연구실 탐방 III 특 집
고아 핵 수용체 연구실
Orphan Nuclear Receptor Laboratory
연구실 개요
동물의 성장, 발생, 분화 및 항상
성 유지의 많은 부분은 세포 핵 내
의 유전자 발현 (gene expression)
이 필수적이며 핵 수용체 (nuclear
최흥식 receptor) 에 의한 유전자 발현 조
절은 인체 호르몬 작용의 핵심 기
전이다.
핵 수용체는 전사조절인자 (transcription factor) 로써 호
르몬 또는 리간드 (ligand)에 의해 조절되는 전사 조절 인자
이며, 세포 내의 표적 유전자의 발현을 전사 과정에서 조절
하며 당뇨, 비만, 고혈압, 동맥경화와 같은 대사 질환에 관련
된 신약 개발에 중요한 후보 단백질로 대두되고 있다. 인간
의 핵 수용체는 49 개가 존재하며, 스테로이드 수용체, 갑상
선수용체, 레티노이드 수용체와 같이, 결합하는 리간드가 밝
혀져 있는 핵 수용체 그룹과, 아직 그 리간드가 밝혀져 있지
않은 핵 수용체, 즉 고아 핵 수용체 (orphan nuclear recep-
tor) 그룹이 있다. 현재, 고아 핵 수용체는 인간의 신경계, 내
분비계, 생식계, 면역계 질환과 관련된 신약 표적단백질로 연
구 되고 있으며 생체내의 유전자 발현 조절기전 이해에 중요
한 정보를 제공하고 있다.
고아 핵 수용체 중 SHP (small heterodimer partner:
NR0B2)는 모든 핵 수용체에 존재하는 DNA binding domain
이 없고, 리간드 결합부위만 가진 특이 구조의 전사보조 조
절자 (transcriptional co-regulator)로서, RAR, TR, ER,
AR, GR, PPAR, LXR, CAR 등과 같은 다양한 핵 수용체
를 비롯, LRH-1, Nur77, HNF4와 같은 또 다른 고아 핵
수용체와 직접 결합하여 표적유전자의 전사 활성도를 조절하
는 기능이 있다. 이들 핵 수용체 그룹이 조절하는 표적 유전
자들로는 약물대사 (cyp2A, 2B), 콜레스테롤 대사 (cyp7A1,
cyp8B1), 지질 대사 (FAS, apolipo- protein), 당 대사
(PEPCK, G-6Pase) 관련 유전자 등이 있다. 현재, SHP 유
전자의 전사 조절 부위에 FXR, LXR, ER, ERR, HNF4,
SF-1, LRH-1와 같은 핵 수용체와, E47이나 SREBP-1c와
같은 조절자들이 결합하여 SHP의 전사 조절에 관여하는 것
으로 알려져 있으며 핵수용체의 작용기전에 SHP의 유전자
발현 조절의 중요성을 인식할 수 있다. 또한 본 연구팀이 일
본과 공동연구를 통하여 일본인 비만, 당뇨 환자에서 SHP 게
놈 유전자에 다양한 돌연변이 (R34X, H53fsdel10, L98fsde-
l9insAC, R213C등) 가 있음을 발견하였으며, 영국과 덴마
크의 당뇨 환자에서도 SHP의 유전자이상이 발견되어, 이러
한 돌연 변이 현상이 대사 질환과 많은 관련이 있는 것으로
밝혀졌다. 따라서 SHP유전자 발현 조절 기전과 전사 보조 조
절자의 기능 기전을 이해하면 SHP에 의해 조절되는 다양한
전사 조절 인자를 제어, 인체 대사 질환 관련 표적유전자를
통제할 수 있는 기술로 활용할 수 있을 것으로 예상된다.
본 연구실에서 수행중인 대표적인 고아 핵 수용체는 SHP
이며, SHP 유전자 발현 조절에 관여하는 전사 인자 특성 분
석과 이를 통한 신규 조절 기작의 탐색, SHP와 상호 작용하
는 전사 인자 또는 핵 수용체의 동정 및 기능 분석, 그리고
SHP에 의해 전사과정에서 유전자 발현이 조절 되는 대사 관
련 표적 호르몬의 탐색, 특성 분석, 및 기작 규명을 연구하
고 있다.
