METODE HEMATOLOGI

TAHAP DASAR I : ORIENTASI

Aggregometry

Presentan : Tisha Patricia

Pembimbing :Amiroh Kurniati, dr., M. Kes, Sp.PK
Program Pendidikan Dokter Spesialis Patologi Klinik
Fakultas Kedokteran Universitas Sebelas Maret
Surakarta
2015

TAHAP DASAR : ORIENTASI

2
NO
.

METODE

JUDUL

TANGGAL
PRESENTASI

PEMBIMBING

1.

Sekresi

Analisis Cairan
Sinovial

13 - 10 - 2015

Yuwono Hadisuparto, dr., Sp. PK

2.

Imuno
Serologi

27 - 11 - 2015

Tonang Ardyanto, dr., Phd, Sp.PK

Pemeriksaan
Toxoplasma gondii
Pada Toksoplasmosis
Serebral dengan
Metode
3. Mikrobiolog
ELISA
14 - 12 2015
B. Rina Sidharta, dr., Sp.PK-K
i
Kultur Kuantitatif
Ulkus Kaki Diabetik
4.
30 12 - 2015 Amiroh Kurniati, dr., M. Kes., Sp.PK
Sampling
Preparasi Sampel:
Pipetasi
5.
2 - 2 - 2016 Amiroh Kurniati, dr., M. Kes., Sp.PK
Hematologi
Aggregometry

LEARNING OBJECTIVE

Mengetahui tentang aggregometry

Mengetahui indikasi pemeriksaan
aggregometry
Mengetahui tentang light transmission
aggregometry

Trombosit

Bagian terkecil unsur BM

Diproduksi dengan cara fragmentasi
sitoplasma megakariosit
Bentuk cakram bikonveks, tidak berinti, ukuran 0,5x3,0
m
Rentang masa hidup 7-10 hari
Jumlah N 150.000-450.000 L
Memegang peranan penting dalam hemostasis-trombosis

Pembentukan sumbat trombosit

6

Aggregometry Pemeriksaan
agregasi trombosit

Light transmission aggregometry

(LTA)

Impedance aggregometry
(Whole blood aggregometry)

Light transmission aggregometry

(LTA)
Dikembangkan oleh Born dan OBrien
1962
Gold standar, paling sering dilakukan
agregasi trombosit
Chrono-log 490

Chrono log 490

Hasil pemeriksaan disajikan dalam bentuk
kurva
Menggambarkan perubahan transmisi cahaya
Penilaian dengan menghitung presentasi
cahaya maksimal
Hasil tergantung jenis dan kadar platelet
agonist

In vivo

In vitro

PRP =
platelet rich plasma

Kolagen a/
ADP a/
Epinefrin
Ristocetin
Trombin

10

(di dlm subendotelium)

11

Adenosine diphosphate (ADP)

Kadar ADP
ditingkatkan
Agregasi
irreversibel
Kurva
bifasik

Light Transmission Aggregometry

12

Tujuan: deteksi abnormalitas

fungsi trombosit
Persiapan : puasa 8-12 jam

Alat dan bahan:

13

1 set
agregometer
Chrono Log

Pipet
volume

Kuvet

Sentrifus

Pipet
otomatik

Stir bar

Tabung
EDTA

Pipet
semiotomati
k

Tabung
sitrat

Tabung clot
activator

stopwatch

Cup

14

Reagensia
NaCl 0,9 %
Chrono-Par & Chrono-Lume

Chrono-Par & Chrono-Lume + 5 mL NaCl 0,9 %

10 mM

15

16

penambaha
n
aggregator

Prinsip

aggregate
mengendap

Aggregasi

plasma
jernih

transmisi
cahaya
meningkat

17

Pemeriksaan agregasi trombosit

Born : Perubahan transmisi cahaya
PRP keruh
transmisi cahaya rendah

ADP

Trombosit beragregasi lalu mengendap

plasma jadi jernih
Transmisi cahaya meningkat

18

Pembuatan larutan, 2 mM dan 1 mM dari larutan

ADP 10 mM

Campur larutan ADP dengan larutan salin

10 mM : NaCl 0,9 % (1:1) ADP 5 mM
10 mM : NaCl 0,9 % (1:4) 2 mM
10 mM : NaCl 0,9 % (1:9) 1 mM

19

Platelet Rich Plasma (PRP)

9 mL darah tabung sitrat
mL Na Sitrat 3,2%)
Sentrifus 1000 rpm, 15 menit

Plasma PRP penampung

(1

20

Platelet poor plasma (PPP)

Sisa darah sentrifus 3500 rpm, 15
menit
Plasma PPP
Masukkan 500 L kuvet

Prosedur kerja
21

Nyalakan alat

Tunggu suhu incubation wells 37C.

