具明胶交联现象的氟伐他汀钠胶囊溶出度方法研究 

李煜 1，邱晓霞 2，张淼 3，梅梅 3，洪利娅 1*(1.浙江省食品药品检验研究院，杭州 310052；2.浙江省医学科技教育发展中心，

杭州 310006；3.浙江工业大学化学工程学院，杭州 310014)

摘要：目的 针对氟伐他汀钠胶囊交联现象建立溶出度试验方法，为修订现行氟伐他汀钠胶囊溶出度标准提供依据。方
法 通过比较氟伐他汀钠胶囊国内外现行标准中溶出度方法，比对国内 2 家公司样品在 4 种 pH 条件下的溶出曲线相似
度，考察样品在水和木瓜蛋白酶溶液(酶活力≥550 U·mL1)这 2 种溶出介质中的平均溶出度，确定溶出度检查方法：桨法，
50 r·min1，溶出介质为 500 mL 水，30 min 取样，HPLC 测定，限度为标示量的 80%；若出现不符合规定情况，以含木
瓜蛋白酶溶液(酶活力≥550 U·mL1)为溶出介质，照上述方法重新试验，应符合规定。结果 本品未发生交联样品批次在
水和木瓜蛋白酶溶液中的溶出结果一致，发生交联样品批次在加酶溶出介质中平均溶出量提高 5%~7%。结论 该方法重
现性好、准确、可靠，能客观反映本品的溶出情况，为统一和修订本品现行标准中溶出度项目提供了依据。
关键词：氟伐他汀钠胶囊；溶出度；明胶胶囊；交联；木瓜蛋白酶
中图分类号：R917.101 文献标志码：B 文章编号：1007-7693(2019)18-2275-05
DOI: 10.13748/j.cnki.issn1007-7693.2019.18.008
引用本文：李煜, 邱晓霞, 张淼, 等. 具明胶交联现象的氟伐他汀钠胶囊溶出度方法研究[J]. 中国现代应用药学, 2019,
36(18): 2275-2279.

Dissolution Method Study of Cross-linked Fluvastatin Sodium Capsules

LI Yu1, QIU Xiaoxia2, ZHANG Miao3, MEI Mei3, HONG Liya1*(1.Zhejiang Institute for Food and Drug Control,
Hangzhou 310052, China; 2.Zhejiang Provincial Center for Medical Science & Education Development, Hangzhou 310006,
China; 3.College of Chemical Engineering of Zhejiang University of Technology, Hangzhou 310014, China)

ABSTRACT: OBJECTIVE To establish a dissolution method of fluvastatin sodium capsules, which deal with the possible
cross-linking of gelatin capsules in dissolution test in vitro. It helps provide reference for revising the current quality standards.
METHODS Dissolution methods in current standards at home and abroad, consistency evaluation of two domestic products in
four media with different pH condition and the average dissolution in water and papain solution were compared to establish the
dissolution method. The paddle method was used with rotational speed of 50 r·min1, using 500 mL of water as the dissolution
medium. The dissolution solution was taken at 30 min and analyzed by HPLC. The dissolution limit was set at 80%. If it does not
meet the limit, add another test according to the above method with enzyme solution which contain papain more than
550 U·mL1. It should be meet the limit. RESULTS The dissolution results for batches without cross-linking were consistent in
both water and the above papain solution dissolution media, and the average dissolution of cross-linked batches in papain
solution increased by 5% to 7%. CONCLUSION The determination method is highly reproducible, accurate and reliable,
which can objectively reflect the dissolution of fluvastatin sodium capsules. It can provide a basis for the reasonable unification
and revision of the dissolution test of the current quality standards.
KEYWORDS: fluvastatin sodium capsules; dissolution; gelatin capsules; cross-linking; papain

