệu có thể ảnh hưởng đáng kể đến quá trình chiết xuất.
Kích thước thảo mộc nhỏ hơn có xu hướng tạo điều kiện thuận lợi cho
việc hòa tan các hoạt chất và tạp chất vào dung môi. Khi tốc độ hòa tan
của hoạt chất đạt đến độ bão hòa, việc kéo dài thời gian chiết có thể làm
tăng hàm lượng tạp chất hoặc thậm chí dẫn đến suy thoái hoạt chất [19].
Với mục đích hạn chế hàm lượng tạp chất trong dịch chiết và tối ưu hóa
lợi ích kinh tế, thời gian chiết xuất tối ưu được đặt rõ ràng là 20 phút.
3.2.4. Ảnh hưởng của nhiệt độ chiết
Nhiệt độ chiết có ảnh hưởng sâu sắc đến cả năng suất chiết và chất
lượng của sản phẩm thu được. Vì vậy, việc xác định nhiệt độ thích hợp
cho quá trình chiết là hết sức quan trọng. Nhiệt độ chiết xuất berberine
17 thử nghiệm thực nghiệm. Kết quả thu được từ sản lượng chiết xuất
berberine được ghi lại tỉ mỉ trong Bảng 3, cung cấp cái nhìn tổng quan
toàn diện về kết quả quan sát được và sự biến đổi của chúng trên phổ thí
nghiệm.
Kết quả phân tích độ tin cậy và phương sai được trình bày toàn diện
trong Bảng 4. Giá trị đánh giá của các biến (A, B, C) cũng như các đối
tượng bậc hai của chúng (A2 , B2 , C2 ) đã chứng minh mức
độ tin cậy cao trong mô hình (p < 0,05). Giá trị p của mô hình, nhỏ hơn
0,0001, khẳng định ý nghĩa thống kê và độ tin cậy của mô hình. Hơn nữa,
các giá trị hệ số tương quan, ký hiệu là R2
, đạt giá trị ấn tượng là 0,9983, biểu thị sự phù hợp tuyệt vời của mô
hình với dữ liệu thực nghiệm. Ngoài ra, giá trị Thiếu Phù hợp, được xác
định là 0,0621 (lớn hơn 0,05), củng cố thêm tính đầy đủ của mô hình so
với các quan sát thử nghiệm. Phương trình hồi quy cuối cùng thể hiện
mối quan hệ phức tạp giữa hiệu suất chiết xuất berberine và các biến phụ
thuộc của nó (theo các yếu tố được mã hóa). Nó có thể được biểu diễn
như sau: y = 10,81013 + 0,30067A + 0,85833B + 0,30590C
0,00035AB 0,00019AC 0,00069BC 0,00234A2 0,02214B2

