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DOI:10.13386/j.issn1002-0306.2013.13.

034

含冷冻带鱼糜的复合鱼糜凝胶特性的研究
巫朝华 ,周文果 ,张 婷 ,陈艺勤 ,姚雅娴 ,刘西之 ,赵建新 ,黄建联
1 1 1 1 1 1 2 1,*

( 1. 福建安井食品股份有限公司,福建厦门 361022;
2. 江南大学食品学院,食品科学与技术国家重点实验室 ,江苏无锡 214122)

摘 要: 通过质构测定和 SDS- PAGE 方法,分析了冷冻带鱼糜加入到白鲢鱼糜后带鱼糜对复合鱼糜凝胶特性的影响。


结果表明,非热处理带鱼糜可显著降低复合鱼糜的凝胶强度,而凝胶劣化特性则被显著提高; 带鱼糜经热处理后使复
合鱼糜的凝胶强度和凝胶劣化指数都得到明显改善; 加入带鱼糜的蛋白酶提取液经 55℃ 反应 240min 后肌球蛋白重链
( Myosin Heavy Chains,MHC) 全部消失。证明冷冻带鱼糜中含有蛋白酶能够降低复合鱼糜凝胶特性。
关键词: 冷冻带鱼糜,复合鱼糜,凝胶特性,肌球蛋白重链

Study on gel properties of mixture surimi


containing frozen hairtail surimi
WU Chao-hua1 ,ZHOU Wen-guo1 ,ZHANG Ting1 ,CHEN Yi-qin1 ,
YAO Ya-xian1 ,LIU Xi-zhi1 ,ZHAO Jian-xin2 ,HUANG Jian-lian1,*

( 1.Fujian Anjoy Food Co.,LTD.,Xiamen 361022,China; 2.State Key Laboratory of Food Science
and Technology,School of Food Science and Technology,Jiangnan University,Wuxi 214122,China)

Abstract: The hairtail surimi was added to sliver carp surimi to study its effect on the gel properties of mixture surimi
through the measurement of texture and sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis( SDS- PAGE) .
The results showed that the gel strength significantly reduced while the modori index increased with the addition of
non-heated hairtail surimi.However,the gel strength and modori index were markedly improved when hairtail surimi
was heated.In the SDS-PAGE experiment the bands of myosin heavy chains completely disappeared under 55℃
for 240min by the addition of protease extract from hairtail surimi.These results indicated that there was protease in
frozen hairtail surimi,which could reduce the gel properties of mixture surimi.
Key words: hairtail surimi; mixture surimi; gel properties; MHC
中图分类号: TS254.1 文献标识码: A 文 章 编 号: 1002-0306( 2013) 13-0070-05