연구배경
핵 수용체는 인체의 생리활성 조절 물질인 호르몬에 의해
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 특 집
그림 1. 호르몬 핵 수용체의 구조 및 기능
그 기능이 조절되며 세포막호르몬 수용체와 달리 핵 내에서
표적 유전자의 전사과정을 조절하는 리간드 의존성 전사조절
인자 (ligand dependent transcription factor)이며 그 구조
와 기능은 그림 1과 같다. 고아 핵 수용체에 결합하는 리간
드를 찾으면 대사질환과 관련된 인체질병을 치료하는 주요 신
약으로 개발될 가능성이 매우 커 다국적 제약회사에서 많은
연구비를 투자하여 연구하고 있는 중요 연구 분야이며, 현재
고아 핵 수용체에 작용하는 리간드 연구결과 당뇨병 치료제
인 TZD계 치료제가 개발되어 현재 임상에서 쓰이고 있으며,
비만이나 암과 같은 인체질환과 관련된 신약개발에 SmithK-
line 등 다국적 기업들이 많은 투자로 참여 하고 있다.
고아 핵 수용체 중 본 연구실에서 대표적으로 수행하고 있
는 고아 핵 수용체인 SHP (Small Heterodimer Partner:
NR0B2)의 게놈 유전자는 2개의 Exon과 1개의 Intron으로
구성되어 있으며 간, 췌장, 심장, 정소 난소 부신선에서 발현
된다. SHP는 모든 핵 수용체에 존재하는 DNA binding
domain이 없고, 리간드 결합부위만 가진 특이한 전사보조 조
절자 (transcriptional co-regulator)로서, 지질대사 (FAS, apolipopro-
tein), 당대사 (G6Pase, PEPCK) 관련 유전자들을 표적으로
하는 핵 수용체와 상호 작용하는 전사조절기능을 가진 고아
핵 수용체로서, 주요 기능은 핵 수용체의 전사조절인자의 기
능을 억제하는 repressor로 작용한다.
앞서 밝힌 바와 같이, 일본, 영국, 덴마크의 비만, 당뇨 환
자에서 SHP 게놈 유전자에 다양한 돌연변이가 있음을 발견
하였으며 이러한 돌연변이현상이 대사질환과 많은 관련이 있
는 것으로 밝혀졌고. 최근에는 한국에서도 당뇨 환자로부터
60 … 분자세포생물학뉴스
그림 2. SHP의 유전자 발현과 SHP의 기능
SHP의 유전자 이상이 발견되었다. 따라서, SHP 유전자 발
현 조절 및 SHP의 기능 이상은 대사 질환과 밀접한 연관이
있음을 알 수 있으며, SHP 유전자 발현 조절 기전과 전사
보조 조절자의 기능 기전을 이해하면 SHP에 의해 조절되는
다양한 전사 조절 인자를 제어, 인체 대사 질환 관련 표적 유
전자를 통제할 수 있는 기술의 개발과 분자 생물학적인 기작
을 규명할 수 있을 것이다. 그림 2는 현재 보고된 SHP 유
전자 발현조절에 관련된 전사조절인자와 SHP에 의해 전사조
절이 되는 표적 유전자들의 사례를 도식으로 보여주고 있다.
연구진행사항 및 향후 연구방향
본 연구실에서는 고아 핵 수용체 ERR gamma가 SHP pro-
moter에 작용하여 SHP 유전자 발현을 증가시키고 SHP가
ERR gamma에 직접 결합하여 ERR gamma의 활성도를 억
제함을 규명하였다. ERR gamma에 의한 SHP 유전자 발현
과 SHP에 의한 ERR gamma작용억제기전은 SHP유전자 발
현이 auto-feed back inhibition system이 존재함을 보여주
며, ERR gamma에 작용하는 co-activator, co-repressor의
새로운 작용기전을 규명하였다.