từ C. fenestratum được đánh giá một cách có hệ thống trên một loạt các
giá trị: 30, 40, 50, 60, 70 và 80 C (Hình 5D và Bảng S7). Đáng chú ý,
sự thay đổi nhiệt độ tăng từ 30 lên 60 C tương ứng với sự gia tăng
đồng thời về hiệu suất chiết xuất berberine, tăng từ 35,24 lên 38,06 mg/
g. Tuy nhiên, xu hướng đã ổn định sau thời điểm này và không có sự cải
thiện đáng kể nào được quan sát thấy. Cơ sở lý luận về hiệu ứng nhiệt
độ bắt nguồn từ nguyên tắc đã được chứng minh rõ ràng rằng nhiệt độ cao
có xu hướng làm giảm độ nhớt của dung môi và thúc đẩy tốc độ khuếch tán
của các chất hòa tan vào dung môi, do đó làm tăng khả năng hòa tan của
các hợp chất mục tiêu và do đó làm tăng hiệu quả chiết. Tuy nhiên, vượt
quá một ngưỡng nhất định, việc tăng nhiệt độ hơn nữa có thể không mang
lại sự cải thiện tương xứng và trên thực tế, có thể dẫn đến giảm hiệu
suất chiết. Hiện tượng này có thể là do sự tương tác yếu đi giữa các
hợp chất mục tiêu và dung môi, hoặc thậm chí là khả năng phân hủy các
chất có hoạt tính sinh học, có thể xảy ra ở nhiệt độ quá cao [19]. Để
theo đuổi phương pháp cân bằng nhằm duy trì khả năng kinh tế trong khi
vẫn bảo toàn tính toàn vẹn của thành phần hoạt tính sinh học, nhiệt độ
chiết tối ưu đã được xác định một cách thận trọng là 60 C.
Thông thường, điều kiện chiết ảnh hưởng đáng kể đến hiệu quả chiết.
Tuy nhiên, hiệu suất chiết berberine đạt cực đại nhanh chóng trong khoảng
20 phút và việc tăng nhiệt độ không ảnh hưởng đáng kể đến hiệu suất
chiết. Điều này chứng tỏ vai trò quan trọng của axit lactic trong quá
trình chiết xuất berberine. Có vẻ như axit lactic nhanh chóng phá vỡ
thành tế bào thực vật, tạo điều kiện cân bằng nhanh chóng trong quá trình
chiết xuất. Ngoài ra, phải xem xét khả năng hòa tan của berberine trong
axit lactic. Người ta hy vọng rằng berberine chủ yếu sẽ tạo thành muối
lactate, muối này sẽ tận dụng được tính phân cực rõ rệt của dung dịch
nước chứa axit lactic, dẫn đến năng suất chiết cao hơn. Do khả năng hòa
0,00207C2 . Trong đó: y là hiệu suất chiết của berberine (mg/g), A là
nồng độ axit lactic (%), B là tỷ lệ lỏng-rắn (mL./g), và C là nhiệt độ
ồ
chiết ( C).
Các biểu đồ bề mặt phản ứng và đồ thị đường viền mô tả tác động của
các biến độc lập đã được nghiên cứu đến sản lượng berberine từ C.
fenestratum, cũng như sự tương tác đồng thời giữa các yếu tố này (Hình
6). Rõ ràng là bề mặt phản ứng của các phần tử có độ nghiêng đáng kể.
Điều này xác nhận rằng các yếu tố độc lập đã gây ảnh hưởng đáng kể đến
quá trình chiết xuất, phù hợp với kết quả phân tích phương sai được
trình bày trong Bảng 4. Dựa trên dữ liệu quy trình tối ưu hóa thu được
từ mô hình bề mặt phản ứng, các thông số lý tưởng để chiết xuất berberine
đã được xác định như sau: nồng độ dung môi là 60 %, tỷ lệ lỏng-rắn là
17,25 mL/g và nhiệt độ chiết là 66 C. Đỉnh sản lượng berberine được
dự đoán là 38,15 mg/g trong những điều kiện tối ưu này. Thử nghiệm tiếp
theo mang lại hiệu suất berberine là 38,23 ± 0,69 mg/g trong điều kiện
tối ưu, phù hợp chặt chẽ với kết quả dự đoán theo mô hình.
Trong cùng điều kiện tối ưu, kết quả này tỏ ra có tính cạnh tranh cao
khi so sánh với kết quả thuận lợi nhất đạt được khi sử dụng dung môi hữu
cơ, cụ thể là 75 % ethanol (hiệu suất 27,59 mg/g), 75 % metanol (hiệu
suất 28,11 mg/g), và 50 % axeton (sản lượng 28,89 mg/g) và các dung dịch
axit-bazơ vô cơ, cụ thể là nước vôi (sản lượng 12,21 mg/g) và axit
sulfuric 0,4 % (sản lượng 29,00 mg/g) (Hình 7 và Bảng S8) . Việc xem xét
các tài liệu trước đây liên quan đến việc chiết xuất berberine từ C.
fenestratum cho thấy nhiều cách tiếp cận khác nhau. Rojsanga và cộng sự.
đã sử dụng phương pháp ngâm ethanol 80% để chiết xuất berberine,
Bảng 3

tan tuyệt vời của berberine trong axit lactic nên việc tăng lượng dung Kết quả thí nghiệm phương pháp bề mặt.

môi không làm thay đổi đáng kể hiệu suất chiết [15]. STT B C
MỘT
Hiệu suất chiết (mg/g)

1 60 5 60 33,97
2 35 5 40 30,87
3.2.5. Tối ưu hóa các điều kiện chiết xuất berberine bằng phương pháp bề mặt phản ứng Để 3 60 12,5 40 35,46
hiểu rõ 4 60 12,5 80 37,21
5 60 20 60 37,78
hơn về sự tương tác phức tạp giữa các yếu tố ảnh hưởng đến quá trình chiết xuất và
6 35 5 80 32,52
để tạo điều kiện tối ưu hóa toàn diện, nghiên cứu đã tiến hành sử dụng Phương pháp bề
7 35 12,5 60 35,58
mặt phản ứng (RSM). Cách tiếp cận tiên tiến này cho phép tinh chỉnh các điều kiện chiết số 8 10 12,5 80 31,29
quan trọng để đạt được năng suất tối ưu. Thiết kế của thử nghiệm tối ưu hóa được xác 9 35 12,5 60 35,55

định dựa trên mô hình Box-Behnken, bao gồm 17 đơn vị thử nghiệm đặc biệt bao gồm các biến 10 35 12,5 60 35,49
11 35 12,5 60 35,52
được chọn một cách có hệ thống. Các yếu tố trọng tâm được xem xét kỹ lưỡng bao gồm nồng
12 35 20 80 35,93
độ axit lactic (A), tỷ lệ lỏng-rắn (B) và nhiệt độ chiết (C). Mức độ cụ thể của các biến
13 35 12,5 60 35,73
độc lập được mã hóa được nêu trong Bảng 2, bảng này cũng mô tả trình tự của 14 10 20 60 31,89
15 10 12,5 40 29,17
16 35 20 40 34,69
17 10 5 60 27,83

7
Machine Translated by Google

N. Trong Le et al. Công nghệ tách và tinh chế 330 (2024) 125541

Bảng 4 [21]. Trong khi đó, việc sử dụng 80% dung môi etanol trong quá trình ngâm, thẩm thấu và

Kết quả phân tích phương sai ANOVA. chiết Soxhlet dẫn đến hiệu suất chiết berberine lần lượt là 33,7, 30,8 và 26,7 mg/g [22].