随着鱼糜制品业的快速发展,市场对鱼糜原料 118.68 万 t,占海洋捕捞鱼类总量的 14.38% ,是海洋


[6]
的需求量越来越高。但是,因过度捕捞、 海水污染等 捕捞鱼类中最主要的品种 。然而, 由于目前捕捞的
[1]
原因造成海洋渔业资源日趋枯竭 , 可用于生产鱼糜 带鱼鱼体较小,鱼糜加工过程中基本没有采取去内
[2]
的优质海水鱼种资源越来越少。许永安、 吴成业等 脏的工艺,导致带鱼糜凝胶强度较低甚至没有凝胶
从 1992 年就开始研究海洋低值鱼类生产鱼糜制品 强度。此前,不少学者就提高带鱼糜的凝胶强度作
[7]
的技术,海洋低值鱼类的开发利用成为解决上述问 了较为广泛的研究,孙京新等 通过研究转谷氨酰胺
题的有效途径。近来年,随淡水鱼糜加工技术日趋 酶对低值带鱼鱼糜制品的影响,发现随着转谷氨酰
成熟,通过以鲢鱼糜为主,复合利用低值海水鱼糜成 胺酶添加量增加,带鱼鱼糜制品的硬度和弹性等显
[3-4] [5]
为鱼糜制品加工的新趋势 ; 黄建联等 通过添加 著增加,而对脆性的影响不显著。程珍珠、张建友、
[8-10]
外源性 TG 酶等凝胶增强剂,分段加热等工艺, 开发 纪荣等 进一步研究了膳食纤维、复合亲水胶体以
了新型淡水 / 海水混合鱼糜加工技术并实现了产业 及 γ- 聚谷氨酸等对带鱼糜凝胶特性的影响,均取得
[11]
化运用。带鱼是脂肪含量比较高的鱼种,因其香味 了一定的成果。程珍珠等 还结合超高压技术探索
好,深受广大消费者喜爱。2010 年我国带鱼捕捞量 了膳食纤维对带鱼、鲢鱼复合鱼糜凝胶品质的影响,
通过多指标综合平衡分析,得到较优的组合和适宜
的加工条件: 压力 400MPa,大豆膳食纤维 4% ,聚葡
[12]
收稿日期: 2013-01-10 * 通讯联系人 萄糖 4% 。陈康 以低值冷冻鱼糜为主要原料, 对提
作者简介: 巫朝华( 1986- ) ,男,本科,助理工程师,主要从事冷冻鱼糜 高复合鱼糜制品凝胶强度的工艺进行了研究,结果
及其制品加工技术研究。 表明,添加一定量非肌肉蛋白可以增强鱼糜制品的
基金项目: “十二五”国家科技支撑计划项目 ( 2012BAD28B05 ) ; 农业 凝胶强度和持水性能,但会导致鱼糜制品的白度下
部科技成果转化资金项目( 2012GB2C410514) ; 厦门市重大 降,且蛋白自身的味道会降低鱼糜独特的香味,而添
产业技术攻关项目( 3502Z20121034) 。 加胡萝卜汁、转谷氨酰胺酶、淀粉都可以增强鱼糜制

70
品的凝胶强度和口感。将冷冻带鱼糜与其他鱼种混 Uresti R.M.的穿刺实验方法[13] ,略作改动。将样品制
合运用于鱼糜制品的加工是未来带鱼糜的重要应用 成直径 31mm,高 25mm 的柱形,利用 TA.XT.plus 物
形式,其与不同鱼种鱼糜的相互作用效果也是鱼糜 性测试仪在室温下进行测定。测试参数为: 探头为
制品加工的关键所在,但目前这方面的研究还鲜见 P /5S 球形探头,测试模式为 RETURN TO START,测
报道。本文以冷冻带鱼糜和鲢鱼鱼糜为研究对象, 前速度为 2.0mm / s,测中速度为 1.0mm / s,测后速度
通过冷冻带鱼糜与鲢鱼糜梯度混合, 从凝胶强度、凝 为 10mm / s,测量距离为 15mm,触发点为 5g。每个样
胶劣化指数、SDS - PAGE 等角度考察了冷冻带鱼糜 品测 量 5 个 点,测 得 破 断 力 和 凹 陷 深 度,凝 胶 强 度
对复合鱼糜凝胶特性的影响,为冷冻带鱼糜应用于 ( g·cm) = 破断力 ( g) × 凹陷深度 ( cm) ,求平均值。
鱼糜制品生产加工中提供参考。 破断力指探头刺破凝胶时的感应力,反映鱼糜凝胶
1 材料与方法 的硬度和凝胶中蛋白质分子间的紧密程度; 凹陷深
1.1 材料与仪器 度指凝胶破裂时探头的位移,反映鱼糜凝胶的弹性
[14]
和凝胶中蛋白质分子间作用力的强弱 。
冷冻带鱼糜 宁波锦海水产食品有限公司; 冷
凝胶劣化指数的测定: 参考潘世玲采用的凝胶
冻鲢鱼糜 湖北莱克水产食品股份有限公司; 丙烯
[15]
酰胺( AR 级) 、过硫酸铵 ( AR 级) 、十二烷基硫酸钠 劣化样品处理方法及数据计算方法 。

( SDS, 1.2.3 SDS - PAGE 实 验 方 法 用 9 倍 4℃ 预 冷 的


电泳纯) 汕头市达濠精细化学品有限公司;
0.5mol / L NaCl 溶液提取鲢鱼糜中的肌原纤维蛋白:
TEMED、 溴酚蓝( AR 级) 西陇化工股份有限公司;
( 4℃ 提取 2h 后 10000r / min 4℃ 离心 10min,取上清液
考马斯亮蓝 R-250 AR 级) 国药集团化学试剂有
限公司。 得到肌原纤维蛋白溶液( A) , 于 4℃ 保存待用;
TA.XT.Plus 物 性 测 试 仪 英 国 Stable micro 用 9 倍 4℃ 预冷的 0.5% KCl 溶液提取带鱼糜中
system 公司; ACS - 3H - B 电子秤 中山金利电子衡 的蛋白酶,
4℃ 提取 2h 后 5000r / min 4℃ 离心 10min,