Siapkan PRP dan PPP.

Masukkan 5 kuvet incubation wells

4 kuvet diisi 500 L PRP

22

4 kuvet berisi 500 L PRP

dimasukkan sebutir magnet
pengaduk.

5 kuvet diinkubasi dalam

incubation wells 3 menit, 37C

23

Satu kuvet berisi PPP dan stir bar

dipindahkan ke lubang optical
chamber,

PPP set switch ditekan ke angka 1.

24

4 kuvet berisi PRP berurutan dimasukkan

ke optical chamber PRP
tombol stirrer dijalankan

inkubasi kelima kuvet tersebut 3 menit

25

Penetapan setting optical baseline

menentukan batas atas transmisi 100%
dengan PPP
dan batas bawah transmisi 0% dengan
PRP (trace 1, 2, 3 dan 4)

26

Masukkan reagen ADP 1, 2, 5 dan 10 mM

masing-masing ke dalam kuvet yang
berisi PRP
Pada layar komputer akan tampak grafik dari
keempat hasil agregasi trombosit dengan warna
berbeda

Hasil agregasi tampak pada layar

27

Penilaian hasil

analisis bentuk
kurva agregasi
trombosit

hitung persentasi
transmisi cahaya
maksimal

28

Interpretasi agregasi trombosit

ADP 1M agregasi primer diikuti deagregasi
ADP 2,5 - 5M biphasic : agregasi primer diikuti

agregasi sekunder
ADP 10 M monophasic : agregasi primer dan

sekunder bersatu, bersifat irreversibel

Normal : tidak ada agregasi spontan

29

Kurva agregasi dengan berbagai kadar ADP

30

ADP

Biphasic aggregation

Agr Tr/US/2004

31

Grafik hasil aggregometry normal dan beberapa

penyakit dengan berbagai agonis trombosit (Harrison
dkk, 2011)

32

Faktor-faktor yang mempengaruhi

hasil aggregometry

Uremia

Paraproteinemia

pemakaian
kontrasepsi
hormonal

diabetes
melitus

perokok

Hiperlipoproteinemia

Obat-obat
tertentu

33

Obat yang dapat menghambat agregasi trombosit

aspirin

sulphinpyrazone

dipiridamol

thienopyridine
clopidogrel

glycoprotein
blockers:
abciximab

dekstran.

34

KESIMPULAN
Pemeriksaan agregasi trombosit digunakan
untuk menilai faal trombosit
Aggregometry merupakan metode baku
emas dan paling sering dilakukan untuk
memeriksa agregasi trombosit.

DAFTAR PUSTAKA
35

Anonim. 2016. Chrono-log. Instruction manual for the Chronolog model 490 optical
aggregometer. 1st ed. Leiden: Havertown.
Anonim. 2016. Chrono-Par and Chrono-Lume reagents for platelet function testing and
secretion studies in whole blood and platelet rich plasma, e-mail:
chronology@chronolog.com
Canon CP, Brownwald E. Unstable angina and non-ST-elevation myocardial infarction. In:
Kasper DL et al, eds. Harrisons principles of internal medicine.16thed. New
York:McGraw-Hill. 2005.p.1444-8.
Fritsma GA. Tests of platelet number and function. In: Corriveau DM, Fritsma GA, eds. 1st
ed. Hemostasis and thrombosis. Philadelphia: Lippincott comp; 1988.p.278-300.
Gawaz M. Blood platelets. 1st ed. Stuttgart: Georg Thieme Verlag;2001.p.42-9;92-3.
Handin RI. Bleeding and thrombosis. In:Kasper DL et al, eds. Harrisons principles of internal
medicine. 17th ed. New York:McGraw-Hill. 2008.p.337-43.
Hoffbrand AV, Pettit JE, Moss PAH. Essential haematology. 4 th ed. Oxford: Blackwell
Science; 2001.p.286-7.
Mustard JF, Packham MA. Platelets and diabetes mellitus. N Engl J Med. 1980;10:6657.Shiffmann FJ. Hematologic pathophysiologic. 1st ed. Philadelphia: Lippincott-Raven;
1998.p.130-5.
Sirridge MS. Laboratory evaluation of hemostasis. 2nd ed. London: Henry Kimpton
Publisher; 1974.p.1-19.
Suryaningsih V, Timan IS. Pemeriksaan agregasi trombosit dengan reagen ADP menggunakan
alat PACKS-4. Bagian Patologi Klinik FKUI-RSCM. 1996.
Yamanaka M. Blood platelets. 1st ed. Kobe: Sysmex Corporation. 2000.p.58-66

36

TERIMA KASIH