또한, 지질대사에 관여하는 bHLH전사조절인자 SREBP-1c
가 인간의 SHP유전자 발현에 특이적으로 작용함을 규명하였
으며 SREBP-1에 의한 SHP 유전자 발현은 인간과 생쥐에
서 서로 다르며 SHP를 통한 인체대사조절에 새로운 기전을
제시하였으며 SREBP-1 binding site에 돌연변이가 생긴 영
국 당뇨환자의 SHP promoter에서는 SREBP-1이 작용하지

않음을 밝혔다. 또 다른 bHLH 전사 조절 인자인 E47이 고
아 핵 수용체 SF-1과 함께 SHP promoter 작용함을 밝혀
SHP 유전자 전사 조절 과정에 다양한 전사 조절 인자가 작
용함을 규명하였다.
고아 핵 수용체 SHP가 다양한 핵 수용체 조절 외에 다른
전사 조절 인자의 활성도를 조절함도 규명하였다. SHP는 췌
장의 beta cell에서 인슐린 유전자 발현을 조절하는 bHLH
전사 조절 인자 BETA2에 직접 결합하여 활성도를 억제하고
co-activator작용을 경쟁적으로 방해함을 규명하였다. 또한
SHP가 forkhead transcription factor family인 HNF3에 직
접결합하고 HNF3의 DNA binding을 방해하여 HNF3의 활
성도를 억제하는 SHP작용의 새로운 기전을 제시함으로써,
SHP가 당 대사 조절에서도 중요한 인자임을 밝혔다.
1. SHP promoter 조절 신규 전사 인자 동정
본 연구실에서는 고아 핵 수용체 SHP promoter에 작용하
는 밝혀진 전사 조절 인자들 이외에 SHP 유전자 발현을 조
절하는 전사 조절 인자 또는 SHP 유전자 발현을 유도하는
생리활성 물질이 더 존재할 것으로 추측하고 있으며, 이들 새
로운 전사 조절 인자 및 생리활성 물질을 탐색 동정하여 SHP
를 통한 대사 조절의 새로운 경로 및 세포 내 여러 생리학
적 기전을 제시할 수 있을 것으로 예상하고 있다. 현재 SHP
promoter에 작용하는 신규 전사 조절 인자로써 bHLH tran-
scription factor의 SHP promoter 작용 부위 규명과, SHP
유전자 발현을 활성화하는 것으로 확인된 생리 활성 물질 의
SHP promoter 활성도 조절 부위 결정 및 발현된 SHP의 표
적 유전자 동정과 기능 규명을 위한 연구를 수행 중에 있다.
2. SHP의 전사 인자 작용 조절
지질, 콜레스테롤, 당, 약물대사관련 효소 유전자 발현에 관
여하는 전사조절인자f로써 SHP에 직접 결합하여 활성도가 억
제되는 전사 조절 인자들로 LXR, CAR, LRH-1, HNF4,
PPAR gamma, FKHR, HNF3등이 보고되어 있다. 이 같이
고아 핵 수용체 SHP는 다양한 핵 수용체 및 고아 핵 수용
체 그리고 전사조절인자에 직접 결합하여 활성도를 조절하는
것으로 알려져 있다.
본 연구실에서는, SHP가 조절하는 대사질환관련 전사조절
인자가 더 존재할 것으로 추측하고 SHP에 의해 조절 되는
고아 핵 수용체 연구실
Spe cial
신규전사조절인자의 특성을 규명하여 SHP에 의한 대사조절
에 새로운 기전을 제시하고자 한다. 이 같은 가설검증을 위
하여 위의 보고된 전사조절인자 이외에 대사관련 전사조절인
자의 cDNA를 확보하고 mammalian expression vector에
cloning하여 binding reporter-luciferase와 SHP를 co-trans-
fection하여 SHP에 의한 전사조절인자의 활성도를 검색하고,
SHP와 신규전사조절인자의 직접결합을 GST-pull down assay,
in vivo IP assay로 확인하여 deletion construct를 제조하
여 상호 결합부위를 결정하고, SHP의 co-repressor 작용 또
는 co-activatior 인지를 규명함으로써 SHP에 의한 새로운
작용기전을 분석하고자 한다.
