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切胶回收的步骤

1. 琼脂糖凝胶电泳目的基因,紫外灯下切除含有目的基因的琼脂糖,用纸巾吸尽凝胶表面
的液体,尽量减少不含目的基因的凝胶量,称重(1mg=1ul)
2. 尽量切碎凝胶
凝胶浓度 NAL 溶液体积
1% 3 倍凝胶体积
1-1.5% 4
1.5-2% 5
3. 向离心管中加入 3 倍体积的 NAL 溶液, 55(视具体胶定)度加热,使凝胶完全融化,
4. 按每 20ul 硅胶树脂结合(树脂使用前要充分混匀)约 3ugDNA 加入适量比例的硅胶树
脂,充分混合,室温放置 20min,
5. 10000rpm 离心 1 分钟,去上清(上清液暂保存,如回收率不过可重复 4)
6. 加入 800ul 清洗液 (清洗液加入 56ml100% 的无水乙醇) ,振荡混匀后,室温静置
10min,10000rpm 离心 1 分钟,去上清
7. 重复步骤 6,尽量去除上清,完全风干至不残留乙醇味道;
8. 加入和硅胶树脂等体积的 TEbuffer 或灭菌蒸馏水混匀,55 度水浴 20min
9. 10000rpm 离心 1 分钟,吸上清为 DNA 回收液,
10. 重复 8,9

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