器有限公司; ML204 电子天平 托利多仪器; HH - 4 取上清液得到蛋白酶液, 取 20mL 蛋白酶液于 100℃

数显恒温水浴锅 国华电器有限公司; 小型打浆机 水浴灭活 30min,得到未灭活蛋白酶液( B) 和灭活的


厦门佳隆达金属制品有限公司; 冻肉切块机 厦 蛋白酶液( C) ,于 4℃ 保存待用;
TM
门市焜阳食品机械有限公司; PowerPac Basic 垂直 取 10 份 1.0mL 的 A 液,分别与等体积的 5 份 B

电泳装置 ③
Bio- Rad Laboratories Inc; InGenuius 凝胶 液和 5 份 C 液混匀得到两组反应液, 于 55℃ 进行劣

成像系统 Gene Company Limited; SMART- N 超纯水 化反应, 各组分别按照 0、 30、60、 240min 的时间
120、

系统 上海康雷分析仪器有限公司; GL - 1800 干式 梯度反应, 反应结束后加入 SDS 上样缓冲液, 于 95℃


[16]
加热 10min,参照 Laemmli 法 ,以配制质量分数为
恒温器、QL-901 漩涡振荡器、KB-900 脱色摇床 海
5% 的 SDS- 聚丙烯酰胺作为浓缩胶,而分离胶的质
门市其林贝尔仪器制造有限公司; 3 - 18K 高速冷冻
离心机 德国 Sigma 公司。 量分数为 10% ,进行电泳实验分析,以观察带鱼糜蛋
白酶对鲢鱼糜肌纤维蛋白的降解情况。
1.2 实验方法
1.2.4 数据分析 实验所得的凝胶强度、凝胶劣化
鱼糜样品及凝胶化处理 将- 18℃ 冷冻带鱼
1.2.1
指数数据采用 SPSS 17.0 进行数据处理,SDS- PAGE
糜和鲢鱼糜于 4℃ 环境下解冻 3h,经冻肉切块机刨片
谱图的条带峰面积由 GeneTools 进行分析。
后于 4℃ 保存待用。
带鱼糜热处理: 利用水浴加热和高温蒸汽加热 2 结果与讨论
方法对带鱼糜进行不同温度的热处理, 其中 65、75、 2.1 带鱼糜对复合鱼糜凝胶特性的影响
95℃ 采用水浴加热方式,
85、 100℃ 采用高温蒸汽加 2.1.1 带鱼糜对复合鱼糜凝胶强度的影响 不同带
热方式, 时间为 30min,热处理后于冰水浴中冷却至 鱼糜含量下复合鱼糜破断力、凹陷深度和凝胶强度
4℃ 以下并保存待用。 等质构特性见表 1。
将非热处理的带鱼糜 ( Not heated,简写“NH”) 表 1 显示,随着带鱼糜含量增加,复合鱼糜的破
和热处理带鱼糜 ( Heated,简写“H”) 分别与鲢鱼糜 断力、凹陷深度和凝胶强度均显著降低,且降低程度
混合 得 到 质 量 分 数 为 0% 、20% 、40% 、60% 、80% 、 与带鱼糜添加量并非线性的负相关,表明两种鱼糜
100% 的复合鱼糜( Mixture surimi,简写“MS”) ; 取复 中存在可供反应的底物,而这些底物的反应生成物
合鱼糜共 500g,空擂至无硬颗粒后加入 15g 的食盐 使与凝胶特性相关的指标发生明显降低。鱼糜中对
斩拌 5min,期间不断将壁上的鱼肉刮下,浆料温度 < 凝胶特性起到关键作用的就是肌原纤维蛋白,因此
10℃ ,制得的鱼糜浆料用塑料肠衣灌肠后扎口密封。 推断带鱼糜中可能存在蛋白酶能够降解肌原纤维蛋
[17]
将灌好肠的鱼糜浆料于 90℃ 水浴 30min 后置于 白 。由凝胶强度公式可知当破断力和凹陷程度均
冰水中冷却至室温,用于破断力、破断距离及凝胶强 呈现下降趋势时,其凝胶强度的下降会更为明显,因
度的测定。将 组灌好肠的鱼糜浆料于 60℃ 分别水
2 此将凝胶强度作为带鱼糜对复合鱼糜凝胶特性影响
浴 20 和 120min 后置于冰水中冷却至常温,于 4℃ 保 的重要指标,考察其凝胶特性的变化。由表 1 可知
温 24h 后用于凝胶劣化指数的测定。以上每组实验 带鱼 糜 含 量 为 0% 和 100% 时 的 凝 胶 强 度 分 别 为
重复三次以确定其平行性。 534.38g·cm 和11.06g·cm,当带鱼糜含量较低时凝胶
1.2.2 凝 胶 特 性 的 测 定 凝 胶 强 度 的 测 定: 参 考 强度主要由混合鱼糜中盐溶蛋白形成的肌动球蛋白