Nguồn Tổng của df Bình phương Giá trị F giá trị p

hình vuông trung bình Rút ra từ những so sánh này, rõ ràng là phương pháp được giới thiệu trong nghiên cứu

128,26 9 14h25 458,95 < này mang lại kết quả chiết xuất berberine đáng khen ngợi.
Người mẫu Có ý nghĩa
0,0001 Hơn nữa, kỹ thuật chiết xuất này tạo ra một sản phẩm giàu hàm lượng berberine. Hàm lượng
MỘT 73,5 1 73,5 2366,93 < berberine trong chất thu hồi được
0,0001
sản phẩm chứa berberine, sử dụng dung dịch axit lactic làm dung môi chiết, đạt 68,18 %.
B 28,47 1 28,47 917.03 <
Điều này vượt trội so với
0,0001
C 5,73 1 5,73 184,4 <
0,0001
AB 0,0171 1 0,0171 0,5493 0,4827 0,3284
AC 0,0343 1 0,0343 1.1
BC 0,0422 1 0,0422 1,36 0,2819
A2 9.02 1 9.02 290,65 <
0,0001
B2 6,53 1 6,53 210,32 <
0,0001

C2 2,89 1 2,89 93,09 <

0,0001
Dư 0,2174 7 0,0311
Thiếu 0,1764 3 0,0588 5,75 0,0621 không đáng kể

Phù hợp

Nguyên chất 0,0409 4 0,0102

Lỗi
Cor 128,48 16
Tổng cộng

R2 = 0,9983 R2 điều = 0,9961 R2 trước = 0,9775

chỉnh

dẫn đến hàm lượng berberine được báo cáo dao động từ 17,1 đến 28,9 mg/g [20]. Trong một

nghiên cứu riêng biệt, quá trình chiết có sự hỗ trợ của vi sóng được tiến hành dưới áp
Hình 7. So sánh hiệu suất chiết và độ tinh khiết của berberine bằng các dung môi chiết khác
suất khí quyển và trong một bình kín, sử dụng 60% etanol. Phương pháp này thu được lượng nhau, bao gồm 75 % etanol, 75 % metanol, 50 % axeton, nước vôi, 0,4 % axit sulfuric và 60 %

berberine lần lượt là 25,20 và 27,35 mg/g so với phương pháp chiết Soxhlet (hiệu suất axit lactic. Trong cùng một loại biểu đồ, các chữ cái khác nhau ở đầu mỗi cột biểu thị sự khác

24,37 mg/g) và chiết bằng axit sulfuric 0,2 % (hiệu suất 21,82 mg/g) biệt đáng kể (p < 0,05).

Hình 6. Đồ thị trên bề mặt (trên) và đường viền (dưới) mô tả mối quan hệ qua lại giữa các yếu tố khác nhau trong hiệu suất chiết xuất berberine.

số 8
Machine Translated by Google

N. Trong Le et al. Công nghệ tách và tinh chế 330 (2024) 125541

Hàm lượng berberine đạt được bằng cách sử dụng dung môi hữu cơ và dung dịch axit-bazơ

vô cơ để chiết (24,29 %, 26,81 %, 25,01 %, 34,14 % và 43,26 % đối với 75 % ethanol, 75 %

metanol, 50 % axeton, nước vôi và 0,4 % axit sulfuric , tương ứng) (Hình 7 và Bảng S8).

Những phát hiện này nhấn mạnh tiềm năng của dung dịch axit lactic dạng nước, khi kết hợp

với sự hỗ trợ của siêu âm, như một giải pháp thay thế đầy hứa hẹn và thân thiện với môi

trường để chiết xuất berberine từ cây thuốc. Phương pháp này cung cấp sự thay thế cho

các dung môi hữu cơ và dung dịch axit-bazơ vô cơ được sử dụng thông thường.

3.3. Thu hồi berberine, tái chế dung môi và nhựa

Sau quá trình chiết xuất berberine trong điều kiện tối ưu, phương pháp chiết chất

rắn-lỏng đã được sử dụng để thu hồi berberine và axit lactic từ dung dịch chiết, sử dụng

nhựa HP-20, D-101 và AB-8. Hiệu quả thu hồi berberine được sử dụng để đánh giá và so sánh

hiệu quả của các loại nhựa này. Đồng thời, độ che phủ lại berberine từ cả chiết xuất nước

vôi và axit sulfuric đã được kiểm tra bằng phương pháp kết tủa. Điều này cho phép so

sánh hiệu quả của phương pháp được sử dụng trong nghiên cứu này. Kết quả thu được từ

việc áp dụng nhựa HP-20, D-101 và AB-8 cho thấy hiệu suất thu hồi là 76,30 ± 1,07 %, 86,96