氟伐他汀钠属于降血脂类药物，分子式为 现象的胶囊在人体内未发生部分不溶现象[1-2]。因此
C24H25FNNaO4 ，化学名为[R*,S*-(E)]-(±)-7-[3-(4- 若明胶胶囊出现交联现象，将不能客观反映胶囊
氟苯基)-1-(1-甲基乙基)-1 氢-吲哚-2-基]-3,5-二羟 在体内的实际溶出情况。
-6-庚酸钠，结构式见图 1。 美国药典(USP 41)[3]附录<711>溶出度中对于
氟伐他汀钠胶囊壳为明胶，由于明胶的原材 出现交联现象的胶囊采用二级溶出度试验系统，
料、填充物和贮存条件等因素，可能会出现明胶 即添加酶和不添加酶试验系统，对交联后的胶囊
交联现象，造成此类胶囊在不加酶的溶出介质中 和未产生交联的胶囊进行溶出度试验，而中国药
崩解、溶出、释放效率降低。实验表明，发生交联 典 2015 年版通则未明确指明胶囊发生交联现象后

基金项目：国家药典会化学药品 2014 年标准提高项目(2014-60)

*
作者简介：李煜，女，博士，副主任药师 Tel: (0571)87180340 E-mail: yuli113@126.com 通信作者：洪利娅，女，硕士，主任药
师 Tel: (0571) 86454617 E-mail: hongliya@zjyj.org.cn