71
表 1 复合鱼糜的质构特性
Table 1 The texture properties of mixture surimi
带鱼糜含量( % ) 破断力( g) 凹陷深度( cm) 凝胶强度( g·cm) 凝胶强度差值
0 469.03 ± 6.75 1.14 ± 0.03 534.38 ± 10.87 -
20 336.17 ± 6.96 0.93 ± 0.02 311.32 ± 5.10 223.06
40 226.46 ± 7.97 0.70 ± 0.02 158.52 ± 11.93 152.80
60 121.81 ± 6.88 0.52 ± 0.02 63.50 ± 5.39 95.02
80 83.00 ± 1.62 0.44 ± 0.02 36.75 ± 1.30 26.75
100 34.28 ± 1.35 0.32 ± 0.02 11.06 ± 0.97 25.69
注: 数据“A ± B”中 A 为平均值,B 为标准偏差值。
提供,此时由带鱼糜带来的凝胶强度的下降也最为 时间处于 劣 化 温 度 时 不 能 形 成 可 观 测 到 的 凝 胶 强
明显; 带鱼糜含量不断增加,当带鱼糜的含量在一定 度,所以二者劣化指数均为 1。图 1 还显示随着 NH
范围内时,降解作用起主要效果,致使凝胶强度下降 含量增加,
20% 时的劣化指数变化增加最多, 结合 2.1
幅度较大,而当带鱼糜含量超过一定范围时盐溶蛋 的凝胶强度下降最多, 本研究选取 NH 含量为 20%
白先行凝胶而加热凝胶升温阻止了降解作用的充分 作为 H 对 MS 的影响。
发挥, 致使凝胶强度的降低减小, 所以当带鱼糜含量 2.2 热处理带鱼糜对复合鱼糜凝胶强度的影响
为 20% 时,凝胶强度的下降程度最大。 由凝胶强度的变化,推断可能是冷冻带鱼糜中
带鱼糜对复合鱼糜凝胶劣化情况的影响 凝
2.1.2 含有一定量的蛋白酶,而郭彩华对鱼糜蛋白酶的活
胶劣化指数( modori) 是判别鱼糜凝胶劣化能力的重 [17]
性研究表明这些酶类在 50 ~ 60℃ 具有较高活性 ,
要指标,通常某种鱼糜凝胶劣化指数越高表明其通 本研究在此基础上进一步探讨了加热处理对由冷冻
过凝胶劣化带温度时凝胶劣化情况越严重,最终形 带鱼糜引起的凝胶强度下降的影响,图 2 为带鱼糜
成的凝胶强度也会越低,反之则越高,有学者通过研 经不同温度处理后 MS 的凝胶强度。
究分析还确定了凝胶劣化的区分方法,即凝胶劣化
指数: < 0.35 为难凝胶劣化,0.35 ~ 0.70 为易凝 胶 劣
化,> 0.70 为极易凝胶劣化。而实际生产中则会采
取一定措施以获得低凝胶劣化指数的原料,不同含
量 NH 样品的凝胶劣化指数如图 1。