현재, SHP 가 상호 작용하는 전사 인자로 동정 된 Smad
및 HNF6와 SHP의 작용 부위의 결정 및 상호 작용에 의
한 대사 조절 신규 기능의 규명을 위한 연구의 진행을 하고
있다.
3. SHP의 표적 유전자 동정 및 조절 기작 규명
SHP에 의해 조절되는 대사질환관련 유전자로 FAS, PEPCK,
G-6-Pase, CYP7A1, CYP2A, CYP2B등이 보고 되었으며,
이들 유전자들의 유전자 발현을 조절하는 전사인자들이 SHP
와의 상호 결합에 의해 대사 관련 효소유전자 발현을 억제하
는 것으로 알려졌다. 이로써, SHP가 다른 대사질환 관련 효
소유전자발현을 조절할 가능성이 높으므로 이들 신규 SHP 조
절 표적유전자를 발굴하면 SHP에 의한 대사조절의 새로운
기전을 제시할 수 있다.
본 연구실에서는 SHP의 대사 질환관련 신규 표적 유전자
의 동정 및 조절 기작 규명의 연구 수행을 위하여, primary
hepatocyte culture system을 확립하고 SHP adenovirus의
infection후 mRNA를 추출하여 DNA microarray를 시행하
고자 한다. DNA miroarray에서 얻은 결과 중 대사관련 유
전자를 선별하여 유전자 promoter-luc를 제작하여 SHP에 의
한 활성도를 조사하고, SHP에 의해 활성도가 조절되는 pro-
moter부위를 결정하고 결합하는 전사조절인자를 탐색, 동정
분석한 후 SHP가 조절하는 전사인자의 활성도를 확인함으로
써, SHP에 의해 조절되는 신규 대사관련 효소의 동정으로
SHP의 조절 기작을 규명하고자 한다.
최근, 서구화와 산업화된 사회구조는 영양과잉 상태의 식
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생활 문화를 불러오게 되었고 이로 인해 대사질환에 의한 성
인병 (비만, 고지혈증, 동맥경화, 당뇨, 고혈압 등)의 증가추
세로 이어졌다. 후천적 요인에 의한 대사질환의 치료제 개발
이 활발해지고 기존약물의 부작용을 극복하기위한 신약개발
의 필요성이 대두되고 있으며, 고아 핵 수용체 SHP 게놈 유
전자의 돌연변이가 당뇨,비만 환자에서 발견되어 SHP에 작
용이 대사질환과 밀접한 관계가 있음이 보고되었으며, 지난 5
년간의 많은 연구결과로 SHP발현과 기능조절을 통한 대사조
절의 신개념이 도입되기 시작했다.
본 연구실은 SHP의 유전자 발현을 조절하는 신규 전사 인
자들의 동정과 전사인자의 기능분석, SHP가 조절하는 신규
전사인자 및 표적 유전자의 기능 분석 등을 통하여 SHP의
대사 조절 기능을 규명해나감으로써, SHP에 의한 대사 질환
치료를 위한 신규작용기전 규명 및 원천기술을 개발 하는데
기여 하고자 한다.
연구진 구성
교 수 : 최흥식
연구교수 : 심정규
박사과정 : 이용수, 박윤용, 김돈규, 안승원, Xie Yuanbin,
Nedumaran Balachandar, Chanda Dipanjan
석사과정 : 이지민
행 정 : 박현옥
연구책임자 소개 (최흥식)
연락처
주 소 : 광주 광역시 북구 용봉동 300번지 전남대학교 호
르몬 연구센터 500-757
전 화 : 062-530-0503 (연구실), 062-530-0501 (실험실)
팩 스 : 062-530-0506
이메일 : hsc@chonnam.chonnam.ac.kr
약력
1985 경희 대학교 (이학사)
1990 Rutgers University (이학 박사)
1994 Harvard Medical School (Post-Doc)
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1995 생명과학 연구소 (해외 초빙 과학자)
현재 전남대학교 호르몬 연구센터 부교수
대표 논문
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고아 핵 수용체 연구실

Spe cial

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