± 1,25 % và 99,52 ±
Hình 9. Hiệu suất chiết, độ thu hồi và độ tinh khiết của Berberine được đánh
giá qua ba chu kỳ chiết, sử dụng axit lactic tái chế và nhựa AB-8 tái chế, liên
quan đến quy trình tái chế dung môi và nhựa. Trong cùng một loại biểu đồ, các
tương ứng là 0,67%. Trong khi đó, kết tủa bằng cách sử dụng NaCl làm phương pháp xử lý
chữ cái khác nhau ở đầu mỗi cột biểu thị sự khác biệt đáng kể (p < 0,05).
mang lại hiệu suất thu hồi là 52,39% đối với chiết xuất nước vôi và 93,09% đối với chiết

xuất axit sulfuric (Hình 8 và Bảng S9). Do hiệu suất vượt trội đáng chú ý của nhựa AB-8,

các bước tiếp theo liên quan đến việc tái sử dụng dung môi và cột đã được tiến hành bằng
Berberine được thu hồi (Hình S2) gần giống với Berberine tiêu chuẩn (Hình S3), ngoại trừ
nhựa này.
các tín hiệu nhỏ trong phạm vi 1,0–1,5 ppm. Tín hiệu cộng hưởng của berberine trong dịch

chiết cuối cùng bao gồm sáu proton thơm [δH 9,88 (s, H-8), 8,93 (s, H-13), 8,20 (d, J =
Hiệu quả của quá trình khai thác bền vững về bản chất gắn liền với việc thu hồi và tái sử dụng các vật liệu được sử dụng ban
9,6 Hz, H-12), 8,01 ( d, J = 9,6 Hz, H-11), 7,79 (s, H-1), 7,09 (s, H-4)], một nhóm
đầu, tạo thành hai điều kiện tiên quyết không thể thiếu cho cả tính bền vững và tiến bộ lâu dài. Do đó, trong cuộc nghiên cứu đang
dioxymetylen [δH 6,17 (s, –OCH2O-)], hai nhóm methylene [ δH 4,94 (t, J = 6,6 Hz, H-6),
diễn ra này, chúng tôi đã hoàn thành việc thu hồi axit lactic từ dung dịch rửa giải và đánh giá một cách có hệ thống khả năng tái
3,20 (t, J = 6,6 Hz, H-5)] và hai nhóm methoxy [δH 4,10 (s, OCH3), 4,07 (s, OCH3)] [23].
sử dụng của cả axit lactic thu hồi và nhựa AB-8 thu hồi. Hình 9 và Bảng S10 minh họa hiệu suất chiết, hiệu suất thu hồi và độ tinh
Vì vậy, có thể kết luận rằng berberine là thành phần chính trong dịch chiết cuối cùng.
khiết berberine đạt được trong mỗi chu kỳ. Trong suốt ba quá trình chiết xuất và ba chu kỳ thu hồi, bao gồm tái chế dung môi và
Những phát hiện này nhấn mạnh tính ổn định của quy trình qua nhiều chu kỳ, khẳng định rằng
nhựa, người ta đã quan sát thấy một loạt các số liệu hiệu suất nhất quán. Hiệu suất chiết xuất dao động từ 38,31 đến 41,98 mg/g,
axit lactic tái chế và nhựa AB-8 duy trì hiệu quả chiết xuất và thu hồi berberine mà không
tỷ lệ thu hồi berberine dao động trong khoảng 95,57 đến 96,00% và độ tinh khiết của berberine dao động từ 64,53 đến 68,09%. Để
có sự thay đổi đáng kể.
chứng minh sự thuần khiết của 1 trận chung kết

Ngoài ra, để xác nhận việc bảo toàn tính toàn vẹn của dung môi trong suốt quá trình

chiết, việc nhận dạng axit lactic thu hồi đã được xác nhận thông qua quang phổ H NMR.
1
Cuộc điều tra cho thấy không có dấu hiệu suy thoái dung môi (Hình 10). Trong khi các dung

môi màu xanh lá cây, bao gồm chất lỏng ion và dung môi eutectic sâu, bị đóng băng bởi đặc
trích xuất, Phổ H NMR của berberine thu hồi và chuẩn berberine được phân tích và so sánh.
tính không bay hơi của chúng, thì việc thu hồi các hợp chất mục tiêu từ dịch chiết của
1
Nói chung, Phổ H NMR của
chúng là một thách thức đáng kể. Nhiều

Hình 8. Hiệu suất thu hồi berberine từ dung dịch axit lactic được đánh giá
bằng cột HP-20, D-101 và AB-8, so với phương pháp kết tủa sử dụng NaCl trên
dịch chiết nước vôi và axit sulfuric.
Các chữ cái khác nhau ở đầu mỗi cột biểu thị sự khác biệt đáng kể (p < 0,05).
1
Hình 10. Phổ H NMR của axit lactic thu hồi.

9
Machine Translated by Google

N. Trong Le et al. Công nghệ tách và tinh chế 330 (2024) 125541

nỗ lực nghiên cứu đã sử dụng dung dịch nước của chất lỏng ion và dung môi gợi ý rằng dung môi màu xanh lá cây được sử dụng để chiết xuất berberine không

eutectic sâu để chiết xuất berberine từ nhiều nguồn dược phẩm khác nhau như làm thay đổi hoạt tính của sản phẩm berberine thu được khi so sánh với berberine

Phellodendri amurensis và Coptis chinensis [7–10]. Tuy nhiên, những nghiên cứu tiêu chuẩn. Những phát hiện này hài hòa với dữ liệu được công bố trước đó.

này không bao gồm việc thu hồi berberine từ dịch chiết thu được. Do đó, cuộc Berberine thể hiện hoạt tính kháng khuẩn chống lại Escherichia coli ATCC 25922 và