图 2 带鱼糜经加热处理后 MS 的凝胶强度
Fig.2 Gel strength of MS mixed with heated surimi of hairtail
注: SC 为鲢鱼糜( Silver carp surimi) 对照组,
NH 为非热处理带鱼糜的复合鱼糜对照组。
图 2 中显示,65℃ 的凝胶强度值比 NH 组的 略
图1 不同非热处理带鱼糜含量的 低,可能是由于带鱼糜内脏蛋白酶在 60~70℃ 范围还
复合鱼糜的凝胶劣化指数 存有一定酶活,而热处理时蛋白酶充分作用将带鱼
Fig.1 The gel modori index of MS filled 糜中为数不多的蛋白降解,使之不能为 MS 提供凝胶
by different contents of NH 强度。图 1 还显示随着处理温度上升, MS 的凝胶强
图 1 显示,当 NH 含量为 0% 时,鲢鱼糜的凝胶 度均呈显著性增加, 65~85℃ 增加幅度较为明显, 85~
劣化指数为 0.555,为易凝胶劣化,与吴汉民等所报 100℃ 增加较为平缓,因此本研究采用 100℃ 蒸汽蒸
[18]
道的结果相吻合 ; 当 NH 含量达 20% 时,凝胶劣化 煮法考察热处理对 MS 凝胶强度和凝胶劣化情况的
指数显著上升为 0.842,达到极易凝胶劣化的水平, 影响,结果如表 2。
从曲线还可以看出当 NH 含量为 40% 时 MS 的凝胶 表 2 显示凝胶强度和凝胶劣化指数均发生极显
劣化指数达最高( 0.937) ,而当 NH 含量为 60% 时却 著的变化, 凝胶强度方面,非热处理和 100℃ 处理的
有所降低( 0.835) ,可能是由于 NH 添加较多, 使 MS 20% 混合鱼糜均比鲢鱼糜( 0% ) 低,其中 100℃ 处理
的整体凝胶强度急剧下降( 表 1 中不足 65g·cm) ,劣 组明显比非热处理组高; 而凝胶劣化方面, 非热处理
化温度下的凝胶强度则会更低,此时除肌动球蛋白 组复合鱼糜为极易凝胶劣化, 100℃ 热处理的复合鱼
的网状结构外,带鱼糜和鲢鱼糜中的其他物质以误 糜比鲢鱼 糜 略 高,但 都 在 易 凝 胶 劣 化 范 围 内,表 明
差的形式也会提供部分凝胶强度, 导致劣化值降低, 100℃ 热处 理 可 有 效 抑 制 带 鱼 糜 引 起 的 凝 胶 劣 化
当为 80% 和 100% 时由于 NH 含量过高,导致 MS 长 现象。