中国现代应用药学 2019 年 9 月第 36 卷第 18 期 Chin J Mod Appl Pharm, 2019 September, Vol.36 No.18 ·2275·
溶出度测定的处理方法。故参考 USP 41 附录，建 胶囊的溶出结果高 9%。2 个批次内容物在水中溶
立明胶交联后的氟伐他汀钠胶囊溶出度方法，完 解度接近，而胶囊剂崩解情况不同，溶出度相差
善氟伐他汀钠胶囊的溶出度项目，为氟伐他汀钠 较大。该结果表明，胶囊壳的存在会导致溶出结
胶囊的标准提高提供依据。 果降低，RSD 增大；而当胶囊壳崩解不完全时，溶
出度的 RSD 明显增加。同时 X1504 批次出现胶囊
壳黏在杯壁的情况，因此认为 X1504 批次的溶出度
偏低现象可能是由于明胶空心胶囊的交联导致[4]。
2.2 初步选择溶出度方法的依据
氟伐他汀钠胶囊现行标准有国家药品标准
WS1-(X-409)-2003Z[5]、企业注册标准。USP 41 亦
图 1 氟伐他汀钠结构式
收载。WS1-(X-409)-2003Z、USP 41 均采用不加沉
Fig. 1 Structure of fluvastatin sodium
降篮的桨法，溶出量测定则采用 HPLC；企业注册
1 仪器与试剂 标准采用篮法，溶出量测定则采用 UV 法，检测波
1.1 仪器 长为 305 nm。考虑到 WS1-(X-409)- 2003Z、USP 41
XPE205 型电子天平(Mettler Toledo)；709DS 中采用桨法，为原研制剂现行方法，因此选用桨
全自动溶出仪(Agilent)；LC-20AD 高效液相色谱 法，而 HPLC 专属性更强，故选择 HPLC。
仪(SPD-M20A 检测器，岛津)；Thermo Hypersil
表 1 X1502 和 X1504 批次氟伐他汀钠胶囊溶出结果
Gold C18 色谱柱(4.6 mm×150 mm，5 μm)；津隆微
Tab. 1 Results of fluvastatin sodium capsules dissolution
孔滤膜(MICRO PES 聚醚砜，水系，0.45 μm)； containing batches of X1502 and X1504
ZTK-18F 真空脱气机(天大天发)。 批号
胶囊内容物溶出度 胶囊溶出度
均值/% RSD/% 均值/% RSD/%
1.2 试药
X1502 90 2.6 85 3.5
氟伐他汀钠对照品(中国食品药品检定研究
X1504 89 1.2 80 10.5
院，纯度：95.5%；批号：100800-201302)；氟伐
他汀钠胶囊(A 公司，规格：40 mg；批号：X1502， 2.3 色谱条件
X1504，X1505，X1507，X1509，X1521，X1527。 十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇-磷酸
B 公司，规格：40 mg；批号：16022311，16027011， 铵缓冲液(取磷酸二氢铵 1.534 g，加水 800 mL 溶
16028511)。 解，用 85%磷酸或氨水调节 pH 值至 3.5)(70∶30)
1.3 试剂 为流动相，流速为 2.0 mL·min1，柱温 30 ℃，检
甲醇(色谱纯，美国默克公司)；磷酸二氢铵(分 测波长为 235 nm，进样体积 50 μL。
析纯，国药集团化学试剂有限公司)；木瓜蛋白酶 2.4 对照品溶液的配制
(国药集团化学试剂有限公司，酶活力 避光操作。取氟伐他汀钠对照品约 42 mg，精
1 密称定，加甲醇 5 mL 使溶解，置 100 mL 量瓶中，
≥6 000 U·mg )。
2 方法与结果 用水稀释并定容，即得浓溶液。精密量取 2 mL 浓
2.1 胶囊交联现象的发现 溶液，置 10 mL 量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，
对 A 公司氟伐他汀钠胶囊的检验中发现， 即得对照品溶液。
X1504 批次在溶出测试过程中存在部分胶囊溶出 2.5 溶出度方法
度偏低且胶囊壳崩解不完全的现象，在取样时间 2.5.1 溶出度方法(不加酶) 避光操作。取本品，
点胶囊壳崩解不完全，出现黏在杯壁的情况，同 照溶出度与释放度测定法(中国药典 2015 年版通
时溶出度平均值偏低，RSD 较大。 则 0931 第二法)，以水 500 mL 为溶剂，转速
为考察胶囊壳和胶囊内容物对溶出结果的影 50 r·min1，依法操作。经 30 min 时，取溶液 10 mL
响，取批号为 X1502 和 X1504 的胶囊内容物，照 滤过，取续滤液作为供试品溶液。
USP 41 氟伐他汀钠胶囊品种溶出度项下方法进行 2.5.2 溶出度方法(加酶) 避光操作。取本品，照
[3]
测试 ，结果见表 1。其中 X1502 批胶囊内容物比 溶出度与释放度测定法(中国药典 2015 年版通则
胶囊的溶出结果高 5%，而 X1504 批胶囊内容物比 0931 第 二 法 ) ， 以 木 瓜 蛋 白 酶 溶 液 ( 酶 活 力 ≥
·2276· Chin J Mod Appl Pharm, 2019 September, Vol.36 No.18 中国现代应用药学 2019 年 9 月第 36 卷第 18 期
550 U·mL1)500 mL 为 溶 出 介 质 ， 转 速 为 在 pH 4.5 溶出介质中，2 家公司样品在平台期溶
50 r·min1，依法操作。经 30 min 时，取溶液 10 mL 出量均≤80%。选用水和 pH 6.8 溶出介质，2 家公
滤过，取续滤液作为供试品溶液。 司样品平均溶出量均>80%，但考虑到水作为溶解
“2.5.1”项下方法为溶出度常规检验方法， 介质更加方便，且 pH 6.8 时 2 家公司共计 6 批样
以“2.3”项下色谱条件，精密量取 50 μL 注入液 品溶出曲线接近重叠，区分度极低，故确定一级
相色谱仪，按外标法以峰面积计算出每粒的氟伐
他汀溶出量，限度为标示量的 80%，应符合规定。
若出现不符合规定情况，采用“2.5.2”项下方法
进行二级溶出试验，限度为标示量的 80%，应符
合规定。
2.6 氟伐他汀钠胶囊在 4 种介质中的溶出曲线
2.6.1 溶出曲线测定方法 避光操作。取本品，
照溶出度与释放度测定法(中国药典 2015 年版通
则 0931 第二法)，分别以 pH 1.2 盐酸溶液、pH 4.5
醋酸盐缓冲液、pH 6.8 磷酸盐缓冲液和水 500 mL
为溶出介质，转速为 50 r·min1，依法操作，在 5，
10，15，30，45，60 min 时分别取溶出液 10 mL，
滤过，并即时在溶出杯中补充相同温度、相同体
积的溶出介质，取续滤液作为供试品溶液。按“2.4”
项下方法制备对照品溶液。以“2.3”项下色谱条
件，精密量取上述 2 种溶液各 50 μL，分别注入液
相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算
每粒的氟伐他汀溶出量。
2.6.2 4 种溶出介质的配制[6] ①pH 1.2 盐酸溶
液：取盐酸 7.65 mL，用水稀释至 1 000 mL，摇匀，
即得。②pH 4.5 醋酸盐缓冲液：称取醋酸钠 2.99 g，
加适量水使溶解，加入 2 mol·L1 醋酸溶液(取冰醋
酸 114 mL，用水稀释至 1 000 mL，摇匀)14.0 mL，
用水稀释至 1 000 mL，摇匀，即得。③pH 6.8 磷
酸盐缓冲液：取 0.2 mol·L1 磷酸二氢钾溶液(称取
磷酸二氢钾 27.22 g，加水溶解并稀释至 1 000 mL，
摇匀)250 mL 与 0.2 mol·L1 氢氧化钠溶液(称取氢
氧化钠 8.00 g，加水溶解并稀释至 1 000 mL，摇
匀)112 mL，用水稀释至 1 000 mL，摇匀，即得。
④水：纯化水。
2.6.3 溶出曲线结果 2 家公司各 3 批氟伐他汀钠
胶囊在 4 种溶出介质中的平均累积溶出曲线测定
结果见图 2。 图2 6 批样品在 4 种溶出介质中的溶出曲线
2.7 一级溶出度试验方法的确定 ApH 1.2 盐酸溶液；BpH 4.5 醋酸盐缓冲液；CpH 6.8 磷酸盐缓冲
液(B 公司 3 个批次溶出曲线重叠)；D水。
采用 50 r·min1，6 批样品在水和 pH 6.8 溶出 Fig. 2 Dissolution curves of fluvastatin sodium capsules of
介质中均快速溶出，在 15 min 时平均溶出量 6 batches in 4 kinds of dissolution media
Ahydrochloric acid solution(pH 1.2); Bacetate buffer solution(pH 4.5);
均>80%，且之后连续取样点溶出量差值<5%。而 Cphosphate buffer solution(pH 6.8) (the dissolution curves of 3 batches
在 pH 1.2 溶出介质中，平均溶出量均为 10%~16%， from B company); Dwater.