điều tra của chúng tôi đóng góp những hiểu biết sâu sắc có giá trị về ứng dụng một chủng kháng thuốc, được đặc trưng bởi giá trị MIC lần lượt là 1280 và 2560

nhựa xốp lớn để thu hồi berberine từ chiết xuất, sử dụng một phương pháp vừa μg/mL [24]. Hơn nữa, Hyeon-Hee et al. đã chứng minh hoạt tính kháng khuẩn của

đơn giản vừa hiệu quả rõ rệt. Phương pháp này vượt ra ngoài việc thu hồi berberine chống lại các chủng Staphylococcus vàng kháng Methicillin , báo cáo

berberine và có thể áp dụng tương tự cho việc thu hồi các ancaloit và các axit giá trị MIC trải dài từ 32 đến 128 μg/mL [25]. Shuai và cộng sự. cũng làm sáng tỏ

amin khác [13]. cơ chế kháng khuẩn của berberine chống lại Staphylococcus vàng kháng Methicillin,

nhấn mạnh giá trị MIC dao động từ 64 đến 256 μg/mL [26]. Về bản chất, berberine

thể hiện tiềm năng đáng kể như một tác nhân kháng khuẩn. Do đó, việc sử dụng các

phương pháp chiết xuất berberine thân thiện với môi trường có ý nghĩa sâu sắc,
3.4. Hoạt tính kháng khuẩn phù hợp với mục tiêu phát triển các sản phẩm an toàn, có nguồn gốc từ thiên nhiên.

Sau khi thu hồi berberine từ dung dịch nước, đánh giá so sánh hoạt tính kháng

khuẩn được tiến hành giữa berberine thu hồi và chiết xuất thu được bằng cách sử

dụng ethanol, metanol và axeton cùng với berberine nguyên chất. Các chủng vi 3.5. Độc tính của dung dịch axit lactic và dịch chiết axit lactic
khuẩn thử nghiệm bao gồm Staphylococcus vàng ATCC 6538, Bacillus pumilus ATCC

14884 và Escherichia coli ATCC 8739. Kết quả được trình bày trong Bảng 5, cho
thấy rằng berberine thu hồi từ chiết xuất axit lactic thể hiện tác dụng kháng
khuẩn tăng cao khi so sánh với etanol, chiết xuất metanol và axeton, cũng như
berberine được thu hồi từ nước vôi và chiết xuất axit sulfuric, tuy nhiên nó vẫn
kém hiệu quả hơn berberine nguyên chất. Sự thay đổi trong hoạt tính kháng khuẩn
này có thể được giải thích bằng hàm lượng berberine trong sản phẩm, một thông số
ảnh hưởng rõ rệt đến tiềm năng kháng khuẩn của nó. Cụ thể, hàm lượng berberine
trong các sản phẩm cuối cùng có nguồn gốc từ axit lactic, ethanol, metanol,
axeton, nước vôi và axit sulfuric làm dung môi chiết được đo lần lượt là 68,18
%, 24,29 %, 26,81 %, 25,01 %, 34,14 % và 43,26 %. (Hình 7). Hơn nữa, để đánh giá
ảnh hưởng của quy trình đề xuất trong nghiên cứu này đến hoạt tính kháng khuẩn
Dung môi hữu cơ dễ bay hơi thường gây nguy hiểm cho sức khỏe con người do
độc tính của chúng. Vì vậy, xu hướng sử dụng dung môi thân thiện với môi trường
để thay thế dung môi hữu cơ là một hướng đi tất yếu cho sự phát triển trong
tương lai. Để nhấn mạnh hơn nữa tính an toàn của phương pháp hiện tại, việc
đánh giá độc tính tế bào đã được tiến hành trên tế bào thận phôi người
(HEK-293A). Cả dung môi axit lactic và dịch chiết thu được, thu được bằng cách
sử dụng dung dịch axit lactic 60 % làm môi trường chiết, đều được đánh giá. Giá
trị IC50 thu được vượt quá 100 µg/mL trong tất cả các trường hợp, cho thấy không
có tác dụng gây độc tế bào trên tế bào HEK-293A. Kết quả này hỗ trợ mạnh mẽ cho
hồ sơ an toàn của phương pháp đã phát triển.

của berberine thu được, berberine thu hồi và chiết xuất được điều chỉnh để phù

hợp với nồng độ berberine. Kết quả cho thấy giá trị IC50 (tính theo nồng độ 4. Kết luận

berberine) của các mẫu nghiên cứu và berberine nguyên chất đối với tất cả các

chủng vi khuẩn đều nằm trong khoảng 150 – 300 µg/mL. Những phát hiện Trong nghiên cứu đột phá này, chúng tôi đã giới thiệu những hiểu biết mới về

lĩnh vực dung môi xanh bằng cách chứng minh tiềm năng của axit lactic như một

phương tiện thay thế để chiết xuất berberine từ sinh khối. Ngoài ra, chúng tôi

đã công bố một phương pháp tiên phong liên quan đến việc sử dụng nhựa xốp để

thu hồi berberine từ chiết xuất axit.

Bảng 5
Hoạt tính kháng khuẩn (giá trị MIC) của berberine thu hồi từ chiết xuất axit lactic, nước vôi và
axit sulfuric, cũng như chiết xuất ethanol, metanol và axeton và berberine nguyên chất.
Thông qua thử nghiệm có hệ thống, chúng tôi đã xác định được các điều kiện chiết
xuất tối ưu cho berberine từ C. fenestratum thông qua phương pháp bề mặt phản
ứng. Những điều kiện này đòi hỏi nồng độ axit lactic là 60 % (w/w), tỷ lệ chất
lỏng-rắn là 17,25 mL/g, thời gian chiết là 20 phút và nhiệt độ chiết là 66 C.