72
表2 热处理对复合鱼糜凝胶强度和凝胶劣化的影响
Table 2 Effect of heating treatment on the
gel strength and modori index of MS
带鱼糜含量 凝胶强度
凝胶劣化指数
( %) ( g·cm)
0 534.38 ± 10.87 Cc 0.555 ± 0.035 Aa
Aa
20( NH) 311.32 ± 5.10 0.842 ± 0.064 Cc
20( H) 414.08 ± 7.63 Bb 0.584 ± 0.040 Bb
注: 用 Duncan 法进行显著性分析。同列标有不同大写字母表
示组间差异极显著( p < 0.01) ; 标有不同小写字母者表示组间
图4 反应时间对 MHC 和 A 条带峰面积的影响
差异显著( p < 0.05) ; 标有相同小写字母者表示组间差异不显
Fig.4 Effect of reaction time on the
著( p > 0.05) 。
peak area of MHC and A
2.3 带鱼糜蛋白酶对肌原纤维蛋白降解的 SDS-
注: MHC、A 分别代表 MHC 条带和 A 条带,
PAGE 图分析 NI、I 分别表示带鱼糜蛋白酶提取液未经过灭活处理
为探究冷冻带鱼糜中蛋白酶对 MS 中肌原纤维 ( Not inactivated) 和经过灭活处理( Inactivated) 。
蛋白的影响,将二者反应后进行 SDS- PAGE 分析,结
中 MHC 因降解、减少所导致的。表明冷冻带鱼糜提
果如图 3。
取液中存在能降解 MHC 的蛋白酶。有研究表明在
酶学最适 条 件 下,对 肌 原 纤 维 蛋 白 的 分 解,尤 其 对
MHC 的降解具有明显的促进作用, 而 MHC 分解是导
[21-22]
致鱼 糜 制 品 弹 性 下 降 的 主 要 原 因 ,Jiang 等
[23-24]
人 的研究表明,组织蛋白酶 B 与 L 对鲭鱼的肌
[20]
原纤维蛋白有着明显的降解作用。Liu 等 发现组
织蛋白酶 B 和 L 能够破坏 鲢 鱼 鱼 糜 凝 胶 的 网 状 结
构,进而引起凝胶劣化现象。带鱼中含有大量蛋白
[17]
酶,尤其是内脏 , 若采肉时未弃除内脏,或漂洗不
充分,都将引入大量内源性蛋白酶,从而加剧带鱼糜
制品凝胶强度下降。
图 3 带鱼糜蛋白酶对肌原纤维蛋白的降解
3 结论
Fig.3 The degradation of protease from
添加带鱼糜后,MS 的凝胶强度会显著降低而凝
hairtail surimi on myofibrillar protein
胶劣化指数则会显著升高, 与鲢鱼糜相比含 20% NH
注: 泳道 1~5 的带鱼糜蛋白酶提取液
的 MS 凝胶强度下降了 41.74% ,凝胶劣化指数也上
未经 100℃ 灭活处理; 泳道 6~10 的带鱼糜蛋白酶
升为 0.842; 带鱼糜经热处理后,凝胶强度下降幅度降
提取液经过 100℃ 30min 的灭活处理。
低为 22.51% ,劣化指数也减少为 0.584; 电泳实验证
据报道,鱼糜的凝胶劣化常常发生在温度 55 ~
明,冷冻带鱼糜的蛋白酶提取液对 MHC 具有明显的
60℃ 。而鱼体蛋白酶中主要的组织蛋白酶 B 和 L 的
[19-20]
降解效果。以上结果说明冷冻带鱼糜中可能含有内
最适温度为 55℃ ,因此本研究也以 55℃ 作为探
源蛋白酶,对 MS 凝胶的形成起到阻碍作用,而这些
讨带鱼糜中蛋白酶的降解作用。
负面影响将大大限制冷冻带鱼糜在鱼糜制品加工中
图 3 显示随着反应时间的延长,肌动蛋白和原
的应用。为了 充 分 发 掘 带 鱼 肉 中 蛋 白 质 的 利 用 价
肌球蛋白未发生明显的规律性变化,而肌球蛋白重
值,需要进一步改进冷冻带鱼糜的加工工艺,去除可
链( MHC) 随时间规律性减少,同时各个泳道随时间
能由其内脏等带来的蛋白酶类物质,以满足现代鱼
增加整体颜色也呈逐渐变暗的趋势,浓缩胶部位的
糜制品生产的需求。
聚合物主要是 MHC 与其他蛋白形成的大分子物质,
其条带( A) 逐渐加深,表明 MHC 或者被蛋白酶降解 参考文献
为低分子量的物质,或者发生凝胶生成更大分子量
[1]赵淑江,吴常文,梁冰,等 .大海洋生态渔业理论与海洋渔
的聚合物。为进一步明确变化情况,利用 GeneTools
业的持续发展[J].海洋开发与管理,
2005,
3: 75-78.
对 MHC 和 A 条带进行条带峰面积分析, 结果如图 4。
[2]许永安,吴成业 .海洋低值鱼类生产鱼糜制品的技术[J].
通过峰面积分 析 可 知,经 过 240min 的 反 应,蛋
白酶液未经灭活处理的实验组中 MHC 已全部消失, 1998,
食品工业科技, 19( 1) : 27-28.
而灭活处理组中存在较为明显的 MHC 条带峰, 表明 [3]Panpipat W,Chaijan M,Benjakul S.Gel properties of croaker
有部分 MHC 被额外降解掉; 对于 A 条带,相同作用 - mackerel surimi blend [J]. Food Chemistry,2010,122 ( 4 ) :
时间下,未经灭活处理的蛋白酶液的峰面积均低于 1122-1128.
经灭活处理的蛋白酶液的实验组,当时间达 240min [4]刘蕾,洪惠,宋永令,等 .不同加热条件对复合鱼糜凝胶特
时,仅为后者的 1 /2,这种情况应该是未灭活处理组 性的影响[J].肉类研究,
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