中国现代应用药学 2019 年 9 月第 36 卷第 18 期 Chin J Mod Appl Pharm, 2019 September, Vol.36 No.18 ·2277·
溶出度试验方法：浆法，转速为 50 r·min1 ，以 按 1 粒胶囊的处方比例，加溶出介质 500 mL，搅
500 mL 水为溶出介质。根据 6 批样品在水中的溶 拌均匀后滤过，取续滤液分别作为空白溶液。按
出曲线，选择维持 USP 41 氟伐他汀钠胶囊溶出度 “2.3”项下色谱条件测定，空白溶液均无干扰，
项方法不变，作为一级溶出度方法。故不进行方 色谱图见图 4。
法学验证。
2.8 二级溶出度试验方法的建立
根据“2.6”项下 2 家公司各 3 批样品的水中
溶出曲线测定结果，可见 2 家公司的样品在 15 min
左右均进入平台期，但 A 公司样品的溶出量相对
偏低，B 公司的样品相对较好，同时 A 公司样品
溶出曲线批内与批间均一性较差，其中 X1507 批
在水中平均溶出量较其他 2 个批次低。由于此前
在 A 公司 X1504 批次检测中发现胶囊交联现象，
故参考 USP 41 附录 711<溶出度>建立二级溶出度
试验方法。
2.8.1 蛋白酶的选择 本方法的溶出介质为水，
pH 值约为 5.6，根据 USP 41 溶出度<711>的指导
原则，溶出介质选择酶活力≥550 U·mL1 的木瓜
蛋白酶溶液。
2.8.2 6 批氟伐他汀钠胶囊在二级溶出度试验方 图4 氟伐他汀钠胶囊溶出度测定专属性研究色谱图
法中的溶出曲线 以“2.6.1”项下方法，选用溶 A空白溶液；B对照品溶液；C供试品溶液；1氟伐他汀。