Kết quả của việc tối ưu hóa này mang lại hiệu suất chiết xuất berberine là 38,23
Vi sinh vật Giá trị MIC (μg/mL) ± 0,69 mg/g, kèm theo độ tinh khiết berberine vượt trội là 68,18%.

tụ cầu khuẩn trực Escherichia

vàng da khuẩn pumilus coli Đáng chú ý, cả hiệu suất chiết và độ tinh khiết của berberine đạt được khi sử

Ethanol Trích xuất

Tôi

300 – 600 300 – 600 >600 dụng axit lactic làm dung môi chiết đều vượt trội so với dung môi hữu cơ dễ bay
Berberin 150 – 300 150 – 300 150 – 300 hơi truyền thống và axit, bazơ vô cơ. Cuộc điều tra của chúng tôi cũng tiết lộ
ii

tiềm năng thu hồi berberine đáng chú ý của nhựa AB-8, cho phép thu hồi gần như
Metanol >600 >600 >600
Tôi

Trích xuất
hoàn toàn từ dịch chiết. Quá trình này cho thấy khả năng phục hồi ấn tượng qua
Berberin ii 150 – 300 150 – 300 150 – 300
ba chu kỳ chiết liên tiếp, tái khẳng định khả năng tái chế dung môi và nhựa mà

Aceton >600 >600 >600 không ảnh hưởng đến hiệu quả chiết. Độ ổn định của axit lactic trong quá trình
Tôi

Trích xuất

Berberin 150 – 300 150 – 300 150 – 300 chiết xuất được chứng minh thông qua phân tích. Hơn nữa, hoạt tính kháng khuẩn
ii
1
của berberine thu hồi từ chiết xuất axit lactic vượt trội hơn các H NMR
Lim- 300–––600 > 600 > 600
Tôi

Trích xuất
chiết xuất có nguồn gốc từ ethanol, metanol và axeton, cũng như berberine thu
berberin Berberin 150 – 300 150 – 300 150 – 300
Một ii
hồi từ chiết xuất nước vôi và axit sulfuric. Điều quan trọng là dung môi axit

> 600 300–––600 > 600 lactic và chiết xuất của nó không gây độc tế bào đối với tế bào HEK-293A. Nói
Tôi

Trên- Trích xuất

b
berberin Berberin ii 150 – 300 150 – 300 150 – 300
chung, các dung môi và phương pháp được đề xuất của chúng tôi là giải pháp thay

thế bền vững hơn cho các phương pháp trước đây. Với quy trình hợp lý, khả năng
Lạc- 300 – 600 300 – 600 300 – 600
Tôi

Trích xuất
c kinh tế, dung môi lành tính và có thể phân hủy sinh học, khả năng tương thích
berberin Berberin 150 – 300 150 – 300 150 – 300
với môi trường, hiệu quả nâng cao và các đặc tính không gây độc tế bào, việc sử
ii

Berberin nguyên chất 150 – 300 150 – 300 150 – 300 dụng dung dịch axit cacboxylic trong nước để chiết xuất berberine từ biểu đồ
Doxycycline 19,5 – 39 9,75 – 19,5 19,5 – 39
sinh khối là một khóa học tiên phong. Sự đổi mới này không chỉ mở đường cho một
b
Một

Thu hồi Berberine từ chiết xuất nước vôi; thu hồi berberine từ lưu huỳnh hướng đi mới đầy hứa hẹn mà còn góp phần đáng kể vào việc khai thác có thể mở
c
chiết xuất axit furic; thu hồi berberine từ chiết xuất axit lactic; được i các giá trị MIC rộng và bền vững.
ii
tính theo nồng độ của dịch chiết; được tính theo nồng độ của berberine. các giá trị MIC

