Peet eee et pads pene INFLUENCIA DA OXIGENAGAO NO CULTIVO DE Pichia pastoris Autor(es): NIZOLI, Leandro Quintana; MORAES, Carina Martins; SOUZA, Lorena Leonardo; DUMMER, Luana Alves; ROOS, Talita Bandeira; LEITE, Apresentador: Leandro Quintana Nizoli Orientador: Fabio Pereira Leivas Leite Revisor 1: Sergio Silva da Silva ibio Pereira Leivas Revisor 2: Rosa Maria Paulsen Instituigio: Universidade Federal de Pelotas Resumo: A levedura metilotréfica Pichia pastoris vem sendo utilizada como sistema de expresséo para diversos tipos de proteinas por sua habilidade em alcangar altos niveis celulares de expresso, podendo produzir em grandes quantidades proteinas de importincia na area biotecnolégica e por expressar com sucesso proteinas que necessitam de modificagdes pos traducionais para manter sua conformagao, Varios fatores de estresse so citados por diversos autores como fatores limitantes para o crescimento desta levedura, prejudicando assim a produgdo de proteinas de interesse na area médica, veterindria e farmacéutica por esse sistema de expresso. Dentre esses fatores, a condigao de oxigenagio do cultivo tem crucial importéncia, O objetivo deste trabalho foi avaliar a influéneia da oxigenagao no cultive de P. pastoris, através da utilizagio de frascos de cultura tradicionais e frascos que possibilitam uma melhor disponibilidade de oxigénio. P. pastoris cepa GS115 (Invitrogen) foi cultivada em Erlenmayers € baldes com “Chicanas”, utilizando-se no ensaio a relagdo volumétrica de 20% de meio de cultivo YPD. Inéculo inicial foi padronizado de acordo com a escala 0,5 McFarland, © material foi cultivado sob agitagio de 250 RPM a 28°c, durante 48horas. Foram realizadas 12 coletas a cada quatro horas de cultivo ¢ as amostras foram submetidas a espectrofotometria a 600 nm para a andlise da densidade éptica. A taxa de crescimento obtida através das densidades épticas demonstrou que o crescimento celular manteve-se uniforme até a 6° coleta, apresentando um aumento significative (p< 0,05) nos cultivos feitos em frascos com chicanas a partir da 7° coleta. No entanto, as densidades épticas das amostras na 12° coleta nfo diferiram. Os resultados demonstram que 0 cultivo com frascos com chicanas permite uma melhor dissolugio do oxigénio no meio de cultivo, possibilitando 0 crescimento da levedura ¢ otimizando a utilizagio dos diversos nutrientes em cultivos feitos nesses frascos.