出介质为酶活力≥550 U·mL1 的木瓜蛋白酶溶 Fig. 4 Chromatograms of specificity in the study on

dissolution method of fluvastatin sodium capsules
液，测定结果见图 3。B 公司胶囊壳未出现交联现 Ablank solution; Breference solution; Ctest solution; 1fluvastatin.
象，其溶出曲线与水溶液中基本一致，无明显差
异，即加入酶不影响胶囊内容物的溶出结果。而 A 2.8.4 定量限 精密量取“2.4”项下对照品溶液
公司 X1507 批在酶溶液中平台期平均溶出度较水 1 mL，置 50 mL 量瓶，加水稀释至刻度，摇匀，
中提高了约 7%，X1521 和 X1527 批无明显差异。 精密量取 1 mL，置 50 mL 量瓶，加水稀释至刻度，
此外 X1507 批在水溶液中存在部分囊壳崩解不完 摇匀，作为定量限溶液。按“2.3”项下色谱条件
全的现象，而在木瓜蛋白酶溶液中崩解情况与 测定，定量限为 1.2 ng(S/N=10.59)。
X1521 和 X1527 批次一致。可知 X1507 批存在胶 2.8.5 吸附性试验 取本品 6 粒(批号：X1507)，
囊壳交联现象。故本方法适用于出现胶囊壳交联 以“2.5.2”项下溶出度方法进行试验，经 30 min
现象的氟伐他汀钠胶囊的二级溶出试验。 后，同时取 10 mL 各 2 份，分别经 9 000 r·min1
离心 10 min 和用 0.45 μm 滤膜滤过(弃去初滤液
2 mL)，以“2.3”项下色谱条件，精密量取各 50 μL
注入色谱仪，测定结果的比值在 0.99~1.03，故滤
膜吸附的影响可忽略。
2.8.6 线性关系 取“2.4”项下氟伐他汀钠对照
品浓溶液，用酶活力≥550 U·mL1 的木瓜蛋白酶
溶液稀释制成系列浓度溶液，按“2.3”项下色谱
条件测定，回归方程为 y=93 502x7 533，相关系
图 3 6 批样品在木瓜蛋白酶溶液中的溶出曲线 数 r=0.999 9。氟伐他汀在 0.029 82~111.8 μg·mL1
Fig. 3 Dissolution curves of fluvastatin sodium capsules of 内与峰面积呈良好的线性关系。
6 batches in papain solution
2.8.7 仪器精密度试验 精密量取“2.4”项下对
2.8.3 专属性试验 取 A 公司和 B 公司空白辅料， 照品溶液和 2.5”项下供试品溶液(批号：X1507，

·2278· Chin J Mod Appl Pharm, 2019 September, Vol.36 No.18 中国现代应用药学 2019 年 9 月第 36 卷第 18 期
1 号溶出杯)各 50 μL，按“2.3”项下色谱条件测 表 3 8 批氟伐他汀钠胶囊在水中溶出度结果
Tab. 3 Results of dissolution in water of 8 batches
定，分别连续平行进样 6 次，峰面积 RSD 分别为
fluvastatin sodium capsules %
0.04%和 0.13%，表明仪器精密度良好。 批号 胶囊 1 胶囊 2 胶囊 3 胶囊 4 胶囊 5 胶囊 6 均值 SD
2.8.8 回收率试验 避光操作。按处方比例，分 X1505 84 82 88 81 81 85 83 2.7
别精密称取样品标示量的 50%，80%，100%的氟 X1507 78 82 81 82 82 83 81 1.8

伐他汀钠对照品及相应的空白辅料，加水稀释至 X1509 84 83 88 82 86 82 84 2.4

X1521 84 88 85 80 82 82 83 2.8
规定浓度，摇匀，滤过，取续滤液，按“2.3”项
X1527 79 81 81 83 78 82 81 1.9
下色谱条件测定。测定结果见表 2，回收率为
16022311 89 87 86 90 83 91 88 2.9
97.72%~99.87%，平均回收率为 99.1%，RSD 为 16027011 89 90 90 92 92 90 91 1.2
0.67%(n=9)。 16028511 93 90 90 93 90 91 91 1.5