10
Machine Translated by Google

N. Trong Le et al. Công nghệ tách và tinh chế 330 (2024) 125541

berberine và các hợp chất alkaloid khác. tối ưu hóa điều kiện sử dụng bề mặt đáp ứng, siêu âm. Sonochem. 24 (2015) 13–18, https://
doi.org/10.1016/j.ultsonch.2014.10.009.
[9] Y. Li, Z. Pan, B. Wang, W. Yu, S. Song, H. Feng, W. Zhao, J. Zhang, Siêu âm-
Tuyên bố đóng góp quyền tác giả CRediT hỗ trợ chiết xuất các ancaloit có hoạt tính sinh học từ vỏ Phellodendri amurensis bằng cách
sử dụng dung dịch nước dung môi eutectic sâu, New J. Chem. 44 (2020) 9172–9178, https://
doi.org/10.1039/d0nj00877j.
Nhân Trọng Lê: Điều tra, Phương pháp luận, Viết – bản thảo gốc.
[10] Y. Li, YH Hsieh, Z. Pan, L. Zhang, W. Yu, B. Wang, J. Zhang, Chiết xuất Alkaloid từ
Ngọc Huyền Thị Châu: Điều tra, Trực quan hóa. Phú Quỳnh Đình Nguyên: Coptidis Rhizoma thông qua dung môi Eutectic sâu dựa trên Betaine, ChemistrySelect. 5
Điều tra, Viết – bình luận & biên tập. Linh Thùy Thị Trần: Điều tra, (2020) 4973–4978, https://doi.org/10.1002/slct.202000865.
[11] L. Li, D. Zhang, Y. Wang, F. Liu, Y. Xu, H. Bao, Chiết xuất hiệu quả Palmatine và Berberine
Viết – review & biên tập. Hương Thanh Phụng: Điều tra, Viết – review
từ Coptis chinensis bằng phương pháp chiết xuất có hỗ trợ siêu âm dựa trên dung môi
& biên tập. Hoài Thị Nguyên: Lên ý tưởng, Viết – review & biên tập, Eutectic sâu, J. Anal . Phương pháp hóa học. 2021 (2021) 9970338, https://doi. org/
Giám sát. 10.1155/2021/9970338.
[12] NT Lê, DV Hồ, TQ Đoàn, AT Lê, A. Raal, D. Usai, S. Madeddu, M. Marchetti, M. Usai, P. Rapelli,
N. Diaz, S. Zanetti, HT Nguyễn, P. Cappuccinelli, M.
Tuyên bố về lợi ích cạnh tranh
G. Donadu, Hoạt động sinh học của tinh dầu từ lá Paramignya Trimera (Oliv.) Guillaum
và Limnocitrus littoralis (Miq.) Swingle, Thuốc kháng sinh. 9 (2020) 1–12.

Các tác giả tuyên bố rằng họ không có lợi ích tài chính hoặc mối
[13] .P. Trung sĩ, B. Dempsey, IU của P. và A. Chemistry., C. on E. Data., Ionization
quan hệ cá nhân cạnh tranh nào có thể ảnh hưởng đến công việc được
hằng số axit hữu cơ trong dung dịch nước, Pergamon Press, Oxford; New York, 1979.
báo cáo trong bài viết này.
[14] J. Benfica, ES Morais, JS Miranda, MG Freire, R. de C' assia Superbi, JAP de Sousa, Coutinho,
Dung dịch nước của axit hữu cơ làm dung môi hiệu quả để chiết xuất levodopa từ hạt
Tính khả dụng của dữ liệu
Mucuna pruriens , Tháng 9. Purif. Technol. 274 (2021), https://doi.org/10.1016/
j.seppur.2021.119084.

Dữ liệu sẽ được cung cấp theo yêu cầu. [15] JB Harborne, Phương pháp phân tích thực vật, Tái bản lần thứ ba, Thomson Science, London,
UK, 1998. https://doi.org/10.1007/978-94-009-5921-7_1.
[16] Leksina UM, Shishov AY, Mulloyarova VV, Puzyk AM, Tolstoy PM, M.S.
Nhìn nhận F. Vokuev, ED Glushkov, VG Petrov, PI Matveev, Một dung môi eutectic sâu mới dựa trên diphenylguanidine để chiết

xuất anion pertechnetate hiệu quả, Tháng 9. Purif. Technol. 316 (2023), 123824. https://doi.org/10.1016/

j.seppur.20 23.123824.
Công trình này được hỗ trợ bởi Đại học Huế thuộc Chương trình
nghiên cứu cốt lõi, số tài trợ NCM.DHH.2023.01, và dự án số 1. [17] A. Ali Redha, Đánh giá về việc chiết xuất các hợp chất phenolic từ các nguồn tự nhiên bằng
DHH2022-04-169. dung môi Eutectic sâu màu xanh lá cây, J. Agric. Hóa chất thực phẩm. 69 (2021) 878–912,
https://doi.org/10.1021/acs.jafc.0c06641.
[18] J. Lei, Y. Wang, W. Li, S. Fu, J. Chu, D. Lu, C. Wang, X. Sheng, M. Zhang, S. Xiao, C. Sun,
Phụ lục A. Dữ liệu bổ sung
G. Wang , Chiết xuất flavonoid hiệu quả và thân thiện với môi trường dựa trên dung môi
eutectic sâu màu xanh tự nhiên từ Selaginella moellendorffii: Tối ưu hóa quy

