UJI KUALITATIF DAN

KUANTITATIF
DNA/RNA
OLEH:

HIJRAL ASWAD,S.Si.M.Kes.
 UJI KUANTITATIF DNA/RNA

Alat Pengukur: Spektrofotometri UV-Vis

DNA murni dapat menyerap cahaya UV karena

adanya basa purin dan pirimidin
Untai ganda
DNA/RNA Kemurnian DNA/RNA di
menyerap cahaya ukur dengan
UV pada 260 nm menghitung nilai
absorbansi 260 nm di
bagi nilai absorbansi
Kontaminan 280 nm.
protein dan fenol
menyerap cahaya Nilai kemurnian
pada 280 nm DNA/RNA berkisar
1,8-2,0
 UJI KUALITATIF DNA/RNA

Metode Standar: Elektroforesis Gel Agarosa

Tujuan: Untuk identifikasi, pemisahan,

dan purifikasi fragmen DNA
Ukuran dan
konformasi molekul
Faktor-Faktor yang
Konsentrasi Agarosa
berpengaruh:
Arus Listrik

SUHU
 Molekul besar seperti genom utuh,
Konsentasi dielektroforesis dengan agarosa
agarosa konsentrasi 0,8%, sedangkan hasil
amplifikasi DNA dielektroforesis dengan
konsentrasi yang lebih tinggi 1,5-2%

Ukuran dan struktur molekul

Ukuran mempengaruhi mobilitas saat saat
molekul dielektroforesis
DNA/RNA
Sirkular > linear
Fragmen DNA > Genom utuh
 DNA/RNA bermuatan negatif. Voltase
100 V, biasa digunakan untuk
Voltase analisis rutin. Sedangkan untuk
pemisahan sempurna digunakan
voltase 50 V, walaupun
pemisahannya lebih lambat tapi hasil
lebih maksimal

Molekul DNA akan cepat terurai

SUHU pada suhu tinggi dan akan kembali
menyatu bila suhu menurun
SEKIAN DAN TERIMAKASIH