表 2 8 批氟伐他汀钠胶囊在水中溶出度结果 表 4 8 批氟伐他汀钠胶囊在木瓜蛋白酶溶液中溶出度结果
Tab. 2 Results of dissolution in water of 8 batches Tab. 4 Results of dissolution in papain solution of 8
fluvastatin sodium capsules batches fluvastatin sodium capsules %
对照浓度/% 回收率/% 平均回收率/% RSD/% 批号 胶囊 1 胶囊 2 胶囊 3 胶囊 4 胶囊 5 胶囊 6 均值 SD
50 99.87 X1505 91 89 89 86 87 91 89 2.0
99.41
X1507 82 90 90 86 91 92 88 3.8
99.82
X1509 89 89 91 86 93 85 89 3.0
80 99.44
X1521 82 84 86 84 83 87 84 1.9
99.45 99.1 0.67
97.72 X1527 86 82 81 81 78 87 83 3.4
100 98.86 16022311 93 78 92 96 93 81 89 7.4
98.76 16027011 93 84 92 91 89 94 90 3.6
98.87 16028511 87 97 92 94 90 93 92 3.4

2.8.9 稳定性试验 取“2.4”项下对照品溶液和 4 结论

“2.5”项下供试品溶液(批号：X1507，1 号溶出 本研究对氟伐他汀钠胶囊在 4 种溶出介质的
杯)在室温避光条件下放置 0，1，2，4，8，12 h 行为进行研究，选择以水作为溶出介质，建立了
后，分别精密量取 50 μL，按“2.3”项下色谱条件 存在胶囊交联现象的氟伐他汀钠胶囊溶出度测定
测定，峰面积 RSD 分别为 0.48%和 0.62%(n=6)。 方法，并进行了方法学验证。该方法在氟伐他汀
2.9 8 批氟伐他汀钠胶囊溶出度测定 钠胶囊出现交联现象时可以避免误判，重现性好、
以“2.5”项下溶出度方法，对 2 家公司共 8 准确、可靠，能客观反映本品的溶出情况，为统
批样品进行测定。结果见表 3~4。 一和修订本品现行标准中溶出度项目提供依据。
3 讨论
REFERENCES
3.1 酶活力的确定
依据 USP 41 附录<711>，木瓜蛋白酶适用于 [1] MEYER M C, STRAUGHN A B, MHATRE R M, et al. The
effect of gelatin cross-linking on the bioequivalence of hard
4.0<pH<6.8 的溶液，同时要求酶活力≥550 U·mL1。 and soft gelatin acetaminophen capsules [J]. Pharm Res, 2000,
维持木瓜蛋白酶的活力对于消除交联现象有重要 17(8): 962-966.
[2] MANN J C, PYGALL S R. A formulation case study
的作用。 comparing the dynamic gastric model with conventional
3.2 添加酶对氟伐他汀钠胶囊溶出结果的影响 dissolution methods [J]. Dissolution Technol, 2012, 19(4):
14-19.
根据“2.9”项下测定结果，A 公司 5 批产品 [3] USP 41, Fluvastatin Capsule [S]. 2018.
溶出结果均符合规定，但添加酶后 X1505，X1507， [4] ZHANG M, MEI M, LI Y, et al. Cross-linking of gelatin
capsules and its study progress of in vitro dissolution test [J].
X1509 批平均溶出量提高 5%~7%，X1521 和 X1527
Chin Mod Appl Pharm(中国现代应用药学杂志), 2018, 35(2):
批无明显差异。而 B 公司 3 个未交联批次溶出度 302-305.
[5] WS1-(X-409)-2003Z, Fluvastatin sodium Capsules [S].
测试过程中未见崩解异常，溶出度平均值没有明
[6] 国家食品药品监督管理总局. 普通口服固体制剂溶出度试
显改变。由此可见，木瓜蛋白酶的加入没有明显 验技术指导原则[S]. 2015.
改变颗粒的溶出行为，但对胶囊壳的交联作用产 收稿日期：2018-11-23
(本文责编：蔡珊珊)
生影响。
中国现代应用药学 2019 年 9 月第 36 卷第 18 期 Chin J Mod Appl Pharm, 2019 September, Vol.36 No.18 ·2279·