Dữ liệu bổ sung cho bài viết này có thể được tìm thấy trực tuyến tại trình, nhận dạng thành phần và hoạt động sinh học, Tháng 9. Purif.
Technol. 283 (2022), 120203. https://doi.org/10.1016/j.seppur.2021.120203.
https://doi. org/10.1016/j.seppur.2023.125541.
[19] NT Lê, NT Hoàng, VTT Văn, TPD Nguyễn, NHT Châu, NTN Lê, HBT Lê, HT Phụng, HT Nguyễn, HM
Nguyễn, Chiết xuất curcumin từ bã nghệ (Curcuma longa L.) bằng dung môi eutectic sâu và
Người giới thiệu dung môi chất hoạt động bề mặt, Hậu môn. Phương pháp. 14 (2022) 850–858, https://doi.org/
10.1039/d1ay02152d.
[20] P. Rojsanga, W. Gritsanapan, Sự biến đổi của hàm lượng Berberine trong Coscinium
[1] X. Ai, P. Yu, L. Peng, L. Luo, J. Liu, S. Li, X. Lai, F. Luan, X. Meng, Berberine: Đánh giá
fenestratum Thân cây ở thị trường Thái Lan, Mahidol Univ, J. Pharm. Khoa học. 32 (2005)
về đặc tính dược động học và tiềm năng điều trị của nó trong các bệnh mạch máu đa dạng,
66–70.
Mặt trận. Dược phẩm. 12 (2021), 762654. https://www.frontiersin. org/articles/10.3389/
[21] P. Deevanhxay, M. Suzuki, N. Maeshibu, S. Hirose, Chiết xuất các alcaloid protoberberine từ
fphar.2021.762654.
Coscinium fenestratum bằng lò vi sóng , J. Chem. Anh. Nhật Bản. 42 (2009) 752–759, https://
[2] MA Neag, A. Mocan, J. Echeverría, RM Pop, CI Bocsan, G. Crisan, A.
doi.org/10.1252/jcej.09we133.
D. Buzoianu, Berberine: Sự xuất hiện của thực vật, cách sử dụng truyền thống,
[22] P. Rojsanga, W. Gritsanapan, L. Suntornsuk, Xác định hàm lượng berberine trong chiết xuất
phương pháp chiết xuất và sự liên quan trong các rối loạn tim mạch, chuyển hóa, gan và
thân cây Coscinium fenestratum bằng phép đo mật độ TLC, Med. Hoàng tử. Thực hành. 15 (2006)
thận, Front. Dược phẩm. 9 (2018) 557, https://doi.org/10.3389/fphar.2018.00557.
373–378, https://doi.org/10.1159/000094272.
[3] A Rauf, T Abu-Izneid, AA Khalil, M Imran, ZA Shah, TB Emran, S Mitra,
[23] H. Lin, J. Ho, L. Tsai, F. Yang, L. Yang, Tổng hợp và độc tính quang tế bào trong ống nghiệm
Z. Khan, F. A. Alhumaydhi, A. S. M. Aljohani, I. Khan, M. M. Rahman, P. Jeandet, T.
của các dẫn xuất Berberine thay thế 9-/13-Lipophilic làm chất chống ung thư tiềm năng, các
A. Gondal, Berberine như một tác nhân chống ung thư tiềm năng: Đánh giá toàn diện, Phân
phân tử. 25 (2020) 677, https://doi.org/10.3390/molecules25030677.
tử. 26 (2021) 7368, https://doi.org/10.3390/molecules26237368.
[24] T. Sun, XD Li, J. Hong, C. Liu, XL Zhang, JP Zheng, YJ Xu, ZY Ou, JL Zheng, DJ Yu, Tác dụng ức chế của hai
[4] Y. Wang, JA Zidichouski, Cập nhật về lợi ích và cơ chế hoạt động của Berberine thực vật có
đơn phân y học cổ truyền Trung Quốc, Berberine và Matrine, trên Hệ thống cảm biến đại biểu của
hoạt tính sinh học đối với chuyển hóa lipid và cân bằng nội môi, Cholesterol. 2018
Escherichia coli kháng kháng sinh, Front. Vi sinh vật. 10 (2019) 1–11, https://doi.org/10.3389/
(2018) 7173920, https://doi.org/10.1155/2018/7173920.
fmicb.2019.02584 .
[5] F. Chemat, MA Vian, G. Cravotto, Khai thác xanh các sản phẩm tự nhiên: Khái niệm và nguyên tắc, Int. J. Mol. Khoa

học. 13 (2012) 8615, https://doi.org/10.3390/ IJMS13078615.

[25] H. Yu, K. Kim, J. Cha, H. Kim, Y. Lee, N. Choi, Y. You, Hoạt tính kháng khuẩn của Berberine
đơn thuần và kết hợp với Ampicillin hoặc Oxacillin chống lại Staphylococcus vàng
[6] N. Winterton, Dung môi xanh: một góc nhìn phê phán, Clean Technol. Môi trường, Chính sách.
kháng Methicillin, J. Med. Đồ ăn. 8 (2005) 454–461, https://doi.org/10.1089/jmf.2005.8.454.
23 (2021) 2499–2522, https://doi.org/10.1007/s10098-021-02188-8.
[7] P. Demmelmayer, L. Steiner, H. Weber, M. Kienberger, dựa trên Thymol-menthol
[26] S. Xia, L. Ma, G. Wang, J. Yang, M. Zhang, X. Wang, J. Su, M. Xie, Hoạt động kháng
dung môi eutectic sâu làm chất biến tính trong quá trình chiết chất lỏng-lỏng phản ứng của
khuẩn trong ống nghiệm và cơ chế của Berberine chống lại Staphylococcus vàng kháng
axit cacboxylic từ nước ép lúa miến ngọt đã qua xử lý trước, Sep. Purif. Technol. 310
Methicillin Bị cô lập từ bệnh nhân nhiễm trùng máu, lây nhiễm. Kháng thuốc. 15 (2022)
(2023), 123060. https://doi.org/10.1016/j.seppur.2022.123060.
1933–1944, https://doi.org/10.2147/IDR.S357077.
[8] W. Wang, Q. Li, Y. Liu, B. Chen, Dung dịch nước-lỏng ion chiết xuất có hỗ trợ siêu âm của ba
loại alkaloid từ Phellodendron amurense Rupr và

11